CN102702190A

CN102702190A - 一种小檗碱静电复合物及其制备方法

Info

Publication number: CN102702190A
Application number: CN2012102237099A
Authority: CN
Inventors: 汲涌; 唐星; 樊冬娇
Original assignee: NORTHEAST PHARMACEUTICAL GROUP CO Ltd
Current assignee: NORTHEAST PHARMACEUTICAL GROUP CO Ltd
Priority date: 2012-07-02
Filing date: 2012-07-02
Publication date: 2012-10-03
Anticipated expiration: 2032-07-02
Also published as: CN102702190B

Abstract

一种应用于医药卫生行业中的小檗碱静电复合物及其制备方法，该静电复合物由阴离子表面活性剂与小檗碱或小檗碱盐复合组成，阴离子表面活性剂与小檗碱或小檗碱盐的摩尔比为1:0.5-10；所述的阴离子与小檗碱盐的摩尔比为1:1；所述的阴离子表面活性剂是指烷基硫酸盐或磺酸盐、脂肪酸盐中的一种或几种；所述烷基硫酸盐是胆固醇硫酸酯钠、十二烷基硫酸钠、去氧胆酸钠中的一种或几种，烷基磺酸盐是指庚烷磺酸钠、十二烷基磺酸钠中的一种或几种，脂肪酸盐是癸酸钠、庚酸钠中的一种或几种；所述的小檗碱及小檗碱盐的来源为化学合成或中药中提取。该发明将小檗碱制成小檗碱静电复合物增加小檗碱的生物膜透过能力，提高小檗碱的口服生物利用度，在糖尿病及其并发症、高血脂症等重大的代谢异常的慢性疾病中发挥其显著的治疗作用。

Description

一种小檗碱静电复合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及医药卫生行业中一种小檗碱静电复合物及其制备方法。

背景技术

小檗碱，英文名Berberine，中文别名黄连素、小蘖碱、小檗硷，一种常见的异喹啉生物碱，它存在于小檗科等四个科十个属的许多植物中。1826年M.-E.夏瓦利埃和G.佩尔坦从Xanthoxylonclava树皮中首次获得。小檗碱为一种季铵生物碱，对溶血性链球菌，金黄色葡萄球菌，淋球菌和弗氏、志贺氏痢疾杆菌等均有抗菌作用，并有增强白血球吞噬作用，对结核杆菌、鼠疫菌也有不同程度的抑制作用，对大鼠的阿米巴菌也有抑制效用。小檗碱在动物身上有抗箭毒作用，并具有末梢性的降压及解热作用。小檗碱的盐酸盐（俗称盐酸黄连素）已广泛用于治疗胃肠炎、细菌性痢疾等，对肺结核、猩红热、急性扁桃腺炎和呼吸道感染也有一定疗效。大量的研究发现，小檗碱具有多重药理学作用如用于代谢异常的糖尿病及其并发症的治疗、高血脂症的治疗、及心血管疾病和神经系统疾病的治疗等。

阴离子表面活性剂自身具有一定的亲水性和亲酯性，具有增强其他物质的溶解度和跨膜能力的作用。胆固醇硫酸酯钠与两性霉素B形成的复合物提高了两性霉素B的溶解度，大量文献报道了表面活性剂作为吸收促进剂应用口服吸收差的药物以提高其生物利用度。目前研究表明，由于小檗碱溶解度低，生物膜透过性差，口服吸收不佳，造成其生物利用度极低，严重限制了小檗碱在某些重大疾病中的应用。已有部分文献报道使用吸收促进剂来提高小檗碱的生物利用度。大多数的吸收促进剂具有一定的细胞毒作用，对胃肠道粘膜或细胞膜造成一定程度的损伤，肠道内毒素和其他化学物质可能被吸收进入血液循环而致副反应，且吸收促进剂本身的体内药物代谢动力学及长期毒性尚不清楚，目前实际应用促进剂的产品较少。经文献检索，将具有吸收促进作用的阴离子表面活性剂与荷正电的季铵型生物碱小檗碱通过静电作用复合形成的小檗碱复合物来提高其口服生物利用度，扩大小檗碱的药用价值的相关研究和应用未见报道。因此，研制开发一种小檗碱静电复合物及其制备方法一直是亟待解决的新课题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种小檗碱静电复合物及其制备方法，本发明通过阴离子表面活性剂与小檗碱或小檗碱盐复合组成静电复合物，提高小檗碱的生物利用度。

本发明的目的是这样实现的：一种小檗碱静电复合物，该静电复合物由阴离子表面活性剂与小檗碱或小檗碱盐复合组成，阴离子表面活性剂与小檗碱或小檗碱盐的摩尔比为1:0.5-10；所述的阴离子与小檗碱盐的摩尔比为1:1；所述的阴离子表面活性剂是指烷基硫酸盐或磺酸盐、脂肪酸盐中的一种或几种；所述烷基硫酸盐是胆固醇硫酸酯钠、十二烷基硫酸钠、去氧胆酸钠中的一种或几种，烷基磺酸盐是指庚烷磺酸钠、十二烷基磺酸钠中的一种或几种，脂肪酸盐是癸酸钠、庚酸钠中的一种或几种；所述的小檗碱是指季铵形式的小檗碱，所述的小檗碱盐是指小檗碱的无机酸盐，所述的小檗碱及小檗碱盐的来源为化学合成或中药中提取；所述的小檗碱的无机酸盐是指小檗碱盐酸盐、小檗碱硫酸盐或小檗碱硫酸氢盐；将该小檗碱静电复合物制成药剂学上的任何一种剂型；将该小檗碱静电复合物制成口服剂型；该制备方法包括如下步骤：将小檗碱或小檗碱盐溶于蒸馏水或乙醇中成饱和溶液，将不溶于水的阴离子表面活性剂溶于乙醇，将溶于水的阴离子表面活性剂溶于水中；在磁力搅拌下，将阴离子表面活性剂滴加至小檗碱饱和溶液中；继续搅拌或超声或加热回流10-60分钟，析出沉淀，离心，清洗并收集沉淀物，真空干燥或冷冻干燥，即得小檗碱静电复合物。

本发明的要点在于小檗碱静电复合物的摩尔比及制备方法。其原理是：小檗碱属于季铵型异喹啉类生物碱，呈强碱性，荷正电，同时阴离子表面活性剂的亲水部分荷负电，在溶液中正负电荷因静电引力而相互结合；又由于小檗碱和阴离子表面活性剂各自的亲水部分被疏水的基团取代，致使因静电复合的化合物的水溶性降低而析出沉淀，从而促使反应向生成复合物的方向进行；大量沉淀析出，离心，清洗并收集沉淀，真空或冷冻干燥，最终制得小檗碱静电复合物。

一种小檗碱静电复合物及其制备方法与现有技术相比，具有将小檗碱制成小檗碱静电复合物增加小檗碱的生物膜透过能力，提高小檗碱的口服生物利用度，在糖尿病及其并发症、高血脂症等重大的代谢异常的慢性疾病中发挥其显著的治疗作用等优点，将广泛的应用于医药卫生行业中。

附图说明

下面结合附图及实例对本发明进行详细说明。

图1是以小檗碱与胆固醇硫酸酯钠制成的摩尔比1:1的复合物的结构式。

图2是以小檗碱与十二烷基硫酸钠制成的摩尔比1:1的复合物的结构式。

图3是小檗碱及其胆固醇硫酸酯和去氧胆酸复合物血药浓度-时间曲线图。

图4是小檗碱及小檗碱十二烷基硫酸酯复合物的药时曲线图。

具体实施方式

参照附图，图3是小檗碱及其胆固醇硫酸酯和去氧胆酸复合物血药浓度-时间曲线图。1表示小檗碱胆固醇硫酸酯复合物；2表示小檗碱去氧胆酸酯复合物；3表示小檗碱盐酸盐；H表示时间（小时）；A表示血药浓度（ng/mL）。图4是小檗碱及小檗碱十二烷基硫酸酯复合物的药时曲线图。1表示小檗碱盐酸盐；2表示小檗碱十二烷基硫酸酯复合物；H表示时间（小时）；A表示血药浓度（ng/mL）。

实施例一

精密称取小檗碱盐酸盐二水合物1.0002克溶于500mL的蒸馏水中，配成小檗碱盐酸盐的饱和溶液；精密称取胆固醇硫酸酯钠1.2007克，溶于240mL无水乙醇中；在磁力搅拌的条件下，将胆固醇硫酸酯钠乙醇溶液滴加至小檗碱盐酸盐的饱和溶液中，且小檗碱与胆固醇硫酸酯钠的摩尔比为1:1，继续搅拌30分钟，沉淀全部析出，离心，清洗并收集沉淀，冷冻干燥即得小檗碱胆固醇硫酸酯的静电复合物。

实施例二

精密称取小檗碱盐酸盐二水合物1.0004克溶于500mL的蒸馏水中，配成小檗碱盐酸盐的饱和溶液；精密称取十二烷基硫酸钠0.7076克，溶于20mL的蒸馏水中；在磁力搅拌下，将十二烷基硫酸钠的水溶液滴加至小檗碱盐酸盐的饱和溶液中，且小檗碱与十二烷基硫酸钠的摩尔比为1:1，继续搅拌40分钟，沉淀全部析出，离心，清洗并收集沉淀，冷冻干燥即得小檗碱十二烷基硫酸酯的静电复合物。

实施例三

精密称取小檗碱盐酸盐二水合物1.0005克溶于500mL的蒸馏水中，配成小檗碱盐酸盐的饱和溶液；精密称取去氧胆酸钠0.9446克，溶于20mL蒸馏水水中；在磁力搅拌的条件下，将去氧胆酸钠的水溶液滴加至小檗碱盐酸盐的饱和溶液中，且小檗碱与去氧胆酸钠的摩尔比为1:1，继续搅拌50分钟，沉淀全部析出，离心，清洗并收集沉淀，冷冻干燥即得小檗碱去氧胆酸酯的静电复合物。

实施例四

精密称取小檗碱盐酸盐二水合物1.0001克溶于500mL的蒸馏水中，配成小檗碱盐酸盐的饱和溶液；精密称取去氧胆酸钠0.4823克，溶于10mL蒸馏水水中；在磁力搅拌的条件下，将去氧胆酸钠的水溶液滴加至小檗碱盐酸盐的饱和溶液中，且去氧胆酸钠与小檗碱的摩尔比为1:0.5，继续超声30分钟，沉淀全部析出，离心，清洗并收集沉淀，真空干燥即得小檗碱去氧胆酸酯的静电复合物。

实施例五

精密称取小檗碱盐酸盐二水合物1.0004克溶于500mL的蒸馏水中，配成小檗碱盐酸盐的饱和溶液；精密称取癸酸钠0.1229克，溶于4mL的蒸馏水中；在磁力搅拌的条件下，将癸酸钠的水溶液滴加至小檗碱盐酸盐的饱和溶液中，且癸酸钠与小檗碱的摩尔比为1:3，继续超声30分钟，沉淀全部析出，离心，清洗并收集沉淀，冷冻干燥即得小檗碱十二烷基硫酸酯的静电复合物。

实施例六

精密称取小檗碱盐酸盐二水合物1.0002克溶于500mL的蒸馏水中，配成小檗碱盐酸盐的饱和溶液；精密称取去氧胆酸钠0.1929克，溶于5mL蒸馏水水中；在磁力搅拌的条件下，将去氧胆酸钠的醇溶液滴加至小檗碱盐酸盐的饱和乙醇溶液中，且去氧胆酸钠与小檗碱的摩尔比为1:5，继续加热50℃水浴回流60分钟，因复合物可溶于乙醇中，故滴加蒸馏水至沉淀全部析出，离心，清洗并收集沉淀，真空干燥即得小檗碱去氧胆酸酯的静电复合物。

实施例七

精密称取小檗碱盐酸盐二水合物1.0004克溶于500mL的蒸馏水中，配成小檗碱盐酸盐的饱和溶液；精密称取癸酸钠0.0461克，溶于4mL的蒸馏水中；在磁力搅拌的条件下，将去癸酸钠的水溶液滴加至小檗碱盐酸盐的饱和溶液中，且癸酸钠与小檗碱的摩尔比为1:8，继续搅拌40分钟，沉淀全部析出，离心，清洗并收集沉淀，冷冻干燥即得小檗碱癸酸酯的静电复合物。

实施例八

精密称取小檗碱硫酸氢盐2.1652克，溶于520mL的蒸馏水中，配成饱和溶液；精密称取十二烷基硫酸钠0.4401克，溶于10mL的蒸馏水中，在磁力搅拌的条件下，将十二烷基硫酸钠的水溶液滴加至小檗碱硫酸氢盐的饱和溶液中，且癸酸钠与小檗碱硫酸氢盐的摩尔比为1:10，继续超声30分钟，沉淀全部析出，离心，清洗并收集沉淀，真空干燥即得小檗碱十二烷基硫酸酯的静电复合物。

实施例九

精密称取小檗碱硫酸盐2.1651克，溶于520mL蒸馏水中，配成饱和溶液；精密称取癸酸钠0.1875克和去氧胆酸钠0.4908克溶于10mL水中；在磁力搅拌的条件下，将表面活性剂溶液滴加至小檗碱硫酸盐的饱和溶液中，且癸酸钠、去氧胆酸钠和小檗碱硫酸盐的摩尔比为0.5:0.5:2，继续搅拌40分钟，沉淀全部析出，离心，清洗并收集沉淀，冷冻干燥即得小檗碱癸酸酯静电复合物和小檗碱去氧胆酸酯复合物的混合物。

实施例十

精密称取小檗碱硫酸氢盐2.1654克，溶于520mL蒸馏水中，配成饱和溶液；精密称取癸酸钠0.0375克和十二烷基硫酸钠0.2881克，溶于10mL蒸馏水中；在磁力搅拌的条件下，将表面活性剂溶液滴加至小檗碱硫酸氢盐的饱和溶液中，且癸酸钠、十二烷基硫酸钠和小檗碱硫酸氢盐的摩尔比为0.2:0.8:4，继续超声30分钟，沉淀全部析出，离心，清洗并收集沉淀，真空干燥即得小檗碱癸酸酯静电复合物和小檗碱十二烷基硫酸酯静电复合物的混合物。

实施例十一

精密称取小檗碱盐酸盐二水合物3.0403克，溶于535mL蒸馏水中，配成饱和溶液；精密称取去氧胆酸钠0.1466克和胆固醇硫酸酯钠0.4253克，溶于90mL无水乙醇中；在磁力搅拌的条件下，将表面活性剂溶液滴加至小檗碱盐酸盐的饱和溶液中，且去氧胆酸钠、胆固醇硫酸酯钠和小檗碱盐酸盐的摩尔比为0.3:0.7:6，继续加热50℃水浴条件下回流50分钟，沉淀全部析出，离心，清洗并收集沉淀，真空干燥即得小檗碱去氧胆酸酯静电复合物和小檗碱胆固醇硫酸酯静电复合物的混合物。

实施例十二

精密称取小檗碱硫酸盐2.3041克，溶于460mL蒸馏水中，配成饱和溶液；精密称取癸酸钠0.4500克、十二烷基硫酸钠0.4320克和去氧胆酸钠0.5889克溶于50mL蒸馏水中；在磁力搅拌的条件下，将表面活性剂溶液滴加至小檗碱硫酸盐的饱和溶液中，继续搅拌60分钟，沉淀全部析出，离心，清洗并收集沉淀，冷冻干燥即得小檗碱癸酸酯静电复合物、小檗碱十二烷基硫酸酯静电复合物和小檗碱去氧胆酸酯静电复合物的混合物。

一种小檗碱静电复合物及其制备方法的动物实验报告。

一、大鼠动物实验与血药浓度的测定-1。

1.大鼠给药样品的配置

（1）取羧甲基纤维素钠0.5g，搅拌下缓慢加入到微沸的100mL的蒸馏水中，继续保持微沸和搅拌至成透明溶液，室温静置10小时以上，取上清液为0.5%的羧甲基纤维素钠溶液。

（2）将小檗碱盐酸盐过100目筛，称取50mg,移液管移取10mL的0.5%的羧甲基纤维素钠溶液配置小檗碱盐酸盐混悬给药样品。

（3）将实施例1中制得的小檗碱胆固醇硫酸酯复合物过100目筛，按50mg小檗碱盐酸盐算，称取108mg小檗碱胆固醇硫酸酯复合物，移液管移取10mL的0.5%的羧甲基纤维素钠溶液配置小檗碱胆固醇硫酸酯复合物混悬给药样品。

（4）将实施例2中制得的小檗碱去氧胆酸酯复合物过100目筛，按50mg小檗碱盐酸盐算，称取102mg小檗碱去氧胆酸酯复合物，移液管移取10mL的0.5%的羧甲基纤维素钠溶液配置小檗碱去氧胆酸酯复合物混悬给药样品。

2.6只SD大鼠称重，随机分为三组，每组2只，第一组给予小檗碱胆固醇硫酸酯复合物混悬液，第二组给予小檗碱去氧胆酸酯复合物混悬液，第三组给予小檗碱盐酸盐混悬液，且均以50mg/kg的小檗碱灌胃给药。于给药前0时及给药后0.167、0.333、0.5、0.75、1、2、3、4、6、8、12、24、36、48小时大鼠眼眶取血。

3.采用LC-MS/MS方法测定血药浓度

（1）色谱条件：

·色谱柱：十八烷基键合硅胶柱

·流动相：乙腈-0.1%的甲酸水溶液，梯度洗脱，梯度表如下表1，流速0.2ml/min。

表1流动相梯度洗脱表

时间（min）	0.1%甲酸水溶液（A）	乙腈（B）
			Initial	80	20
1	20	80
			2.5	20	80
3	80	20

·柱温：35℃

·进样量：5μL

（2）质谱条件：电喷雾离子源（ESI），正离子扫描，MRM扫描分析，Q1/Q3离子通道分别选择m/z:336→320（小檗碱）和356→192（内标）。离子源参数：离子源电压：0.6Kv,锥孔电压：50V，离子源温度：100℃，碰撞能量：25eV,脱溶剂温度：450℃，锥孔气流速：50L/h,脱溶剂气流速：450L/h。

（3）样品测定：将处理好的对照品、质控样品和测定样品溶液各5μL注入液质联用仪，记录色谱图，按峰面积比值计算血样中小檗碱的含量。

(4)结果:血药浓度测定值如下表2和图3血药浓度-时间曲线图所示。

表2小檗碱及其胆固醇硫酸酯和去氧胆酸复合物在大鼠体内药动学参数

	Cmax(ng/ml)	Tmax(h)	AUC_0-48h(ng·h/ml)
				小檗碱盐酸盐对照组	3.88±2.08	7.7±7.07	24.11±34.95
小檗碱胆固醇硫酸酯复合物组	7.34±3.59	8±5.66	122.96±26.69
				小檗碱去氧胆酸酯复合物组	19.99±12.45	2.25±2.47	43.74±35.33

二、大鼠动物实验及血药浓度测定-2

1.大鼠给药样品的配置

（2）将小檗碱盐酸盐过100目筛，称取50mg,移液管移取10mL0.5%的羧甲基纤维素钠溶液配置小檗碱盐酸盐混悬给药样品。

（3）将实施例3中制得的小檗碱十二烷基硫酸酯复合物过100目筛，按小檗碱盐酸盐50mg计称取小檗碱十二烷基硫酸酯复合物81mg，移液管移取10mL0.5%的羧甲基纤维素钠溶液，配置小檗碱十二烷基硫酸酯复合物混悬给药样品。

2.4只SD大鼠称重并随机分为两组，第一组为小檗碱盐酸盐对照组，第二组为小檗碱十二烷基硫酸酯复合物实验组，按体重灌胃给予100mg/kg的药物混悬液，在给药前0时和给药后0.25、0.5、0.75、1、2、3、4、6、8、12、24、36小时于大鼠眼眶取血。

3.LC-MS/MS测定血浆样品中小檗碱的含量

（1）色谱条件：同实施例9。

（2）质谱条件：同实施例9。

（3）样品测定：同实施例9。

（4）结果：对照组和实验组的血浆样品中小檗碱含量测定值如表3和图4血药浓度-时间曲线所示。

表3小檗碱及其十二烷基硫酸酯复合物在大鼠体内的药动学参数

	Cmax(ng/mL)	Tmax(h)	AUC0-36h(ng·h/mL)
				小檗碱盐酸盐组	13.9±0.49	1.25±1.06	50.96±2.00
小檗碱十二烷基硫酸酯复合物组	12.45±1.77	9.00±2.12	199.04±4.76

Claims

1.一种小檗碱静电复合物，其特征在于：该静电复合物由阴离子表面活性剂与小檗碱或小檗碱盐复合组成，阴离子表面活性剂与小檗碱或小檗碱盐的摩尔比为1:0.5-10。

2.根据权利要求1所述的一种小檗碱静电复合物，其特征在于：所述的阴离子与小檗碱盐的摩尔比为1:1。

3.根据权利要求1所述的一种小檗碱静电复合物，其特征在于：所述的阴离子表面活性剂是指烷基硫酸盐或磺酸盐、脂肪酸盐中的一种或几种。

4.根据权利要求1所述的一种小檗碱静电复合物，其特征在于：所述烷基硫酸盐是胆固醇硫酸酯钠、十二烷基硫酸钠、去氧胆酸钠中的一种或几种，烷基磺酸盐是指庚烷磺酸钠、十二烷基磺酸钠中的一种或几种，脂肪酸盐是癸酸钠、庚酸钠中的一种或几种。

5.根据权利要求1所述的一种小檗碱静电复合物，其特征在于：所述的小檗碱是指季铵形式的小檗碱，所述的小檗碱盐是指小檗碱的无机酸盐，所述的小檗碱及小檗碱盐的来源为化学合成或中药中提取。

6.根据权利要求1所述的一种小檗碱静电复合物，其特征在于：所述的小檗碱的无机酸盐是指小檗碱盐酸盐、小檗碱硫酸盐或小檗碱硫酸氢盐。

7.根据权利要求1所述的一种小檗碱静电复合物，其特征在于：将该小檗碱静电复合物制成药剂学上的任何一种剂型。

8.根据权利要求1所述的一种小檗碱静电复合物，其特征在于：将该小檗碱静电复合物制成口服剂型。

9.根据权利要求1所述的一种小檗碱静电复合物的制备方法，其特征在于：该制备方法包括如下步骤：将小檗碱或小檗碱盐溶于蒸馏水或乙醇中成饱和溶液，将不溶于水的阴离子表面活性剂溶于乙醇，将溶于水的阴离子表面活性剂溶于水中；在磁力搅拌下，将阴离子表面活性剂滴加至小檗碱饱和溶液中；继续搅拌或超声或加热回流10-60分钟，析出沉淀，离心，清洗并收集沉淀物，真空干燥或冷冻干燥，即得小檗碱静电复合物。