CN102612320B - 病毒灭活剂 - Google Patents

病毒灭活剂 Download PDF

Info

Publication number
CN102612320B
CN102612320B CN201080050783.4A CN201080050783A CN102612320B CN 102612320 B CN102612320 B CN 102612320B CN 201080050783 A CN201080050783 A CN 201080050783A CN 102612320 B CN102612320 B CN 102612320B
Authority
CN
China
Prior art keywords
virus
bactericidal effect
weight
norovirus
present
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201080050783.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102612320A (zh
Inventor
川上大雄
小谷博秀
山下泰治
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Kawakami Co Ltd
Original Assignee
Kawakami Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kawakami Co Ltd filed Critical Kawakami Co Ltd
Publication of CN102612320A publication Critical patent/CN102612320A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102612320B publication Critical patent/CN102612320B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N31/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic oxygen or sulfur compounds
    • A01N31/02Acyclic compounds
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N59/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing elements or inorganic compounds
    • A01N59/06Aluminium; Calcium; Magnesium; Compounds thereof
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23BPRESERVING, e.g. BY CANNING, MEAT, FISH, EGGS, FRUIT, VEGETABLES, EDIBLE SEEDS; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES; THE PRESERVED, RIPENED, OR CANNED PRODUCTS
    • A23B4/00General methods for preserving meat, sausages, fish or fish products
    • A23B4/02Preserving by means of inorganic salts
    • A23B4/027Preserving by means of inorganic salts by inorganic salts other than kitchen salt, or mixtures thereof with organic compounds, e.g. biochemical compounds
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23BPRESERVING, e.g. BY CANNING, MEAT, FISH, EGGS, FRUIT, VEGETABLES, EDIBLE SEEDS; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES; THE PRESERVED, RIPENED, OR CANNED PRODUCTS
    • A23B4/00General methods for preserving meat, sausages, fish or fish products
    • A23B4/14Preserving with chemicals not covered by groups A23B4/02 or A23B4/12
    • A23B4/18Preserving with chemicals not covered by groups A23B4/02 or A23B4/12 in the form of liquids or solids
    • A23B4/20Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23BPRESERVING, e.g. BY CANNING, MEAT, FISH, EGGS, FRUIT, VEGETABLES, EDIBLE SEEDS; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES; THE PRESERVED, RIPENED, OR CANNED PRODUCTS
    • A23B4/00General methods for preserving meat, sausages, fish or fish products
    • A23B4/14Preserving with chemicals not covered by groups A23B4/02 or A23B4/12
    • A23B4/18Preserving with chemicals not covered by groups A23B4/02 or A23B4/12 in the form of liquids or solids
    • A23B4/24Inorganic compounds
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L17/00Food-from-the-sea products; Fish products; Fish meal; Fish-egg substitutes; Preparation or treatment thereof
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L3/00Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs
    • A23L3/34Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals
    • A23L3/3454Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals in the form of liquids or solids
    • A23L3/3463Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L3/00Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs
    • A23L3/34Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals
    • A23L3/3454Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals in the form of liquids or solids
    • A23L3/358Inorganic compounds
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/06Aluminium, calcium or magnesium; Compounds thereof, e.g. clay
    • A61K33/08Oxides; Hydroxides
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12Antivirals
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12Antivirals
    • A61P31/14Antivirals for RNA viruses

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Marine Sciences & Fisheries (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Food Preservation Except Freezing, Refrigeration, And Drying (AREA)

Abstract

本发明提供煅烧钙等的明显有病毒灭活效果,特别是有诺罗病毒灭活效果的新颖的病毒灭活剂。包括将氢氧化钙、氧化钙及煅烧钙之中1种以上配合到水中而得到的水溶液或水分散体。上述成分之外、可配合乙醇和有机酸盐。

Description

病毒灭活剂
【技术领域】
本发明涉及病毒灭活剂,特别是涉及对诺罗病毒及A型流感病毒有灭活效果的病毒灭活剂。
【背景技术】
一直以来,以醇作为主剂的组合物作为除菌剂广泛使用,再者,作为对诺罗病毒有灭活效果的组合物,公开有例如,向酿造用醇配合葡萄水果种子提取液和植酸的组合物(专利文献1)、向乙醇配合碱性物质和表面活性剂的组合物(专利文献2)、及向乙醇配合有机酸盐和桉树提取物的组合物(专利文献3)等。
另一方面,近年公开、在贝壳煅烧钙、氧化钙及作为其水和物的氢氧化钙中有抗菌性(专利文献4)、公开了向此贝壳煅烧钙配合有机酸盐的食品的制菌剂(专利文献5)、向煅烧钙配合多元醇脂肪酸酯及乙醇的食品用除菌剂(专利文献6)等。但是,贝壳煅烧钙等的对诺罗病毒的灭活效果尚不明。
【现有技术文献】
【专利文献】
专利文献1:特开2007-320924号公报
专利文献2:特开2008-189645号公报
专利文献3:特开2009-179577号公报
专利文献4:特开平11-222796号公报
专利文献5:特开平11-290044特号公报
专利文献6:特开2002-272434号公报
【发明内容】
【发明要解决的技术课题】
本发明鉴于上述事实,以提供煅烧钙等的明显有病毒灭活效果,特别是有诺罗病毒灭活效果的新颖的病毒灭活剂作为课题。
【解决课题的技术方案】
本发明人为了解决上述课题而重复锐意研究的结果,发现配合氢氧化钙的水溶液或水分散体不仅有诺罗病毒灭活效果,再者也有A型流感病毒灭活效果,从而完成本发明。
即,本发明的要旨如下。
〔1〕诺罗病毒灭活剂,其特征在于,其是配合氢氧化钙而成的水溶液或水分散体;
〔2〕A型流感病毒灭活剂,其特征在于,其是配合氢氧化钙而成的水溶液或水分散体;
〔3〕上述〔1〕或〔2〕所述的病毒灭活剂,其为代替氢氧化钙,或者与该氢氧化钙一同,配合氧化钙和/或煅烧钙而成;
〔4〕上述〔1〕~〔3〕之任一项所述的病毒灭活剂,其是再配合乙醇及乳酸钠而成;
〔5〕上述〔4〕所述的病毒灭活剂,其中氢氧化钙、氧化钙及煅烧钙之中,配合的成分的合计的配合比例是0.01~30重量%、乙醇的配合比例是5~30重量%、乳酸钠的配合比例是1~30重量%;
〔6〕上述〔1〕~〔5〕之任一项所述的病毒灭活剂,其中所述氢氧化钙、氧化钙及煅烧钙的平均粒径均为0.1~10μm;
〔7〕食品,其用上述〔1〕~〔6〕之任一项所述的病毒灭活剂进行病毒灭活处理而得到;
〔8〕上述〔7〕所述的食品,其中所述食品是鲜鱼贝类。
【发明效果】
通过本发明,提供有诺罗病毒灭活效果和A型流感病毒灭活效果的病毒灭活剂。
【附图说明】
【图1】是PCR产物的电泳图。
【图2】是PCR产物的电泳图。
【图3】是示对被金黄色葡萄球菌污染的生牡蛎进行除菌处理之时的,生牡蛎的活菌数的经时变化的图。
【图4】是示对被沙门氏菌污染的生牡蛎进行除菌处理之时的,生牡蛎的活菌数的经时变化的图。
【图5】是示对被0-157污染的生牡蛎进行除菌处理之时的,生牡蛎的活菌数的经时变化的图。
【图6】是示对被副溶血性弧菌污染的生牡蛎进行除菌处理之时的,生牡蛎的活菌数的经时变化的图。
【图7】是示对被大肠杆菌污染的生牡蛎进行除菌处理之时的,生牡蛎的活菌数的经时变化的图。
【图8】是示对浸渍到人工海水的生牡蛎进行除菌处理之时的,生牡蛎的活菌数的经时变化的图。
【实施方式】
本发明的病毒灭活剂是将氢氧化钙配合到水而得到的水溶液或水分散体,有诺罗病毒灭活效果、A型流感病毒灭活效果及猫杯状病毒灭活效果,再者对一般食中毒菌有除菌效果。
作为本发明的配合成分,也可代替氢氧化钙,或者与氢氧化钙一同,使用例如,使氧化钙或煅烧钙等的与水反应而生成氢氧化钙的成分的1种以上。以下,在本说明书,氢氧化钙、及氧化钙、煅烧钙等的与水反应而生成氢氧化钙的成分总称为“病毒灭活成分”。
上述病毒灭活成分之中,煅烧钙是将牡蛎壳、扇贝壳、北极贝壳、卵壳或珊瑚壳等、煅烧前的成分是碳酸钙的动物性来源的钙在600℃以上、优选在900~1200℃的温度煅烧或通电加热15~60分钟左右而得到,主成分是氧化钙。得到的煅烧钙的饱和水溶液的pH优选在11~13的范围。煅烧钙通常使用适合于食品添加物规格的。
病毒灭活成分的平均粒径不特别限定,通常是0.1~10μm。另外,病毒灭活剂中的病毒灭活成分的配合比例不特别限定,通常是0.01~30重量%。
在本发明中,为了提高病毒灭活效果或对食中毒菌的除菌效果,作为病毒灭活成分以外的其他配合成分,可配合例如,乙醇或有机酸盐。乙醇优选适合于常规食品添加物规格。病毒灭活剂中的乙醇的配合比例不特别限定,通常以5~30重量%的范围配合。
有机酸盐而言,可举出例如,柠檬酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、草酸盐、醋酸盐、蚁酸盐、琥珀酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐等,这些可单独或适宜组合2种以上而使用。盐而言,可举出碱金属盐等。在这些之中,也优选乳酸盐,更优选乳酸钠。病毒灭活剂中的有机酸盐的配合比例不特别限定,通常以1~30重量%的范围配合。
在本发明的病毒灭活剂中,除了上述的成分之外,在不妨碍本发明的效果的范围内,可适量含有可配合到除菌剂的公知的成分。这样的成分而言,可举出防腐剂、氧化防止剂、表面活性剂、染料、香料、染料等。
本发明的病毒灭活剂的pH从病毒灭活效果或对食中毒菌的除菌效果的观点来看,优选11~14,更优选11~13。
本发明的病毒灭活剂,特别是诺罗病毒灭活效果和A型流感病毒灭活效果显著,再者对一般食中毒菌除菌效果也优良。在本发明中,根据上述的配合成分的浓度,可作为各成分基本上溶解于水的水溶液型,或者作为各成分之中一部分溶解于水,一部分分散于水中的水分散型而使用。本发明的病毒灭活剂在使用时不用水稀释而直接使用也可,但在使用水分散型时,优选用水稀释而使用。在直接使用水溶液型或水分散型时,或者将这些用水稀释而使用时等、采用任何的使用方法时,病毒灭活剂中的病毒灭活成分的配合比例在实际的使用浓度均优选0.01~5重量%。
使用水溶液型时填充到喷雾容器等中,可在例如,食品工场、饮食店的厨房或家庭的厨房等,向作业者的手、腕等的皮肤、菜刀、锅等的烹调器具、皿、容器等的餐具、鲜鱼贝类、蔬菜、肉类等的生鲜食品、加工食品等、有上述病毒的附着的担忧的部分喷雾而使用。另外,使用水分散型时,使用时可用水稀释,在上述例示的适用对象物之中,将可携带病毒的浸渍而使用。
【实施例】
以下,根据试验例等更详细地说明本发明,但本发明不以任何方式受这些的限定。
【1.对猫杯状病毒的灭活效果的验证】
【A.试验概要】
配合氢氧化钙、乙醇、乳酸钠,将余部作为水将下述配方的水分散体(本发明品)作为待测样品,在(财)日本食品分析中心,对于对猫杯状病毒的本发明品的灭活效果实施验证试验。即,由于诺罗病毒自体不被稳定的培养,在本试验中,从形态的特征或基因组的结构,将作为诺罗病毒的近亲的猫杯状病毒作为代替病毒使用。试验的详细如下。
【B.试验方法】
〔1〕待测样品:水分散体(本发明品)
氢氧化钙 12.8重量%
乙醇 19.7重量%
乳酸钠 9.9重量%
57.6重量%
〔2〕试验病毒
猫杯状病毒F-9ATCC VR-782(猫杯状病毒)
〔3〕使用细胞
CRFK细胞(大日本制药公司)
〔4〕使用培养基
细胞增殖培养基
(1)向Eagle MEM培养基“ニッスイ”(1)(日水制药公司)加10%胎牛血清。
(2)细胞维持培养基
向Eagle MEM培养基“ニッスイ”(1)(日水制药公司)加2%胎牛血清。
〔5〕病毒悬浮液的制备
(1)细胞的培养
使用细胞增殖培养基,将使用细胞在组织培养用瓶内单层培养。
(2)病毒的接种
单层培养后,从瓶内除去细胞增殖培养基,接种试验病毒。接下来,加细胞维持培养基而在37℃的碳酸气体温育器(CO2浓度:5%)内培养1~5天。
(3)病毒悬浮液的制备
培养后,使用倒置相差显微镜观察细胞的形态,确认细胞发生形态变化(细胞变性效果)。接下来,将培养液离心分离(3,000r/min,10分钟),将得到的上清液作为病毒悬浮液。
〔6〕试验操作
使用纯化水而制备待测样品的2%悬浮液而作为试验液。向试验液1ml添加病毒悬浮液0.1ml、混合之后,以80~90r/min振荡着室温保存,6及24小时后,将试验液使用细胞维持培养基稀释100倍。
再有,以纯化水作为对照的试验液同样地进行试验。但是,在开始时就进行测定。
〔7〕病毒感染价的测定
使用细胞增殖培养基,将使用的细胞在组织培养用微板(96孔)内进行单层培养之后,除去细胞增殖培养基而加各0.1ml细胞维持培养基。接下来,将试验液的稀释液0.1ml接种到各4孔,在37℃的碳酸气体温育器(CO2浓度:5%)内培养4~7天。培养后,使用倒置相差显微镜观察细胞的形态变化(细胞变性效果)的有无,根据Reed-Muench法算出50%组织培养感染量(TCID50)而换算成每试验液1ml的病毒感染价。结果显示于表1。
【表1】
TCID50:半数组织培养感染剂量,50%组织培养感染量
1:每试验液1ml的TCID50的对数值
开始时:测定作用开始后立即的对照的TCID50,作为开始时。
对照:纯化水
作用条件:室温、振动保存
<2.5:检测不到
从表1知,本发明品在6小时以内完全地灭活3.1×108TCID50/ml的猫杯状病毒。
【2.对诺罗病毒的灭活效果的验证】
(1)配合氢氧化钙、乙醇、乳酸钠,将余部作为水将下述配方的水溶液(本发明品)作为待测样品,在ビジョンバイオ株式会社食品检查中心,对于本发明品的对诺罗病毒的灭活效果实施验证试验。
<待测样品:水溶液(本发明品)>
氢氧化钙 0.26重量%
乙醇 10重量%
乳酸钠 5重量%
84.74重量%
诺罗病毒的检测试验根据厚生劳动省公示的“诺罗病毒的检测法”(最终改正2007年5月14日食安监发第0514004号)实施。诺罗病毒而言,使用粪便来源诺罗病毒(属于NV基因2组)。实验顺序而言,将下述4个样品用涡旋混合器搅拌,静置10分钟后,开始RNA的提取,接下来进行DNA酶处理及RT-PCR反应(逆转录酶-聚合酶链式反应),对得到的PCR产物进行2.5%琼脂糖凝胶电泳。电泳结束之后,进行凝胶染色和照片撮影,进行条带的确认。在RT-PCR反应中,向Genogroup(G)II检测用,作为引物使用G2-SKF/G2-SKR(扩增片段344bp),G2-SKF/G2AL-SKR(扩增片段344bp)。图1中示PCR产物的电泳图。
<样品>
1:诺罗病毒悬浮液500μl中未添加任何物质的样品(对照区1)
2:诺罗病毒悬浮液100μl中添加纯化水400μl的样品(对照区2)
3:诺罗病毒悬浮液100μl中添加本发明品400μl的样品(本发明品添加区1)
4:与上述3相同的样品(本发明品添加区2)
在本验证试验中,诺罗病毒阳性的情况在344bp的位置出现条带。从而看图1,则在添加本发明品的样品3,4中确认不到条带而检测不到诺罗病毒基因,与此相比,在未添加本发明品的样品1,2中检测到诺罗病毒基因的条带。从而,在本验证试验条件下,确认本发明品对诺罗病毒有灭活效果。
(2)如下述配方所示,不配合乙醇和乳酸钠,将氢氧化钙配合到水而得到的水溶液(本发明品)作为待测样品,及将下述4个样品用涡旋混合器搅拌,静置30分钟后,开始RNA的提取,除此之外,用与上述(1)同样的方法对于对诺罗病毒的灭活效果实施验证试验。图2中示PCR产物的电泳图。
<待测样品:水溶液(本发明品)>
氢氧化钙 0.26重量%
99.74重量%
<样品>
1:诺罗病毒悬浮液500μl中未添加任何物质的样品(对照区1)
2:诺罗病毒悬浮液100μl中添加纯化水400μl的样品(对照区2)
3:诺罗病毒悬浮液100μl中添加本发明品400μl的样品(本发明品添加区1)
4:与上述3相同的样品(本发明品添加区2)
根据图2,在添加本发明品的样品3,4中确认不到条带而检测不到诺罗病毒基因,与此相比,在未添加本发明品的样品1,2中检测到诺罗病毒基因的条带。从而,在本验证试验条件下,确认本发明品对诺罗病毒有灭活效果。
比较上述(1)和(2)的实验条件,则在(1)中,对诺罗病毒本发明品(配合氢氧化钙、乙醇、乳酸钠,余部为水)的处理时间是10分钟,与此相比,在(2)中对诺罗病毒本发明品(配合氢氧化钙,余部为水)的处理时间是30分钟。然后,根据图1,2,(1)的样品3,4和(2)的样品3,4均检测不到诺罗病毒基因的条带。认为对诺罗病毒的本发明品的处理时间与病毒灭活效果的程度相关,从上述(1),(2)的结果得知,(1)的本发明品相比(2)的本发明品在病毒灭活效果的方面更优良。
【3.对A型流感病毒的灭活效果的验证】
【A.试验概要】
使用与上述“2.对诺罗病毒的灭活效果的验证”的(1)相同的待测样品,在(财)日本食品分析中心,对于本发明品的对A型流感病毒的灭活效果实施验证试验。试验的详细如下。
B.试验方法
〔1〕待测样品:水溶液(本发明品)
氢氧化钙 0.26重量%
乙醇 10重量%
乳酸钠 5重量%
84.74重量%
〔2〕试验病毒
A型流感病毒(H1N1)
〔3〕使用细胞
MDCK(NBL-2)细胞ATCC CCL-34株(大日本制药公司)
〔4〕使用培养基
(1)细胞增殖培养基
EagleMEM培养基“ニッスイ”(1)(日水制药公司) 1,000ml
10%NaHCO3 14ml
L-谷氨酰胺(30g/l) 9.8ml
100×MEM用维生素液 30ml
10%白蛋白 20ml
0.25%胰蛋白酶 20ml
〔5〕病毒悬浮液的制备
(1)细胞的培养
使用细胞增殖培养基,将使用的细胞在组织培养用瓶内单层培养。
(2)病毒的接种
单层培养后,从瓶内除去细胞增殖培养基而,接种试验病毒。接下来,加细胞维持培养基而在37℃的碳酸气体温育器(CO2浓度:5%)内培养1~5天。
(3)病毒悬浮液的制备
培养后,使用倒置相差显微镜观察细胞的形态,确认细胞发生形态变化(细胞变性效果)。接下来,将培养液离心分离(3,000r/min,10分钟),将得到的上清液作为病毒悬浮液。
〔6〕试验操作
向待测样品1ml添加病毒悬浮液0.1ml,混合而作为作用液。使于室温作用30秒钟、1分钟及5分钟后,使用细胞维持培养基稀释100倍。再有,作为对照而使用纯化水而同样地进行试验,开始时及5分钟后,进行测定。
〔7〕病毒感染价的测定
使用细胞增殖培养基,将使用的细胞在组织培养用微板(96孔)内进行单层培养之后,除去细胞增殖培养基而加各0.1ml细胞维持培养基。接下来,接种各4孔作用液的稀释液0.1ml,在37℃的碳酸气体温育器(CO2浓度:5%)内培养4~7天。培养后,使用倒置相差显微镜观察细胞的形态变化(细胞变性效果)的有无,根据Reed-Muench法算出50%组织培养感染量(TCID50)而换算成每作用液1ml的病毒感染价。结果显示于表2。
【表2】
TCID50:半数组织培养感染剂量,50%组织培养感染量
*:每试验液1ml的TCID50的对数值
开始时:测定作用开始后立即的对照的TCID50,作为开始时。
对照:纯化水
作用条件:室温
<2.5:检测不到
从表2得知,本发明品在1分钟以内完全地灭活2.0×107TCID50/ml的流感病毒。
【4.生牡蛎的除菌测试】
将带壳生牡蛎在含103~104cfu/ml的食中毒菌(金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、0-157、副溶血性弧菌或大肠杆菌)的人工海水(SEAWATER,GEX公司)中于常温浸渍12小时(浸渍步骤),接下来取出浸渍后的污染生牡蛎,在含下述除菌剂的别的人工海水中于常温浸渍(除菌步骤)、浸渍时,测定在3,6,9及24小时后的污染生牡蛎的活菌数,研究除菌剂的除菌效果。
再有,作为对照,在浸渍步骤中,使用在未添加食中毒菌的人工海水中浸渍带壳生牡蛎的试验区,在除菌步骤中,使用在未添加除菌剂的人工海水中浸渍污染生牡蛎的,进行与上述同样的试验。结果显示于图3~图8。
<除菌步骤的试验区>
1:人工海水中,含有1ppm次氯酸钠。
2:人工海水中,含有2重量%上述“1.对猫杯状病毒的灭活效果的验证”中使用的待测样品(本发明品)。
3:仅人工海水(未添加除菌剂)
由图3~图8确认,配合本发明品的试验区2相比配合次氯酸钠的试验区1,示同等或其以上的除菌效果。
【5.包含煅烧钙和乙醇的组合物的杀菌效果】
以表3及表4所示的配合配方,制备了配合贝壳煅烧钙(NC公司)和乙醇,余部为水的组合物(本发明品),检查对大肠杆菌(Esherichia coliNIHJ)及金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus209P)(以下,也称之为“供试菌”)的杀菌效果。
【杀菌效果的判断试验】
上述组合物的杀菌效果根据已知为消毒剂的杀菌效果判断法的Kelsey-Sykes法(The pharmaceutical journal、1974年11月30日发行、第528~530页)的藤本变法(“防菌防霉”、技报堂出版、第683~684页)进行判断。操作顺序的概略如下。
(1)向设定于20℃的反应容器分注上述制备的混合液至水分散体3ml,注加浓度调节到104~105cfu/ml的供试菌1ml(将此时间点作为供试菌的最初的注加开始时)、其8分钟后,采集反应液,向放入后培养基(Bacto(TM)Tryptic Soy Broth)的5个试管各注加接种0.02ml(1滴)。
(2)2分钟后(从步骤(1)的注加开始时经过10分钟后)、向反应液注入上述供试菌1ml,8分钟后(从步骤(1)的注加开始时经过18分钟后)、采集反应液,向放入后培养基(Bacto(TM)TrypticSoy Broth)的5个试管各注加接种0.02ml(1滴)。
(3)2分钟后(从步骤(1)的注加开始时经过20分钟后)、向反应液注入上述供试菌1ml,8分钟后(从步骤(1)的注加开始时经过28分钟后)、采集反应液,放入后培养基(Bacto(TM)TrypticSoy Broth)的5个试管各注加接种0.02ml(1滴)。
【评价】
将步骤(1)~(3)中得到的各5个试管于37℃培养24小时,在各步骤中,在5个中3个以上的试管中确认不到供试菌的增殖时,判断为有杀菌效果。
具体性的评价如下。结果示于表3和表4。
×:无杀菌效果
△:在步骤(1)中有杀菌效果,但在步骤(2)中无杀菌效果
○:至步骤(2)有杀菌效果,但在步骤(3)中无杀菌效果
◎:至步骤(3)有杀菌效果
【表3】<使用菌株:大肠杆菌>
×:无杀菌效果
△:在步骤(1)中有杀菌效果,但在步骤(2)中无杀菌效果
○:至步骤(2)有杀菌效果,但在步骤(3)中无杀菌效果
◎:至步骤(3)有杀菌效果
-:未实施(由于效果明显)
【表4】<使用菌株:金黄色葡萄球菌>
×:无杀菌效果
△:在步骤(1)中有杀菌效果,但在步骤(2)中无杀菌效果
○:至步骤(2)有杀菌效果,但在步骤(3)中无杀菌效果
◎:至步骤(3)有杀菌效果
-:未实施(由于效果明显)
从表3的结果确认,对大肠杆菌而言,配合0.05重量%以上的煅烧钙时,配合10重量%以上的乙醇,则有充分的杀菌效果(评价:◎)。另外,从表4的结果确认,对金黄色葡萄球菌而言,配合0.05重量%以上的煅烧钙时,配合20重量%以上的乙醇,则有充分的杀菌效果(评价:◎)。
【6.配合乳酸钠的组合物的杀菌效果】
根据表5及表6所示的配合配方,制备配合贝壳煅烧钙(NC公司)和乙醇及乳酸钠(60重量%水溶液、武藏野化学研究所),余部为水的各种的组合物(本发明品),检查对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌的杀菌效果。杀菌效果的判断试验及评价方法与上述“5.包含煅烧钙和乙醇的组合物的杀菌效果”同样地进行。结果示于表5和表6。
【表5】对大肠杆菌的杀菌效果
×:无杀菌效果
△:在步骤(1)中有杀菌效果,但在步骤(2)中无杀菌效果
○:至步骤(2)有杀菌效果,但在步骤(3)中无杀菌效果
◎:至步骤(3)有杀菌效果
-:未实施(由于效果明显)
【表6】对金黄色葡萄球菌的杀菌效果
×:无杀菌效果
△:在步骤(1)中有杀菌效果,但在步骤(2)中无杀菌效果
○:至步骤(2)有杀菌效果,但在步骤(3)中无杀菌效果
◎:至步骤(3)有杀菌效果
-:未实施(由于效果明显)
从表5的结果得知,以乳酸钠单独,则在配合9重量%的乳酸钠时也完全确认不到对大肠杆菌的杀菌效果(参照表5之左列),与此相比,配合5重量%乙醇、配合0.1重量%煅烧钙时,配合1.5重量%以上乳酸钠,则杀菌效果从评价○成◎(参照表5之中央列)。即,通过对含有乙醇和煅烧钙的组合物配合乳酸钠,确认对大肠杆菌的杀菌力的增强效果。
此倾向在对金黄色葡萄球菌的杀菌效果中显著地确认到。即,配合5重量%乙醇、配合0.1重量%煅烧钙时,配合4.5重量%以上乳酸钠,则杀菌效果从评价×成△(参照表6之中央列),配合10重量%乙醇、配合0.2重量%煅烧钙时,配合6重量%以上乳酸钠,则杀菌效果从评价△成◎(参照表6之右列)。
由乳酸钠的杀菌力的增强效果被推测为是通过升高组合物中的氢氧化钙的溶解性。即,一般地认为,配合的煅烧钙与组合物中的水反应而作为氢氧化钙存在,此氢氧化钙示杀菌效果。而且认为,氢氧化钙对水的溶解度小,因此不发挥原本的杀菌效果,但上述的结果可认为是提示,通过乳酸钠的添加,升高生成的氢氧化钙的溶解度。
【工业实用性】
本发明的病毒灭活剂除了食品本身之外,还可作为在烹调器具、烹调设备等的食品制备设备中适用的病毒灭活剂而广泛利用。

Claims (3)

1.诺罗病毒灭活剂,其特征在于,其是配合氢氧化钙0.26重量%、乙醇10重量%、乳酸钠5重量%和水84.74重量%而成的水溶液,其中氢氧化钙的平均粒径均为0.1~10μm。
2.权利要求1所述的病毒灭活剂在食品的病毒灭活处理中的用途。
3.权利要求2所述的用途,其中所述食品是鲜鱼贝类。
CN201080050783.4A 2009-11-10 2010-11-09 病毒灭活剂 Expired - Fee Related CN102612320B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2009-257384 2009-11-10
JP2009257384 2009-11-10
PCT/JP2010/069919 WO2011058964A1 (ja) 2009-11-10 2010-11-09 ウイルス不活化剤

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102612320A CN102612320A (zh) 2012-07-25
CN102612320B true CN102612320B (zh) 2014-10-08

Family

ID=43991623

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201080050783.4A Expired - Fee Related CN102612320B (zh) 2009-11-10 2010-11-09 病毒灭活剂

Country Status (6)

Country Link
US (1) US20120231143A1 (zh)
EP (1) EP2499915B1 (zh)
JP (1) JP5763546B2 (zh)
CN (1) CN102612320B (zh)
AU (1) AU2010319177B2 (zh)
WO (1) WO2011058964A1 (zh)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104255793B (zh) * 2014-10-16 2017-07-18 李卫平 绿色食品消毒剂活性牡蛎钙及其制备方法
JP2017071566A (ja) * 2015-10-06 2017-04-13 株式会社かわかみ 化粧料
JP7298908B2 (ja) * 2017-10-16 2023-06-27 株式会社日本抗菌総合研究所 抗菌性組成物
KR20210108945A (ko) * 2018-12-27 2021-09-03 도아고세이가부시키가이샤 비엔벨로프형 항바이러스제 및 그것을 포함하는 조성물 그리고 항바이러스 제품 및 그의 제조 방법
CN111449084A (zh) * 2020-05-09 2020-07-28 同济大学 一种杀灭和抑制细菌及病毒的制剂及使用方法
WO2022055311A1 (ko) * 2020-09-10 2022-03-17 건국대학교 산학협력단 항균 또는 항바이러스 활성을 갖는 수산화 인회석 및 수산화 칼슘을 포함하는 조성물 및 이의 제조 방법

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2001226210A (ja) * 2000-02-18 2001-08-21 Hozawa Hiroki 滅ウィルス剤およびその製造方法
CN1835681A (zh) * 2003-08-12 2006-09-20 用濑电机株式会社 抗病毒剂、使用它的纤维和抗病毒部件
WO2009078447A1 (ja) * 2007-12-17 2009-06-25 Adept Co., Ltd. 抗ノロウイルス剤、抗インフルエンザウイルス剤、およびこれらを用いた抗ウイルス処理方法
WO2009084211A1 (ja) * 2007-12-27 2009-07-09 Johnsondiversey Co., Ltd. 殺菌消毒剤組成物およびこれを含有する殺菌消毒材、ならびにこれらを用いた殺菌消毒方法
WO2009104670A1 (ja) * 2008-02-19 2009-08-27 東京ナノ・バイオテクノロジー株式会社 抗菌抗ウイルス剤及びその使用方法

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5350361A (en) * 1977-08-04 1978-05-08 Hiroe Ogawa Method of preserving smoked food products
US4371560A (en) * 1980-04-07 1983-02-01 Dca Food Industries Seafood product and method of producing same
JPS63133972A (ja) * 1986-11-26 1988-06-06 De-Baa Youshiyu Boeki Kk 食品防腐用組成物
JPH11222796A (ja) 1998-02-02 1999-08-17 Toyo Ink Mfg Co Ltd 抗菌紙および包装材
JPH11290044A (ja) 1998-04-16 1999-10-26 Sankyo Foods Kk カルシウム溶液製剤
US6773737B1 (en) * 1998-11-19 2004-08-10 The Procter & Gamble Company Microorganism reduction methods and compositions for food
JP2002272434A (ja) * 2001-03-16 2002-09-24 Riken Vitamin Co Ltd 食品用除菌剤組成物
WO2003059074A1 (fr) * 2002-01-15 2003-07-24 Japantechno Ltd.,Co. Procede de prevention du brunissement ou du noircissement de mollusques a tentacules
CN100386026C (zh) * 2002-05-30 2008-05-07 味之素株式会社 纯肉食品用制剂及使用该制剂的纯肉食品的制造方法
JP4621590B2 (ja) * 2003-08-12 2011-01-26 株式会社モチガセ 抗ウイルス剤、これを用いた繊維及び抗ウイルス部材
JP4875913B2 (ja) * 2006-03-29 2012-02-15 公益財団法人函館地域産業振興財団 活魚介類の保存又は輸送方法
US20070254015A1 (en) * 2006-04-28 2007-11-01 Searete Llc, A Limited Liability Corporation Of The State Of Delaware Sanitizing surfaces
JP4126068B2 (ja) 2006-06-02 2008-07-30 株式会社ドゥリーム・ドゥ ネコカリシウイルス不活化剤、ネコカリシウイルス不活化剤の製造方法及びネコカリシウイルス不活化スプレー剤
JP2008189645A (ja) 2007-02-01 2008-08-21 Saraya Kk 親水性ウイルスの不活化に有効な組成物
JP5158352B2 (ja) 2008-01-30 2013-03-06 ライオンハイジーン株式会社 抗ウイルス剤
WO2009098786A1 (ja) * 2008-02-08 2009-08-13 Mochigase Co., Ltd. 抗ウイルス材、環境型抗ウイルス材及び包装材料に収容した抗ウイルス材
JP2012006983A (ja) * 2008-10-15 2012-01-12 Ion Commerce Co Ltd アルカリ洗浄水
CN102802448B (zh) * 2009-06-26 2014-03-05 株式会社川上 食品用杀菌剂
JP2011012000A (ja) * 2009-06-30 2011-01-20 Kyoto Sangyo Univ カキ殻由来の石灰を含有する抗鳥インフルエンザウイルス剤、哺乳類または鳥類のための畜産用資材、哺乳類または鳥類のための畜産用飼料、食品容器および衛生用品

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2001226210A (ja) * 2000-02-18 2001-08-21 Hozawa Hiroki 滅ウィルス剤およびその製造方法
CN1835681A (zh) * 2003-08-12 2006-09-20 用濑电机株式会社 抗病毒剂、使用它的纤维和抗病毒部件
WO2009078447A1 (ja) * 2007-12-17 2009-06-25 Adept Co., Ltd. 抗ノロウイルス剤、抗インフルエンザウイルス剤、およびこれらを用いた抗ウイルス処理方法
WO2009084211A1 (ja) * 2007-12-27 2009-07-09 Johnsondiversey Co., Ltd. 殺菌消毒剤組成物およびこれを含有する殺菌消毒材、ならびにこれらを用いた殺菌消毒方法
WO2009104670A1 (ja) * 2008-02-19 2009-08-27 東京ナノ・バイオテクノロジー株式会社 抗菌抗ウイルス剤及びその使用方法

Also Published As

Publication number Publication date
JPWO2011058964A1 (ja) 2013-04-04
EP2499915A4 (en) 2013-09-11
AU2010319177B2 (en) 2014-02-06
EP2499915B1 (en) 2017-10-04
US20120231143A1 (en) 2012-09-13
JP5763546B2 (ja) 2015-08-12
CN102612320A (zh) 2012-07-25
WO2011058964A1 (ja) 2011-05-19
EP2499915A1 (en) 2012-09-19
AU2010319177A1 (en) 2012-05-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102612320B (zh) 病毒灭活剂
Lee et al. Campylobacter in poultry: filling an ecological niche
Rodrigues et al. Listeria monocytogenes and Salmonella enterica Enteritidis biofilms susceptibility to different disinfectants and stress-response and virulence gene expression of surviving cells
Chen et al. Single-and mixed-species biofilm formation by Escherichia coli O157: H7 and Salmonella, and their sensitivity to levulinic acid plus sodium dodecyl sulfate
DK2586319T3 (en) COMPOSITION INCLUDING FLAVORS AND ORGANIC ACID AND USE THEREOF
BR112017013210B1 (pt) Métodos para formar ácido peroxifórmico
US20070042094A1 (en) Oxidation method and compositions therefor
Caixeta et al. Chemical sanitizers to control biofilms formed by two Pseudomonas species on stainless steel surface
CN1350437A (zh) 含有微溶性ⅱa族络合物的酸性溶液的加合物
CN103931627A (zh) 一种有机发泡剂用复合增效杀菌防腐剂
JP2006206558A (ja) 食中毒予防用抗菌性組成物
Scheinemann et al. Hygienisation and nutrient conservation of sewage sludge or cattle manure by lactic acid fermentation
Guéneau et al. Positive biofilms to guide surface microbial ecology in livestock buildings
Jiang et al. Viricidal activity of several disinfectants against African swine fever virus
JP2020527603A (ja) 細菌及び真菌に対して有効な抗菌性組成物
WO2014006097A1 (en) Biocidal compositions
Aksoy et al. Comparative evaluation of the effects of binzalkonium chloride, iodine, gluteraldehyde and hydrogen peroxide disinfectants against avian Salmonellae focusing on genotypic resistance pattern of the Salmonellae serotypes toward benzalkonium chloride
Costa et al. Antimicrobial resistance of enterococci isolated from food in South Brazil: Comparing pre-and post-RDC 20/2011
Ricke Application of molecular approaches for understanding foodborne Salmonella establishment in poultry production
JP6316810B2 (ja) カカオ(Theobromacacao)からのフェノール化合物の生成を増大させる方法
Allan et al. A rapid, high-throughput method for culturing, characterizing and biocide efficacy testing of both planktonic cells and biofilms
CN105613706A (zh) 用于生鲜肉类的防腐保鲜剂
CN113317327A (zh) 一种杀菌杀病毒酶制剂组合物及其应用
Jerônimo et al. Adhesion and biofilm formation by Staphylococcus aureus from food processing plants as affected by growth medium, surface type and incubation temperature
Elmanama et al. Bacteriological Quality of Fresh Vegetables Salad Sold in Schools Canteens and Restaurants in Gaza Strip-Palestine.

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20141008

Termination date: 20201109