JP4126068B2

JP4126068B2 - ネコカリシウイルス不活化剤、ネコカリシウイルス不活化剤の製造方法及びネコカリシウイルス不活化スプレー剤

Info

Publication number: JP4126068B2
Application number: JP2006154236A
Authority: JP
Inventors: 和之三宅
Original assignee: 株式会社ドゥリーム・ドゥ
Priority date: 2006-06-02
Filing date: 2006-06-02
Publication date: 2008-07-30
Anticipated expiration: 2026-06-02
Also published as: US20070281070A1; JP2007320924A; EP1862071A2

Description

本発明は、ネコカリシウイルスに噴霧して用いるネコカリシウイルス不活化剤に関するものである。

特許文献１は、有機酸を用いてｐＨコントロールされた水溶液中に、微粉末の銅を混合することにより、純銅イオンを含んだ有機酸の水溶液を主体とする除菌液を開示している。

特許文献２は、アルコールと保湿剤と水とを混合してなる除菌剤を開示している。

一方、グレープフルーツ種子抽出液（ｇｒａｐｅｆｒｕｉｔｓｅｅｄｅｘｔｒａｃｔ：ＧＳＥ）は、天然の食品添加物であり、１９７６年に殺菌効果が確かめられて以来、大腸菌Ｏ１５７、サルモネラ、腸炎ビブリオ、黄色ブドウ球菌など、多くのグラム陽性菌、グラム陰性菌、カビ属に対する不活化効果が明らかにされてきた。

しかしながら、ウイルスに対する効果は不明であった。
ＷＯ９８／１２９２４号公報特開２０００−３５５５０６号公報

本発明は、ＧＳＥのネコカリシウイルスに対する不活化効果を明らかにし、ネコカリシウイルスの不活化に適切なネコカリシウイルス不活化剤を提供することにある。

本発明は、ＧＳＥを水に溶かし、フィチン酸を加えた上で、醸造用アルコールを加えてなるネコカリシウイルス不活化剤であって、ネコカリシウイルスに対して不活化効果を有するものである。ＧＳＥが０．０７ないし０．０９W/W ％、フィチン酸が０．０４ないし０．０６W/W ％、醸造用アルコールが５８ないし５９．９W/W ％、残りが水である。特に、ＧＳＥが０．０８W/W ％、フィチン酸が０．０５W/W ％、醸造用アルコールが５８．８W/W ％、残りが水とすることができる。また、ペーハー（ｐＨ）が５．８ないし６．４となるように調整されることが望ましい。本発明に係るネコカリシウイルス不活化剤の製造方法は、ネコカリシウイルスに対して不活化効果を有するネコカリシウイルス不活化剤の製造方法であって、ＧＳＥを水に溶かし、フィチン酸を加えて乳化し、９５度の醸造用アルコールを加えてなる。ＧＳＥが０．０７ないし０．０９W/W ％、フィチン酸が０．０４ないし０．０６W/W ％、醸造用アルコールが５８ないし５９．９W/W ％、残りが水であるように調整する。特に、ＧＳＥが０．０８W/W ％、フィチン酸が０．０５W/W ％、醸造用アルコールが５８．８W/W ％、残りが水であるように調整することが望ましい。さらに、ペーハー（ｐＨ）が５．８ないし６．４であるように調整する。スプレーボトルに収納してネコカリシウイルス不活化スプレー剤とすることができる。

ノロウイルスが形態的特徴やゲノムの構造から近縁なウイルスであるとされるネコカリシウイルス（ＦＣＶ）について不活化効果がある。すなわち、短い時間でネコカリシウイルスをこわし、ウイルスのない状態を長く保つ抗菌効果を有する。このことにより、ノロウイルスに対する不活化効果が示唆された。

本発明の発明者が属する株式会社ドゥリーム・ドゥは、除菌剤として、「スーパードリームＦ１」という商品を開発した。以下、スーパードリームＦ１（「スーパードリームＦ１」は、株式会社ドゥリーム・ドゥの商標）を必要に応じて「ＳＤ−Ｆ１」と記載する。この「ＳＤ−Ｆ１」の大腸菌などに対する効果は当初から知られていたが、このたび、ノロウイルスに対する効果を調べるべく、大阪府立公衆衛生研究所に試験を依頼した。そして、ノロウイルスの代替ウイルスであるネコカリシウイルスに対する不活化効果の報告を得た。本発明は、その新しい知見によるものである。

まず、ＳＤ−Ｆ１であるが、ＧＳＥを水に溶かし、フィチン酸を加えた上で、醸造用アルコールを加えてなる除菌液である。ＧＳＥが０．０７ないし０．０９W/W ％、フィチン酸が０．０４ないし０．０６W/W ％、醸造用アルコールが５８ないし５９．９W/W ％、残りが水である。特に、ＧＳＥが０．０８W/W ％、フィチン酸が０．０５W/W ％、醸造用アルコールが５８．８W/W ％、残りが水とするように調整する。また、ペーハー（ｐＨ）が５．８ないし６．２となるように調整されることが望ましい。ＳＤ−Ｆ１の製造方法は、ＧＳＥを水に溶かし、フィチン酸を加えて乳化し、９５度の醸造用アルコールを加えてなる。ＧＳＥが０．０７ないし０．０９W/W ％、フィチン酸が０．０４ないし０．０６W/W ％、醸造用アルコールが５８ないし５９．９W/W ％、残りが水であるように調整する。特に、ＧＳＥが０．０８W/W ％、フィチン酸が０．０５W/W ％、醸造用アルコールが５８．８W/W ％、残りが水であるように調整することが望ましい。さらに、ペーハー（ｐＨ）が５．８ないし６．４であるように調整する。なお、本明細書において、W/W ％は、重量パーセントを意味する。

このＳＤ−Ｆ１のノロウイルスに対する不活化効果を知るために、その代替ウイルスであるネコカリシウイルス（ＦＣＶ）を用いる。ノロウイルス自体は、安定した培養がなされていないため、形態的特徴やゲノムの構造からノロウイルスの近縁であるネコカリシウイルスについて実験した。ネコカリシウイルスは、ＡＴＣＣより購入したＦＣＶ−Ｆ９株を用いた。ウイルスの増殖および感染価の測定には大日本製薬株式会社から購入したネコ腎臓(CRFK)細胞を用いた。被検材料はＳＤ−Ｆ１（0.08% GSE、58.8% 醸造用アルコール、0.05% フィチン酸）および58.8% 醸造用アルコールを用い、対照として精製水を用いた（０分のみ）。不活化実験は各試料に1/10量のＦＣＶを添加し、室温、一定時間後に採取した試料を直ちに50倍希釈した後、ウイルス感染価（TCID₅₀）をマイクロプレート法で測定した。

[結果と考察] ＳＤ−Ｆ１1は5×10⁴TCID₅₀のＦＣＶを10秒以内に完全に不活化した。ＳＤ−Ｆ１は3%グルタラール、100mg/L次亜塩素酸ナトリウムなど中度ないし高度殺菌消毒剤による効果（第26回日本環境感染学会）と同等のウイルス不活化効果を示した。また58.8%醸造用アルコールのみでは99.9%不活化するのに2分間を要した。80%消毒用アルコールでは1分であった（第26回日本環境感染学会）。ＧＳＥの抗菌作用はフラボノイド、脂肪酸によるものと考えられており、電子顕微鏡下では、ＧＳＥにより細菌の細胞壁が溶解され、15分以内に原形質が溶出することが観察されている。ＦＣＶに対する高い不活化効果が確かめられたことから、ＳＤ−Ｆ１はノロウイルスによる食中毒の防止に有用であることが示唆された。

表１は、ＳＤ−Ｆ１と58.5％醸造用アルコールのネコカリシウイルスに対する不活化効果を示すものであり、数値は、TCID₅₀の対数を取って示している。表２は、対数をとらずにTCID₅₀そのもので示してある。

表１をグラフにしたものを図１に示す。また、大阪府立公衆衛生研究所の試験成績書を図２に示す。試験の概要を示すと、次の通りである。５０μＬあたりおよそ１０⁶TCID₅₀に調整したＦＣＶ０．５mＬに被検検体４．５mＬを加え、室温にて１０秒、３０秒、１分、２分、５分、１０分ごとに０．１mＬを取り、イーグルMEM液４．９mＬで５０倍希釈し、試薬の作用を止める。これを感染価測定の原液とした。対照（０秒）として精製水を用いた。感染価の測定は、マイクロ法により行った。ＣＲＦＫ細胞を増殖させたマイクロプレートの培地（１０％ウシ胎児血清加イーグルMEM）を捨て、１０^-6まで１０倍階段希釈したウイルス反応液５０μＬずつ各希釈あてプレートの４ウェルに入れる。３７℃で１時間吸着させた後、維持培地（２％ウシ胎児血清加イーグルMEM）を加え、３７℃に静置し、５日後に細胞変性の出現を指標としてウイルス感染価を求めた。
その結果、ＳＤ−Ｆ１は、５．６×１０⁴TCID₅₀のＦＣＶを10秒間で１００パーセント不活化した。５８．５％アルコールがＦＣＶを９９．９パーセント不活化するには、２分間を必要とした。

本発明に係るネコカリシウイルス不活化剤は、例えば、１トンごとに製造できる。そして、製造直後に、使いやすい容量のスプレーボトル（液体を霧状にして噴霧する霧吹きがついたボトル）に収納してさまざまなネコカリシウイルス不活化を必要とする場面で用いることができる。

本発明のネコカリシウイルス不活化剤を使いやすい容量のスプレーボトルに収納して、さまざまな場面で用いることができる。たとえば、製造ライン全般、フードプロセッサー等の機械器具、包丁・まな板等の調理器具、洗浄後の手や指、生ゴミの消臭に用いることが可能である。

ネコカリシウイルスに対する不活化試験結果のグラフである。大阪府立公衆衛生研究所の試験成績書である。

符号の説明

ＳＤ−Ｆ１株式会社ドゥリーム・ドゥの開発した除菌液
TCID₅₀ 感染価を示す単位

Claims

スプレーボトルに収納して、食品の製造ライン全般、調理器具、洗浄後の手や指、生ゴミに噴霧して用いるネコカリシウイルス不活化剤であって、
グレープフルーツ種子抽出液（以下、ＧＳＥと略す。）を水に溶かし、フィチン酸を加えた上で、醸造用アルコールを加えて、ＧＳＥが０．０７ないし０．０９W/W ％、フィチン酸が０．０４ないし０．０６W/W ％、醸造用アルコールが５８ないし５９．９W/W ％、残りが水となるように調整され、ネコカリシウイルスを噴霧後１０秒以内に不活化するネコカリシウイルス不活化剤。
請求項１に記載のネコカリシウイルス不活化剤であって、ＧＳＥが０．０８W/W ％、フィチン酸が０．０５W/W ％、醸造用アルコールが５８．８W/W ％、残りが水となるように調整されたネコカリシウイルス不活化剤。
請求項１又は２のいずれか一に記載のネコカリシウイルス不活化剤であって、ペーハー（ｐＨ）が５．８ないし６．４であるネコカリシウイルス不活化剤。
ネコカリシウイルスを噴霧後１０秒以内に不活化するネコカリシウイルス不活化剤の製造方法であって、
ＧＳＥを水に溶かし、フィチン酸を加えて乳化し、９５度の醸造用アルコールを加えて、ＧＳＥが０．０７ないし０．０９W/W ％、フィチン酸が０．０４ないし０．０６W/W ％、醸造用アルコールが５８ないし５９．９W/W ％、残りが水となるように調整することを特徴とするネコカリシウイルス不活化剤の製造方法。
請求項４に記載のネコカリシウイルス不活化剤の製造方法であって、ＧＳＥが０．０８W/W ％、フィチン酸が０．０５W/W ％、醸造用アルコールが５８．８W/W ％、残りが水となるように調整することを特徴とするネコカリシウイルス不活化剤の製造方法。
請求項４又は５のいずれか一に記載のネコカリシウイルス不活化剤の製造方法であって、
ペーハー（ｐＨ）が５．８ないし６．４であるように調整することを特徴とするネコカリシウイルス不活化剤の製造方法。
ＧＳＥを水に溶かし、フィチン酸を加えた上で、醸造用アルコールを加えて、ＧＳＥが０．０７ないし０．０９W/W ％、フィチン酸が０．０４ないし０．０６W/W ％、醸造用アルコールが５８ないし５９．９W/W ％、残りが水として調整され、ネコカリシウイルスを噴霧後１０秒以内に不活化するネコカリシウイルス不活化剤をスプレーボトルに収納してなるネコカリシウイルス不活化スプレー剤。
ＧＳＥを水に溶かし、フィチン酸を加えた上で、醸造用アルコールを加えて、ＧＳＥが０．０８W/W ％、フィチン酸が０．０５W/W ％、醸造用アルコールが５８．８W/W ％、残りが水として調整され、ネコカリシウイルスを噴霧後１０秒以内に不活化するネコカリシウイルス不活化剤をスプレーボトルに収納してなるネコカリシウイルス不活化スプレー剤。