CN102600494B - 一种多糖组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种多糖组合物，由0.01%～10%壳聚糖、0.01%～20%燕麦β-葡聚糖、70%～99.98%水配制而成；本发明所述的多糖组合物由以下方法制备而成：将燕麦β-葡聚糖溶解在水中，配制得到燕麦β-葡聚糖溶解水溶液；将壳聚糖加水溶胀，过夜消泡，配制得壳聚糖凝胶，将上述两种溶液混合，搅匀，最后得到0.01%～10%壳聚糖、0.01%～20%燕麦β-葡聚糖、70%～99.98%水的多糖组合物；所述的多糖组合物在制备医用敷料、创口护理剂、预防及治疗放射性皮炎的药物、治疗褥疮、糖尿病足引起的溃疡及口腔溃疡的药物、促进创面愈合、减少疤痕产生的药物中的应用。

Description

一种多糖组合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及一种多糖组合物及其制备方法和用途，具体来说涉及壳聚糖与燕麦β-葡聚糖组合物及其制备方法和用途，旨在通过组合，协同提高两种多糖抗放射性皮炎、促进创口愈合等的能力，属于医学材料领域。 

背景技术

甲壳素是从虾、蟹等甲壳类动物的甲壳以及真菌的细胞壁中提取出来的一种天然多糖，也是自然界仅次于纤维素的第二大生物资源。壳聚糖是甲壳素的脱乙酰化衍生物，具有良好的生物相容性、生物可降解性、天然无毒性和多种生物活性。近年来，壳聚糖作为一种天然医用生物敷料，因其抗菌性和抗炎作用，在创口护理方面应用受到人们的广泛关注。但壳聚糖由于分子量较大，难以透皮吸收，在促进创伤愈合及收敛作用方面不显著，造成壳聚糖在实际应用中受到限制。

燕麦β-葡聚糖具有良好的透皮吸收性，很好的弥补了壳聚糖的不足。Wood等人用专一性酶水解表明：在燕麦β-葡聚糖中β- (1-4)和β- (1-3)糖苷键在空间上呈链式单螺旋结构，透皮吸收性能良好，可作为活性成分的释放载体。其中，85％以上燕麦β-葡聚糖分子存在着每隔2～3个β- (1-4)糖苷键有一个β- (1-3)糖苷键，大量亲水基团均匀分布在葡聚糖主链上，具有长期高效保湿性能，能赋予皮肤如丝绸般滋润光滑的触感；燕麦β-葡聚糖具有非常出色的延缓衰老特性，能够即时的收紧及软化细小皱纹，改善皮肤纹理度；燕麦β-葡聚糖还能够显著提高皮肤的免疫功能，提高皮肤抵抗外界刺激的能力，促进伤口愈合，淡化疤痕颜色。

目前，市场上尚没疗预防及治疗放射性皮炎、创口护理、创口愈合及淡化疤痕的标准药物，常用的放射性药物比亚芬及创口护理药物云南白药等都存在治疗效率较低，不能很好缓解病情的现状。

发明内容  

本发明的目的针对现有技术的不足，提供了一种多糖组合物及其制备方法和用途，能够解决现有的壳聚糖物透皮吸收性、燕麦β-葡聚糖无杀菌性的问题，采用该方法制备的组合物，具备了比各自多糖单独使用更好的抗放射性皮炎及促创口愈合的作用，且对人体安全、无毒、无刺激。

本发明提供的技术方案之一为一种多糖组合物：由0.01%~10%壳聚糖、0.01%~20%燕麦β-葡聚糖、70%~99.98%水配制而成，以上百分比为重量百分比。

本发明提供的技术方案之二为多糖组合物的制备方法：

将燕麦β-葡聚糖溶解在水中，配制得到燕麦β-葡聚糖溶解水溶液；将壳聚糖加水溶胀，过夜消泡，配制得壳聚糖凝胶，将上述两种溶液等量混合，搅匀，最后得到0.01%~10%壳聚糖、0.01%~20%燕麦β-葡聚糖、70%~99.98%水的多糖组合物。

而且，上述的壳聚糖为羧甲基壳聚糖。

而且，上述的燕麦β-葡聚糖纯度可以为30%~100%。

上述的多糖组合物在制备医用敷料，创口护理剂，预防及治疗放射性皮炎的药物，治疗褥疮、糖尿病足引起的溃疡及口腔溃疡的药物，促进创面愈合、减少疤痕产生的药物中的用途。

本发明以6Mev电子线，吸收剂量为60Gy，剂量率为600cGy/分，一次照射对大鼠裸露的右后大腿，产生10%II度放射性皮炎，将大鼠分为模型组；模型+壳聚糖凝胶治疗组；模型组+燕麦β-葡聚糖组；模型+壳聚糖+燕麦β-葡聚糖组合物组；于出现急性放射性皮炎后，模型组每天于照射部位喷涂生理盐水，一天二次；给药物喷涂相应药物，于照射部位，一天二次；每次给药均为0.2ml/只，于给药后4周结束实验，照像并用图像软件计算皮炎面积，结果可见，壳聚糖凝胶、燕麦β-葡聚糖水溶液、壳聚糖与燕麦β-葡聚糖组合物对放射性皮炎均有显著的治疗作用，且治疗作用以壳聚糖与燕麦β-葡聚糖组合物效果最好。

本发明以家兔，去毛，在脊柱两侧分别切除2个1×2cm皮肤，用湿纱布浸润伤口1h后，给予相应护理品，连续给药7天后观察家兔伤口愈合率，结果可见，家兔大伤口7天自然愈合率为50%；壳聚糖凝胶组7天愈合率为70%；燕麦β-葡聚糖组7天愈合率为60%，壳聚糖+燕麦β-葡聚糖组合物组7天愈合率为90%。

本发明以昆明种小鼠40只，随机分为：纯壳聚糖膜组；壳聚糖生物胶组；生理盐水组；生理盐水组。各组小鼠沿脊柱两侧脱毛，划#字口，金黄色葡萄球菌菌液涂抹伤口，于接菌后30min给予相应药物，每天重复一次，连续7d。分别记录各组死亡率,结果可见，金黄色葡萄球菌可引起小鼠死亡，7天内的死亡率为50%，壳聚糖凝胶和壳聚糖+燕麦β-葡聚糖组合物组可明显保护伤口感染，7天内感染死亡率为20%；燕麦β-葡聚糖无抗感染作用，7天内感染死亡率为50%。

    实验表明，本发明的药物组合物可预防和治疗放射性皮炎，促进伤口愈合和治疗创口感染，并且也可用于制备医用敷料，创口护理剂，治疗褥疮、糖尿病足引起的溃疡及口腔溃疡的药物，促进创面愈合、减少疤痕产生的药物中的用途。

本发明采用上述的技术方案，其优点在于：利用壳聚糖的杀菌性、抗炎性及可以成膜后的阻菌性，在皮损部位和创口表面形成护理膜，利用燕麦β-葡聚糖的透皮吸收性，渗入组织内，促进细胞增殖、加速创口愈合。由于壳聚糖成膜后，可形成局部半封闭环境，并增强皮肤的水合作用，可提高燕麦β-葡聚糖的透皮吸收性。因此本发明的创新在于，提供了一种可弥补两种多糖彼此缺陷，并可协同发挥作用的组合，保留壳聚糖对皮损的抗菌、抗炎作用，同时复配燕麦β-葡聚糖的促细胞增殖作用，增强促伤口愈合的效果，该组合是一种安全、高效的创口护理产品。

壳聚糖与燕麦β-葡聚糖组合物具备抗感染作用，作用优于单纯使用燕麦β-葡聚糖的作用；具有促伤口愈合作用，其作用优于单纯使用壳聚糖类药物、单纯使用燕麦β-葡聚糖类药物的作用。

而且，目前市场上尚没疗预防及治疗放射性皮炎、创口护理、创口愈合及淡化疤痕的标准药物，常用的放射性药物比亚芬及创口护理药物云南白药等都存在治疗效率较低，不能很好缓解病情的现状。本发明保留壳聚糖对皮损的保湿和促进愈合的作用，同时复配β-葡聚糖，保持杀菌性、抗炎性及可以成膜后的阻菌性的同时，利用燕麦β-葡聚糖的透皮吸收性，渗入组织内，促进细胞增殖，具有更加明显的抗放射性皮炎及促创口愈合的作用，且对人体安全、无毒、无刺激。

附图说明

图1羧甲基壳聚糖与燕麦β-葡聚糖组合物、羧甲基壳聚糖凝胶、燕麦β-葡聚糖、生理盐水治疗放射性皮炎的作用比较。经6Mev电子线，吸收剂量为60Gy的照射，14天后（产生放射性皮炎的时间），采用相应药物进行治疗4周，结果可见，生理盐水组的平均红肿面积为：0.94cm²、单独羧甲基壳聚糖凝胶组的平均红肿面积为：0.49cm²、单独燕麦β-葡聚糖水溶液的平均红肿面积为：0.45cm²、羧甲基壳聚糖与燕麦β-葡聚糖组合物的平均红肿面积为：0.08cm²。表明组合物具备抗放射性皮炎作用，其作用优于单纯使用羧甲基壳聚糖、单纯使用燕麦β-葡聚糖的作用。

具体实施方式

本发明通过以下实施例作进一步说明。 

实施例1：

将20g纯度为100%燕麦β-葡聚糖溶解在50mL水溶液中，配制得40%燕麦β-葡聚糖水溶液。将0.1g羧甲基壳聚糖加50ml水溶胀，过夜消泡，配制得0.2%羧甲基壳聚糖凝胶。将上述两种溶液等量混合，搅匀，制备得0.1%羧甲基壳聚糖+20%燕麦β-葡聚糖组合物。

实施例2:

将0.01g纯度为100%燕麦β-葡聚糖溶解在50mL水溶液中，配制得0.02%燕麦β-葡聚糖水溶液。将10g羧甲基壳聚糖加50ml水溶胀，过夜消泡，配制得20%羧甲基壳聚糖凝胶。将上述两种溶液等量混合，搅匀，制备得10%羧甲基壳聚糖+0.01%燕麦β-葡聚糖组合物。

实施例3：

将5g纯度为100%燕麦β-葡聚糖溶解在50mL水溶液中，配制得10%燕麦β-葡聚糖水溶液。1g羧甲基壳聚糖加50ml水溶胀，过夜消泡，配制得2%羧甲基壳聚糖凝胶。将上述两种溶液等量混合，搅匀，制备得1%羧甲基壳聚糖+5%燕麦β-葡聚糖组合物。

实施例4：

将2g纯度为100%燕麦β-葡聚糖溶解在50mL水溶液中，配制得4%燕麦β-葡聚糖水溶液。将2g羧甲基壳聚糖加50ml水溶胀，过夜消泡，配制得4%羧甲基壳聚糖凝胶。将上述两种溶液等量混合，搅匀，制备得2%羧甲基壳聚糖+2%燕麦β-葡聚糖组合物。

实施例5:

采用实施例3所述方法配制1%羧甲基壳聚糖+5%燕麦β-葡聚糖组合物，建立大鼠放射性皮炎模型，探讨组合物抗放射性皮炎的作用。

材料方法

（一）试验动物

SD鼠，雌雄兼用，由武汉大学动物试验中心提供。180-250g，常规饲料，许可证号：SCXK(鄂)2008-0004；

（二）试验材料

试剂：羧甲基壳聚糖(药用级，浙江金壳生物化学有限公司)，批号：D061226300；燕麦β-葡聚糖（食品级，广州久恒贸易有限公司），批号：20110302

（三）试验仪器

加速器CL21800（美国VARIAN制造）。

（四）试验方法

造模方法：采用6Mev电子线，吸收剂量为60Gy，剂量率为600cGy/分，一次照射对大鼠裸露的右后大腿，产生10%II度放射性皮炎。

分组及给药：动物24只，随机分为4组，每组6只。模型组；模型+羧甲基壳聚糖凝胶治疗组；模型+燕麦β-葡聚糖组；模型+羧甲基壳聚糖+燕麦β-葡聚糖组合物组；于出现急性放射性皮炎后，模型组每天于照射部位喷涂生理盐水，一天二次；给药组喷涂相应药物，于照射部位，一天二次，每次给药均为0.2ml/只，于给药后4周结束实验，照像并用图像软件计算皮炎面积。

统计学处理：采用SPSS10.0如见进行统计分析。计量资料以（χ±S）表示，结果进行t检验；计数资料采用卡方检验。P<0.05为差异显著。

实验结果

治疗放射性皮炎的作用研究

结果可见，羧甲基壳聚糖凝胶、燕麦β-葡聚糖水溶液、羧甲基壳聚糖与燕麦β-葡聚糖组合物对放射性皮炎均有显著的治疗作用，且治疗作用以羧甲基壳聚糖与燕麦β-葡聚糖组合物效果最好，结果见表1、图1。

表1. 羧甲基壳聚糖凝胶、燕麦β-葡聚糖水溶液、羧甲基壳聚糖与燕麦β-葡聚糖组合物治疗放射性皮炎的作用（χ±S）

组别	n	皮炎面积cm2
			生理盐水组	6	0.94±0.81
羧甲基壳聚糖凝胶组	6	0.48±0.80
			燕麦β-葡聚糖水溶液组	6	0.4±0.21
羧甲基壳聚糖与燕麦β-葡聚糖组合物组	6	0.08±0.15

实施例6:

采用实施例4所述的方法制备2%羧甲基壳聚糖+2%燕麦β-葡聚糖组合物，建立家兔创伤模型、小鼠感染模型，探讨组合物对伤口的保护作用。

材料方法

（一）试验动物

日本大耳白兔，雌雄兼用，由武汉大学动物试验中心提供；昆明小鼠，雌雄兼用，由武汉大学动物试验中心提供，常规饲料。许可证号：SCXK(鄂)2008-0004；

（二）试验材料

试剂：羧甲基壳聚糖(药用级，浙江金壳生物化学有限公司)，批号：D061226300；燕麦β-葡聚糖（食品级，广州久恒贸易有限公司），批号：20110302。

金黄色葡萄球菌：武汉大学药学院提供

（三）试验方法

1．家兔皮肤大创口愈合试验：

家兔1只，去毛，在脊柱两侧分别切除2个1×2cm皮肤，用湿纱布浸润伤口1h后，给予相应护理品：生理盐水、羧甲基壳聚糖凝胶、燕麦β-葡聚糖、羧甲基壳聚糖+燕麦β-葡聚糖组合物，每日一次，每次给药0.2ml；给药7天后观察家兔伤口愈合率。

2．小鼠创口感染试验：

昆明种小鼠40只，随机分为四组：羧甲基壳聚糖膜组；羧甲基壳聚糖+燕麦β-葡聚糖组合物组；燕麦β-葡聚糖组；生理盐水组。各组小鼠沿脊柱两侧脱毛，每只小鼠划一个#字口，金黄色葡萄球菌菌液涂抹伤口，于接菌后30min给予相应药物，每天重复给药一次，每次给药均为0.2ml/只，连续7天，分别记录各组死亡率。

实验结果

家兔皮肤大创口愈合试实验

结果可见，家兔大伤口7天自然愈合率为50%；羧甲基壳聚糖凝胶7天愈合率为70%；燕麦β-葡聚糖7天愈合率为60%，羧甲基壳聚糖+燕麦β-葡聚糖组合物7天愈合率为90%，结果见下表2。

表2. 羧甲基壳聚糖凝胶、燕麦β-葡聚糖水溶液、羧甲基壳聚糖与燕麦β-葡聚糖组合物对家兔大伤口7天愈合作用观察

组别	7天愈合率（%）
		羧甲基壳聚糖凝胶组	70
燕麦β-葡聚糖组	60
		羧甲基壳聚糖+燕麦β-葡聚糖组合物组	90
生理盐水组	50

小鼠创口感染试验

结果可见，金黄色葡萄球菌可引起小鼠死亡，7天内的死亡率为50%，羧甲基壳聚糖凝胶和羧甲基壳聚糖+燕麦β-葡聚糖组合物组可明显保护伤口感染，7天内感染死亡率为20%；燕麦β-葡聚糖无抗感染作用，7天内感染死亡率为50%。结果见下表3。

表3. 羧甲基壳聚糖凝胶、燕麦β-葡聚糖水溶液、羧甲基壳聚糖与燕麦β-葡聚糖组合物对小鼠金黄色葡萄球菌伤口感染死亡率的保护作用

Claims (7)

1.一种多糖组合物，其特征在于，由0.01%~10%壳聚糖、0.01%~20%燕麦β-葡聚糖、70%~99.98%水配制而成，以上百分比为重量百分比。

2.根据权利要求1所述的多糖组合物，其特征在于，所述的壳聚糖为羧甲基壳聚糖。

3.根据权利要求1所述的多糖组合物，其特征在于，所述的燕麦β-葡聚糖纯度为30%~100%。

4.一种权利要求1所述的多糖组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

将燕麦β-葡聚糖溶解在水中，配制得到燕麦β-葡聚糖溶解水溶液；将壳聚糖加水溶胀，过夜消泡，配制得壳聚糖凝胶，将上述两种溶液混合，搅匀，最后得到0.01%~10%壳聚糖、0.01%~20%燕麦β-葡聚糖、70%~99.98%水的多糖组合物。

5.根据权利要求4所述的多糖组合物的制备方法，其特征在于，所述的壳聚糖为羧甲基壳聚糖。

6.根据权利要求4所述的多糖组合物的制备方法，其特征在于，所述的燕麦β-葡聚糖纯度为30%~100%。

7.一种权利要求1所述的多糖组合物在制备预防及治疗放射性皮炎的药物中的应用。

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