CN102574026A - 分离系统和方法 - Google Patents
分离系统和方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102574026A CN102574026A CN2010800431939A CN201080043193A CN102574026A CN 102574026 A CN102574026 A CN 102574026A CN 2010800431939 A CN2010800431939 A CN 2010800431939A CN 201080043193 A CN201080043193 A CN 201080043193A CN 102574026 A CN102574026 A CN 102574026A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- piece
- rate system
- separative element
- pump
- post
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/10—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features
- B01D15/18—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to flow patterns
- B01D15/1864—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to flow patterns using two or more columns
- B01D15/1871—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to flow patterns using two or more columns placed in series
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/38—Flow patterns
- G01N30/46—Flow patterns using more than one column
- G01N30/461—Flow patterns using more than one column with serial coupling of separation columns
- G01N30/465—Flow patterns using more than one column with serial coupling of separation columns with specially adapted interfaces between the columns
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/10—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features
- B01D15/18—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to flow patterns
- B01D15/1864—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to flow patterns using two or more columns
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
- B01D15/36—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving ionic interaction
- B01D15/361—Ion-exchange
- B01D15/362—Cation-exchange
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N30/24—Automatic injection systems
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
- Separation Using Semi-Permeable Membranes (AREA)
Abstract
一种分离系统包括:(i)至少两个分离单元,各个分离单元包括流体入口和流体出口,其中,分离单元以出口对入口的方式串联连接,以形成分离单元排;以及(ii)感测和调节器件,其顺列地设置在各个分离单元之间,以持续地监测和调节从分离单元排中的一个分离单元流到后面的分离单元的流体的至少一个环境属性参数。还公开了分离系统的使用和用于使用分离单元和对流体流或多个流体流的顺列调节来纯化包含期望的物质的液体的方法。
Description
发明领域
本发明涉及分离和纯化化合物,尤其是生物分子,并且更具体而言,涉及执行多个分离步骤的分离系统。
发明背景
在过去的十年里,对于药物研制和治疗应用,在蛋白质(例如单克隆抗体)的使用方面已经有了巨大的发展。但是,大规模生产药用级单克隆抗体是复杂的工艺,其需要多个色谱步骤和过滤步骤来满足严格的规章要求。
制造生物分子始于在生物衍生系统中合成期望的生物材料。典型地通过特殊地设计和定制而成的一系列物理分离技术来完成期望的材料的制备。
例如,单克隆抗体的制造工艺典型地包括在重组哺乳动物细胞培养中的表达。在进行离心分离之后,使培养产物经历下游纯化(DSP),下游纯化大体包括“捕捉”阶段、“中间纯化”阶段和“精制(polishing)”阶段。捕捉阶段通常以蛋白质A亲合色谱法为基础。然后典型地使用阳离子交换和阴离子交换色谱步骤来对得到的产物进行进一步的纯化和精制,以移除降解产物和杂质。最后,通过所包括的过滤步骤来移除病毒物质。
但是,蛋白质A亲合色谱法会有若干缺点,包括蛋白质A泄漏,并且因此开发出了简化的纯化工艺,其中,阳离子交换捕捉阶段代替蛋白质A亲合色谱法。然后阳离子捕捉步骤移除与工艺有关的污染物,达到单个精制步骤就足以清洁残余物的低水平。因而单克隆抗体的这种下游纯化工艺包括阳离子交换色谱步骤、阴离子交换色谱步骤和病毒移除过滤步骤。
通过使用在不同的色谱步骤和过滤步骤之间的滞留槽,用批量工艺来执行迄今使用的下游纯化工艺。各个工艺步骤使用某个pH值和导电率的缓冲剂或多个缓冲剂以及工艺后清洁和存储液体。在各个步骤之前,常常必须调节产物流的诸如pH值和蛋白质浓度的状况,然后将这些调节步骤作为单独的中间批量操作来执行。
在现有技术中已经提出了至少在某种程度上允许对洗脱液进行自动的和在线的调节的分离系统和工艺。
US 2009-0149638公开了用于大规模地进行下游蛋白质纯化且允许自动化的系统和工艺,这些工艺能够高产量且持续地运行。在这些工艺中,一个色谱步骤接着另一个,没有中间超滤/渗滤步骤,来自一个槽的洗脱液通过中间滞留槽传递到另一个槽,洗脱液可呈酸性或碱性。
US 2009-0126466公开了一种多维高性能液体色谱法(HPLC),其中,用第一流动相在第一pH值处执行第一色谱分离,并且使从中收集到的馏分或多个馏分经历用第二流动相在第二个不同的pH值处进行的第二色谱分离。在使馏分或多个馏分经历第二色谱分离模式之前,可使从第一分离中收集到的馏分或多个馏分可选地在线浓缩或稀释。
本发明的目标在于提供一种改进的自动化分离系统,它能够进一步减小研制时间、处理时间和货物成本,并且不需要中间滞留槽。
发明概述
根据本发明,以上和其它目标与优点通过这样的分离或纯化系统来实现:该系统包括串联连接而形成单个运行单元的若干分离单元,以及其中,在各个分离单元之间顺列(in-line)提供用于测量和调节分离单元之间的流体流的被测参数的器件,优选闭环器件。这种系统将缩短运行时间,并且消除例如单克隆抗体制造所需的中间滞留与中间测试要求。
但是,以上有创造性的概念不局限于下游纯化(DSP)或呈色谱柱或过滤器的形式的分离单元和蛋白质(例如抗体)的纯化。相反,本发明大体能够应用于在化学或生物化学物质的生产的下游与上游的化学或生物化学物质的任何分离或纯化。
因此,在一方面,本发明提供了一种如权利要求1中所限定的分离系统。
此分离系统包括多个分离单元,各个分离单元包括流体入口和流体出口。分离单元以出口对入口的方式串联连接,以形成分离单元排。在各个分离单元之间,顺列地提供感测和调节器件,以监测和调节从分离单元排中的一个分离单元流到后面的分离单元的流体的至少一个环境属性参数。
要宽泛地理解如本文所用的用语“分离单元”,而且它包括例如色谱装置(包括柱和隔膜)、过滤器、离心机、两相分离装置等。
而且,要宽泛地理解如本文所用且涉及在系统中流动的流体的用语“环境属性参数”,而且它包括例如流体的物理参数(例如导电率、压力、粘度、温度、折射率、浊度、流率)和化学参数,例如物质(例如产物、盐)的pH值、浓度、总的有机碳(TOC)。
分离系统优选包括用于分离系统的运行的计算机化的控制和数据分析系统。
在另一方面,本发明包括一种如权利要求14中所限定的纯化方法。
这个用于纯化包含至少一种期望的物质的液体方法包括以下步骤:(i)使液体流到第一分离单元,以从中获得包含期望的物质的纯化流体流出物;(ii)在线监测流体流出物的至少一个环境属性参数且将其调节成期望值;(iii)将流出物引导到第二分离单元,以从中获得包含期望的物质的纯化流体流出物;以及(iv)回收包含期望的物质的纯化流出物。
在一个优选实施例中,该方法包括使来自第二分离单元的流出物经历至少一个额外的分离单元,其中,监测通往各个额外的分离单元的流体入口流的至少一个环境属性参数,并且将其调节成期望值。
优选地,通过计算机化的控制和数据分析系统来控制方法步骤。
在另外的另一方面,如权利要求16中所限定,本发明包括使用根据首先提到的方面的分离系统来研究生物分子。
在又一方面,如权利要求17中所限定,本发明包括使用根据首先提到的方面的分离系统来发展分离方法。
在从属权利要求中阐述了本发明的上述方面的其它优选实施例。
参照以下描述和附图,将获得对本发明的更完整的理解,以及本发明的另外的特征与优点。
附图简述
图1是根据本发明的、具有三个分离单元的基本分离系统构造的概略图。
图2是根据本发明的一个实施例的色谱系统构造的图示。
图3是用于测试图2的色谱系统的特征的色谱系统测试平台构造的图示。
图4是用于测试图2的色谱系统的特征的另一个色谱系统测试平台构造的图示。
发明详述
如上面提到的那样,本发明大体涉及分离或纯化系统,其中多个分离单元串联连接,以形成单个运行单元,而且该分离或纯化系统包括在各个分离单元之间的顺列感测和调节器件。在下文中,关于呈用于抗体(尤其是单克隆抗体)的下游纯化系统的形式的本发明的非限制性实施例,将仅以实例的方式来更加详细地描述本发明。
可称为直通处理(STP)系统的分离系统在单个连续的工艺中结合了多个色谱步骤和病毒过滤步骤。STP系统的基本特征在于其设计成优选以闭环的方式执行对工艺参数的控制,包括(但不限于)产物流的pH值、导电率和UV吸收率。
图1概略性地显示了根据本发明的STP系统的基本构造,在这里为了说明且无限制,该系统具有三个分离单元。
在图1中,第一分离单元1(这里称为DSP1)通过其出口被直接管道或管2连接到第二分离单元3(这里称为DSP2)的入口。然后第二分离单元3的出口通过直接管道4而连接到第三分离单元5(这里称为VF)的输入上,使得三个分离单元形成连续的分离单元排。
在各个分离单元1、3和5之间,提供了用于进行顺列调节(ILA)的器件,以进行监测和控制(向上或向下,即提高或降低)。第一顺列调节器件6联接到第一分离单元1的入口管道7上,第二顺列调节器件8联接到第一分离单元1和第二分离单元3之间的管道2上,而第三顺列调节器件9联接到第二分离单元3和第三分离单元5之间的管道4上。要理解,这些顺列调节器件代替用于传统的基于批量的处理装备中的过程中的采样和工艺参数测试。经由闭环(反馈环),使用传感器来进行顺列调节,从而产生在异常发生时立刻对异常进行响应的能力,如下面更加详细地描述的那样。
通过出口管道10从病毒移除过滤器5中回收包含流体流的纯化产物。
典型地将不同的系统单元安装在平台或滑道上。另外,典型地通过计算机化的控制和数据分析系统来操作STP系统。
在示出的分离系统例如将打算对蛋白质(例如单克隆抗体)进行下游纯化(DSP)的情况下,三个分离单元例如将包括串联的两个色谱柱和病毒移除过滤器,在图1中分别标为DSP1、DSP2和VF。然后第一柱DSP1可为阳离子交换色谱(CIEX)柱,第二柱DSP2可为阴离子交换色谱(AIEX)柱,而病毒移除过滤器VF可为例如隔膜过滤器。备选地,可使用三个不同的色谱柱。
在这种情况下,顺列环境调节例如可包括对进入第一柱(DSP1)的产物流进行离子强度(导电率)调节。在第一柱(DSP1)和第二柱(DSP2)之间,顺列调节可包括pH值和/或导电率的改变。在第二柱(DSP2)和病毒过滤器(VF)之间,顺列调节可包括稀释(产物的浓度),以及可选地还可包括pH值。可在具有预先制备的溶液的槽中提供所使用的缓冲剂和其它液体,或者可使用例如与本申请相伴提交的共同未决的“Method and system for preparation of liquid mixtures(用于制备液体混合物的方法和系统)”中描述的类型的顺列制备(顺列稀释)系统来实时地制备缓冲剂和其它液体。
与单克隆抗体的传统的基于批量的下游纯化相比,本发明的自动化的直通方法提供这样的流线工艺流程:它具有较迅速的批量周转时间,改进制造设施利用和产量,消除在各步骤之间的容器和那些容器的附加物,并且降低处理成本。它还通过基于传感器的顺列调节来提供较稳定可靠的工艺。
本发明的分离系统将具有广泛的应用。因而,除了直接产物纯化之外,与现有的劳力密集型系统相比,其它应用将得到非常大的促进。这样的应用包括例如对生物分子的研究和分离方法的开发。其它应用包括对例如介质和/或装置寿命的按比例缩放研究、清洁率研究、清洁研究,在此仅列举几项。
分离系统将容许获得高的精确性以及高重复性。
要理解,分离系统不仅将提供对分离环境的控制,而且还影响被分离的分子的环境。例如,使用低pH值可使病毒失去活性,可使pH值、离子强度和蛋白质浓度达到这样的水平:在该水平处,期望的产物稳定,蛋白酶无活性和/或不可形成有害聚集物。
如上面提到的那样,通过闭环(反馈环),使用传感器来进行顺列调节。设计简单的闭环控制系统包括联接成闭环的工艺和控制器。工艺受其输入信号(控制信号)的影响。测量信号(即工艺输出信号)提供关于待被控制的工艺的信息。控制器具有两个输入信号,即测量信号和指示测量信号的期望值的设定点。这两个信号之间的差异启动将导致工艺的实际响应接近期望的响应的动作。这又向零驱动差异信号。较复杂的控制系统具有多个测量信号和多个控制信号。闭环控制系统是众所周知的,并且不需要在本文中对其进行详细描述。
常用的闭环控制器是PID(比例积分微分)控制器。PID控制器计算三个单独的参数,即比例值、积分值和微分值。比例值确定对当前误差的反应,积分值基于最近的误差的总和确定反应,而微分值则基于误差变化的速率确定反应。使用这三个动作的加权总和来调节控制值的一部分。
在上面略述的顺列调节器件中,以闭环的方式将顺列感测装置或传感器(检测器)联接到控制器和液体输送装置(典型地是泵或用于进行流体输送的其它原动力)上,使得在感测到的系统参数值和设定点之间的差异控制泵的促动。
基本上,可使用可检测系统流体和流的具体参数以及输出可测量的(模拟的或数字的)信号的任何传感器,例如基于光谱度量(例如近IR、UV)或离子量度(导电率、pH值)的传感器。
顺列调节器件典型地由计算机化的控制器操作,计算机化的控制器可为单独的形式,或者与用来操作STP系统的计算机化的控制和数据分析系统相同。关于上面提到的蛋白质纯化的情况,例如,顺列调节将对pH值、导电率和UV执行闭环控制,同时这些参数在工艺进料流中发生阶梯式、陡坡式和浅坡式的改变。
图2显示了根据本发明而针对蛋白质(特别是单克隆抗体)的下游纯化所设计的色谱系统的一个实施例的构造。
色谱系统包括串联连接的三个分离单元,即阳离子交换柱21、阴离子交换柱22和病毒移除过滤器23。具体而言,柱21通过管道24而联接到柱22上,而柱22则通过管道25经由阀、减压(pressure break)槽26和泵27而联接到病毒移除过滤器23上。
色谱柱21的入口通过管道28经由阀和气泡收集器30连接到第一色谱泵29上,并且通过管道31连接到第二色谱泵33上,管道31在T形接头32处连接到管道28上。第一泵29具有(这里)带有四个入口阀35的入口管路34,入口阀35中的一个用作取样阀。同样,第二泵33具有(这里)带有四个入口和取样阀37的入口管路36。
闭环控制回路(PID)控制色谱泵29和33的运行,并且包括用于感测入口管道28的导电率且连接到控制器39上的顺列导电率传感器38,控制器39又连接到泵29和33上。控制器39还以闭环的方式连接顺列流量传感器40,顺列流量传感器40联接到连接色谱柱21和22的管道24上。
色谱泵29和33对应于传统上在色谱法中使用的梯度泵,而上面描述的闭环控制回路则对应于在梯度系统上提供的标准的导电率反馈调节逻辑。
示出的色谱系统包括四个顺列调节组件。
第一顺列调节组件用于调节来自色谱柱21的流出物的导电率,并且包括缓冲泵41,缓冲泵41经由管道42在下游混合器44附近的T形接头43处连接到管道24上。提供PID闭环控制回路来控制泵41的运行,该PID闭环控制回路包括在管道24的下游联接到混合器44上的顺列导电率传感器45。导电率传感器45连接到控制器46上,控制器46又连接到泵41上。PID环从传感器45中读取导电率,并且调节泵41,以达到和保持期望的设定点。
第二顺列调节组件调节来自色谱柱21的流出物的pH值,并且包括经由管道48在下游混合器50附近的T形接头49处连接到管道24上的缓冲泵47。提供PID闭环控制回路来控制泵47的运行,该PID闭环控制回路包括在混合器50的下游联接到管道24上的顺列pH值传感器51。pH值传感器51连接到控制器52上,控制器52又连接到泵47上。PID环从传感器51中读取pH值,并且调节泵47,以达到和保持期望的设定点。
第三顺列调节组件调节来自管道25中的第二色谱柱22的流出物的UV吸收率(产物浓度),并且包括经由管道54在下游混合器56附近的T形接头55处连接到管道25上的缓冲泵53。PID闭环控制回路控制泵53的运行,该PID闭环控制回路包括在混合器56的下游联接到管道25上的顺列UV传感器57。UV传感器57连接到控制器58上,控制器58又连接到泵53上。PID环从传感器57中读取UV吸收率,并且调节泵53,以达到和保持期望的设定点。
提供第四顺列调节组件来对减压槽26的下游的管道25中的产物流的UV吸收率(产物浓度)进行最终调节。这个顺列调节组件包括稀释缓冲泵27和控制泵27的运行的PID闭环控制回路,PID闭环控制回路包括在泵27和病毒移除过滤器23之间联接到管道25上的顺列UV传感器59,以及控制器60。PID环从传感器59中读取UV吸收率,并且调节泵27,以达到和保持期望的设定点,期望的设定点经选择成对应于在过滤之前进行的仅避免过滤器堵塞所必要的程度的稀释。
在加载在第一柱上的期间对产物流的导电率和/或pH值的顺列调节可由色谱泵29和33以及相关联的PID控制回路38、39共同提供,而且可选地,可认为该顺列调节是第五顺列调节组件。
示出的色谱系统进一步包括在气泡收集器30的上游的顺列压力传感器61,以及分别在柱21的下游但在接头43的上游的顺列的导电率传感器62、pH值传感器63和UV传感器64。
病毒移除过滤器23可为例如隔膜过滤器。
在色谱系统中的不同的泵例如可选自蠕动泵、活塞泵和膜片泵。
混合器44、50、56可为静态混合器,例如增加直径且然后减小内径从而在流中产生湍流的导管的管内大小节段。
色谱系统由控制软件控制。示例性的这种控制软件包括UNICORNTM控制系统(瑞典乌普萨拉的GE Healthcare Bio-SciencesAB),它以具有计算机图形用户接口(它是控制系统的组成部分)的控制器和I/O接口为基础。
可用各种方式执行图2中显示的和上面描述的系统。在下面,将描述三个示例性使用来进行说明:
1.处于结合-洗脱模式的第一柱(21)和最终病毒过滤(23)
2.处于结合-洗脱模式的第一柱(21)、处于捕捉模式(流过)的第二柱(22),以及最终病毒过滤(23)
3.处于结合-洗脱模式的第一柱(21)、处于结合-洗脱模式的第二柱(22),以及最终病毒过滤(23)
1.处于结合-洗脱模式的第一柱和最终病毒过滤
或者用预先制备的溶液或者用使用顺列缓冲剂制备单元或组件(例如上面提到的共同未决的申请“Method and system fbr preparationof liquid mixtures(用于制备液体混合物的方法和系统)”中公开的那个)而实时制备的缓冲剂来平衡第一柱21。然后或者直接地或者通过经由泵33和控制回路38、39、40对导电率或pH值的调节来将样本装载到柱21上。在样本结合且对未结合样本的冲洗完成之后,蛋白质就被洗脱。
或者用预先制备的溶液供应的或者用使用顺列缓冲剂制备单元(如果分离系统这样配备了的话)制备的缓冲剂供应的洗脱可为等度的(isocratic),具有固定的pH值或导电率。备选地,流的梯度洗脱或导电率可用泵29、33和控制回路39、38、40来施加。梯度洗脱允许在泵之间的混合的目标设定点以线性速率改变,并且系统控制的控制算法使该混合遵从这个变化的线性设定点。
可选地,在从柱21中洗脱出时,可在洗脱期间通过包括泵41、管道42、T形接头43、混合器44和导电率控制回路45、46的第一顺列调节组件来将导电率顺列地调节到指定值。同样,可通过包括泵47、管道48、T形接头49、混合器50和pH值控制回路51、52的第二顺列调节组件来顺列地调节pH值;并且可通过包括泵53、管道54、T形接头55、混合器56和UV控制回路57、58的第三顺列调节组件来顺列地调节蛋白质浓度。
使用泵27和UV控制回路59、60来使浓度经调节的产物持续以恒定的压力通过过滤器23。
2.处于结合-洗脱模式的第一柱、处于捕捉模式(流过)的第二柱,以
及最终病毒过滤
或者用预先制备的溶液或者用使用系统的顺列缓冲剂制备能力(如果这样配备了的话)而实时制备的缓冲剂来平衡第一柱21和第二柱22。如果平衡溶液对于两个柱是相同的,则这可彼此顺列地执行;否则,将在绕过另一个柱的情况下按顺序执行平衡。
然后或者直接地或者通过对导电率33、38或pH值39、40的调节来将样本装载到柱21上。在这个操作期间,第二柱22可为成顺列或被绕过,这取决于工艺要求。在样本结合且对未结合样本的冲洗完成之后,蛋白质就被洗脱。
在洗脱期间,如果还没有顺列的话,则使第二柱22顺列。或者从预先制备的溶液供应的或者用使用系统的顺列缓冲剂制备能力(如果这样配备了的话)制备的缓冲剂供应的洗脱可为等度的,具有固定的pH值或导电率。备选地,流的梯度洗脱或导电率可用泵29、33和控制回路39、38、40施加。梯度洗脱允许在泵之间的混合的目标设定点以线性速率改变,并且控制算法系统控制使混合遵从这个变化的线性设定点。
可选地,在从第一柱21中洗脱出时,可顺列地调节导电率和/或pH值,以使其满足第二柱22的应用要求,通过包括泵41、管道42、T形接头43、混合器44和控制回路45、46的第一顺列调节组件来调节导电率,并且通过包括泵47、管道48、T形接头49、混合器50和控制回路51、52的第二顺列调节组件来调节pH值。
可通过包括泵53、管道54、T形接头55、混合器56和控制回路57、58的第三顺列调节组件来将离开第二柱22的蛋白质浓度顺列地调节成指定值。
使用泵27和控制回路59、60来使浓度经调节的产物持续以恒定的压力通过过滤器23。
要注意,如果满足工艺要求需要的话,还可在运行之前(或在增加了额外的阀的运行期间)将系统容易地构造成改变中间导电率调节环41、42、43、44、45、46(第一顺列调节组件)和pH值调节环47、48、49、50、51、52(第二顺列调节组件)的位置,以允许在第二柱22之后进行调节。
3.处于结合-洗脱模式的第一柱、处于结合-洗脱模式的第二柱,
以及最终病毒过滤
或者用预先制备的溶液或者使用系统的顺列缓冲剂制备能力(如果这样配备了的话)实时制备的缓冲剂来平衡第一柱21和第二柱22。如果平衡溶液对于两个柱是相同的,则这可彼此顺列地执行;否则,将在绕过另一个柱的情况下按顺序执行平衡。过滤器23在此时不成顺列。
或者直接地或者通过泵33和控制回路38、39、40对导电率或pH值的调节来将样本装载到柱21上。在这个操作期间,第二柱22被绕过。在样本结合且未结合样本的冲洗完成之后,蛋白质就被洗脱。
或者从预先制备的溶液供应的或者用使用系统的顺列缓冲剂制备能力(如果这样配备了的话)制备的缓冲剂供应的洗脱可为等度的,具有固定的pH值或导电率。备选地,流的梯度洗脱或导电率可由泵29、33和控制回路39、38、40施加。梯度洗脱允许在泵之间的混合的目标设定点以线性速率改变,并且系统控制的控制算法使该混合遵从这个变化的线性设定点。
在从第一柱21中洗脱出的期间,第二柱22成顺列,并且来自第一柱21的洗脱液结合到第二柱22上。可选地,在从第一柱21中洗脱出时,可顺列地调节导电率和/或pH值,以满足关于结合到第二柱22上的应用要求,通过包括泵41、管道42、T形接头43、混合器44和控制回路45、46的第一顺列调节组件来调节导电率,并且通过包括泵47、管道48、T形接头49、混合器50、和控制回路51、52的第二顺列调节组件来调节pH值。
在来自第一柱21的所有蛋白质都结合到第二柱22上之后,第一柱21被绕过,并且冲洗掉第二柱22的未结合样本。当第二柱22的冲洗完成之后,使过滤器23顺列,开始对第二柱22进行洗脱。
或者从预先制备的溶液中供应的或者用使用系统的顺列缓冲剂制备能力(如果这样配备了的话)制备的缓冲剂供应的洗脱可为等度的,具有固定的pH值或导电率。备选地,流的梯度洗脱或导电率可由泵29、33和控制回路39、38、40施加。梯度洗脱允许在泵之间的混合的目标设定点以线性速率改变,并且系统控制的控制算法使该混合遵从这个变化的线性设定点。
可使用包括泵53、管道54、T形接头55、混合器56和控制回路57、58的第三顺列调节组件来将离开第二柱22的蛋白质浓度顺列地调节成指定值。泵27通过控制回路59、60以恒定的压力将洗脱产物持续地泵送通过过滤器23。
要注意,如果满足工艺要求需要的话,还可在运行之前(或在增加了额外的阀的运行期间)将系统容易地构造成改变中间导电率调节环41、42、43、44、45、46(第一顺列调节组件)和pH值调节环47、48、49、50、51、52(第二顺列调节组件)的位置,以允许在第二柱22之后进行调节。
在下面,将描述用展示了本发明的功能性的测试平台来执行的实验。
实例
将在下面以实例的方式公开本发明,实例仅意图为说明性目的,并且不应理解为限制在所附权利要求中限定的本发明。在下面或本申请的其它地方提到的所有参考均以引用的方式包括在本文中。
通过在两个测试平台(各自包括单个柱而无病毒过滤器)上用两种模型单克隆抗体(Mab)产物执行的测试来展示了本发明的STP系统(包括串联的两个柱和病毒过滤器)的上面描述的实施例的功能性。
两个测试平台以有许多额外的特征设计到系统中的标准10mm生物工艺聚丙烯系统(瑞典乌普萨拉的GE Healthcare Bio-Sciences AB)为基础。
测试平台I
图3显示了第一测试平台的色谱系统构造,其用于第一模型单克隆抗体DPC(直接产物捕捉)产物,在下面称为“Mab 1”。
色谱柱71的入口通过包含气泡收集器73的管道72而连接到第一膜片色谱泵74(德国莱昂伯格的Lewa GmbH)上,并且通过连接到管道72上的管道75而连接到第二膜片色谱泵76(Lewa GmbH)上。泵74具有(这里)带有四个入口阀78的入口管道77,入口阀78中的一个用作取样阀。同样,泵76具有(这里)带有四个入口和取样阀80的入口管道79。柱71的出口通过管道81而连接到(这里)四个出口阀82上,它们中的一个用于废料。
第一蠕动滴定缓冲泵83(美国马萨诸塞州威尔明顿的Watson-Marlow公司的Watson-Marlow 604IU IP55)通过管道84在T形接头85处连接到柱出口管道81上。在接头85的下游提供管内静态混合器86。第二蠕动滴定缓冲泵87(Watson-Marlow520DU IP31)通过管道88在T形接头89处连接到出口管道81上,并且在接头89的下游提供静态混合器90。
第一PID闭环控制回路控制色谱泵74和76的运行,并且包括用于感测入口管道72的导电率且连接到控制器92(GE HealthcareBio-Sciences AB的UNICORNTM)上的顺列导电率传感器91(GEHealthcare Bio-Sciences AB的CMC-DN8、CM-P),控制器92又连接到泵74和76上。联接到柱出口管道81上的顺列流量传感器93(瑞士雷纳赫的Endress+Hauser的PROMASSTM M、60MT-AUG00A00B2B)也以闭环的方式连接到控制器92上。
第二PID闭环控制回路控制滴定缓冲泵83的运行,并且包括在混合器86和T形接头89之间联接到柱出口管道81上的顺列UV传感器94(用以感测产物浓度)(GE Healthcare Bio-Sciences AB的光学单元UV1、UV-P)。UV传感器94连接到控制器95(GE HealthcareBio-Sciences AB的UNICORNTM)上,控制器95又连接到泵83上。
第三PID闭环控制回路控制滴定缓冲泵87的运行,并且包括在混合器90的下游联接到柱出口管道81上的顺列pH值传感器96(Endress+Hauser的pH值传感器、GE Healthcare Bio-Sciences AB的Transmitter pH-P)。pH值传感器96连接到控制器97(GE HealthcareBio-Sciences AB的UNICORNTM)上,控制器97又连接到泵87上。
示出的色谱测试平台进一步包括在柱71的上游的顺列压力传感器98、分别在柱71的下游但在混合器86的上游的顺列导电率传感器99、pH值传感器100和UV传感器101,以及在pH值传感器96的下游的顺列导电率传感器102。
仅有缓冲剂的运行
在对实际蛋白质执行任何运行之前,执行一系列的仅有缓冲剂的运行,以校验结合到系统中的控制环的运行,以及分析在过渡状态和固定状态中关于控制导电率、pH值和UV(蛋白质浓度)的能力。使用相应的控制回路来在设定值处控制工艺流。
Mab 1产物实验
然后用Mab 1单克隆抗体产物来进行实验,目标是(i)在装载期间关于目标导电率展示样本的顺列稀释,(ii)在洗脱期间展示对pH值的柱后调节,以及(iii)在洗脱期间展示对蛋白质浓度(UV)的柱后调节。
柱71是填充有SP SEPHAROSETM XL阳离子色谱树脂(GEHealthcare Bio-Sciences AB)的25厘米的色谱柱(瑞典乌普萨拉的GEHealthcare Bio-Sciences AB的BPGTM)。对于所有步骤,除了以150厘米/小时执行的洗脱,流率为200厘米/小时。
对阳离子交换色谱工艺使用以下缓冲剂:
卫生处理: 1.0mM NaOH
关于基线的平衡/冲洗: 30mM磷酸钠、pH值6.5
洗脱缓冲剂: 30mM磷酸钠、50mM NaCl、pH值6.5
剥离缓冲剂: 50mM三氨基甲烷盐酸、
1.0M NaCl、pH值8.0
存储缓冲剂: 0.1mM NaOH
用于样本装载的柱前导电率调节由包括导电率传感器91和控制器92的反馈控制环执行。
在柱后,将被蠕动泵83馈送到T形接头85中且然后通过混合器86(增加内径然后减小内径的导管的大小变化节段)混合的洗脱缓冲剂用作稀释剂来调节UV。联接到泵83上的包括传感器94和控制器95的PID环从在混合器86的下游的传感器94中读取UV,并且调节泵83,以达到设定点。
在UV调节之后进行pH值调节,并且将三氨基甲烷盐酸缓冲剂用作调节缓冲剂,该三氨基甲烷盐酸缓冲剂由蠕动泵87通过在混合器86的下游的T形接头89而馈送到出口管道81中,以及馈送到流中的管内静态混合器90,从而产生湍流。联接到泵87上的PID环从在混合器90的下游的传感器96中读取pH值,并且调节泵87,以达到设定点。
测试平台II
图4显示了第二测试平台的色谱系统构造,其用于第二模型单克隆抗体DPC(直接产物捕捉)产物,下面称为“Mab 2”。
色谱柱121的入口通过包含气泡收集器123的管道122而连接到第一膜片色谱泵124(德国莱昂伯格的Lewa GmbH)上,并且通过连接到管道122上的管道125而连接到第二膜片色谱泵126(Lewa GmbH)上。泵124具有(这里)带有四个入口阀128的入口管道127,入口阀128中的一个用作取样阀。同样,泵126具有(这里)带有四个入口和取样阀130的入口管道129。柱121的出口通过管道131而连接到(这里)四个出口阀132上,出口阀132中的一个用于废料。
第一活塞蠕动滴定缓冲泵133(瑞典乌普萨拉的GE HealthcareBio-Sciences AB的泵P900)通过管道134在气泡收集器123的下游的T形接头135处连接到柱入口管道122上。在接头85的下游提供管内静态混合器136。第二蠕动滴定缓冲泵137(Watson-Marlow 604U IP55)通过管道138在T形接头139处连接到柱出口管道131上,并且在接头139的下游提供管内静态混合器140。
第一PID闭环控制回路控制色谱泵124和126的运行,并且包括用于感测入口管道122的导电率且连接到控制器142上的顺列导电率传感器141(GE Healthcare Bio-Sciences AB的CMC-DN8、CM-P),控制器142又连接到泵124和126上。联接到柱出口管道131上的顺列流量传感器143也以闭环的方式连接到控制器142上。
第二PID闭环控制回路控制滴定缓冲泵133的运行,并且包括在混合器136和柱121之间联接到柱入口管道122上的顺列UV传感器144(Endress+Hauser的pH值传感器、GE Healthcare Bio-Sciences AB的Transmitter pH-P)。pH值传感器144连接到控制器145上,控制器145又连接到泵133上。
第三PID闭环控制回路控制滴定缓冲泵137的运行,并且包括在混合器140的下游联接到柱出口管道131上的顺列UV传感器146(GEHealthcare Bio-Sciences AB的光学单元UV1、UV-P)。UV传感器146连接到控制器147上,控制器147又连接到泵137上。
示出的色谱测试平台进一步包括在气泡收集的上游的顺列压力传感器148、分别在柱121和T形接头139之间的顺列导电率传感器149、pH值传感器150和UV传感器151,以及在UV传感器146的下游的顺列导电率传感器152。
Mab 2产物实验
然后用Mab 2单克隆抗体产物来进行实验,目标是(i)在样本装载期间展示对pH值的顺列柱前调节(向下),以及(ii)在洗脱期间展示对蛋白质浓度(UV)的柱后调节。
柱121是填充有SP SEPHAROSETMXL阳离子色谱树脂(GEHealthcare Bio-Sciences AB)的25厘米色谱柱(瑞典乌普萨拉的GEHealthcare Bio-Sciences AB的BPGTM)。对于所有步骤,流率为250厘米/小时。
对阳离子交换色谱工艺使用以下缓冲剂:
MMC装载pH值调节: 2.0M醋酸盐
卫生处理: 1.0mM NaOH
关于基线的平衡/冲洗:100mM醋酸盐、pH值5.0
中间冲洗: 25mM柠檬酸盐、200mM NaCl、
pH值5.0
洗脱缓冲剂: 25mM柠檬酸盐、225mM NaCl、
pH值5.6
剥离缓冲剂: 25mM柠檬酸盐、1.0M NaCl、
pH值5.4
存储缓冲剂: 0.1M NaOH
将被P900正位移泵(瑞典乌普萨拉的GE Healthcare Bio-SciencesAB)馈送到T形接头135中的2M醋酸用作调节缓冲剂来进行柱前pH值调节,在流中有静态混合器136,从而产生湍流。包括控制器145的PID环从在pH值静态混合器136的下游的传感器144中读取pH值,并且调节泵133,以达到设定点。
在柱后,将被蠕动泵馈送到导管T形节段接头139和用以提供混合机制的混合器140中的洗脱缓冲剂用作稀释剂来调节UV。包括控制器147的PID环从在T形接头139的下游的传感器146中读取UV,并且调节泵137,以达到设定点。
结果/结论
缓冲剂运行显示了该系统能够响应于许多动态状况,只要泵在它们的线性操作范围内运行。
Mab 2样本运行展示了系统可响应于具有不同的起始导电率的样本,并且成功地装载和结合到柱上。具有顺列稀释的样本装载展示了装载参数的自动调节,确保恰当的装载状况得到满足,而不管样本批次的起始导电率或pH值的差异如何。因此该技术能够调节状况来确保装载成功,而不需要人工操作来调节批次。基于装载期间的UV度量,没有损失产物。
还展示了成功的柱后pH值调节以及柱后蛋白质浓度控制。pH值调节显示了调节从柱洗脱出的pH值的能力,这可使其准备装载到第二柱或其它分离装置上。执行顺列调节允许系统对洗脱流的变化的状况作出反应,从而确保为下一个柱恰当地制备抗体或蛋白质,或者在不稳定的状况下花费最少时间。这在槽批量调节模式中是不可能实现的。因而,STP系统消除了对在所讨论的类型的抗体纯化系统中、在柱1和柱2之间的容器的需要。
样本浓度调节对于确保浓度保持在可能导致在抗体纯化系统中在第二柱的下游的病毒过滤器过早阻塞的水平之下是有效的。再一次,顺列调节允许系统作出反应,节省运行后的稀释的时间和劳动力,从而使得能够在消毒过滤步骤中直通地应用流,以及通过去除人工交互来改进质量。因而,STP系统消除了对用以在抗体纯化系统中、在柱2和病毒过滤器之间进行调节的容器的需要。
本发明不限于上面描述的优选实施例。可使用各种备选方案、改良和等效方案。因此,上面的实施例不应理解为限制本发明的范围,本发明的范围由所附权利要求限定。
Claims (15)
1.一种分离系统,包括:
至少两个分离单元,各个分离单元包括流体入口和流体出口,其中,所述分离单元以出口对入口的方式串联连接,以形成分离单元排;以及
感测和调节器件,其顺列地设置在各个分离单元之间,以持续地监测和调节从所述分离单元排中的一个分离单元流到后面的分离单元的流体的至少一个环境属性参数。
2.根据权利要求1所述的分离系统,其特征在于,所述感测和调节器件包括以闭环的方式连接到流体输送装置上的顺列传感器和控制器。
3.根据权利要求1所述的分离系统,其特征在于,所述分离系统包括至少三个分离单元。
4.根据权利要求1所述的分离系统,其特征在于,所述分离单元选自柱和过滤器。
5.根据权利要求2所述的分离系统,其特征在于,所述流体输送装置包括至少一个泵。
6.根据权利要求4所述的分离系统,其特征在于,所述分离系统包括至少两个色谱柱。
7.根据权利要求1所述的分离系统,其特征在于,至少一个环境属性参数选自pH值、导电率和物质浓度。
8.根据权利要求7所述的分离系统,其特征在于,用于监测和调节物质浓度的所述感测和调节器件包括UV传感器。
9.根据权利要求4所述的用于蛋白质纯化的分离系统,其特征在于,所述分离系统包括两个色谱柱和病毒移除过滤器。
10.根据权利要求9所述的分离系统,其特征在于,所述色谱柱包括阳离子交换柱和阴离子交换柱。
11.根据权利要求10所述的分离系统,其特征在于,设置在所述阳离子交换柱和所述阴离子交换柱之间的所述感测和调节器件包括用于监测和调节导电率和pH值中的至少一个的感测和调节器件。
12.根据权利要求10所述的分离系统,其特征在于,设置在所述阴离子交换柱和所述病毒移除过滤器之间的所述感测和调节器件包括用于监测和调节UV吸收率的感测和调节器件。
13.根据权利要求1所述的分离系统,其特征在于,所述分离系统包括用于所述分离系统的运行的计算机化的控制和数据分析系统。
14.一种用于纯化包含至少一种期望的物质的液体的方法,包括以下步骤:
使所述液体流到第一分离单元,以从中获得包含所述期望的物质的纯化流体流出物;
在线监测所述流体流出物的至少一个环境属性参数且将其调节成期望值;
将所述流出物引导到第二分离单元,以从中获得包含所述期望的物质的纯化流体流出物;以及
回收包含所述期望的物质的所述纯化流出物。
15.根据权利要求14所述的方法,其特征在于,所述方法包括使来自所述第二分离单元的流出物经历至少一个额外的分离单元,其中,监测通往各个额外的分离单元的流体入口流的至少一个环境属性参数且将其调节成期望值。
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US12/566,701 | 2009-09-25 | ||
US12/566701 | 2009-09-25 | ||
US12/566,701 US9527010B2 (en) | 2009-09-25 | 2009-09-25 | Separation system and method |
PCT/SE2010/051003 WO2011037522A1 (en) | 2009-09-25 | 2010-09-20 | Separation system and method |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN102574026A true CN102574026A (zh) | 2012-07-11 |
CN102574026B CN102574026B (zh) | 2015-10-07 |
Family
ID=43779133
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201080043193.9A Active CN102574026B (zh) | 2009-09-25 | 2010-09-20 | 分离系统和方法 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9527010B2 (zh) |
EP (1) | EP2480305B1 (zh) |
JP (1) | JP5749270B2 (zh) |
CN (1) | CN102574026B (zh) |
AU (1) | AU2010298768B2 (zh) |
IN (1) | IN2012DN01850A (zh) |
WO (1) | WO2011037522A1 (zh) |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104237418A (zh) * | 2013-09-11 | 2014-12-24 | 青岛普仁仪器有限公司 | 免稀释作线性曲线的色谱仪及线性曲线测量方法 |
CN104897788A (zh) * | 2014-03-04 | 2015-09-09 | 株式会社岛津制作所 | 液相色谱仪和液相色谱仪分析方法 |
CN105980847A (zh) * | 2014-02-14 | 2016-09-28 | 通用电气健康护理生物科学股份公司 | 自动多步纯化系统 |
CN109313419A (zh) * | 2016-04-04 | 2019-02-05 | 贝林格尔·英格海姆Rcv两合公司 | 产品纯化的实时监测 |
CN111629802A (zh) * | 2017-11-16 | 2020-09-04 | 诺瓦塞普工艺公司 | 分离混合物的调节方法 |
CN114729916A (zh) * | 2019-09-23 | 2022-07-08 | 建新公司 | 产品品质属性测量 |
Families Citing this family (36)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102549516A (zh) * | 2009-09-25 | 2012-07-04 | 通用电气健康护理生物科学股份公司 | 用于液体混合物的制备的方法和系统 |
JP2013519652A (ja) * | 2010-02-12 | 2013-05-30 | ディーエスエム アイピー アセッツ ビー.ブイ. | 単一ユニット抗体精製 |
US9428546B2 (en) * | 2010-07-30 | 2016-08-30 | Pfizer Inc. | Tandem purification of proteins |
US20130109102A1 (en) * | 2010-09-20 | 2013-05-02 | Hiroyuki Yabe | Liquid chromatography system and method for protein separation and purification |
JP2013540787A (ja) * | 2010-11-01 | 2013-11-07 | ディーエスエム アイピー アセッツ ビー.ブイ. | 単一ユニットイオン交換クロマトグラフィー抗体精製 |
KR20140033126A (ko) * | 2011-06-16 | 2014-03-17 | 디에스엠 아이피 어셋츠 비.브이. | 단일 유닛 크로마토그래피 항체 정제 |
US9096648B2 (en) * | 2011-08-19 | 2015-08-04 | Emd Millipore Corporation | Methods of reducing level of one or more impurities in a sample during protein purification |
EP2578286A1 (en) | 2011-10-04 | 2013-04-10 | Merck Patent GmbH | Method and apparatus for chromatographic purification |
CA2850581A1 (en) * | 2011-11-10 | 2013-05-16 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Preparative column chromatography system |
WO2013075740A1 (en) | 2011-11-23 | 2013-05-30 | Sanofi | Antibody purification method |
ES2895173T3 (es) * | 2012-06-29 | 2022-02-17 | Emd Millipore Corp | Métodos para inactivar virus durante un proceso de purificación de proteínas |
BR112015027812B1 (pt) * | 2013-05-06 | 2021-03-30 | Sanofi | Método para a purificação de uma proteína a partir de uma solução |
EP3048109A4 (en) * | 2013-09-17 | 2017-04-19 | Kaneka Corporation | Novel antibody purification method and antibody obtained therefrom, and novel antibody purification method using cation exchanger and antibody obtained therefrom |
WO2015117883A1 (en) * | 2014-02-07 | 2015-08-13 | Cmc Biologics A/S | A bioreactor arrangement and continuous process for producing and capturing a biopolymer |
JP2017515501A (ja) * | 2014-05-02 | 2017-06-15 | ノヴォ ノルディスク アー/エス | 統合型連続バイオマニュファクチャリング方法 |
US11835501B2 (en) | 2015-07-13 | 2023-12-05 | Sartorius Stedim Chromatography Systems Ltd. | Optimizing operating binding capacity for a multiple column chromatography process |
JP6579515B2 (ja) * | 2015-08-10 | 2019-09-25 | 国立大学法人 岡山大学 | アポe含有hdlの測定方法及び測定装置 |
GB201622343D0 (en) * | 2016-12-29 | 2017-02-15 | Ge Healthcare Bio Sciences Ab | Method in bioprocess purification system |
WO2018140485A1 (en) * | 2017-01-26 | 2018-08-02 | Counsyl, Inc. | Reagent delivery and waste management system |
US11185830B2 (en) | 2017-09-06 | 2021-11-30 | Waters Technologies Corporation | Fluid mixer |
GB201802593D0 (en) * | 2018-02-16 | 2018-04-04 | Fujifilm Diosynth Biotechnologies Uk Ltd | Rig |
KR20200136454A (ko) * | 2018-03-27 | 2020-12-07 | 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 | 자외선 신호를 사용한 단백질 농도의 실시간 모니터링 |
CN109453545A (zh) * | 2018-12-20 | 2019-03-12 | 上海兆维科技发展有限公司 | 层析柱洗脱液的配液装置 |
EP3693732A1 (en) * | 2019-02-11 | 2020-08-12 | Bayer Aktiengesellschaft | Influencing a sequential chromatography in real-time |
SG11202107699QA (en) * | 2019-02-11 | 2021-08-30 | Bayer Ag | Influencing a sequential chromatography in real-time |
EP3763429A1 (en) * | 2019-07-08 | 2021-01-13 | Bayer Aktiengesellschaft | Influencing a sequential chromatography in real-time |
EP3699697A1 (en) * | 2019-02-25 | 2020-08-26 | Bayer Aktiengesellschaft | Automated simultaneous process control |
FR3099066B1 (fr) | 2019-07-26 | 2021-08-13 | Novasep Process | Procédé de purification d’une substance cible avec inactivation virale |
WO2021030245A1 (en) | 2019-08-12 | 2021-02-18 | Waters Technologies Corporation | Mixer for chromatography system |
GB201911686D0 (en) * | 2019-08-15 | 2019-10-02 | Fujifilm Diosynth Biotechnologies Uk Ltd | Process for purifying target substances |
GB201911685D0 (en) * | 2019-08-15 | 2019-10-02 | Fujifilm Diosynth Biotechnologies Uk Ltd | Process for purifying monoclonal antibodies |
JP7388206B2 (ja) * | 2020-01-22 | 2023-11-29 | 株式会社島津製作所 | 液体クロマトグラフおよび分析方法 |
CN116134312A (zh) | 2020-07-07 | 2023-05-16 | 沃特世科技公司 | 液相色谱用混合器 |
US11988647B2 (en) | 2020-07-07 | 2024-05-21 | Waters Technologies Corporation | Combination mixer arrangement for noise reduction in liquid chromatography |
US11821882B2 (en) | 2020-09-22 | 2023-11-21 | Waters Technologies Corporation | Continuous flow mixer |
WO2023165947A1 (en) * | 2022-03-03 | 2023-09-07 | Chromacon Ag | Chromatographic purification method and uses thereof |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20070039375A1 (en) * | 2004-05-17 | 2007-02-22 | Alain Chaintreau | Multidimensional gas chromatography apparatus and analyte transfer procedure using a multiple-cool strand interface |
WO2007043874A1 (en) * | 2005-10-13 | 2007-04-19 | Xendo Holding B.V. | Device for chromatographic separations |
WO2008127087A1 (en) * | 2007-04-17 | 2008-10-23 | Xendo Holding B.V. | Method and device for continuous membrane adsorption |
US20090050567A1 (en) * | 2005-04-29 | 2009-02-26 | Eidgenossische Technische Hochschule Zurich | Method and device for chromatographic purification |
Family Cites Families (30)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3918907A (en) * | 1973-10-29 | 1975-11-11 | Beckman Instruments Inc | Micro automatic amino acid analysis process and system |
US4246101A (en) * | 1978-12-28 | 1981-01-20 | Pure Cycle Corporation | Water recycling system |
US4762796A (en) | 1981-10-05 | 1988-08-09 | Exxon Research And Engineering Company | pH control of a process stream |
JPS62255865A (ja) | 1986-04-28 | 1987-11-07 | Hitachi Ltd | 液体クロマトグラフ |
US4840730A (en) * | 1986-07-25 | 1989-06-20 | Sepragen Corporation | Chromatography system using horizontal flow columns |
JP2581568B2 (ja) | 1987-10-08 | 1997-02-12 | 株式会社日立製作所 | イオンクロマトグラフイ装置 |
US5114576A (en) * | 1990-02-15 | 1992-05-19 | Trineos | Prevention of contaminants buildup in captured and recirculated water systems |
JP3175941B2 (ja) * | 1991-03-28 | 2001-06-11 | パーセプティブ バイオシステムズ インコーポレイテッド | クロマトグラフ溶出液の減法に依るオンライン生成物確認方法及び装置 |
US5792371A (en) | 1996-08-22 | 1998-08-11 | Iosolutions Incorporated | Method of disinfecting water with iodine species |
US6799883B1 (en) | 1999-12-20 | 2004-10-05 | Air Liquide America L.P. | Method for continuously blending chemical solutions |
WO2003025156A2 (en) * | 2001-09-18 | 2003-03-27 | Affinium Pharmaceuticals, Inc. | Methods and apparatuses for purification |
WO2003083467A2 (de) | 2002-03-28 | 2003-10-09 | Siemens Aktiengesellschaft | Gaschromatograph und verfahren zur gaschromatographischen analyse eines stoffgemischs |
JP2004077329A (ja) * | 2002-08-20 | 2004-03-11 | Japan Organo Co Ltd | クロマト分離装置 |
US6972415B2 (en) * | 2002-09-26 | 2005-12-06 | R-Can Environmental Inc. | Fluid treatment system with UV sensor and intelligent driver |
US20040124253A1 (en) * | 2002-10-17 | 2004-07-01 | Bergwin Gregory A. | Injection apparatus for irrigation system |
US20040102380A1 (en) | 2002-11-18 | 2004-05-27 | Fulton Scott P. | Method for continuous, automated blending of solutions from acids and bases |
WO2004103519A2 (en) * | 2003-05-16 | 2004-12-02 | Cryobiophysica, Inc. | External gradient chromatofocusing |
US7632410B2 (en) * | 2003-08-21 | 2009-12-15 | Christopher Heiss | Universal water purification system |
US7072742B1 (en) | 2003-10-17 | 2006-07-04 | Technikrom, Inc. | Accurate blending module and method |
WO2005040787A1 (en) | 2003-10-17 | 2005-05-06 | Ge Healthcare Bio-Sciences Ab | Chromatography system, method and software for the separation of biomolecules |
US8271139B2 (en) | 2003-10-17 | 2012-09-18 | Asahi Kasei Bioprocess, Inc. | Multi-stage accurate blending system and method |
US7674375B2 (en) | 2004-05-21 | 2010-03-09 | Waters Technologies Corporation | Closed loop flow control of a HPLC constant flow pump to enable low-flow operation |
US7642306B2 (en) | 2004-06-25 | 2010-01-05 | Johns Manville | Control of pH in formaldehyde-free binder systems |
PT2550971T (pt) | 2004-09-30 | 2017-10-02 | Bayer Healthcare Llc | Dispositivos e métodos para fabrico contínuo integrado de moléculas biológicas |
EP1871503B1 (en) * | 2005-01-20 | 2014-03-12 | Waters Technologies Corporation | Methods for separating compounds |
JP4939910B2 (ja) * | 2006-11-29 | 2012-05-30 | 株式会社東芝 | マイクロ化学分析システム及びマイクロ化学分析装置 |
GB0709109D0 (en) | 2007-05-11 | 2007-06-20 | Enpar Technologies Inc | Wastewater ammonium extraction and electrolytic conversion to nitrogen gas |
US20090149638A1 (en) * | 2007-10-03 | 2009-06-11 | Ley Arthur C | Systems and methods for purifying proteins |
CN103396480A (zh) | 2008-05-15 | 2013-11-20 | 诺沃—诺迪斯克有限公司 | 抗体纯化方法 |
WO2010124159A1 (en) | 2009-04-23 | 2010-10-28 | Xcellerex, Inc. | System and method for variable speed feedback control chromatography loading |
-
2009
- 2009-09-25 US US12/566,701 patent/US9527010B2/en active Active
-
2010
- 2010-09-20 IN IN1850DEN2012 patent/IN2012DN01850A/en unknown
- 2010-09-20 CN CN201080043193.9A patent/CN102574026B/zh active Active
- 2010-09-20 WO PCT/SE2010/051003 patent/WO2011037522A1/en active Application Filing
- 2010-09-20 AU AU2010298768A patent/AU2010298768B2/en active Active
- 2010-09-20 JP JP2012530844A patent/JP5749270B2/ja active Active
- 2010-09-20 EP EP10819116.4A patent/EP2480305B1/en active Active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20070039375A1 (en) * | 2004-05-17 | 2007-02-22 | Alain Chaintreau | Multidimensional gas chromatography apparatus and analyte transfer procedure using a multiple-cool strand interface |
US20090050567A1 (en) * | 2005-04-29 | 2009-02-26 | Eidgenossische Technische Hochschule Zurich | Method and device for chromatographic purification |
WO2007043874A1 (en) * | 2005-10-13 | 2007-04-19 | Xendo Holding B.V. | Device for chromatographic separations |
WO2008127087A1 (en) * | 2007-04-17 | 2008-10-23 | Xendo Holding B.V. | Method and device for continuous membrane adsorption |
Cited By (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104237418A (zh) * | 2013-09-11 | 2014-12-24 | 青岛普仁仪器有限公司 | 免稀释作线性曲线的色谱仪及线性曲线测量方法 |
CN104237418B (zh) * | 2013-09-11 | 2015-11-18 | 青岛普仁仪器有限公司 | 免稀释作线性曲线的色谱仪及线性曲线测量方法 |
CN105980847A (zh) * | 2014-02-14 | 2016-09-28 | 通用电气健康护理生物科学股份公司 | 自动多步纯化系统 |
US10429359B2 (en) | 2014-02-14 | 2019-10-01 | Ge Healthcare Bio-Sciences Ab | Automated multi-step purification system |
CN104897788A (zh) * | 2014-03-04 | 2015-09-09 | 株式会社岛津制作所 | 液相色谱仪和液相色谱仪分析方法 |
CN109313419A (zh) * | 2016-04-04 | 2019-02-05 | 贝林格尔·英格海姆Rcv两合公司 | 产品纯化的实时监测 |
CN109313419B (zh) * | 2016-04-04 | 2022-07-15 | 贝林格尔·英格海姆Rcv两合公司 | 产品纯化实时监测的方法和装置 |
CN111629802A (zh) * | 2017-11-16 | 2020-09-04 | 诺瓦塞普工艺公司 | 分离混合物的调节方法 |
US11857892B2 (en) | 2017-11-16 | 2024-01-02 | Novasep Process Solutions | Regulated method for separating a mixture |
CN114729916A (zh) * | 2019-09-23 | 2022-07-08 | 建新公司 | 产品品质属性测量 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP2480305B1 (en) | 2020-10-28 |
EP2480305A1 (en) | 2012-08-01 |
CN102574026B (zh) | 2015-10-07 |
EP2480305A4 (en) | 2014-07-02 |
JP5749270B2 (ja) | 2015-07-15 |
IN2012DN01850A (zh) | 2015-08-21 |
US9527010B2 (en) | 2016-12-27 |
JP2013506127A (ja) | 2013-02-21 |
AU2010298768B2 (en) | 2015-07-02 |
AU2010298768A1 (en) | 2012-03-15 |
US20110073548A1 (en) | 2011-03-31 |
WO2011037522A1 (en) | 2011-03-31 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN102574026B (zh) | 分离系统和方法 | |
Ötes et al. | Scale-up of continuous multicolumn chromatography for the protein a capture step: from bench to clinical manufacturing | |
EP2675540B1 (en) | System and process for biopolymer chromatography | |
US20210080434A1 (en) | Chromatography System with Guard Columns | |
Strube et al. | Process development and design of downstream processes | |
US20130296538A1 (en) | Downstream bioprocessing device | |
JP2015534635A (ja) | タンパク質分離用多次元の液体クロマトグラフィーの分離システム及分離方法 | |
CN101687119A (zh) | 色谱方法 | |
Rathore et al. | Challenges in process control for continuous processing for production of monoclonal antibody products | |
CN105980847A (zh) | 自动多步纯化系统 | |
Saleh et al. | Cross‐scale quality assessment of a mechanistic cation exchange chromatography model | |
AU2019221748A1 (en) | Apparatus for processing a liquid comprising a target substance | |
Gomis-Fons et al. | Integration of a complete downstream process for the automated lab-scale production of a recombinant protein | |
Wisniewski et al. | Process Design Considerations for Large–Scale Chromatography of Biomolecules | |
KR20110114560A (ko) | 크로마토그래피 시스템용 용매 공급 시스템 및 제작 방법 및 이용 방법 | |
Thakur et al. | Continuous manufacturing of monoclonal antibodies: Automated downstream control strategy for dynamic handling of titer variations | |
CN1117277C (zh) | 智能集成自动液相色谱系统 | |
Jungbauer et al. | Integrated continuous manufacturing of biopharmaceuticals | |
US10717023B1 (en) | Method for continuous purification | |
CN109633053B (zh) | 细胞培养物蛋白质表达量和蛋白质聚集体量的检测方法 | |
Chase | Rapid chromatographic monitoring of bioprocesses | |
Jungbauer et al. | Continuous downstream processing | |
CN208071618U (zh) | 一种蛋白分离检测装置 | |
CN114573657A (zh) | 一种用于靶分子连续纯化的系统和方法 | |
Hofmann | Use of ultrasound to monitor the packing of large-scale columns, the monitoring of media compression and the passage of molecules, such as monoclonal antibodies, through the column bed during chromatography |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CP03 | Change of name, title or address | ||
CP03 | Change of name, title or address |
Address after: Massachusetts, USA Patentee after: Globegroup life technology consulting America Co.,Ltd. Address before: new jersey Patentee before: GE HEALTHCARE BIO-SCIENCES Corp. |