CN102573872B

CN102573872B - 胃泌酸调节素类似物

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Publication number: CN102573872B
Application number: CN200980158734.XA
Authority: CN
Inventors: 保罗·E·卡灵顿; 乔治·J·埃尔曼; 多纳德·J·玛什; 约瑟夫·M·梅茨格; 阿雷桑德罗·波卡伊; 拉纳比尔·辛哈罗伊; 伊利萨贝塔·比安奇; 帕奥罗·因加利内拉; 安东内洛·佩西; 阿莱西亚·桑托普莱特; 伊莱纳·卡皮托; 理查德·迪玛奇; 布莱恩·瓦尔德
Original assignee: Istituto di Ricerche di Biologia Molecolare P Angeletti SpA; Indiana University Research and Technology Corp; Schering Corp
Current assignee: Istituto di Ricerche di Biologia Molecolare P Angeletti SpA; Indiana University Research and Technology Corp; Merck Sharp and Dohme LLC
Priority date: 2009-02-19
Filing date: 2009-12-18
Publication date: 2016-03-23
Anticipated expiration: 2029-12-18
Also published as: CN102573872A; US20120165503A1; BRPI0924307B1; BRPI0924307B8; EP2398483A4; CA2754350A1; US20150307580A1; HK1165333A1; ES2524477T3; CA2754350C; DK2398483T3; PL2398483T3; BRPI0924307A8; IL214729A0; RU2542362C2; JP5756961B2; CY1116917T1; SI2398483T1; AU2009340439A1; WO2010096052A1

Abstract

本申请描述了胃泌酸调节素(OXM，胰高血糖素-37)的肽类似物，其已被修饰以抵抗二肽基肽酶IV(DPP-IV)切割和失活并增加肽类似物的体内半衰期，同时能够使肽类似物起到双重GLP-1/胰高血糖素受体(GCGR)激动剂的作用。肽类似物可用于治疗代谢障碍例如糖尿病和肥胖症。

Description

胃泌酸调节素类似物

与相关申请的交叉引用

本申请是2009年2月19日提交的国际专利申请No.PCT/US2009/034448的部分连续案，其内容在此以其全文引用。

发明背景

(1)发明领域

本发明涉及胃泌酸调节素(OXM，胰高血糖素-37)的肽类似物，其已被修饰以抵抗二肽基肽酶IV(DPP-IV)切割和失活并增加肽类似物的体内半衰期，同时能够使肽类似物起到双重GLP-1/胰高血糖素受体(GCGR)激动剂的作用，以及使用所述肽类似物来治疗代谢障碍例如糖尿病和肥胖症。

(2)相关技术描述

激素胃泌酸调节素(OXM、胰高血糖素-37)是前胰高血糖素原在肠和中枢神经系统(CNS)中加工的翻译后产物，并由肠中的L-细胞对进食做出响应而分泌。OXM在1983年发现，已被暗示参与进食和能量消耗的调节(Jarrouse等，Endocrinol.115：102-105(1984)；Schjoldager等，Eur.J.Clin.Invest.，18：499-503(1988))。在大鼠中OXM的中枢或外周给药引起短期进食降低并伴有对胃排空的极小影响(Dakin等，Endocrinology，142：4244-4250(2001)；Dakin等，Endocrinology，145：2687-2695(2004))。在大鼠中OXM的反复脑室内给药，导致与成对饲养的动物相比核心温度的升高和体重增加的降低，表明了对卡路里摄入和能量消耗两者的影响(Dakin等，Am.J.Physiol.Endocrinol.Metab.，283：E1173-E1177(2002))。

在相关研究中，OXM的外周给药剂量依赖性地抑制禁食诱导的和黑暗期进食两者，但是与GLP-1不同，对胃排空没有影响。OXM也在弓状核(ARC)中降低禁食ghrelin水平并增加c-fos免疫反应性。OXM的反复7日IP给药在大鼠中引起体重增加和肥胖速率的减低(参见Dakin等，Endocrinology，145：2687-2695(2004))。

OXM在小鼠中的作用的研究已经证实，尽管OXM能够活化胰高血糖素和GLP-1受体两者，但OXM的食欲减退作用只需要GLP-1受体，因为在胰高血糖素受体敲除小鼠中，脑室内OXM抑制了进食。然而，在GLP-1受体敲除小鼠中，OXM的食欲减退效应完全缺失。此外，在小鼠中是exendin-4而不是OXM调控能量消耗。因此，当在药理学浓度下使用时，OXM似乎是GLP-1受体的弱激动剂(参见Baggio等，Gastroenterol.127：546-58(2004))。还发现OXM在喂食高脂肪饮食的小鼠中改善葡萄糖不耐受性(Dakin等，Am.J.Physiol.Endocrinol.Metab.294：E142-E147(2008))并在小鼠中不依赖于GLP-1受体增加固有心率(Sowden等，Am.J.Physiol.Regul.Integr.Comp.Physiol.292：R962-R970(2007))。也已显示，OXM差异影响GLP-1受体β-视紫红质抑制蛋白召集和通过G-α的信号传导(Jorgensen等，J.Pharma.Exp.Therapeut.322：148-154(2007))，并且在外周注射OXM后差异影响下丘脑神经元活化(Choudhri等，Biochem.Biophys.Res.Commun.350：298-306(2006))。

在人类中，在正常体重的健康对象中进行单次90分钟的OXM静脉内灌注降低了饥饿分值，并将自助餐的进食量降低了约19％。累积12小时卡路里摄入量降低了约11％，没有恶心或食物可口性变化的报告(Cohen等，J.Clin.Endocrinol.Metab.，88：4696-4701(2003)；Lykkegaard等，ADAScientificSessions，摘要#1506-P(2003))。更近些时候，在肥胖的健康志愿者(BMI约为33)中，在为期四周内正餐前注射OXM导致在治疗的第一天卡路里摄入量显著降低(约25％)，其在整个研究过程中得以维持(四周后降低35％)(Wynne等，Diabetes54：2390-2395(2005))。在治疗对象中，在研究结束时观察到强的体重丧失(1.9％，经安慰剂校正过)。OXM的血浆水平与灌输研究中观察到的相似(峰值浓度约为950pM)。尽管由于OXM的不良体内稳定性(血浆t_1/2＜12分钟)而需要相对高的剂量，但不存在任何快速脱敏，以及轻度和暂时恶心的低发生率(约3％)，使得这种激素成为既经过人类验证又具有吸引人的耐受性情况的很少的几个肥胖症靶点之一。

OXM具有非常短的半衰期，并被细胞表面的二肽基肽酶IV(DPP-IV)快速失活(Zhu等，J.Biol.Chem.278：22418-22423(2002))。然而，DPP-IV抑制剂在临床上对体重没有影响，表明可能需要超生理水平的OXM(900-1000pM)才能在人类中实现体重丧失。用于在人类中诱导体重丧失的OXM肽类似物成为已公开的国际申请号WO03/022304、WO2004/062685和WO2006/134340的目标。

因此，OXM显示出作为代谢障碍例如糖尿病和肥胖症的治疗方法的潜力。此外，因为OXM的不良体内稳定性，因此对于开发能够安全有效地给药以治疗代谢疾病例如糖尿病和肥胖症的OXM，存在着需求。此外，如果开发出通过与改进稳定性和药物动力学的部分偶联进行修饰、更具体为提供了对DPP-IV切割的抗性的修饰的类似物或衍生物，将是更加理想的。提供能够起到GLP-1受体/胰高血糖素受体双重激动剂作用的OXM类似物，也将是理想的。

发明简述

本发明提供了胃泌酸调节素(OXM、胰高血糖素-37)肽类似物，其已被修饰以抵抗二肽基肽酶IV(DPP-IV)切割和失活并增加肽类似物的体内半衰期，同时能够使肽类似物起到GLP-1/胰高血糖素受体(GCGR)双重激动剂的作用，以及使用这样的肽类似物来治疗代谢障碍例如糖尿病和肥胖症。具体来说，本文公开的类似物降低食物摄入量和体重、增加代谢速率、介导来自胰岛的葡萄糖依赖性胰岛素分泌(GDIS)并增加葡萄糖耐受性，从而为患有代谢障碍例如代谢综合征、肥胖症、糖尿病、代谢综合征X、高血糖、禁食血糖受损、血脂异常、动脉粥样硬化和其他糖尿病前期状态的个体提供治疗选项。

因此，本发明提供了包含SEQIDNO：1中显示的人类胃泌酸调节素(OXM)的氨基酸序列的肽，其中从肽的N-末端起第二个氨基酸被使肽对二肽基肽酶IV切割和失活具有抗性的氨基酸取代，所述肽包括与肽共价连接的脂类或胆固醇部分；除了2位处的取代之外，肽任选包括1至3个氨基酸取代；并且肽任选包括保护性基团，其如果存在的话，与肽的C-末端羧基相连；其中肽能够起到GLP-1受体和胰高血糖素受体双重激动剂的作用，并具有与人类OXM的血清半衰期相比更长的血清半衰期，及其可药用盐。在其他情况下，取代从N-末端起第二个氨基酸的氨基酸选自D-丝氨酸和α-氨基异丁酸。

还提供了包含SEQIDNO：1中显示的人类胃泌酸调节素(OXM)的氨基酸序列的肽，其中从N-末端起第二个氨基酸被选自D-丝氨酸和α-氨基异丁酸的氨基酸取代；肽的C-末端包括半胱氨酸残基，其中半胱氨酸残基的硫醇基通过亲水性连接物与胆固醇部分共价连接；除了2位处的取代之外，肽任选包括1至3个氨基酸取代；并且肽任选包括保护性基团，其如果存在的话，与肽的C-末端羧基相连；其中肽起到GLP-1受体和胰高血糖素受体双重激动剂的作用，并具有与人类OXM的血清半衰期相比更长的血清半衰期，及其可药用盐。

还提供了包含SEQIDNO：1中显示的人类胃泌酸调节素(OXM)的氨基酸序列的肽，其中从N-末端起第二个氨基酸被使肽对二肽基肽酶IV切割和失活具有抗性的氨基酸取代；所述肽包括与肽共价连接的脂类或胆固醇部分；所述肽包括在选自17、18和27位的氨基酸位置处包括一个或多个氨基酸取代；并且所述肽任选包括保护性基团，其如果存在的话，与肽的C-末端羧基相连；其中所述肽起到GLP-1受体和胰高血糖素受体双重激动剂的作用，并具有与人类OXM的血清半衰期相比更长的血清半衰期，及其可药用盐。在其他情况下，一个或多个氨基酸取代选自谷氨酸取代17位处的精氨酸、丙氨酸取代18位处的精氨酸、正亮氨酸或O-甲基-L-高丝氨酸取代27位处的甲硫氨酸。

还提供了包含SEQIDNO：1中显示的人类胃泌酸调节素(OXM)的氨基酸序列的肽，其中从N-末端起第二个氨基酸被使肽对二肽基肽酶IV切割和失活具有抗性的氨基酸取代；肽包括与肽共价连接的脂类或胆固醇部分；除了2位处的取代之外，肽任选包括1至3个氨基酸取代；肽缺少氨基酸序列RNRNNIA(SEQIDNO：104)；并且肽任选包括保护性基团，其如果存在的话，与肽的C-末端羧基相连；其中肽起到GLP-1受体和胰高血糖素受体双重激动剂的作用，并具有与人类OXM的血清半衰期相比更长的血清半衰期，及其可药用盐。

在其他情况下，在2位的氨基酸取代是选自D-丝氨酸和α-氨基异丁酸的氨基酸，胆固醇部分通过亲水性连接物与半胱氨酸的硫醇基共价连接，并且半胱氨酸残基通过肽键与肽的C-末端共价连接。在其他情况下，肽还包含在选自17、18和27位的氨基酸位置处的一个或多个氨基酸取代。在其他情况下，肽还包括一个或多个氨基酸取代，其选自谷氨酸取代17位处的精氨酸、丙氨酸取代18位处的精氨酸、正亮氨酸或O-甲基-L-高丝氨酸取代27位处的甲硫氨酸。

在上述任一种肽的其他情况下，肽包括胆固醇部分，其与位于肽的C-末端的半胱氨酸残基的硫醇基共价连接。在特定情况下，胆固醇部分通过亲水性连接物与硫醇基共价连接。亲水性连接物可以是肽或聚合物，例如包括1至10个乙氧基单元的乙氧基聚合物。在其他情况下，亲水性连接物是包括4个乙氧基单元的乙氧基聚合物。在肽的其他情况下，肽包括与共价连接到肽的C-末端的赖氨酸残基的ε-氨基共价连接的脂类部分，其在特定实施方案中是棕榈酰基。在其他实施方案中，赖氨酸残基通过连接物部分与肽的C-末端相连。在特定情况下，连接物部分包括一个或多个γ-谷氨酸残基，并且在其他情况下，连接物部分是1-氨基-4，7，10-三氧杂-13-三癸胺琥珀酰胺酸。

此外，还提供了选自表1和表2中显示的肽类似物的OXM肽类似物，以及表1和表2中显示的一种或多种OXM肽类似物在制备用于治疗代谢障碍的药物的应用。

还提供了肽类似物，其包含结构

Z₁-P-L₁-Z₂

其中P是具有下列氨基酸序列的肽

HX₁QGTFTSDYSX₂YLDX₃X₄X₅AX₆DFVQWLX₇NTK(SEQIDNO：106)

其中X₁是D-丝氨酸、α-氨基异丁酸(aib)、1-氨基-1-环丁烷羧酸(Acb)残基、1-氨基-1-环己烷羧酸(Acx)；α-氨基丁酸(Abu)；D-α-氨基丁酸(D-Abu)；氨基戊酸(Nva)；β-环丙基-丙氨酸(Cpa)；丙炔基甘氨酸(Prg)；烯丙基甘氨酸(Alg)；2-氨基-2-环己基-丙酸(2-Cha)；D-叔丁基甘氨酸(D-tbg)；乙烯基甘氨酸(Vg)；1-氨基-1-环丙烷羧酸(Acp)；或1-氨基-1-环戊烷羧酸(Acpe)；X₂是Ser(S)或Lys(K)；X₃是Ser(S)或Glu(E)；X₄是精氨酸(R)或谷氨酸(E)残基；X₅是精氨酸(R)或丙氨酸(A)残基；X₆是Gln(Q)或Lys(K)；X₇是甲硫氨酸(M)、正亮氨酸(Nle)、甲硫氨酸亚砜(m)或O-甲基-L-高丝氨酸(o)残基；

Z₁是任选存在的保护性基团，其如果存在的话，与N-末端氨基相连，L₁是任选的，但是当存在时是氨基酸序列RNRNNIA(SEQIDNO：104)或连接物部分；Z₂是任选的，但是当存在时是赖氨酸(K)残基、与脂类部分共价连接的赖氨酸残基、与胆固醇部分共价连接的赖氨酸残基、半胱氨酸(C)残基、与脂类部分共价连接的半胱氨酸残基、与胆固醇部分共价连接的半胱氨酸残基；并且P或Z₂任选包括保护性基团，其如果存在的话，与C-末端羧基相连；及其可药用盐。L₁-Z₂可以与P的C-末端氨基酸或与P的内部氨基酸相连。

在上述肽的其他情况下，Z₂是半胱氨酸残基，其在特定实施方案中，可以通过其硫醇基与胆固醇部分或脂类部分共价连接。在其他实施方案中，胆固醇部分或组成部分通过亲水性连接物与半胱氨酸的硫醇基共价连接。在特定情况下，亲水性连接物是包括1至24个乙氧基单元的乙氧基聚合物，或者在更具体情况下，亲水性连接物是包括4个乙氧基单元的乙氧基聚合物。

在上述肽的其他情况下，Z₂是赖氨酸残基，在特定实施方案中，赖氨酸的ε-氨基与胆固醇部分或组成部分直接或通过亲水性连接物共价连接。在特定实施方案中，脂类部分是棕榈酰基。

在上述肽的其他情况下，L₁是连接物部分。在特定情况下，连接物部分是亲水性连接物部分。在其他情况下，连接物部分包含一个或多个γ-谷氨酸残基，而在其他情况下，连接物部分是1-氨基-4，7，10-三氧杂-13-三癸胺琥珀酰胺酸。

在上述肽的特定实施方案中，肽包含选自OXM70(SEQIDNO：12)、OXM110(SEQIDNO：19)、OXM115(SEQIDNO：21)、OXM177(SEQIDNO：24)、OXM212(SEQIDNO：27)、OXM213(SEQIDNO：28)、OXM216(SEQIDNO：29)、OXM290(SEQIDNO：46)、OXM301(SEQIDNO：51)或OXM325(SEQIDNO：65)的结构。在上述肽的其他特定实施方案中，肽包含选自OXM237(SEQIDNO：31)、OXM238(SEQIDNO：32)、OXM259(SEQIDNO：33)、OXM260(SEQIDNO：34)、OXM261(SEQIDNO：35)、OXM262(SEQIDNO：36)、OXM263(SEQIDNO：37)、OXM264(SEQIDNO：38)、OXM265(SEQIDNO：39)、OXM266(SEQIDNO：40)、OXM267(SEQIDNO：41)、OXM268(SEQIDNO：42)、OXM306(SEQIDNO：43)、OXM307(SEQIDNO：44)和OXM308(SEQIDNO：45)的结构。

在上述肽的特定实施方案中，当肽缺少RNRNNIA(SEQIDNO：104)时，肽包含选自OXM291(SEQIDNO：47)、OXM292(SEQIDNO：48)、OXM293(SEQIDNO：49)、OXM294(SEQIDNO：50)、OXM302(SEQIDNO：52)、OXM303(SEQIDNO：53)、OXM304(SEQIDNO：54)、OXM305(SEQIDNO：55)、OXM311(SEQIDNO：56)、XM312(SEQIDNO：57)、OXM314(SEQIDNO：58)、OXM313(SEQIDNO：59)、OXM317(SEQIDNO：60)、OXM318(SEQIDNO：61)、OXM319(SEQIDNO：62)、OXM323(SEQIDNO：64)、OXM327(SEQIDNO：66)或OXM329(SEQIDNO：67)的结构。

在其他特定实施方案中，当肽缺少RNRNNIA(SEQIDNO：104)时，肽包含选自OXM345(SEQIDNO：69)、OXM355(SEQIDNO：70)、OXM357(SEQIDNO：71)、OXM359(SEQIDNO：72)、OXM361(SEQIDNO：73)、OXM373(SEQIDNO：74)、OXM374(SEQIDNO：75)、OXM380(SEQIDNO：76)、OXM381(SEQIDNO：77)、OXM383(SEQIDNO：78)、OXM388(SEQIDNO：79)、OXM392(SEQIDNO：80)、OXM395(SEQIDNO：81)、OXM398(SEQIDNO：82)、OXM399(SEQIDNO：83)、OXM400(SEQIDNO：84)、OXM401(SEQIDNO：85)、OXM404(SEQIDNO：86)、OXM406(SEQIDNO：87)、OXM407(SEQIDNO：88)、OXM408(SEQIDNO：89)、OXM410(SEQIDNO：91)、OXM411(SEQIDNO：92)、OXM412(SEQIDNO：93)、OXM414(SEQIDNO：95)、OXM415(SEQIDNO：96)、OXM416(SEQIDNO：97、OXM417(SEQIDNO：98)、OXM418(SEQIDNO：99、OXM419(SEQIDNO：100、OXM420(SEQIDNO：101)或OXM421(SEQIDNO：102)的结构。

此外，还提供了肽类似物，其包含以下结构：

Z₁-P-L₁-Z₂

其中P是具有下列氨基酸序列的肽

HX₁QGTFTSDYSX₂YLDX₃X₄X₅AX₆DFVQWLX₇NTK(SEQIDNO：106)

其中X₁是D-丝氨酸、α-氨基异丁酸(aib)、1-氨基-1-环丁烷羧酸(Acb)残基、1-氨基-1-环己烷羧酸(Acx)；α-氨基丁酸(Abu)；D-α-氨基丁酸(D-Abu)；氨基戊酸(Nva)；β-环丙基-丙氨酸(Cpa)；丙炔基甘氨酸(Prg)；烯丙基甘氨酸(Alg)；2-氨基-2-环己基-丙酸(2-Cha)；D-叔丁基甘氨酸(D-tbg)；乙烯基甘氨酸(Vg)；1-氨基-1-环丙烷羧酸(Acp)或1-氨基-1-环戊烷羧酸(Acpe)；X₂是Ser(S)或Lys(K)；X₃是Ser(S)或Glu(E)；X₄是精氨酸(R)或谷氨酸(E)残基；X₅是精氨酸(R)或丙氨酸(A)残基；X₆是Gln(Q)或Lys(K)；X₇是甲硫氨酸(M)、正亮氨酸(Nle)、甲硫氨酸亚砜(m)或O-甲基-L-高丝氨酸(o)残基；

Z₁是任选存在的保护性基团，其如果存在的话，与N-末端氨基相连，L₁是任选的，但是当存在时是连接物部分；Z₂是任选的，但是当存在时是赖氨酸(K)残基、与脂类部分共价连接的赖氨酸残基、与胆固醇部分共价连接的赖氨酸残基、半胱氨酸(C)残基、与脂类部分共价连接的半胱氨酸残基、与胆固醇部分共价连接的半胱氨酸残基；并且P或Z₂任选包括保护性基团，其如果存在的话，与C-末端羧基相连；及其可药用盐。L₁-Z₂可以与P的C-末端氨基酸或与P的内部氨基酸相连。

在上述肽的其他情况下，Z₂是半胱氨酸残基，其在特定实施方案中，可以通过其硫醇基与胆固醇部分或脂类部分共价连接。在其他实施方案中，胆固醇部分或脂类部分通过亲水性连接物与半胱氨酸的硫醇基共价连接。在特定情况下，亲水性连接物是包括1至24个乙氧基单元的乙氧基聚合物，或者在更具体情况下，亲水性连接物是包括4个乙氧基单元的乙氧基聚合物。

在上述肽的其他情况下，Z₂是赖氨酸残基，在特定实施方案中，赖氨酸的ε-氨基与胆固醇部分或脂类部分直接或通过亲水性连接物共价连接。在特定实施方案中，脂类部分是棕榈酰基。

在上述肽的特定实施方案中，肽包含选自OXM291(SEQIDNO：47)、OXM292(SEQIDNO：48)、OXM293(SEQIDNO：49)、OXM294(SEQIDNO：50)、OXM302(SEQIDNO：52)、OXM303(SEQIDNO：53)、OXM304(SEQIDNO：54)、OXM305(SEQIDNO：55)、OXM311(SEQIDNO：56)、OXM312(SEQIDNO：57)、OXM314(SEQIDNO：58)、OXM313(SEQIDNO：59)、OXM317(SEQIDNO：60)、OXM318(SEQIDNO：61)、OXM319(SEQIDNO：62)、OXM323(SEQIDNO：64)、OXM327(SEQIDNO：66)或OXM329(SEQIDNO：67)的结构。

在其他特定实施方案中，肽包含选自OXM345(SEQIDNO：69)、OXM355(SEQIDNO：70)、OXM357(SEQIDNO：71)、OXM359(SEQIDNO：72)、OXM361(SEQIDNO：73)、OXM373(SEQIDNO：74)、OXM374(SEQIDNO：75)、OXM380(SEQIDNO：76)、OXM381(SEQIDNO：77)、OXM383(SEQIDNO：78)、OXM388(SEQIDNO：79)、OXM392(SEQIDNO：80)、OXM395(SEQIDNO：81)、OXM398(SEQIDNO：82)、OXM399(SEQIDNO：83)、OXM400(SEQIDNO：84)、OXM401(SEQIDNO：85)、OXM404(SEQIDNO：86)、OXM406(SEQIDNO：87)、OXM407(SEQIDNO：88)、OXM408(SEQIDNO：89)、OXM410(SEQIDNO：91)、OXM411(SEQIDNO：92)、OXM412(SEQIDNO：93)、OXM414(SEQIDNO：95)、OXM415(SEQIDNO：96)、OXM416(SEQIDNO：97)、OXM417(SEQIDNO：98)、OXM418(SEQIDNO：99)、OXM419(SEQIDNO：100)、OXM420(SEQIDNO：101)或OXM421(SEQIDNO：102)的结构。

还提供了肽类似物，其包含结构

Z₁-P-L₁-Z₂

其中P是具有下列氨基酸序列的肽

HX₁QGTFTSDYSX₂YLDX₃X₄X₅AX₆DFVQWLX₇NTKRNRNNIA(SEQIDNO：107)

在上述肽的特定实施方案中，肽包含选自OXM290(SEQIDNO：46)、OXM301(SEQIDNO：51)、OXM321(SEQIDNO：63)、OXM325(SEQIDNO：65)或OXM330(SEQIDNO：68)的结构。

在上述肽的其他特定实施方案中，肽包含选自OXM70(SEQIDNO：12)、OXM110(SEQIDNO：19)、OXM115(SEQIDNO：21)、OXM177(SEQIDNO：24)、OXM212(SEQIDNO：27)、OXM213(SEQIDNO：28)或OXM216(SEQIDNO：29)的结构。

在上述肽的其他特定实施方案中，肽包含选自OXM237(SEQIDNO：31)、OXM238(SEQIDNO：32)、OXM259(SEQIDNO：33)、OXM260(SEQIDNO：34)、OXM261(SEQIDNO：35)、OXM262(SEQIDNO：36)、OXM263(SEQIDNO：37)、OXM264(SEQIDNO：38)、OXM265(SEQIDNO：39)、OXM266(SEQIDNO：40)、OXM267(SEQIDNO：41)、OXM268(SEQIDNO：42)、OXM306(SEQIDNO：43)、OXM307(SEQIDNO：44)和OXM308(SEQIDNO：45)的结构。

还提供了肽类似物，其是GLP-1/胰高血糖素受体(GCGR)双重激动剂，并具有低于6.0的pI。已发现包含胆固醇或脂肪酸部分并具有低于6的pI的肽类似物，具有降低的刺激肥大细胞脱颗粒的能力，正如使用人类肥大细胞系LAD2通过体外反向筛选测定法所确定的。因此，还提供了肽类似物，其包含氨基酸序列HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK(SEQIDNO：109)，其中从肽的N-末端起第二个氨基酸被使肽对二肽基肽酶IV切割和失活具有抗性的氨基酸取代；肽包括脂类或胆固醇部分，其通过包含一个或多个γ-谷氨酸残基的间隔物与肽共价连接；除了2位处的取代之外，肽任选包括1至3个氨基酸取代；并且肽任选包括保护性基团，其如果存在的话，与肽的C-末端羧基相连；其中肽类似物具有低于6.0的pI，并且是双重的GLP-1受体激动剂和胰高血糖素受体激动剂，及其可药用盐。在特定情况下，肽类似物具有介于4至6之间的pI，或约5.0的pI，例如约5.4的pI。

在其他情况下，取代从肽类似物的N-末端起第二个氨基酸的氨基酸选自D-丝氨酸、α-氨基异丁酸和1-氨基-1-环丁烷羧酸。

在特定情况下，肽类似物包括与半胱氨酸残基的硫醇基共价连接的胆固醇部分，所述半胱氨酸残基通过包含一个或多个γ-谷氨酸残基的间隔物与位于肽类似物C-末端的赖氨酸残基的ε-氨基共价连接。在其他实施方案中，胆固醇部分通过亲水性连接物与硫醇基共价连接，所述亲水性连接物在特定实施方案中是包括1至12个乙氧基单元的乙氧基聚合物，例如包括4个乙氧基单元的乙氧基聚合物。

在特定情况下，肽类似物包括与赖氨酸残基的ε-氨基共价连接的脂类部分：在特定实施方案中，脂类部分是脂肪酸例如棕榈酰基、豆蔻酰基或硬脂酰基部分。在其他实施方案中，脂类部分通过一个或多个γ-谷氨酸残基与赖氨酸残基的ε-氨基共价连接。在其他实施方案中，脂类部分通过一个或多个γ-谷氨酸残基与位于C-末端的赖氨酸残基的ε-氨基共价连接。在其他实施方案中，脂类部分通过一个或多个γ-谷氨酸残基与赖氨酸残基的ε-氨基共价连接，并且赖氨酸残基通过一个或多个γ-谷氨酸残基与位于C-末端的赖氨酸残基相连。

在其他情况下，肽类似物还包括一个或多个在选自10、12、16、17、18和27位的氨基酸位置处的氨基酸取代。在特定实施方案中，肽类似物包括一个或多个氨基酸取代，其选自赖氨酸取代10位处的酪氨酸、丝氨酸取代12位处的赖氨酸、谷氨酸或氨基异丁酸取代16位处的丝氨酸、谷氨酸取代17位处的精氨酸、丙氨酸取代18位处的精氨酸、赖氨酸取代20位处的谷氨酰胺以及正亮氨酸或O-甲基-L-高丝氨酸取代27位处的甲硫氨酸。

在其他实施方案中，肽类似物中位于10位处的酪氨酸被赖氨酸取代，并且脂类部分通过一个或多个γ-谷氨酸残基与赖氨酸残基的ε-氨基共价连接。在另一个实施方案中，肽类似物中位于20位处的谷氨酰胺被赖氨酸取代，并且脂类部分通过一个或多个γ-谷氨酸残基与赖氨酸的ε-氨基共价连接。在任一实施方案中，肽类似物还包括与C-末端共价连接的一个或多个γ-谷氨酸残基。

还提供了肽类似物，其包含结构

Z₁-P-M-Z₂

其中P是具有下列氨基酸序列的肽

HX₁QGTFTSDX₂SX₃YLDX₄X₅X₆AX₇DFVQWLX₈NTKX₉X₁₀(SEQIDNO：110)

其中X₁是D-丝氨酸、α-氨基异丁酸(aib)、1-氨基-1-环丁烷羧酸(Acb)残基、1-氨基-1-环己烷羧酸(Acx)；α-氨基丁酸(Abu)；D-α-氨基丁酸(D-Abu)；氨基戊酸(Nva)；β-环丙基-丙氨酸(Cpa)；丙炔基甘氨酸(Prg)；烯丙基甘氨酸(Alg)；2-氨基-2-环己基-丙酸(2-Cha)；D-叔丁基甘氨酸(D-tbg)；乙烯基甘氨酸(Vg)；1-氨基-1-环丙烷羧酸(Acp)；或1-氨基-1-环戊烷羧酸(Acpe)残基；X₂是酪氨酸(Y)或赖氨酸(K)残基；X₃是丝氨酸(S)或赖氨酸(K)残基；X₄是丝氨酸(S)、α-氨基异丁酸(aib)或谷氨酸(E)残基；X₅是精氨酸(R)或谷氨酸(E)残基；X₆是精氨酸(R)或丙氨酸(A)残基；X₇是谷氨酰胺(Q)或赖氨酸(K)残基；X₈是甲硫氨酸(M)、正亮氨酸(Nle)、甲硫氨酸亚砜(m)或O-甲基-L-高丝氨酸(o)残基；X₉是γ-谷氨酸(γGlu)残基；X₁₀是γ-谷氨酸(γGlu)残基或空缺；Z₁是任选存在的保护性基团，其如果存在的话，与N-末端氨基相连，M是(i)通过亲水性连接物与胆固醇部分共价连接的半胱氨酸残基，(ii)通过包含一个或多个γ-谷氨酸残基的间隔物与脂类部分共价连接的赖氨酸残基，或(iii)脂类部分，其中M通过包含一个或多个γ-谷氨酸残基的间隔物与P的C-末端或内部氨基酸共价连接；并且Z₂是任选存在的保护性基团，其如果存在的话，与C-末端羧基相连；及其可药用盐，其中肽类似物或其盐具有低于6.0的pI，并且是双重的GLP-1受体激动剂和胰高血糖素受体激动剂。在特定情况下，肽类似物具有介于4至6之间的pI，或约5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8或5.9的pI，或约5.4至5.5的pI。

在肽类似物的其他情况下，M是通过亲水性连接物与胆固醇部分共价连接的半胱氨酸残基，并且半胱氨酸残基与P的C-末端相连。在其他实施方案中，亲水性连接物是包括1至24个乙氧基单元的乙氧基聚合物，其在特定情况下可以包括例如4个乙氧基单元。

在其他情况下，M是通过包含一个或多个γ-谷氨酸残基的间隔物与脂类部分共价连接的赖氨酸残基，并且赖氨酸残基与P的C-末端相连，或者M是通过包含一个或多个γ-谷氨酸残基的间隔物与脂类部分共价连接的赖氨酸残基，并且赖氨酸残基位于P的X₂或X₇位。在特定情况下，脂类部分是棕榈酰基、豆蔻酰基或硬脂酰基部分。

在特定情况下，肽类似物是OXM317(SEQIDNO：60)、OXM318(SEQIDNO：61)、OXM319(SEQIDNO：62)、OXM323(SEQIDNO：64)、OXM327(SEQIDNO：66)或OXM329(SEQIDNO：67)。在其他情况下，肽类似物是OXM345(SEQIDNO：69)、OXM355(SEQIDNO：70)、OXM357(SEQIDNO：71)、OXM359(SEQIDNO：72)、OXM361(SEQIDNO：73)、OXM373(SEQIDNO：74)、OXM374(SEQIDNO：75)、OXM380(SEQIDNO：76)、OXM381(SEQIDNO：77)、OXM383(SEQIDNO：78)、OXM388(SEQIDNO：79)、OXM392(SEQIDNO：80)、OXM395(SEQIDNO：81)、OXM398(SEQIDNO：82)、OXM399(SEQIDNO：83)、OXM400(SEQIDNO：84)、OXM401(SEQIDNO：85)、OXM404(SEQIDNO：86)、OXM406(SEQIDNO：87)、OXM407(SEQIDNO：88)、OXM408(SEQIDNO：89)、OXM410(SEQIDNO：91)、OXM411(SEQIDNO：92)、OXM412(SEQIDNO：93)、OXM414(SEQIDNO：95)、OXM415(SEQIDNO：96)、OXM416(SEQIDNO：97)、OXM417(SEQIDNO：98)、OXM418(SEQIDNO：99)、OXM419(SEQIDNO：100)、OXM420(SEQIDNO：101)或OXM421(SEQIDNO：102)。

还提供了任一种上述肽及其可药用盐在制造用于治疗代谢障碍的药物中的应用。

定义

GLP-1激动剂是与GLP-1受体结合并刺激与GLP-1相同的生物活性的肽、小分子或化学化合物。在一个实施方案中，GLP-1受体的激动剂以与天然GLP-1相比至少1％的亲和性与受体结合。在另一个实施方案中，GLP-1受体的激动剂以与天然GLP-1相比相等或更高的亲和性与受体结合。

胰高血糖素激动剂是与胰高血糖素受体结合并刺激与胰高血糖素所做的相同的生物活性的肽、小分子或化学化合物。在一个实施方案中，胰高血糖素受体的激动剂以与天然胰高血糖素相比至少1％的亲和性与受体结合。在另一个实施方案中，胰高血糖素受体的激动剂以与天然胰高血糖素相比相等或更高的亲和性与受体结合。

当在本文中使用时，“GLP1/胰高血糖素受体双重激动剂”是“GLP1受体/胰高血糖素受体共同激动剂分子”，其对胰高血糖素受体和GLP1受体两者都显示出活性。一般来说，双重的GLP1受体激动剂和胰高血糖素受体激动剂，对胰高血糖素受体表现出相对于天然胰高血糖素至少约10％的活性，并且也对GLP-1受体表现出相对于天然GLP-1至少约10％的活性。

附图简述

图1显示了比较天然OXM与OXM(Q3E)的糖原分解作用的离体测定的结果。该图显示，天然OXM以剂量依赖性方式诱导糖原分解作用，在1.5nM下诱导完全的糖原分解作用并具有0.5nM的近似EC₅₀，而OXM-Q3E在300nM下只诱导约58％，与其不良的GCGR激动剂效能相一致。

图2显示了体内GCG受体占据实验的结果，其显示出胰高血糖素(GCG)在1.5mpk下给出84％的GCGR占有率，3mpk的OXM给出31％的GCGR占有率，但是OXM-Q3E给出0％的GCGR占有率。

图3A和3B分别显示了对OXM和OXM-Q3E做出响应的血糖水平和葡萄糖输注率。

图4显示了在瘦小鼠中皮下(s.c.)给药OXM和OXM-Q3E的腹膜内葡萄糖耐受测试的结果。

图5A显示了在灌注肝脏中，在OXM70、OXM110、OXM177、OXM115和OXM216存在下糖原分解作用的离体测量。

图5B显示了在野生型小鼠中，在竞争测定法中，皮下(s.c.)或静脉内(i.v.)给药OXM70、OXM110、OXM177、OXM115和OXM216后与天然OXM相比的GGCR占有率。

图6概述了OXM70对于在已建立的DIO小鼠中降低摄食量和体重的剧烈体内效能。在约2小时和18小时后测量摄食量。也测量了18小时时(过夜)的体重变化(*与介质相比P＜0.05，n＝每组5-6只)。

图7概述了OXM110和OXM177对于在已建立的DIO小鼠中降低摄食量和体重的急性体内效能。在约2小时和18小时后测量摄食量。也测量18小时时(过夜)的体重变化(*与介质相比P＜0.05，n＝每组5-6只)。

图8概述了OXM216、OXM115和OXM177对于在已建立的DIO小鼠中降低摄食量和体重的急性体内效能。在约2小时和18小时后测量摄食量。也测量18小时时(过夜)的体重变化(*与介质相比P＜0.05，n＝每组5-6只)。

图9A-D显示了在DIO小鼠中对OXM肽类似物OXM110、OXM177和OXM115进行的长期体重和摄食量研究的药理学终点。图9A显示了摄食量的累积变化。图9B显示了体重的累积变化。图9C显示了在研究的几天内的基础血糖水平。图9D显示了在研究的第13天进行的IPGTT测定。

图10显示了在瘦小鼠中皮下给药OXM70的腹膜内葡萄糖耐受测试(IPGTT)的结果。

图11显示了在瘦小鼠中皮下给药OXM110的腹膜内葡萄糖耐受测试(IPGTT)的结果。

图12显示了在瘦小鼠中皮下给药OXM177的腹膜内葡萄糖耐受测试(IPGTT)的结果。

图13显示了在瘦小鼠中皮下给药OXM115的腹膜内葡萄糖耐受测试(IPGTT)的结果。

图14A显示了OXM115对DIO小鼠中代谢率影响随时间的变化。

图14B显示了由OXM115在DIO小鼠中引起的代谢率变化百分数。

图15概述了几种+/+肽对于在已建立的DIO小鼠中降低摄食量和体重的急性体内效能。

图16显示了进食后单剂使用几种+/+肽对于在已建立的DIO小鼠中降低摄食量和体重的影响。

发明详述

基于OXM的治疗具有有利影响肥胖症以及尚需仔细定性的对改善糖尿病的相伴效应的潜力。在外周给药OXM后的降低体重效能和摄食量降低，已在人类中得到很好验证(Wynne等，Diabetes54：2390-2395(2005))。更近些时候，已经显示OXM在肥胖对象中增加代谢率以及特别是活动相关的能量消耗(Wynne等，Int.J.Obes.30：1729-1736(2006)，2006年4月18日预先在线发表；doi：10.1038/sj.ijo.0803344)。也已显示，OXM在人类中降低体重(参见例如已发表的国际专利申请号WO03/022304、WO2004/062685和WO2006/134340)；然而，OXM肽和类似的双重GLP-1受体/胰高血糖素受体(GLP-1R/GCGR)激动剂对不依赖于体重的血糖控制的影响，还没有系统地研究。OXM对胰高血糖素受体和GLP-1受体两者具有激动剂活性的能力，使其成为对于希望治疗与胰高血糖素和GLP-1受体正面相互作用的代谢疾病的治疗来说有吸引力的候选者。

OXM(和GLP-1)具有非常短的半衰期，并被细胞表面的二肽基肽酶IV(DPP-IV)快速失活。可以在OXM肽中引入突变以使肽对DPP-IV切割具有抗性；然而，也已发现这些突变中的许多使天然肽失活，或者不利地影响肽与胰高血糖素受体(GCGR)或GLP-1受体(GLP-1R)相互作用的能力(参见已发表的国际专利申请号WO2007/100535，在此以其全文引为参考)。OXM(和GLP-1)也被肾脏快速清除。肽与大体积取代基例如聚乙二醇的偶联能够降低肽的肾清除率；然而，当这些大体积取代基被引入到OXM肽中时，发现得到的许多OXM肽类似物与胰高血糖素受体有效相互作用的能力降低或消失。在能够推进基于给药OXM肽的有效的代谢疾病疗法之前，需要解决与稳定性和药物动力学相关的问题。

本文公开的OXM肽类似物解决了这些问题。

首先，通过突变DPP-IV切割位点(位于N-末端的倒数第二位残基)和脂化OXM肽以增加体内半衰期(t_1/2)，解决了由DPP-IV切割和快速肾清除导致的天然OXM和GLP-1的有限的体内稳定性，这是在人类中以高剂量频繁给药(每日三次皮下注射OXM，连续灌注GLP-1)所必需的。预计脂化(例如乙酰化或与胆固醇部分偶联)的OXM肽类似物在人类中的t_1/2将适合于至少每日一次给药。本文公开的OXM肽类似物与需要每日三次给药的天然OXM相比对于治疗目的来说更加方便。其次，预期本发明的多肽在人类中的耐受性情况与天然OXM相似，其可能优于常规的GLP-1模拟物例如艾塞那肽(exenatide)和利拉鲁肽(liraglutide)的情况。因此，由于极少的恶心和呕吐，本文公开的OXM类似物的长期效能可能优于常规的GLP-1模拟物例如Byetta(AmylinPharmaceuticals)，所述恶心和呕吐典型是GLP-1模拟物剂量的限制因素。与后者不同，本发明的多肽可能不需要剂量滴定来减轻恶心。

第三，还没有进行系统的研究来评估改进血糖控制的潜力。因为OXM是胰高血糖素受体的强力激动剂，因此预计长期给药将导致血糖控制受损(高血糖)。然而，出人意料的是，本文公开的引入了平衡的GLP-1受体和GCGR共激动作用的OXM类似物，在长期给药时引起增加的摄食量和体重降低，并导致葡萄糖耐受性提高。具有GLP-1受体(GLP-1R)和胰高血糖素受体(GCGR)双重激动剂活性的OXM肽类似物在本文中表示成(+/+)。仅仅是GLP-1激动剂的OXM肽类似物在本文中表示成(+/0)。

生产长效OXM肽类似物不是一帆风顺的。我们的最初研究聚焦于大体积聚乙二醇(PEG)取代基在整个肽中有希望的位置处的位点特异性偶联。令人吃惊的是，在所有测试位置处添加PEG导致GCGR和/或GLP-1R效能的显著降低。因此，我们研究了改进药物动力学性质并同时维持GCGR活性的其他方法。在肽中的各个位置添加胆固醇偶联物表明C-末端偶联是最有利的方法。然而，体外和体内研究表明，胆固醇化导致显著的血清效价漂移和体内效能降低。因此，进一步研究导致在肽与胆固醇基团之间包含不常见的亲水性连接物，或向C-末端残基直接添加酰基链。

可以使用本公开的OXM类似物的主要适应症是肥胖症和/或糖尿病的治疗。次级适应症是代谢综合征、高血糖、禁食血糖受损和其他糖尿病前期状态。其他适应症包括GLP-1的所有适应症，例如过敏性肠综合征和肠的其他吸收疾病、局部缺血、中风和神经障碍包括焦虑、认知受损和阿茨海默氏病。

根据已发表的使用OXM的人类研究，预期本文公开的OXM类似物与当前的抗肥胖症药剂例如常见副作用分别为GI不耐受(腹泻、胃肠气胀)和高血压的奥利司他(Xenical(Roche)，一种脂肪酶抑制剂)和西布曲明(Meridia(AbbottLaboratories)，一种血清素/去甲肾上腺素重吸收抑制剂)相比，显示出如果不是更优也是至少相当的效能和更好的安全性情况。

在特定情况下，OXM肽类似物任选包括与N-末端氨基共价连接的保护性基团。与肽的N-末端氨基共价连接的保护性基团降低了氨基端在体内条件下的反应性。氨基保护性基团包括-C_1-10烷基、-C_1-10取代烷基、-C_2-10烯基、-C_2-10取代烯基、芳基、-C_1-6烷基芳基、-C(O)-(CH₂)_1-6-COOH、-C(O)-C_1-6烷基、-C(O)-芳基、-C(O)-O-C_1-6烷基或-C(O)-O-芳基。在特定实施方案中，氨基端保护性基团选自乙酰基、丙基、琥珀酰基、苯甲基、苯甲基氧基羰基和叔丁基氧基羰基。N-末端氨基酸的脱胺是可以考虑用来降低氨基端在体内条件下的反应性的另一种修饰。

可以修饰OXM肽类似物以使保护性基团与C-末端羧基共价连接，其降低了羧基端在体内条件下的反应性。例如，肽的羧酸基团，无论是在羧基端还是侧链上，可以提供成可药用阳离子的盐的形式，或酯化形成C_1-6酯，或转变成式NRR₂的酰胺，其中R和R₂各自独立地是H或C_1-6烷基，或组合形成杂环例如5-或6员环。羧基端保护性基团优选连接到最后一个氨基酸的α-羰基上。羧基端保护性基团包括但不限于酰胺、甲酰胺和乙酰胺。肽的氨基，无论是N-末端还是侧链上的，可以采取可药用酸加成盐的形式例如HCl、HBr、乙酸、苯甲酸、甲苯磺酸、马来酸、酒石酸和其他有机酸盐，或者可以修饰成C_1-6烷基或二烷基氨基，或进一步转变成酰胺。

能够用作双重GLP-1和胰高血糖素激动剂的OXM肽类似物包含SEQIDNO：1中显示的人类胃泌酸调节素(OXM)的氨基酸序列，其中从N-末端起第二个氨基酸被使肽对二肽基肽酶IV切割和失活具有抗性的氨基酸取代；与OXM肽类似物共价连接的脂类或胆固醇部分；除了2位处的取代之外，任选的1至3个氨基酸取代；并且任选具有保护性基团，其如果存在的话，与肽的C-末端羧基相连。在其他实施方案中，肽类似物还缺少氨基酸序列RNRNNIA(SEQIDNO：104)。一般来说，具有上述结构的OXM肽类似物将起到GLP-1受体和胰高血糖素受体双重激动剂的作用，并具有高于天然人类OXM的血清半衰期的血清半衰期。

在更具体的实施方案中，OXM肽类似物可以由下列结构表示

Z₁-P-L₁-Z₂

其中P是具有下列氨基酸序列的肽

HX₁QGTFTSDYSKYLDSX₂X₃AQDFVQWLX₄NTK(SEQIDNO：103)

其中X₁是D-丝氨酸或α-氨基异丁酸(aib)残基；X₂是精氨酸(R)或谷氨酸(E)残基；X₃是精氨酸(R)或丙氨酸(A)残基；X₄是甲硫氨酸(M)、正亮氨酸(Nle)或O-甲基-L-高丝氨酸(o)残基；

在其他实施方案中，OXM肽类似物可以由下列结构表示：

Z₁-P-L₁-Z₂

其中P是具有下列氨基酸序列的肽

HX₁QGTFTSDYSKYLDSX₂X₃AQDFVQWLX₄NTK(SEQIDNO：103)

在其他实施方案中，OXM肽类似物可以由下列结构表示：

Z₁-P-L₁-Z₂

其中P是具有下列氨基酸序列的肽

HX₁QGTFTSDYSKYLDSX₂X₃AQDFVQWLX₄NTKRNRNNIA(SEQIDNO：105)

其中X₁是D-丝氨酸、α-氨基异丁酸(aib)、1-氨基-1-环丁烷羧酸(Acb)残基、1-氨基-1-环己烷羧酸(Acx)；α-氨基丁酸(Abu)；D-α-氨基丁酸(D-Abu)；氨基戊酸(Nva)；β-环丙基-丙氨酸(Cpa)；丙炔基甘氨酸(Prg)；烯丙基甘氨酸(Alg)；2-氨基-2-环己基-丙酸(2-Cha)；D-叔丁基甘氨酸(D-tbg)；乙烯基甘氨酸(Vg)；1-氨基-1-环丙烷羧酸(Acp)；或1-氨基-1-环戊烷羧酸(Acpe)；X₂是精氨酸(R)或谷氨酸(E)残基；X₃是精氨酸(R)或丙氨酸(A)残基；X₄是甲硫氨酸(M)、正亮氨酸(Nle)或O-甲基-L-高丝氨酸(o)残基；

在其他特定实施方案中，OXM肽类似物可以由下列结构表示：

Z₁-P-L₁-Z₂

其中P是具有下列氨基酸序列的肽：

HX₁QGTFTSDYSX₂YLDX₃X₄X₅AX₆DFVQWLX₇NTK(SEQIDNO：106)

在其他实施方案中，OXM肽类似物可以由下列结构表示：

Z₁-P-L₁-Z₂

其中P是具有下列氨基酸序列的肽：

HX₁QGTFTSDYSX₂YLDX₃X₄X₅AX₆DFVQWLX₇NTK(SEQIDNO：106)

在其他实施方案中，OXM肽类似物可以由下列结构表示

Z₁-P-L₁-Z₂

其中P是具有下列氨基酸序列的肽

HX₁QGTFTSDYSX₂YLDX₃X₄X₅AX₆DFVQWLX₇NTKRNRNNIA(SEQIDNO：107)

在其他特定实施方案中，OXM肽类似物可以由下列结构表示

Z₁-P-L₁-Z₂

其中P是具有下列氨基酸序列的肽

HX₁QGTFTSDX₂SX₃YLDX₄X₅X₆AX₇DFVQWLX₈NTKX₉(SEQIDNO：108)

其中X₁是D-丝氨酸、α-氨基异丁酸(aib)、1-氨基-1-环丁烷羧酸(Acb)残基、1-氨基-1-环己烷羧酸(Acx)；α-氨基丁酸(Abu)；D-α-氨基丁酸(D-Abu)；氨基戊酸Nva)；β-环丙基-丙氨酸(Cpa)；丙炔基甘氨酸(Prg)；烯丙基甘氨酸(Alg)；2-氨基-2-环己基-丙酸(2-Cha)；D-叔丁基甘氨酸(D-tbg)；乙烯基甘氨酸(Vg)；1-氨基-1-环丙烷羧酸(Acp)；或1-氨基-1-环戊烷羧酸(Acpe)残基；X₂是Tyr或Lys；X₃是Ser(S)或Lys(K)；X₄是Ser(S)或Glu(E)；X₅是精氨酸(R)或谷氨酸(E)残基；X₆是精氨酸(R)或丙氨酸(A)残基；X₇是Gln(Q)或Lys(K)；X₈是甲硫氨酸(M)、正亮氨酸(Nle)、甲硫氨酸亚砜(m)或O-甲基-L-高丝氨酸(o)残基；X₉是任选的，但是当存在时是一个或多个γ-谷氨酸残基。

在每个上述实施方案中，脂类或胆固醇部分可以与氨基酸的侧链直接或间接相连。当脂类或胆固醇部分与氨基酸侧链间接相连时，脂类或胆固醇部分通过连接物部分与氨基酸侧链间接相连。在特定情况下，脂类或胆固醇与氨基酸的侧链直接相连，然后其通过连接物部分(L₁)与OXM肽类似物相连。

在本文公开的OXM类似物的特定实施方案中，当16和20位残基分别为Glu和Lys时，所述残基的侧链可以参与所述Glu和Lys残基之间的内酰胺桥。

在许多实施方案中，连接物部分是亲水性连接物。然而，连接物部分的化学结构不是关键的，因为它主要用作间隔物。但是，在某些实施方案中，连接物部分自身可以为OXM肽类似物提供改进的性质。连接物部分的实例包括但不限于氨基酸和肽；烷基连接物例如-NH-(CH₂)_s-C(O)-，其中s＝2-20，这些烷基连接物可以被任何非空间位阻基团例如短链烷基(例如C_1-6)、短链酰基、卤素(例如Cl、Br)、CN、NH₂、苯基等进一步取代；包括1至12个乙氧基单元的乙氧基聚合物；Ttds(1-氨基-4，7，10-三氧杂-13-三癸胺-琥珀酰胺酸)；以及1、2、3个或更多个γ-谷氨酸残基。

一般来说，连接物部分与肽(P)的C-末端氨基酸共价连接，并且Z₂与连接物部分共价连接。在特定情况下，连接物部分与P的内部氨基酸共价连接，并且Z₂与连接物部分共价连接。在其他情况下，当L₁-Z₂与P的内部氨基酸共价连接时，X₉可以包括一个或多个γ-谷氨酸残基。

OXM肽类似物包括非对映异构体及其消旋和拆分的对映异构纯形式。一般来说，氨基酸采取L-型，其中特定氨基酸采取D-型。正如本技术领域中已知的，各个氨基酸可以如下表示：A＝Ala＝丙氨酸；C＝Cys＝半胱氨酸；D＝Asp＝天冬氨酸；E＝Glu＝谷氨酸；F＝Phe＝苯丙氨酸；G＝Gly＝甘氨酸；H＝His＝组氨酸；I＝Ile＝异亮氨酸；K＝Lys＝赖氨酸；L＝Leu＝亮氨酸；M＝Met＝甲硫氨酸；N＝Asn＝天冬酰胺；P＝Pro＝脯氨酸；Q＝Gln＝谷氨酰胺；R＝Arg＝精氨酸；S＝Ser＝丝氨酸；T＝Thr＝苏氨酸；V＝Val＝缬氨酸；W＝Trp＝色氨酸；并且Y＝Tyr＝酪氨酸。

表1显示了基于对胰高血糖素受体和GLP-1受体两者具有活性(+/+)的全长OXM分子的多种代表性OXM肽类似物。OXM肽类似物OXM29、208、209和229是用于与溴代胆固醇部分进行偶联反应的肽类似物前体(硫醇化肽)。

OXM肽类似物OXM36和OXM115从OXM229制备，后者包括天然的人类OXM肽，但是在第二个氨基酸位置处具有D-丝氨酸，在C-末端处的肽键中具有半胱氨酸残基，并且其中C-末端羧基已被酰胺化。OXM36具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTKRNRNNIAC₄-CONH₂(SEQIDNO：8)，其中C₄是半胱氨酸残基，其中胆甾-5-烯-3-基{[(2R)-3-氨基-2-(氨基)-3-氧基丙基]硫代}乙酸酯如下所示与其共价连接。

OXM115具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTKRNRNNIAC₇-CONH₂(SEQIDNO：21)，其中C₇是如下所示的胆甾-5-烯-3-基1-{[(2R)-3-氨基-2-(氨基)-3-氧基丙基]硫代}-2-氧基-6，9，12，15-四氧杂-3-氮杂十八碳-18-酸酯(或Cys(氧杂₄-胆固醇))。

C₇与C₄的差异在于它在胆固醇基团与半胱氨酸部分之间具有由四个乙二醇重复(乙氧基单元)形成的亲水性间隔物。C₇基团增加了得到的肽-胆固醇偶联物的溶解性。此外，在存在血清血浆的情况下，肽-C₇偶联物与肽-C₄偶联物相比显示出不太显著的血清漂移。发现这对于维持对两种受体GLP-1R和胰高血糖素受体的最优平衡活性是重要的。实施例中显示的结果说明了这种情况。

OXM肽类似物OXM70和OXM216从OXM29制备，后者包括天然的人类OXM肽，但是在第二个氨基酸位置处具有α-氨基异丁酸，在C-末端处的肽键中具有半胱氨酸残基，并且其中C-末端羧基已被酰胺化。OXM70具有结构HαQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTKRNRNNIAC₄-CONH₂(SEQIDNO：12)，其中C₄是如对OXM36所示的胆甾-5-烯-3-基{[(2R)-3-氨基-2-(氨基)-3-氧基丙基]硫代}乙酸酯。OXM216具有结构HαQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTKRNRNNIAC₇-CONH₂(SEQIDNO：29)，其中C₇是如对OXM115所示的胆甾-5-烯-3-基1-{[(2R)-3-氨基-2-(氨基)-3-氧基丙基]硫代}-2-氧基-6，9，12，15-四氧杂-3-氮杂十八碳-18-酸酯(或Cys(氧杂₄-胆固醇))。

OXM肽类似物OXM212从OXM208制备，后者包括天然的人类OXM肽，但是在第二个氨基酸位置处具有α-氨基异丁酸，27位处的甲硫氨酸残基被正亮氨酸取代，在C-末端处的肽键中具有半胱氨酸残基，并且其中C-末端羧基已被酰胺化。OXM212具有结构HαQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLnNTKRNRNNIAC₄-CONH₂(SEQIDNO：26)，其中C₄是如对OXM36所示的胆甾-5-烯-3-基{[(2R)-3-氨基-2-(氨基)-3-氧基丙基]硫代}乙酸酯。

OXM肽类似物OXM213从OXM209制备，后者包括天然的人类OXM肽，但是在第二个氨基酸位置处具有α-氨基异丁酸，27位处的甲硫氨酸残基被O-甲基-L-高丝氨酸取代，在C-末端处的肽键中具有半胱氨酸残基，并且其中C-末端羧基已被酰胺化。OXM213具有结构HαQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLYNTKRNRNNIAC₄-CONH₂(SEQIDNO：28)，其中C₄是如OXM36所示的胆甾-5-烯-3-基{[(2R)-3-氨基-2-(氨基)-3-氧基丙基]硫代}乙酸酯。

OXM237具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLmNTKRNRNNIAC₇-CONH₂(SEQIDNO：31)。它被设计成在2位处包含D-Ser(s)，在27位处包含Met(O)，并在38位处包含Cys(氧杂₄-胆固醇)(C₇)。

OXM238被设计成在2位处包含D-Ser(s)，在27位处包含Met(O)，并在38位处包含Cys(乙酰胺)(C₅)。该肽具有与OXM237相同的肽序列，并且是不用胆固醇而是用乙酰胺阻断半胱氨酸的硫醇基的对照肽。

OXM259-OXM268和OXM306-308(如表1中所示)具有OXM的氨基酸序列，但是其中2位处的氨基酸已被非天然氨基酸取代，以鉴定赋予对DPP4催化活性的抗性的氨基酸取代。

缺少氨基酸序列RNRNNIA(SEQIDNO：55)的OXM肽类似物也能显示出对GLP-1和胰高血糖素受体的完全的激动活性。这些OXM肽类似物以及基于全尺寸OXM肽的一些其他肽显示在表2中。这些截短的OXM肽类似物是在共同拥有的已公开的国际公开号WO2007100535中描述的胰高血糖素K(GcgK)肽属的变体。GcgK肽是其中OXM序列已在C端被截短，以消除了位于C-末端7个氨基酸残基的肽。得到的肽是在C-末端具有额外赖氨酸残基的胰高血糖素之一。该GcgK肽与+/+样式相容，其中肽对GLP-1R和GCGR显示出亚纳摩尔级效能。相反，天然OXM对两种受体显示出纳摩尔级效能。GcgK肽的其他优点是消除了位于C-末端的两个碱性精氨酸残基。这在具有双重GLP-1/GCGR激动剂活性的脂化(酰化或胆固醇化)肽类似物的构建中是重要的。我们的数据显示，基于OXM序列的pI高于7的脂化肽类似物刺激肥大细胞脱颗粒，而pI约为5的脂化肽类似物似乎不刺激肥大细胞脱颗粒(参见实施例11)。因此，根据我们的结果，为了降低肽刺激肥大细胞脱颗粒的风险，基于脂化的肽类似物的pI应该在5附近。因此，在特定情况下，脂化肽类似物具有低于6.0的pI。在其他情况下，脂化肽类似物具有介于4.5至6.0之间的pI。在其他情况下，脂化肽类似物具有约5.4的pI。pI的降低使用下列三种不同策略中的一种或多种来进行：1)肽中残基的取代，2)在C端引入羧酸基团，以及3)引入带负电残基，例如一个或多个γ-羧基-谷氨酸残基作为间隔物。

因此，在具有低于6.0的pI的OXM肽类似物的一种情况下，酰基或胆固醇基团通过包含两个γ-羧基-谷氨酸残基的间隔物与肽共价连接。这些肽类似物的实例包括表2中显示的肽类似物。例如，pI约为5.4的肽包括但不限于OXM345、OXM380、OXM381、OXM392、OXM395、OXM398、OXM399、OXM400和OXM401。在具有低于6.0的pI的肽类似物的另一种情况下，酰基或胆固醇基团通过包含一个或两个γ-羧基-谷氨酸残基的间隔物与肽类似物中的内部氨基酸共价连接，并且肽还包括一个或多个与位于C-末端的赖氨酸残基共价连接的γ-羧基-谷氨酸残基。这些肽类似物的实例包括但不限于OXM407、OXM408、OXM414、和OXM418。在具有低于6.0的pI的肽类似物的另一种情况下，酰基或胆固醇基团通过包含一个γ-羧基-谷氨酸残基的间隔物与肽的C-末端共价连接，并且肽还包括一个或多个氨基酸取代以降低肽的pI。OXM374是这样的肽类似物的实例。

因此，还提供了肽类似物，其包含氨基酸序列HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK(SEQIDNO：109)，其中从肽的N-末端起第二个氨基酸被使肽对二肽基肽酶IV切割和失活具有抗性的氨基酸取代；肽包括脂类或胆固醇部分，其通过包含一个或多个γ-谷氨酸残基的间隔物与肽共价连接；除了2位处的取代之外，肽任选包括1至3个氨基酸取代；并且肽任选包括保护性基团，其如果存在的话，与肽的C-末端羧基相连；其中肽类似物具有低于6.0的pI，并且是双重的GLP-1受体激动剂和胰高血糖素受体激动剂，及其可药用盐。在特定情况下，肽类似物具有介于4至6之间的pI，或约5.0的pI，例如约5.4的pI。

还提供了肽类似物，其包含结构

Z₁-P-M-Z₂

其中P是具有下列氨基酸序列的肽

其中X₁是D-丝氨酸、α-氨基异丁酸(aib)、1-氨基-1-环丁烷羧酸(Acb)残基、1-氨基-1-环己烷羧酸(Acx)；α-氨基丁酸(Abu)；D-α-氨基丁酸(D-Abu)；氨基戊酸(Nva)；β-环丙基-丙氨酸(Cpa)；丙炔基甘氨酸(Prg)；烯丙基甘氨酸(Alg)；2-氨基-2-环己基-丙酸(2-Cha)；D-叔丁基甘氨酸(D-tbg)；乙烯基甘氨酸(Vg)；1-氨基-1-环丙烷羧酸(Acp)；或1-氨基-1-环戊烷羧酸(Acpe)残基；X₂是酪氨酸(Y)或赖氨酸(K)残基；X₃是丝氨酸(S)或赖氨酸(K)残基；X₄是丝氨酸(S)、α-氨基异丁酸(aib)或谷氨酸(E)残基；X₅是精氨酸(R)或谷氨酸(E)残基；X₆是精氨酸(R)或丙氨酸(A)残基；X₇是谷氨酰胺(Q)或赖氨酸(K)残基；X₈是甲硫氨酸(M)、正亮氨酸(Nle)、甲硫氨酸亚砜(m)或O-甲基-L-高丝氨酸(o)残基；X₉是γ-谷氨酸(γGlu)残基；X₁₀是γ-谷氨酸(γGlu)残基或不存在；Z₁是任选存在的保护性基团，其如果存在的话，与N-末端氨基相连，M是(i)通过亲水性连接物与胆固醇部分共价连接的半胱氨酸残基，(ii)通过包含一个或多个γ-谷氨酸残基的间隔物与脂类部分共价连接的赖氨酸残基，或(iii)脂类部分，其中M通过包含一个或多个γ-谷氨酸残基的间隔物与P的C-末端或内部氨基酸共价连接；并且Z₂是任选存在的保护性基团，其如果存在的话，与C-末端羧基相连；及其可药用盐，其中肽类似物或其盐具有低于6.0的pI，并且是双重的GLP-1受体激动剂和胰高血糖素受体激动剂。在特定情况下，肽类似物具有介于4至6之间的pI，或约5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8或5.9的pI，或约5.4至5.5的pI。

在其他情况下，M是通过包含一个或多个γ-谷氨酸残基的间隔物与脂类部分共价连接的赖氨酸残基，并且赖氨酸残基与P的C-末端相连，或者M是通过包含一个或多个γ-谷氨酸残基的间隔物与脂类部分共价连接的赖氨酸残基，并且赖氨酸残基位于P的X₂或X₇位。在特定情况下，脂类部分是棕榈酰基、豆蔻酰基或硬脂酰基部分。这些肽类似物的实例显示在表2中。

肽OXM290是OXM301的前体，OXM291至294是表2中显示的其余肽类似物的前体。OXM301是类似物，其在2位氨基酸位置中具有D-Ser以获得DPPIV抗性，分别用Glu和Ala取代Arg₁₇和Arg₁₈残基，并具有C(氧杂₄-胆固醇)基团(C₇)以提高体内药物动力学性质。在Arg₁₇和Arg₁₈处进行取代以增加体内稳定性，因为这些残基是主要的蛋白水解切割位点。

OXM302是肽类似物，其在C-末端缺少氨基酸序列RNRNNIA(SEQIDNO：96)(参见共同拥有的已公开的国际专利申请号WO2007/100535，在此以其全文引为参考)。因此，OXM302由于C-末端的一个赖氨酸残基而比胰高血糖素肽长一个氨基酸。在具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTKC₇-CONH₂(SEQIDNO：52)的OXM302中，在2位氨基酸位置处存在D-Ser以获得DPPIV抗性，并具有C(氧杂₄-胆固醇)基团(C₇)以改进体内药物动力学性质。

OXM303具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSEAAQDFVQWLMNTKC₇-CONH₂(SEQIDNO：53)。2位氨基酸位置中的D-Ser提供DPPIV抗性，Glu和Ala分别取代Arg₁₇和Arg₁₈残基增加了稳定性，并且C(氧杂₄-胆固醇)基团(C₇)改进了肽类似物的体内药物动力学性质。

OXM304具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSERAQDFVQWLMNTKC₇-CONH₂(SEQIDNO：54)。2位中的D-Ser提供DPPIV抗性，Glu取代Arg₁₇残基增加了稳定性，并且C(氧杂₄-胆固醇)基团(C₇)改进了肽类似物的体内药物动力学性质。

OXM305具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSERAQDFVQWLMNTKC₇-CONH₂(SEQIDNO：55)。2位中的D-Ser提供DPPIV抗性，Ala取代Arg₁₈残基增加了稳定性，并且C(氧杂₄-胆固醇)基团(C₇)改进了肽类似物的体内药物动力学性质。

OXM311具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-K(棕榈酰基)-CONH₂(SEQIDNO：56)。2位氨基酸位置中的D-Ser提供DPPIV抗性，并且K(棕榈酰基)基团改进了肽类似物的体内药物动力学性质。

OXM312具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSEAAQDFVQWLMNTKK(棕榈酰基)-CONH₂(SEQIDNO：57)。2位氨基酸位置中的D-Ser提供DPPIV抗性，Glu和Ala分别取代Arg₁₇和Arg₁₈残基增加了稳定性，并且K(棕榈酰基)基团改进了肽类似物的体内药物动力学性质。

OXM314具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-Ttds-K(棕榈酰基)-CONH₂(SEQIDNO：58)。2位氨基酸位置中的D-Ser提供DPPIV抗性，K(棕榈酰基)基团改进了肽类似物的体内药物动力学性质。Ttds(1-氨基-4，7，10-三氧杂-13-三癸胺琥珀酰胺酸)是在肽序列与K(棕榈酰基)基团之间起到柔性和亲水性间隔物作用的连接物。

OXM313具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSEAAQDFVQWLMNTK-Ttds-K(棕榈酰基)-CONH₂(SEQIDNO：59)。2位氨基酸位置中的D-Ser提供DPPIV抗性，Glu和Ala分别取代Arg₁₇和Arg₁₈残基增加了稳定性，并且Ttds-K(棕榈酰基)基团改进了肽类似物的体内药物动力学性质。

OXM317具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-γE-C₄-CONH₂(SEQIDNO：60)。在肽中，在2位氨基酸位置处存在D-Ser以提供DPPIV抗性，并且存在与胆甾-5-烯-3-基{[(2R)-3-氨基-2-(氨基)-3-氧基丙基]硫代}乙酸酯(C₄)连接的γ-谷氨酸残基以改进体内药物动力学性质。γ-谷氨酸残基(γE)是在肽序列与C₄基团之间起到柔性间隔物作用的连接物。

OXM318具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSEAAQDFVQWLMNTK-γE-C₄-CONH₂(SEQIDNO：61)。2位氨基酸位置处的D-Ser提供了DPPIV抗性，Glu和Ala分别取代Arg₁₇和Arg₁₈残基增加了稳定性，并且γE-C₄基团改进了肽类似物的体内药物动力学性质。

OXM319具有结构HαQGTFTSDYSKYLDSEAAQDFVQWLMNTKC₇-CONH₂(SEQIDNO：62)。在肽中，在2位氨基酸位置处存在Aib以提供DPPIV抗性，并且C(氧杂₄-胆固醇)基团(C₇)改进了肽类似物的体内药物动力学性质。

OXM321具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSEAAQDFVQWLMNTKRNRNNIA-γE-C₄-CONH₂(SEQIDNO：63)。它是类似物，其在2位氨基酸位置处具有D-Ser以提供DPPIV抗性，Glu和Ala分别取代Arg₁₇和Arg₁₈残基，并且C(-胆固醇)基团(C₄)改进了体内药物动力学性质。进行Arg₁₇和Arg₁₈处的取代增加了体内稳定性，因为这些残基是主要的蛋白水解切割位点。γ-谷氨酸残基(γE)是在肽序列与C₄基团之间起到柔性间隔物作用的连接物。

OXM323具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSEAAQDFVQWLMNTKR-C₇-CONH₂(SEQIDNO：64)。2位中的D-Ser提供了DPPIV抗性，Glu和Ala取代Arg₁₇和Arg₁₈残基为肽提供了改进的稳定性，并且C(氧杂₄-胆固醇)基团(C₇)为肽提供了改进的体内药物动力学性质。

OXM325具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSEAAQDFVQWLMNTKRNRNNIAC₇-CO₂H(SEQIDNO：65)。它是类似物，其在2位氨基酸位置处具有D-Ser以提供DPPIV抗性，Glu和Ala分别取代Arg₁₇和Arg₁₈残基，并且C(氧杂₄-胆固醇)基团(C₇)改进了体内药物动力学性质。进行Arg₁₇和Arg₁₈处的取代增加了体内稳定性，因为这些残基是主要的蛋白水解切割位点。

OXM327具有结构HαQGTFTSDYSKYLDSERAQDFVQWLMNTKC₇-CONH₂(SEQIDNO：66)。2位中的Aib提供了DPPIV抗性，Glu取代Arg₁₇残基为肽提供了改进的稳定性，并且C(氧杂₄-胆固醇)基团(C₇)提供了改进的体内药物动力学性质。

OXM329具有结构HαQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-γE-C₄-CO₂H(SEQIDNO：67)。2位中的Aib提供了DPPIV抗性，并且C(氧杂₄-胆固醇)基团(C₇)提供了改进的体内药物动力学性质。γ-谷氨酸残基(γE)是在肽序列与C₄基团之间起到柔性间隔物作用的连接物。

OXM330具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSEAAQDFVQWLMNTKRNRNNIA-γE-K(Pam)-CONH₂(SEQIDNO：68)。它是类似物，其在2位氨基酸位置处具有D-Ser以提供DPPIV抗性，Glu和Ala分别取代Arg₁₇和Arg₁₈残基，并且-K(棕榈酰基)基团改进了体内药物动力学性质。γ-谷氨酸残基(γE)是在肽序列与K(棕榈酰基)基团之间起到柔性间隔物作用的连接物。进行Arg₁₇和Arg₁₈处的取代增加了体内稳定性，因为这些残基是主要的蛋白水解切割位点。

OXM345具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-γE-γE-C₄-COOH(SEQIDNO：69)。它被设计成在2位处包含D-Ser(s)，在31和32位处包含作为肽序列与胆固醇基团之间的间隔物的两个γ-谷氨酸，并在33位处包含一个Cys(胆固醇)(C₄)。

OXM355具有结构HsQGTFTSDYSSYLDSRRAQDFVQWLMNTK-γE-C₄-COOH(SEQIDNO：70)。它被设计成包含2位处的D-Ser(s)、Lys₁₂Ser取代、31位处作为肽序列与胆固醇基团之间的间隔物的一个γ-谷氨酸，以及32位处的一个Cys(胆固醇)(C₄)。在GLP-1肽序列中，在12位中存在丝氨酸。因此，预计它对GLP-1R具有至少相容的效能。Lys₁₂Ser取代消除了正电荷，其将导致pI约为5。

OXM357具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSRAAQDFVQWLMNTK-γE-C₄-COOH(SEQIDNO：71)。它被设计成包含2位处的D-Ser(s)、31位处作为肽序列与胆固醇基团之间的间隔物的一个γ-谷氨酸，以及32位处的一个Cys(胆固醇)(C₄)。OXM357与OXM345的差别在于仅具有一个γ-Glu，而OXM345具有两个γ-Glu。

OXM359具有结构HsQGTFTSDYSSYLDSRRAQDFVQWLMNTK-γE-C₇-COOH(SEQIDNO：72)。它被设计成包含2位处的D-Ser(s)、Lys₁₂Ser取代、31位处作为肽序列与胆固醇基团之间的间隔物的一个γ-谷氨酸，以及32位处的一个Cys(氧杂₄-胆固醇)(C₇)。因此，OXM359与OXM355的差别在于用C₇(具有四乙二醇间隔物的胆固醇基团)代替C₄(没有乙二醇间隔物的胆固醇)。

OXM361具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSRAAQDFVQWLMNTK-γE-C₇-COOH(SEQIDNO：73)。它被设计成包含2位处的D-Ser(s)、Arg₁₈Ala取代、31位处作为肽序列与胆固醇基团之间的间隔物的一个γ-谷氨酸，以及32位处的一个Cys(氧杂₄-胆固醇)(表中的C₇)。Arg₁₈Ala取代消除了正电荷，其对于将最适pI值调整至5来说是重要的。

OXM373具有结构HsQGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNTK-γE-C₄-COOH(SEQIDNO：74)。它被设计成包含2位处的D-Ser(s)、Ser₁₆Glu取代、31位处作为肽序列与胆固醇基团之间的间隔物的一个γ-谷氨酸，以及32位处的一个Cys(胆固醇)(C₄)。在exendin-4肽中，在16位处存在Glu，因此预期该取代将至少与GLP-1R活化相容。

OXM374具有结构HsQGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNTK-γE-C₇-COOH(SEQIDNO：75)。它被设计成包含2位处的D-Ser(s)、Ser₁₆Glu取代、31位处作为肽序列与胆固醇基团之间的间隔物的一个γ-谷氨酸，以及32位处的一个Cys(氧杂₄-胆固醇)(C₇)。因此，OXM373与374之间的差异在于在OXM374中存在与胆固醇基团相连的四乙二醇间隔物。

OXM380具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-γE-γE-C₇-COOH(SEQIDNO：76)。它被设计成包含2位处的D-Ser(s)、31和32位处作为肽序列与胆固醇基团之间的间隔物的两个γ-谷氨酸，以及33位处的一个Cys(氧杂₄-胆固醇)(C₇)。OXM380具有与OXM345相同的肽序列，但是区别在于与胆固醇基团相连的氧杂₄间隔物。

OXM381具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-γE-γE-C₉-COOH(SEQIDNO：77)。它被设计成包含2位处的D-Ser(s)、31和32位处作为肽序列与胆固醇基团之间的间隔物的两个γ-谷氨酸，以及33位处的一个Cys(马来酰亚胺-氧杂₁₂-胆固醇)(C₉)。OXM381具有与OXM345和OXM380相同的肽序列，差别在于与胆固醇相连的马来酰亚胺-氧杂₁₂间隔物。C₉的结构显示如下。

OXM383具有结构HαQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-γE-γE-C₇-COOH(SEQIDNO：78)。它被设计成含有2位处的Aib(α)、31和32位处作为肽序列与胆固醇基团之间的间隔物的两个γ-谷氨酸，以及33位处的一个Cys(氧杂₄-胆固醇)(C₇)。OXM383与OXM380的差别仅在于2位处的氨基酸。

OXM388具有结构H-Acb-QGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-γE-γE-C₇-COOH(SEQIDNO：79)。它被设计成含有2位处的Acb、31和32位处作为肽序列与胆固醇基团之间的间隔物的两个γ-谷氨酸，以及33位处的一个Cys(氧杂₄-胆固醇)(C₇)。OXM388与OXM380和383的差异仅在于2位处的氨基酸。

OXM392具有结构HsQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTK-γE-γE-C₁₀-COOH(E与K之间存在内酰胺桥)(SEQIDNO：80)。它被设计成含有2位处的Ser(s)，Ser₁₆Glu和Gln₂₀Lys取代，其中Glu₁₆和Lys₂₀与侧链上的内酰胺桥相连，31和32位处作为肽序列与胆固醇之间的间隔物的两个γ-谷氨酸，以及33位处的一个Cys(氧杂₁₂-胆固醇)(C₁₀)。内酰胺桥在位置i(16)和i+4(20)之间，并意味着使肽的α-螺旋构象稳定并使肽稳定以抵抗蛋白水解降解。

C₁₀基团与C₉基团的差别在于连接半胱氨酸硫醇基与氧杂₁₂-胆固醇的硫醚键。在C₉中是马来酰亚胺硫醚键，而在C₁₀中是乙酰胺硫醚。C₁₀的结构显示如下。

OXM395具有结构HαQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTK-γE-γE-C₁₀-COOH(E与K之间存在内酰胺桥)(SEQIDNO：81)。它被设计成含有2位处的Aib(α)，Ser₁₆Glu和Gln₂₀Lys取代，其中Glu₁₆和Lys₂₀与侧链之间的内酰胺桥相连，31和32位处作为肽序列与胆固醇之间的间隔物的两个γ-谷氨酸残基，以及33位处的一个Cys(氧杂₁₂-胆固醇)(C₁₀)。内酰胺桥在位置16(i)和20(i+4)之间，并意味着使肽的α-螺旋构象稳定并使肽稳定以抵抗蛋白水解降解。

OXM398具有结构H-Acb-QGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTK-γE-γE-C₁₀-COOH(E与K之间存在内酰胺桥)(SEQIDNO：82)。它被设计成含有2位处的Acb，Ser₁₆Glu和Gln₂₀Lys取代，其中Glu₁₆和Lys₂₀与侧链之间的内酰胺桥相连，31和32位处作为肽序列与胆固醇之间的间隔物的两个γ-谷氨酸残基，以及33位处的一个Cys(氧杂₁₂-胆固醇)(C₁₀)。内酰胺桥在位置16(i)和20(i+4)之间，并意味着使肽的α-螺旋构象稳定并使肽稳定以抵抗蛋白水解降解。

OXM392、395和398的差别只在于2位处的氨基酸。

OXM399具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-γE-γE-C₁₀-COOH(SEQIDNO：83)。它被设计成包含2位处的D-Ser(s)、31和32位处作为肽序列与胆固醇之间的间隔物的两个γ-谷氨酸，以及33位处的一个Cys(氧杂₁₂-胆固醇)(C₁₀)。OXM399与OXM392的差别仅在于它缺少OXM392中存在的内酰胺桥。

OXM400具有结构HαQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-γE-γE-C₁₀-COOH(SEQIDNO：84)。它被设计成包含2位处的Aib(α)、31和32位处作为肽序列与胆固醇之间的间隔物的两个γ-谷氨酸，以及33位处的一个Cys(氧杂₁₂-胆固醇)(C₁₀)。OXM400与OXM395的差别仅在于它缺少OXM395中存在的内酰胺桥。

OXM401具有结构H-Acb-QGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-γE-γE-C₁₀-COOH(SEQIDNO：85)。它被设计成包含2位处的Acb、31和32位处作为肽序列与胆固醇之间的间隔物的两个γ-谷氨酸，以及33位处的一个Cys(氧杂₁₂-胆固醇)(C₁₀)。OXM401与OXM398的差别仅在于它缺少OXM398中存在的内酰胺桥。OXM399、OXM400和401彼此之间的差别在于2位处的氨基酸。

OXM404具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-γE-γE-K(γE-棕榈酰基)-CONH₂(SEQIDNO：86)。它被设计成包含2位处的D-Ser(s)、31和32位处作为肽序列与棕榈酰基之间的间隔物的两个γ-谷氨酸，以及33位处的一个Lys(γE-棕榈酰基)。在本实施方案中，肽在C-末端酰胺化。

OXM406具有结构HsQGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNTK-γE-γE-C₁₀-CONH₂(SEQIDNO：87)。它被设计成包含2位处的D-Ser(s)、Ser₁₆Glu取代、31和32位处作为肽序列与胆固醇之间的间隔物的两个γ-谷氨酸，以及33位处的一个Cys(氧杂₁₂-胆固醇)(C₁₀)。在本实施方案中，肽在C-末端酰胺化。

OXM407具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSRRAK(γE-棕榈酰基)DFVQWLMNTK-γEγE-CONH₂(SEQIDNO：88)。它被设计成包含2位处的D-Ser(s)、31和32位处作为肽序列与棕榈酰基之间的间隔物的两个γ-谷氨酸，以及33位处的一个Lys(γE-棕榈酰基)。在本实施方案中，肽在C-末端酰胺化。

OXM408具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSRRAK(γE-γE-棕榈酰基)DFVQWLMNTK-γE-CONH₂(SEQIDNO：89)。它被设计成包含2位处的D-Ser(s)、31位处的一个γ-谷氨酸，以及20位处的与两个γ-谷氨酸残基和赖氨酸的侧链氨基相连的棕榈酰基：[Lys(γE-γE-棕榈酰基)]。在本实施方案中，肽在C-末端酰胺化。

OXM409具有结构HsQGTFTSDK(γE-γE-棕榈酰基)SKYLDSRRADFVQWLMNTK-CONH₂(SEQIDNO：89)。它被设计成包含2位处的D-Ser(s)以及10位处的与两个γ-谷氨酸残基和赖氨酸的侧链氨基相连的棕榈酰基：[Lys(γE-γE-棕榈酰基)]。在本实施方案中，肽在C-末端酰胺化。

OXM410具有结构HsQGTFTSDYSKYLDERRAK(γE-γE-棕榈酰基)DFVQWLMNTK-CONH₂(SEQIDNO：91)。它被设计成包含2位处的D-Ser(s)、Ser₁₆Glu取代，以及20位处的与两个γ-谷氨酸残基和赖氨酸的侧链氨基相连的棕榈酰基：[Lys(γE-γE-棕榈酰基)]。在本实施方案中，肽在C-末端酰胺化。

OXM411具有结构HsQGTFTSDK(γE-γE-棕榈酰基)SKYLDERRAQDFVQWLMNTK-CONH₂(SEQIDNO：92)。它被设计成包含2位处的D-Ser(s)、Ser₁₆Glu取代，以及10位处的与两个γ-谷氨酸残基和赖氨酸的侧链氨基相连的棕榈酰基：[Lys(γE-γE-棕榈酰基)]。在本实施方案中，肽在C-末端酰胺化。

OXM412具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-γE-γE-C₁₁-COOH(SEQIDNO：93)。它被设计成包含2位处的D-Ser(s)、31和32位处作为肽序列与胆固醇之间的间隔物的两个γ-谷氨酸残基，以及33位处的一个Cys(氧杂₂₄-胆固醇)(C₁₁)。OXM412与OXM399的差别在于与胆固醇基团相连的氧杂间隔物的长度。C₁₁的结构显示如下。

OXM413具有结构HαDGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVK(DOTA)WLmNTK-γE-γE-C₁₀-CONH₂(SEQIDNO：94)。它被设计成在体内靶向GLP-1R的用于成像的肽。序列含有2位处的Aib、3位处的用于提供对GLP-1R的选择性的Asp、24位处的Lys(DOTA)、27位处的Met(O)、31和32位处作为肽序列与胆固醇之间的间隔物的两个γ-谷氨酸残基，以及33位处的一个Cys(氧杂₁₂-胆固醇)(C₁₀)。在本实施方案中，肽在C-末端酰胺化。Fmoc-Lys(DOTA)-OH的结构显示如下。

OXM414具有结构HsQGTFTSDK(γE-棕榈酰基)SKYLDERRAQDFVQWLMNTK-γE-CONH₂(SEQIDNO：95)。它被设计成包含2位处的D-Ser(s)、31位处的一个γ-谷氨酸、Ser₁₆Glu取代以及10位处的与赖氨酸的侧链氨基相连的棕榈酰基[Lys(棕榈酰基)]。在本实施方案中，肽在C-末端酰胺化。

OXM415具有结构HsQGTFTSDK(γE-棕榈酰基)SKYLDERRAQDFVQWLMNTK-γE-γE-CONH₂(SEQIDNO：96)。它被设计成包含2位处的D-Ser(s)、31位处的一个γ-谷氨酸、Ser₁₆Glu取代以及10位处的与一个γ-谷氨酸残基和赖氨酸的侧链氨基相连的棕榈酰基：[Lys(γE-棕榈酰基)]。在本实施方案中，肽在C-末端酰胺化。

OXM416具有结构HαQGTFTSDK(γE-γE-棕榈酰基)SKYLDERRAQDFVQWLMNTK-CONH₂(SEQIDNO：97)。它被设计成包含2位处的Aib(α)、Ser₁₆Glu取代以及10位处的与两个γ-谷氨酸残基和赖氨酸的侧链氨基相连的棕榈酰基：[Lys(γE-γE-棕榈酰基)]。在本实施方案中，肽在C-末端酰胺化。

OXM417具有结构H-Acb-QGTFTSDK(γE-γE-棕榈酰基)SKYLDERRAQDFVQWLMNTK-CONH₂(SEQIDNO：98)。它被设计成包含2位处的Acb、Ser₁₆Glu取代以及10位处的与两个γ-谷氨酸残基和赖氨酸的侧链氨基相连的棕榈酰基：[Lys(γE-γE-棕榈酰基)]。在本实施方案中，肽在C-末端酰胺化。

OXM418具有结构HsQGTFTSDK(γE-γE-棕榈酰基)SKYLDαRRAQDFVQWLMNTK-γE-CONH₂(SEQIDNO：99)。它被设计成包含2位处的D-Ser(s)、31位处的一个γ-谷氨酸、Ser₁₆Aib(α)取代以及10位处的与两个γ-谷氨酸残基和赖氨酸的侧链氨基相连的棕榈酰基：[Lys(γE-γE-棕榈酰基)]。在本实施方案中，肽在C-末端酰胺化。

OXM419具有结构HαQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-γE-γE-K(γE-棕榈酰基)-CONH₂(SEQIDNO：100)。它被设计成包含2位处的Aib(α)、31和32位处作为肽序列与棕榈酰基之间的间隔物的两个γ-谷氨酸，以及33位处的一个Lys(γE-棕榈酰基)。在本实施方案中，肽在C-末端酰胺化。

OXM420具有结构H-Acb-QGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-γE-γE-K(γE-棕榈酰基)-CONH₂(SEQIDNO：101)。它被设计成包含2位处的Acb、31和32位处作为肽序列与棕榈酰基之间的间隔物的两个γ-谷氨酸，以及33位处的一个Lys(γE-棕榈酰基)。在本实施方案中，肽在C-末端酰胺化。

OXM421具有结构HsQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-γE-γE-C₁₂-COOH(SEQIDNO：102)。它被设计成包含2位处的D-Ser(s)、31和32位处作为肽序列与胆固醇之间的间隔物的两个γ-谷氨酸，以及33位处的一个Cys(氧杂₁₂-O-胆固醇)(C₁₂)。Cys(氧杂₁₂-O-胆固醇)与Cys(氧杂₁₂-胆固醇)的差别在于胆固醇通过醚键与氧杂₁₂间隔物相连。醚键可以使Cys(氧杂₁₂-胆固醇)或C₁₁基团中存在的酯键更加稳定。Cys(氧杂₁₂-O-胆固醇)的结构显示如下。

药物组合物

此外，提供了用于在个体中治疗代谢障碍的药物组合物，其包含治疗有效量的一种或多种OXM类似物。这样的障碍包括但不限于肥胖症、代谢综合征或综合征X、II型糖尿病、糖尿病的并发症例如视网膜病、高血压、血脂异常、心血管疾病、胆结石、骨关节炎和某些形式的癌症。本文中与肥胖症相关的障碍与肥胖症相关、由其引起或源于肥胖症。

“肥胖症”是其中存在过量体脂的状态。肥胖症的工作定义是基于体重指数(BMI)，其根据体重与以米为单位的身高的平方的比率计算(kg/m2)。“肥胖症”是指其他方面健康的个体具有高于或等于30kg/m2的体重指数(BMI)的状态，或患有至少一种共存疾病的对象具有高于或等于27kg/m2的BMI的状态。“肥胖对象”是体重指数(BMI)高于或等于30kg/m2的其他方面健康的对象，或BMI高于或等于27kg/m2的患有至少一种共通疾病的对象。“具有肥胖症风险的对象”是BMI为25kg/m2至低于30kg/m2的其他方面健康的对象，或BMI为25kg/m2至低于27kg/m2的患有至少一种共存疾病的对象。

在亚洲人中，在较低体重指数(BMI)下出现与肥胖症相关的高风险。在包括日本的亚洲国家中，“肥胖症”是指患有至少一种肥胖诱导或肥胖相关的、需要减轻体重或可以通过减轻体重得到改善的共同疾病的对象，具有高于或等于25kg/m2的BMI的状态。在包括日本的亚洲国家中，“肥胖对象”是指患有至少一种肥胖诱导或肥胖相关的、需要减轻体重或可以通过减轻体重得到改善的共存疾病，具有高于或等于25kg/m2的BMI的对象。在亚洲国家中，“具有肥胖症风险的对象”是BMI高于23kg/m2至低于25kg/m2的对象。

当在本文中使用时，术语“肥胖症”意味着涵盖了所有上面的肥胖症定义。

肥胖症诱导的或肥胖症相关的共存疾病包括但不限于糖尿病、非胰岛素依赖型糖尿病-2型、葡萄糖耐受受损、禁食血糖受损、胰岛素抗性综合征、血脂异常、高血压、血尿酸过多、痛风、冠状动脉疾病、心肌梗塞、心绞痛、睡眠无呼吸综合征、匹克威克综合征、脂肪肝、脑梗塞、脑血栓、短暂性脑缺血发作、骨伤科障碍、变形关节炎、腰痛、月经不调和不育症。具体来说，共存疾病包括：高血压、高脂血症、血脂异常、葡萄糖不耐受、心血管疾病、睡眠窒息、糖尿病和其他肥胖症相关病症。

(肥胖症和肥胖症相关障碍的)“治疗”是指给药本发明的化合物以降低或维持肥胖对象的体重。治疗的结果之一可以是肥胖对象的体重与即将给药本发明的化合物之前的对象体重相比降低。治疗的另一种结果可以是防止以前作为饮食、锻炼或药物疗法的结果而失去的体重重新增加。治疗的另一种结果可以是降低肥胖症相关疾病的发生率和/或严重性。治疗可以适合地导致对象的食物或卡路里摄入量减少，包括总摄食量减少或饮食的特定组分例如糖类或脂肪的摄入量减少；和/或营养吸收的抑制；和/或代谢率降低的抑制；以及导致在需要的患者中降低体重。代替代谢率降低的抑制或除此之外，治疗也可以导致代谢率的改变例如代谢率的增加；和/或导致将由体重丧失所正常引起的代谢抗性降到最低。

(肥胖症和肥胖症相关障碍的)“预防”是指给药本发明的化合物以降低或维持有肥胖症风险的对象的体重。预防的结果之一可以是是有肥胖症风险的对象的体重与即将给药本发明的化合物之前所述对象的体重相比降低。预防的另一种结果可以是防止以前作为饮食、锻炼或药物疗法的结果而失去的体重重新增加。预防的另一种结果可以是如果在具有肥胖症风险的对象中在肥胖症发作之前实施治疗，使肥胖症相关障碍的发生率和/或严重性降低。此外，如果在已经肥胖的对象中开始治疗，这样的治疗可以预防肥胖症相关障碍的发生、发展或严重性，所述相关障碍例如但不限于动脉粥样硬化、II型糖尿病、多囊卵巢疾病、心血管疾病、骨关节炎、皮肤科障碍、高血压、胰岛素抗性、高胆固醇血症、高甘油三酯血症和胆石病。

本文中的肥胖症相关障碍与肥胖症相关、由其引起或源于肥胖症。肥胖症相关障碍的实例包括过度饱食和贪食症、高血压、糖尿病、血浆胰岛素浓度和胰岛素抗性升高、血脂异常、高脂血症、子宫内膜、乳腺、前列腺和结肠癌、骨关节炎、阻塞性睡眠呼吸暂停、胆石病、胆结石、心脏病、心律异常和心律失常、心肌梗塞、充血性心力衰竭、冠心病、猝死、中风、多囊卵巢疾病、颅咽管瘤、Prader-Willi综合征、Frohlich’s综合征、GH缺陷对象、正常变异矮身材、Turner’s综合征以及显示出代谢活性降低或静息能量消耗作为总不含脂肪的质量的百分数的降低的其他病理状况，例如患有急性淋巴母细胞性白血病的儿童。肥胖症相关障碍的其他实例是也称为综合征X的代谢综合征、胰岛素抗性综合征、性和生殖功能障碍例如不育症、男性中的性腺机能减退和女性中的多毛症、胃肠动力障碍例如肥胖症相关的胃-食管反流、呼吸系统障碍例如肥胖-通气不良综合征(Pickwickian综合征)、心血管障碍、炎症例如血管的系统性炎症、动脉粥样硬化、高胆固醇血症、高尿酸血症、下腰痛、胆囊疾病、痛风和肾癌。本发明的化合物也可用于降低肥胖症的次级结果的风险，例如降低左心室肥大的风险。

当在本文中使用时，术语“糖尿病”包括胰岛素依赖型糖尿病(IDDM，也称为I型糖尿病)和非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM，也称为II型糖尿病)。I型糖尿病或胰岛素依赖型糖尿病是调控葡萄糖利用的激素胰岛素绝对缺乏的结果。II型糖尿病或胰岛素不依赖型糖尿病(即非胰岛素依赖型糖尿病)，通常发生在正常或甚至升高的胰岛素水平的情况下，并似乎是组织不能对胰岛素恰当响应的结果。大多数II型糖尿病人也肥胖。本发明的化合物可用于治疗I型和II型糖尿病两者。化合物对于治疗II型糖尿病特别有效。本发明的化合物也可用于治疗和/或预防妊娠期糖尿病。

美国专利No.6,852,690在此以其全文引为参考，其公开了用于增强营养物代谢的方法，所述方法包含向非糖尿病患者给药包含营养有效量的一种或多种营养物或其任意组合以及一种或多种促胰岛素肽的制剂。本文公开的OXM肽类似物是促胰岛素性的，并且可以给药于患有葡萄糖代谢扰乱例如胰岛素抗性但是没有明显糖尿病的患者，以及出于任何原因不能通过消化道接受营养的患者。这样的患者包括手术患者、昏迷患者、休克患者、患有胃肠疾病的患者、患有消化激素疾病的患者等。具体来说，肥胖患者、动脉粥样硬化患者、血管病患者、患有妊娠期糖尿病的患者、患有肝病例如肝硬化的患者、患有肢端肥大症的患者、患有糖皮质激素过量例如皮质醇治疗或库欣病的患者、具有例如在创伤、事故和手术等后发生的激活的反调节激素的患者、患有高甘油三酯血脂的患者和患有慢性胰腺炎的患者，可以按照本发明容易和适合地供给营养而不会使患者经历低或高血糖。具体来说，向这样的患者给药旨在提供一种疗法，以便尽可能快地将营养和热量需求递送到患者，同时将其血浆葡萄糖维持在约160至180毫克每分升血糖的所谓肾阈值之下。尽管不具有正好低于肾阈值的血糖水平的正常患者也可以如上所述按照本发明进行治疗，但是具有扰乱的葡萄糖代谢的患者、例如血浆葡萄糖水平正好高于肾阈值的高血糖患者，也发现疗法适合于它们的状况。具体来说，这种在间歇的间隔时间时具有低于肾阈值程度的高血糖的患者，可以按照下述任一治疗方式接受营养物加上促胰岛素肽的组合治疗。不患有这种高血糖的正常患者也可以使用本文公开的肽类似物进行治疗。

本文公开的OXM类似物当与可药用载体组合时，可用于药物组合物中。这样的组合物包含治疗有效量的本文公开的一种或多种OXM类似物以及可药用载体。这样的组合物(除了本文公开的OXM类似物和载体之外)还可以包含稀释剂、填充剂、盐类、缓冲剂、稳定剂、增溶剂和本技术领域公知的其他材料。包含本文公开的OXM类似物的组合物，如果需要，可以盐的形式给药，只要盐是可药用的即可。盐类可以使用合成有机化学领域的专业人员已知的标准程序制备。

术语“个体”是指包括人类和宠物或驯养动物例如狗、猫、马等。因此，包含式I的组合物也可用于治疗或预防猫和狗中的肥胖症和肥胖症相关障碍。同样，术语“哺乳动物”包括宠物例如猫和狗。

术语“可药用盐”是指从可药用无毒性碱或酸、包括无机或有机碱和无机或有机酸制备的盐。源自于无机碱的盐包括铝、铵、钙、铜、铁、亚铁、锂、镁、锰盐、亚锰、钾、钠、锌盐等。特别优选的是铵、钙、镁、钾和钠盐。源自于可药用有机无毒性碱的盐包括下列化合物的盐：伯、仲和叔胺、取代的胺包括天然存在的取代胺、环胺以及碱性离子交换树脂，例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N，N’-二苯甲基乙二胺、二乙胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基-吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、葡萄糖胺、组氨酸、海巴明、异丙基胺、赖氨酸、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、多胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、缓血酸胺等。术语“可药用盐”还包括所有可接受的盐例如乙酸盐、乳糖酸盐、苯磺酸盐、月桂酸盐、苯甲酸盐、苹果酸盐、碳酸氢盐、马来酸盐、硫酸氢盐、扁桃酸盐、酒石酸氢盐、甲磺酸盐、硼酸盐、甲基溴化物、溴化物、甲基硝酸盐、乙二胺四乙酸钙、甲基硫酸盐、右旋樟脑磺酸盐、粘酸盐、碳酸盐、萘磺酸盐、氯化物、硝酸盐、克拉维酸盐、N-甲基葡糖胺、柠檬酸盐、铵盐、二盐酸化物、油酸盐、乙二胺四乙酸盐、草酸盐、乙二磺酸盐、巴莫酸盐(pamoate)(双羟萘酸盐)、依托酸盐、棕榈酸盐、乙磺酸盐、泛酸盐、延胡索酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐、葡庚糖酸盐、聚半乳糖醛酸盐、葡萄糖酸盐、水杨酸盐、谷氨酸盐、硬脂酸盐、乙醇酰阿散酸盐、硫酸盐、己基间苯二酚盐、碱式乙酸盐、海巴明、琥珀酸盐、氢溴酸盐、单宁酸盐、盐酸盐、酒石酸盐、羟基萘甲酸盐、茶氯酸盐、碘化物、甲苯磺酸盐、异硫氰酸盐、三乙基碘化物、乳酸盐、panoate、戊酸盐等，其可以用作调节溶解性或水解特征的制剂，或者可以用于持续释放或前体药物制剂中。应该理解，当在本文中使用时，对本文公开的OXM类似物的指称意味着还包括可药用盐。

当在本文中使用时，术语“可药用的”是指不干扰活性成分的生物活性有效性，由联邦或州政府的管理结构批准或列于美国药典或其他公认的药典中的可用于动物和更具体为人类的无毒性材料。术语“载体”是指用于给药治疗药物的稀释剂、佐剂、赋形剂或介质，其包括但不限于诸如水和油的无菌液体。载体的特性取决于给药途径。本文公开的OXM类似物可以采取与自身或其他肽的多体(例如异源二体或同源二体)或络合物的形式。因此，本发明的药物组合物可以在这样的多体或络合形式中包含一种或多种本文公开的OXM类似物。

当在本文中使用时，术语“治疗有效量”是指药物组合物或方法的每种活性成分的总量，所述总量足以显示出有意义的患者益处，即相关医学状况的治疗、治愈、预防或改善，或增加这些状况的治疗、治愈、预防或改善率。当应用于单独给药的单个活性成分时，术语是指称该单独的成分。当应用于组合时，术语是指产生治疗效果的活性成分的组合的量，不论这些活性成分是组合、连续还是同时给药。

药物组合物可以包含一种或多种本文公开的OXM类似物；一种或多种本文公开的OXM类似物和一种或多种用于治疗代谢障碍的其他药剂；或者包含一种或多种本文公开的OXM类似物的药物组合物可以与包含用于治疗代谢障碍的药剂的药物组合物同时使用。这样的障碍包括但不限于肥胖症、代谢综合征或综合征X、II型糖尿病、糖尿病的并发症、高血压、血脂异常、心血管疾病、胆结石、骨关节炎和某些形式的癌症。

当药物组合物包含另一种用于治疗代谢障碍的药剂，或者治疗包括第二种包含用于治疗代谢障碍的药剂的药物组合物时，药剂包括但不限于大麻类物质(CB1)受体拮抗剂、胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂、脂肪酶抑制剂、瘦素、四氢利普司他汀、2-4-二硝基酚、阿卡波糖、西布曲明、苯丁胺、脂肪吸收阻断剂、辛伐他汀、美伐他汀、依泽替米、阿伐他汀、西他列汀、二甲双胍、奥利司他、Qnexa、托吡酯、纳曲酮、安非他酮、苯丁胺、氯沙坦、氯沙坦与氢氯噻嗪等。

与本发明的化合物组合使用的适合的药剂包括但不限于：

(a)在已出版的国际专利申请WO2007/109135中公开的神经介素U受体激动剂。

(b)抗糖尿病药剂例如(1)PPARγ激动剂例如格列酮类(例如环格列酮、达格列酮、恩格列酮、伊沙列酮(MCC-555))；匹格列酮(ACTOS)；罗格列酮(AVANDIA)；曲格列酮；来格列酮、BRL49653；CLX-0921；5-BTZD、GW-0207、LG-100641、R483和LY-300512等，以及在WO97/10813、97/27857、97/28115、97/28137、97/27847、03/000685和03/027112中公开的化合物，以及SPPARMS(选择性PPARγ调节剂)例如T131(Amgen)、FK614(Fujisawa)、奈托列酮和美他达森(metaglidasen)；(2)双胍类药物例如丁双胍、二甲双胍和苯乙双胍等；(3)蛋白酪氨酸磷酸酶-1B(PTP-1B)抑制剂例如ISIS113715、A-401674、A-364504、IDD-3、IDD2846、KP-40046、KR61639、MC52445、MC52453、C7、OC-060062、OC-86839、OC29796、TTP-277BC1以及在WO04/041799、04/050646、02/26707、02/26743、04/092146、03/048140、04/089918、03/002569、04/065387、04/127570和US2004/167183中公开的药剂；(4)磺酰脲类例如醋磺己脲、氯磺丙脲、氯磺丙脲、格列本脲、格列吡嗪、优降糖、格列美脲、格列齐特、格列戊脲、格列喹酮、格列索脲、妥拉磺脲和甲苯磺丁脲等；(5)氯茴苯酸类药物例如瑞格列奈、米格列奈(GLUFAST)和那格列奈等，(6)α-葡糖苷水解酶抑制剂例如阿卡波糖、脂解素、卡格列波糖、乙格列酯、米格列醇、伏格列波糖、普拉定霉素-Q、萨伯斯塔定(salbostatin)、CKD-711、MDL-25,637、MDL-73,945和MOR14等，(7)α-淀粉酶抑制剂例如淀粉酶抑肽、萃他丁和Al-3688等，(8)胰岛素促分泌素类例如利诺格列、那格列奈、米格列奈(GLUFAST)、ID1101A-4166等；(9)脂肪酸氧化抑制剂，例如氯莫克舍和乙莫克舍等；(10)A2拮抗剂例如咪格列唑、伊格列哚、德格列哚、咪唑克生、爱罗森(earoxan)和氟洛克生等；(11)胰岛素或胰岛素模拟物例如比欧他(biota)、LP-100、novarapid、地特胰岛素、赖脯胰岛素、甘精胰岛素、胰岛素锌混悬液(慢和特慢)；Lys-Pro胰岛素、GLP-1(17-36)、GLP-1(73-7)(insulintropin)；GLP-1(7-36)-NH₂)艾塞那肽/Exendin-4、艾塞那肽LAR、利拉鲁肽、AVE0010、CJC1131、BIM51077、CS872、THO318、BAY-694326、GP010、ALBUGON(与白蛋白融合的GLP-1)、HGX-007(Epac激动剂)、S-23521以及在WO04/022004、WO04/37859中公开的化合物等；(12)非噻唑烷二酮类药物例如JT-501和法格列酮(GW-2570/GI-262579)等；(13)PPARα/γ双重激动剂例如AVE0847、CLX-0940、GW-1536、GW1929、GW-2433、KRP-297、L-796449、LBM642、LR-90、LY510919、MK-0767、ONO5129、SB219994、TAK-559、TAK-654、677954(GlaxoSmithkline)、E-3030(Eisai)、LY510929(Lilly)、AK109(Asahi)、DRF2655(Dr.Reddy)、DRF8351(Dr.Reddy)、MC3002(Maxocore)、TY51501(ToaEiyo)、纳格列扎、莫格他唑、配格列扎(peliglitazar)、替格列扎(GALIDA)、瑞格列扎(JTT-501)、西格列羧，以及在WO99/16758、WO99/19313、WO99/20614、WO99/38850、WO00/23415、WO00/23417、WO00/23445、WO00/50414、WO01/00579、WO01/79150、WO02/062799、WO03/033481、WO03/033450、WO03/033453中所公开的；和(14)其他胰岛素敏化药物；(15)VPAC2受体激动剂；(16)GLK调节剂，例如PSN105、RO281675、RO274375以及在WO03/015774、WO03/000262、WO03/055482、WO04/046139、WO04/045614、WO04/063179、WO04/063194、WO04/050645等中所公开的；(17)类视色素调节剂例如在WO03/000249中所公开的；(18)GSK3β/GSK3抑制剂例如4-[2-(2-溴苯基)-4-(4-氟苯基-1H-咪唑-5-基]吡啶、CT21022、CT20026、CT-98023、SB-216763、SB410111、SB-675236、CP-70949、XD4241，以及在WO03/037869、03/03877、03/037891、03/024447、05/000192、05/019218等中所公开的；(19)糖原磷酸化酶(HGLPa)抑制剂，例如AVE5688、PSN357、GPi-879，以及在WO03/037864、WO03/091213、WO04/092158、WO05/013975、WO05/013981、US2004/0220229和JP2004-196702等中所公开的；(20)ATP消耗促进剂，例如在WO03/007990中所公开的；(21)PPARγ激动剂和二甲双胍类药物的固定组合例如AVANDAMET；(22)PPAR全激动剂例如GSK677954；(23)GPR40(G-蛋白偶联受体40)，也称为SNORF55例如BG700，以及在WO04/041266、04/022551、03/099793中所公开的；(24)GPR119(也称为RUP3、SNORF25)，例如RUP3、HGPRBMY26、PFI007、SNORF25；(25)腺苷受体2B拮抗剂，例如ATL-618、AT1-802、E3080等，(26)肉毒碱棕榈酰基转移酶抑制剂，例如ST1327和ST1326等；(27)果糖1，6-二磷酸酶抑制剂，例如CS-917、MB7803等；(28)胰高血糖素拮抗剂，例如AT77077、BAY694326、GW4123X、NN2501，以及在WO03/064404、WO05/00781、US2004/0209928、US2004/029943等中所公开的；(30)葡萄糖-6-磷酸酶抑制剂；(31)磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)抑制剂；(32)丙酮酸脱氢酶激酶(PDK)活化剂；(33)RXR激动剂，例如MC1036、CS00018、JNJ10166806，以及在WO04/089916、US6759546等中所公开的；(34)SGLT抑制剂，例如AVE2268、KGT1251、T1095/RWJ394718；(35)BLX-1002；

(c)降脂药剂，例如(1)胆汁酸多价螯合剂，例如消胆胺、colesevelem、考来替泊、交联葡聚糖的二烷基氨基烷基衍生物、ColestidLoCholest和Questran等；(2)HMG-CoA还原酶抑制剂，例如阿伐他汀、伊伐他汀、匹伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、普伐他汀、西立伐他汀、罗苏伐他汀、辛伐他汀、罗苏伐他汀(ZD-4522)等，特别是辛伐他汀；(3)HMG-CoA合成酶抑制剂；(4)胆固醇吸收抑制剂，例如FMVP4(ForbesMedi-Tech)、KT6-971(KotobukiPharmaceutical)、FM-VA12(ForbesMedi-Tech)、FM-VP-24(ForbesMedi-Tech)、stanol酯、β-谷甾醇、固醇苷例如替奎安，以及丙内酰胺类例如依泽替米以及在WO04/005247等中所公开的；(5)酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶(ACAT)抑制剂，例如阿伐麦布、依鲁麦布、帕替麦布(KY505)、SMP797(Sumitomo)、SM32504(Sumitomo)，以及在WO03/091216等中所公开的；(6)CETP抑制剂，例如JTT705(JapanTobacco)、托彻普(torcetrapib)、CP532,632、BAY63-2149(Bayer)、SC591、SC795等；(7)鲨烯合成酶抑制剂；(8)抗氧化剂，例如普罗布考等；(9)PPARα激动剂，例如苄氯贝特、苯扎贝特、环丙贝特、氯贝丁酯、依托贝特、非诺贝特、格木卡宾(gemcabene)和吉非贝齐、GW7647、BM170744(Kowa)、LY518674(Lilly)、GW590735(GlaxoSmithkline)、KRP-101(Kyorin)、DRF10945(Dr.Reddy)、NS-220/R1593(NipponShinyaku/Roche)、ST1929(SigmaTau)、MC3001/MC3004(MaxoCorePharmaceuticals)、格木卡宾(gemcabene)钙、其他神经纤维酸衍生物例如AtromidLopid和Tricor以及在US6,548,538等中所公开的；(10)FXR受体调节剂，例如GW4064(GlaxoSmithkline)、SR103912、QRX401、LN-6691(LionBioscience)，以及在WO02/064125、WO04/045511等中所公开的；(11)LXR受体调节剂，例如GW3965(GlaxoSmithkline)、T9013137和XTCO179628(X-CeptorTherapeutics/Sanyo)，以及在WO03/031408、WO03/063796、WO04/072041等中所公开的；(12)脂蛋白合成抑制剂，例如烟酸；(13)肾素-血管紧张素系统抑制剂；(14)PPARδ部分激动剂，例如在WO03/024395中所公开的；(15)胆汁酸重吸收抑制剂，例如BARI1453、SC435、PHA384640、S8921、AZD7706等，以及胆汁酸多价螯合剂例如考来维仑(WELCHOL/CHOLESTAGEL)；(16)PPARγ激动剂，例如GW501516(Ligand、GSK)、GW590735、GW-0742(GlaxoSmithkline)、T659(Amgen/Tularik)、LY934(Lilly)、NNC610050(NovoNordisk)，以及在WO97/28149、WO01/79197、WO02/14291、WO02/46154、WO02/46176、WO02/076957、WO03/016291、WO03/033493、WO03/035603、WO03/072100、WO03/097607、WO04/005253、WO04/007439和JP10237049等中所公开的；(17)甘油三酯合成抑制剂；(18)微粒体甘油三酯运输(MTTP)抑制剂，例如英普他派、LAB687、JTT130(JapanTobacco)、CP346086，以及在WO03/072532等中所公开的；(19)转录调节剂；(20)鲨烯环氧酶抑制剂；(21)低密度脂蛋白(LDL)受体诱导物；(22)血小板凝集抑制剂；(23)5-LO或FLAP抑制剂；以及(24)烟酸受体激动剂，包括HM74A受体激动剂；(25)PPAR调节剂，例如在WO01/25181、WO01/79150、WO02/79162、WO02/081428、WO03/016265、WO03/033453中所公开的；(26)WO03/039535中公开的烟酸结合性铬；(27)WO03/040114中公开的取代酸衍生物；(28)注入的HDL，例如LUV/ETC-588(Pfizer)、APO-A1Milano/ETC216(Pfizer)、ETC-642(Pfizer)、ISIS301012、D4F(BruinPharma)、合成的三体ApoA1、靶向泡沫细胞的BioralApoA1等；(29)IBAT抑制剂，例如BARI143/HMR145A/HMR1453(Sanofi-Aventis)、PHA384640E(Pfizer)、S8921(Shionogi)、AZD7806(AstrZeneca)、AK105(AsahKasei)等；(30)Lp-PLA2抑制剂，例如SB480848(GlaxoSmithkline)、659032(GlaxoSmithkline)、677116(GlaxoSmithkline)等；(31)其他影响脂类组成的药剂，包括ETC1001/ESP31015(Pfizer)、ESP-55016(Pfizer)、AGI1067(AtheroGenics)、AC3056(Amylin)、AZD4619(AstrZeneca)；以及

(d)抗高血压药剂，例如(1)利尿剂，例如噻嗪类包括氯噻酮、氯噻嗪、二氯苯磺胺、氢氟甲噻嗪、吲达帕胺和氢氯噻嗪；环利尿剂，例如布美他尼、利尿酸、呋塞米和托拉塞米；留钾剂，例如阿米洛利和氨苯蝶啶；以及醛甾酮拮抗剂，例如螺内酯、依普利酮等；(2)β-肾上腺素能阻断剂，例如醋丁洛尔、阿替洛尔、倍他洛尔、贝凡洛尔、比索洛尔、波吲洛尔、卡替洛尔、卡维地洛、塞利洛尔、艾司洛尔、茚诺洛尔、美托洛尔、纳多洛尔、奈必洛尔、喷布洛尔、吲哚洛尔、心得安、索他洛尔、特他洛尔、替利洛尔和噻吗咯尔等；(3)钙通道阻断剂，例如氨氯地平、阿雷地平、阿折地平、巴尼地平、贝尼地平、苄普地尔、西尼地平、氯维地平、地尔硫卓、依福地平、非洛地平、戈洛帕米、伊拉地平、拉西地平、来米地平、乐卡地平、尼卡地平、硝苯地平、尼伐地平、尼莫地平、尼索地平、尼群地平、马尼地平、普拉地平和维拉帕米等；(4)血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂例如贝那普利、卡托普利、西拉普利、地拉普利、依那普利、福辛普利、咪达普利、赖诺普利、莫昔普利、喹那普利、喹普利拉、雷米普利、培哚普利、培哚普利、喹那普利、螺普利、替莫普利、群多普利和佐芬普利等；(5)中性内切肽酶抑制剂，例如奥马曲拉、坎沙曲和依卡曲尔、法西多曲、山帕曲拉、AVE7688、ER4030等；(6)内皮素拮抗剂例如tezosentan、A308165和YM62899等；(7)血管舒张剂，例如肼苯哒嗪、可乐定、米诺地尔和烟醇等；(8)血管紧张素II受体拮抗剂，例如坎地沙坦、依普罗沙坦、厄贝沙坦、氯沙坦、普拉沙坦、他索沙坦、替米沙坦、缬沙坦和EXP-3137、FI6828K以及RNH6270等；(9)α/β-肾上腺素能阻断剂，例如尼普地洛、阿罗洛尔和氨磺洛尔等；(10)α1阻断剂，例如特拉唑嗪、乌拉地尔、哌唑嗪、布那唑嗪、曲马唑嗪、多沙唑嗪、萘哌地尔、吲哚拉明、WHIP164和XEN010等；(11)α2激动剂，例如洛非西定、硫美尼定、莫索尼定、利美尼定和胍那苄等；(12)醛固酮抑制剂等；(13)促血管生成素-2结合剂，例如在WO03/030833中所公开的；以及

(e)抗肥胖症药剂，例如(1)5HT(血清素)转运蛋白抑制剂，例如帕罗西汀、氟西汀、芬氟拉明、氟伏沙明、舍曲林和丙咪嗪，以及在WO03/00663中所公开的，以及血清素/去甲肾上腺素重吸收抑制剂例如西布曲明(MERIDIA/REDUCTIL)和多巴胺吸收抑制剂/去甲肾上腺素吸收抑制剂例如盐酸雷达法辛、353162(GlaxoSmithkline)等，(2)NE(去甲肾上腺素)转运蛋白抑制剂，例如GW320659、地昔帕明、他舒普仑和诺米芬辛；(3)CB1(大麻类物质-1受体)拮抗剂/反激动剂，例如利莫那班(ACCOMPLIASanofiSynthelabo)、SR-147778(SanofiSynthelabo)、AVE1625(Sanofi-Aventis)、BAY65-2520(Bayer)、SLV319(Solvay)、SLV326(Solvay)、CP945598(Pfizer)、E-6776(Esteve)、O1691(Organix)、ORG14481(Organon)、VER24343(Vernalis)、NESS0327(UnivofSassari/UnivofCagliari)，以及在美国专利No.4,973,587、5,013,837、5,081,122、5,112,820、5,292,736、5,532,237、5,624,941、6,028,084和6,509367以及WO96/33159、WO97/29079、WO98/31227、WO98/33765、WO98/37061、WO98/41519、WO98/43635、WO98/43636、WO99/02499、WO00/10967、WO00/10968、WO01/09120、WO01/58869、WO01/64632、WO01/64633、WO01/64634、WO01/70700、WO01/96330、WO02/076949、WO03/006007、WO03/007887、WO03/020217、WO03/026647、WO03/026648、WO03/027069、WO03/027076、WO03/027114、WO03/037332、WO03/040107、WO04/096763、WO04/111039、WO04/111033、WO04/111034、WO04/111038、WO04/013120、WO05/000301、WO05/016286、WO05/066126和EP-658546等中所公开的；(4)ghrelin激动剂/拮抗剂，例如BVT81-97(BioVitrum)、RC1291(Rejuvenon)、SRD-04677(Sumitomo)、未酰化的ghrelin(TheraTechnologies)，以及在WO01/87335、WO02/08250、WO05/012331等中所公开的；(5)H3(组胺H3)拮抗剂/反激动剂，例如噻普酰胺、3-(1H-咪唑-4-基)丙基N-(4-戊烯基)氨基甲酸酯、氯苯普罗特(clobenpropit)、碘苯普罗特(iodophenpropit)、imoproxifan、GT2394(Gliatech)和A331440，以及在WO02/15905中所公开的；和O-[3-(1H-咪唑-4-基)丙醇]氨基甲酸酯(Kiec-Kononowicz，K.等，Pharmazie，55：349-55(2000))、含哌啶的组胺H3-受体拮抗剂(Lazewska，D.等，Pharmazie、56：927-32(2001)、二苯甲酮衍生物和相关化合物(Sasse，A.等，Arch.Pharm.(Weinheim)334：45-52(2001))、取代的N-苯基氨基甲酸酯(Reidemeister，S.等，Pharmazie，55：83-6(2000))和proxifan衍生物(Sasse，A.等，J.Med.Chem..43：3335-43(2000))以及组胺H3受体调节剂，例如在WO03/024928和WO03/024929中所公开的；(6)黑色素聚集激素1受体(MCH1R)拮抗剂，例如T-226296(Takeda)、T71(Takeda/Amgen)、AMGN-608450、AMGN-503796(Amgen)、856464(GlaxoSmithkline)、A224940(Abbott)、A798(Abbott)、ATC0175/AR224349(ArenaPharmaceuticals)、GW803430(GlaxoSmithkine)、NBI-1A(NeurocrineBiosciences)、NGX-1(Neurogen)、SNP-7941(Synaptic)、SNAP9847(Synaptic)、T-226293(ScheringPlough)、TPI-1361-17(SaitamaMedicalSchool/UniversityofCaliforniaIrvine)，以及在WO01/21169、WO01/82925、WO01/87834、WO02/051809、WO02/06245、WO02/076929、WO02/076947、WO02/04433、WO02/51809、WO02/083134、WO02/094799、WO03/004027、WO03/13574、WO03/15769、WO03/028641、WO03/035624、WO03/033476、WO03/033480、WO04/004611、WO04/004726、WO04/011438、WO04/028459、WO04/034702、WO04/039764、WO04/052848、WO04/087680和日本专利申请No.JP13226269、JP1437059、JP2004315511等中所公开的；(7)MCH2R(黑色素聚集激素2R)激动剂/拮抗剂；(8)NPY1(神经肽YY1)拮抗剂，例如BMS205749、BIBP3226、J-115814、BIBO3304、LY-357897、CP-671906和GI-264879A，以及在美国专利No.6,001,836和WO96/14307、WO01/23387、WO99/51600、WO01/85690、WO01/85098、WO01/85173和WO01/89528中所公开的；(9)NPY5(神经肽YY5)拮抗剂，例如152,804、S2367(Shionogi)、E-6999(Esteve)、GW-569180A、GW-594884A(GlaxoSmithkline)、GW-587081X、GW-548118X、FR235,208、FR226928、FR240662、FR252384、1229U91、GI-264879A、CGP71683A、C-75(Fasgen)LY-377897、LY366377、PD-160170、SR-120562A、SR-120819A、S2367(Shionogi)、JCF-104和H409/22，以及在美国专利No.6,140,354、6,191,160、6,258,837、6,313,298、6,326,375、6,329,395、6,335,345、6,337,332、6,329,395和6,340,683和EP-01010691、EP-01044970和FR252384以及PCT公开号WO97/19682、WO97/20820、WO97/20821、WO97/20822、WO97/20823、WO98/27063、WO00/107409、WO00/185714、WO00/185730、WO00/64880、WO00/68197、WO00/69849、WO01/09120、WO01/14376、WO01/85714、WO01/85730、WO01/07409、WO01/02379、WO01/02379、WO01/23388、WO01/23389、WO01/44201、WO01/62737、WO01/62738、WO01/09120、WO02/20488、WO02/22592、WO02/48152、WO02/49648、WO02/051806、WO02/094789、WO03/009845、WO03/014083、WO03/022849、WO03/028726、WO05/014592、WO05/01493，以及Norman等，J.Med.Chem.43：4288-4312(2000)中所公开的化合物；(10)瘦素，例如重组人类瘦素(PEG-OB、HoffmanLaRoche)和重组甲二璜酰基人类瘦素(Amgen)；(11)瘦素衍生物，例如在专利No.5,552,524、5,552,523、5,552,522、5,521,283和WO96/23513、WO96/23514、WO96/23515、WO96/23516、WO96/23517、WO96/23518、WO96/23519和WO96/23520中所公开的；(12)阿片样拮抗剂，例如纳美芬(Revex)、3-甲氧基纳曲酮、纳洛酮和纳曲酮，以及在WO00/21509中所公开的；(13)促食素拮抗剂，例如SB-334867-A(GlaxoSmithkline)，以及在WO01/96302、01/68609、02/44172、02/51232、02/51838、02/089800、02/090355、03/023561、03/032991、03/037847、04/004733、04/026866、04/041791、04/085403等中所公开的；(14)BRS3(铃蟾肽受体亚型3)激动剂；(15)CCK-A(胆囊收缩素-A)激动剂，例如AR-R15849、GI181771、JMV-180、A-71378、A-71623、PD170292、PD149164、SR146131、SR125180、butabindide，以及在US5,739,106中所公开的；(16)CNTF(睫状神经营养因子)，例如GI-181771(Glaxo-SmithKline)、SR146131(SanofiSynthelabo)、butabindide以及PD170,292、PD149164(Pfizer)；(17)CNTF衍生物，例如axokine(Regeneron)，以及在WO94/09134、WO98/22128和WO99/43813中所公开的；(18)GHS(生长激素促分泌素受体)激动剂，例如NN703、海沙瑞林、MK-0677、SM-130686、CP-424,391、L-692,429和L-163,255，以及在美国专利No.6358951、美国专利申请号No.2002/049196和2002/022637，以及WO01/56592和WO02/32888中所公开的；(19)5HT2c(血清素受体2c)激动剂，例如APD3546/AR10A(ArenaPharmaceuticals)、ATH88651(Athersys)、ATH88740(Athersys)、BVT933(Biovitrum/GSK)、DPCA37215(BMS)、IK264、LY448100(Lilly)、PNU22394、WAY470(Wyeth)、WAY629(Wyeth)、WAY161503(Biovitrum)、R-1065、VR1065(Vernalis/Roche)YM348，以及在美国专利No.3,914,250和PCT出版物01/66548、02/36596、02/48124、02/10169、02/44152、02/51844、02/40456、02/40457、03/057698、05/000849等中所公开的；(20)Mc3r(黑素皮质激素3受体)激动剂；(21)Mc4r(黑素皮质激素4受体)激动剂，例如CHIR86036(Chiron)、CHIR915(Chiron)、ME-10142(Melacure)、ME-10145(Melacure)、HS-131(Melacure)、NBI72432(NeurocrineBiosciences)、NNC70-619(NovoNordisk)、TTP2435(Transtech)，以及在PCT出版物WO99/64002、00/74679、01/991752、01/0125192、01/52880、01/74844、01/70708、01/70337、01/91752、01/010842、02/059095、02/059107、02/059108、02/059117、02/062766、02/069095、02/12166、02/11715、02/12178、02/15909、02/38544、02/068387、02/068388、02/067869、02/081430、03/06604、03/007949、03/009847、03/009850、03/013509、03/031410、03/094918、04/028453、04/048345、04/050610、04/075823、04/083208、04/089951、05/000339和EP1460069以及US2005049269和JP2005042839等中所公开的；(22)单胺重摄取抑制剂，例如西布曲明(Meridia/Reductil)及其盐，以及在美国专利No.4,746,680、4,806,570和5,436,272以及美国专利出版号No.2002/0006964和WO01/27068、WO01/62341中所公开的化合物；(23)血清素重摄取抑制剂，例如右芬氟拉明、氟西汀，以及在美国专利No.6,365,633和WO01/27060以及WO01/162341中所公开的；(24)GLP-1(胰高血糖素样肽1)激动剂；(25)托吡酯(Topimax)；(26)phytopharm化合物57(CP644,673)；(27)ACC2(乙酰CoA羧化酶-2)抑制剂；(28)β3(β-肾上腺素能受体3)激动剂，例如rafebergron/AD9677/TAK677(Dainippon/Takeda)、CL-316,243、SB418790、BRL-37344、L-796568、BMS-196085、BRL-35135A、CGP12177A、BTA-243、GRC1087(GlenmarkPharmaceuticals)、GW427353(索拉勃隆盐酸盐)、曲卡君、ZenecaD7114、N-5984(NisshinKyorin)、LY-377604(Lilly)、KT07924(Kissei)、SR59119A，以及在美国专利No.5,705,515、US5,451,677和WO94/18161、WO95/29159、WO97/46556、WO98/04526WO98/32753、WO01/74782、WO02/32897、WO03/014113、WO03/016276、WO03/016307、WO03/024948、WO03/024953、WO03/037881、WO04/108674等中所公开的；(29)DGAT1(二酰甘油酰基转移酶1)抑制剂；(30)DGAT2(二酰甘油酰基转移酶2)抑制剂；(31)FAS(脂肪酸合酶)抑制剂，例如浅蓝菌素和C75；(32)PDE(磷酸二酯酶)抑制剂，例如茶碱、己酮可可碱、扎普司特、西地那非、氨利酮、米力农、西洛酰胺、咯利普兰和西洛司特，以及在WO03/037432、WO03/037899中所公开的；(33)甲状腺激素β激动剂，例如KB-2611(KaroBioBMS)，以及在WO02/15845和日本专利申请No.JP2000256190中所公开的；(34)UCP-1(解偶联蛋白1)、2或3激活剂，例如植烷酸、4-[(E)-2-(5，6，7，8-四氢-5，5，8，8-四甲基-2-萘基)-1-丙烯基]苯甲酸(TTNPB)和视黄酸，以及在WO99/00123中所公开的；(35)酰基-雌激素，例如油酰基-雌酮，在delMar-Grasa，M.等，ObesityResearch，9：202-9(2001)中所公开的；(36)糖皮质激素受体拮抗剂，例如CP472555(Pfizer)、KB3305，以及在WO04/000869、WO04/075864等中所公开的；(37)11βHSD-1(11-β羟基甾醇脱氢酶1型)抑制剂，例如BVT3498(AMG331)、BVT2733、3-(1-金刚烷基)-4-乙基-5-(乙硫基)-4H-1，2，4-三唑、3-(1-金刚烷基)-5-(3，4，5-三甲氧基苯基)-4-甲基-4H-1，2，4-三唑、3-金刚烷基-4，5，6，7，8，9，10，11，12，3a-十氢-1，2，4-三唑并[4，3-a][11]轮烯，以及在WO01/90091、01/90090、01/90092、02/072084、04/011410、04/033427、04/041264、04/027047、04/056744、04/065351、04/089415、04/037251等中所公开的化合物；(38)SCD-1(硬脂酰CoA去饱和酶-1)抑制剂；(39)二肽基肽酶IV(DPP-4)抑制剂，例如异亮氨酸噻唑烷、缬氨酸吡咯烷、西他列汀、沙格列汀、NVP-DPP728、LAF237(维格列汀)、P93/01、TSL225、TMC-2A/2B/2C、FE999011、P9310/K364、VIP0177、SDZ274-444、GSK823093、E3024、SYR322、TS021、SSR162369、GRC8200、K579、NN7201、CR14023、PHX1004、PHX1149、PT-630、SK-0403，以及在WO02/083128、WO02/062764、WO02/14271、WO03/000180、WO03/000181、WO03/000250、WO03/002530、WO03/002531、WO03/002553、WO03/002593、WO03/004498、WO03/004496、WO03/005766、WO03/017936、WO03/024942、WO03/024965、WO03/033524、WO03/055881、WO03/057144、WO03/037327、WO04/041795、WO04/071454、WO04/0214870、WO04/041273、WO04/041820、WO04/050658、WO04/046106、WO04/067509、WO04/048532、WO04/099185、WO04/108730、WO05/009956、WO04/09806、WO05/023762、US2005/043292和EP1258476中所公开的化合物；(40)脂肪酶抑制剂，例如四氢利普司他汀(奥利司他/XENICAL)、ATL962(Alizyme/Takeda)、GT389255(Genzyme/Peptimmune)、曲拉通WR1339、RHC80267、尼泊司他汀、茶皂素和二乙基伞形基磷酸酯、FL-386、WAY-121898、Bay-N-3176、缬基内酯、esteracin、抑脂酶免疫酮A、抑脂酶免疫酮B和RHC80267，以及在WO01/77094、WO04/111004和美国专利No.4,598,089、4,452,813、5,512,565、5,391,571、5,602,151、4,405,644、4,189,438和4,242,453等中所公开的；(41)脂肪酸转运蛋白抑制剂；(42)二羧酸转运蛋白抑制剂；(43)葡萄糖转运蛋白抑制剂；以及(44)磷酸转运蛋白抑制剂；(45)降低食欲的双环化合物例如1426(Aventis)和1954(Aventis)，以及在WO00/18749、WO01/32638、WO01/62746、WO01/62747和WO03/015769中所公开的化合物；(46)肽YY和PYY激动剂，例如PYY336(Nastech/Merck)、AC162352(ICInnovations/Curis/Amylin)、TM30335/TM30338(7TMPharma)、PYY336(EmisphereTehcnologies)、PEG化的肽YY3-36，以及在WO03/026591、04/089279等中所公开的；(47)脂类代谢调节物，例如山楂酸、高根二醇、熊果酸、熊果醇、桦木酸、桦木素等，以及在WO03/011267中所公开的化合物；(48)转录因子调节物，例如在WO03/026576中所公开的；(49)Mc5r(黑素皮质激素5受体)调节物，例如在WO97/19952、WO00/15826、WO00/15790、US20030092041等中所公开的；(50)脑源性神经营养因子(BDNF)；(51)Mc1r(黑素皮质激素1受体调节物，例如LK-184(Proctor&Gamble)等；(52)5HT6拮抗剂，例如BVT74316(BioVitrum)、BVT5182c(BioVitrum)、E-6795(Esteve)、E-6814(Esteve)、SB399885(GlaxoSmithkline)、SB271046(GlaxoSmithkline)、RO-046790(Roche)等；(53)脂肪酸转运蛋白4(FATP4)；(54)乙酰CoA羧化酶(ACC)抑制剂，例如CP640186、CP610431、CP640188(Pfizer)；(55)C-末端生长激素片段，例如AOD9604(MonashUniv/MetabolicPharmaceuticals)等；(56)胃泌酸调节素；(57)神经肽FF受体拮抗剂，例如在WO04/083218等中所公开的；(58)糊精激动剂，例如Symlin/普兰林肽/AC137(Amylin)；(59)Hoodia和trichocaulon提取物；(60)BVT74713和其他消化道脂类食欲抑制剂；(61)多巴胺激动剂，例如安非他酮(WELLBUTRIN/GlaxoSmithkline)；(62)唑尼沙胺(ZONEGRAN/Dainippon/Elan)等。

可以与本文公开的OXM类似物组合使用的具体化合物包括特异性CB1拮抗剂/反激动剂，包括在WO03/077847中所公开的，包括：N-[3-(4-氯苯基)-2(S)-苯基-1(S)-甲基丙基]-2-(4-三氟甲基-2-嘧啶基氧基)-2-甲基丙酰胺、N-[3-(4-氯苯基)-2-(3-氰基苯基)-1-甲基丙基]-2-(5-三氟甲基-2-吡啶基氧基)-2-甲基丙酰胺、N-[3-(4-氯苯基)-2-(5-氯-3-吡啶基)-1-甲基丙基]-2-(5-三氟甲基-2-吡啶基氧基)-2-甲基丙酰胺及其可药用盐；以及在WO05/000809中所公开的，其包括下列化合物：3-{1-[双(4-氯苯基)甲基]氮杂环丁-3-亚基}-3-(3，5-二氟苯基)-2，2-二甲基丙腈、1-{1-[1-(4-氯苯基)戊基]氮杂环丁-3-基}-1-(3，5-二氟苯基)-2-甲基丙-2-醇、3-((S)-(4-氯苯基){3-[(1S)-1-(3，5-二氟苯基)-2-羟基-2-甲基丙基]氮杂环丁-1-基}甲基)苄腈、3-((S)-(4-氯苯基){3-[(1S)-1-(3，5-二氟苯基)-2-氟-2-甲基丙基]氮杂环丁-1-基}甲基)苄腈、3-((4-氯苯基){3-[1-(3，5-二氟苯基)-2，2-二甲基丙基]氮杂环丁-1-基}甲基)苄腈、3-((1S)-1-{1-[(S)-(3-氰基苯基)(4-氰基苯基)甲基]氮杂环丁-3-基}-2-氟-2-甲基丙基)-5-氟苄腈、3-[(S)-(4-氯苯基)(3-{(1S)-2-氟-1-[3-氟-5-(4H-1，2，4-三唑-4-基)苯基]-2-甲基丙基}氮杂环丁-1-基)甲基]苄腈和5-((4-氯苯基){3-[(1S)-1-(3，5-二氟苯基)-2-氟-2-甲基丙基]氮杂环丁-1-基}甲基)噻吩-3-甲腈及其可药用盐；以及：3-[(S)-(4-氯苯基)(3-{(1S)-2-氟-1-[3-氟-5-(5-氧代-4，5-二氢-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基]-2-甲基丙基}氮杂环丁-1-基)甲基]苄腈、3-[(S)-(4-氯苯基)(3-{(1S)-2-氟-1-[3-氟-5-(1，3，4-噁二唑-2-基)苯基]-2-甲基丙基}氮杂环丁-1-基)甲基]苄腈、3-[(S)-(3-{(1S)-1-[3-(5-氨基-1，3，4-噁二唑-2-基)-5-氟苯基]-2-氟-2-甲基丙基}氮杂环丁-1-基)(4-氯苯基)甲基]苄腈、3-[(S)-(4-氰基苯基)(3-{(1S)-2-氟-1-[3-氟-5-(5-氧代-4，5-二氢-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基]-2-甲基丙基}氮杂环丁-1-基)甲基]苄腈、3-[(S)-(3-{(1S)-1-[3-(5-氨基-1，3，4-噁二唑-2-基)-5-氟苯基]-2-氟-2-甲基丙基}氮杂环丁-1-基)(4-氰基苯基)甲基]苄腈、3-[(S)-(4-氰基苯基)(3-{(1S)-2-氟-1-[3-氟-5-(1，3，4-噁二唑-2-基)苯基]-2-甲基丙基}氮杂环丁-1-基)甲基]苄腈、3-[(S)-(4-氯苯基)(3-{(1S)-2-氟-1-[3-氟-5-(1，2，4-噁二唑-3-基)苯基]-2-甲基丙基}氮杂环丁-1-基)甲基]苄腈、3-[(1S)-1-(1-{(S)-(4-氰基苯基)[3-(1，2，4-噁二唑-3-基)苯基]-甲基}氮杂环丁-3-基)-2-氟-2-甲基丙基]-5-氟苄腈、5-(3-{1-[1-(二苯基甲基)氮杂环丁-3-基]-2-氟-2-甲基丙基}-5-氟苯基)-1H-四唑、5-(3-{1-[1-(二苯基甲基)氮杂环丁-3-基]-2-氟-2-甲基丙基}-5-氟苯基)-1-甲基-1H-四唑、5-(3-{1-[1-(二苯基甲基)氮杂环丁-3-基]-2-氟-2-甲基丙基}-5-氟苯基)-2-甲基-2H-四唑、3-[(4-氯苯基)(3-{2-氟-1-[3-氟-5-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯基]-2-甲基丙基}氮杂环丁-1-基)甲基]苄腈、3-[(4-氯苯基)(3-{2-氟-1-[3-氟-5-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯基]-2-甲基丙基}氮杂环丁-1-基)甲基]苄腈、3-[(4-氰基苯基)(3-{2-氟-1-[3-氟-5-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯基]-2-甲基丙基}氮杂环丁-1-基)甲基]苄腈、3-[(4-氰基苯基)(3-{2-氟-1-[3-氟-5-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯基]-2-甲基丙基}氮杂环丁-1-基)甲基]苄腈、5-{3-[(S)-{3-[(1S)-1-(3-溴-5-氟苯基)-2-氟-2-甲基丙基]氮杂环丁-1-基}(4-氯苯基)甲基]苯基}-1，3，4-噁二唑-2(3H)-酮、3-[(1S)-1-(1-{(S)-(4-氯苯基)[3-(5-氧代-4，5-二氢-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基]甲基}氮杂环丁-3-基)-2-氟-2-甲基丙基]-5-氟苄腈、3-[(1S)-1-(1-{(S)-(4-氰基苯基)[3-(5-氧代-4，5-二氢-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基]甲基}氮杂环丁-3-基)-2-氟-2-甲基丙基]-5-氟苄腈、3-[(1S)-1-(1-{(S)-(4-氰基苯基)[3-(1，3，4-噁二唑-2-基)苯基]甲基}氮杂环丁-3-基)-2-氟-2-甲基丙基]-5-氟苄腈、3-[(1S)-1-(1-{(S)-(4-氯苯基)[3-(1，3，4-噁二唑-2-基)苯基]甲基}氮杂环丁-3-基)-2-氟-2-甲基丙基]-5-氟苄腈、3-((1S)-1-{1-[(S)-[3-(5-氨基-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基](4-氯苯基)甲基]氮杂环丁-3-基}-2-氟-2-甲基丙基)-5-氟苄腈、3-((1S)-1-{1-[(S)-[3-(5-氨基-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基](4-氰基苯基)甲基]氮杂环丁-3-基}-2-氟-2-甲基丙基)-5-氟苄腈、3-[(1S)-1-(1-{(S)-(4-氰基苯基)[3-(1，2，4-噁二唑-3-基)苯基]甲基}氮杂环丁-3-基)-2-氟-2-甲基丙基]-5-氟苄腈、3-[(1S)-1-(1-{(S)-(4-氯苯基)[3-(1，2，4-噁二唑-3-基)苯基]甲基}氮杂环丁-3-基)-2-氟-2-甲基丙基]-5-氟苄腈、5-[3-((S)-(4-氯苯基){3-[(1S)-1-(3，5-二氟苯基)-2-氟-2-甲基丙基]氮杂环丁-1-基}甲基)苯基]-1，3，4-噁二唑-2(3H)-酮、5-[3-((S)-(4-氯苯基){3-[(1S)-1-(3，5-二氟苯基)-2-氟-2-甲基丙基]氮杂环丁-1-基}甲基)苯基]-1，3，4-噁二唑-2(3H)-酮、4-{(S)-{3-[(1S)-1-(3，5-二氟苯基)-2-氟-2-甲基丙基]氮杂环丁-1-基}[3-(5-氧代-4，5-二氢-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基]甲基}-苄腈、ACOMPLIA(利莫那班，N-(1-哌啶基)-5-(4-氯苯基)-1-(2，4-二氯苯基)-4-甲基吡唑-3-氨甲酰，SR141716A)、3-(4-氯苯基-N’-(4-氯苯基)磺酰基-N-甲基-4-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-1-氨甲酰(SLV-319)、泰伦那班、N-[(1S，2S)-3-(4-氯苯基)-2-(3-氰基苯基)-1-甲基丙基]-2-甲基-2-[[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]氧基]丙酰胺，及其可药用盐。

可以与本文公开的OXM类似物组合使用的特异性NPY5拮抗剂包括：3-氧代-N-(5-苯基-2-吡嗪基)-螺[异苯并呋喃-1(3H)，4’-哌啶]-1’-氨甲酰、3-氧代-N-(7-三氟甲基吡啶并[3，2-b]吡啶-2-基)螺-[异苯并呋喃-1(3H)，4’-哌啶]-1’-氨甲酰、N-[5-(3-氟苯基)-2-嘧啶基]-3-氧代螺-[异苯并呋喃-1(3H)，4’-哌啶]-1’-氨甲酰、反式-3’-氧代-N-(5-苯基-2-嘧啶基)螺[环己烷-1，1’(3’H)-异苯并呋喃]-4-氨甲酰、反式-3’-氧代-N-[1-(3-喹啉基)-4-咪唑基]螺[环己烷-1，1’(3’H)-异苯并呋喃]-4-氨甲酰、反式-3-氧代-N-(5-苯基-2-吡嗪基)螺[4-氮杂异苯并呋喃-1(3H)，1’-环己烷]-4’-氨甲酰、反式-N-[5-(3-氟苯基)-2-嘧啶基]-3-氧代螺[5-氮杂异苯并呋喃-1(3H)，1’-环己烷]-4’-氨甲酰、反式-N-[5-(2-氟苯基)-2-嘧啶基]-3-氧代螺[5-氮杂异苯并呋喃-1(3H)，1’-环己烷]-4’-氨甲酰、反式-N-[1-(3，5-二氟苯基)-4-咪唑基]-3-氧代螺[7-氮杂异苯并呋喃-1(3H)，1’-环己烷]-4’-氨甲酰、反式-3-氧代-N-(1-苯基-4-吡唑基)螺[4-氮杂异苯并呋喃-1(3H)，1’-环己烷]-4’-氨甲酰、反式-N-[1-(2-氟苯基)-3-吡唑基]-3-氧代螺[6-氮杂异苯并呋喃-1(3H)，1’-环己烷]-4’-氨甲酰、反式-3-氧代-N-(1-苯基-3-吡唑基)螺[6-氮杂异苯并呋喃-1(3H)，1’-环己烷]-4’-氨甲酰、反式-3-氧代-N-(2-苯基-1，2，3-三唑-4-基)螺[6-氮杂异苯并呋喃-1(3H)，1’-环己烷]-4’-氨甲酰，及其可药用盐和酯。

可以与本文公开的OXM类似物组合使用的特异性ACC-1/2抑制剂包括：1′-[(4，8-二甲氧基喹啉-2-基)羰基]-6-(1H-四唑-5-基)螺[色满-2，4′-哌啶]-4-酮、(5-{1′-[(4，8-二甲氧基喹啉-2-基)羰基]-4-氧代螺[色满-2，4′-哌啶]-6-基}-2H-四唑-2-基)甲基新戊酸酯、5-{1′-[(8-环丙基-4-甲氧基喹啉-2-基)羰基]-4-氧代螺[色满-2，4′-哌啶]-6-基}烟酸、1′-(8-甲氧基-4-吗啉-4-基-2-萘甲酰基)-6-(1H-四唑-5-基)螺[色满-2，4′-哌啶]-4-酮；和1′-[(4-乙氧基-8-乙基喹啉-2-基)羰基]-6-(1H-四唑-5-基)螺[色满-2，4′-哌啶]-4-酮，及其可药用盐和酯。

可以与本文公开的OXM类似物组合使用的特异性MCH1R拮抗剂化合物包括：1-{4-[(1-乙基氮杂环丁-3-基)氧基]苯基}-4-[(4-氟苯甲基)氧基]吡啶-2(1H)-酮、4-[(4-氟苯甲基)氧基]-1-{4-[(1-异丙基氮杂环丁-3-基)氧基]苯基}吡啶-2(1H)-酮、1-[4-(氮杂环丁-3-基氧基)苯基]-4-[(5-氯吡啶-2-基)甲氧基]吡啶-2(1H)-酮、4-[(5-氯吡啶-2-基)甲氧基]-1-{4-[(1-乙基氮杂环丁-3-基)氧基]苯基}吡啶-2(1H)-酮、4-[(5-氯吡啶-2-基)甲氧基]-1-{4-[(1-丙基氮杂环丁-3-基)氧基]苯基}吡啶-2(1H)-酮和4-[(5-氯吡啶-2-基)甲氧基]-1-(4-{[(2S)-1-乙基氮杂环丁-2-基]甲氧基}苯基)吡啶-2(1H)-酮，或其可药用盐。

可以与本文公开的OXM类似物组合使用的特异性DPP-IV抑制剂是7-[(3R)-3-氨基-4-(2，4，5-三氟苯基)丁酰基]-3-(三氟甲基)-5，6，7，8-四氢-1，2，4-三唑并[4，3-a]吡嗪，或其可药用盐。

可以与本文公开的OXM类似物组合使用的特异性H3(组胺H3)拮抗剂/反激动剂包括：在WO05/077905中所公开的，包括：3-{4-[(1-环丁基-4-哌啶基)氧基]苯基}-2-乙基吡啶并[2，3-d]-嘧啶-4(3H)-酮、3-{4-[(1-环丁基-4-哌啶基)氧基]苯基}-2-甲基吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮、2-乙基-3-(4-{3-[(3S)-3-甲基哌啶-1-基]丙氧基}苯基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-4(3H)-酮、2-甲基-3-(4-{3-[(3S)-3-甲基哌啶-1-基]丙氧基}苯基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮、3-{4-[(1-环丁基-4-哌啶基)氧基]苯基}-2，5-二甲基-4(3H)-喹唑啉酮、3-{4-[(1-环丁基-4-哌啶基)氧基]苯基}-2-甲基-5-三氟甲基-4(3H)-喹唑啉酮、3-{4-[(1-环丁基-4-哌啶基)氧基]苯基}-5-甲氧基-2-甲基-4(3H)-喹唑啉酮、3-{4-[(1-环丁基哌啶-4-基)氧基]苯基}-5-氟-2-甲基-4(3H)-喹唑啉酮、3-{4-[(1-环丁基哌啶-4-基)氧基]苯基}-7-氟-2-甲基-4(3H)-喹唑啉酮、3-{4-[(1-环丁基哌啶-4-基)氧基]苯基}-6-甲氧基-2-甲基-4(3H)-喹唑啉酮、3-{4-[(1-环丁基哌啶-4-基)氧基]苯基}-6-氟-2-甲基-4(3H)-喹唑啉酮、3-{4-[(1-环丁基哌啶-4-基)氧基]苯基}-8-氟-2-甲基-4(3H)-喹唑啉酮、3-{4-[(1-环戊基-4-哌啶基)氧基]苯基}-2-甲基吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮、3-{4-[(1-环丁基哌啶-4-基)氧基]苯基}-6-氟-2-甲基吡啶并[3，4-d]嘧啶-4(3H)-酮、3-{4-[(1-环丁基-4-哌啶基)氧基]苯基}-2-乙基吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮、6-甲氧基-2-甲基-3-{4-[3-(1-哌啶基)丙氧基]苯基}吡啶并[3，4-d]嘧啶-4(3H)-酮、6-甲氧基-2-甲基-3-{4-[3-(1-吡咯烷基)丙氧基]苯基}吡啶并[3，4-d]嘧啶-4(3H)-酮、2，5-二甲基-3-{4-[3-(1-吡咯烷基)丙氧基]苯基}-4(3H)-喹唑啉酮、2-甲基-3-{4-[3-(1-吡咯烷基)丙氧基]苯基}-5-三氟甲基-4(3H)-喹唑啉酮、5-氟-2-甲基-3-{4-[3-(1-哌啶基)丙氧基]苯基}-4(3H)-喹唑啉酮、6-甲氧基-2-甲基-3-{4-[3-(1-哌啶基)丙氧基]苯基}-4(3H)-喹唑啉酮、5-甲氧基-2-甲基-3-(4-{3-[(3S)-3-甲基哌啶-1-基]丙氧基}苯基)-4(3H)-喹唑啉酮、7-甲氧基-2-甲基-3-(4-{3-[(3S)-3-甲基哌啶-1-基]丙氧基}苯基)-4(3H)-喹唑啉酮、2-甲基-3-(4-{3-[(3S)-3-甲基哌啶-1-基]丙氧基}苯基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-4(3H)-酮、5-氟-2-甲基-3-(4-{3-[(2R)-2-甲基吡咯烷-1-基]丙氧基}苯基)-4(3H)-喹唑啉酮、2-甲基-3-(4-{3-[(2R)-2-甲基吡咯烷-1-基]丙氧基}苯基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-4(3H)-酮、6-甲氧基-2-甲基-3-(4-{3-[(2R)-2-甲基吡咯烷-1-基]丙氧基}苯基)-4(3H)-喹唑啉酮、6-甲氧基-2-甲基-3-(4-{3-[(2S)-2-甲基吡咯烷-1-基]丙氧基}苯基)-4(3H)-喹唑啉酮，及其可药用盐。

可以与本文公开的OXM类似物组合使用的特异性CCK1R激动剂包括：3-(4-{[1-(3-乙氧基苯基)-2-(4-甲基苯基)-1H-咪唑-4-基]羰基}-1-哌嗪基)-1-萘甲酸、3-(4-{[1-(3-乙氧基苯基)-2-(2-氟-4-甲基苯基)-1H-咪唑-4-基]羰基}-1-哌嗪基)-1-萘甲酸、3-(4-{[1-(3-乙氧基苯基)-2-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基]羰基}-1-哌嗪基)-1-萘甲酸、3-(4-{[1-(3-乙氧基苯基)-2-(2，4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基]羰基}-1-哌嗪基)-1-萘甲酸；和3-(4-{[1-(2，3-二氢-1，4-苯并二噁烷-6-基)-2-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基]羰基}-1-哌嗪基)-1-萘甲酸，及其可药用盐。

可以与本文公开的OXM类似物组合使用的特异性MC4R激动剂包括：1)(5S)-1′-{[(3R，4R)-1-叔丁基-3-(2，3，4-三氟苯基)哌啶-4-基]羰基}-3-氯-2-甲基-5-[1-甲基-1-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)乙基]-5H-螺[呋喃并[3，4-b]吡啶-7，4′-哌啶]；2)(5R)-1′-{[(3R，4R)-1-叔丁基-3-(2，3，4-三氟苯基)-哌啶-4-基]羰基}-3-氯-2-甲基-5-[1-甲基-1-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)乙基]-5H-螺[呋喃并[3，4-b]吡啶-7，4′-哌啶]；3)2-(1′-{[(3S，4R)-1-叔丁基-4-(2，4-二氟苯基)吡咯烷-3-基]羰基}-3-氯-2-甲基-5H-螺[呋喃并[3，4-b]吡啶-7，4′-哌啶]-5-基)-2-甲基丙腈；4)1′-{[(3S，4R)-1-叔丁基-4-(2，4-二氟苯基)吡咯烷-3-基]羰基}-3-氯-2-甲基-5-[1-甲基-1-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)乙基]-5H-螺[呋喃并[3，4-b]吡啶-7，4′-哌啶]；5)N-[(3R，4R)-3-({3-氯-2-甲基-5-[1-甲基-1-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)乙基]-1′H，5H-螺[呋喃并-[3，4-b]吡啶-7，4′-哌啶]-1′-基}羰基)-4-(2，4-二氟苯基)-环戊基]-N-甲基四氢-2H-吡喃-4-胺；6)2-[3-氯-1′-({(1R，2R)-2-(2，4-二氟苯基)-4-[甲基(四氢-2H-吡喃-4-基)氨基]-环戊基}-羰基)-2-甲基-5H-螺[呋喃并[3，4-b]吡啶-7，4′-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙腈，及其可药用盐。

此外，肠促胰岛素激素胰高血糖素样肽1(GLP-1)的其他肽类似物和模拟物，也可以与本文公开的OXM类似物组合使用。

向个体给药包含本文公开的一种或多种OXM类似物的药物组合物的方法，包括但不限于真皮内、肌肉内、腹膜内、静脉内、皮下、鼻内、硬膜外和口服途径。组合物可以通过任何方便的途径给药，例如通过灌注或弹丸注射，通过经上皮或黏膜层(例如口腔黏膜、直肠和肠黏膜等)、眼等的吸收，并可以与其他生物活性药剂一起给药。给药可以是系统的或局部的。此外，通过任何适合的途径包括脑室内或鞘内注射将组合物给药到中枢神经系统中，可能是有利的。通过与储药器(例如Ommaya储药器)相连的脑室内导管，可以便于脑室内注射。利用吸入器或喷雾器以及含有雾化剂的制剂，也可以使用肺部给药。可能也希望将本文公开的一种或多种OXM类似物局部给药到需要治疗的区域；这可以通过例如但不限于手术期间的局部灌注、表面施用、通过注射、利用导管、利用栓剂或利用植入物来实现。

各种递送系统是已知的，并可用于给药本文公开的OXM类似物，这些系统包括但不限于包胶在脂质体、微粒、微胶囊中、minicells、聚合物、胶囊、片剂等。在一个实施方案中，本文公开的OXM类似物可以在囊泡、特别是脂质体中递送。在脂质体中，将本文公开的OXM类似物除了与其他可药用载体组合，与两亲性药剂组合，所述两亲性药剂例如以聚集形式作为胶束、不溶性单层、液晶或片状层存在于水性溶液中的脂类。适合用于脂质体制剂的脂类包括但不限于甘油单酸酯、甘油二酸酯、脑硫脂、溶血卵磷脂、磷脂、皂角苷、胆汁酸等。这些脂质体制剂的制备在本技术领域的技术水平范围内，正如在例如美国专利No.4,837,028和美国专利No.4,737,323中所公开的。在另一个实施方案中，本文公开的OXM类似物可以在受控释放系统中递送，所述系统包括但不限于：递送泵(参见例如Saudek等，NewEngl.J.Med.321：574(1989))和半透性聚合材料(参见例如Howard等，J.Neurosurg.71：105(1989))。此外，受控释放系统可以置于治疗靶点(例如脑)附近，因此只需要系统剂量的一部分。参见例如Goodson，在《受控释放的医学应用》(MedicalApplicationsofControlledRelease)，1984.(CRCPress，BoccaRaton，Fla.)中。

在特定障碍或病症的治疗中，包含本文公开的一种或多种OXM类似物的组合物的有效量将取决于障碍或病症的本性，并可以由本技术领域的普通技术人员通过标准的临床技术来确定。此外，可以任选使用体外测定法来帮助鉴定最适剂量范围。在制剂中使用的精确剂量也将取决于给药途径和疾病或障碍的总体严重性，并应该根据开业医生的判断和每个患者的情况来决定。最终，主治医师将决定用于治疗每个个体患者的组合物的量。一开始，主治医师将给药低剂量的组合物并观察患者的响应。可以给药较大剂量的组合物，直到获得患者的最适疗效，并且在该点处剂量不再增加。一般来说，每日剂量范围在每kg哺乳动物体重约0.001mg至约100mg的范围内，优选为每kg体重0.01mg至约50mg，更优选为每kg体重0.1至10mg，以单剂或分剂使用。另一方面，在某些情况下可能需要使用在这些限度之外的剂量。然而，包含本文公开的一种或多种OXM类似物的组合物静脉内给药的适合剂量范围，一般为每千克(Kg)体重约5-500微克(μg)活性化合物。适合于鼻内给药的剂量范围一般为约0.01pg/kg体重至1mg/kg体重。有效剂量可以从源自于体外或动物模型测试系统的剂量响应曲线外推。栓剂一般含有以重量计0.5％至10％范围内的活性成分；口服制剂优选含有10％至95％的活性成分。最终，主治医师将决定使用本发明的包含本文公开的一种或多种OXM类似物的组合物的疗法的适合持续时间。剂量也根据个体患者的年龄、体重和响应而变。

还提供了药物包或试剂盒，其包含一个或多个容器，其中装有一种或多种药物组合物的成分和本文公开的OXM类似物。任选地，这些容器可以伴有采取由管理药物或生物制品的制造、使用和销售的政府机构所规定的形式的通告，所述通告反映出管理机构批准其制造、使用和销售用于人类给药。

本文公开的所有参考文献在此以其全文引为参考。

下面的实施例旨在促进对本发明的进一步理解。

实施例1

胃泌酸调节素(OXM)类似物的合成基本上如下所述。在肽多功能合成仪APEX396(AdvancedChemtech)上，使用40孔反应块，使用Fmoc/t-Bu化学方法通过固相合成了下面表2中显示的OXM类似物。每种肽在单一孔中合成。对于肽酰胺来说，使用了0.1g用修饰过的Rink连接物p-[(R，S)-α-[9H-芴-9-基-甲氧基甲酰胺基]-2，4-二甲氧基苯甲基]-苯氧基乙酸(Rink，H.，1987，TetrahedronLett.28：3787-3789；Bernatowicz，M.S.等，1989，TetrahedronLett.30：4645-4667)衍生化的氨甲基化聚苯乙烯LL(100-200目，0.41mmol/g)(Novabiochem)树脂。所有氨基酸以0.5M浓度溶解在0.5MHOBt(羟基苯并三唑)的DMF溶液中。酰化反应使用6倍过量的活化氨基酸在不含氨基的树脂上进行45分钟。氨基酸用等摩尔量的HBTU(2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯)和两倍摩尔过量的DIEA(N，N-二异丙基乙胺)进行活化。

可选地，在Pioneer肽合成仪(AppliedBiosystems)上使用Fmoc/t-Bu化学方法通过固相来合成肽。在这种情况下，使用0.1g1％交联的树脂Fmoc-LinkerAM-Champion(BiosearchTechnologies，Inc.)和用修饰过的Rink连接物p-[(R，S)-α-[9H-芴-9-基-甲氧基甲酰胺基]-2，4-二甲氧基苯甲基]-苯氧基乙酸(Rink，H.，1987，TetrahedronLett.28：3787-3789；Bernatowicz，M.S.等，1989，TetrahedronLett.30：4645-4667)衍生化的基于PEG-PS的树脂。所有酰化反应在肽在合成仪上组装结束后，使用四倍过量的活化氨基酸在不含氨基的树脂上进行60分钟；对于N-末端Aib和His进行了双重偶联。

侧链保护性基团是：用于Asp的OMpe(O-3-甲基-戊-3-基)；用于Glu、Ser、D-Ser、Thr和Tyr的叔丁基；用于Asn、Cys、Gln和His的三苯甲游基；以及用于Lys、Trp的叔丁氧基-羰基和用于Arg的2，2，4，6，7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰基。

对于OXM110和OXM177来说，赖氨酸-棕榈酰基通过与等摩尔量的HBTU(2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯)和两倍摩尔过量的DIEA(N，N-二异丙基乙胺)进行反应来手动酰化。酰化反应使用三倍过量的活化酰化剂在不含氨基的树脂上进行120分钟。

在合成结束时，将干燥的肽-树脂单独地用20mL切割混合物、88％三氟乙酸(TFA)、5％苯酚、2％三异丙基硅烷和5％水(Sole，N.A.和G.Barany，1992，J.Org.Chem.57：5399-5403)在室温下处理1.5小时。将每种树脂过滤，并将溶液加入到冷甲基叔丁基醚中以沉淀肽。离心后，将肽沉淀物用新鲜的冷甲基叔丁基醚洗涤以除去有机清除剂。将该过程重复两次。将最终沉淀物干燥，重悬浮在H₂O、20％乙腈中，并冷冻干燥。

粗肽通过反相HPLC进行纯化，使用了制备型WatersRCMDelta-Pak^TMC-4柱套(40x200mm，15μm)，并使用(A)0.1％TFA的水溶液和(B)0.1％TFA的乙腈溶液作为洗脱液。使用了下面的洗脱剂B梯度：对于OXM229(OXM36和OXM115的硫醇化肽前体)、OXM29(OXM70和OXM216的硫醇化前体)、OXM208(OXM212的硫醇化肽前体)和OXM209(OXM213的硫醇化肽前体)来说，20％-20％共5分钟以及20％-35％共20分钟。

对于肽OXM110和177来说，使用下面的洗脱剂B梯度：32％-32％共5分钟以及32％-42％共20分钟，流速为80mL/min。分析HPLC在AllianceWatersChromatograph上，使用ACEC-4(300A)，3μm柱，150x4.6mm(CPSanaliticap/nACE-213-1546)在45℃下进行，使用H₂O，0.1％TFA(A)和CH₃CN，0.1％TFA(B)作为溶剂和下列线性梯度：20％-20％B(在5分钟内)-35％B(在20分钟内)-80％B(在2分钟内)，流速为1mL/min。纯化的肽通过电喷射质谱在MicromassLCZ平台上定性。

实施例2

如下进行了胃泌酸调节素(OXM)的胆固醇化类似物OXM36、OXM70、OXM115、OXM212、OXM213和OXM216的合成。

反应在允许硫醚键形成的条件下进行。然后使用反相HPLC分离胆固醇化的OXM肽，并在MicromassLCZ平台上定性。类似物OXM36、70、212和213分别从含有硫醇的OXM肽前体OXM229、OXM208和209，通过与具有下列结构的溴衍生物胆甾-5-烯-3-基溴乙酸酯反应

以产生通过硫醚键相连的偶联物来合成。简单来说，将30mg肽前体溶解在1mLDMSO中(浓度为30mg/mL)，并加入1倍摩尔过量的溶解在THF中的胆甾-5-烯-3-基溴乙酸酯(浓度为20mg/mL)。然后向混合物加入1％体积的DIPEA(N，N-二异丙基-乙胺)；在温育30分钟后，将肽溶液通过RP-HPLC纯化，并在MicromassLCZ平台上定性。

肽OXM115和216从含有硫醇的OXM肽前体OXM229和OXM29合成，通过与溴衍生物胆甾-5-烯-3-基1-溴-2-氧代-6，9，12，15-四氧杂-3-氮杂十八碳-18-酸酯

反应以产生通过硫醚键相连的偶联物来产生类似物。简单来说，将30mg肽前体溶解在1mLDMSO中(浓度为30mg/mL)，并加入1倍摩尔过量的溶解在THF中的胆甾-5-烯-3-基1-溴-2-氧代-6，9，12，15-四氧杂-3-氮杂十八碳-18-酸酯(浓度为20mg/mL)。然后向混合物加入3％体积的DIPEA(N，N-二异丙基-乙胺)；在温育30分钟后，将肽溶液通过RP-HPLC纯化，并在MicromassLCZ平台上定性。

实施例3

PEG化反应在允许硫酯键形成的条件下进行。然后使用反相HPLC或离子交换层析和孔径排阻层析(SEC)分离PEG化的OXM肽。使用RP-HPLC、HPLC-SEC和MALDI-Tof质谱对PEG化的OXM类似物进行定性。

OXM33、34、35、36和54肽从含有硫醇的OXM肽前体OXM229合成，以产生具有通过硫醚键共价连接的PEG的类似物。

OXM33的合成

将10mg肽前体(2.2μmoles)溶解在0.2mL0.1MHEPESpH7.3，6M氯化胍，2mMEDTA中。向该溶液添加溶解在0.4mL0.1MHEPES，pH7.3中的22mgMPEG-MAL-5000(NEKTAR2F2MOH01)(4.4μmoles)(肽与PEG的摩尔/摩尔比为1∶2)。在温育1小时后，将PEG化的肽通过RP-HPLC纯化，并通过MALDI-TOF定性。

OXM34的合成

将10mg肽前体(2.2μmoles)溶解在0.2mL0.1MHEPESpH7.3，6M氯化胍，2mMEDTA中。向该溶液添加溶解在0.5mL0.1MHEPES，pH7.3中的80mgMPEG-MAL-20K(NEKTAR2F2M0P01)(4.0μmoles)(肽与PEG的摩尔/摩尔比为1∶1.8)。在温育1小时后，将PEG化的肽通过RP-HPLC纯化，并通过MALDI-TOF定性。

OXM35的合成

将10mg肽前体(0.92μmoles)溶解在0.4mL0.1MHEPESpH7.3，6M氯化胍，2mMEDTA中。向该溶液添加溶解在0.8mL0.1MHEPES，pH7.3中的70mgMPEG2-MAL-40K(NEKTAR2D3Y0T01)(1.7μmoles)，其中肽与PEG的摩尔/摩尔比为1∶1.8。在温育1小时后，将PEG化的肽通过RP-HPLC纯化，并通过MALDI-TOF定性。

对照肽OXM54通过将含有硫醇的肽前体与10倍当量的碘乙酰胺在0.1MTrisHClpH7.5，6M氯化胍中的溶液温育来制备。在温育30分钟后，将肽通过RP-HPLC纯化，并通过电喷射质谱进行定性。

OXM103、OXM105、OXM107、OXM113的合成

将10mg相应的肽前体(2.26μmoles)溶解在2mL8M尿素，0.1MHEPESpH7.3，2mMEDTA中。向该溶液添加溶解在H₂O中的109mgMPEG2-MAL-40K(NEKTAR2D3Y0T01)(2.71μmoles)(肽与PEG的摩尔/摩尔比为1∶1.2)。在温育1小时后，将PEG化的肽溶液酸化至1％乙酸，通过阳离子交换层析(IXC)在TSKCM-650S上，使用NaCl在50mMpH4.8的乙酸钠中的线性梯度进行纯化。将IXC纯化的PEG化的肽通过SEC进一步纯化，并通过MALDI-TOF定性。

OXM109的合成

将10mg相应的肽前体(2.26μmoles)溶解在2mL8M尿素，0.1MHEPESpH7.3，2mMEDTA中。向该溶液添加溶解在2mLH₂O中的108mgMPEG2-MAL-40K(NEKTAR2D3Y0T01)(2.7μmoles)(肽与PEG的摩尔/摩尔比为1∶1.2)。在温育1小时后，将PEG化的肽溶液酸化至1％乙酸，通过阳离子交换层析(IXC)在TSKCM-650S上，使用NaCl在50mMpH4.8的乙酸钠中的线性梯度进行纯化。将IXC纯化的PEG化的肽通过SEC进一步纯化，并通过MALDI-TOF定性。

实施例4

表现出对GLP-1和胰高血糖素受体的完全激动活性并显示在表2中的OXM肽类似物如下进行合成。

作为OXM301、OXM302、OXM303、OXM304和OXM305的前体的肽OXM290、291、292、293和294(参见表2)，在肽多功能合成仪SimphonyProteinTechnologiesInc.使用Fmoc/t-Bu化学方法通过固相进行合成。对于肽酰胺来说，使用了0.5g用修饰过的Rink连接物p-[(R，S)-α-[9H-芴-9-基-甲氧基甲酰胺基]-2，4-二甲氧基苯甲基]-苯氧基乙酸(Rink，H.，1987，TetrahedronLett.28：3787-3789；Bernatowicz等，TetrahedronLett.30：4645-4667(1989)衍生化的氨甲基化聚苯乙烯LL(100-200目，0.41mmol/g)(Novabiochem)树脂。将所有氨基酸以0.5M浓度溶解在0.5MHOBt(羟基苯并三唑)的DMF溶液中。酰化反应使用8倍过量的活化氨基酸在不含氨基的树脂上进行60分钟。氨基酸用等摩尔量的0.5MHBTU(2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯)的DMF溶液和两倍摩尔过量的2MDIEA(N，N-二异丙基乙胺)的NMP溶液进行活化。

侧链保护性基团是：用于Asp的OMpe(O-3-甲基-戊-3-基)；用于Glu、Ser、D-Ser、Thr和Tyr的叔丁基；用于Asn、Cys、Gln和His的三苯甲游基；用于Lys、Trp的叔丁氧基-羰基以及用于Arg的2，2，4，6，7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰基；在合成中使用了Boc-His(Trt)-OH。

在合成结束时，将干燥的肽-树脂单独地用25mL切割混合物、82.5％三氟乙酸(TFA)、5％苯酚、5％苯甲硫醚、2.5％乙二硫醇和5％水在室温下处理1.5小时。将每种树脂过滤，减少溶液的体积然后将其加入到冷甲基叔丁基醚中以沉淀肽。离心后，将肽沉淀物用新鲜的冷甲基叔丁基醚洗涤以除去有机清除剂。将该过程重复两次。将最终沉淀物干燥，重悬浮在H₂O、20％乙腈中，并冷冻干燥。

粗肽通过反相HPLC进行纯化，使用了制备型WatersRCMDelta-Pak^TMC-4柱套(40x200mm，15μm)，并使用(A)0.1％TFA的水溶液和(B)0.1％TFA的乙腈溶液作为洗脱液。使用了下面的洗脱液B梯度：对于OXM301前体来说22％-22％共5分钟以及22％-32％共20分钟，对于OXM302前体来说22％-22％共5分钟以及22％-35％共20分钟，对于OXM303前体来说25％-25％共5分钟以及25％-40％共20分钟，对于OXM304前体和OXM305前体来说25％-25％共5分钟以及25％-35％共20分钟，流速为80mL/min，波长为214nm。分析HPLC在AllianceWatersChromatograph上，使用ACEC-4(300A)，3μm柱，150x4.6mm(CPSanaliticap/nACE-213-1546)在45℃下进行，使用H₂O，0.1％TFA(A)和CH3CN，0.1％TFA(B)作为溶剂和下列线性梯度：25％-25％B(在5分钟内)-40％B(在20分钟内)-80％B(在2分钟内)，流速为1mL/min。纯化的肽通过电喷射质谱在MicromassLCZ平台上定性。

C₇偶联物如下合成。肽OXM301、OXM302、OXM303、OXM304和OXM305从相应的含硫醇OXM肽前体OXM290-294合成，以产生具有通过位于C-末端的半胱氨酸残基的硫醚基团共价连接的C₇基团的衍生物。作为前体衍生的实例：将40mg肽前体溶解在1.33mLDMSO中(浓度为30mg/mL)，并加入2.1倍摩尔过量的溶解在THF中的胆甾-5-烯-3-基1-溴-2-氧代-6，9，12，15-四氧杂-3-氮杂十八碳-18-酸酯(浓度为30mg/mL)。然后，向混合物加入5％体积的DIPEA(N，N-二异丙基-乙胺)；在温育30分钟后，通过逐滴加入乙酸铵(1M水溶液)直到溶液浑浊为止来淬灭反应。

然后使用pH7.8的0.5M乙酸铵、20％MetOH、25％乙腈的水溶液作为洗脱液，以5mL/min的流速将溶液直接上样到反相WatersRCMDelta-Pak^TMC-4柱套(20x200mm，15μm，300A)上。使用该缓冲液以30mL/min运行15分钟的等度洗脱。然后将洗脱液改变成：(A)0.2％乙酸、20％MetOH的水溶液和(B)0.2％乙酸、20％MetOH的乙腈溶液，然后运行下列梯度：25％(B)-35％(B)共5分钟-70％(B)共20分钟-80％(B)共2分钟-80％(B)共3分钟，流速为30mL/min，波长为230nm。

将最终的肽在AllianceWatersChromatograph上，使用ACEC-4(300A)，3μm柱，150x4.6mm(CPSanaliticap/nACE-213-1546)在45℃下进行定性，使用H₂O，0.1％TFA(A)和CH₃CN，0.1％TFA(B)作为溶剂并使用下述线性梯度：40％-40％B(共5min)-70％B(共20min)-80％B(共2min)，流速为1mL/min。肽通过电喷射质谱在MicromassLCZ平台上定性。

实施例5

在肽多功能合成仪SimphonyProteinTechnologiesInc.上，使用Fmoc/t-Bu化学方法通过固相合成了OXM237-OXM308和OXM345-OXM414。对于肽酰胺来说，使用了0.5g用修饰过的Rink连接物p-[(R，S)-α-[9H-芴-9-基-甲氧基甲酰胺基]-2，4-二甲氧基苯甲基]-苯氧基乙酸(Rink，H.，1987，TetrahedronLett.28：3787-3789；Bernatowicz，M.S.等，1989，TetrahedronLett.30：4645-4667)衍生化的氨甲基化硫醚LL(100-200目，0.41mmol/g)(Novabiochem)树脂。对于肽酸来说，使用了0.5g用4-羟甲基苯氧基乙酸衍生化的氨甲基化硫醚LL(100-200目，0.41mmol/g)(Novabiochem)树脂。所有氨基酸以0.5M浓度溶解在0.5MHOBt(羟基苯并三唑)的DMF溶液中。酰化反应使用8倍过量的活化氨基酸在不含氨基的树脂上进行60分钟。氨基酸用等摩尔量的0.5MHBTU(2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯)的DMF溶液和两倍摩尔过量的2MDIEA(N，N-二异丙基乙胺)的NMP溶液进行活化。

对于肽OXM392、395和398来说，Glu16和Lys20作为Glu(Oall)和Lys(Alloc)引入。在装配结束时，将树脂干燥，除去Glu(Oall)和Lys(Alloc)的保护性基团，并通过将树脂与5倍摩尔过量的HBTU和10倍摩尔过量的DIPEA温育来形成内酰胺桥。

对于脂化肽例如OXM404、407、408、410、411、414、415、416、417、418、419、420来说，在侧链上进行衍生化的赖氨酸作为Lys(Alloc)引入。在装配结束时，除去Alloc保护性基团，并通过使用HBTU和DIPEA作为活化剂将γ-羧基谷氨酸残基与棕榈酸进行缩合来完成合成。

粗肽通过反相HPLC进行纯化，使用了制备型WatersRCMDelta-Pak^TMC-4柱套(40x200mm，15μm)，并使用(A)0.1％TFA的水溶液和(B)0.1％TFA的乙腈溶液作为洗脱液。分析HPLC在AllianceWatersChromatograph上，使用ACEC-4(300A)，3μm柱，150x4.6mm(CPSanaliticap/nACE-213-1546)在45℃下进行，使用H₂O，0.1％TFA(A)和CH3CN，0.1％TFA(B)作为溶剂。纯化的肽通过电喷射质谱在MicromassLCZ平台上定性。

C₅偶联物如下合成。肽OXM238从含硫醇OXM肽前体合成，以产生具有通过位于C-末端的半胱氨酸残基的硫醚基团共价连接的乙酰胺的衍生物。作为前体衍生的实例：将50mg肽前体溶解在0.25MTrisHCl缓冲液，2mMEDTA，6M尿素，pH8.3中(浓度为30mg/mL)，并加入10倍摩尔过量的溶解在DMSO中的碘乙酰胺(浓度为30mg/mL)。30分钟后反应完成。使用乙酸将溶液酸化，并在制备型HPLC上纯化。

C₄偶联物如下合成。肽OXM345、OXM355、OXM357、OXM373从相应的含硫醇OXM肽前体合成，以产生具有通过位于C-末端的半胱氨酸的硫醚基团共价连接的胆固醇基团的衍生物。作为前体衍生的实例：将40mg肽前体溶解在DMSO中(浓度为30mg/mL)，并加入2.1倍摩尔过量的溶解在THF中的胆甾-5-烯-3-基1-溴-2-氧代-6，9，12，15-四氧杂-3-氮杂十八碳-18-酸酯(浓度为30mg/mL)。然后，向混合物加入5％体积的DIPEA(N，N-二异丙基-乙胺)；在温育30分钟后，通过逐滴加入乙酸铵(1M水溶液)直到达到溶液浊度为止来淬灭反应。

然后使用pH7.8的0.5M乙酸铵、20％MetOH、25％乙腈的水溶液作为洗脱液，以5mL/分钟，将溶液直接上样到反相WatersRCMDelta-Pak^TMC-4柱套(40x200mm，15μm，300A)上。使用该缓冲液以30mL/min运行15分钟的等度洗脱。然后将洗脱液改变成：(A)0.2％乙酸、20％MetOH的水溶液和(B)0.2％乙酸、20％MetOH的乙腈溶液。

将最终的肽在AllianceWatersChromatograph上，使用ACEC-4(300A)，3μm柱，150x4.6mm(CPSanaliticap/nACE-213-1546)在45℃下进行定性，使用H₂O，0.1％TFA(A)和CH3CN，0.1％TFA(B)作为溶剂。肽通过电喷射质谱在MicromassLCZ平台上定性。

C₇偶联物如下合成。肽OXM359、OXM361、OXM374、OXM380、OXM383和OXM388从含硫醇的OXM肽前体合成，以产生具有通过位于C-末端的半胱氨酸残基的硫醚键共价连接的氧杂4-胆固醇的衍生物。作为前体衍生的实例：将25mg肽前体溶解在1.33mLDMSO中(浓度为30mg/mL)，并加入1.1倍摩尔过量的溶解在THF中的胆甾-5-烯-3-基1-溴-2-氧代-6，9，12，15-四氧杂-3-氮杂十八碳-18-酸酯(浓度为30mg/mL)。然后，向混合物加入5％体积的DIPEA(N，N-二异丙基-乙胺)；在温育30分钟后，通过逐滴加入乙酸铵(1M水溶液)直到达到溶液浊度为止来淬灭反应。

C₉偶联物如下合成。肽OXM381从含硫醇的OXM肽前体合成，以产生具有通过位于C-末端的半胱氨酸残基的马来酰亚胺硫醚键共价连接的氧杂12-胆固醇的衍生物。作为前体衍生的实例：将25mg肽前体溶解在DMSO中(浓度为30mg/mL)，并加入1.5倍摩尔过量的溶解在THF中的胆甾-5-烯-3-基N-[43-(2，5-二氧代-2，5-二氢-1H-吡咯-1-基)-41-氧代-4，7，10，13，16，19，22，25，28，31，34，37-十二氧杂-40-氮杂四十三烷-1-基]甘氨酸酯(浓度为20mg/mL)。然后，向混合物加入2％体积的DIPEA(N，N-二异丙基-乙胺)；在温育4-6小时后将反应用冰醋酸淬灭，并直接上样到反相HPLC上并纯化。将最终的肽在AllianceWatersChromatograph上，使用ACEC-4(300A)，3μm柱，150x4.6mm(CPSanaliticap/nACE-213-1546)在45℃下进行定性，使用H₂O，0.1％TFA(A)和CH3CN，0.1％TFA(B)作为溶剂。肽通过电喷射质谱在MicromassLCZ平台上定性。

C₁₀偶联物如下合成。肽OXM392、395、398、399、400和401从含硫醇的OXM肽前体合成，以产生具有通过位于C-末端的半胱氨酸残基的硫醚键共价连接的氧杂12-胆固醇的衍生物。作为前体衍生的实例：将25mg肽前体溶解在DMSO中(浓度为30mg/mL)，并加入1.5倍摩尔过量的溶解在THF中的胆甾-5-烯-3-基1-溴-2-氧代-6，9，12，15，18，21，24，27，30，33，36，39-十二氧杂-3-氮杂四十二烷-42-酸酯(浓度为20mg/mL)。然后，向混合物加入2％体积的DIPEA(N，N-二异丙基-乙胺)；在温育4-6小时后将反应用冰醋酸淬灭，并直接上样到反相HPLC上并纯化。将最终的肽在AllianceWatersChromatograph上，使用ACEC-4(300A)，3μm柱，150x4.6mm(CPSanaliticap/nACE-213-1546)在45℃下进行定性，使用H₂O，0.1％TFA(A)和CH3CN，0.1％TFA(B)作为溶剂。肽通过电喷射质谱在MicromassLCZ平台上定性。

C₁₁偶联物如下合成。肽OXM412从含硫醇的OXM肽前体合成，以产生具有通过位于C-末端的半胱氨酸残基的硫醚键共价连接的氧杂24-胆固醇的衍生物。作为前体衍生的实例：将25mg肽前体溶解在DMSO中(浓度为30mg/mL)，并加入1.5倍摩尔过量的溶解在THF中的胆甾-5-烯-3-基1-溴-2-氧代-6，9，12，15，18，21，24，27，30，33，36，39，42，45，48，51，54，57，60，63，66，69，72，75-二十四氧杂-3-氮杂七十八烷-78-酸酯(浓度为20mg/mL)。然后，向混合物加入2％体积的DIPEA(N，N-二异丙基-乙胺)；在温育4-6小时后将反应用冰醋酸淬灭，并直接上样到反相HPLC上并纯化。

C₁₂偶联物如下合成。肽OXM421从含硫醇的OXM肽前体合成，以产生具有通过位于C-末端的半胱氨酸残基的硫醚键共价连接的氧杂12-O-胆固醇的衍生物。作为前体衍生的实例：将25mg肽前体溶解在DMSO中(浓度为30mg/mL)，并加入1.5倍摩尔过量的溶解在THF中的胆甾-5-烯-3-基1-溴-2-氧代-6，9，12，15，18，21，24，27，30，33，36-十二氧杂-3-氮杂三十八烷-78-酸酯(浓度为20mg/mL)。然后，向混合物加入2％体积的DIPEA(N，N-二异丙基-乙胺)；在温育4-6小时后将反应用冰醋酸淬灭，并直接上样到反相HPLC上并纯化。

实施例6

表3显示了本文公开的天然OXM和OXM类似物的结构。

实施例7

证实了GLP-1R/GCGR共同激动剂降低体重和摄食量以及改进血糖控制的能力。

最初，我们在基于荧光细胞的测定方法中对肽进行筛选，所述测定方法使用稳定表达重组人类GLP-1R或人类GCGR的CHO细胞株测量环AMP(cAMP)的产生。小鼠和人类GLP-1R和GCGR激动剂活性的测定基本上如下进行。将稳定表达小鼠或人类GLP-1R或GCGR的CHO细胞在Iscove修改的Dulbecco培养基(IMDM)、10％FBS、1mML-谷氨酰胺、青霉素-链霉素(100μ/mL)和750μgG418/mL中生长3-4天，然后使用EnzymefreeDissociationMedia(EFDM，SpecialtyMedia)收获。为了确定GLP-1R和GCGR活性，将OXM和OXM-Q3E在测定缓冲液中稀释，并与细胞分别在不存在或存在10％小鼠血浆的情况下在室温下温育30分钟。按照制造商的说明书通过加入LANCE试剂盒检测缓冲液来终止测定。将板在室温下再保持1小时，然后按照制造商的说明书，通过在EnVision计数器(PerkinElmer)中测量到的TR-FRET信号的降低与cAMP标准曲线进行比较，来检测cAMP水平的增加。数据使用线性和非线性回归分析软件GraphPadPrism进行分析。

如下进行了双重GLP-1R/GCGR共同激动剂(OXM模拟物)的效用与GLP-1R选择性激动剂(GLP-1模拟物)相比的评估。首先，为了评估双重GLP-1R/GCGR激动剂(OXM模拟物)的治疗效用，鉴定了只对GLP-1受体具有选择性(GLP-1模拟物)并且与天然OXM只相差1个氨基酸的匹配的肽。该肽与天然OXM的差别在于在3位处用谷氨酸(E)残基代替了谷氨酰胺(Q)。鉴定到的第二个GLP-1模拟物用天冬氨酸残基(D)代替了Q。对GLP-1模拟物和OXM模拟物在啮齿动物中改进代谢控制的效能进行了比较。这些肽和人类OXM由GLBiochem(Shanghai)Ltd公司合成和纯化。

在表4中，显示了天然OXM和OXM-Q3E和OXM-Q3D肽的体外效能和受体结合亲和性。第三个残基从中性的Q突变成酸性残基例如D或E，显著降低了天然胃泌酸调节素结合胰高血糖素受体的效能，而对GLP-1受体的效应具有极小影响。

我们在离体糖原分解作用研究和体内GCGR受体占据测定法两者中，进一步评估了天然OXM和OXM-Q3E(GLP-1模拟物)在体内与GCGR相互作用的能力。由于不适合的药物动力学性质常常使肽的体内效能的证实变得难以理解，因此灌注肝脏测定法为评估测试肽在有功能的目标器官中的活性提供了可选的离体方法。

用于体内测定法的动物：

瘦的或饮食诱导的肥胖的10-12周龄雄性C57BL/6小鼠从TaconicFarms(Germantown，NY)购买，并在常规SPF设施中饲养在单独的Tecniplast笼子中。除非另有陈述，否则小鼠在12小时光照/12小时黑暗的周期中用常规食物(Teklad7012：13.4％kcal来自脂肪；HarlanTeklad)或高脂肪饮食(D12492：60％来自脂肪；ResearchDiets，Inc.)维持，并随意取水。腹膜内葡萄糖耐受试验。将雄性C57BL/6N小鼠按重量分配到治疗组中(n＝6/组)。在研究当天早上，取消食物，在进行葡萄糖激惹前10分钟，以0.01、0.03、0.1、0.3、1或3mg/kg的量向小鼠皮下给药介质(无菌水)、OXM或OXM-Q3E。测定T＝-10min和T＝0min(基准)时的血糖浓度。然后将小鼠立即用D-葡萄糖(2g/kg)腹膜内激惹。一个介质处理的小鼠组用0.9％盐水激惹作为阴性对照。在D-葡萄糖激惹后20、40和60分钟从尾巴取血，测定血糖水平。对于每种处理，使用从T＝0至T＝60min的血糖波动图来积分曲线下面积(AUC)。从归一化到盐水激惹的对照的AUC数据，产生了每种处理的抑制百分率值。使用梯形法计算葡萄糖的曲线下面积(AUC)(AUC葡萄糖)。统计方法。统计分析使用不配对双侧Student’st检验进行。P值＜0.05被报告为显著。

肝脏糖原分解作用测定法

在暗周期的中间，对人源化GCGR小鼠(C₅7B/6N)进行麻醉(NembutalIP，50mg/kg)。然后对门静脉进行插管，将肝脏切下并用预充氧的Krebs-Henseleit碳酸氢盐缓冲溶液灌注5-10分钟，其开始时不重新循环，以便洗掉任何内源物质。然后将肝脏置于20mmNMR管中，并将初始的Krebs溶液更换成Krebs-BSA灌注液(约72ml，2.5％BSA)，将其重新循环。在开始时，进行³¹PNMR波谱分析以检测ATP和无机磷酸(Pi)水平来评估肝脏存活性。然后通过向灌注液添加糖异生物质[2-¹³C]丙酮酸和氯化铵(分别为～7mM和1mM)，产生可用¹³CNMR检测的糖原池，并通过糖原中葡萄糖基单元的C1共振实时监测肝脏中包含的¹³C糖原的量。45分钟后，灌注OXM、OXM-Q3E、胰高血糖素或介质，并使用随后糖原水平的响应来评估GCGR活化(Bergans等，NMRBiomed.16：36-46，(2003))。葡萄糖依赖性胰岛素分泌(GDIS)。为了测量GDIS，通过胶原酶方法，使用胰腺管插管和密度梯度纯化程序(Mu等，Diabetes55：1695-704，(2006))分离小鼠胰岛，并将其与2或16mmol/L葡萄糖温育。使用商业化试剂盒(ALPCOdiagnostics，Windham，NH)，通过酶联免疫吸附分析法测量温育缓冲液的等份试样中的胰岛素。动物研究方案由Rahway，NJ的Merck研究实验室学术动物护理和使用委员会(MerckResearchLaboratoriesInstitutionalAnimalCareandUseCommittee)审查和批准。

¹³C-NMR波谱术用于非侵入性监测糖原和葡萄糖水平对新的胃泌酸调节素类似物急性处理的实时响应。在大约暗周期的中间，对表达人类GCGR的小鼠进行麻醉(NembutalIP，50mg/kg)。然后对门静脉进行插管和结扎，并将肝脏切下。然后将肝脏置于20mmNMR管中，并将初始的Krebs溶液更换成Krebs-BSA灌注液，将其重新循环。在开始时进行31PNMR波谱分析以检测ATP和无机磷酸(Pi)水平，其可用于评估肝脏存活性。然后通过添加糖异生物质[2-¹³C]丙酮酸+NH₄Cl，产生可用¹³CNMR检测的糖原池，并通过糖原中葡萄糖基单元的C1共振实时监测肝脏中包含的13C糖原的量。约45分钟后，灌注OXM或肽类似物，并使用随后糖原水平的响应来评估人类GCGR活化。对于接受OXM肽类似物、50pM胰高血糖素或介质的肝脏来说，糖原中葡萄糖基单元的C1共振的面积随时间的变化作图于图1中。正如在下文中可以看出的，天然OXM以剂量依赖性方式诱导糖原分解作用，在1.5nM下诱导完全糖原分解作用，并具有约0.5nM的EC₅₀，与此相比，OXM-Q3E在300nM下只诱导58％，与其不良的GCGR激动效能相一致。

由于OXM刺激强烈糖原分解作用响应的能力，我们在野生型小鼠中，在竞争性测定中进一步检查了OXM和OXM-Q3E的体内GCGR受体占有率。对三个小鼠组群皮下给药介质(总数)、介质和冷胰高血糖素(非特异性结合)或OXM-Q3E。在给药后约15分钟，静脉内给药¹²⁵I-胰高血糖素，并在约15分钟后收集肝脏并测定总放射活性。如图2中所示，1.5mpk的胰高血糖素(GCG)给出84％的GCGR占有率，3mpkOXM给出31％的GCGR占有率，OXM-Q3E给出0％的GCGR占有率。

使用匹配的肽，OXM、OXM-Q3E，我们在长期高血糖夹和长期摄食(FI)和体重(BW)研究(表5)以及短期腹膜内葡萄糖耐受试验(IPGTT，图3)中研究了两种受体的共激动作用的短期和长期药效。尽管两种肽有效提高葡萄糖耐受，但OXM-Q3E在瘦的和饮食诱导的肥胖(DIO)小鼠模型两者中在降低葡萄糖波动方面优于天然OXM。然而，在DIO小鼠中，天然肽被证明在归因于GCGR的共刺激作用的效应、即降低摄食量和体重方面占优(ΔBW：在5mg/kg下，OXM为-6％，与此相比OXM-Q3E为-2.4％)。在短期和长期范式两者中，天然OXM不引起葡萄糖波动的增加。

高血糖夹研究

在体内研究前3天，将DIO小鼠(使用高脂肪饮食16wk)用甲苯噻嗪和开他敏麻醉，并通过右侧内颈静脉插管。灌注25％葡萄糖并调整实验的持续时间以维持高血糖。由于肽的短半衰期(两者都被二肽基肽酶IV快速失活并经肾清除(Zhu等，J.Biol.Chem.278：22418-23，(2003)))，因此介质、OXM(～16μg/kg/min)和OXM-Q3E(～16μg/kg/min)在研究的最后60分钟时间内静脉内灌注。静脉插管用于灌注，血样从尾静脉收集。在手术后对每只动物监测摄食量和体重增加，以确保完全复原。高血糖夹在有意识、不受限、插管的小鼠中按照以前的描述进行(Pocai等，Nature.43：1026-31，(2005))。简单来说，在2小时时间内每10分钟通过OneTouch葡萄糖测定仪测量血浆葡萄糖。静脉内灌注25％葡萄糖(D-葡萄糖，Sigma)，并周期性调整速率以增高血浆葡萄糖水平(～20mM)。在灌输开始后1小时，在剩余时间内给药OXM(～16μg/kg/min)、OXM-Q3E(16μg/kg/min)和介质。根据体重调整葡萄糖输注率(GIR)。

高血糖夹测定的结果显示在图3A和3B中。在夹住期间血糖水平维持在约20mmol/L。与介质处理的小鼠相比，在OXM-Q3E处理的动物中，需要葡萄糖灌注(GIR，葡萄糖输注率)的快速和强大的增加才能维持高血糖(GIR0-6055±4比6±2mg/kg/min；OXM-Q3E比介质，p＜0.05)。OXM也增加维持高血糖所需的葡萄糖输注率(GIR0-60＝40±4比6±2mg/kg/min；OXM比介质，p＜0.05)，但是GIR的增加与OXM-Q3E组中相比低约30％(GIR0-60＝40±4比55±4mg/kg/min；相应的OXM比OXM-Q3E，p＜0.05)，并且与OXM-Q3E处理的小鼠相比葡萄糖降低效应被延迟(约10分钟)，与介质相比*p＜0.05。

在瘦的C57BL/6N小鼠中比较了OXM或OXM-Q3E对葡萄糖波动的影响。图4显示天然和OXM肽类似物两者都降低葡萄糖波动。在腹膜内葡萄糖耐受测试(IPGTT)中，在葡萄糖激惹(血浆Cmax)之前皮下给药任一种肽，以剂量依赖性方式显著降低血糖波动。最低有效剂量的比较表明，在降低血糖方面，OXM-Q3E与天然肽相比有效10倍以上(体内EC₅₀分别为0.055nM和0.38nM)。

实施例8

天然OXM在人类中具有约8至12分钟的体内半衰期(t1/2)，不适合持续药物治疗。因此，我们调查了向肽添加大体积取代基以降低肾清除率。

通过与导入的半胱氨酸残基的侧链相连，将各种分子量的PEG部分或N-乙基马来酰亚胺偶联到OXM肽分子上的各种不同位置。所调查的用于与Cys-N-乙基马来酰亚胺或Cys-PEG部分偶联的位置，在下面OXM(SEQIDNO：1)的氨基酸序列中下划线，或置于OXM的C-末端。

HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTKRNRNNIA

出人意料的是，PEG化(5至80kDa)似乎严重降低了肽类似物活化GCGR或GLP-1R与GCGR两者的能力。在某些情况下，导入N-乙基马来酰亚胺封端的半胱氨酸残基足以显著降低活性。结果显示在表6中。

实施例9

作为PEG化的可替选方案，我们评估了几种脂化OXM肽类似物对药物动力学情况的改进。

我们首先通过半胱氨酸侧链将肽与胆固醇基团偶联，并再一次测量它们在GLP-1R和GCGR转染的细胞株中刺激cAMP生产的能力。C-末端偶联是偶联的最有利位置，并鉴定到具有低纳摩尔受体效能的OXM类似物。出人意料的是，在离体肝脏灌注糖原分解作用测定法中对这些肽进行的分析表明，体外GCGR激动剂效能没有正确反映出肝脏中GCGR的活化(参见图5中的OXM70)。在添加有10至20％血浆的体外细胞测定法中对激动剂效能的测定揭示出显著的“血清漂移”，其有效地将分子的效能降低了超过40倍(参见表7)，表明胆固醇化的分子与血浆中的脂类和/或蛋白结合，降低了有效浓度。

图5A显示在OXM70、OXM110、OXM177、OXM115和OXM216存在下在灌注的肝脏中进行的糖原分解作用的离体测量。图5B显示了在野生型小鼠中的竞争测定法中，皮下(s.c.)或静脉内(i.v.)给药OXM70、OXM110、OXM177、OXM115和OXM216后的GGCR占有率与天然OXM的比较。

实施例10

为了减轻血浆结合对受体接合的影响，我们利用了改变的策略，通过在肽与胆固醇基团之间引入亲水性连接物来改进药物动力学。在胆固醇部分与肽之间添加四乙氧基连接物(氧杂4)显著降低了上述当向基于细胞的测定方法添加血浆时所观察到的效应，即如表8中所示将“血清漂移”降低至小到2倍。此外，在第二位氨基酸处用氨基异丁酸(Aib)或D-丝氨酸(D-Ser)进行取代进一步增加了GLP-1R和GCGR两种亲和性。我们在离体糖原分解作用测定法和GCG受体结合测定法两者中证实了这些体外观察(参见表8)，观察到的结果证实了亲水性连接胆固醇基团或酰基链的偶联反应导致鉴定到有效接合并活化GCGR的分子。

所选类似物的药效学分析。我们评估了在短期和长期给药两者后，各种脂化肽在降低体重、摄食量(DIO小鼠)和改进血糖控制(瘦的小鼠)方面的效能。如图6至9所示，在单次皮下给药后，脂化分子显著降低摄食量和体重两者，并具有持续的效能。正如从体外分析所预测的，在该模型中，在降低摄食量和体重方面，含有酰基或亲水性连接物的类似物明显比其他位点特异性脂化OXM类似物更加有效。

图6概述了在已建立的DIO小鼠中，OXM70对降低摄食量和体重的短期体内效能。图7概述了在已建立的DIO小鼠中，OXM110和OXM177对降低摄食量和体重的短期体内效能。图8概述了在已建立的DIO小鼠中，OXM216、OXM115和OXM177对降低摄食量和体重的短期体内效能。在所有三个实验中，将随意进食的DIO雄性C₅7BL/6小鼠(每只约51g)称重，并在开始暗阶段之前约30分钟腹膜内给药介质(水)或OXM类似物OXM70、OXM110、OXM177、OXM216或OXM115。约2小时和18小时后测量摄食量。也测量18小时(过夜)时的体重变化(*与介质相比P＜0.05，每组n＝5-6)。

长期摄食和体重效应

为了确定类似物对能量和葡萄糖代谢的长期效应，在已建立的饮食诱导的肥胖症(DIA)小鼠模型中进行研究。在连续14天的研究过程中，以每隔一天(Q2D)3或10mg/kg的量向随意进食的雄性C57BL/6N野生型小鼠(每组n＝6，平均体重～50g)给药介质、OXM115、OXM177、OXM110。每日测量体重、摄食量和基础葡萄糖水平。如图9A和9B中所示，用脂化类似物长期处理在整个研究过程中以剂量依赖性方式显著降低了体重和摄食量。图9C显示了在研究的时间过程中基础葡萄糖对各种不同肽的响应。

与长期研究的第0日以及与同一天的介质处理的动物相比，测试的所有脂化肽在整个研究过程中以剂量依赖性方式显著降低基础葡萄糖(p＜0.05)。在第13天执行IPGTT，显示出在慢性给药脂化类似物之后以剂量依赖性方式提高了葡萄糖耐受性(图9D)。

提高葡萄糖耐受性

如图10至13中所示，在C57BL/6N瘦小鼠的IPGTT中，对于所有测试的脂化类似物来说，在适当定时以对应于血浆C_max的葡萄糖激惹之前，皮下给药OXM肽类似物以剂量依赖性方式显著降低了血糖波动。

代谢率效应

为了确定给药四乙氧基连接的胆固醇化的OXM115类似物是否提供代谢率效应，使用OXM115单一注射执行了长期研究。使雄性B6DIO小鼠(平均初始体重55g)适应温度适中的(T29℃)没有食物的代谢率室。使用上午6:00至9:00的三个小时时间来计算静息代谢率。进入光照期三小时时(上午9:00)，以3或10mg/kg的量皮下给药介质(dH₂O)、OXM115。总循环时间设定为20分钟，包括对于16个笼子中的每个笼子来说具有70秒稳定时间和10秒测量时间的参比读取以及60秒稳定时间和10秒测量时间。显示在图14A和B中的结果显示，在DIO小鼠中给药OXM115以剂量依赖性方式增加短期代谢率。

图15概述了在已建立的DIO小鼠中OXM303、OXM304和OXM305对降低摄食量和体重的短期体内效能，并显示出OXM305对于降低摄食量和降低体重特别有效。将随意进食的DIO雄性C57BL/6小鼠(每只约50g)称重，并在开始暗阶段之前约30分钟皮下给药介质(水)或OXM类似物。2小时、18和42小时后测量摄食量。也在18和42小时(过夜)时测量体重变化(*与介质相比P＜0.05，每组n＝5-6)。

图16概述了在已建立的DIO小鼠中OXM395、OXM399、OXM400和OXM401对降低摄食量和体重的急性体内效能。OXM401是序列为HAibEGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLmNTK-γEγE-C(氧杂12Chol)(SEQIDNO：99)的0/+对照肽。

在开始暗阶段之前约30分钟以1mg/kg的量向已建立的DIO小鼠(每只～52g)皮下给药介质(30％HBC)或肽。在四天的时间过程中测量摄食量和体重变化(*与介质相比P＜0.05，每组n＝5)。

实施例11

本实施例显示了基于OXM序列的具有高于7的pI的脂化肽刺激肥大细胞脱颗粒，而pI约为5的脂化肽似乎不刺激肥大细胞脱颗粒。

为了评估胃泌酸调节素类似物的组胺释放能力，我们使用人类肥大细胞细胞系LAD2建立了体外反向筛选分析法。将LAD2细胞(50,000个细胞/孔，96孔板)与化合物温育30分钟。通过在水解4-甲基伞形基-N-乙酰基-β-D-氨基葡糖苷后对上清液和细胞裂解物中释放的β-氨基己糖苷酶进行定量，来测定LAD2细胞的脱颗粒。结果表示成以总含量的百分数计，β-氨基己糖苷酶释放的百分数。表1概述了LAD2细胞中OXM类似物的脱颗粒效能(EC₅₀)。结果表明，为了降低刺激肥大细胞脱颗粒的可能性，基于脂化的类似物的pI应该在5左右。

实施例12

本实施例显示的表格显示了各种肽类似物对人类GLP-1受体(hGLP-1R)和人类胰高血糖素受体(hGCGR)的体外效能。表10或表11中显示的体内效能，从与本文上述基于细胞的cAMP测定法(表10)或在此以其全文引为参考的已出版的国际专利申请No.WO2008101017中描述的基于细胞的cAMP测定法、特别是在其中描述的基于细胞的cAMP测定法(表11)相似的测定法的结果来确定。

尽管在本文中参考显示的实施方案对本发明进行了描述，但应该理解本发明不限于此。具有本技术领域的普通专业技术并接触本文的叫道的人员将会认识到其范围内的其他修改和实施方案。因此，本发明只受本文随附的权利要求书的限定。

Claims

1.一种肽，其由SEQIDNO:12、14、21、24、29、46-102、111-119和121任一种的序列构成，或其可药用盐。

2.一种包括权利要求1的肽或其可药用盐的药物组合物。

3.权利要求1的一种或更多种肽在制造用于治疗代谢障碍的药物中的应用。

4.权利要求3的应用，其中所述代谢障碍为代谢综合征、肥胖症、糖尿病、代谢综合征X、高血糖、禁食血糖受损、血脂异常、动脉粥样硬化或糖尿病前期状态。

5.权利要求4的应用，其中所述代谢障碍为肥胖。

6.权利要求4的应用，其中所述代谢障碍为糖尿病。