CN102532239A

CN102532239A - 一种从雷公藤中提取去甲泽拉木醛的方法

Info

Publication number: CN102532239A
Application number: CN2010106038875A
Authority: CN
Inventors: 李法庆; 刘东锋
Original assignee: Suzhou Baozetang Medical Technology Co Ltd
Current assignee: Suzhou Baozetang Medical Technology Co Ltd
Priority date: 2010-12-24
Filing date: 2010-12-24
Publication date: 2012-07-04

Abstract

本发明提供一种从雷公藤中提取去甲泽拉木醛的方法，工艺步骤包括：(1)将雷公藤药材粉碎，加入60～80％的乙醇液超声提取2～3次，合并提取液，浓缩至浸膏；(2)加入适量pH7.5～9的碱液溶解浸膏，过滤，取滤液加酸调节至pH5～7，加乙酸乙酯萃取，萃取液蒸干得去甲泽拉木醛粗品；(3)最后采用制备高效液相色谱法分离得到产品。

Description

一种从雷公藤中提取去甲泽拉木醛的方法

技术领域：

本发明属于天然产物分离领域，尤其是涉及一种采用制备高效液相从雷公藤中提取去甲泽拉木醛的方法。

背景技术：

雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook.f)为卫矛科雷公藤属木质藤本植物，别名黄藤根、黄药、水莽草、断肠草等。其性温，味苦涩，有祛风除湿、舒筋活络、消肿止痛、杀虫解毒等功效。临床上用其治疗麻风反应、类风湿性关节炎等，药理研究也表明其有抗肿瘤、抗炎等作用。雷公藤以其对一些疑难杂症的良好疗效而备受关注，使得现在针对雷公藤中的活性成分如雷公藤内酯醇、雷公藤红素、去甲泽拉木醛等的研究也越来越多。

去甲泽拉木醛：雷公藤根皮中的三萜单体，分子量：480，分子式：C₂₉H₃₆O₆。易溶于氯仿、乙酸乙酯。

结构式：

去甲泽拉木醛具有明确的抗肿瘤活性。硕士论文《去甲泽拉木醛对T24膀胱癌细胞株效应的实验研究》，该论文研究表明去甲泽拉木醛具有诱导肿瘤细胞凋亡的能力，且毒性低于雷公藤甲素。林宗明等发表的“去甲泽拉木醛与雷公藤多苷的免疫抑制作用比较”，该文献明确了去甲泽拉木醛的细胞免疫抑制作用，且其作用强于雷公藤多苷。因此提供一种高含量去甲泽拉木醛的提取分离方法则很有必要。

现有文献中提取去甲泽拉木醛的方法较少，多是采用有机溶剂提取，硅胶柱分离的方法。如贺卫国等发表的“不同产地雷公藤药材中四种活性成分的含量测定及其质量标准的建立”，该文献采用的方法是90％乙醇回馏提取，浓缩后加氯仿萃取，再次浓缩后，上硅胶柱分离，得淡黄色粉末。采用硅胶分离，制备量小、周期长，仅制得去甲泽拉木醛粗品。本发明提供了一种含量高、质量好的去甲泽拉木醛的制备方法。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是提供一种从雷公藤中提取去甲泽拉木醛的方法，本工艺制得产品含量高、质量好。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种从雷公藤中提取去甲泽拉木醛的方法，其特征在于包含以下步骤：

提取：将雷公藤药材粉碎，加入3～10倍量的60～80％的乙醇液超声提取2～3次，合并提取液，浓缩得浸膏；

纯化：向上述浸膏中加入适量pH7.5～9的碱液溶解，过滤，取滤液加酸调节至pH5～7，加入1～3倍量的乙酸乙酯萃取2～3次，合并萃取液，蒸干得去甲泽拉木醛粗品；

精制：将上述去甲泽拉木醛粗品采用制备高效液相色谱法分离，色谱柱：十八烷基键和硅胶，流动相：乙腈-水(40～55∶45～60)，以示差折光检测器监视指导产品收集，收集液浓缩干燥得产品。

所述步骤1)中的超声提取时间为20～60min，超声功率为0.5～1.5KW。

所述步骤2)中的碱液可以是碳酸钠或者是碳酸氢钠的水溶液，酸可选用盐酸或硫酸。

本发明采用碱溶酸沉的方法纯化去甲泽拉木醛提取，因为去甲泽拉木醛结构中有酚羟基和羧基，可在碱性条件下溶解，调酸后游离出来，再经制备高效液相色谱法制得高含量的产品，可作为对照品使用。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

将雷公藤药材粉碎，称取500g，加入3L70％乙醇超声提取2次，提取时间为20min，功率为500W，合并提取液，浓缩至浸膏，加入200mlpH8的碳酸氢钠溶液溶解，过滤，滤液加盐酸调节至pH6.5，加入300ml乙酸乙酯萃取2次，合并萃取液，蒸干得去甲泽拉木醛粗品；将去甲泽拉木醛粗品用甲醇溶解，微孔滤膜滤过，经制备高效液相分离，色谱柱：十八烷基键和硅胶，流动相：乙腈-水(40∶60)，以示差折光检测器监视指导产品收集，收集液浓缩干燥得产品1.42g，含量98.7％。

实施例2：

将雷公藤药材粉碎，称取500g，加入1.5L75％乙醇超声提取3次，提取时间为25min，功率为800W，合并提取液，浓缩至浸膏，加入250mlpH8.5的碳酸钠溶液溶解，过滤，滤液加盐酸调节至pH7，加入250ml乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，蒸干得去甲泽拉木醛粗品；将去甲泽拉木醛粗品用甲醇溶解，微孔滤膜滤过，经制备高效液相分离，色谱柱：十八烷基键和硅胶，流动相：乙腈-水(45∶55)，以示差折光检测器监视指导产品收集，收集液浓缩干燥得产品1.68g，含量98.5％。

实施例3：

将雷公藤药材粉碎，称取1000g，加入4L80％乙醇超声提取2次，提取时间为30min，功率为1000W，合并提取液，浓缩至浸膏，加入500mlpH9的碳酸氢钠溶液溶解，过滤，滤液加硫酸调节至pH6，加入500ml乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，蒸干得去甲泽拉木醛粗品；将去甲泽拉木醛粗品用甲醇溶解，微孔滤膜滤过，经制备高效液相分离，色谱柱：十八烷基键和硅胶，流动相：乙腈-水(50∶50)，以示差折光检测器监视指导产品收集，收集液浓缩干燥得产品3.01g，含量98.7％。

实施例4：

将雷公藤药材粉碎，称取1000g，加入10L70％乙醇超声提取3次，提取时间为40min，功率为1400W，合并提取液，浓缩至浸膏，加入600mlpH7.5的碳酸钠溶液溶解，过滤，滤液加盐酸调节至pH5，加入700ml乙酸乙酯萃取2次，合并萃取液，蒸干得去甲泽拉木醛粗品；将去甲泽拉木醛粗品用甲醇溶解，微孔滤膜滤过，经制备高效液相分离，色谱柱：十八烷基键和硅胶，流动相：乙腈-水(55∶45)，以示差折光检测器监视指导产品收集，收集液浓缩干燥得产品3.19g，含量98.9％。

Claims

1.一种从雷公藤中提取去甲泽拉木醛的方法，其特征在于包含以下步骤：

1)提取：将雷公藤药材粉碎，加入3～10倍量的60～80％的乙醇液超声提取2～3次，合并提取液，浓缩得浸膏；

2)纯化：向上述浸膏中加入适量pH7.5～9的碱液溶解，过滤，取滤液加酸调节至pH5～7，加入1～3倍量的乙酸乙酯萃取2～3次，合并萃取液，蒸干得去甲泽拉木醛粗品；

3)精制：将上述去甲泽拉木醛粗品采用制备高效液相色谱法分离，色谱柱：十八烷基键和硅胶，流动相：乙腈-水(40～55∶45～60)，以示差折光检测器监视指导产品收集，收集液浓缩干燥得产品。

2.如权利要求1所述的一种从雷公藤中提取去甲泽拉木醛的方法，其特征在于所述步骤1)中的超声提取时间为20～60min，超声功率为0.5～1.5KW。

3.如权利要求1所述的一种从雷公藤中提取去甲泽拉木醛的方法，其特征在于所述步骤2)中的碱液可以是碳酸钠或者是碳酸氢钠的水溶液，酸可选用盐酸或硫酸。