CN102504004A - 一种齐墩果酸三糖皂苷类成分的制备工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明属于医药技术领域,提供了齐墩果酸皂苷类成分3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法,主要是通过溶剂提取法、碱水解法、大孔树脂吸附法、小孔树脂吸附法、ODS反向硅胶、动态轴向柱色谱法等任意一种方法,或这些方法的任意组合制备获得。本发明的齐墩果酸三糖皂苷类成分含量高达95%以上。
Description
技术领域
本发明属于医药、兽药技术领域,涉及西南银莲花中的一种齐墩果酸皂苷类成分3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法。该类成分可以通过溶剂提取法、碱水解法、大孔树脂吸附法、小孔树脂吸附法、ODS反向硅胶、动态轴向柱色谱法等任意一种方法,或这些方法的任意组合制备获得。所制得的齐墩果酸三糖皂苷类成分含量高达95%以上。
背景技术
西南银莲花(Anemone davidii Franch),又名铜钱草(湖北)、铜骨七(四川)和钻骨风(贵州),来源于毛茛科银莲花属西南银莲花的干燥根状茎,生长于海拔950~3500m的山地中,分布于西南及湖北西部和湖南西北部。具有活血止痛、祛瘀消肿和补肾之功效,可用于治疗跌打损伤、风湿痛、劳伤、阳痿和腰痛。现代药理研究表明西南银莲花具有祛风湿、消痈肿、抗癌、抗肿瘤、抗菌等多种功效。该植物富含五环三萜皂苷,尤以齐墩果酸糖苷和常春藤配基糖苷为主,在体外可以明显抑制肺癌、结肠癌、卵巢癌、乳腺癌、肾癌、前列腺癌、黑素瘤以及白血病等癌细胞的生长。
发明内容
本发明利用现代分离技术及鉴定手段对西南银莲花进行系统的化学成分分离,从中分离得到一种齐墩果酸皂苷类成分:3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷,通过与西南银莲花的水提物和醇提物成分比较分析发现,碱水解后产物中3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的含量较水解前大大提高。西南银莲花药材资源丰富,3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备工艺简单易行,适合工业化大量生产,具有广阔的市场前景和开发价值。
本发明的具体技术方案如下:
1、3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法,包括以下步骤:
第一步,将西南银莲花药材粉碎成粗粉,用水或0.1-95%乙醇浸泡0.5-2h,6-12倍量加热回流提取2-3次,每次1-3h,过滤,合并滤液。上述滤液于50-70℃减压浓缩至0.5-1.0g生药材/mL,无醇味,0-4℃冷藏过夜,析胶,滤过,即得西南银莲花提取物。
第二步,西南银莲花提取物水溶液中加入氢氧化钠溶液调到PH10-13,加热沸腾4-10小时,每30-60分钟测PH,保持在PH10-13,放冷,加盐酸溶液,调PH3-7,离心,去沉淀,即得西南银莲花提取物水解液。
第三步,西南银莲花提取物水解液,经过D101或AB-8或ADS-17大孔树脂吸附,依次用水、30-40%乙醇、50-80%乙醇、95%乙醇洗脱,收集50-80%乙醇洗脱部分,蒸干,用水溶解后经过小孔树脂吸附,收集甲醇-水6∶4洗脱部分,即得XNY58组分。
第四步、XNY58组分经ODS反相硅胶柱,用甲醇和水(6∶4-9∶1)的混合液进行梯度洗脱,梯度洗脱液依次有五组,其体积配比分别为
第一组甲醇6份∶水4份;
第二组甲醇7份∶水3份;
第三组甲醇8份∶水2份;
第四组甲醇85份∶水15份;
第五组甲醇9份∶水1份;
第五步、收集甲醇85份∶水15份的洗脱部分,经Sephadex LH-20柱甲醇-水7∶3洗脱,经ODS动态轴向色谱柱制备,甲醇-水8∶2洗脱得到化合物I,经对照品比较及LC/MS/MS测试,该化合物为3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷,用高效液相色谱法测定化合物I含量。
液相条件为:乙腈∶0.1%磷酸水=45∶55,检测波长为203nm,柱温25℃,色谱柱:COSMOSIL4.6*250mm。
本发明所述的齐墩果酸皂苷类成分是单一成分的化合物,其化学名称为3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷。
附图说明:
图1是3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的分子结构式;
图2是3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的HPLC分析图;
图3是3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的核磁共振氢谱图;
图4是3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的核磁共振碳谱图;
具体实施例:
3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法为:
实施案例1
第一步,将西南银莲花药材粉碎成粗粉,用水浸泡0.5-2h,6-12倍量加热回流提取2-3次,每次1-3h,过滤,合并滤液。上述滤液于50-70℃减压浓缩至0.5-1.0g生药材/mL,0-4℃冷藏过夜,析胶,滤过,即得西南银莲花提取物。
第二步,西南银莲花提取物水溶液中加入氢氧化钠溶液调到PH10-13,加热沸腾4-10小时,每30-60分钟测PH,保持在PH10-13,放冷,加盐酸溶液,调PH 3-7,离心,去沉淀,即得西南银莲花提取物水解液。
第三步,西南银莲花提取物水解液,经过D101或AB-8或ADS-17大孔树脂吸附,依次用水、30-40%乙醇、50-80%乙醇、95%乙醇洗脱,收集50-80%乙醇洗脱部分,蒸干,用水溶解后经过小孔树脂吸附,收集甲醇-水6∶4洗脱部分,即得XNY58组分。
第四步、西南银莲花XNY58组分经ODS反相硅胶柱,用甲醇和水(6∶4-9∶1)的混合液进行梯度洗脱,梯度洗脱液依次有五组,其体积配比分别为
第一组甲醇6份∶水4份;
第二组甲醇7份∶水3份;
第三组甲醇8份∶水2份;
第四组甲醇85份∶水15份;
第五组甲醇9份∶水1份;
第五步、收集甲醇85份∶水15份的洗脱部分,经Sephadex LH-20柱甲醇-水7∶3洗脱,经ODS动态轴向色谱柱制备,甲醇-水8∶2洗脱,得到化合物I,经对照品比较及LC/MS/MS测试,该化合物为3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷,高效液相色谱法测定含量为96%。
实施案例2
第一步,将西南银莲花药材粉碎成粗粉,用10%乙醇浸泡0.5-2h,6-12倍量加热回流提取2-3次,每次1-3h,过滤,合并滤液。上述滤液于50-70℃减压浓缩至0.5-1.0g生药材/mL,无醇味,0-4℃冷藏过夜,析胶,滤过,即得西南银莲花提取物。
第二步,西南银莲花提取物水溶液中加入氢氧化钠溶液调到PH10-13,加热沸腾4-10小时,每30-60分钟测PH,保持在PH10-13,放冷,加盐酸溶液,调PH3-7,离心,去沉淀,即得西南银莲花提取物水解液。
第三步,西南银莲花提取物水解液,经过D101或AB-8或ADS-17大孔树脂吸附,依次用水、30-40%乙醇、50-80%乙醇、95%乙醇洗脱,收集50-80%乙醇洗脱部分,蒸干,用水溶解后经过小孔树脂吸附,收集甲醇-水6∶4洗脱部分,即得XNY58组分。
第四步、XNY58组分经ODS反相硅胶柱,用甲醇和水(6∶4-9∶1)的混合液进行梯度洗脱,梯度洗脱液依次有五组,其体积配比分别为
第一组甲醇6份∶水4份;
第二组甲醇7份∶水3份;
第三组甲醇8份∶水2份;
第四组甲醇85份∶水15份;
第五组甲醇9份∶水1份;
第五步、收集甲醇85份∶水15份的洗脱部分,经Sephadex LH-20柱甲醇-水7∶3洗脱,经ODS动态轴向色谱柱制备,甲醇-水8∶2洗脱得到化合物I,经对照品比较及LC/MS/MS测试,该化合物为3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷。高效液相色谱法测定含量为96%。
实施案例3
第一步,将西南银莲花药材粉碎成粗粉,用20%乙醇浸泡0.5-2h,6-12倍量加热回流提取2-3次,每次1-3h,过滤,合并滤液。上述滤液于50-70℃减压浓缩至0.5-1.0g生药材/mL,无醇味,0-4℃冷藏过夜,析胶,滤过,即得西南银莲花提取物。
第二步,西南银莲花提取物水溶液中加入氢氧化钠溶液调到PH10-13,加热沸腾4-10小时,每30-60分钟测PH,保持在PH10-13,放冷,加盐酸溶液,调PH 3-7,离心,去沉淀,即得西南银莲花提取物水解液。
第三步,西南银莲花提取物水解液,经过D101或AB-8或ADS-17大孔树脂吸附,依次用水、30-40%乙醇、50-80%乙醇、95%乙醇洗脱,收集50-80%乙醇洗脱部分,蒸干,用水溶解后经过小孔树脂吸附,甲醇-水6∶4洗脱即得XNY58组分。
第四步、XNY58组分经ODS反相硅胶柱,用甲醇和水(6∶4-9∶1)的混合液进行梯度洗脱,梯度洗脱液依次有五组,其体积配比分别为
第一组甲醇6份∶水4份;
第二组甲醇7份∶水3份;
第三组甲醇8份∶水2份;
第四组甲醇85份∶水15份;
第五组甲醇9份∶水1份;
第五步、收集甲醇85份∶水15份的洗脱部分,经Sephadex LH-20柱甲醇-水7∶3洗脱,经ODS动态轴向色谱柱制备,甲醇-水8∶2洗脱得到化合物I,经对照品比较及LC/MS/MS测试,该化合物为3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷。高效液相色谱法测定含量为98%。
实施例4、
第一步,将西南银莲花药材粉碎成粗粉,用40%乙醇浸泡0.5-2h,6-12倍量加热回流提取2-3次,每次1-3h,过滤,合并滤液。上述滤液于50-70℃减压浓缩至0.5-1.0g生药材/mL,无醇味,0-4℃冷藏过夜,析胶,滤过,即得西南银莲花提取物。
第二步,西南银莲花提取物水溶液中加入氢氧化钠溶液调到PH10-13,加热沸腾4-10小时,每30-60分钟测PH,保持在PH10-13,放冷,加盐酸溶液,调PH 3-7,离心,去沉淀,即得西南银莲花提取物水解液。
第三步,西南银莲花提取物水解液,经过D101或AB-8或ADS-17大孔树脂吸附,依次用水、30-40%乙醇、50-80%乙醇、95%乙醇洗脱,收集50-80%乙醇洗脱部分,蒸干,用水溶解后经过小孔树脂吸附,收集甲醇-水6∶4洗脱部分,即得XNY58组分。
第四步、XNY58组分经ODS反相硅胶柱,用甲醇和水(6∶4-9∶1)的混合液进行梯度洗脱,梯度洗脱液依次有五组,其体积配比分别为
第一组甲醇6份∶水4份;
第二组甲醇7份∶水3份;
第三组甲醇8份∶水2份;
第四组甲醇85份∶水15份;
第五组甲醇9份∶水1份;
第五步、收集甲醇85份∶水15份的洗脱部分,经Sephadex LH-20柱甲醇-水7∶3洗脱,经ODS动态轴向色谱柱制备,甲醇-水8∶2洗脱得到化合物I,经对照品比较及LC/MS/MS测试,该化合物为3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷。高效液相色谱法测定含量为97%
实施例5、
第一步,将西南银莲花药材粉碎成粗粉,用60%乙醇浸泡0.5-2h,6-12倍量加热回流提取2-3次,每次1-3h,过滤,合并滤液。上述滤液于50-70℃减压浓缩至0.5-1.0g生药材/mL,无醇味,0-4℃冷藏过夜,析胶,滤过,即得西南银莲花提取物。
第二步,西南银莲花提取物水溶液中加入氢氧化钠溶液调到PH10-13,加热沸腾4-10小时,每30-60分钟测PH,保持在PH10-13,放冷,加盐酸溶液,调PH3-7,离心,去沉淀,即得西南银莲花提取物水解液。
第三步,西南银莲花提取物水解液,经过D101或AB-8或ADS-17大孔树脂吸附,依次用水、30-40%乙醇、50-80%乙醇、95%乙醇洗脱,收集50-80%乙醇洗脱部分,蒸干,用水溶解后经过小孔树脂吸附,甲醇-水6∶4洗脱即得XNY58组分。
第四步、XNY58组分经ODS反相硅胶柱,用甲醇和水(6∶4-9∶1)的混合液进行梯度洗脱,梯度洗脱液依次有五组,其体积配比分别为
第一组甲醇6份∶水4份;
第二组甲醇7份∶水3份;
第三组甲醇8份∶水2份;
第四组甲醇85份∶水15份;
第五组甲醇9份∶水1份;
第五步、收集甲醇85份∶水15份的洗脱部分,经Sephadex LH-20柱甲醇-水7∶3洗脱,经ODS动态轴向色谱柱制备,甲醇-水8∶2洗脱得到化合物I,经对照品比较及LC/MS/MS测试,该化合物为3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷。高效液相色谱法测定含量为98%。
实施例6、
第一步,将西南银莲花药材粉碎成粗粉,用70%乙醇浸泡0.5-2h,6-12倍量加热回流提取2-3次,每次1-3h,过滤,合并滤液。上述滤液于50-70℃减压浓缩至0.5-1.0g生药材/mL,无醇味,0-4℃冷藏过夜,析胶,滤过,即得西南银莲花提取物。
第二步,西南银莲花提取物水溶液中加入氢氧化钠溶液调到PH10-13,加热沸腾4-10小时,每30-60分钟测PH,保持在PH10-13,放冷,加盐酸溶液,调PH3-7,离心,去沉淀,即得西南银莲花提取物水解液。
第三步,西南银莲花提取物水解液,经过D101或AB-8或ADS-17大孔树脂吸附,依次用水、30-40%乙醇、50-80%乙醇、95%乙醇洗脱,收集50-80%乙醇洗脱部分,蒸干,用水溶解后经过小孔树脂吸附,收集甲醇-水6∶4洗脱部分,即得XNY58组分。
第四步、XNY58组分经ODS反相硅胶柱,用甲醇和水(6∶4-9∶1)的混合液进行梯度洗脱,梯度洗脱液依次有五组,其体积配比分别为
第一组甲醇6份∶水4份;
第二组甲醇7份∶水3份;
第三组甲醇8份∶水2份;
第四组甲醇85份∶水15份;
第五组甲醇9份∶水1份;
第五步、收集甲醇85份∶水15份的洗脱部分,经Sephadex LH-20柱甲醇-水7∶3洗脱,经ODS动态轴向色谱柱制备,甲醇-水8∶2洗脱得到化合物I,经对照品比较及LC/MS/MS测试,该化合物为3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷。高效液相色谱法测定含量为97%。
实施例7、
第一步,将西南银莲花药材粉碎成粗粉,用95%乙醇浸泡0.5-2h,6-12倍量加热回流提取2-3次,每次1-3h,过滤,合并滤液。上述滤液于50-70℃减压浓缩至0.5-1.0g生药材/mL,无醇味,0-4℃冷藏过夜,析胶,滤过,即得西南银莲花提取物。
第二步,西南银莲花提取物水溶液中加入氢氧化钠溶液调到PH10-13,加热沸腾4-10小时,每30-60分钟测PH,保持在PH10-13,放冷,加盐酸溶液,调PH3-7,离心,去沉淀,即得西南银莲花提取物水解液。
第三步,西南银莲花提取物水解液,经过D101或AB-8或ADS-17大孔树脂吸附,依次用水、30-40%乙醇、50-80%乙醇、95%乙醇洗脱,收集50-80%乙醇洗脱部分,蒸干,用水溶解后经过小孔树脂吸附,收集甲醇-水6∶4洗脱部分,即得XNY58组分。经抗肿瘤药理实验,证明XNY58组分为西南银莲花抗XNY58组分。
第四步、XNY58组分经ODS反相硅胶柱,用甲醇和水(6∶4-9∶1)的混合液进行梯度洗脱,梯度洗脱液依次有五组,其体积配比分别为
第一组甲醇6份∶水4份;
第二组甲醇7份∶水3份;
第三组甲醇8份∶水2份;
第四组甲醇85份∶水15份;
第五组甲醇9份∶水1份;
第五步、收集甲醇85份∶水15份的洗脱部分,经Sephadex LH-20柱甲醇-水7∶3洗脱,经ODS动态轴向色谱柱制备,甲醇-水8∶2洗脱得到化合物I,经对照品比较及LC/MS/MS测试,该化合物为3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷。高效液相色谱法测定含量为97%。
研究发现,在西南银莲花的乙醇提取物中,含有3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷,但含量明显低于经碱水解后的XNY58组分。
化合物I结构解析:
白色无定形粉末,硫酸乙醇显紫红色斑点,醋酐-浓硫酸反应阳性,Molish反应阳性,提示该化合物可能为皂苷类化合物。化合物I用2N TFA完全酸水解得到齐墩果酸皂苷元和单糖,糖经衍生化后进行GC分析,检测到L-阿拉伯糖、L-鼠李糖和D-葡萄糖的存在。
13C NMR谱共显示47个碳信号,包括30个苷元碳信号。其中苷元碳信号与齐墩果酸苷元基本一致。3位碳向低场位移至δ88.9,28位羰基碳信号在δ180.4,说明该化合物的糖是连在苷元的3位上。13C NMR谱中出现了3个糖信号,结合NMR数据和水解衍生化后的GC分析结果,证明其分别为L-阿拉伯糖、L-鼠李糖和D-葡萄糖。另外,13C NMR谱中显示,在δ106.5,105.1和101.9位置出现3个糖对应的端基碳信号。经过上述分析,并和公开的文献[Opinya A.Ekabo,Norman R.Farnsworth,Henderson T.,et al.J Nat Prod,1996,59:431-435]中的数据进行比较,证明化合物I的结构为3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷。13C NMR谱数据归属见表1。
表1化合物I的碳谱数据(Pyridine-d6)
No | δ(ppm) | No | δ(ppm) | No | δ(ppm) |
1 | 39.0 | 17 | 46.8 | 3′ | 74.2 |
2 | 26.8 | 18 | 42.1 | 4′ | 79.7 |
3 | 88.9 | 19 | 46.6 | 5′ | 64.6 |
4 | 39.9 | 20 | 31.1 | Rha-1″ | 101.9 |
5 | 56.1 | 21 | 34.4 | 2″ | 72.6 |
6 | 18.7 | 22 | 33.4 | 3″ | 72.4 |
7 | 33.4 | 23 | 28.2 | 4″ | 74.2 |
8 | 39.6 | 24 | 17.2 | 5″ | 69.9 |
9 | 48.2 | 25 | 15.9 | 6″ | 18.8 |
10 | 37.2 | 26 | 17.5 | Glc-1′″ | 106.5 |
11 | 23.9 | 27 | 26.3 | 2′″ | 75.6 |
12 | 122.7 | 28 | 180.4 | 3′″ | 78.7 |
13 | 145.0 | 29 | 33.4 | 4′″ | 71.4 |
14 | 42.3 | 30 | 23.9 | 5′″ | 78.9 |
15 | 28.5 | Ara-1′ | 105.1 | 6′″ | 62.7 |
16 | 23.9 | 2′ | 76.5 |
Claims (7)
1.3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
第一步,将西南银莲花药材粉碎成粗粉,用水或0.1-95%乙醇浸泡0.5-2h,6-12倍量加热回流提取2-3次,每次1-3h,过滤,合并滤液,滤液于50-70℃减压浓缩至0.5-1.0g生药材/mL,无醇味,0-4℃冷藏过夜,析胶,滤过,即得西南银莲花提取物;
第二步,西南银莲花提取物水溶液中加入碱性溶液调到PH10-13,加热沸腾4-10小时,每30-60分钟测PH,保持在PH10-13,放冷,加酸性溶液,调PH 3-7,离心,去沉淀,即得西南银莲花提取物水解液;
第三步,西南银莲花提取物水解液,经过大孔树脂吸附,依次用水、30-40%乙醇、50-80%乙醇、95%乙醇洗脱,收集50-80%乙醇洗脱部分,蒸干,用水溶解后经过小孔树脂吸附,收集甲醇-水6∶4洗脱部分,即得XNY58组分;
第四步、XNY58组分经ODS反相硅胶柱,用甲醇和水(3∶7-10∶0)的混合液进行梯度洗脱,梯度洗脱液依次有五组,其体积配比分别为
第一组甲醇5份∶水5份;
第二组甲醇6份∶水4份;
第三组甲醇7份∶水3份;
第四组甲醇8份∶水2份;
第五组甲醇9份∶水1份;
第五步、收集甲醇8份∶水2份的洗脱部分,经Sephadex LH-20柱甲醇-水7∶3洗脱,经ODS动态轴向色谱柱制备,甲醇-水8∶2洗脱得到化合物I,经对照品比较及LC/MS/MS测试,该化合物为3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷。
2.权利要求1的3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法,其特征是:其中的碱性溶液包括氢氧化钠、氢氧化钾。
3.权利要求1的3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法,其特征是:其中的酸性溶液包括盐酸、硫酸。
4.权利要求1的3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法,其特征是:其中大孔树脂包括非极性大孔吸附树脂(HPD100、HPD-300、HPD700、D101)、弱极性大孔吸附树脂(HPD-722、AB-8)、中极性大孔吸附树脂(HPD-450、HPD750、HPD-800、DM-130、ADS-17)、极性大孔吸附树脂(HPD-600、NKA-9) 和小孔树脂等任何一种类型。
5.权利要求1的3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法,其特征是:其中用于洗脱大孔树脂的洗脱液依次为水、30%乙醇洗脱、50~80%乙醇洗脱、95%乙醇洗脱,收集50~80%乙醇洗脱部分。
6.权利要求1至5中任一项的3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷,其特征是:含量大于95%。
7.3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的结构见附图。
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Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102898496A (zh) * | 2012-10-12 | 2013-01-30 | 苏州世林医药技术发展有限公司 | 一种齐墩果酸型皂苷的制备方法 |
CN104356181A (zh) * | 2014-10-23 | 2015-02-18 | 上海永恒生物科技有限公司 | 一种反式草木樨苷的制备方法 |
CN105891403A (zh) * | 2016-06-24 | 2016-08-24 | 广州康和药业有限公司 | 地乌药材hplc-uv特征图谱构建方法 |
CN107033211A (zh) * | 2017-03-27 | 2017-08-11 | 西南民族大学 | 从红牛膝中分离纯化皂苷类成分的方法 |
CN107847891A (zh) * | 2015-07-27 | 2018-03-27 | 明尼苏达-达科塔农民合作社 | 从农产品中提取皂苷的方法 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101492489A (zh) * | 2009-03-06 | 2009-07-29 | 吉林大学 | 银莲花素a的提取方法及其脂微球制剂的制备方法 |
CN102250190A (zh) * | 2011-05-30 | 2011-11-23 | 江西本草天工科技有限责任公司 | 一种齐墩果酸皂苷类衍生物、其盐的制备方法及其用途 |
CN102247393A (zh) * | 2011-05-30 | 2011-11-23 | 江西本草天工科技有限责任公司 | 一种齐墩果酸皂苷类成分的制备方法及其用途 |
-
2011
- 2011-09-29 CN CN2011102911392A patent/CN102504004A/zh active Pending
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101492489A (zh) * | 2009-03-06 | 2009-07-29 | 吉林大学 | 银莲花素a的提取方法及其脂微球制剂的制备方法 |
CN102250190A (zh) * | 2011-05-30 | 2011-11-23 | 江西本草天工科技有限责任公司 | 一种齐墩果酸皂苷类衍生物、其盐的制备方法及其用途 |
CN102247393A (zh) * | 2011-05-30 | 2011-11-23 | 江西本草天工科技有限责任公司 | 一种齐墩果酸皂苷类成分的制备方法及其用途 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
CHARLES GAUTHIER 等: "Haemolytic activity, cytotoxicity and membrane cell permeabilization of semi-synthetic and natural lupane- and oleanane-type saponins", 《BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY》 * |
刘雅萱: "中药白头翁的化学成分研究", 《长春中医药大学硕士学位论文》 * |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102898496A (zh) * | 2012-10-12 | 2013-01-30 | 苏州世林医药技术发展有限公司 | 一种齐墩果酸型皂苷的制备方法 |
CN104356181A (zh) * | 2014-10-23 | 2015-02-18 | 上海永恒生物科技有限公司 | 一种反式草木樨苷的制备方法 |
CN104356181B (zh) * | 2014-10-23 | 2018-10-09 | 上海永恒生物科技有限公司 | 一种反式草木樨苷的制备方法 |
CN107847891A (zh) * | 2015-07-27 | 2018-03-27 | 明尼苏达-达科塔农民合作社 | 从农产品中提取皂苷的方法 |
CN105891403A (zh) * | 2016-06-24 | 2016-08-24 | 广州康和药业有限公司 | 地乌药材hplc-uv特征图谱构建方法 |
CN107033211A (zh) * | 2017-03-27 | 2017-08-11 | 西南民族大学 | 从红牛膝中分离纯化皂苷类成分的方法 |
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