CN102481289A - 治疗与蛋白激酶ck2活性有关的疾病的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了用于治疗或改善与不希望的蛋白激酶CK2活性有关的障碍的方法，其中使用式(I)的化合物和这些化合物的药物组合物，

式I，所述化合物是有效的、选择性的CK2抑制剂，其中Z⁵、R^6B、R^6D、R⁸、n、R⁹和p如在说明书中进一步描述地定义。

Description

治疗与蛋白激酶CK2活性有关的疾病的方法

相关申请的交叉引用

本申请要求下述申请的优先权：2009年4月17日提交的美国临时申请系列号61/170,468；2009年9月4日提交的美国临时申请系列号61/240,165；2009年9月14日提交的美国临时申请系列号61/242,227：和2010年1月22日提交的美国临时申请系列号61/297,669。这些申请的内容通过引用整体并入本文。

本申请涉及PCT/US2007/077464、PCT/US2008/074820、PCT/US2009/035609和美国临时专利申请系列号61/143,282。这些申请的内容通过引用并入本文。

技术领域

本发明部分地涉及具有某些生物学活性的分子，所述活性包括、但不限于：抑制细胞增殖，和调节丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶活性。本发明的分子具体地调节蛋白激酶CK2(酪蛋白激酶II或CK2)活性，，因而可用于治疗特征在于过度的、不希望的或异常的CK2活性的疾病。本发明还部分地涉及使用这样的分子来治疗或改善下述病症的方法：与不希望的CK2活性有关的疾病，和其中CK2的抑制在治疗上有用的病症，诸如在疼痛、癌症和炎症，以及某些传染性疾病的治疗中。

背景技术

蛋白激酶CK2(以前称作酪蛋白激酶II，在本文中称作“CK2”)是一种普遍存在的且高度保守的蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶。全酶通常作为四聚体复合物存在，所述四聚体复合物由2个催化(α和/或α′)亚基和2个调节(β)亚基组成。CK2具有许多生理学靶物，并参与一系列复杂的细胞功能，包括细胞生存的维持。正常细胞中的CK2水平受到严格调节，且长期以来被认为在细胞生长和增殖中起作用。在PCT/US2007/077464、PCT/US2008/074820和PCT/US2009/035609中，描述了可用于治疗某些类型的癌症的CK2的抑制剂。

CK2的普遍性和重要性表明，它在进化尺度(evolutionary scale)上是古老的酶，它的序列的进化分析也如此表明；它的长寿可以解释为什么它在如此众多的生化过程中已经变得重要，和为什么来自宿主的CK2甚至已经被传染性病原体(例如，病毒、原生动物)采纳(co-opt)为它们的存活和生命周期生化系统的不可或缺的部分。这些相同的特征解释了为什么认为CK2的抑制剂可用于本文讨论的多种医学治疗中。因为它对于许多生物学过程起决定作用，如Guerra & Issinger，Curr.Med.Chem.，2008，15：1870-1886所总结的，CK2的抑制剂，包括本文所述的化合物，可用于治疗多种疾病和疾病。

癌细胞显示出CK2的升高，而最近的证据表明，通过保护调节蛋白免于胱天蛋白酶(caspase)-介导的降解，CK2有效地抑制细胞中的细胞凋亡。CK2的抗细胞凋亡功能可能促成它的参与转化和肿瘤发生的能力。具体地，已经显示，CK2与急性和慢性髓性白血病、淋巴瘤和多发性骨髓瘤有关。另外，在结肠、直肠和乳腺的实体瘤、肺和头颈的鳞状细胞癌(SCCHN)、肺、结肠、直肠、肾、乳腺和前列腺的腺癌中，已经观察到增强的CK2活性。据报道，小分子对CK2的抑制会诱导胰腺癌细胞和肝细胞癌细胞(HegG2、Hep3、HeLa癌细胞系)的细胞凋亡；且CK2抑制剂会急剧敏化RMS(横纹肌肉瘤)肿瘤朝向TRAIL诱导的细胞凋亡。因而，CK2抑制剂本身，或与TRAIL或TRAIL受体的配体组合，可用于治疗RMS，即在儿童中最常见的软组织肉瘤。另外，已经发现，升高的CK2与瘤形成的进攻性高度相关，使用本发明的CK2抑制剂的治疗因而会减少良性病变向恶性病变发展的趋势，或减少恶性病变转移的趋势。

不同于其它激酶和信号传递途径(其中突变经常与造成调节控制丧失的结构变化有关)，增加的CK2活性水平似乎通常由该活性蛋白的上调或过表达造成，而不是由影响活化水平的变化造成。Guerra和Issinger假设这可能是由于通过聚集的调节，因为活性水平与mRNA水平没有良好的关联性。已经在许多癌症中显示了过度的CK2活性，包括SCCHN肿瘤、肺肿瘤、乳腺肿瘤和其它肿瘤。出处同上。

显示结肠直肠癌中的升高的CK2活性与增加的恶性程度相关联。已经报道，CK2的异常表达和活性会促进乳腺癌细胞中NF-κB的细胞核水平的增加。在原始细胞危象期间，在具有急性髓细胞性白血病(AML)和慢性髓细胞性白血病(CML)的患者中，CK2活性显著增加，表明CK2的抑制剂在这些病症中会是特别有效的。已经显示多发性骨髓瘤细胞存活依赖于CK2的高活性，且CK2的抑制剂对多发性骨髓瘤(MM)细胞是细胞毒性的。类似地，CK2抑制剂会抑制鼠p190淋巴瘤细胞的生长。已经报道，它与Bcr/Abl的相互作用在表达Bcr/Abl的细胞的增殖中起重要作用，指示CK2的抑制剂可能用于治疗Bcr/Abl-阳性的白血病。已经显示，CK2的抑制剂抑制小鼠中皮肤乳头状瘤、前列腺和乳腺癌异种移植物的进展，并延长表达前列腺-启动子的转基因小鼠的存活。出处同上。

最近已经综述了CK2在多种非癌疾病过程中的作用。参见Guerra &Issinger，Curr.Med.Chem.，2008，15：1870-1886。越来越多的证据表明，CK2涉及中枢神经系统的危险疾病，包括，例如，阿尔茨海默氏病、帕金森病和罕见的神经变性疾病诸如Guam-Parkinson痴呆、染色体18缺失综合征、进行性核上麻痹(progressive supranuclear palsy)、库夫斯病(Kuf’s disease)或皮克病(Pick’s disease)。有人提出，选择性的CK2-介导的tau蛋白的磷酸化可能涉及阿尔茨海默氏病的进行性神经变性。另外，最近的研究表明，CK2在记忆缺陷和脑缺血中起作用，后一种作用显然由CK2对PI3K存活途径的调节作用来介导。

还已经显示，CK2涉及炎性疾病和自身免疫病的调节，所述炎性疾病例如急性或慢性炎性疼痛、肾小球肾炎，所述自身免疫病包括例如多发性硬化(MS)、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎和青少年关节炎。它正调节5-羟色胺5-HT3受体通道的功能，活化2型血红素氧化酶，并增强神经元一氧化氮合酶的活性。据报道，当在疼痛试验之前施用至脊髓组织时，选择性的CK2抑制剂强烈减少小鼠的疼痛响应。它磷酸化来自类风湿性关节炎(RA)患者的滑液的分泌型IIA磷脂酶A2，并调节DEK(一种细胞核DNA-结合蛋白)的分泌，所述DEK是在青少年关节炎患者的滑液中发现的一种促炎分子。因而，预期CK2的抑制会控制炎症性病理学(诸如这里所述的那些)的进展，且已经显示，本文公开的抑制剂在动物模型中有效地治疗疼痛。

还已经显示，蛋白激酶CK2在血管系统的疾病中起作用，所述疾病例如，动脉粥样硬化、层流剪切应力(laminar shear stress)和缺氧。还已经显示，CK2在骨骼肌和骨组织的疾病中起作用，所述疾病诸如心肌细胞肥厚、受损的胰岛素信号传递和骨组织矿化作用。在一项研究中，CK2的抑制剂有效地减慢生长因子在培养的细胞中诱导的血管发生。此外，在视网膜病变模型中，与奥曲肽(octreotide)(一种生长激素抑制素类似物)相组合的CK2抑制剂会减少新生血管丛(neovascular tuft)；因而，本文所述的CK2抑制剂可以与生长激素抑制素类似物相组合有效地治疗视网膜病变。

还已经显示，CK2会磷酸化GSK、肌钙蛋白和肌球蛋白轻链；因而，它在骨骼肌和骨组织生理学中是作用的，且与影响肌肉组织的疾病相关。

有证据表明，CK2也涉及原生动物寄生物的发育和生命周期调节，例如，小泰勒虫(theileria parva)、克鲁斯锥虫(Trypanosoma cruzi)、杜氏利什曼原虫(Leishmania donovani)、家蝇匐滴虫(Herpetomonas muscarummuscarum)、恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)、布鲁斯锥虫(Trypanosomabrucei)、鼠弓形虫(Toxoplasma gondii)和曼森血吸虫(Schistosoma mansoni)。许多研究已经证实了CK2在原生动物寄生物的细胞运动性(这是侵入宿主细胞所必需的)的调节中的作用。已经显示，在被杜氏利什曼原虫、家蝇匐滴虫、恶性疟原虫、布鲁斯锥虫、鼠弓形虫和曼森血吸虫感染的宿主中，发生CK2的活化或CK2的过度活性。实际上，已经显示，CK2的抑制会阻断克鲁斯锥虫的感染。

还已经显示，CK2会与病毒蛋白相互作用和/或磷酸化病毒蛋白，所述病毒蛋白与人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)、人乳头瘤病毒(HPV)和单纯疱疹病毒以及其它病毒类型(例如，Epstein-Baar病毒、人巨细胞病毒、丙肝病毒和乙肝病毒、Borna病病毒、腺病毒、柯萨奇病毒(coxsackievirus)、冠状病毒、流感和水痘带状疱疹病毒)有关。CK2在体外和在体内磷酸化和活化HIV-1逆转录酶和蛋白酶，并促进猿-人免疫缺陷病毒(SHIV，HIV的一种模型)的致病性。CK2也磷酸化HIV-2Nef，而它磷酸化Vpu蛋白，导致循环的CD4+T-细胞快速损失。CK2的抑制剂因而能够减少HIV感染模型的致病作用。CK2也磷酸化单纯疱疹病毒和许多其它病毒中的许多蛋白，且有证据表明，病毒已经采用CK2作为它们必需的生命周期蛋白的磷酸化酶。例如，已经报道，当E7(在被HPV感染的细胞中上调的一种病毒癌蛋白)功能是最佳的时，即，当它刺激细胞周期从G1期进展至S期时，CK2会磷酸化E7上调。HPV引起许多疾病，包括宫颈癌。认为病毒癌蛋白E6和E7主要负责在HPV感染的细胞中诱导转化表型。因而，通过阻断E7的磷酸化，CK2可以有效地减少HPV感染的致病作用。

还已经证实，CK2起昼夜节律钟的温度补偿的关键调节剂的作用。通过控制表达，显示了CK2的水平通过时钟蛋白FREQUENCY(FRQ)的磷酸化来决定补偿形式，发现该蛋白质在CK2亚效等位基因中受损。相反，涉及时钟功能的其它激酶和磷酸酶在温度补偿中不起可察觉的作用。参见Mehra等人，Cell，2009，137(4)：749-60。

CK2的不寻常之处在于它影响的生物学过程的多样性，且它也在其它方面不同于大多数激酶：它是组成性活性的，它可以使用ATP或GTP，且它在大多数肿瘤和快速增殖的组织中升高。它也具有不常见的结构特征，所述结构特征可以将它与大多数激酶区分开，而且，使它的抑制剂能够对CK2是高度特异性的，而许多激酶抑制剂会影响多种激酶，增加脱靶效应(off-targeteffect)的可能性，或受试者个体之间的差异性。出于所有这些原因，CK2是药物开发的特别令人感兴趣的靶物，本发明提供了高度有效的CK2抑制剂，其可用于治疗多种由过度的、异常的或不希望的CK2活性水平介导或与之相关的不同疾病和病症。

发明内容

本发明部分地提供了具有某些生物学活性的化合物，所述生物学活性包括、但不限于：抑制细胞增殖、抑制血管发生和调节蛋白激酶活性。这些分子调节酪蛋白激酶2(CK2)活性，并从而影响生物学功能，所述生物学功能包括、但不限于：例如，抑制γ磷酸盐从ATP向蛋白或肽底物转移、抑制血管发生、抑制细胞增殖和诱导细胞的细胞凋亡。本发明也部分地提供了制备新颖的化合物及其类似物的方法，和使用这些化合物的方法。也提供了药物组合物，其包含上述分子和药学上可接受的赋形剂或稀释剂，和使用这样的化合物和组合物的方法。本发明也提供了组合物，其包含与其它物质(包括其它治疗剂)相组合的上述分子。

在一个方面，本发明提供了用于治疗或改善除了实体瘤以外与不希望的蛋白激酶CK2活性有关的疾病或其中CK2的抑制具有治疗益处的病症的方法，所述方法包括：给需要这种治疗或改善的受试者施用治疗有效量的式I化合物：

式I，

或其药学上可接受的盐或酯，

其中Z⁵是N或CR^6A；

每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是H或任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

或每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是卤素、CF₃、CFN、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、羧基生物电子等排体、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

每个R⁹独立地是任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，或

每个R⁹独立地是卤素、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

其中每个R独立地是H或C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

且其中在同一个原子上或在相邻原子上的2个R可以连接形成3-8元环，所述环任选地含有N、O或S中的一个或多个；

且每个R基团，和通过把2个R基团连接到一起形成的每个环，任选地被一个或多个选自下述的取代基取代：卤素、＝O、＝N-CN、＝N-OR’、＝NR’、OR’、NR’₂、SR’、SO₂R’、SO₂NR’₂、NR’SO₂R’、NR’CONR’₂、NR’COOR’、NR’COR’、CN、COOR’、CONR’₂、OOCR’、COR’和NO₂，

其中每个R’独立地是H、C1-C6烷基、C2-C6杂烷基、C1-C6酰基、C2-C6杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-12芳基烷基或C6-12杂芳基烷基，其中的每一个任选地被一个或多个选自下述的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4杂烷基、C1-C6酰基、C1-C6杂酰基、羟基、氨基和＝O；

且其中2个R’可以连接形成3-7元环，所述环任选地含有最多3个选自N、O和S的杂原子；

n是0-4；且

p是0-4。

在另一个方面，本发明提供了用于治疗或改善除了实体瘤以外与过度的或不希望的CK2活性有关的疾病的方法，所述方法包括：给需要这种治疗或改善的受试者施用治疗有效量的如上所述的式I化合物：

式I，

或其药学上可接受的盐或酯，

其中所述疾病选自：神经变性疾病、炎性疾病、疼痛、血管系统的疾病、骨骼肌或骨组织的病理生理疾病、原生动物寄生虫病、病毒病、白血病、淋巴瘤和多发性骨髓瘤。

在另一个方面，本发明提供了用于治疗或改善受试者中的这些疾病的方法，所述方法包括：以有效地抑制不希望的蛋白激酶CK2活性的量，给所述需要这种治疗或改善的受试者施用如上所述的式I化合物：

式I，

或其药学上可接受的盐或酯。

在另一个方面，本发明提供了用于治疗或改善实体瘤、尤其是晚期实体瘤的方法，所述方法包括：给需要这种治疗或改善的受试者施用治疗有效量的如本文另外所述的式I化合物：

式I，

或其药学上可接受的盐或酯。

在另一个方面，本发明提供了用于治疗、改善或预防有此需要的受试者的昼夜节律疾病的方法，所述方法包括：给所述受试者施用治疗有效量的如本文另外所述的式(I)化合物：

式I，

或其药学上可接受的盐或酯。

在另一个方面，本发明提供了用于调节温度补偿和/或昼夜节律的方法，所述方法包括：给需要这种调节的受试者施用治疗有效量的如本文另外所述的式(I)化合物：

式I，

或其药学上可接受的盐或酯。

在有些实施方案中，式I化合物具有式II、III、IV、V或VI的结构，

式II    ；式III    式IV    ；

式V    ；或     式VI    ；

或其药学上可接受的盐或酯；

其中Z⁵是N或CR^6A；

每个R^6A和R⁸独立地是H或任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

或每个R^6A和R⁸独立地是卤素、CF₃、CFN、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、羧基生物电子等排体、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

每个R⁹独立地是任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，或

每个R⁹独立地是卤素、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

其中每个R独立地是H或C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

且其中在同一个原子上或在相邻原子上的2个R可以连接形成3-8元环，所述环任选地含有N、O或S中的一个或多个；

且每个R基团，和通过把2个R基团连接到一起形成的每个环，任选地被一个或多个选自下述的取代基取代：卤素、＝O、＝N-CN、＝N-OR’、＝NR’、OR’、NR’₂、SR’、SO₂R’、SO₂NR’₂、NR’SO₂R’、NR’CONR’₂、NR’COOR’、NR’COR’、CN、COOR’、CONR’₂、OOCR’、COR’和NO₂，

其中每个R’独立地是H、C1-C6烷基、C2-C6杂烷基、C1-C6酰基、C2-C6杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-12芳基烷基或C6-12杂芳基烷基，其中的每一个任选地被一个或多个选自下述的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4杂烷基、C1-C6酰基、C1-C6杂酰基、羟基、氨基和＝O；

且其中2个R’可以连接形成3-7元环，所述环任选地含有最多3个选自N、O和S的杂原子；且

p是0-4。

在要求保护的方法中特别有用的化合物包括式VIa化合物和其药学上可接受的盐：

式VIa    ；

其中R^6B可以是H或-NHR’，其中R’是C1-C5烃基、优选C1-C3烷基或C3-C5环烷基；Z⁵是CH或N；且R⁹是卤素、CF₃或C≡CR”，其中R”是H或Me。

在式VIa化合物的优选实施方案中，R^6B是H或-NH-环丙基；且R⁹是Cl、CF₃或C≡CH。Z⁵优选地是CH，且R^6B则优选地是H。当Z⁵是N时，R^6B可以是H或-NHR’。式VIa化合物包括下述的化合物K、(1)和(2)。也包括式VIa化合物的游离羧酸的酯，尤其是甲基、乙基、2-羟乙基和2-甲氧基乙基酯。

在某些优选的实施方案中，式I化合物是具有下式的化合物(化合物K)：

化合物K，

或其药学上可接受的盐或酯。

在其它优选的实施方案中，式I化合物是具有下式的化合物(化合物1或化合物2)：

或

或其药学上可接受的盐或酯。

本发明提供了用于治疗或改善与不希望的蛋白激酶CK2活性有关的疾病的方法，所述方法包括：给需要这种治疗或改善的受试者施用治疗有效量的具有下式的化合物(化合物K)：

或其药学上可接受的盐或酯。

在有些这样的实施方案中，要治疗或改善的疾病是除了实体瘤以外的疾病。在其它实施方案中，所述疾病是实体瘤，尤其是晚期实体瘤。

在有些实施方案中，本文所述的方法包括：施用有效量的药物组合物，其包含与至少一种药学上可接受的赋形剂相混合的式I化合物或其药学上可接受的盐或酯。在有些这样的实施方案中，所述药物组合物包含式II、III、IV、V或VI的化合物。在其它这样的实施方案中，所述药物组合物包含式VIa化合物，诸如化合物K、化合物(1)或化合物(2)。

在有些实施方案中，以固体形式，或作为包含有效量的化合物的液体组合物，口服施用化合物或包含化合物(诸如化合物K、化合物(1)或化合物(2))的药物组合物。或者，可以通过注射来施用化合物或药物组合物。有效量可以通过常规方法来确定，但是通常是1-200mg/kg。口服剂型可以作为含有约25mg或50mg或100mg化合物的固定剂量来施用，或作为根据体重调节的化合物剂量来施用。

附图说明

图1显示，使用qRT-PCR(8小时)(A)和ELISA(24小时)(B)，化合物K造成前列腺癌细胞中IL-8产生的抑制。

图2显示了化合物K在福尔马林-诱导的疼痛响应实验中的作用，所述实验设计用于鉴别提供疼痛缓解的化合物，并辨别化合物是否具有抗炎活性。这个实验表明，化合物K可有效地减少疼痛响应，并指示化合物K具有抗炎活性。每个图中的第一个直条是没有化合物的对照；第二个条是30mg/kg化合物K；第三个直条是100mg/kg化合物K；在最后的更深色的条是200mg/kg化合物K。标识*和**指示退缩(flinching)的统计上显著的减少。在阶段I，即用化合物K治疗后的前9分钟，该减少不是统计上显著的(A)，但是在阶段II期间，在3个实验组中的2个中，观察到统计上显著的效应(B)。

图3显示了化合物(1)在福尔马林-诱导的疼痛响应实验中的作用，所述实验设计用于鉴别提供疼痛缓解的化合物，并辨别化合物是否具有抗炎活性。该实验表明，化合物(1)可有效地减少疼痛响应，并指示化合物(1)具有抗炎活性。每个图中的第一个直条是没有化合物的对照；第二个条是30mg/kg化合物(1)；第三个直条是100mg/kg化合物(1)；在最后的更深色的条是200mg/kg化合物(1)。标识*和**指示退缩的统计上显著的减少。在阶段I，即用化合物(1)治疗后的前9分钟，减少不是统计上显著的(A)，但是在阶段II期间，在3个实验组中的2个中，观察到统计上显著的效应(B)。

图4显示了实施例5的1-3人群(cohort)在第1天(A)和第21天(B)时，血浆中化合物K的血浆浓度均值分布(profile)。

图5显示了在用化合物2(A)或叠氧胸苷(AZT)(B)处理的新鲜的人外周血单核细胞(PBMC)中，在8个CCR5-向性的HIV-1临床分离物中HIV-193TH073进化枝(clade)E的复制的抑制。

具体实施方式

本发明涉及抑制CK2并发挥多种有益治疗效果的化合物，并提供了使用高度有效的CK2抑制剂来治疗多种疾病的方法。

参照本发明的优选实施方案的下述详细描述和本文包括的实施例，可以更容易地理解本发明。应当理解，除非在本文中特别定义，否则给予本文使用的术语相关领域已知的传统含义。

式I、II、III、IV、V和VI的化合物是CK2的抑制剂；化合物K、(1)和(2)是用于本发明目的的CK2抑制剂的优选实施例。这些化合物发挥生物学活性，所述生物学活性包括、但不限于：抑制细胞增殖和调节蛋白激酶活性。这些式的化合物可以调节蛋白激酶CK2活性，且不受理论的约束，认为它们对CK2的抑制提供治疗本文所述的多种疾病的能力，所述疾病与异常的、过度的、或不希望的CK2活性水平有关。这样的化合物因此可以被本领域普通技术人员用于多种用途。例如，本文所述的化合物可以用于，包括、但不限于：(i)调节蛋白激酶活性(例如，CK2活性)，(ii)调节细胞增殖，(iii)调节细胞凋亡，(iv)治疗细胞增殖相关的疾病，诸如白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤和实体瘤，和(v)治疗神经变性疾病、炎性疾病、血管系统的疾病、骨骼肌或骨组织的疾病、原生动物寄生虫病、病毒病和疼痛。

除非另外指出，本文使用的单数形式“一个”、“一种”(“a”或“an”)和“所述”(“the”)包括复数所指。

本文使用的术语“受试者”表示人或动物受试者。在优选的实施方案中，所述受试者是人。

在提及特定疾病或病症时，术语“治疗”包括预防疾病或病症，和/或减轻、改善、缓解或去除疾病或病症的症状和/或病理学。

术语“治疗有效量”或“有效量”意在表示，会引起细胞、组织、系统、动物或人的生物学或医学响应的药物或药剂的量，所述响应是研究人员、兽医、医生或其它临床医师所寻求的。

本文所述的候选分子或化合物可以以治疗有效量存在于药物制剂或药剂中，这是可以导致希望的生物学效应的量，例如，导致改善、减轻、缓解或去除疾病或病状的症状。该术语也可以表示减少或停止细胞增殖速率(例如，减慢或停止肿瘤生长)，或减少增殖的癌细胞的数目(例如，去除肿瘤一部分或全部)。这些术语也适用于减少被微生物感染的系统(即，细胞、组织或受试者)中的微生物的滴度，降低微生物增殖速率，减少症状数目或与微生物感染有关的症状的影响，和/或从系统去除可检测量的微生物。微生物的实例包括、但不限于：病毒、原生动物、细菌和真菌。

本文使用的术语“烷基”、“烯基”和“炔基”包括直链、支链和环状单价烃基及其组合，当它们未被取代时，其仅含有C和H。实例包括甲基、乙基、异丁基、环己基、环戊基乙基、2-丙烯基、3-丁炔基等。每个这样的基团中的碳原子总数有时如本文所述，例如，当基团可以含有至多10个碳原子时，它可以表示为1-10C或C1-C10或C1-10。当允许杂原子(通常是N、O和S)替代碳原子时，例如在杂烷基中，描述该基团的数目，尽管仍然写为例如C1-C6，表示基团中的碳原子数目加上所包括的用于所述替代环的主链或链中的碳原子的这类杂原子数目之和。

通常，本发明的烷基、烯基和炔基取代基含有1-10C(烷基)或2-10C(烯基或炔基)。优选地，它们含有1-8C(烷基)或2-8C(烯基或炔基)。有时，它们含有1-4C(烷基)或2-4C(烯基或炔基)。单一基团可以包括超过一类的重键或超过一个重键；这类基团当含有至少一个碳-碳双键时，被包括在术语“烯基”定义内，当含有至少一个碳-碳三键时，被包括在术语“炔基”定义内。

烷基、烯基和炔基经常任选地被取代至在化学上认为合理的取代程度。典型的取代基包括、但不限于：卤素、＝O、＝N-CN、＝N-OR、＝NR、OR、NR₂、SR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、C≡CR、COOR、CONR₂、OOCR、COR和NO₂，其中每个R独立地是H、C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C6-C10芳基或C5-C10杂芳基，且每个R任选地被卤素、＝O、＝N-CN、＝N-OR’、＝NR’、OR’、NR’₂、SR’、SO₂R’、SO₂NR’₂、NR’SO₂R’、NR’CONR’₂、NR’COOR’、NR’COR’、CN、C≡CR’、COOR’、CONR’₂、OOCR’、COR’和NO₂取代，其中每个R’独立地是H、C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基或C5-C10杂芳基。烷基、烯基和炔基也可以被C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基或C5-C10杂芳基取代，其中的每一个可以被适合特定基团的取代基取代。

“乙炔”取代基是具有式-C≡C-R^a的任选地被取代的2-10C炔基，其中R^a是H或C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

且每个R^a基团任选地被一个或多个选自下述的取代基取代：卤素、＝O、＝N-CN、＝N-OR’、＝NR’、OR’、NR’₂、SR’、SO₂R’、SO₂NR’₂、NR’SO₂R’、NR’CONR’₂、NR’COOR’、NR’COR’、CN、COOR’、CONR’₂、OOCR’、COR’和NO₂，其中每个R’独立地是H、C1-C6烷基、C2-C6杂烷基、C1-C6酰基、C2-C6杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-12芳基烷基或C6-12杂芳基烷基，其中的每一个任选地被一个或多个选自下述的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4杂烷基、C1-C6酰基、C1-C6杂酰基、羟基、氨基和＝O；且其中2个R’可以连接形成3-7元环，所述环任选地含有最多3个选自N、O和S的杂原子。在有些实施方案中，-C≡C-R^a的R^a是H或Me。

“杂烷基”、“杂烯基”和“杂炔基”等类似地定义为相应的烃基(烷基、烯基和炔基)，但是‘杂’术语是指，在主链残基中含有1-3个O、S或N杂原子或其组合的基团；因此，相应的烷基、烯基或炔基中的至少一个碳原子被指定的杂原子之一替代，形成杂烷基、杂烯基或杂炔基。烷基、烯基和炔基杂型(heteroform)的一般大小和优选大小通常与相应的烃基相同，可以存在于杂型上的取代基与上面对于烃基所描述的那些相同。还应当理解，除非另外指出，为了化学稳定性的原因，这类基团不包含超过两个相邻的杂原子，但是氧代基团存在于N或S上形成硝基或磺酰基的情况除外。

当本文使用的“烷基”包括环烷基和环烷基烷基时，术语“环烷基”在本文中可用于描述通过环碳原子相连的碳环非芳族基团，“环烷基烷基”可用于描述通过烷基连接基团与分子相连的碳环非芳族基团。类似地，“杂环基”可用于描述含有至少一个作为环成员的杂原子、并通过环原子(其可以是C或N)与分子相连的非芳族环状基团；“杂环基烷基”可用于描述通过连接基团与另一分子相连的这样的基团。适合于环烷基、环烷基烷基、杂环基和杂环基烷基的大小和取代基与上面对于烃基所描述的那些相同。本文使用的这些术语还包括含有一个或两个双键的环，只要该环不是芳族的。

本文使用的“酰基”包括这样的基团：其包含连接于羰基碳原子上两个可能价位之一上的烷基、烯基、炔基、芳基或芳基烷基，杂酰基是指其中至少一个非羰基碳的碳被选自N、O和S中的杂原子替代的相应基团。因此，杂酰基包括例如-C(＝O)OR和-C(＝O)NR₂以及-C(＝O)-杂芳基。

酰基和杂酰基与和它们相连的任意基团或分子通过羰基碳原子的开放化合价(open valence)键合。其通常为C1-C8酰基包括甲酰基、乙酰基、新戊酰基和苯甲酰基，C2-C8杂酰基包括甲氧乙酰基、乙氧羰基和4-吡啶酰基。含有酰基或杂酰基的烃基、芳基以及这类基团的杂型可以被是本文所述的通常适合酰基或杂酰基每个相应成分的取代基的取代基所取代。

“芳族”部分或“芳基”部分是指具有众所周知的芳香性特征的单环或稠合二环部分；实例包括苯基和萘基。类似地，“杂芳族”和“杂芳基”是指这样的单环或稠合二环环系：其含有一个或多个选自O、S和N的杂原子作为环成员。杂原子的引入会使5-元环和6-元环具有芳香性。通常的杂芳族体系包括单环C5-C6芳族基团，例如吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡唑基、噻唑基、

唑基和咪唑基，以及通过使这些单环基团之一与苯基环或者与任一种杂芳族单环基团稠合形成C8-C10二环基团所形成的稠合二环部分，例如吲哚基、苯并咪唑基、吲唑基、苯并三唑基、异喹啉基、喹啉基、苯并噻唑基、苯并呋喃基、吡唑并吡啶基、喹唑啉基、喹喔啉基、噌啉基等。在整个环系的电子分布方面，具有芳香性特征的任意单环或稠合二环环系均包括在该定义内。它还包括这样的二环基团，其中至少与分子剩余部分直接相连的环具有芳香性特征。通常，该环系含有5-12个环成员原子。优选地，单环杂芳基含有5-6个环成员，二环杂芳基含有8-10个环成员。

芳基和杂芳基部分可以被各种取代基取代，所述取代基包括C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C5-C12芳基、C1-C8酰基和它们的杂型，其中的每一个自身可以进一步被取代；芳基和杂芳基部分的其它取代基包括卤素、OR、NR₂、SR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、C≡CR、COOR、CONR₂、OOCR、COR和NO₂，其中每个R独立地是H、C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，且每个R如上面对于烷基所述的任选地被取代。在芳基或杂芳基上的取代基当然可以进一步被本文所述的基团取代，这适用于每类这样的取代基或取代基的每个组分。因而，例如，芳基烷基取代基可以在芳基部分上被本文对于芳基所描述的通常取代基取代，且它可以另外在烷基部分上被本文对于烷基所描述的通常的或合适的取代基取代。

类似地，“芳基烷基”和“杂芳基烷基”是指这样的芳族或杂芳族环系：其通过连接基团与它们的连接点键合，所述连接基团例如亚烷基，包括被取代的或未取代的、饱和的或不饱和的环状或非环状连接基团。该连接基团通常为C1-C8烷基或其杂型。这些连接基团还可以包括羰基，因此使它们能够提供取代基，如酰基或杂酰基部分。芳基烷基或杂芳基烷基中的芳基或杂芳基环可以被与上面对于芳基所述相同的取代基取代。优选地，芳基烷基包括任选地被上面对于芳基所定义的基团取代的苯基环，和未被取代的或者被1个或2个C1-C4烷基或杂烷基取代的C1-C4亚烷基，其中所述烷基或杂烷基可以任选地环化，以形成环，例如环丙烷、二氧杂环戊烷或氧杂环戊烷。类似地，杂芳基烷基优选地包括任选地被上述描述为芳基上的通常取代基的基团取代的C5-C6单环杂芳基，和未被取代的或者被1个或2个C1-C4烷基或杂烷基取代的C1-C4亚烷基，或者它包括任选地被取代的苯基环或C5-C6单环杂芳基，和未被取代的或者被1个或2个C1-C4烷基或杂烷基取代的C1-C4亚杂烷基，其中所述烷基或杂烷基可以任选地环化，以形成环，例如环丙烷、二氧杂环戊烷或氧杂环戊烷。

在芳基烷基或杂芳基烷基被描述为任选地被取代的情况下，所述取代基可以位于基团的烷基或杂烷基部分上或芳基或杂芳基部分上。任选地存在于烷基或杂烷基部分上的取代基通常与上面对于烷基所述的那些相同；任选地存在于芳基或杂芳基部分上的取代基通常与上面对于芳基所述的那些相同。

本文使用的“芳基烷基”如果未被取代的话，则是烃基，其通过环和亚烷基或类似的连接基团中的碳原子总数来描述。因此，苄基是C7-芳基烷基，苯乙基是C8-芳基烷基。

上述的“杂芳基烷基”是指这样的部分：其包含通过连接基团相连的芳基，其与“芳基烷基”的区别之处在于，芳基部分中的至少一个环原子或连接基团中的至少一个原子是选自N、O和S的杂原子。在本文中根据环以及所组合的连接基团中的原子总数来描述杂芳基烷基，它们包括通过杂烷基连接基团连接的芳基；通过烃基连接基团(例如亚烷基)连接的杂芳基；以及通过杂烷基连接基团连接的杂芳基。因此，例如，C7-杂芳基烷基应包括吡啶基甲基、苯氧基和N-吡咯基甲氧基。

本文使用的“亚烷基”是指二价烃基；因为是二价，因此可以同时连接两个其它基团。其通常是指-(CH₂)_n-，其中n是1-8，优选n是1-4，尽管当具体指明时，亚烷基还可以被其它基团取代，因而可能具有其它长度，并且开放化合价不一定位于链的相对侧。因此，-CH(Me)-和-C(Me)₂-也可以称作亚烷基，正如可以是环状基团例如环丙烷-1，1-二基。当亚烷基被取代时，取代基包括那些通常出现在本文所述烷基上的取代基。

一般而言，包含在取代基中的任何烷基、烯基、炔基、酰基、芳基或芳烷基或者上述基团之一的任意杂型自身可以任选地被另外的取代基取代。如果这些取代基未被另外描述的话，其性质类似于主要取代基本身。因此，在例如R⁷是烷基的实施方案中，该烷基可以任选地被实施方案针对R⁷所列举的其它取代基取代，只要这在化学上是可行的，且并未脱离烷基自身的大小限制；例如被烷基或烯基取代的烷基仅仅简单地是扩大了这些实施方案中的碳原子的上限，因而未被包括在内。然而，被芳基、氨基、烷氧基、＝O等取代的烷基应当包括在本发明范围内，这些取代基中的原子未被计算在用于描述正在描述的烷基、烯基等基团的数目之内。在未具体指明取代基数目时，每个所述烷基、烯基、炔基、酰基、或芳基可以根据其可能化合价被多个取代基取代；具体地说，例如，任何一个上述基团可以被氟原子在其任意的或者全部可能的化合价取代。

本文使用的“杂型”是指基团例如烷基、芳基或酰基的衍生物，其中指定碳环基团中的至少一个碳原子被选自N、O和S中的杂原子替代。因此，烷基、烯基、炔基、酰基、芳基和芳烷基的杂型分别是杂烷基、杂烯基、杂炔基、杂酰基、杂芳基和杂芳基烷基。应该理解，通常没有超过两个的N、O或S原子依次相连，除非氧代基团与N或S相连形成硝基或磺酰基。

本文使用的“卤素”包括氟、氯、溴和碘。通常优选氟和氯。

本文使用的“氨基”是指NH₂，但是在氨基被描述为“被取代的”或“任选地被取代的”的情况下，该术语包括NR’R”，其中每个R’和R”独立地是H，或者是烷基、烯基、炔基、酰基、芳基、芳烷基或者这些基团之一的杂型，且每个烷基、烯基、炔基、酰基、芳基、芳烷基或者这些基团之一的杂型任选地被本文所述的适合相应基团的取代基取代。该术语还包括这样的形式：其中R’和R”连接到一起形成3-8元环，所述环可以是的饱和的、不饱和的或芳族的，且其含有1-3个独立地选自N、O和S的杂原子作为环成员，且其任选地被对于烷基所述的合适取代基取代，或者如果NR’R”是芳族基团的话，其任选地被对于杂芳基所述的典型取代基取代。

本文使用的术语“碳环”是指在环中仅含有碳原子的环状化合物，而“杂环”是指包含杂原子的环状化合物。碳环和杂环结构包括具有单环、二环或多环环体系的化合物。

本文使用的术语“杂原子”是指不是碳或氢的任意原子，诸如氮、氧或硫。

杂环的说明性实例包括、但不限于：四氢呋喃、1，3二氧杂环戊烷、2，3二氢呋喃、吡喃、四氢吡喃、苯并呋喃、异苯并呋喃、1，3-二氢-异苯并呋喃、异

唑、4，5二氢异

唑、哌啶、吡咯烷、吡咯烷-2-酮、吡咯、吡啶、嘧啶、八氢吡咯并[3，4b]吡啶、哌嗪、吡嗪、吗啉、硫代吗啉、咪唑、咪唑烷-2，4-二酮、1，3-二氢苯并咪唑-2-酮、吲哚、噻唑、苯并噻唑、噻二唑、噻吩、四氢噻吩1，1-二氧化物、二氮杂卓、三唑、胍、二氮杂双环[2.2.1]庚烷、2，5二氮杂双环[2.2.1]庚烷、2，3，4，4a，9，9a六氢1H β咔啉、环氧乙烷、环氧丙烷、四氢吡喃、二

烷、内酯、氮丙啶、氮杂环丁烷、哌啶、内酰胺，且也可以包括杂芳基。杂芳基的其它说明性实例包括、但不限于：呋喃、吡咯、吡啶、嘧啶、咪唑、苯并咪唑和三唑。

本文使用的术语“无机取代基”是指这样的取代基：其不含有碳，或含有结合到除氢以外的元素上的碳(例如，元素碳、一氧化碳、二氧化碳和碳酸盐)。无机取代基的实例包括、但不限于：硝基、卤素、叠氮基、氰基、磺酰基、亚磺酰基、磺酸盐、磷酸盐等。

本文使用的术语“极性取代基”是指具有电偶极子且任选地具有偶极矩的任意取代基(例如，不对称的极性取代基具有偶极矩，对称的极性取代基不具有偶极矩)。极性取代基包括接受或贡献氢键的取代基，和在生理pH水平的水溶液中携带至少部分的正电荷或负电荷的基团。在某些实施方案中，极性取代基是这样的基团：其可以在与另一个化学部分的非共价氢键中接受或贡献电子。在某些实施方案中，极性取代基选自羧基、羧基生物电子等排体或其它酸-衍生的部分，其在约7-8的pH主要作为阴离子存在。其它极性取代基包括、但不限于：含有OH或NH的基团、醚氧、胺氮、氧化的硫或氮、羰基、腈和含氮的或含氧的杂环(芳族的或非芳族的)。在有些实施方案中，由R8表示的极性取代基是羧酸盐/酯或羧酸盐/酯生物电子等排体。

本文使用的“羧酸盐/酯生物电子等排体”或“羧基生物电子等排体”是指这样的部分：预期其在生理pH在很大程度上是带负电荷的。在某些实施方案中，所述羧酸盐/酯生物电子等排体是选自下述的部分：

和前述物质的盐和前药，其中每个R⁷独立地是H或任选地被取代的选自下述的成员：C_1-10烷基、C_2-10烯基、C_2-10杂烷基、C_3-8碳环和C_3-8杂环，所述碳环或杂环任选地与另外的任选地被取代的碳环或杂环稠合；或R⁷是C_1-10烷基、C_2-10烯基或C_2-10杂烷基，其被任选地取代的C_3-8碳环或C_3-8杂环取代。

在某些实施方案中，所述极性取代基选自下组：羧酸、羧酸酯、羧酰胺、四唑、三唑、羧基甲磺酰胺、

二唑、氧代噻二唑、噻二唑、噻唑、氨基噻唑和羟基噻唑。

在有些实施方案中，至少一个存在的R⁸是羧酸或其盐或酯或生物电子等排体。在某些实施方案中，至少一个存在的R⁸是含有羧酸的取代基或其盐、酯或生物电子等排体。在后一实施方案中，R⁸取代基可以是连接有羧酸(或其盐、酯或生物电子等排体)的C1-C10烷基或C1-C10烯基。

在一个方面，本发明提供了用于治疗或改善与不希望的蛋白激酶CK2活性有关的疾病的方法，所述方法包括：给需要这种治疗或改善的受试者施用治疗有效量的本文所述的式I、II、III、IV、V或VI的化合物：

式I，

式II    ；式III    ；式IV    ；

式V    ；或式VI    ；

或其药学上可接受的盐或酯。

具体地，式VIa化合物可以用于本发明的方法中：

式VIa    ；

其中R^6B可以是H或-NHR’，其中R’是C1-C5烃基、优选C1-C3烷基或C3-C5环烷基；Z⁵是CH或N；且R⁹是卤素、CF₃或C≡CR”，其中R”是H或Me。

在式VIa化合物的优选实施方案中，R^6B是H或-NH-环丙基；且R⁹是Cl、CF₃或C≡CH。Z⁵优选地是CH，R^6B则优选地是H。当Z⁵是N时，R^6B可以是H或-NHR’。式VIa化合物包括下述的化合物K、(1)和(2)。也包括式VIa化合物的游离羧酸的酯，尤其是甲基、乙基、2-羟乙基和2-甲氧基乙基酯。

在有些这样的实施方案中，所述疾病是神经变性疾病、炎性疾病、血管系统的疾病、骨骼肌或骨组织的病理生理疾病、原生动物寄生虫病、病毒病、白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤、实体瘤(包括晚期实体瘤)或Castleman病。

在另一个方面，本发明提供了用于治疗或改善受试者的疾病的方法，所述方法包括：给所述需要这种治疗或改善的受试者施用治疗有效量的本文所述的式I、II、III、IV、V或VI的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中所述疾病选自：神经变性疾病、炎性疾病、疼痛、血管系统的疾病、骨骼肌或骨组织的病理生理疾病、原生动物寄生虫病、病毒病、白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤、实体瘤(包括晚期实体瘤)或Castleman病。

在另一个方面，本发明提供了用于治疗或改善受试者的疾病的方法，所述方法包括：以有效地抑制不希望的蛋白激酶CK2活性的量，给所述需要这种治疗或改善的受试者施用本文所述的式I、II、III、IV、V或VI的化合物或其药学上可接受的盐或酯。

在有些这样的实施方案中，所述疾病是神经变性疾病、炎性疾病、疼痛、血管系统的疾病、骨骼肌或骨组织的病理生理疾病、原生动物寄生虫病、病毒病、白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤、实体瘤(包括晚期实体瘤)或Castleman病。

在某些实施方案中，要通过本文所述的方法治疗或改善的疾病是神经变性疾病。在有些这样的实施方案中，所述神经变性疾病是阿尔茨海默氏病、帕金森病、记忆缺陷、脑缺血、Guam-Parkinson痴呆、染色体18缺失综合征、进行性核上麻痹、库夫斯病或皮克病。

在其它实施方案中，要通过本文所述的方法治疗或改善的疾病是炎性疾病。有时，所述炎性疾病是肾小球肾炎、多发性硬化、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎或青少年关节炎。在有些实施方案中，所述化合物被用于减轻炎性疼痛，因为鼠模型证实，CK2会调节感受伤害的信号传递，并在注入脊髓中时会在小鼠中减少疼痛响应。

显示本发明的化合物在福尔马林-诱导的疼痛模型中可有效地治疗与炎症有关的疼痛。具体地，在Hunskaar等人(“The frmalin test in mice：Dissociation between inflammatory and non-inflammatory pain，”Pain 30，103-14(1987))描述的福尔马林-诱导的方法的第二个测试阶段，测试的化合物是有活性的。Hunskaar描述了一个两-阶段实验，用于观察对福尔马林注射进小鼠爪子中的响应。在注射福尔马林以后前几分钟内的疼痛响应减少，指示缺少抗炎活性的作用于中枢系统的镇痛药(例如吗啡)特有的一般镇痛响应。诸如萘普生(naproxen)和起抗炎剂作用的甾类等化合物在该实验中仅影响晚期阶段。本发明的化合物在该实验中起抗炎剂作用，因而本文公开的化合物可用于治疗疼痛，包括急性或慢性炎性疼痛，和持续一小时或更久的时段的疼痛(持续性疼痛)。因为它们在该实验的第二阶段(而不是两个阶段)中起作用，它们被指示具有抗炎活性，且可用于治疗炎症以及与炎症有关的疼痛。

还显示了CK2在动脉粥样硬化的发病机制中起作用，通过维持层流剪应力流，可以预防动脉粥样化形成。CK2在血管形成中起作用，且显示其会介导缺氧-诱导的组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)的活化。CK2也涉及与与骨骼肌和骨组织有关的疾病，包括，例如，心肌细胞肥厚、心力衰竭、受损的胰岛素信号传递和胰岛素抗性、低磷血症和不充分的骨基质矿化作用。

因而，在一个方面，本发明提供了治疗这些病症中的每一种的方法，所述方法包括：给需要这种治疗的受试者施用有效量的CK2抑制剂，诸如本文所述的式I-VI或VIa的化合物。

在其它实施方案中，要通过本文所述的方法治疗或改善的疾病是血管系统的疾病。在有些这样的实施方案中，所述血管系统的疾病是动脉粥样硬化、层流剪应力或缺氧。

本发明也部分地涉及用于调节受试者的免疫应答的方法，和用于治疗与受试者的异常免疫应答有关的病症的方法。因而，提供了用于测定本文的化合物是否会调节免疫应答的方法，所述方法包括：以有效地调节(例如，抑制)免疫应答或与免疫应答有关的信号的量，使系统接触本文所述的化合物。与免疫调节活性有关的信号包括，例如，T-细胞增殖的刺激，细胞因子的抑制或诱导，所述细胞因子包括，例如，白介素、干扰素-γ和TNF。评估免疫调节活性的方法是本领域已知的。

也提供了用于治疗受试者的与异常免疫应答有关的病症的方法，所述方法包括：以有效治疗病症的量，施用本文所述的化合物给有此需要的受试者。特征在于异常免疫应答的病症包括、但不限于：器官移植排斥、哮喘、自身免疫疾病，包括类风湿性关节炎、多发性硬化、重症肌无力、系统性红斑狼疮、硬皮病、多肌炎、混合结缔组织病(MCTD)、克罗恩病和溃疡性结肠炎。在某些实施方案中，通过与调节(例如，抑制)mTOR途径成员或相关途径成员(例如，mTOR、PI3激酶、AKT)的生物活性的分子组合地施用本发明的化合物，可以调节免疫应答。在某些实施方案中，调节mTOR途径成员或相关途径成员的生物活性的分子是雷帕霉素。在某些实施方案中，本文提供了组合物，其包含例如与调节mTOR途径成员或相关途径成员的生物活性的分子(诸如雷帕霉素)相组合的本文所述的化合物。

在其它实施方案中，要通过本文所述的方法治疗或改善的疾病是骨骼肌或骨组织的病理生理疾病。这些病症包括动脉粥样硬化、层流剪应力和缺氧和有关的病症。在有些这样的实施方案中，要通过本发明的方法治疗的疾病是心肌细胞肥厚、受损的胰岛素信号传递或骨组织矿化作用。

仍在其它实施方案中，要通过本文所述的方法治疗或改善的疾病是原生动物寄生虫病。已经显示，原生动物感染会导致受感染的宿主中IL-8水平的几乎立即的增加。现在已经显示，用式VIa化合物治疗可以抑制IL-8的分泌。参见图1。除了上面讨论的CK2抑制剂涉及这种病原体的生命周期以外，IL-8表达的抑制可能有助于改善与寄生病原体有关的局部损伤。本发明的化合物因而可以用于治疗由小泰勒虫(Theileria parva)、鼠弓形虫(Toxoplasma gondii)、克鲁斯锥虫(Trypanosoma cruzi)(美洲锥虫病，Chagas disease)、杜氏利什曼原虫(Leishmania donovani)、家蝇匐滴虫(Herpetomonas muscarum muscarum)、恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)、布鲁斯锥虫(Traypanosoma brucei)和曼森血吸虫(Schistosoma mansoni)以及其它寄生病原体导致的寄生物病。

在其它实施方案中，要治疗或改善的疾病是病毒病。在有些这样的实施方案中，所述病毒病是人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)、人乳头瘤病毒、非洲淋巴细胞瘤病毒(Epstein-Barr virus)或单纯疱疹病毒。在其它实施方案中，所述病毒疾病是人乳头瘤病毒、人巨细胞病毒、丙型肝炎或乙型肝炎、Borna病病毒、腺病毒、柯萨奇病毒、冠状病毒或水痘带状疱疹病毒。

仍在其它实施方案中，要通过所述方法治疗或改善的疾病是白血病(例如，急性髓性白血病、慢性髓性白血病、急性淋巴细胞白血病(ALL)和Bcr/Abl-阳性的白血病)、淋巴瘤或多发性骨髓瘤。在其它实施方案中，所述疾病是实体瘤。在有些实施方案中，所述实体瘤是晚期实体瘤。有时，所述实体瘤是鳞状细胞癌，或结肠、直肠、肾、乳腺或前列腺的腺癌。在其它实施方案中，所述化合物被用于治疗胰腺癌、肝细胞癌、神经母细胞瘤或横纹肌肉瘤肿瘤(RMS)。为了治疗RMS，所述化合物可以与TRAIL受体配体组合使用。在其它实施方案中，所述疾病是Castelman病。

本发明也提供了用于治疗、改善或预防有此需要的受试者的昼夜节律疾病的方法，所述方法包括：给所述受试者施用治疗有效量的a CK2抑制剂，诸如本文所述的式I-VI或VIa的化合物。在有些实施方案中，所述昼夜节律疾病选自：时差综合症、轮班工作睡眠疾病和睡眠疾病，包括，例如，睡眠时相延迟综合征(DSPS)、睡眠时相前移综合征和非24-小时睡眠清醒疾病(non24-hour sleep wake disorder)。在其它实施方案中，所述昼夜节律疾病是冬季抑郁或季节性情感疾病。

本发明另外提供了用于调节温度补偿和/或昼夜节律的方法，所述方法包括：给需要这种调节的受试者施用治疗有效量的CK2抑制剂，诸如本文所述的式I-VI或VIa的化合物。

在有些实施方案中，本文所述的化合物可以用于重新设定昼夜节律钟。所述化合物可以用于治疗或预防时差综合症，或者用于促进轮班工作者的时钟的重设，或者用于治疗、改善或预防睡眠疾病，包括，例如，睡眠时相延迟综合征(DSPS)、睡眠时相前移综合征和非24-小时睡眠清醒疾病。另外，所述化合物可以用于改善节律，即，来自视交叉上核(SCN)内的细胞的输出信号的协同调节。节律紊乱常见于老年人中，并影响睡眠能力。本文所述的化合物可以用于改善神经元之间的相互作用，以允许它们到达共同时相，或直接地重新设定单个神经元至共同时相。化合物也可以用于减轻昼夜节律疾病，诸如冬季抑郁或季节性情感疾病。

在本文所述的方法的某些优选实施方案中，式(I)化合物是化合物K：

化合物K，

或其药学上可接受的盐或酯。

化合物K是高度有效的和选择性的CK2抑制剂。它对CK2的IC₅₀是约2nM。针对一组约145种激酶，测试了它的活性，发现对CK2的活性最高(最低的IC₅₀)。它显示出大部分活性的其它激酶如下表所示(表1)。对于其它激酶，IC₅₀更高，所以化合物K是对CK2选择性的。

表1

激酶	IC-50(nM)
		CK2α	1
CK2’	3
		DAPK3	17
FLT3	35
		HIPK3	45
PIM1	46
		Cdk1/Cycl B	56
DYRK2	91

在其它优选的实施方案中，式I化合物是具有化合物1或化合物2的通式的化合物：

或

或其药学上可接受的盐或酯。

对于抑制CK2，化合物1表现出6nM的IC₅₀。对于抑制CK2，化合物2表现出约9nM的IC₅₀。

在本文所述的方法的优选实施方案中，所述受试者是人。通常，所述受试者是已经被诊断为需要治疗一种或多种本文所述病症的受试者；本发明的方法任选地包括：鉴别适合治疗的受试者。所述方法另外任选地包括：测定受试者或来自受试者的适当组织(诸如要治疗的疾病所影响的组织)中的CK2的水平。在有些实施方案中，通过测定根据本发明的化合物的治疗是否降低了受试者或所述疾病影响的组织中的CK2水平或CK2活性水平，可以监测本文公开的治疗方法的进展或有效性。

制剂和给药

尽管本发明的组合物和方法通常用于治疗人患者，它们也可以用于兽药中，用于治疗类似的或相同的疾病。所述组合物可以用于例如治疗哺乳动物，包括，但不限于，灵长类动物和家养的哺乳动物。所述组合物可以用于例如治疗食草动物。本发明的组合物包括一种或多种药物的几何和旋光异构体，其中每种药物是异构体的外消旋混合物或一种或多种纯化的异构体。

适用于本发明中的药物组合物包括这样的组合物，其中包含有效地实现预期目的的量的活性成分。有效量的确定是在本领域技术人员的能力范围内，特别是在考虑本文提供的详细公开内容以后。

本发明的化合物可以作为药学上可接受的盐存在。本发明包括这样的盐。术语“药学上可接受的盐”意在包括，根据在本文所述的化合物上存在的具体取代基部分，用相对无毒的酸或碱制备的活性化合物的盐。当本发明的化合物含有相对酸性的官能团时，通过使这样的化合物的中性形式接触足够量的希望的碱(纯的，或在合适的惰性溶剂中)，可以得到碱加成盐。包括诸如钠、钾、钙、铵、有机氨基或镁盐的碱加成盐或类似的盐。在有些实施方案中，诸如化合物K、(1)或(2)等化合物作为钠盐来施用，且可以以固体形式或液体形式来施用。

当本发明的化合物含有相对碱性的官能团时，通过使这样的化合物的中性形式接触足够量的希望的酸(纯的，或在合适的惰性溶剂中)，可以得到酸加成盐。可接受的酸加成盐的实例包括源自无机酸的盐以及源自相对无毒的有机酸的盐，所述无机酸例如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸、单氢碳酸(monohydrogencarbonic)、磷酸、单氢磷酸(monohydrogenphosphoric)、二氢磷酸(dihydrogenphosphoric)、硫酸、单氢硫酸(monohydrogensulfuric)、氢碘酸或亚磷酸等，所述有机酸例如醋酸、丙酸、异丁酸、马来酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、富马酸、乳酸、扁桃酸、酞酸、苯磺酸、对甲苯基磺酸、柠檬酸、酒石酸、甲磺酸等。也包括氨基酸的盐诸如精氨酸盐、谷氨酸盐等，和葡糖醛酸或半乳糖醛酸等有机酸的盐等(参见，例如，Berge等人，“Pharmaceutical Salts”，Journal of Pharmaceutical Science，1977，66，1-19)。本发明的某些具体化合物含有碱性和酸性两种官能团，它们允许将所述化合物转化成碱加成盐或酸加成盐。

适用的盐形式的实例包括氢氯化物、氢溴化物、硫酸盐、甲磺酸盐、硝酸盐、马来酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、酒石酸盐(例如(+)-酒石酸盐、(-)-酒石酸盐或其混合物，包括外消旋混合物)、琥珀酸盐、苯甲酸盐和诸如谷氨酸等氨基酸的盐。通过本领域技术人员已知的方法，可以制备这些盐。

可以方便地如下再生化合物的中性形式：通过使盐接触碱或酸，并以常规方式分离母体化合物。化合物的母体形式与各种盐形式的差异之处在于某些物理性质，诸如在极性溶剂中的溶解度。

本发明中的药学上可接受的酯是指无毒的酯，优选烷基酯，诸如甲基酯、乙基酯、丙基酯、异丙基酯、丁基酯、异丁基酯或戊基酯，其中乙基酯或甲基酯是优选的。但是，如果需要，可以采用诸如苯基-C_1-5烷基等其它酯。某些化合物的酯衍生物可以起前药的作用，当被吸收进温血动物的血流中时，其可以以释放出药物形式并允许药物产生提高的治疗效能的方式进行分裂。

本发明的某些化合物被分离成固体，且可以以未溶剂化形式以及溶剂化形式(包括水合形式)存在。一般而言，溶剂化形式与未溶剂化形式等效，且被包括在本发明范围内。本发明的某些化合物可以以多种结晶形式或无定形形式存在。一般而言，对于本发明预见到的用途，所有物理形式都是等效的，且意图在本发明范围内。

本发明的某些化合物具有不对称的碳原子(旋光中心或手性中心)或双键；以绝对立体化学的方式，可以定义为(R)-或(S)-或者针对氨基酸为(D)-或(L)-的对映异构体、外消旋物、非对映异构体、互变异构体、几何异构体、立体异构形式，和单个异构体都被包括在本发明的范围内。因此，本发明化合物的单个立体化学异构体以及对映异构的和非对映异构的混合物，都在本发明的范围内。本发明的化合物不包括本领域已知因为太不稳定而不能合成和/或分离的化合物。本发明意在包括外消旋形式和旋光纯的形式的化合物。旋光的(R)-和(S)-或者(D)-和(L)-异构体可以使用手性合成子或手性试剂制备，或者使用常规技术进行拆分。当本文所述的化合物含有烯键或其它几何不对称中心时，除非另有说明，所述化合物意图包括E和Z两种几何异构体。

本文使用的术语“互变异构体”是指两种或多种结构异构体之一，它们平衡地存在，且可以容易地从一种异构形式转化为另一种。对本领域技术人员显而易见，本发明的某些化合物可以以互变异构形式存在，化合物的所有这样的互变异构形式都在本发明范围内。

除非另有说明，本文描绘的结构也意在包括差别仅在于存在一个或多个同位素富集的原子的化合物。例如，除了用氘或氚替代氢以外，或者用¹³C-或¹⁴C-富集的碳替代碳以外，具有本发明结构的化合物是在本发明范围内。本发明的化合物也可以在一个或多个构成这样的化合物的原子处含有非天然比例的原子同位素。例如，所述化合物可以用放射性同位素放射性地标记，例如氚(3H)、碘-125(¹²⁵I)或碳-14(¹⁴C)。本发明化合物的所有同位素变体(无论是否是放射性的)都被包括在本发明范围内。

除了盐形式以外，本发明提供了前药形式的化合物。本文所述化合物的前药是这样的化合物：其在生理条件下，可容易地发生化学变化，以提供本发明的化合物。另外，在离体环境中，通过化学或生化方法，可以将前药转化为本发明的化合物。例如，当放入含有合适的酶或化学试剂的透皮贴剂储库(reservoir)中时，前药可以缓慢地转化为本发明的化合物。

本发明化合物的描述受到本领域技术人员已知的化学键合的原理的限制。因此，在基团可以被许多取代基中的一个或多个取代时，选择这样的取代，使得其符合化学键合的原理，并产生并非固有地不稳定的和/或本领域普通技术人员已知在环境条件(诸如水性的、中性的、和几种已知的生理条件)下可能不稳定的化合物。例如，杂环烷基或杂芳基符合本领域技术人员已知的化学键合的原理地通过环杂原子连接至分子的其它部分，从而避免固有地不稳定的化合物。

当用作治疗剂时，本文所述的化合物经常与生理上可接受的载体一起给药。生理上可接受的载体是可将化合物加到其中以溶解它或以其它方式促进它的给药的制剂。生理上可接受的载体的实例包括、但不限于：水、盐水、磷酸盐缓冲液或生理缓冲盐水。

本发明的化合物可配制为药物组合物。然后经口服、肠胃外、吸入喷雾、经直肠或局部途径，以含有需要的常规无毒的可药用载体、辅剂和媒介物的剂量单位制剂形式，施用这样的药物组合物。局部给药还可以包括使用透皮给药，例如透皮贴剂或离子电渗疗法装置。本文使用的术语肠胃外包括皮下注射、静脉内注射、肌肉内注射、胸骨内注射或输注技术。有关药物制剂的讨论，参见，例如Hoover，John E.、R_EMINGTON′S P_{HARMACEUTICAL}S_CIENCES，Mack Publishing Co.，Easton，Pa.；1975。药物制剂的其它实例可以参见，Liberman，H.A.和Lachman，L.，编，P_{HARMACEUTICAL} D_OSAGE F_ORMS，Marcel Decker，New York，N.Y.，1980。

按照已知的技术，使用合适的分散或润湿剂和助悬剂，可以配制注射剂，例如无菌注射用水性或油性悬浮液。无菌注射剂也可以是在无毒的、肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液或悬浮液，例如作为在1，3-丁二醇中的溶液。在可接受的媒介物和溶剂中，可以采用水、林格式溶液和等渗氯化钠溶液。此外，无菌的不挥发性油常用作溶剂或悬浮介质。为此目的，可使用任何品牌的不挥发性油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。另外，诸如油酸等脂肪酸可用于制备注射剂。也可使用二甲基乙酰胺、包括离子型和非离子性去污剂在内的表面活性剂、以及聚乙二醇。还可使用溶剂和润湿剂(诸如上面讨论的那些)的混合物。

用于药物直肠给药的栓剂可如下制备：将药物与合适的非刺激性赋形剂混合，所述赋形剂例如可可脂、合成的甘油单酯、甘油二酯或甘油三酯、脂肪酸和聚乙二醇，它们在常温是固体，但在直肠温度时是液体，因而会在直肠中融化，并释放药物。

用于口服给药的固体剂型可以包括胶囊、片剂、丸剂、散剂和颗粒。在这类固体剂型中，通常将本发明的化合物与一种或多种适合所示给药途径的辅剂相组合。如果口服给药，可以将本发明的化合物与乳糖、蔗糖、淀粉粉末、链烷酸的纤维素酯、纤维素烷基酯、滑石、硬脂酸、硬脂酸镁、氧化镁、磷酸和硫酸的钠盐和钙盐、明胶、阿拉伯胶、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮和/或聚乙烯醇相混合，然后压片或包囊，以方便给药。这类胶囊或片剂可以含有控释制剂，可呈活性化合物在羟丙基甲基纤维素中的分散形式。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型还可包含缓冲剂，例如柠檬酸钠、镁或钙的碳酸盐或碳酸氢盐。片剂和丸剂也可制备有肠溶衣。

为了治疗目的，肠胃外给药制剂可以是水性或非水性等渗无菌注射溶液或悬浮液形式。从含有一种或多种上述用于口服给药制剂中的载体或稀释剂的无菌散剂或颗粒，可以制备这些溶液和悬浮液。可以将本发明的化合物溶解于水、聚乙二醇、丙二醇、乙醇、玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、苯甲醇、氯化钠和/或各种缓冲液中。其它辅剂和给药模式是药学领域熟悉的和广为人知的。

在有些实施方案中，以与惰性载体相混合的固体片剂或丸剂形式，施用化合物或它的钠盐；在其它实施方案中，将化合物或它的钠盐溶解或悬浮于液体介质诸如磷酸盐缓冲盐水中，并通过加入小量的聚乙二醇诸如PEG-300，促进溶解度。这些制剂可以口服给药，或可以制备所述液体制剂，并通过注射来递送。在有些实施方案中，在含有PEG的缓冲溶液中配制本发明的化合物，诸如化合物K或(1)或(2)。

在有些实施方案中，以固体形式，或作为包含有效量的化合物的液体组合物，口服施用化合物或包含化合物(诸如化合物K、化合物(1)或化合物(2))的药物组合物。或者，可以通过注射来施用它。通过常规方法，可以确定有效量，但是通常是1至200mg/kg。作为含有约25mg或50mg或100mg化合物的固定剂量，或作为根据体重调节剂量的化合物，可以施用口服剂型。

用于口服给药的液体剂型可以包括药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆剂和酏剂，它们含有本领域常用的惰性稀释剂，例如水。这类组合物还可含有辅剂，例如润湿剂、乳化剂和助悬剂以及甜味剂、矫味剂和芳香剂。

可以与载体物质相组合来制备单一剂型的活性成分的量，随所治疗的哺乳动物宿主和具体给药模式而异。通过常规方法，可以确定有效量，但是通常是1至200mg/kg。作为含有约25mg或50mg或100mg化合物的固定剂量，或作为根据体重调节剂量的化合物，诸如30mg/kg或60mg/kg或100-200mg/kg，可以施用口服剂型。可以以任意适当的频率，施用剂量，但是在有些实施方案中，因为化合物的血浆半衰期，所述方法包括，每天给药1次或每天给药2次。根据主治医师的判断，可以继续定量给药任意适当的时间，但是在有些实施方案中，每天给药本发明化合物1次或2次，持续约1周或约2周。

根据多种因素，选择单独地或与抗癌剂组合地使用本发明化合物的剂量方案，所述因素包括：患者的类型、物种、年龄、体重、性别和医学状况；要治疗的病症的严重性；给药途径；患者的肾功能和肝功能；以及采用的具体化合物或其盐或酯。为了确定要施用给需要立即治疗或联合治疗的人的治疗有效剂量的目的而考虑这些因素，是在普通技术的临床医师的技能范围内。

尽管不同的给药途径可以用于本发明的化合物和方法，在有些实施方案中，所述方法使用化合物K或其盐进行口服给药，以治疗一种或多种本文所述的病症。当以填充的明胶胶囊形式口服给药时，化合物K在小鼠、大鼠和狗试验中表现出良好的口服生物利用度(约20-50％)。在该范围的实验受试者内，它表现出约5至12小时的半衰期和相对较低的体内清除率，因而，它的总口服生物利用度是良好的。基于药代动力学特性和半衰期信息，在有些实施方案中，每天2次口服给药化合物K，以提供有效的血浆水平。具体地，对于慢性病症，口服给药是优选的。口服给药的典型剂量是每天大约5-500mg/kg。

如实施例3所证实的，本发明的化合物可以口服施用来减少疼痛。为了治疗疼痛，可以口服或通过注射方法来施用所述化合物。为了治疗持续性疼痛，可以每天1次或2次，或每天超过2次，口服施用所述化合物；在有些实施方案中，每天1次或2次地施用本发明化合物，体重标准化的日剂量为约1-500mg/kg，优选10-300mg/kg。在有些实施方案中，可以每天1次以10-300mg/kg施用每个剂量，或在有些实施方案中，每天2次以约10-200mg/kg的剂量施用。当每日施用2个剂量时，它们经常间隔至少4小时、优选间隔至少约8小时来施用。

在有些实施方案中，用于治疗疼痛的方法使用固定的剂量，诸如特定的片剂或胶囊大小，而不是标准化至受试者的体重。在这样的实施方案中，每个剂量可以是10-500mg，经常是20-300mg。

用于治疗疼痛的口服给药可以使用固体制剂或液体制剂。所述液体制剂可以是溶液或悬浮液。使用一种或多种载体和/或药学上可接受的赋形剂，可以如本文所述配制固体和液体制剂。

对于有些实施方案，通过注射(诸如肌肉内注射或静脉内注射)来递送化合物K可能是优选的。当注射时，化合物K的半衰期仍然是约5-12小时，这基本上与口服递送相同。注射递送(静脉内)的剂量可以是口服剂量的约一半，因为注射会绕过降低口服生物利用度的吸收屏障。对于注射递送，可以使用更低的剂量，诸如每天1-25mg/kg，以实现类似的药物血浆水平。

治疗组合

本发明的化合物可以单独使用，或与其它治疗剂组合使用。本发明提供了治疗病症(诸如癌症、炎症和免疫疾病)的方法，其中给需要这种治疗的受试者施用治疗有效量的可用于治疗所述疾病的治疗剂，并给相同受试者施用治疗有效量的本发明的调节剂。CK2调节剂是抑制或增强CK2蛋白的生物活性的药剂，下文中统称为“调节剂”。

式I的化合物是示例性的“调节剂”。治疗剂和调节剂可以一起施用，作为分开的药物组合物，或混合在单一药物组合物中。治疗剂和调节剂也可以分开施用，包括在不同时间和以不同频率。通过任意已知的途径，诸如口服、静脉内地、肌肉内地、经鼻地等，可以施用调节剂；也可以通过任意常规途径，施用治疗剂。在许多实施方案中，调节剂和治疗剂中的至少一种(任选地，两种)可以口服施用。优选地，所述调节剂是CK2抑制剂，并提供本文所述的治疗效果。

在某些实施方案中，上述的“调节剂”可以与治疗剂组合使用，所述治疗剂可以通过结合DNA区域(它们可以形成某些四链(quadruplex)结构)而起作用。在这样的实施方案中，治疗剂自身具有抗癌活性，但是当与调节剂组合使用时，它们的活性会得到增强。该协同效应允许治疗剂以更低的剂量施用，同时实现等同或更高水平的至少一种希望的效应。

要施用的这些物质中的每一种的量，随给药途径、受试者状况、施用给受试者的其它治疗和其它参数而变化。当然，本发明的治疗剂可以造成多种希望的效应；与治疗剂组合使用的调节剂的量，应当是增加这些希望的效应中的一种或多种的量。以有效地增强治疗剂的希望的作用的量，施用调节剂。如本文使用的，如果它单独地使治疗剂的至少一种希望的作用增加了至少约25％，则该量“有效地增强治疗剂的希望的作用”。优选地，它是使治疗剂的希望的作用增加了至少50％或至少100％(即，它使治疗剂的有效活性倍增)的量。在有些实施方案中，它是使治疗剂的希望的作用增加了至少200％的量。

使用体外方法，诸如细胞增殖试验，可以确定增加治疗剂的希望的作用的调节剂的量。本发明的治疗剂可用于抵抗(counter)过度增殖疾病诸如癌症，因而，它们会减少细胞增殖。因而，例如，调节剂的合适量可以是使治疗剂的抗增殖作用增强至少25％(在细胞增殖试验中测得)所需的量。

在本发明中使用的调节剂可以增强与它一起使用的治疗剂所产生的至少一种希望的效应，因而，本发明的组合会提供协同效应，而不仅仅是累加效应。调节剂自身有时可用于治疗相同类型的病症，因而，也可以在这样的试验中具有一些直接的效应。在该情况下，“有效地增加希望的效应的量”必须是治疗剂的活性的协同增强，这可以归因于调节剂对治疗剂的效应的增强，而不是单独施用两种物质所预期到的简单累加效应。在许多情况下，可以以预期对治疗的受试者或体外试验不会具有任何明显作用的量(浓度)，使用调节剂，所以使用该组合实现的增强的效应直接归因于协同效应。

为了施用给动物或人受试者，调节剂(诸如本文所述的式I、II、III、IV、V或VI的化合物)的适当剂量通常是约0.01-15mg/kg，和约0.1-10mg/kg。剂量水平取决于病症的性质、药物效能、患者的状况、从业人员的判断以及给药频率和模式；但是，这类参数的优化，属于本领域的一般技术水平。

对于治疗癌症，调节剂可以是单独地有活性的。对于上述的联合治疗，当与治疗剂组合使用时，调节剂的剂量经常是单独使用该调节剂来治疗相同病症或受试者所需剂量的1/2至1/10。通过本领域已知的方法，可以容易地确定与治疗剂组合使用的调节剂的合适量。

本发明的化合物和组合物可以与通常施用给需要治疗癌症的患者的抗癌剂或其它药剂(诸如姑息剂)组合使用。这样的“抗癌剂”包括，例如，经典的化学治疗剂以及分子靶向的治疗剂、生物治疗剂和放疗剂。

当本发明的化合物或组合物与抗癌剂或其它治疗剂组合使用时，本发明提供了例如同时的、交错的或替代性的治疗。因而，本发明的化合物可以与抗癌剂或其它治疗剂在同一种药物组合物中同时施用；本发明的化合物可以与其它药剂在分开的药物组合物中同时施用；本发明的化合物可以在其它药剂之前施用，或其它药剂可以在本发明的化合物之前施用，例如，具有数秒、数分钟、数小时、数天或数周的时间差。

在交错治疗的实施例中，可以施用本发明的化合物的疗程，继之以其它治疗剂的疗程，或者可以使用颠倒的治疗次序，并且也可以使用超过一系列的使用每个组分的治疗。在本发明的某些实施例中，将一种组分(例如，本发明的化合物或其它治疗剂)施用给哺乳动物，同时其它组分或它的衍生产物保留在哺乳动物的血流中。例如，可以施用式(I)-(VI)的化合物，同时其它药剂或它的衍生产物保留在血流中，或者可以施用其它治疗剂，同时式(I)-(VI)化合物或它的衍生物保留在血流中。在其它实施例中，在所有或大部分第一种组分或它的衍生物已经离开哺乳动物的血流以后，施用第二种组分。

本发明的化合物和其它治疗剂可以在相同剂型中施用，例如，二者都作为静脉内溶液施用，或者它们可以在不同剂型中施用，例如，一种化合物可以局部施用，另一种口服施用。基于药物的具体特征和涉及的癌症，本领域普通技术人员能够辨别哪种药剂组合是有用的。

可用于与本发明化合物的联合治疗中的其它治疗剂包括下述类型的药剂和抑制剂：

可与本发明化合物组合使用的抗癌剂可以包括选自本领域普通技术人员已知的任意类别的药剂，包括，但不限于，抗微管剂诸如二萜类化合物和长春花生物碱；铂配位络合物；烷化剂诸如氮芥、氧氮磷环类(oxazaphosphorines)、烷基磺酸盐(alkylsulfonates)、亚硝基脲和三氮烯；抗生素药诸如蒽环类抗生素、放线菌素和博来霉素；拓扑异构酶II抑制剂诸如表鬼臼毒素(epipodophyllotoxins)；抗代谢药诸如嘌呤和嘧啶类似物和抗叶酸化合物；拓扑异构酶I抑制剂诸如喜树碱(camptothecins)；激素和激素类似物；信号传导途径抑制剂；非受体酪氨酸激酶血管发生抑制剂；免疫治疗剂；促凋亡剂；和细胞周期信号传递抑制剂；其它药剂。

抗微管剂或抗有丝分裂剂是期特异性(phase specific)的药剂，它们通常在细胞周期中的M期或有丝分裂期对肿瘤细胞的微管是有活性的。抗微管剂的实例包括、但不限于：二萜类化合物和长春花生物碱。

从天然来源衍生出的二萜类化合物是期特异性的抗癌剂，认为其在细胞周期中的G2/M期起作用。据信，通过与微管的p-微管蛋白亚基结合，二萜类化合物使微管的p-微管蛋白亚基稳定化。然后使该蛋白的分解受到抑制，有丝分裂停止，接着发生细胞死亡。

二萜类化合物的实例包括、但不限于：紫杉烷类诸如紫杉醇、多西他赛(docetaxel)、larotaxel、ortataxel和tesetaxel。紫杉醇是从太平洋紫杉树Taxusbrevifolia中分离出的天然二萜产物，且在商业上可作为注射溶液

得到。多西他赛是适量(q.v.)紫杉醇的半合成衍生物，其利用天然前体即从欧洲红豆杉树的针叶中提取的10-脱乙酰基-浆果赤霉素(baccatin)III制备。多西他赛在商业上可作为注射溶液

得到。

长春花生物碱是源自长春花属植物的期特异性的抗肿瘤剂。认为长春花生物碱通过特异性地结合微管蛋白而在细胞周期的M期(有丝分裂)起作用。其结果，被结合的微管蛋白分子不能聚合成微管。据信，有丝分裂在中期被停止，随后细胞死亡。长春花生物碱的实例包括、但不限于：长春碱(vinblastine)、长春新碱(vincristine)、长春地辛(vindesine)和长春瑞滨(vinorelbine)。长春碱，长春碱硫酸盐(vincaleukoblastine sulfate)，在商业上可作为注射液得到。长春新碱，长春碱22-氧代-硫酸盐，在商业上可作为

注射液得到。长春瑞滨在商业上可作为长春瑞滨酒石酸盐注射液

得到，是半合成的长春花生物碱衍生物。

铂配位络合物是非期特异性的抗癌剂，其与DNA相互作用。认为铂络合物进入肿瘤细胞，经历水合作用，并与DNA形成链内和链间的交叉连接，导致对肿瘤不利的生物学作用。基于铂的配位络合物包括、但不限于：顺铂(cisplatin)、卡铂(carboplatin)、奈达铂(nedaplatin)、奥沙利铂(oxaliplatin)、沙铂(satraplatin)和(SP-4-3)-(顺式)-氨二氯-[2-甲基吡啶]铂(II)((SP-4-3)-(cis)-amminedichloro-[2-methylpyridine]platinum(II))。顺铂，顺式-二氯二氨络铂(cis-diamminedichloroplatinum)，在商业上可作为

注射液得到。卡铂，二氨[1，1-环丁烷-二羧酸根(2-)-0，0′]合铂(diammine[1，1-cyclobutane-dicarboxylate(2-)-0，0′])，在商业上可作为

注射液得到。

烷化剂通常是非期特异性的药剂，且通常是强亲电体。通常，借助于烷基化作用，通过DNA分子的亲核部分诸如磷酸基、氨基、巯基、羟基、羧基和咪唑，烷化剂与DNA形成共价连接。这种烷基化作用会扰乱核酸功能，导致细胞死亡。烷化剂的实例包括、但不限于：烷基磺酸盐诸如白消安(busulfan)；亚乙基亚胺和甲基三聚氰胺衍生物诸如六甲蜜胺(altretamine)和塞替派(thiotepa)；氮芥诸如苯丁酸氮芥(chlorambucil)、环磷酰胺(cyclophosphamide)、雌莫司汀(estramustine)、异环磷酰胺(ifosfamide)、二氯甲基二乙胺(mechlorethamine)、美法仑(melphalan)和乌拉莫司汀(uramustine)；亚硝基脲诸如卡莫司汀(carmustine)、洛莫司汀(lomustine)和链佐星(streptozocin)；三氮烯和咪唑并四嗪诸如达卡巴嗪(dacarbazine)、丙卡巴肼(procarbazine)、temozolamide和替莫唑胺(temozolomide)。环磷酰胺，2-[二(2-氯乙基)-氨基]四氢-2H-1，3，2-氧氮磷环2-氧化物一水合物(2-[bis(2-chloroethyl)-amino]tetrahydro-2H-1，3，2-oxazaphosphorine 2-oxidemonohydrate)，在商业上可以作为

注射液或片剂得到。美法仑，4-[二(2-氯乙基)氨基]-L-苯丙氨酸(4-[bis(2-chloroethyl)amino]-L-phenylalanine)，在商业上可以作为

注射液或片剂得到。苯丁酸氮芥，4-[二(2-氯乙基)氨基]-苯丁酸(4-[bis(2-chloroethyl)amino]-benzenebutanoic acid)，在商业上可以作为片剂得到。白消安，1，4-丁二醇二甲磺酸酯(1，4-butanedioldimethanesulfonate)，在商业上可以作为

片剂得到。卡莫司汀(1，3-[bis(2-chloroethyl)-1-nitrosourea)，1，3-[二(2-氯乙基)-1-亚硝基脲，在商业上可以作为

单瓶装的冻干物得到，5-(3，3-二甲基-1-三氮烯基)-咪唑-4-羧酰胺(5-(3，3-dimethyl-1-triazeno)-imidazole-4-carboxamide)，在商业上可以作为

单瓶装的物质得到。

抗肿瘤的抗生素是非期特异性的药剂，认为其结合或插入DNA中。这可以导致稳定的DNA复合物或链断裂，从而扰乱核酸的正常功能，导致细胞死亡。抗肿瘤的抗生素药的实例包括、但不限于：蒽环类抗生素诸如柔红霉素(daunorubicin)(包括脂质体柔红霉素)、阿霉素(doxorubicin)(包括脂质体多柔比星)、表柔比星(epirubicin)、伊达比星(idarubicin)和戊柔比星(valrubicin)；链霉菌属(streptomyces)-相关的药剂诸如博来霉素(bleomycin)、放线菌素、普卡霉素(mithramycin)、丝裂霉素(mitomycin)、泊非霉素(porfiromycin)；和米托蒽醌(mitoxantrone)。更生霉素(dactinomycin)，也称作放线菌素D，在商业上可作为

注射形式得到。柔红霉素，(8S-顺式-)-8-乙酰基-10-[(3-氨基-2，3，6-三脱氧-a-L-来苏吡喃型己糖基)氧]-7，8，9，10-四氢-6，8，11-三羟基-1-甲氧基-5，12-萘并萘二酮盐酸盐((8S-cis-)-8-acetyl-10-[(3-amino-2，3，6-trideoxy-a-L-lyxohexopyranosyl)oxy]-7，8，9，10-tetrahydro-6，8，11-trihydroxy-1-methoxy-5，12-naphthacenedionehydrochloride)，在商业上可以作为

脂质体注射形式或

注射剂得到。多柔比星，(8S，10S)-10-[(3-氨基-2，3，6-三脱氧-α-L-来苏吡喃型己糖基)氧]-8-乙醇酰基，7，8，9，10-四氢-6，8，11-三羟基-1-甲氧基-5，12-萘并萘二酮盐酸盐((8S，10S)-10-[(3-amino-2，3，6-trideoxy-α-L-lyxohexopyranosyl)oxy]-8-glycoloyl，7，8，9，10-tetrahydro-6，8，11-trihydroxy-1-methoxy-5，12-naphthacenedionehydrochloride)，在商业上可以作为

或

注射形式得到。博来霉素，是从轮丝链霉菌(Streptomyces verticil/us)菌株分离出的细胞毒性的糖肽抗生素的混合物，在商业上可以作为

得到。

拓扑异构酶II抑制剂包括、但不限于：表鬼臼毒素，它是源自盾叶鬼臼(mandrake)植物的期特异性的抗肿瘤剂。表鬼臼毒素通常如下影响处于细胞周期的S和G2期的细胞：通过与拓扑异构酶II和DNA形成三元络合物，导致DNA链断裂。链断裂积聚，接着细胞死亡。表鬼臼毒素的实例包括、但不限于：依托泊苷(etoposide)、替尼泊苷(teniposide)和安吖啶(amsacrine)。依托泊苷，4′-脱甲基-表鬼臼毒素9[4，6-0-(R)-亚乙基-β-D-吡喃型葡萄糖苷](4′-demethyl-epipodophyllotoxin 9[4，6-0-(R)-ethylidene--D-glucopyranoside])，在商业上可以作为

注射液或胶囊得到，并且常称为VP-16。替尼泊苷，4′-脱甲基-表鬼臼毒素9[4，6-0-(R)-噻吩亚甲基-β-D-吡喃型葡萄糖苷](4′-demethyl-epipodophyllotoxin9[4，6-0-(R)-thenylidene--D-glucopyranoside])，在商业上可以作为

注射液得到，并且常称为VM-26。

抗代谢类抗肿瘤剂是期特异性的抗肿瘤药剂，其如下作用于细胞周期的S期(DNA合成)：通过抑制DNA合成，或者通过抑制嘌呤或嘧啶碱基合成，从而限制DNA合成。因此，S期不能继续下去，接着发生细胞死亡。抗-代谢物包括嘌呤类似物，诸如氟达拉滨(fludarabine)、克拉屈滨(cladribine)、氯代脱氧腺苷(chlorodeoxyadenosine)、氯法拉滨(clofarabine)、巯嘌呤(mercaptopurine)、喷司他丁(pentostatin)、红羟基壬基腺嘌呤(erythrohydroxynonyladenine)、磷酸氟达拉滨(fludarabine phosphate)和硫鸟嘌呤(thioguanine)；嘧啶类似物诸如氟尿嘧啶(fluorouracil)、吉西他滨(gemcitabine)、卡培他滨(capecitabine)、阿糖胞苷(cytarabine)、阿扎胞苷(azacitidine)、依达曲沙(edatrexate)、氮尿苷(floxuridine)和曲沙他滨(troxacitabine)；抗叶酸剂，诸如甲氨蝶呤、培美曲塞、雷替曲塞和三甲曲沙。阿糖胞苷，4-氨基-1-p-D-阿拉伯呋喃糖基-2(1H)-嘧啶酮(4-amino-1-p-D-arabinofuranosyl-2(1H)-pyrimidinone)，在商业上可以作为

得到，并且常称为Ara-C。巯基嘌呤，1，7-二氢-6H-嘌呤-6-硫酮一水合物(1，7-dihydro-6H-purine-6-thione monohydrate)，在商业上可以作为

得到。硫鸟嘌呤，2-氨基-1，7-二氢-6H-嘌呤-6-硫酮(2-amino-1，7-dihydro-6H-purine-6-thione)，在商业上可以作为得到。吉西他滨，2′-脱氧-2′，2′-二氟胞苷一盐酸盐(2′-deoxy-2′，2′-difluorocytidinemonohydrochloride)(p-异构体)，在商业上可以作为得到。

拓扑异构酶I抑制剂包括喜树碱和喜树碱衍生物。拓扑异构酶I抑制剂的实例包括、但不限于：喜树碱、托泊替康(topotecan)、伊立替康(irinotecan)、卢比替康(rubitecan)、贝洛替康(belotecan)和7-(4-甲基哌嗪子基-亚甲基)-10，11-亚乙基二氧-喜树碱(7-(4-methylpiperazino-methylene)-10，11-ethylenedioxy-camptothecin)的各种旋光形式(即，(R)、(S)或(R，S))，如在美国专利号6,063,923、5,342,947、5,559,235、5,491,237和1997年11月24日提交的未决的美国专利申请号08/977,217中所述。盐酸伊立替康，(4S)-4，11-二乙基-4-羟基-9-[(4-哌啶子基哌啶子基)-羰基氧基]-1H-吡喃并[3′，4′，6，7]吲嗪并[1，2-b]喹啉-3，14(4H，12H)-二酮盐酸盐((4S)-4，11-diethyl-4-hydroxy-9-[(4-piperidinopiperidino)-carbonyloxy]-1H-pyrano[3′，4′，6，7]indolizino[1，2-b]quinoline-3，14(4H，12H)-dionehydrochloride)，在商业上可以作为

注射液得到。伊立替康是喜树碱的衍生物，其与其代谢物8N-38一起结合在拓扑异构酶I-DNA络合物上。盐酸托泊替康，(S)-10-[(二甲氨基)甲基]-4-乙基-4，9-二羟基-1H-吡喃并[3′，4′，6，7]吲嗪并[1，2-b]喹啉-3，14-(4H，12H)-二酮一盐酸盐((S)-10-[(dimethylamino)methyl]-4-ethyl-4，9-dihydroxy-1H-pyrano[3′，4′，6，7]indolizino[1，2-b]quinoline-3，14-(4H，12H)-dione monohydrochloride)，在商业上可以作为

注射液得到。

激素和激素类似物是可用于治疗癌症的化合物，在所述癌症中，在激素与癌的生长和/或缺乏生长之间存在关联。可用于治疗癌症的激素和激素类似物的实例包括、但不限于：雄激素诸如氟甲睾酮(fluoxymesterone)和睾内酯(testolactone)；抗雄激素诸如比卡鲁胺(bicalutamide)、环丙孕酮(cyproterone)、氟他胺(flutamide)和尼鲁米特(nilutamide)；芳香酶抑制剂诸如氨鲁米特(aminoglutethimide)、阿那曲唑(anastrozole)、依西美坦(exemestane)、福美坦(formestane)、伏氯唑(vorazole)和来曲唑(letrozole)；皮质甾类诸如地塞米松(dexamethasone)、泼尼松(prednisone)和泼尼松龙(prednisolone)；雌激素诸如己烯雌酚(diethylstilbestrol)；抗雌激素诸如氟维司群(fulvestrant)、雷洛昔芬(raloxifene)、他莫昔芬(tamoxifen)、toremifine、屈洛昔芬(droloxifene)和iodoxyfene，以及选择性的雌激素受体调节剂(SERMS)，诸如在美国专利号5,681,835，5,877,219，和6,207,716中所述的那些；5α-还原酶诸如非那雄胺(finasteride)和度他雄胺(dutasteride)；促性腺素-释放激素(GnRH)和它们的类似物，它们刺激促黄体激素(LH)和/或卵泡刺激激素(FSH)的释放，例如LHRH激动剂和拮抗剂诸如布舍瑞林(buserelin)、戈舍瑞林(goserelin)、亮丙瑞林(leuprolide)和曲普瑞林(triptorelin)；孕激素诸如醋酸甲羟孕酮(medroxyprogesterone acetate)和乙酸甲地孕酮(megestrol acetate)：和甲状腺激素诸如左甲状腺素(levothyroxine)和碘塞罗宁(liothyronine)。

信号传导途径抑制剂是阻断或抑制引起细胞内变化(诸如细胞增殖或分化)的化学过程的那些抑制剂。可用于本发明的信号传导抑制剂包括，例如，受体酪氨酸激酶、非受体酪氨酸激酶、SH2/SH3结构域阻断剂、丝氨酸/苏氨酸激酶、磷脂酰肌醇-3激酶、肌醇信号传递和Ras癌基因的抑制剂。

若干蛋白酪氨酸激酶催化细胞生长的调节中所涉及的不同蛋白的特定酪氨酰残基的磷酸化。这样的蛋白酪氨酸激酶可以大致地分类为受体或非受体激酶。受体酪氨酸激酶是跨膜蛋白，其具有胞外配体结合域、跨膜域和酪氨酸激酶域。受体酪氨酸激酶参与细胞生长的调节，有时称为生长因子受体。

已经显示，许多这样的激酶的不适当的或失控的活化，如过度表达或突变，导致失控的细胞生长。因此，这些激酶的异常活性已经与恶性组织生长相关联。因此，这些激酶的抑制剂可提供癌症治疗方法。

生长因子受体包括，例如，表皮生长因子受体(EGFr)、血小板衍生的生长因子受体(PDGFr)、erbB2、erbB4、血管内皮生长因子受体(VEGFr)、具有免疫球蛋白-样和表皮生长因子同源域(TIE-2)的酪氨酸激酶、胰岛素生长因子-I(IGFI)受体、巨噬细胞集落刺激因子(cfms)、BTK、ckit、cmet、成纤维细胞生长因子(FGF)受体、Trk受体(TrkA、TrkB和TrkC)、ephrin(eph)受体、以及RET原癌基因。

若干生长受体的抑制剂正在开发中，包括配体拮抗剂、抗体、酪氨酸激酶抑制剂和反义寡核苷酸。生长因子受体以及抑制生长因子受体功能的药剂，描述在：例如，Kath，John C.，Exp.Opin.Ther.Patents(2000)10(6)：803-818；Shawver等人，Drug Discov.Today(1997)，2(2)：50-63：和Lofts，F.J.等人，“Growth factor receptors as targets”，New Molecular Targets for CancerChemotherapy，Workman，Paul和Kerr，David编，CRC press 1994，London。受体酪氨酸激酶抑制剂的具体实例包括、但不限于：舒尼替尼(sunitinib)、厄洛替尼(erlotinib)、吉非替尼(gefitinib)和伊马替尼(imatinib)。

不是生长因子受体激酶的酪氨酸激酶被称为非受体酪氨酸激酶。可用于本发明中的作为抗癌药靶标或潜在靶标的非受体酪氨酸激酶包括cSrc、Lck、Fyn、Yes、Jak、cAbl、FAK(粘着斑激酶(focal adhesion kinase))/Brutons酪氨酸激酶和Bcr-Abl。这些非受体激酶和抑制非受体酪氨酸激酶功能的药剂，描述在：Sinh，S.和Corey，S.J.，J.Hematotherapy & Stem Cell Res.(1999)8(5)：465-80：和Bolen，J.B.，Brugge，J.S.，Annual Review of Immunology.(1997)15：371-404。

SH2/SH3域阻断剂是在多种酶或接头蛋白中破坏SH2或SH3域结合的药剂，所述酶或衔接蛋白包括PI3-K p85亚基、Src家族激酶、接头分子(Shc、Crk、Nck、Grb2)及Ras-GAP。有关SH2/SH3结构域作为抗癌药物靶标的论述，参见Smithgall，T.E.，J.Pharmacol.Toxicol.Methods.(1995)，34(3)：125-32。丝氨酸/苏氨酸激酶的抑制剂包括MAP激酶级联阻断剂，其包括Raf激酶(rafk)、促分裂原或胞外调节的激酶(MEK)及包外调节的激酶(ERK)的阻断剂；以及蛋白激酶C家族成员阻断剂，其包括PKC(α、β、γ、ε、μ、λ、ι、ζ)、IkB激酶家族(IKKa、IKKb)、PKB家族激酶、AKT激酶家族成员及TGFβ受体激酶的阻断剂。有关这种丝氨酸/苏氨酸激酶及其抑制剂的描述，参见：Yamamoto，T.，Taya，S.，Kaibuchi，K.，J. Biochemistry.(1999)126(5)：799-803；Brodt，P，Samani，A，& Navab，R，Biochem.Pharmacol.(2000)60：1101-1107；Massague，J.，Weis-Garcia，F.，Cancer Surv.(1996)27：41-64；Philip，P.A，和Harris，AL，Cancer Treat.Res.(1995)78：3-27；Lackey，K.等人Bioorg.Med. Chem.Letters，(2000)10(3)：223-226；美国专利号6,268,391：和Martinez-Lacaci，I.，等人，Int.J. Cancer(2000)，88(1)：44-52。在本发明中还可以使用磷酯酰肌醇-3激酶家族成员的抑制剂，包括PI3-激酶、ATM、DNA-PK和Ku的阻断剂。有关这类激酶的讨论，参见：Abraham，RT.Current Opin.Immunol.(1996)，8(3)：412-8；Canman，C.E.，Lim，D.S.，Oncogene(1998)17(25)：3301-8；Jackson，S.P.，Int.J. Biochem.Cell Biol.(1997)29(7)：935-8：和Zhong，H.等人，Cancer Res.(2000)60(6)：1541-5。在本发明中还可以使用肌醇(Myoinositol)信号传递抑制剂，诸如磷脂酶C阻断剂和肌醇类似物。这种信号抑制剂描述在：Powis，G.，和Kozikowski A，(1994)NEWMOLECULAR TARGETS FOR CANCER CHEMOTHERAPY，Paul Workman和DavidKerr编，CRC Press 1994，London。

另一组信号传导途径抑制剂是Ras癌基因的抑制剂。这类抑制剂包括法呢基转移酶、香叶基-香叶基转移酶和CAAX蛋白酶的抑制剂，以及反义寡核苷酸、核酶和免疫疗法。已经显示，这类抑制剂会阻断包含野生型突变体ras的细胞中的ras活化，因而可充当抗增殖剂。有关Ras癌基因的抑制的讨论，参见：Scharovsky，O.G.，Rozados，V.R，Gervasoni，SI，Matar，P.，J. Biomed. Sci.(2000)7(4)：292-8；Ashby，M.N.，Curr.Opin.Lipidol.(1998)9(2)：99-102：和Oliff，A.，Biochim.Biophys.Acta，(1999)1423(3)：C19-30。

如上所述，受体激酶配体结合的抗体拮抗剂也可以充当信号传导抑制剂。该组信号传导途径抑制剂包括使用针对受体酪氨酸激酶的胞外配体结合域人源化的抗体。例如，Imclone C225EGFR特异性的抗体(参见Green，M.C.等人，Cancer Treat.Rev.，(2000)26(4)：269-286)；

erbB2抗体(参见Stern，DF，Breast Cancer Res.(2000)2(3)：176-183)；和2CB VEGFR2特异性的抗体(参见Brekken，R.A.等人，Cancer Res.(2000)60(18)：5117-24)。

非受体激酶血管发生抑制剂也可用于本发明。与VEGFR和TIE2有关的血管发生抑制剂，已在上面的信号传导抑制剂中讨论过(二者的受体均为受体酪氨酸激酶)。血管发生通常与erbB2/EGFR信号传递相关联，因为已经显示，erbB2和EGFR的抑制剂会抑制血管发生，主要是VEGF表达。因而，erbB2/EGFR抑制剂与血管发生抑制剂的组合是合理的。因此，非受体酪氨酸激酶抑制剂可与本发明的EGFR/erbB2抑制剂组合使用。例如，也可以证实，抗-VEGF抗体(其不识别VEGFR(受体酪氨酸激酶)，但结合配体)、整联蛋白(αv β3)的小分子抑制剂(其抑制血管发生)、内皮他丁(endostatin)和血管他丁(angiostatin)(非-RTK)可与公开的erb家族抑制剂组合使用(参见Bruns，CJ等人，Cancer Res.(2000)，60(11)：2926-2935；Schreiber AB，Winkler ME，&Derynck R.，Science(1986)232(4755)：1250-53；Yen L.等人，Oncogene(2000)19(31)：3460-9)。

在免疫疗法中使用的药剂也可与式(I)-(V)的化合物组合使用。存在大量的免疫策略，以产生针对erbB2或EGFR的免疫应答。这些策略一般属于肿瘤疫苗接种领域。通过用小分子抑制剂组合地抑制erbB2/EGFR信号传递途径，可以大大地增强免疫方法的疗效。有关针对erbB2/EGFR的免疫/肿瘤疫苗接种的方法的讨论，参见Reilly RT，等人，Cancer Res.(2000)60(13)：3569-76：和Chen Y，等人，Cancer Res.(1998)58(9)：1965-71。

用于促细胞凋亡疗法的药剂(例如，bcl-2反义寡核苷酸)也可用于本发明的组合中。Bcl-2家族蛋白的成员阻断细胞凋亡。因此，bcl-2的上调已经与药物抗性相关联。研究表明，表皮生长因子(EGF)会刺激bcl-2家族的抗细胞凋亡成员。因此，用于下调肿瘤中bcl-2的表达的策略已经表现出临床益处，现在正处于II/III期试验中，即Genta′s G3139bcl-2反义寡核苷酸。有关这种利用bcl-2的反义寡核苷酸策略的促细胞凋亡策略的讨论，参见JS，等人，J.Clin.Oncol.(2000)18(9)：1812-23：和Kitada S，等人Antisense Res.Dev.(1994)4(2)：71-9。

细胞周期信号传递抑制剂抑制在细胞周期控制中所涉及的分子。称作周期蛋白依赖性蛋白激酶(CDK)的蛋白激酶家族，以及它们与称作细胞周期蛋白的蛋白家族的相互作用，控制真核细胞周期的发展。对于细胞周期的正常进展而言，不同细胞周期蛋白/CDK复合物的协同活化和灭活是必需的。若干细胞周期信号传递抑制剂正在开发中。例如，包括CDK2、CDK4和CDK6在内的周期蛋白依赖性蛋白激酶及它们的抑制剂的实例，可参见例如，RosaniaGR & Chang Y-T.，Exp.Opin.Ther.Patents(2000)10(2)：215-30。

其它分子靶向的药剂包括FKBP结合剂，诸如免疫抑制性的大环内酯抗生素雷帕霉素(rapamycin)；基因治疗剂、反义治疗剂和基因表达调节剂诸如类视黄醇类(retinoids)和rexinoids，例如阿达帕林(adapalene)、贝沙罗汀(bexarotene)、反式-视黄酸(trans-retinoic acid)、9-顺式视黄酸(9-cisretinoic acid)和N-(4羟基苯基)视黄酰胺(N-(4 hydroxyphenyl)retinamide)；表型-指导的治疗剂，包括：单克隆抗体诸如阿仑珠单抗(alemtuzumab)、贝伐单抗(bevacizumab)、西妥昔单抗(cetuximab)、替伊莫单抗(ibritumomab tiuxetan)、利妥昔单抗(rituximab)和曲妥单抗(trastuzumab)；免疫毒素诸如吉姆单抗奥佐米星(gemtuzumab ozogamicin)、放射免疫缀合物诸如131-托西莫单抗(131-tositumomab)；和癌症疫苗。

各种药剂包括六甲蜜胺(altretamine)、三氧化二砷、硝酸镓、羟基脲、左旋咪唑(levamisole)、米托坦(mitotane)、奥曲肽(octreotide)、丙卡巴肼(procarbazine)、舒拉明(suramin)、沙利度胺(thalidomide)、光动力化合物诸如甲氧沙林(methoxsalen)和卟菲尔钠(sodium porfimer)和蛋白酶体抑制剂诸如硼替佐米(bortezomib)。

生物治疗剂包括：干扰素诸如干扰素-u2a和干扰素-u2b，和白介素诸如阿地白介素(aldesleukin)，地尼白介素2(denileukin diftitox)和奥普瑞白介素(oprelvekin)。

除了旨在针对癌细胞起作用的这些抗癌剂以外，也涵盖包括使用保护剂或辅助剂的联合治疗，所述保护剂或辅助剂包括：细胞保护剂诸如氨磷汀(armifostine)、右雷佐生(dexrazonxane)和美司钠(mesna)、膦酸酯诸如帕玛二磷酸(parmidronate)和唑来膦酸(zoledronic acid)、和刺激因子诸如红细胞生成素(epoetin)、达贝泊汀(darbeopetin)、非格司亭(filgrastim)、PEG-非格司亭(PEG-filgrastim)和沙格司亭(sargramostim)。

合成本发明化合物的方法

通过本领域已知的方法，包括在国际专利申请号PCT/US2007/077464中公开的方法，可以合成本发明的化合物。下面提供了代表性的合成方法。

方法1

用浓硫酸(5mL)处理在乙醇(100mL)中的3-溴-4-吡啶羧酸(3.0g，14.9mmol)。

使混合物达到回流，在此时，所有物质进入溶液中。回流12小时以后，LCMS指示反应结束。将反应混合物冷却至室温，并在旋转蒸发器上浓缩至最初体积的1/3。然后用250mL乙酸乙酯稀释混合物，并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤2次。在旋转蒸发器上浓缩，产生3.25g乙基酯，为微黄色油，其对于以后的化学转化而言是足够纯的。LCMS(ESI)216.2(M+1)⁺。

在烧瓶中合并3-溴-4-吡啶羧酸乙酯(1.15g，5.0mmol)、2-氨基-4-甲氧基羰基-苯基硼酸(1.04g，4.5mmol)、醋酸钠(1.64g，20mmol)、1，1’-二(二苯基膦基)二茂铁氯化钯(II)(与二氯甲烷络合)(182mg，0.25mmol)和二甲基甲酰胺(7.5mL)。将烧瓶抽真空，充入氮气，如此进行2次，并在搅拌下加热至125℃且保持12小时，或直到LCMS指示没有任何原料。将混合物冷却至室温，加入水(100mL)，以形成褐色沉淀物。过滤沉淀物，得到637mg 5-氧代-5，6-二氢苯并[c][2，6]二氮杂萘-8-羧酸甲酯(methyl5-oxo-5，6-dihydrobenzo[c][2，6]naphthyridine-8-carboxylate)。LCMS(ESI)255.4(M+1)⁺。

将5-氧代-5，6-二氢苯并[c][2，6]二氮杂萘-8-羧酸甲酯(200mg，0.787mmol)与磷酰氯(1mL)合并，并加热至回流。2小时后，LCMS指示没有任何原料。在减压下去除挥发物。将残余物吸收到二氯甲烷(50mL)中，并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤2次。有机相经硫酸钠干燥，在旋转蒸发器上浓缩，得到5-氯苯并[c][2，6]二氮杂萘-8-羧酸甲酯(140mg)，为淡灰色固体。LCMS(ESI)273.3(M+1)⁺。

在微波管中，将5-氯苯并[c][2，6]二氮杂萘-8-羧酸甲酯(20mg，0.074mmol)与苯胺(60mg，0.65mmol)和N-甲基吡咯烷酮(0.2mL)合并，将混合物加热至120℃且保持10分钟，在此时，LCMS指示反应结束，因为指示没有任何原料。然后通过HPLC纯化混合物，得到酯(22mg)，或者用6N氢氧化钠处理它，得到酸(19mg)。LCMS(ESI)316.3(M+1)⁺。¹HNMR(400MHz，CD₃OD)10.17(1H，s)，9.67(1H，br)，8.99(1H，d，5.9Hz)，8.83(1H，d，8.6Hz)，8.62(1H，d，5.9Hz)，8.24(1H，d，1.6Hz)，8.04(1H，s)，8.02(1H，s)，7.93(1H，dd，8.2，1.6Hz)，7.43(1H，d，7.4Hz)，7.41(1H，d，7.4Hz)，7.10(1H，m)。

在烧瓶中，将5-氯苯并[c][2，6]二氮杂萘-8-羧酸甲酯(232mg，0.853mmol)与间-氯苯胺(217mg，1.71mmol)和N-甲基吡咯烷酮(1mL)合并，将混合物加热至80℃且保持2小时，在此时，LCMS指示反应结束，因为指示没有任何原料。将混合物溶解于CH₂Cl₂中，用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，经Na₂SO₄干燥。通过快速色谱法(SiO₂，EtOAc/己烷的1∶1-9∶1梯度)纯化该物质，得到酯。将该物质溶解于甲醇和6N NaOH水溶液中，将混合物在50℃搅拌30分钟。在真空中去除挥发物。使用己烷和乙酸乙酯的混合物，从醋酸/THF/甲醇研磨残余物。过滤，并干燥，得到147mg 5-(3-氯苯基氨基)苯并[c][2，6]二氮杂萘-8-羧酸。LCMS(ESI)350(M+1)⁺。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δ10.21(s，1H)，9.72(br s，1H)，9.02(d，J＝5.6，1H)，8.89(d，J＝8.8，1H)，8.62(d，J＝5.6，1H)，8.31(br s，1H)，8.28(d，J＝1.6，1H)，8.10(br d，J＝8，1H)，7.99(dd，J＝2，J＝8.4，1H)，7.46(t，J＝8.0，1H)，7.16(br d，J＝7.2，1H)ppm。

方法2

将5-溴嘧啶-4-羧酸(根据在美国专利4，110,450中所述的方法制备)(1.0当量，6.14g，30.2mmol)悬浮于CH₂Cl₂(100ml)中。加入草酰氯(1.1当量，2.9ml，33.0mmol)，随后加入2滴DMF。将混合物在室温搅拌过夜，在真空中去除挥发物。将残余物吸收到MeOH(50ml)中，并加热。在真空中蒸发MeOH以后，将化合物溶解于CH₂Cl₂中，并装载于预填充的硅胶柱。使用在己烷中的20％乙酸乙酯，洗脱该物质。蒸发溶剂，得到5-溴嘧啶-4-羧酸甲酯，为浅橙色结晶固体(2.54g，39％产率)。LCMS(ES)：95％纯度，m/z 217[M]⁺；219[M+2]⁺；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ4.04(s，3H)，9.02(s，1H)，9.21(s，1H)ppm。

方法3

将醋酸钠(4.0当量，1.92g，23.41mmol)和1，1’-二(二苯基膦基)二茂铁氯化钯(II)(与二氯甲烷络合)(0.05当量，214mg，0.29mmol)加入到5-溴嘧啶-4-甲酸甲酯(1.0当量，1.27g，5.85mmol)和2-氨基-4-(甲氧基羰基)苯基硼酸盐酸盐(1.0当量，1.35g，5.85mmol)在无水DMF(10ml)中的混合物中。在氮气气氛下在120℃搅拌该混合物18小时。加入水和盐水，滤出形成的固体杂质。用CH₂Cl₂(4x)萃取该物质，合并的萃取物经Na₂SO₄干燥。蒸发CH₂Cl₂以后，通过在真空中加热残余物，蒸发剩余的DMF。在CH₂Cl₂中研磨形成的固体，过滤，并干燥，得到5-氧代-5，6-二氢嘧啶并[4，5-c]喹啉-8-羧酸甲酯，为浅褐色固体(127mg，8.5％产率)。LCMS(ES)：＞80％纯度，m/z 256[M+1]⁺；¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ3.79(s，3H)，7.81(d，J＝8.0，1H)，8.68(d，J＝8.8，1H)，9.49(s，1H)，10.19(s，1H)，12.37(s，1H)ppm。

方法4

在小瓶中，将5-氧代-5，6-二氢嘧啶并[4，5-c]喹啉-8-羧酸甲酯(1.0当量，151mg，0.59mmol)在甲苯(1ml)中与DIEA(1.5当量，155ul，0.89mmol)和POCl₃(5当量，270ul，3.0mmol)混合。在120℃搅拌该混合物1小时，并冷却至室温。加入冰和水以后，用CH₂Cl₂(4x)萃取化合物。在Na₂SO₄上过滤溶液，通过硅藻土垫过滤。蒸发挥发物以后，在乙酸乙酯和己烷的混合物中研磨该物质，过滤，并干燥，得到5-氯嘧啶并[4，5-c]喹啉-8-羧酸甲酯，为浅褐色松散的固体(115mg，71％产率)。LCMS(ES)：95％纯度，m/z 274[M+1]⁺.¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ3.96(s，3H)，8.37(dd，J＝1.6，J＝8.4，1H)，8.60(d，J＝1.6，1H)，9.15(d，J＝8.8，1H)，9.74(s，1H)，10.61(s，1H)ppm

方法5

在NMP(0.1ml)中，混合5-氯嘧啶并[4，5-c]喹啉-8-羧酸甲酯(10mg)与3，5-二氟苯胺(100mg)。在微波下在120℃加热混合物10分钟。加入水，用CH₂Cl₂萃取该物质。去除溶剂。在乙酸乙酯和己烷的混合物中研磨，过滤，得到5-(3，5-二氟苯基氨基)嘧啶并[4，5-c]喹啉-8-羧酸甲酯。将该物质悬浮于THF和MeOH的1∶1混合物(2ml)中，加入5N氢氧化锂水溶液。将混合物在室温剧烈搅拌5小时。加入水和6N盐酸，以诱导预期的物质沉淀。过滤固体，用水洗涤，干燥，并悬浮于MeOH中。过滤，并干燥，得到5-(3，5-二氟苯基氨基)嘧啶并[4，5-c]喹啉-8-羧酸，为黄色固体(4mg，31％产率)。LCMS(ES)：95％纯度，m/z 353[M+1]⁺.¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ6.90(br t，J＝9.6，1H)，8.02(dd，J＝1.6，J＝8.0，1H)，8.18(br d，J＝10.8，2H)，8.34(d，J＝1.6，1H)，8.86(d，J＝8.4，1H)，9.65(s，1H)，10.40(s，1H)，10.44(s，1H)ppm。

方法6

使用相同的方法，从5-氯嘧啶并[4，5-c]喹啉-8-羧酸甲酯和3-乙炔基苯胺开始，制备5-(3-乙炔基苯基氨基)嘧啶并[4，5-c]喹啉-8-羧酸。LCMS(ES)：95％纯度，m/z 341[M+1]⁺.¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ4.20(s，1H)，7.19(d，J＝7.6，1H)，7.42(t，J＝8.0，1H)，7.99(dd，J＝1.6，J＝8.4，1H)，8.30(d，J＝1.6，1H)，8.34(dd，J＝1.6，J＝8.0，1H)，8.49(br s，1H)，8.85(d，J＝8.8，1H)，9.65(s，1H)，10.11(s，1H)，10.43(s，1H)ppm。

方法7

根据在方法2中用于制备5-溴嘧啶-4-羧酸甲酯的步骤，制备5-溴-2-(甲硫基)嘧啶-4-羧酸甲酯。LCMS(ES)：＞90％纯度，m/z 263[M]⁺，265[M+2]⁺；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ2.59(s，3H)，4.00(s，3H)，8.71(s，1H)ppm。

方法8

将5-溴-2-(甲硫基)嘧啶-4-羧酸甲酯(1.0当量，661mg，2.52mmol)溶解于CH₂Cl₂(10ml)中。加入间-氯过苯甲酸(m-cpba，77％纯级，2.5当量，1.42g，6.34mmol)，将混合物在室温搅拌1小时。向所得的悬浮液中，加入无水THF(10ml)、盐酸甲胺(10当量，1.7g，25.18mmol)和DIEA(10当量，4.3ml，24.69mmol)，将混合物在室温搅拌过夜。在真空中去除溶剂，然后加入CH₂Cl₂和饱和碳酸氢钠水溶液。倾析两相，进行另外2次CH₂Cl₂萃取。合并的萃取物经Na₂SO₄干燥，蒸发溶剂。通过硅胶上的快速色谱法(20-30％乙酸乙酯在己烷中)进行纯化，得到5-溴-2-(甲氨基)嘧啶-4-羧酸甲酯，为灰白色固体(461mg，75％产率)。LCMS(ES)：＞95％纯度，m/z 246[M]⁺，248[M+2]⁺。

方法9

将醋酸钠(3.0当量，240mg，2.93mmol)和1，1’-二(二苯基膦基)二茂铁氯化钯(II)(与二氯甲烷络合)(0.05当量，36mg，0.049mmol)加入到5-溴-2-(甲氨基)嘧啶-4-羧酸甲酯(1.0当量，240mg，0.975mmol)和2-氨基-4-(甲氧基羰基)苯基硼酸盐酸盐(1.0当量，226mg，0.98mmol)在无水DMF(2ml)中的混合物中。在微波下在120℃加热混合物10分钟。加入水以诱导预期的化合物沉淀，将其过滤，并干燥。3-(甲氨基)-5-氧代-5，6-二氢嘧啶并[4，5-c]喹啉-8-羧酸甲酯(57mg，21％产率)。LCMS(ES)：＞80％纯度，m/z 285[M+1]⁺。

方法10

使用在方法3和4中所述的方法，从3-(甲氨基)-5-氧代-5，6-二氢嘧啶并[4，5-c]喹啉-8-羧酸甲酯开始，制备3-(甲氨基)-5-(苯基氨基)嘧啶并[4，5-c]喹啉-8-羧酸。通过快速色谱法，纯化最终的产物，并分离为黄色固体(0.35mg)。LCMS(ES)：＞95％纯度，m/z 346[M+1]⁺。

方法11

在微波管中，在无水DMF(2ml)中混合5-溴-2-(甲硫基)嘧啶-4-羧酸甲酯(1.0当量，274mg，1.18mmol)、2-氨基-4-(甲氧基羰基)苯基硼酸盐酸盐(1.2当量，329mg，1.42mmol)和醋酸钠(3.0当量，291mg，3.55mmol)。通过在该溶液中用氮气鼓泡10分钟，使混合物脱气，然后在微波下在120℃加热反应物30分钟。冷却后，预期的物质从NMP沉淀出来。过滤固体，悬浮于水中，过滤，并干燥。在AcOEt中研磨该物质，过滤，得到黄色固体。使用相同量的物质，重复相同的操作9次，得到3-(甲硫基)-5-氧代-5，6-二氢嘧啶并[4，5-c]喹啉-8-羧酸甲酯(283mg，10％产率)。LCMS(ES)：＞95％纯度，m/z 302[M+1]⁺，¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ2.71(s，3H)，3.89(s，3H)，7.80(dd，J＝1.6，J＝8.4，1H)，7.97(d，J＝1.6，1H)，8.59(d，J＝8.8，1H)，9.98(s，1H)，12.34(s，1H)ppm。

方法12

将3-(甲硫基)-5-氧代-5，6-二氢嘧啶并[4，5-c]喹啉-8-羧酸甲酯(1.0当量，279mg，0.926mmol)悬浮于甲苯(2ml)中。加入POCl₃(2ml)和DIEA(0.5ml)，将混合物在120℃搅拌5小时。在真空中去除挥发物，加入CH₂Cl₂。用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤有机相，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥。通过硅藻土垫过滤溶液，在真空中去除溶剂。在己烷和AcOEt中研磨该物质，过滤，并干燥，得到5-氯-3-(甲硫基)嘧啶并[4，5-c]喹啉-8-羧酸甲酯，为浅褐色固体(184mg，63％产率)。LCMS(ES)：＞95％纯度，m/z 320[M+1]⁺，322[M+3]⁺。

方法13

在NMP(1ml)中，混合5-氯-3-(甲硫基)嘧啶并[4，5-c]喹啉-8-羧酸甲酯(1.0当量，182mg，0.57mmol)和苯胺(0.5ml)。在微波下在120℃加热混合物10分钟。加入水，过滤所得的固体，并干燥。在EtOAc和己烷中研磨化合物，并过滤，得到3-(甲硫基)-5-(苯基氨基)嘧啶并[4，5-c]喹啉-8-羧酸甲酯，为黄色固体。LCMS(ES)：＞95％纯度，m/z 377[M+1]⁺。将该物质悬浮于CH₂Cl₂(4ml)中，以小份加入间-氯过苯甲酸(77％纯度，2.5当量，165mg，0.737mmol)。1小时后，加入额外量(100mg)的间-氯过苯甲酸(mcpba)，将混合物搅拌1.5小时。加入更多的CH₂Cl₂以后，用水(4x)洗涤有机相，经Na₂SO₄干燥，通过硅胶垫过滤溶液，用MeOH/CH₂Cl₂混合物洗脱。蒸发溶剂后，分离出3-(甲磺酰基)-5-(苯基氨基)嘧啶并[4，5-c]喹啉-8-羧酸甲酯，为黄色固体(166mg，72％产率)。LCMS(ES)：＞95％纯度，m/z 409[M+1]⁺，¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ3.77(s，3H)，3.93(s，3H)，7.15(t，J＝7.2，1H)，7.45(t，J＝7.6，2H)，7.99(dd，J＝2.0，J＝8.4，1H)，8.16(d，J＝7.6，2H)，8.28(d，J＝2.0，1H)，8.89(d，J＝8.8，1H)，9.76(s，1H)，10.61(s，1H)ppm。

方法14

在密闭的小瓶中，在DMF(1ml)中将3-(甲磺酰基)-5-(苯基氨基)嘧啶并[4，5-c]喹啉-8-羧酸甲酯(1.0当量，62mg，0.152mmol)与盐酸甲胺(100mg)、DIEA(260ul)混合。在60℃搅拌该混合物40分钟。加入水以诱导3-(甲氨基)-5-(苯基氨基)嘧啶并[4，5-c]喹啉-8-羧酸甲酯沉淀，通过过滤进行分离。将该物质悬浮于THF、MeOH和水的1∶1∶1混合物(4ml)中，在有LiOH(200mg)存在下在60℃剧烈搅拌1.5小时。加入水和HCl水溶液，并调至pH＝1。过滤固体，干燥，并在AcOEt/己烷中研磨，得到3-(甲氨基)-5-(苯基氨基)嘧啶并[4，5-c]喹啉-8-羧酸，为黄色固体(40mg，74％产率)。LCMS(ES)：＞95％纯度，m/z 346[M+1]⁺。

可以使用其它胺(诸如环丙胺)替代甲胺，可以使用被取代的苯胺(诸如3-(三氟甲基)苯胺)替代苯胺，得到化合物，诸如本文所述的式(2)化合物。化合物(2)的合成会产生由预期的LC-MS来表征的产物。

提供下面的实施例，来说明而不是限制本发明。

药代动力学性质的评价

在图中指示的剂量，在静脉内(IV)推注或口服(PO)给药化合物K以后，在3个物种中研究了药物的药代动力学性质。在预定的时间收集血液样品，并分离血浆。从在给药后5分钟、15分钟和30分钟和1小时、2小时、4小时、8小时和24小时收集的血液样品，分离出血浆。

通过下述的LC/MS/MS方法，定量药物水平。对于静脉内给药，应用非隔室型药代动力学分析(Noncompartmental pharmacokinetic analysis)。使用线性梯形法则来计算AUC(0-24)。分别使用最后3个和前3个数据点，计算末端t_1/2和C₀。

使用Quattro Micro LC/MS/MS仪器，以MRM检测模式，使用内部标准品(IS)，进行生物分析。简言之，制备15μL血浆样品用于分析，使用120μL乙腈来沉淀蛋白。将上清液转移进96孔板中，使用Phenomenex Polar-RPHPLC柱，进行LC-MS/MS分析。流动相是10mM NH₄HCO₃水溶液(溶液-A)和10mM NH₄HCO₃甲醇溶液(溶液-B)。最初，用25％溶液-B平衡柱，随后用100％溶液B平衡5分钟。该方法具有1-10,000ng/mL的动态范围。根据生物分析样品列表，使用2个定标试验(bracketing)校正曲线，以分批模式进行分析物的定量。

^a所有静脉内实验使用25mM磷酸钠缓冲液作为媒介物

^b啮齿类动物的口服给药使用25mM磷酸盐缓冲液作为媒介物

^c狗的口服给药使用填充的胶囊

^d  这些实验使用不同批次的化合物K

实施例1

化合物1的药代动力学参数

使用与实施例1中的那些类似的方法，在小鼠中评估了化合物1的药代动力学性能。在下表(表2)中提供了结果的总结。

表2：

PK参数	IV	PO	单位
				剂量	5.4	10.8	mg/kg
AUC(0-8h)	11197.0	1052.9
				AUC(0-24h)	15305.3	2213.4	ng.h.ml-1
AUC(0-Inf)	17029.4	3756.2	ng.h.ml-1
				Cmax-obs	21846.1	800.0	ng/mL
Cp0-exp	29442.03	N/A	ng/mL
				Tmax	N/A	0.25	小时
Kel	0.0678	0.0323	小时-1

PK参数	IV	PO	单位
				t 1/2	10.22	21.47	小时
Vd	4.674	N/A	L/kg
				CLs	0.317	N/A	L/kg/小时
F(0-24h)	N/A	7.2	％
				F(0-Inf)	N/A	11.0	％

实施例2

在持续性疼痛鼠模型中疼痛的抑制

使用福尔马林-诱导的持续性疼痛，在疼痛缓解模型中，测试了化合物K和(1)。参见Hunskaar，等人，“The formalin test in mice：Dissociation betweeninflammatory and non-inflammatory pain，”Pain，vol.30，103-114(1987)；Saddi，等人，“The formalin test in the mouse：a parametric analysis of scoringproperties，”Pain，vol.89，53-63(2000)。根据国际疼痛研究学会(InternationalAssociation for the Study of Pain)确立的指南，用ICR小鼠进行这些实验。本发明的化合物作为约3-20mg/mL的约pH 8的水溶液使用。在有些情况下，化合物会部分地从溶液中沉淀出来，因而，作为混悬液施用。通过注射10微升在盐水溶液中的2％福尔马林(将其注射进左后爪背表面)，诱导持续性疼痛。监测实验动物至少40分钟，在这期间，观察并记录每个5-分钟时段内发生的退缩次数。对于每个剂量水平的每种实验化合物，使用12只动物组。“盲法”观察疼痛响应，这意味着，观察人员不知道哪只动物已经接受哪种治疗。使用Prism^TM 5.0，进行结果的统计分析，其中使用每个化合物相对于媒介物的单因素方差分析(one-way analysis of variance，ANOVA)；显著性水平设定为P＜0.05。

在注射福尔马林之前1小时，以30、100和200mg/kg的单次剂量，口服施用化合物。通过退缩频率，测量疼痛响应。在注射后前9分钟阶段期间，两种化合物都没有影响退缩比率。但是，在注射后10-40分钟阶段期间，两种化合物都显著减少了福尔马林-诱导的退缩。化合物K在30和200mg/kg剂量是有效的，化合物(1)在100和200mg/kg剂量是有效的。作为阳性对照

单次给药的吗啡(3mg/kg，皮下注射)，在两个实验阶段中减少了福尔马林-诱导的退缩。

实施例3

在抗痛觉过敏模型中测试化合物

如Hargreaves，等人(Hargreaves，等人，“A new and sensitive method formeasuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia，”Pain，vol.32，77-88(1988))所述，使用CFA(完全弗氏辅剂，0.05％w/v乳酪分枝杆菌(mycobacterium Butyricum))来诱导热痛觉过敏，在炎性疼痛模型中测试了化合物K和(1)的效能。如上所讨论的，使用ICR小鼠，并在至少12只实验动物中，测试每种化合物的每个剂量。盲法观察疼痛响应。使用Prism^TM 5.0，进行结果的统计分析，其中使用每个化合物相对于媒介物的单因素方差分析(ANOVA)；显著性水平设定为P＜0.05。两种化合物都从溶液中沉淀出来，所以在涡旋和温热(以促进化合物的溶解度)后，作为混悬液施用它们。在这些剂量的化合物都没有表现出对CFA-诱导的热痛觉过敏的统计上显著的作用。在萘普生给药后1、2和4小时，作为阳性对照单次腹膜内给药的萘普生(50mg/kg)显著逆转了CFA-诱导的热痛觉过敏。

以25、75或150mg/kg的剂量，每天2次(BID)施用化合物，持续4天。在第4天，实验受试者在左后爪的跖面接受单次皮下注射CFA(20微升)。在异氟烷麻醉下，将CFA皮下地注射进每个实验受试者的左后爪的跖面。允许在注射部位的炎症发展约24小时，然后测试。在第5天，测量热反应，然后用化合物治疗，并在CFA治疗后1、2和4小时，再次测量。通过Hargreaves方法，按照对热刺激的响应，测量收缩潜伏期。萘普生用作阳性对照。

实施例5

化合物K的I期临床研究

化合物K在抑制异种移植物肿瘤生长中表现出单一药剂效能，在临床前具有宽治疗窗。进行I期研究，以确定最高耐受剂量(MTD)和剂量限制性毒性(DLTs)，表征药代动力学(PKs)，和研究化合物K的药效动力学作用。

规程：

合格的患者(具有晚期实体瘤、Castleman病或多发性骨髓瘤，具有渐进性疾病，或者没有针对他的标准疗法)接受下述连续剂量组的化合物K：90、160、300、460、700和1000mg/剂。每天2次施用口服剂量，持续21个连续天，4周周期。在同意的患者中继续治疗，直到观察到对化合物K的不耐受征兆，或存在疾病恶化的证据。在每2个周期后，测定RECIST响应。在第1周期的第一个和最后一个给药天(即第1天和第21天)，收集系列血液和血浆样品，用于药代动力学分析和药效动力学生物标志物评价(具体地，p21和Akt的所有和磷酸化形式)。

给药途径和计划：

给在组1-3中的患者施用口服胶囊，每天2次(BID)。组1接受90mg化合物K，每天2次。组2接受160mg化合物K，每天2次。组3接受300mg化合物K，每天2次。

结果总结：

13位具有实体瘤的患者(每个组3-4位患者，来自4个单独的剂量组)接受化合物K的口服剂量。这些剂量被较好地耐受，没有报告3级或更高的药物-相关的显著不利事件。

药代动力学分析

化合物K在剂量组之间表现出药代动力学(PK)参数的一般线性，在稳态时，具有大约25小时的终末半衰期。

在第1天(图4A)和第21天(图4B)，在第一个剂量以后，测定化合物K的血浆浓度。观察到剂量相关的血浆暴露。没有观察到积累。

结论：

化合物K已经证实没有药物相关的毒性，且具有与剂量成比例的药代动力学。尚未观察到剂量限制性毒性(DLTs)，最高耐受剂量(MTD)有待在在该I期研究中确定。计划的剂量递增组的进一步招募正在进行中。

实施例6

在抗病毒试验中的CK2抑制剂

潜在性感染试验：

在有实验化合物存在下，用TNFα治疗被HIV-1潜伏性感染的组织细胞白血病细胞系U937，以诱导病毒表达。将抗病毒活性测定为，72小时温育以后，逆转录酶的减少。

PBMC试验：

使用来自多位供体(PMA和IL-2刺激的)的新鲜的人PBMC，进行HIV-1分离物(CXCR4-向性的HIV-1亚型B和CCR5-向性的HIV-1亚型)的急性感染。将抗病毒活性测定为，7天温育以后，逆转录酶的减少。

数据分析：

IC₅₀(病毒复制的50％抑制)

TC₅₀(50％宿主细胞细胞毒性)

TI＝TC/IC；也称作治疗指数值(TI)或抗病毒指数(AI)

在U1潜在性感染试验中的CK2抑制剂

在U1潜在性感染试验中，测试了化合物K、化合物1和化合物2。在有实验化合物存在下，用TNFα处理被HIV-1潜伏性感染的组织细胞白血病细胞系U937，以诱导病毒表达。将抗病毒活性测定为，72小时温育以后，逆转录酶的减少。将Temacrazine(HIV转录起始的抑制剂)用作该试验的阳性对照。

化合物K和化合物1没有表现出病毒生产的显著抑制。

化合物2表现出明显的双相(biphasic)作用，这可能与化合物对细胞的作用有关。化合物2在中间浓度时会抑制病毒生产。化合物2在高浓度时似乎会增强U1细胞的病毒生产(例如，对病毒转录的潜在刺激作用)。

数据显示在表3中。

表3

在PBMC试验中的CK2抑制剂：

在PBMC试验中，测试了化合物K、化合物1和化合物2。将抗病毒活性测定为，7天温育以后，逆转录酶的减少。将AZT(一种核苷类似物逆转录酶抑制剂)用作该试验的阳性对照。

化合物K和化合物1没有表现出病毒生产的显著抑制。

化合物2在中间浓度时会抑制病毒生产。数据如表4所示。92HT599是CXCR4-向性的HIV-1亚型B病毒。91US005是CCR5-向性的HIV-1亚型B病毒。

表4

在新鲜的人PBMC中的CCR5-向性的HIV-1临床分离物

在新鲜的人PBMC中，针对8个CCR5-向性的HIV-1临床分离物，测试了化合物2。在CCR5-向性的HIV-1感染的PBMC’s中，化合物2以剂量依赖性的方式抑制病毒生产。化合物2在PBMC’s中具有最小细胞毒性，产生有利的治疗指数。AZT用作该试验的阳性对照。

在图5(A)中提供了化合物2的数据，在图5(B)中提供了AZT的数据。

实施例7

代表性的实施方案

A1.一种用于治疗或改善除了实体瘤以外与不希望的蛋白激酶CK2活性有关的疾病的方法，所述方法包括：给需要这种治疗或改善的受试者施用治疗有效量的式(I)化合物：

式I，

或其药学上可接受的盐或酯，

其中Z⁵是N或CR^6A；

每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是H或任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

或每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是卤素、CF₃、CFN、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、羧基生物电子等排体、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

每个R⁹独立地是任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，或

每个R⁹独立地是卤素、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

其中每个R独立地是H或C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

且其中在同一个原子上或在相邻原子上的2个R可以连接形成3-8元环，所述环任选地含有N、O或S中的一个或多个；

且每个R基团，和通过把2个R基团连接到一起形成的每个环，任选地被一个或多个选自下述的取代基取代：卤素、＝O、＝N-CN、＝N-OR’、＝NR’、OR’、NR’₂、SR’、SO₂R’、SO₂NR’₂、NR’SO₂R’、NR’CONR’₂、NR’COOR’、NR’COR’、CN、COOR’、CONR’₂、OOCR’、COR’和NO₂，

其中每个R’独立地是H、C1-C6烷基、C2-C6杂烷基、C1-C6酰基、C2-C6杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-12芳基烷基或C6-12杂芳基烷基，其中的每一个任选地被一个或多个选自下述的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4杂烷基、C1-C6酰基、C1-C6杂酰基、羟基、氨基和＝O；

且其中2个R’可以连接形成3-7元环，所述环任选地含有最多3个选自N、O和S的杂原子；

n是0-4；且

p是0-4。

A2.一种用于治疗或改善除了实体瘤以外与不希望的蛋白激酶CK2活性有关的疾病的方法，所述方法包括：给需要这种治疗或改善的受试者施用治疗有效量的具有下式的化合物：

或其药学上可接受的盐或酯。

A3.如实施方案A1或A2所述的方法，其中所述疾病是神经变性疾病、炎性疾病、血管系统的疾病、骨骼肌或骨组织的病理生理疾病、原生动物寄生虫病、病毒病、白血病、淋巴瘤和多发性骨髓瘤。

A4.如实施方案A1或A2所述的方法，其中所述疾病是神经变性疾病。

A5.如实施方案A4所述的方法，其中所述神经变性疾病是阿尔茨海默氏病、帕金森病、Guam-Parkinson痴呆、染色体18缺失综合征、进行性核上麻痹、库夫斯病、皮克病、记忆缺陷或脑缺血。

A6.如实施方案A1或A2所述的方法，其中所述疾病是炎性疾病。

A7.如实施方案A6所述的方法，其中所述炎性疾病是炎性疼痛、肾小球肾炎、多发性硬化、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎或青少年关节炎。

Ag.如实施方案A1或A2所述的方法，其中所述疾病是血管系统的疾病。

A9.如实施方案A1或A2所述的方法，其中所述血管系统的疾病是动脉粥样硬化、层流剪应力或缺氧。

A10.如实施方案A1或A2所述的方法，其中所述疾病是骨骼肌或骨组织的病理生理疾病。

A11.如实施方案A10所述的方法，其中所述骨骼肌或骨组织的病理生理疾病是心肌细胞肥厚、受损的胰岛素信号传递或骨组织矿化作用。

A12.如实施方案A1或A2所述的方法，其中所述疾病是原生动物寄生虫病。

A13.如实施方案A1或A2所述的方法，其中所述疾病是病毒病。

A14.如实施方案A13所述的方法，其中所述病毒病是人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)、人乳头瘤病毒或单纯疱疹病毒。

A15.如实施方案A1或A2所述的方法，其中所述疾病是白血病、淋巴瘤或多发性骨髓瘤。

A16.如前述实施方案中任一个所述的方法，其中所述受试者是人。

A17.一种用于治疗或改善受试者的疾病的方法，所述方法包括：给所述需要这种治疗或改善的受试者施用治疗有效量的具有下式的化合物：

或其药学上可接受的盐或酯；

其中所述疾病选自：神经变性疾病、炎性疾病、血管系统的疾病、骨骼肌或骨组织的病理生理疾病、原生动物寄生虫病、病毒病、白血病、淋巴瘤和多发性骨髓瘤。

A18.一种用于治疗或改善受试者的疾病的方法，所述方法包括：以有效地抑制不希望的蛋白激酶CK2活性的量，给所述需要这种治疗或改善的受试者施用具有下式的化合物：

或其药学上可接受的盐或酯。

A19.如实施方案A18所述的方法，其中所述疾病选自：神经变性疾病、炎性疾病、血管系统的疾病、骨骼肌或骨组织的病理生理疾病、原生动物寄生虫病、病毒病、白血病、淋巴瘤和多发性骨髓瘤。

A20.一种治疗疼痛的方法，所述方法包括：给需要这种治疗的受试者施用式I化合物：

式I，

或其药学上可接受的盐或酯，

其中Z⁵是N或CR^6A；

每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是H或任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

或每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是卤素、CF₃、CFN、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、羧基生物电子等排体、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

每个R⁹独立地是任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，或

每个R⁹独立地是卤素、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

其中每个R独立地是H或C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

且其中在同一个原子上或在相邻原子上的2个R可以连接形成3-8元环，所述环任选地含有N、O或S中的一个或多个；

且每个R基团，和通过把2个R基团连接到一起形成的每个环，任选地被一个或多个选自下述的取代基取代：卤素、＝O、＝N-CN、＝N-OR’、＝NR’、OR’、NR’₂、SR’、SO₂R’、SO₂NR’₂、NR’SO₂R’、NR’CONR’₂、NR’COOR’、NR’COR’、CN、COOR’、CONR’₂、OOCR’、COR’和NO₂，

其中每个R’独立地是H、C1-C6烷基、C2-C6杂烷基、C1-C6酰基、C2-C6杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-12芳基烷基或C6-12杂芳基烷基，其中的每一个任选地被一个或多个选自下述的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4杂烷基、C1-C6酰基、C1-C6杂酰基、羟基、氨基和＝O；

且其中2个R’可以连接形成3-7元环，所述环任选地含有最多3个选自N、O和S的杂原子；

n是0-4；且

p是0-4。

A21.如实施方案A20所述的方法，其中所述化合物是式VIa的化合物或其药学上可接受的盐：

式VIa    ；

其中R^6B可以是H或-NHR’，其中R’是C1-C5烃基、优选C1-C3烷基或C3-C5环烷基；Z⁵是CH或N；且R⁹是卤素、CF₃或C≡CR”，其中R”是H或Me。

A22.如实施方案A20或A21所述的方法，其中所述化合物选自：

知

和它们的药学上可接受的盐和/或酯。

A23.如实施方案A20、A21或A22所述的方法，其中所述疼痛是急性或慢性炎性疼痛。

A24.一种治疗病毒病的方法，所述方法包括：给需要这种治疗的受试者施用式I化合物：

式I，

或其药学上可接受的盐或酯，

其中Z⁵是N或CR^6A；

每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是H或任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

或每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是卤素、CF₃、CFN、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、羧基生物电子等排体、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

每个R⁹独立地是任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，或

每个R⁹独立地是卤素、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

其中每个R独立地是H或C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

且其中在同一个原子上或在相邻原子上的2个R可以连接形成3-8元环，所述环任选地含有N、O或S中的一个或多个；

且每个R基团，和通过把2个R基团连接到一起形成的每个环，任选地被一个或多个选自下述的取代基取代：卤素、＝O、＝N-CN、＝N-OR’、＝NR’、OR’、NR’₂、SR’、SO₂R’、SO₂NR’₂、NR’SO₂R’、NR’CONR’₂、NR’COOR’、NR’COR’、CN、COOR’、CONR’₂、OOCR’、COR’和NO₂，

其中每个R’独立地是H、C1-C6烷基、C2-C6杂烷基、C1-C6酰基、C2-C6杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-12芳基烷基或C6-12杂芳基烷基，其中的每一个任选地被一个或多个选自下述的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4杂烷基、C1-C6酰基、C1-C6杂酰基、羟基、氨基和＝O；

且其中2个R’可以连接形成3-7元环，所述环任选地含有最多3个选自N、O和S的杂原子；

n是0-4；且

p是0-4。

A25.如实施方案A24所述的方法，其中所述化合物是式VIa的化合物或其药学上可接受的盐：

式VIa    ；

其中R^6B可以是H或-NHR’，其中R’是C1-C5烃基、优选C1-C3烷基或C3-C5环烷基；Z⁵是CH或N；且R⁹是卤素、CF₃或C≡CR”，其中R”是H或Me。

A26.如实施方案A24或A25所述的方法，其中所述化合物选自：

知

和它们的药学上可接受的盐和/或酯。

A27.如实施方案A24、A25或A26所述的方法，其中所述病毒病选自：人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)、人乳头瘤病毒(HPV)、单纯疱疹病毒、非洲淋巴细胞瘤病毒、人巨细胞病毒、丙型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、Borna病病毒、腺病毒、柯萨奇病毒、冠状病毒、流感和水痘带状疱疹病毒。

A28.一种治疗晚期实体瘤的方法，所述方法包括：给需要这种治疗的受试者施用式I化合物：

式I，

或其药学上可接受的盐或酯，

其中Z⁵是N或CR^6A；

每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是H或任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

或每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是卤素、CF₃、CFN、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、羧基生物电子等排体、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

每个R⁹独立地是任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，或

每个R⁹独立地是卤素、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

其中每个R独立地是H或C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

且其中在同一个原子上或在相邻原子上的2个R可以连接形成3-8元环，所述环任选地含有N、O或S中的一个或多个；

且每个R基团，和通过把2个R基团连接到一起形成的每个环，任选地被一个或多个选自下述的取代基取代：卤素、＝O、＝N-CN、＝N-OR’、＝NR’、OR’、NR’₂、SR’、SO₂R’、SO₂NR’₂、NR’SO₂R’、NR’CONR’₂、NR’COOR’、NR’COR’、CN、COOR’、CONR’₂、OOCR’、COR’和NO₂，

其中每个R’独立地是H、C1-C6烷基、C2-C6杂烷基、C1-C6酰基、C2-C6杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-12芳基烷基或C6-12杂芳基烷基，其中的每-个任选地被一个或多个选自下述的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4杂烷基、C1-C6酰基、C1-C6杂酰基、羟基、氨基和＝O；

且其中2个R’可以连接形成3-7元环，所述环任选地含有最多3个选自N、O和S的杂原子；

n是0-4；且

p是0-4。

A29.一种用于治疗、改善或预防有此需要的受试者的昼夜节律疾病的方法，所述方法包括：给所述受试者施用治疗有效量的式(I)化合物：

式I，

或其药学上可接受的盐或酯，

其中Z⁵是N或CR^6A；

每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是H或任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

或每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是卤素、CF₃、CFN、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、羧基生物电子等排体、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

每个R⁹独立地是任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，或

每个R⁹独立地是卤素、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

其中每个R独立地是H或C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

且其中在同一个原子上或在相邻原子上的2个R可以连接形成3-8元环，所述环任选地含有N、O或S中的一个或多个；

且每个R基团，和通过把2个R基团连接到一起形成的每个环，任选地被一个或多个选自下述的取代基取代：卤素、＝O、＝N-CN、＝N-OR’、＝NR’、OR’、NR’₂、SR’、SO₂R’、SO₂NR’₂、NR’SO₂R’、NR’CONR’₂、NR’COOR’、NR’COR’、CN、COOR’、CONR’₂、OOCR’、COR’和NO₂，

其中每个R’独立地是H、C1-C6烷基、C2-C6杂烷基、C1-C6酰基、C2-C6杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-12芳基烷基或C6-12杂芳基烷基，其中的每一个任选地被一个或多个选自下述的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4杂烷基、C1-C6酰基、C1-C6杂酰基、羟基、氨基和＝O；

且其中2个R’可以连接形成3-7元环，所述环任选地含有最多3个选自N、O和S的杂原子；

n是0-4；且

p是0-4。

A30.如实施方案A29所述的方法，其中所述昼夜节律疾病选自：时差综合症、轮班工作睡眠疾病、睡眠时相延迟综合征(DSPS)、睡眠时相前移综合征和非24-小时睡眠清醒疾病。

A31.一种用于调节温度补偿和/或昼夜节律的方法，所述方法包括：给需要这种调节的受试者施用治疗有效量的式(I)化合物：

式I，

或其药学上可接受的盐或酯，

其中Z⁵是N或CR^6A；

每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是H或任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

或每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是卤素、CF₃、CFN、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、羧基生物电子等排体、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

每个R⁹独立地是任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，或

每个R⁹独立地是卤素、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

其中每个R独立地是H或C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

且其中在同一个原子上或在相邻原子上的2个R可以连接形成3-8元环，所述环任选地含有N、O或S中的一个或多个；

且每个R基团，和通过把2个R基团连接到一起形成的每个环，任选地被一个或多个选自下述的取代基取代：卤素、＝O、＝N-CN、＝N-OR’、＝NR’、OR’、NR’₂、SR’、SO₂R’、SO₂NR’₂、NR’SO₂R’、NR’CONR’₂、NR’COOR’、NR’COR’、CN、COOR’、CONR’₂、OOCR’、COR’和NO₂，

其中每个R’独立地是H、C1-C6烷基、C2-C6杂烷基、C1-C6酰基、C2-C6杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-12芳基烷基或C6-12杂芳基烷基，其中的每一个任选地被一个或多个选自下述的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4杂烷基、C1-C6酰基、C1-C6杂酰基、羟基、氨基和＝O；

且其中2个R’可以连接形成3-7元环，所述环任选地含有最多3个选自N、O和S的杂原子；

n是0-4；且

p是0-4。

A32.如实施方案A28、A29、A30或A31中任一个所述的方法，其中所述化合物是式VIa的化合物或其药学上可接受的盐：

式VIa    ；

其中R^6B可以是H或-NHR’，其中R’是C1-C5烃基、优选C1-C3烷基或C3-C5环烷基；Z⁵是CH或N；且R⁹是卤素、CF₃或C≡CR”，其中R”是H或Me。

A33.如实施方案A28、A29、A30、A31或A32中任-个所述的方法，其中所述化合物选自：

知

和它们的药学上可接受的盐和/或酯。

提供前述实施例和实施方案来说明本发明，而不是限制或界定它的范围。考虑到这些实施例和本文的描述，普通技术人员会明白这些实施例的适当变体和改变，它们被包括在本发明范围内。

Claims (22)

1.一种用于治疗或改善除了实体瘤以外与不希望的蛋白激酶CK2活性有关的疾病的方法，所述方法包括：给需要这种治疗或改善的受试者施用治疗有效量的式(I)化合物：

式I，

或其药学上可接受的盐或酯，

其中Z⁵是N或CR^6A；

每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是H或任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

或每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是卤素、CF₃、CFN、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、羧基生物电子等排体、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

每个R⁹独立地是任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，或

每个R⁹独立地是卤素、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

其中每个R独立地是H或C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

且其中在同一个原子上或在相邻原子上的2个R可以连接形成3-8元环，所述环任选地含有N、O或S中的一个或多个；

且每个R基团，和通过把2个R基团连接到一起形成的每个环，任选地被一个或多个选自下述的取代基取代：卤素、＝O、＝N-CN、＝N-OR’、＝NR’、OR’、NR’₂、SR’、SO₂R’、SO₂NR’₂、NR’SO₂R’、NR’CONR’₂、NR’COOR’、NR’COR’、CN、COOR’、CONR’₂、OOCR’、COR’和NO₂，

其中每个R’独立地是H、C1-C6烷基、C2-C6杂烷基、C1-C6酰基、C2-C6杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-12芳基烷基或C6-12杂芳基烷基，其中的每一个任选地被一个或多个选自下述的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4杂烷基、C1-C6酰基、C1-C6杂酰基、羟基、氨基和＝O；

且其中2个R’可以连接形成3-7元环，所述环任选地含有最多3个选自N、O和S的杂原子；

n是0-4；且

p是0-4。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述化合物是式VIa的化合物或其药学上可接受的盐：

式VIa    ；

其中R^6B可以是H或-NHR’，其中R’是C1-C5烃基、优选C1-C3烷基或C3-C5环烷基；Z⁵是CH或N；且R⁹是卤素、CF₃或C≡CR”，其中R”是H或Me。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述疾病是神经变性疾病、炎性疾病、血管系统的疾病、骨骼肌或骨组织的病理生理疾病、原生动物寄生虫病、病毒病、白血病、淋巴瘤和多发性骨髓瘤。

4.如权利要求1所述的方法，其中所述疾病是神经变性疾病。

5.如权利要求4所述的方法，其中所述神经变性疾病是阿尔茨海默氏病、帕金森病、Guam-Parkinson痴呆、染色体18缺失综合征、进行性核上麻痹、库夫斯病、皮克病、记忆缺陷或脑缺血。

6.如权利要求1所述的方法，其中所述疾病是炎性疾病。

7.如权利要求6所述的方法，其中所述炎性疾病是炎性疼痛、肾小球肾炎、多发性硬化、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎或青少年关节炎。

8.如权利要求1所述的方法，其中所述疾病是血管系统的疾病。

9.如权利要求8所述的方法，其中所述血管系统的疾病是动脉粥样硬化、层流剪应力或缺氧。

10.如权利要求1所述的方法，其中所述疾病是骨骼肌或骨组织的病理生理疾病。

11.如权利要求10所述的方法，其中所述骨骼肌或骨组织的病理生理疾病是心肌细胞肥厚、受损的胰岛素信号传递或骨组织矿化作用。

12.如权利要求1所述的方法，其中所述疾病是原生动物寄生虫病。

13.如权利要求1所述的方法，其中所述疾病是病毒病。

14.如权利要求13所述的方法，其中所述病毒病选自：人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)、人乳头瘤病毒(HPV)、单纯疱疹病毒、非洲淋巴细胞瘤病毒、人巨细胞病毒、丙型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、Borna病病毒、腺病毒、柯萨奇病毒、冠状病毒、流感和水痘带状疱疹病毒。

15.如权利要求1所述的方法，其中所述疾病是白血病、淋巴瘤或多发性骨髓瘤。

16.一种治疗疼痛的方法，所述方法包括：给需要这种治疗的受试者施用式I化合物：

式I，

或其药学上可接受的盐或酯，

其中Z⁵是N或CR^6A；

每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是H或任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

或每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是卤素、CF₃、CFN、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、羧基生物电子等排体、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

每个R⁹独立地是任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，或

每个R⁹独立地是卤素、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

其中每个R独立地是H或C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

且其中在同一个原子上或在相邻原子上的2个R可以连接形成3-8元环，所述环任选地含有N、O或S中的一个或多个；

且每个R基团，和通过把2个R基团连接到一起形成的每个环，任选地被一个或多个选自下述的取代基取代：卤素、＝O、＝N-CN、＝N-OR’、＝NR’、OR’、NR’₂、SR’、SO₂R’、SO₂NR’₂、NR’SO₂R’、NR’CONR’₂、NR’COOR’、NR’COR’、CN、COOR’、CONR’₂、OOCR’、COR’和NO₂，

其中每个R’独立地是H、C1-C6烷基、C2-C6杂烷基、C1-C6酰基、C2-C6杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-12芳基烷基或C6-12杂芳基烷基，其中的每一个任选地被一个或多个选自下述的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4杂烷基、C1-C6酰基、C1-C6杂酰基、羟基、氨基和＝O；

且其中2个R’可以连接形成3-7元环，所述环任选地含有最多3个选自N、O和S的杂原子；

n是0-4；且

p是0-4。

17.如权利要求16所述的方法，其中所述化合物是式VIa的化合物或其药学上可接受的盐：

式VIa    ；

其中R^6B可以是H或-NHR’，其中R’是C1-C5烃基、优选C1-C3烷基或C3-C5环烷基；Z⁵是CH或N；且R⁹是卤素、CF₃或C≡CR”，其中R”是H或Me。

18.如权利要求16所述的方法，其中所述疼痛是急性或慢性炎性疼痛。

19.一种治疗晚期实体瘤的方法，所述方法包括：给需要这种治疗的受试者施用式I化合物：

式I，

或其药学上可接受的盐或酯，

其中Z⁵是N或CR^6A；

每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是H或任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

或每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是卤素、CF₃、CFN、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、羧基生物电子等排体、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

每个R⁹独立地是任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，或

每个R⁹独立地是卤素、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

其中每个R独立地是H或C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

且其中在同一个原子上或在相邻原子上的2个R可以连接形成3-8元环，所述环任选地含有N、O或S中的一个或多个；

且每个R基团，和通过把2个R基团连接到一起形成的每个环，任选地被一个或多个选自下述的取代基取代：卤素、＝O、＝N-CN、＝N-OR’、＝NR’、OR’、NR’₂、SR’、SO₂R’、SO₂NR’₂、NR’SO₂R’、NR’CONR’₂、NR’COOR’、NR’COR’、CN、COOR’、CONR’₂、OOCR’、COR’和NO₂，

其中每个R’独立地是H、C1-C6烷基、C2-C6杂烷基、C1-C6酰基、C2-C6杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-12芳基烷基或C6-12杂芳基烷基，其中的每一个任选地被一个或多个选自下述的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4杂烷基、C1-C6酰基、C1-C6杂酰基、羟基、氨基和＝O；

且其中2个R’可以连接形成3-7元环，所述环任选地含有最多3个选自N、O和S的杂原子；

n是0-4；且

p是0-4。

20.一种用于治疗、改善或预防有此需要的受试者的昼夜节律疾病的方法，所述方法包括：给所述受试者施用治疗有效量的式(I)化合物：

式I，

或其药学上可接受的盐或酯，

其中Z⁵是N或CR^6A；

每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是H或任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

或每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是卤素、CF₃、CFN、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、羧基生物电子等排体、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

每个R⁹独立地是任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，或

每个R⁹独立地是卤素、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

其中每个R独立地是H或C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

且其中在同一个原子上或在相邻原子上的2个R可以连接形成3-8元环，所述环任选地含有N、O或S中的一个或多个；

且每个R基团，和通过把2个R基团连接到一起形成的每个环，任选地被一个或多个选自下述的取代基取代：卤素、＝O、＝N-CN、＝N-OR’、＝NR’、OR’、NR’₂、SR’、SO₂R’、SO₂NR’₂、NR’SO₂R’、NR’CONR’₂、NR’COOR’、NR’COR’、CN、COOR’、CONR’₂、OOCR’、COR’和NO₂，

其中每个R’独立地是H、C1-C6烷基、C2-C6杂烷基、C1-C6酰基、C2-C6杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-12芳基烷基或C6-12杂芳基烷基，其中的每一个任选地被一个或多个选自下述的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4杂烷基、C1-C6酰基、C1-C6杂酰基、羟基、氨基和＝O；

且其中2个R’可以连接形成3-7元环，所述环任选地含有最多3个选自N、O和S的杂原子；

n是0-4；且

p是0-4。

21.如权利要求20所述的方法，其中所述昼夜节律疾病选自：时差综合症、轮班工作睡眠疾病、睡眠时相延迟综合征(DSPS)、睡眠时相前移综合征和非24-小时睡眠清醒疾病。

22.一种用于调节温度补偿和/或昼夜节律的方法，所述方法包括：给需要这种调节的受试者施用治疗有效量的式(I)化合物：

式I，

或其药学上可接受的盐或酯，

其中Z⁵是N或CR^6A；

每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是H或任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

或每个R^6A、R^6B、R^6D和R⁸独立地是卤素、CF₃、CFN、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、羧基生物电子等排体、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

每个R⁹独立地是任选地被取代的C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C12杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，或

每个R⁹独立地是卤素、OR、NR₂、NROR、NRNR₂、SR、SOR、SO₂R、SO₂NR₂、NRSO₂R、NRCONR₂、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、CONR₂、OOCR、COR或NO₂，

其中每个R独立地是H或C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-C12芳基烷基或C6-C12杂芳基烷基，

且其中在同一个原子上或在相邻原子上的2个R可以连接形成3-8元环，所述环任选地含有N、O或S中的一个或多个；

且每个R基团，和通过把2个R基团连接到一起形成的每个环，任选地被一个或多个选自下述的取代基取代：卤素、＝O、＝N-CN、＝N-OR’、＝NR’、OR’、NR’₂、SR’、SO₂R’、SO₂NR’₂、NR’SO₂R’、NR’CONR’₂、NR’COOR’、NR’COR’、CN、COOR’、CONR’₂、OOCR’、COR’和NO₂，

其中每个R’独立地是H、C1-C6烷基、C2-C6杂烷基、C1-C6酰基、C2-C6杂酰基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C7-12芳基烷基或C6-12杂芳基烷基，其中的每一个任选地被一个或多个选自下述的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4杂烷基、C1-C6酰基、C1-C6杂酰基、羟基、氨基和＝O；

且其中2个R’可以连接形成3-7元环，所述环任选地含有最多3个选自N、O和S的杂原子；

n是0-4；且

p是0-4。

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