CN114957252B - 一种化合物及其制备方法以及药物组合物和在制备eed抑制剂中的应用 - Google Patents

一种化合物及其制备方法以及药物组合物和在制备eed抑制剂中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及药物技术领域，提供了一种化合物及其制备方法以及药物组合物和在制备EED抑制剂中的应用。本发明提供的化合物能够通过抑制EED活性达到治疗或预防肿瘤目的，可以通过向需要此种治疗或预防的患者给予治疗有效量的一种或多种本发明化合物、其立体异构、药学上可接受的盐、水合物、溶剂合物或同位素化合物，以达到治疗或预防的目的。实施例结果表明，本发明提供的化合物具有较好的抑制EED活性的作用。

Description

一种化合物及其制备方法以及药物组合物和在制备EED抑制 剂中的应用
技术领域
本发明涉及药物技术领域，尤其涉及一种化合物及其制备方法以及药物组合物和在制备EED抑制剂中的应用。
背景技术
表观遗传(Epigenetics)是指基因的DNA序列没有改变的情况下，基因功能却发生可遗传的变化，最终导基因表型的变化。近几年，表观遗传和基于表观遗传的药物开发近年来一直是研究的热点。表观遗传主要的研究内容包括：DNA的甲基化，组蛋白的各种修饰，非编码RNAs等，表观遗传调控涉及过程可逆，控制细胞命运，调控个体正常生长发育有序进行，并与肿瘤，糖尿病，心脏病，肠道疾病等多种疾病的发生发展也密切相关。目前已上市的表观类抑制剂有8个，分属三个靶点，分别为2个DNA甲基化酶抑制剂，5个组蛋白去乙酰化酶抑制剂和1个异柠檬酸脱氢酶抑制剂(IDH)。
多梳抑制复合物2(PRC2)是表观遗传中一颇受关注的组蛋白甲基转移酶。它是由EZH2、EED、SUZ12和RbAp46/48等亚基构成的复合物，主要催化H3K27甲基化，导致靶基因启动子区H3K27的高度甲基化，继而使该基因转录沉默，从而影响细胞的多种生物学效应。越来越多的研究表明EZH2与多种肿瘤的发生发展密切相关。如在淋巴瘤，胰腺癌，黑色素瘤，乳腺癌，膀胱癌，胃癌等肿瘤中，都发现EZH2的异常表达和/或突变。因此抑制PRC2复合物的活性被认为可能成为治疗肿瘤的新兴手段，很多科学家为此投入大量精力。目前靶向PRC2的抑制剂多为针对EZH2的酶活抑制剂，有数个化合物正进行临床试验，因此，EED抑制剂的研究具有重要意义。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了一种化合物及其制备方法以及药物组合物和在制备EED抑制剂中应用。本发明提供的化合物能够抑制EED活性，具有抗肿瘤药理活性，能够用于制备抗肿瘤药物。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
一种具有式I结构的化合物、其立体异构、药学上可接受的盐、水合物、溶剂合物或同位素化合物；
式I中：R1选自取代或不取代的苯基、取代或不取代的芳杂环基；R2选自F、Cl、Br、CH3SO2、CONH2或CF3；R3选自H、F、Cl、Br、MeO或CN。
优选的，所述芳杂环基中的杂原子为氮；所述杂原子的个数为1～2个。
优选的，所述芳杂环基选自吡唑基、吡咯基、咪唑基或吡啶基，所述取代的芳杂环基中的取代基选自链烷基、烷氧基或环烷基。
优选的，所述具有式I所示结构的化合物为表1(见后文)中所示化合物中的至少一种；
本发明还提供了上述方案所述具有式I所示结构的化合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将化合物II、化合物III、钯催化剂、碱试剂和溶剂混合，进行偶联反应，得到化合物IV；
(2)将所述化合物IV、还原剂和溶剂混合，进行还原反应，得到化合物V；
(3)将所述化合物V、氧化剂和溶剂混合，进行氧化反应，然后将所得氧化反应液与化合物VI和碱试剂混合，进行缩合反应，得到化合物VII；
(4)将所述化合物VII、三氯氧磷和第四溶剂混合，进行氯化反应，得到化合物VIII；
(5)将所述化合物VIII、化合物IX、钯催化剂、配体、碱试剂和溶剂混合，进行偶联反应，得到具有式I所示结构的化合物；
所述化合物II、化合物III、化合物IV、化合物V、化合物VI、化合物VII和化合物VIII的结构式依次如下所示：
优选的，所述步骤(1)中使用的钯催化剂选自四三苯基膦钯、醋酸钯、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯和三(二亚苄基丙酮)二钯中的一种或几种；所述步骤(1)中使用的碱试剂选自碱金属碳酸盐、碱金属氢氧化物、碱金属磷酸盐和碱金属叔丁醇盐中的一种或几种；
所述步骤(2)中使用的还原剂选自铁粉-氯化铵、铁粉-乙酸、铁粉-盐酸和锌粉-氯化铵中的一种或几种；
所述步骤(3)中使用的氧化剂选自间氯过氧苯甲酸和过氧化氢中的一种或两种；
所述步骤(3)中使用的碱试剂选自三乙胺、二异丙基乙胺和4-二甲基吡啶中的一种或几种；
所述步骤(5)中使用的钯催化剂选自醋酸钯、三二亚苄基丙酮二钯和1,1'-双(二苯膦基)二茂铁二氯化钯中的一种或几种；
所述步骤(5)中使用的配体选自1,1'-联萘-2,2'-双二苯膦、2-二环己基膦-2',6'-二甲氧基联苯和4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽中的一种或几种；
所述步骤(5)中使用的碱试剂选自碱金属碳酸盐和碱金属叔丁醇盐中的一种或几种。
本发明还提供了一种药物组合物，包括活性成分和药学上可接受的辅料，所述药物组合物的活性成分为具有式I结构的化合物、其立体异构、药学上可接受的盐、水合物、溶剂合物或同位素化合物。
本发明还提供了上述方案所述式I结构的化合物、其立体异构、药学上可接受的盐、水合物、溶剂合物或同位素化合物，或上述方案所述的药物组合物在制备EED抑制剂中的应用。
本发明还提供了上述方案所述式I结构的化合物、其立体异构、药学上可接受的盐、水合物、溶剂合物或同位素化合物，或所述的药物组合物在制备预防和/或治疗肿瘤药物的应用。
优选的，所述肿瘤选自皮肤癌、膀胱癌、卵巢癌、乳腺癌、胃癌、前列腺癌、结肠癌、肺癌、骨癌、脑癌、直肠癌、食管癌、舌癌、胃癌、肾癌、肾实质癌、宫颈癌、子宫体癌、子宫内膜癌、睾丸癌、泌尿癌、黑素癌、星型细胞癌、脑膜瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴性白血病、慢性淋巴性白血病、急性骨髓性白血病，慢性粒细胞白血病、成人T细胞白血病淋巴瘤、肝细胞癌、支气管癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、多发性骨髓瘤、基底细胞瘤、精原细胞瘤、横纹肌肉瘤、软骨肉瘤、肌肉瘤或纤维肉瘤。
本发明提供了一种具有式I结构的化合物、其立体异构、药学上可接受的盐、水合物、溶剂合物或同位素化合物。本发明提供的化合物能够通过抑制EED活性达到治疗肿瘤目的，可以通过向需要此种治疗或预防的患者给予治疗有效量的一种或多种本发明化合物、其立体异构、药学上可接受的盐、水合物、溶剂合物或同位素化合物，以达到治疗或预防的目的。
具体实施方式
本发明提供了一种具有式I结构的化合物、其立体异构、药学上可接受的盐、水合物、溶剂合物或同位素化合物；
式I中：R1选自取代或不取代的苯基、取代或不取代的芳杂环基；R2选自F、Cl、Br、CH3SO2、CONH2或CF3；R3选自H、F、Cl、Br、MeO或CN。
在本发明中，所述芳杂环基中的杂原子优选为氮；所述杂原子的个数优选为1～2个；所述芳杂基优选为吡唑基、吡咯基、咪唑基或吡啶基，所述取代的芳杂环基中的取代基优选为链烷基、烷氧基或环烷基，所述链烷基和烷氧基的碳原子数优选为1～5，更优选为1～3，所述环烷基的碳原子数优选为3～5，在本发明的具体实施例中，所述取代的芳杂环基中的取代基优选为甲基、甲氧基或环丙基。
在本发明中，所述具有式I所示结构的化合物优选为表1所示化合物中的至少一种(记为化合物1～化合物28)：
表1具有式I所示结构的化合物的优选种类
本发明还提供了式I所示结构的化合物的立体异构、药学上可接受的盐、水合物、溶剂合物或同位素化合物，下面分别进行说明：
本发明的化合物可具有一个或多个不对称中心；该化合物因此可以个别(R)-立体异构体或(S)-立体异构体形式制备或以其混合物形式制备。除非另有说明，否则本说明书及权利要求中的特定化合物的描述或名称意欲包括个别对映异构体与其外消旋混合物或其它混合物。用于测定立体化学构型及分离立体异构体的方法在本领域中是熟知的(参见＂Advanced Organic Chemistry＂的第4章中的论述，第4版，J.March，JohnWiley及Sons，NewYork，1992)。因此，本发明亦涵盖具有抑制EED活性的任何立体异构形式、其相应对映异构体(d-异构体及l-异构体或(+)异构体及(-)异构体)及其非对映异构体及其混合物且不限于任一种立体异构形式。
在本发明中，药学上可接受的盐是指那些保留母体化合物的生物有效性及特性的盐。该盐包括：酸加成盐，其是通过母体化合物的游离碱与无机酸或与有机酸的反应而获得的；所述无机酸诸如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硝酸、磷酸、硫酸及高氯酸等；所述有机酸诸如乙酸、草酸、(D)或(L)苹果酸、马来酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸、酒石酸、苯磺酸(苯磺酸盐)、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、富马酸、葡萄糖酸、谷氨酸、羟乙磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、黏液酸、双羟萘酸、泛酸、琥珀酸、酒石酸或丙二酸等；优选为盐酸或(L)-苹果酸；或者当母体化合物中存在的酸质子被置换为金属离子或与有机碱配位时，形成盐，所述金属离子例如碱金属离子、碱土离子或铝离子；所述有机碱诸如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、缓血酸胺、N-甲基葡糖胺及类似物。
本发明对所述水合物、溶剂合物和同位素化合物没有特殊要求，为本领域技术人员熟知的，本发明不做具体限定。
本发明还提供了上述方案所述具有式I所示结构的化合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将化合物II、化合物III、钯催化剂、碱试剂和溶剂混合，进行偶联反应，得到化合物IV；
(2)将所述化合物IV、还原剂和溶剂混合，进行还原反应，得到化合物V；
(3)将所述化合物V、氧化剂和溶剂混合，进行氧化反应，然后将所得氧化反应液与化合物VI和碱试剂混合，进行第二缩合反应，得到化合物VII；
(4)将所述化合物VII、三氯氧磷和第四溶剂混合，进行氯化反应，得到化合物VIII；
(5)将所述化合物VIII、化合物IX、钯催化剂、配体、碱试剂和溶剂混合，进行偶联反应，得到具有式I所示结构的化合物；
所述化合物II、化合物III、化合物IV、化合物V、化合物VI、化合物VII和化合物VIII的结构式依次如下所示：
所述化合物III、化合物IV、化合物V、化合物VII和化合物VIII中R2和R3的种类和式I中一致。
在本发明中，所述具有式I所示结构的化合物的合成路线如下式所示：
下面结合上述合成路线，对本发明式I所示结构化合物的制备方法进行详细说明：
本发明将化合物II、化合物III、钯催化剂、碱试剂和溶剂混合，进行偶联反应，得到化合物IV。在本发明中，所述化合物II和化合物III的摩尔比优选为1:0.8～1.2，更优选为1:1；所述钯催化剂(记为第一钯催化剂)优选为四三苯基膦钯、醋酸钯、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯和三(二亚苄基丙酮)二钯中的一种或几种；所述第一钯催化剂的摩尔量优选为化合物II摩尔量的5～12％，优选为10％；所述碱试剂(记为第一碱试剂)优选为碱金属碳酸盐、碱金属氢氧化物、碱金属磷酸盐和碱金属叔丁醇盐中的一种或几种，所述碱金属碳酸盐优选为碳酸钠、碳酸钾和碳酸铯中的一种或几种，所述碱金属氢氧化物优选为氢氧化钾或氢氧化钠；所述碱金属磷酸盐优选为磷酸钾；所述碱金属叔丁醇盐优选为叔丁醇钠；所述第一碱试剂和化合物II的摩尔比优选为1～3:1，优选为2:1；所述偶联反应用溶剂(记为第一溶剂)优选为四氢呋喃-水混合溶剂、二氧六环-水混合溶剂、甲苯-水混合溶剂、N,N-二甲基甲酰胺和N,N-二甲基乙酰胺中的一种或几种，所述四氢呋喃-水混合溶剂中四氢呋喃和水的体积比优选为2～5:1，所述二氧六环-水混合溶剂中二氧六环和水的体积比优选为2～5:1，所述甲苯-水混合溶剂中甲苯和水的体积比优选为2～5:1。本发明对所述第一溶剂的用量没有特殊要求，能够使第一缩合反应顺利进行即可。在本发明中，所述偶联反应的温度优选为60～120℃，更优选为80～100℃，所述偶联反应的时间优选为12～24h；本发明优选通过TLC监测反应进程。
偶联反应结束后，本发明优选将所得产物料液和乙酸乙酯混合进行萃取，将所得有机层依次进行干燥、浓缩和柱层析分离，得到化合物IV。
得到化合物IV后，本发明将化合物IV、还原剂和溶剂混合，进行还原反应，得到具有化合物V。在本发明中，所述还原剂优选为铁粉-氯化铵、铁粉-乙酸、铁粉-盐酸和锌粉-氯化铵中的一种或几种；所述铁粉-氯化铵中铁粉和氯化铵的摩尔比优选为1:0.5～2，所述铁粉-乙酸中铁粉和乙酸的摩尔比优选为1:0.5～2，所述铁粉-盐酸中铁粉和盐酸的摩尔比优选为1:0.5～2，所述盐酸优选以稀盐酸的形式使用，所述稀盐酸的浓度优选为5％～20％；所述化合物IV和还原剂中铁粉的摩尔比优选为1:5～12，更优选为1:10；在本发明中，所述还原反应用溶剂(记为第二溶剂)优选为甲醇、乙醇、异丙醇和乙酸中的一种或几种；本发明对第二溶剂的用量没有特殊要求，能够使还原反应顺利进行即可。在本发明的具体实施例中，优选将化合物IV溶解于第二溶剂中，然后加入还原剂，之后升温至还原反应的温度进行反应。在本发明中，所述还原反应的温度优选为20～100℃，更优选为40～80℃；所述还原反应的时间优选为8～15h，更优选为10～12h，本发明优选通过TLC监测反应进程。
还原反应完成后，本发明优选将所得产物料液过滤，滤液用乙酸乙酯萃取，将所得有机层浓缩后进行柱层析分离，得到化合物V；所述萃取的次数优选为2次。
得到化合物V后，本发明将所述化合物V、氧化剂和溶剂混合，进行氧化反应，然后将所得氧化反应液与化合物VI和碱试剂混合，进行缩合反应，得到化合物VII。在本发明中，所述氧化剂优选为间氯过氧苯甲酸和过氧化氢中的一种或两种；所述化合物V和氧化剂的摩尔比优选为1:1.5～2.5，更优选为1:2；所述氧化反应的温度优选为20～100℃，更优选为25～50℃，在本发明的具体实施例中，优选在室温下进行反应，所述氧化反应的时间优选为2～4h，更优选为3h；所述化合物V和化合物VI的摩尔比优选为1:0.8～1.2，更优选为1:1；所述碱试剂(记为第二碱试剂)优选为三乙胺、二异丙基乙胺(DIEA)和4-二甲基吡啶中的一种或几种；所述第二碱试剂和化合物V的摩尔比优选为3～5:1，更优选为4:1；所述缩合反应的温度优选为40～100℃，更优选为80～100℃，所述缩合反应的时间优选为10～15h，更优选为12～13h，本发明优选通过TLC监测反应进程。在本发明中，所述缩合反应用溶剂(记为第三溶剂)优选为二氯甲烷、甲苯或乙腈中的一种或几种，本发明对第三溶剂的用量没有特殊要求，能够使氧化反应和第二缩合反应顺利进行即可。
缩合反应结束后，本发明优选将所得产物料液和水混合，然后过滤，将所得滤饼干燥，得到化合物VII。
得到化合物VII后，本发明将所述化合物VII、三氯氧磷和溶剂混合，进行氯化反应，得到化合物VIII。在本发明中，所述化合物VII和三氯氧磷的摩尔比优选为1:4～6，优选为1:5；所述氯化反应用溶剂(记为第四溶剂)优选为甲苯、乙腈和N,N-二甲基甲酰胺中的一种或几种；本发明对所述第四溶剂的用量没有特殊要求，能够使氯化反应顺利进行即可。在本发明的具体实施例中，优选先将化合物VII溶解于第四溶剂中，然后在室温下滴加三氯氧磷，滴加完毕后升温至氯化反应温度进行反应。在本发明中，所述氯化反应的温度优选为20～100℃，更优选为40～80℃，所述氯化反应的时间优选为5～7h，更优选为6h，本发明优选通过TLC监测反应进程。
氯化反应结束后，本发明将所得产物料液减压蒸馏除去溶剂，将所得浓缩液体倒入水中，析出固体，然后依次进行过滤和干燥，得到化合物VIII。
得到化合物VIII后，本发明将所述化合物VIII、化合物IX、钯催化剂、配体、碱试剂和溶剂混合，进行偶联反应，得到具有式I所示结构的化合物。在本发明中，所述化合物VIII和化合物IX的摩尔比优选为1:0.8～1.2，更优选为1:1；所述钯催化剂(记为第二钯催化剂)优选为醋酸钯、三二亚苄基丙酮二钯和1,1'-双(二苯膦基)二茂铁二氯化钯中的一种或几种，所述第二钯催化剂的用量优选为化合物VIII摩尔量的5～12％，更优选为10％；所述配体优选为1,1'-联萘-2,2'-双二苯膦(BINAP)、2-二环己基膦-2',6'-二甲氧基联苯和4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽中的一种或几种；所述配体和第二钯催化剂的摩尔比优选为1～3:1，更优选为2:1；所述碱试剂(记为第三碱试剂)优选为碱金属碳酸盐和碱金属叔丁醇盐中的一种或几种；所述碱金属碳酸盐优选为碳酸铯或碳酸钾，所述碱金属叔丁醇盐优选为叔丁醇钠或叔丁醇钾；所述化合物VIII和第三碱试剂的摩尔比优选为1:1～3，更优选为1:2；所述偶联反应用溶剂(记为第五溶剂)优选为二氧六环、N,N-二甲基甲酰胺和甲苯中的一种或几种；本发明对所述第五溶剂的用量没有特殊要求，能够使偶联反应顺利进行即可。在本发明中，所述偶联反应的温度优选为80～120℃，更优选为100℃，所述偶联反应的时间优选为12～24h，本发明优选通过TLC监测反应进程。
偶联反应完成后，本发明将所得产物料液和乙酸乙酯混合进行萃取，将所得有机层依次进行干燥、浓缩和柱层析分离，得到具有式I所示结构的化合物。
本发明对具有式I所示结构的化合物的药学上可接受的盐、立体异构体、水合物、溶剂合物或同位素化合物的制备方法没有特殊限定，采用本领域技术人员熟知的方法制备得到即可。
本发明还提供了一种药物组合物，包括活性成分和药学上可接受的辅料，所述药物组合物的活性成分为具有式I结构的化合物、其立体异构、药学上可接受的盐、水合物、溶剂合物或同位素化合物。本发明所述药学上可接受的辅料是指对生物不产生明显刺激且不会消除所给予的化合物的生物活性及特性的物质；在本发明中，所述药学上可接受的辅料优选包括药用载体和稀释剂中的一种或几种；本发明对所述载体和稀释剂的具体种类没有特殊要求，采用本领域技术人员熟知的即可。在本发明中，所述药物组合物中活性成分的含量优选为10～50％。
本发明还提供了上述方案所述所述式I结构的化合物、其立体异构、药学上可接受的盐、水合物、溶剂合物或同位素化合物，或上述方案所述的药物组合物在制备EED抑制剂中的应用。
本发明还提供了上述方案所述所述式I结构的化合物、其立体异构、药学上可接受的盐、水合物、溶剂合物或同位素化合物，或上述方案所述的药物组合物在制备治疗肿瘤药物的应用。
在本发明中，所述肿瘤选自皮肤癌、膀胱癌、卵巢癌、乳腺癌、胃癌、前列腺癌、结肠癌、肺癌、骨癌、脑癌、直肠癌、食管癌、舌癌、胃癌、肾癌、肾实质癌、宫颈癌、子宫体癌、子宫内膜癌、睾丸癌、泌尿癌、黑素癌、星型细胞癌、脑膜瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴性白血病、慢性淋巴性白血病、急性骨髓性白血病，慢性粒细胞白血病、成人T细胞白血病淋巴瘤、肝细胞癌、支气管癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、多发性骨髓瘤、基底细胞瘤、精原细胞瘤、横纹肌肉瘤、软骨肉瘤、肌肉瘤或纤维肉瘤。在本发明中，所述预防和/或治疗肿瘤药物的剂型优选包括片剂或针剂等。
下面将结合本发明中的实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-8-(甲基磺酰基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-3-胺(化合物1)的制备：
第一步：将化合物1a(26.2g，100.0mmol)、化合物1b(32.7g，100.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(7.3g，10mmol)、K2CO3(27.6g，200.0mmol)溶于二氧六环(300mL)和水(100mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(500mL)提取，有机层干燥，浓缩得柱层析分离，得到灰色固体即为化合物1c，产量为31.2g，收率81.4％。
第二步：将上述得到化合物1c(30.6g，80.0mmol)溶于乙醇(1000mL)和水(200mL)，加入氯化铵(42.4g，800.0mmol)和铁粉(44.8g，800.0mmol)，升温至80℃搅拌反应10h，TLC检测反应，反应完毕后过滤，滤液用乙酸乙酯(500mL×2)提取，有机层浓缩，柱层析分离，得到类白色固体即为化合物1d，产量为18.2g，收率为70.9％。
第三步：将化合物1d(18.0g，56.1mmol)溶于甲苯(300mL)中，室温下加入间氯过氧苯甲酸(19.3g，112.0mmol)，搅拌反应3h，加入DIEA(28.9g，224.0mmol)和化合物1e(9.4g，56.1mmol)，升温至100℃反应12h，TLC检测反应，完毕后加入200mL水，过滤，滤饼干燥得到黄色固体即为化合物1f，产量为16.8g，收率为68.1％。
第四步：将化合物1f(16.0g，36.4mmol)溶于乙腈(200mL)中，室温下滴加三氯氧磷(27.8g，181.8mmol)，滴加完毕后升至80℃，保温反应6h，TLC检测反应，反应完毕后减压除去溶剂，将浓缩液体倒入水中，析出固体，过滤，干燥得到黄色固体即为化合物1g，产量为14.5g，收率87.0％
第五步：将化合物1g(458mg，1.0mmol)、化合物1h(126mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体即为化合物1，产量为234mg，收率46.4％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝505.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.29(s,1H),8.56–8.51(m,1H),8.34–8.25(m,2H),7.99(d,J＝1.6Hz,1H),7.89(d,J＝1.4Hz,1H),6.93(t,J＝8.2Hz,1H),6.65(dd,J＝8.4,4.9Hz,1H),5.19(t,J＝5.5Hz,1H),5.01(d,J＝5.5Hz,2H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.97(s,3H),3.22–3.13(m,5H)。
实施例2
5-(1-环丙基-1H-吡唑-4-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-8-(甲基磺酰基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-3-胺(化合物2)的制备：
将化合物1g(458mg，1.0mmol)、化合物2a(152mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)、K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体即为化合物2，产量为311mg，收率58.7％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝531.1。1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.29(s,1H),8.56–8.52(m,1H),8.34–8.25(m,2H),8.09(d,J＝1.4Hz,1H),7.94(d,J＝1.4Hz,1H),6.93(t,J＝8.2Hz,1H),6.65(dd,J＝8.4,4.9Hz,1H),5.16–5.10(m,1H),5.01(d,J＝5.5Hz,2H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.85(p,J＝5.7Hz,1H),3.22–3.13(m,5H),0.90(dddd,J＝10.3,8.4,5.7,1.8Hz,2H),0.80(dddd,J＝10.6,8.8,5.7,1.8Hz,2H)。
实施例3
N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-5-(1-甲基-1H-吡喏-3-基)-8-(甲基磺酰基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-3-胺(化合物3)的制备：
/>
将化合物1g(458mg，1.0mmol)、化合物3a(125mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)、K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体即为化合物3，产量为344mg，收率68.4％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝504.1,1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.25(s,1H),8.51(d,J＝2.1Hz,1H),8.35–8.25(m,2H),7.05(d,J＝1.4Hz,1H),6.99–6.87(m,3H),6.65(dd,J＝8.4,4.9Hz,1H),5.02(s,3H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.66(s,3H),3.22–3.13(m,5H).
实施例4
N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-5-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-8-(甲基磺酰基)嘧啶并[4，5-c]喹啉-3-胺(化合物4)的制备：
将化合物1g(458mg，1.0mmol)、化合物4a(126mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)、K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体即为化合物4，产量为298mg，收率59.1％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝505.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.29(s,1H),8.55(d,J＝2.1Hz,1H),8.31–8.21(m,2H),8.01(s,1H),7.85(s,1H),6.97–6.89(m,1H),6.65(dd,J＝8.4,5.1Hz,1H),5.42(t,J＝5.5Hz,1H),5.04(d,J＝5.5Hz,2H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.73(s,3H),3.22–3.14(m,5H).
实施例5
N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-8-(甲基磺酰基)-5-(1H-吡咯-2-基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-3-胺(化合物5)的制备：
将化合物1g(458mg，1.0mmol)、化合物5a(111mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)、K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体即为化合物5，产量为321mg，收率65.6％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝490.1,1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.59–9.54(m,2H),8.83(d,J＝2.1Hz,1H),8.52(d,J＝8.4Hz,1H),8.32(dd,J＝8.4,2.2Hz,1H),8.14(dt,J＝7.9,1.9Hz,1H),7.14(dd,J＝7.8,4.1Hz,1H),7.00–6.90(m,2H),6.64(dd,J＝8.4,4.9Hz,1H),5.18–5.12(m,1H),5.03(d,J＝5.5Hz,2H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.22–3.14(m,5H).
实施例6
N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-8-(甲基磺酰基)-5-(吡啶-2-基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-3-胺(化合物6)的制备：
将化合物1g(458mg，1.0mmol)、化合物6a(123mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)、K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体即为化合物6，产量为308mg，收率61.5％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝502.1,1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.59(s,1H),8.84(d,J＝2.3Hz,1H),8.60(dd,J＝3.5,1.5Hz,1H),8.53(d,J＝8.5Hz,1H),8.33(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),8.22(dd,J＝7.9,1.4Hz,1H),7.69(td,J＝7.4,1.5Hz,1H),7.09(ddd,J＝7.5,3.5,1.5Hz,1H),6.93(t,J＝8.2Hz,1H),6.63(dd,J＝8.4,5.1Hz,1H),5.58(t,J＝5.5Hz,1H),5.04(d,J＝5.5Hz,2H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.22–3.14(m,5H).
实施例7
N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-5-(2-二甲氧基吡啶-4-基)-8-(甲基磺酰基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-3-胺(化合物7)的制备：
将化合物1g(458mg，1.0mmol)、化合物7a(153mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)、K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体即为化合物7，产量为278mg，收率52.4％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝532.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.34(s,1H),8.55(dd,J＝1.9,0.8Hz,1H),8.45(d,J＝5.6Hz,1H),8.33–8.25(m,2H),7.56(dd,J＝5.7,2.2Hz,1H),7.39(d,J＝2.2Hz,1H),6.93(t,J＝8.2Hz,1H),6.65(dd,J＝8.4,4.9Hz,1H),5.00(d,J＝5.5Hz,2H),4.82(t,J＝5.5Hz,1H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.99(s,3H),3.22–3.13(m,5H).
实施例8
N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-8-(甲基磺酰基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-3-胺(化合物8)的制备：
第一步：将化合物1a(26.2g，100.0mmol)、化合物8a(31.7g，100.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(7.3g，10mmol)、K2CO3(27.6g，200.0mmol)溶于二氧六环(300mL)和水(100mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(500mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体即为化合物8b，产量为29.8g，收率79.9％。
第二步：将上述得到化合物8b(29.0g，77.7mmol)溶于乙醇(1000mL)和水(200mL)，加入氯化铵(41.2g，777mmol)和铁粉(43.5g，777mmol)，升温至80℃搅拌反应10h，TLC检测反应，反应完毕后过滤，滤液用乙酸乙酯(500mL×2)提取，有机层浓缩，柱层析分离，得到类白色固体即为化合物8c，产量为18.6g，收率为87.0％。
第三步：将化合物8c(18.0g，65.5mmol)溶于甲苯(300mL)中，室温下加入间氯过氧苯甲酸(22.5g，131.0mmol)，搅拌反应3h，加入DIEA(33.8g，262.0mmol)和化合物1e(10.9g，65.5mmol)，升温至100℃反应12h，TLC检测反应，完毕后加入200mL水，过滤，滤饼干燥得到黄色固体即为化合物8d，产量为17.2g，收率为61.1％。
第四步：将中间体8d(17.0g，39.5mmol)溶于乙腈(200mL)中，室温下滴加三氯氧磷(30.2g，197.7mmol)，滴加完毕后升至80℃，保温反应6h，TLC检测反应，反应完毕后减压除去溶剂，将浓缩液体倒入水中，析出固体，过滤，干燥得到黄色固体即为化合物8e，产量为15.4g，收率87.0％
第五步：将化合物8e(448mg，1.0mmol)、化合物1h(126mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体即为化合物8，产量为255mg，收率51.6％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝495.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.30(s,1H),8.39(d,J＝1.8Hz,1H),8.08(d,J＝8.4Hz,1H),7.99(d,J＝1.5Hz,1H),7.89(d,J＝1.4Hz,1H),7.63(dd,J＝8.4,1.8Hz,1H),6.97–6.90(m,1H),6.65(dd,J＝8.4,4.9Hz,1H),5.06–4.97(m,3H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.97(s,3H),3.16(t,J＝5.0Hz,2H).
实施例9
5-(1-1-环丙基-1H-吡唑-4-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-8-(三氟甲基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-3-胺(化合物9)的制备：
将化合物8e(448mg，1.0mmol)、化合物2a(152mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)、K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体即为化合物9，产量为276mg，收率53.1％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝521.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.30(s,1H),8.39(d,J＝1.7Hz,1H),8.12–8.06(m,2H),7.93(d,J＝1.4Hz,1H),7.64(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),6.93(t,J＝8.2Hz,1H),6.65(dd,J＝8.4,5.1Hz,1H),5.01(s,3H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.85(p,J＝5.7Hz,1H),3.16(t,J＝5.0Hz,2H),0.89(dddd,J＝10.1,8.2,5.7,1.8Hz,2H),0.84–0.75(m,2H).
实施例10
N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-5-(1-甲基-1H-吡喏-3-基)-8-(三氟甲基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-3-胺(化合物10)的制备：
将化合物8e(448mg，1.0mmol)、化合物3a(125mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)、K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体即为化合物10，产量为301mg，收率61.1％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝494.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.27(s,1H),8.37(d,J＝1.8Hz,1H),8.09(d,J＝8.4Hz,1H),7.63(dd,J＝8.4,1.8Hz,1H),7.01(d,J＝1.5Hz,1H),6.99–6.90(m,3H),6.65(dd,J＝8.4,5.1Hz,1H),5.08–4.97(m,3H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.65(s,3H),3.16(t,J＝5.0Hz,2H).
实施例11
N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-5-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-8-(三氟甲基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-3-胺(化合物11)的制备：
将化合物8e(448mg，1.0mmol)、化合物4a(126mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)、K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体即为化合物11，产量为288mg，收率58.3％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝495.1，1H NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.01(s,1H),8.40(d,J＝2.0Hz,1H),8.09(d,J＝8.4Hz,1H),8.02(s,1H),7.85(s,1H),7.62(dd,J＝8.4,1.8Hz,1H),6.93(t,J＝8.2Hz,1H),6.65(dd,J＝8.4,5.1Hz,1H),5.40(t,J＝5.5Hz,1H),5.04(d,J＝5.6Hz,2H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.73(s,3H),3.16(t,J＝4.9Hz,2H).
实施例12
N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-5-(1H-吡咯-2-基)-8-(三氟甲基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-3-胺(化合物12)的制备：
将化合物8e(448mg，1.0mmol)、化合物5a(111mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)、K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体即为化合物12，产量为293mg，收率61.2％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝480.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.60–9.54(m,2H),8.67(d,J＝1.8Hz,1H),8.40(d,J＝8.4Hz,1H),8.13(dt,J＝7.9,1.7Hz,1H),7.86(dd,J＝8.4,1.8Hz,1H),7.14(dd,J＝7.7,4.0Hz,1H),7.00–6.90(m,2H),6.64(dd,J＝8.4,4.9Hz,1H),5.06–4.96(m,3H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.17(t,J＝5.0Hz,2H).
实施例13
N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-5-(吡啶-2-基)-8-(三氟甲基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-3-胺(化合物13)的制备：
将化合物8e(448mg，1.0mmol)、化合物6a(123mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)、K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体即为化合物13，产量为311mg，收率63.3％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝492.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.60(s,1H),8.69(d,J＝2.0Hz,1H),8.58(dd,J＝3.5,1.5Hz,1H),8.38(d,J＝8.4Hz,1H),8.23(dd,J＝7.9,1.4Hz,1H),7.88(dd,J＝8.4,1.8Hz,1H),7.69(td,J＝7.6,1.5Hz,1H),7.09(ddd,J＝7.5,3.5,1.5Hz,1H),6.97–6.90(m,1H),6.63(dd,J＝8.4,4.9Hz,1H),5.58(t,J＝5.5Hz,1H),5.04(d,J＝5.5Hz,2H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.16(t,J＝4.9Hz,2H).
实施例14
N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-5-(2-二甲氧基吡啶-4-基)-8-(三氟甲基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-3-胺(化合物14)的制备：
将化合物8e(448mg，1.0mmol)、化合物7a(153mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)、K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体即为化合物14，产量为335mg，收率64.3％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝522.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.35(s,1H),8.44(d,J＝5.6Hz,1H),8.39(d,J＝1.7Hz,1H),8.11(d,J＝8.6Hz,1H),7.64(dd,J＝8.4,1.8Hz,1H),7.56(dd,J＝5.7,2.2Hz,1H),7.36(d,J＝2.3Hz,1H),6.93(t,J＝8.2Hz,1H),6.65(dd,J＝8.4,4.9Hz,1H),4.99(d,J＝5.5Hz,2H),4.81(t,J＝5.5Hz,1H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.99(s,3H),3.16(t,J＝5.0Hz,2H).
实施例15
8,9-二氟-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-3-胺(化合物15)的制备：
第一步：将化合物1a(26.2g，100.0mmol)、化合物15a(28.5g，100.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(7.3g，10mmol)、K2CO3(27.6g，200.0mmol)溶于二氧六环(300mL)和水(100mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(500mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体即为化合物15b，产量为27.9g，收率81.8％。
第二步：将上述得到化合物15b(27.0g，79.2mmol)溶于乙醇(1000mL)和水(200mL)，加入氯化铵(42.0g，792.0mmol)和铁粉(44.4g，792.0mmol)，升温至80℃搅拌反应10h，TLC检测反应，反应完毕后过滤，滤液用乙酸乙酯(500mL×2)提取，有机层浓缩，柱层析分离，得到类白色固体即为化合物15c，产量为19.5g，收率为88.2％。
第三步：将化合物15c(19.0g，68.1mmol)溶于甲苯(300mL)中，室温下加入间氯过氧苯甲酸(23.4g，136.0mmol)，搅拌反应3h，加入DIEA(35.1g，272.4mmol)和化合物1e(11.4g，68.1mmol)，升温至100℃反应12h，TLC检测反应，完毕后加入200mL水，过滤，滤饼干燥得到黄色固体即为化合物15d，产量为16.1g，收率为59.4％。
第四步：将化合物15d(16.0g，37.7mmol)溶于乙腈(200mL)中，室温下滴加三氯氧磷(28.8g，188.4mmol)，滴加完毕后升至80℃，保温反应6h，TLC检测反应，反应完毕后减压除去溶剂，将浓缩液体倒入水中，析出固体，过滤，干燥得到黄色固体即为化合物15e，产量为12.9g，收率82.2％
第五步：将化合物15e(416mg，1.0mmol)、化合物1h(126mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(500mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体即为化合物15，产量为321mg，收率63.7％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝463.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.45(s,1H),8.08(d,J＝1.4Hz,1H),8.03(d,J＝1.4Hz,1H),7.95(dd,J＝8.0,5.0Hz,1H),7.75(dd,J＝7.9,5.1Hz,1H),6.97–6.89(m,1H),6.64(dd,J＝8.4,4.9Hz,1H),5.04(d,J＝5.5Hz,2H),4.76(t,J＝5.5Hz,1H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.98(s,3H),3.17(t,J＝5.0Hz,2H).
实施例16
5-(1-环丙基-1H-吡唑-4-基)-8,9-二氟-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-3-胺(化合物16)的制备：
将化合物15e(416mg，1.0mmol)、化合物2a(152mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体即为化合物16，产量为337mg，收率75.2％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝489.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.17(s,1H),8.15(d,J＝1.4Hz,1H),7.94(d,J＝1.4Hz,1H),7.57(ddd,J＝13.1,8.0,5.1Hz,2H),6.93(t,J＝8.2Hz,1H),6.65(dd,J＝8.4,5.1Hz,1H),5.01(d,J＝5.5Hz,2H),4.78(t,J＝5.5Hz,1H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.81(p,J＝5.7Hz,1H),3.16(t,J＝5.0Hz,2H),0.89(dddd,J＝10.1,8.2,5.7,1.8Hz,2H),0.84–0.75(m,2H).
实施例17
8,9-二氟-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-5-(1-甲基-1H-吡喏-3-基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-3-胺(化合物17)的制备：
将化合物15e(416mg，1.0mmol)、化合物3a(125mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体，即为化合物17，产量为311mg，收率67.5％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝462.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.37(s,1H),7.95(dd,J＝7.9,5.0Hz,1H),7.74(dd,J＝8.1,4.9Hz,1H),7.10(d,J＝1.4Hz,1H),6.97–6.89(m,2H),6.64(dd,J＝8.4,4.9Hz,1H),6.28(dd,J＝4.3,1.6Hz,1H),5.05(d,J＝5.5Hz,2H),4.90(t,J＝5.5Hz,1H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.69(s,3H),3.18(t,J＝4.9Hz,2H).
实施例18
8,9-二氟-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基l)-5-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-3-胺(化合物18)的制备：
将化合物15e(416mg，1.0mmol)、化合物4a(126mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体，即为化合物18，产量为325mg，收率70.3％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝463.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.47(s,1H),8.05(s,1H),7.98–7.87(m,2H),7.75(dd,J＝8.1,4.9Hz,1H),6.93(t,J＝8.2Hz,1H),6.64(dd,J＝8.4,4.9Hz,1H),5.23(t,J＝5.5Hz,1H),5.00(d,J＝5.5Hz,2H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.74(s,3H),3.16(td,J＝4.9,3.1Hz,2H).
实施例19
8,9-二氟-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-5-(1H-吡咯-2-基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-3-胺(化合物19)的制备：
将化合物15e(416mg，1.0mmol)、化合物5a(111mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体，即为化合物19，产量为282mg，收率63.1％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝448.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.91(t,J＝2.1Hz,1H),9.46(s,1H),8.15(dt,J＝7.7,1.7Hz,1H),7.94(dd,J＝8.0,5.0Hz,1H),7.74(dd,J＝7.9,5.1Hz,1H),7.12(dd,J＝7.9,4.0Hz,1H),7.00–6.90(m,2H),6.64(dd,J＝8.4,4.9Hz,1H),5.04(d,J＝5.5Hz,2H),4.96–4.90(m,1H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.18(t,J＝4.9Hz,2H).
实施例20
8,9-二氟-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-5-(吡啶-2-基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-3-胺(化合物20)的制备：
将化合物15e(416mg，1.0mmol)、化合物6a(123mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体，即为化合物20，产量为312mg，收率67.8％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝460.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.49(s,1H),8.57(dd,J＝3.5,1.5Hz,1H),8.21(dd,J＝7.9,1.5Hz,1H),7.96(dd,J＝8.0,5.0Hz,1H),7.79–7.65(m,2H),7.11(ddd,J＝7.5,3.5,1.5Hz,1H),6.93(t,J＝8.2Hz,1H),6.63(dd,J＝8.4,5.1Hz,1H),5.31(t,J＝5.5Hz,1H),5.04(d,J＝5.5Hz,2H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.18(t,J＝4.9Hz,2H).
实施例21
8,9-二氟-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-5-(2-二甲氧基吡啶-4-基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-3-胺(化合物21)的制备：
将化合物15e(416mg，1.0mmol)、化合物7a(153mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体，即为化合物21，产量为319mg，收率65.1％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝490.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.40(s,1H),8.46(d,J＝5.6Hz,1H),7.95(dd,J＝8.0,5.0Hz,1H),7.73–7.58(m,3H),6.97–6.90(m,1H),6.64(dd,J＝8.4,4.9Hz,1H),5.02(d,J＝5.5Hz,2H),4.89(t,J＝5.5Hz,1H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.99(s,3H),3.16(t,J＝5.0Hz,2H).
实施例22
3-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[4,5-c]喹啉-8-甲酰胺(化合物22)的制备：
第一步：将化合物1a(26.2g，100.0mmol)、化合物22a(29.2g，100.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(7.3g，10mmol)、K2CO3(27.6g，200.0mmol)溶于二氧六环(300mL)和水(100mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(500mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体，即为化合物22b，产量为26.8g，收率77.0％。
第二步：将上述得到化合物22b(26.0g，74.7mmol)溶于乙醇(1000mL)和水(200mL)，加入氯化铵(39.6g，747.0mmol)和铁粉(41.8g，747.0mmol)，升温至80℃搅拌反应10h，TLC检测反应，反应完毕后过滤，滤液用乙酸乙酯(500mL×2)提取，有机层浓缩，柱层析分离，得到类白色固体，即为化合物22c，产量为17.2g，收率为80.5％。
第三步：将化合物22c(17.0g，59.4mmol)溶于甲苯(300mL)中，室温下加入间氯过氧苯甲酸(20.4g，118.9mmol)，搅拌反应3h，加入DIEA(30.7g，237.8mmol)和化合物1e(9.9g，59.4mmol)，升温至100℃反应12h，TLC检测反应，完毕后加入200mL水，过滤，滤饼干燥得到黄色固体，即为化合物22d，产量为16.7g，收率为69.4％。
第四步：将化合物22d(16.0g，39.5mmol)溶于乙腈(200mL)中，室温下滴加三氯氧磷(30.2g，197.5mmol)，滴加完毕后升至80℃，保温反应6h，TLC检测反应，反应完毕后减压除去溶剂，将浓缩液体倒入水中，析出固体，过滤，干燥得到黄色固体，即为化合物22e，产量为13.4g，收率80.2％
第五步：将化合物22e(423mg，1.0mmol)、化合物1h(126mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)、K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(500mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体，即为化合物22，产量为276mg，收率58.7％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝470.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.30(s,1H),8.64(d,J＝2.2Hz,1H),8.31(d,J＝8.4Hz,1H),8.13(dd,J＝8.4,2.2Hz,1H),8.00(d,J＝1.4Hz,1H),7.89(d,J＝1.4Hz,1H),7.52(s,2H),6.98–6.91(m,1H),6.68(dd,J＝8.4,5.1Hz,1H),4.96(d,J＝5.5Hz,2H),4.79(t,J＝5.5Hz,1H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.97(s,3H),3.17(t,J＝5.0Hz,2H).
实施例23
5-(1-环丙基-1H-吡唑-4-基)-3-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-8-甲酰胺(化合物23)的制备：
将化合物22e(423mg，1.0mmol)、化合物2a(152mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)、K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体，即为化合物23，产量为282mg，收率57.0％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝496.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.30(s,1H),8.61(d,J＝2.1Hz,1H),8.26(d,J＝8.4Hz,1H),8.21–8.14(m,2H),8.00(d,J＝1.4Hz,1H),7.51(s,2H),6.94(t,J＝8.2Hz,1H),6.65(dd,J＝8.4,4.9Hz,1H),5.06–4.98(m,3H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.82(p,J＝5.7Hz,1H),3.16(t,J＝5.0Hz,2H),0.90(dddd,J＝10.2,8.4,5.7,1.8Hz,2H),0.80(dddd,J＝10.6,9.0,5.7,1.8Hz,2H).
实施例24
3-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-5-(1-甲基-1H-吡咯-3-基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-8-甲酰胺(化合物24)的制备：
将化合物22e(423mg，1.0mmol)、化合物3a(125mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)、K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体，即为化合物24，产量为299mg，收率63.9％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝469.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.26(s,1H),8.60(d,J＝2.1Hz,1H),8.32(d,J＝8.4Hz,1H),8.15(dd,J＝8.4,2.2Hz,1H),7.52(s,2H),7.03(d,J＝1.5Hz,1H),6.97–6.86(m,2H),6.65(dd,J＝8.4,4.9Hz,1H),6.17(dd,J＝4.4,1.5Hz,1H),5.01(d,J＝2.0Hz,3H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.65(s,3H),3.17(t,J＝5.0Hz,2H).
实施例25
3-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-5-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-8-甲酰胺(化合物25)的制备：
将化合物22e(423mg，1.0mmol)、化合物4a(126mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)、K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体，即为化合物25，产量为269mg，收率57.4％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝470.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.02(s,1H),8.64(d,J＝2.1Hz,1H),8.32(d,J＝8.4Hz,1H),8.18(dd,J＝8.4,2.2Hz,1H),8.02(s,1H),7.85(s,1H),7.53(s,2H),6.97–6.90(m,1H),6.65(dd,J＝8.4,5.1Hz,1H),5.38(t,J＝5.5Hz,1H),5.04(d,J＝5.5Hz,2H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.73(s,3H),3.17(t,J＝5.0Hz,2H).
实施例26
3-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-5-(1H-吡咯-2-基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-8-甲酰胺(化合物26)的制备：
将化合物22e(423mg，1.0mmol)、化合物5a(111mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)、K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体，即为化合物26，产量为249mg，收率54.8％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝455.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.67(t,J＝2.1Hz,1H),9.58(s,1H),8.91(d,J＝2.3Hz,1H),8.47(d,J＝8.4Hz,1H),8.22(dd,J＝8.4,2.2Hz,1H),8.14(dt,J＝7.9,1.7Hz,1H),7.53(s,2H),7.14(dd,J＝7.9,4.0Hz,1H),7.00–6.90(m,2H),6.64(dd,J＝8.4,4.9Hz,1H),5.06–4.96(m,3H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.18(t,J＝4.9Hz,2H).oo
实施例27
3-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-5-(吡啶-2-基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-8-甲酰胺(化合物27)的制备：
将化合物22e(423mg，1.0mmol)、化合物6a(123mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)、K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体，即为化合物27，产量为295mg，收率63.3％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝467.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.60(s,1H),9.00(d,J＝2.3Hz,1H),8.58(dd,J＝3.5,1.5Hz,1H),8.48(d,J＝8.6Hz,1H),8.27–8.16(m,2H),7.69(td,J＝7.7,1.5Hz,1H),7.53(s,2H),7.10(ddd,J＝7.3,3.6,1.6Hz,1H),6.97–6.89(m,1H),6.63(dd,J＝8.4,5.1Hz,1H),5.40(t,J＝5.5Hz,1H),5.04(d,J＝5.5Hz,2H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.17(t,J＝5.0Hz,2H).
实施例28
3-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-5-(2-甲氧基吡啶-4-基)嘧啶并[4,5-c]喹啉-8-甲酰胺(化合物28)的制备：
将化合物22e(423mg，1.0mmol)、化合物7a(153mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)、BINAP(124mg，0.2mmol)、K2CO3(276mg，2.0mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)中，升温至100℃，搅拌反应12h，TLC检测反应，反应完毕后加乙酸乙酯(50mL)，有机层干燥、浓缩、柱层析分离，得到灰色固体，即为化合物28，产量为281mg，收率56.7％。表征数据如下：ESI(+)m/z＝497.1，1H-NMR(500MHz,d6-DMSO)δ9.35(s,1H),8.62(d,J＝2.1Hz,1H),8.45(d,J＝5.7Hz,1H),8.28(d,J＝8.4Hz,1H),8.17(dd,J＝8.4,2.2Hz,1H),7.58–7.49(m,3H),7.40(d,J＝2.3Hz,1H),6.93(t,J＝8.2Hz,1H),6.65(dd,J＝8.4,4.9Hz,1H),5.00(d,J＝5.5Hz,2H),4.89–4.82(m,1H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.99(s,3H),3.16(t,J＝5.0Hz,2H).
实施例29生物学评价
对化合物1～化合物28进行生物学评价，并采用EED226作为对照，具体步骤如下：将待测化合物用DMSO溶解，取1.5μL化合物母液移动至198.5μL反应缓冲液(25mM HEPES(pH8.0)，50mM NaCl，0.015％Tween 20，0.5％BSA)中混匀，再用含有0.75％DMSO的上述缓冲液3倍梯度稀释，同一化合物设置9个不同的测试浓度，取5μL不同浓度梯度的化合物至384孔板，每个浓度梯度设置2个平行重复。用上述缓冲液稀释带有His6标签的全长EED蛋白至60nM，以及生物素标记的多肽片段H3K27me3至75nM。分别转移5μL浓度为75nM多肽片段以及5μL的60nm蛋白至含有化合物的检测孔内，薄膜封住检测板，室温孵育30min。最后AlphaScreen方法检测，临用前，镍鳌合受体珠与链霉抗生素供体珠以1:1的比例混入上述反应缓冲液，再向各检测孔中加入5μL上述预混的检测液，供体珠与受体珠最终浓度为5μg/mL，锡箔遮封住检测板，室温避光放置1h，使用Specctramax读取信号，通过计算得到化合物IC50。测试结果见表2：
表2化合物1～化合物28的生物学评价结果
化合物 IC50(EED)nM 化合物 IC50(EED)nM
1 67.2 16 23.5
2 100.3 17 18.6
3 98.2 18 27.6
4 32.5 19 57.6
5 12.3 20 98.3
6 8.5 21 95.5
7 33.4 22 77.2
8 23.6 23 56.6
9 55.6 24 88.4
10 67.9 25 73.5
11 112.2 26 23.6
12 138.3 27 11.2
13 5.5 28 43.2
14 78.4 EED226 31.0
15 88.5
根据表2可以看出，本发明提供的化合物1～化合物28均能够起到抑制EED活性的作用，并且化合物5、化合物6、化合物8、化合物13、化合物16、化合物18、化合物16和化合物27的IC50值均低于对照品EED226，说明这些化合物具有比EED226更好的抑制活性。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种具有式I结构的化合物或其药学上可接受的盐；
式I中：R1选自取代或不取代的芳杂环基；所述芳杂环基选自吡唑基、吡咯基、咪唑基或吡啶基，所述取代的芳杂环基中的取代基选自链烷基、环烷基或烷氧基；所述链烷基和烷氧基的碳原子数为1～5，所述环烷基的碳原子数为3～5；R2选自F、Cl、Br、CH3SO2、CONH2或CF3；R3选自H、F、Cl、Br。
2.根据权利要求1所述的具有式I结构的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述具有式I所示结构的化合物为以下化合物中的至少一种：
3.权利要求1～2任一项所述具有式I所示结构的化合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将化合物II、化合物III、钯催化剂、碱试剂和溶剂混合，进行偶联反应，得到化合物IV；
(2)将所述化合物IV、还原剂和溶剂混合，进行还原反应，得到化合物V；
(3)将所述化合物V、氧化剂和溶剂混合，进行氧化反应，然后将所得氧化反应液与化合物VI和碱试剂混合，进行缩合反应，得到化合物VII；
(4)将所述化合物VII、三氯氧磷和第四溶剂混合，进行氯化反应，得到化合物VIII；
(5)将所述化合物VIII、化合物IX、钯催化剂、配体、碱试剂和溶剂混合，进行偶联反应，得到具有式I所示结构的化合物；
所述化合物II、化合物III、化合物IV、化合物V、化合物VI、化合物VII和化合物VIII的结构式依次如下所示：
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中使用的钯催化剂选自四三苯基膦钯、醋酸钯、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯和三(二亚苄基丙酮)二钯中的一种或几种；所述步骤(1)中使用的碱试剂选自碱金属碳酸盐、碱金属氢氧化物、碱金属磷酸盐和碱金属叔丁醇盐中的一种或几种；
所述步骤(2)中使用的还原剂选自铁粉-氯化铵、铁粉-乙酸、铁粉-盐酸和锌粉-氯化铵中的一种或几种；
所述步骤(3)中使用的氧化剂选自间氯过氧苯甲酸和过氧化氢中的一种或两种；
所述步骤(3)中使用的碱试剂选自三乙胺、二异丙基乙胺和4-二甲基吡啶中的一种或几种；
所述步骤(5)中使用的钯催化剂选自醋酸钯、三二亚苄基丙酮二钯和1,1'-双(二苯膦基)二茂铁二氯化钯中的一种或几种；
所述步骤(5)中使用的配体选自1,1'-联萘-2,2'-双二苯膦、2-二环己基膦-2',6'-二甲氧基联苯和4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽中的一种或几种；
所述步骤(5)中使用的碱试剂选自碱金属碳酸盐和碱金属叔丁醇盐中的一种或几种。
5.一种药物组合物，其特征在于，包括活性成分和药学上可接受的辅料，所述药物组合物的活性成分为具有式I结构的化合物或其药学上可接受的盐；
式I中：R1选自取代或不取代的芳杂环基；所述芳杂环基选自吡唑基、吡咯基、咪唑基或吡啶基，所述取代的芳杂环基中的取代基选自链烷基、环烷基或烷氧基；所述链烷基和烷氧基的碳原子数为1～5，所述环烷基的碳原子数为3～5；R2选自F、Cl、Br、CH3SO2、CONH2或CF3；R3选自H、F、Cl、Br。
6.权利要求1～2任意一项所述式I结构的化合物或其药学上可接受的盐，或权利要求5所述的药物组合物在制备EED抑制剂中的应用。
7.权利要求1～2任意一项所述式I结构的化合物或其药学上可接受的盐，或权利要求5所述的药物组合物在制备预防和/或治疗肿瘤药物的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述肿瘤选自皮肤癌、膀胱癌、卵巢癌、乳腺癌、胃癌、前列腺癌、结肠癌、肺癌、骨癌、脑癌、直肠癌、食管癌、舌癌、肾癌、宫颈癌、子宫体癌、子宫内膜癌、睾丸癌、泌尿癌、黑素癌、星型细胞癌、脑膜瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴性白血病、慢性淋巴性白血病、急性骨髓性白血病、慢性粒细胞白血病、成人T细胞白血病淋巴瘤、肝细胞癌、支气管癌、多发性骨髓瘤、基底细胞瘤、精原细胞瘤、横纹肌肉瘤、软骨肉瘤、肌肉瘤或纤维肉瘤。
9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述肿瘤选自小细胞肺癌或非小细胞肺癌。
10.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述肿瘤选自肾实质癌。
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