CN102432601B - 一种芒果苷五乙酯化衍生物 - Google Patents

Abstract

本专利公开一种芒果苷五乙酯化衍生物的化学合成方法，及其抗炎、降血糖的药理作用。该衍生物的化学结构式如下：

Description

一种芒果苷五乙酯化衍生物

技术领域

本发明涉及以芒果苷为起始原料，制备一种新的有机化合物的方法，以及这一化合物在抗炎、降血糖方面的药理作用。 

技术背景

芒果苷(Mangiferin)是一种具有Xanthone结构的葡萄糖C-糖苷(分子式C₁₉H₁₈O₁₁，分子量422.34)，存在于漆树科植物芒果(Mangifera indica L)的果实、叶、树皮，百合科植物知母(Anemarrhena asphodeloides Bge.)的根茎、地上部分，鸢尾科植物射干(Belamcanda chinensis(L.)DC.)的花、叶等植物中。 

芒果苷分子具有较大的平面结构，溶解度较差(在纯水及pH 1.3～7.4的缓冲溶液中平均溶解度＜1mg·mL^-1)，而经换算人的口服有效剂量为630mg，溶解单剂量芒果苷需要的胃肠道的液体体积＞250mL，根据生物药剂学分类系统(Biopharmaceutics classification system，BCS)的定义，芒果苷属于一种溶解性差的药物。此外，芒果苷在正丁醇-水系统中分配系数(Oil/water partition coefficient，P)非常小(pH1～4时，P值约为2.3，当pH值大于6.86时，P值仅为0.01)，通常P值与胃肠通透性相关性较好，P值在100～1000时，被动吸收较好，推测芒果苷胃肠通透性较差。再者，芒果苷在小鼠体内肠道吸收效果较差，证实了芒果苷通透性差。综合芒果苷上述三方面的性质，芒果苷的低油水分配系数可能与其在小鼠体内低生物利用度直接相关，按照生物药剂学分类系统(BCS)原则，芒果苷可归类为BCS第4类药物(低溶解性-低通透性)。 

为了解决BCS第4类药物(低溶解性-低通透性)的吸收问题，国内外学者 大多选择将药物进行酯化衍生，形成脂溶性高的衍生物，从而提高药物的跨膜通透性，提高药物的吸收。 

发明内容

本发明要解决的第一个技术问题是：采用化学合成方法，制备芒果苷五 

乙酯化衍生物，其结构式如下： 

制备方法及步骤如下：在不断搅拌和冷却条件下，往乙酸酐中滴加高浓度无机酸(其中一种或几种的混合物：质量百分比浓度不低于70％的H₂SO₄、不低于30％的HCl、不低于80％的H₃PO₄)，得到溶液A；在不断搅拌和冷却条件下，将芒果苷溶解于A中，得到溶液B；将B在20-65℃环境中保温6-48小时，得到反应液C；在不断搅拌条件下，将C直接倾入水中；滤取不溶物，得到反应产物D；将D用硅胶拌样，置硅胶干柱顶上，用氯仿-乙酸乙酯-丙酮梯度洗脱，在氯仿∶乙酸乙酯∶丙酮＝7∶2∶1流分中得到结晶，即为芒果苷五乙酯化衍生物。 

本发明要解决的第二个技术问题是：芒果苷衍生物的结构确证。对衍生物的红外、紫外、氢谱、碳谱、二维谱、质谱(低、高分辨率)进行解析，确证了其结构。化合物表征数据：类白色晶体，结构疏松，略泛黄色；mp150-152℃； ¹H NMR(CDCl₃，600Hz)d：13.55(1H，s，1-OH)，7.80(1H，s，H-8)，6.84(1H，s，H-5)，6.33(1H，s，H-4)，5.43～3.90(糖上氢质子)，2.30、2.10、2.07、1.99、1.82(15H，s)。¹³C NMR(CDCl₃，125Hz)d：161.0(C-1)，104.3(C-2)，163.7(C-3)，96.0(C-4)，156.6(C-4a)，103.5(C-5)，147.7(C-6)，137.2(C-7)，113.0(C-8)，119.4(C-8a)，179.9(C-9)，155.5(C-9a)，157.8(C-10a)，73.3 (C-1′)，70.6(C-2′)，73.6(C-3′)，68.0(C-4′)，76.4(C-5′)，61.6(C-6′)，20.9、20.8、20.7、20.6、20.5(5CH₃)，171.0、170.4、169.8、169.7、169.4(5C＝O)。EI-MS：632[M]⁺，590，523，481(100)，439，397。HR-MS：632.1584，Calcd.632.1589，Calcd.for C₂₉H₂₈O₁₆。 

本发明要解决的第三个问题是：明确芒果苷五乙酯化衍生物的药理作用。采用二甲苯所致小鼠耳廓肿胀模型研究抗炎药效，结果表明，衍生物有显著的抗炎作用；采用四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠模型研究降血糖药效，结果表明，衍生物有显著的降血糖作用，对糖尿病小鼠有明显的治疗效果。 

具体实施方式

下列实施例子用于举例说明本发明，并不是对本发明保护范围的任何限制。 

实施例1：制备芒果苷五乙酯化衍生物 

在水浴中操作，在不断搅拌条件下，往250ml乙酸酐中滴加1.5ml 98％H₂SO₄，滴完后接着加入10g芒果苷；将此溶液置于40℃环境中保温，反应24小时，期间不时搅拌使芒果苷全部溶解；反应完毕，在不断搅拌条件下，将反应液直接倾入水中；滤取不溶物，得到反应产物；将反应产物用硅胶拌样，置硅胶干柱顶上，先用氯仿洗脱，接着用氯仿∶乙酸乙酯∶丙酮＝20∶1∶1洗脱，然后用氯仿∶乙酸乙酯∶丙酮＝7∶2∶1洗脱，收集流分，挥干，得粗结晶；粗结晶用甲醇重结晶2-3次，即得芒果苷五乙酯化衍生物。 

实施例2：制备芒果苷五乙酯化衍生物 

在水浴中操作，在不断搅拌条件下，往250ml乙酸酐中滴加4ml 36％HCl，滴完后接着加入10g芒果苷；将此溶液置于50℃环境中保温，反应12小时，期间不时搅拌使芒果苷全部溶解；反应完毕，在不断搅拌条件下，将反应液直接倾入水中；滤取不溶物，得到反应产物；将反应产物用硅胶拌样，置硅胶干 柱顶上，先用氯仿洗脱，接着用氯仿∶乙酸乙酯∶丙酮＝20∶1∶1洗脱，然后用氯仿∶乙酸乙酯∶丙酮＝7∶2∶1洗脱，收集流分，挥干，得粗结晶；粗结晶用甲醇重结晶2-3次，即得芒果苷五乙酯化衍生物。 

实施例3：抗炎药理实验及结果 

小鼠耳廓肿胀试验取小鼠40只，随机分为4组。设正常对照组，阿斯匹林组(0.045g/kg)，芒果苷五乙酯化衍生物大小剂量组(0.4g/kg，0.2g/kg)，每天灌胃给药1次，正常对照组给予等体积蒸馏水，连续7d。于末次给药后0.5h后，用微量移液器取20μl二甲苯滴涂于小鼠右耳，待15min后通过拉颈椎处死小鼠。立即用口径为6mm的打孔器，沿着小鼠左右耳廓相同部位打孔取材，然后用万分之一电子天平分别称重，以两耳片重量(mg)的差值作为肿胀程度指标，肿胀度＝(右耳重量-左耳重量)/右耳重量，结果见表1。 

试验结果表明，芒果苷五乙酯化衍生物具有显著的抗炎效果。 

表1抗炎试验结果 

注：经t检验，与正常对照组比较：*P＜0.05；**P＜0.01 

实施例4：降血糖药理实验及结果 

四氧嘧啶高血糖模型小鼠降糖试验：取雄性KM小鼠90只，适应性饲养1W后体重(25±2g)。按体重随机分出10只为正常对照组，剩余80只鼠为实验处理组。所有小鼠禁食不禁水12h，除正常对照组注射等体积NS外，其余各鼠尾静脉注射新鲜配制的浓度为3.5mg/ml的四氧嘧啶NS溶液(小鼠剂量35mg/kg，给药容量0.1ml/10kg)。于尾静脉注射四氧嘧啶造模5天后，禁食3h尾静脉取 血，用三诺安稳快速血糖仪测试血糖。除正常组外，其余小鼠取血糖值在11～26mmol/L之间的糖尿病模型小鼠，按血糖高低重新随机分组供试验。各鼠给药每日1次，灌胃容积统一为每次0.2ml/10g体重，正常组、模型组给等体积纯净水。疗程为14天，于第给药0天、14天测血糖值，比较各组动物血糖值及血糖下降百分率。血糖下降百分率％＝(实验前血糖值-实验后血糖值)/实验前血糖值×100％。 

动物试验显示，二甲双胍阳性药组组和芒果苷五乙酯化衍生物大、中、小剂量组，均能明显降低四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠的血糖，对动物模型的糖尿病有显著的治疗效果。 

表2降血糖试验结果 

注：经t检验，与模型组比较，*p＜0.05；**p＜0.01。 

(比较各组动物血糖值及血糖下降百分率。血糖下降百分率＝(实验前血糖值-实验后血糖值)/实验前血糖值×100％)。 

Claims (1)

1.一种具有抗炎和降血糖药理作用的化合物，其制备方法及步骤为：在不断搅拌和冷却条件下，往乙酸酐中滴加质量百分比浓度不低于70％的H₂SO₄，得到溶液A；在不断搅拌和冷却条件下，将芒果苷溶解于A中，得到溶液B；将B在30-60℃下保温6-48小时，得到反应液C；在不断搅拌条件下，将C直接倾入水中；滤取不溶物，得到反应产物D；将D用硅胶拌样，置硅胶干柱顶上，用氯仿-乙酸乙酯-丙酮梯度洗脱，在氯仿∶乙酸乙酯∶丙酮=7∶2∶1流分中得到结晶，即是所需化合物，其结构如下式：