CN102432420A - 从马缨丹中提取分离β-榄香烯的方法 - Google Patents
从马缨丹中提取分离β-榄香烯的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102432420A CN102432420A CN2011104575324A CN201110457532A CN102432420A CN 102432420 A CN102432420 A CN 102432420A CN 2011104575324 A CN2011104575324 A CN 2011104575324A CN 201110457532 A CN201110457532 A CN 201110457532A CN 102432420 A CN102432420 A CN 102432420A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- elemene
- beta
- volatile oil
- extraction
- raw material
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- OPFTUNCRGUEPRZ-QLFBSQMISA-N (-)-beta-elemene Chemical compound CC(=C)[C@@H]1CC[C@@](C)(C=C)[C@H](C(C)=C)C1 OPFTUNCRGUEPRZ-QLFBSQMISA-N 0.000 title claims abstract description 226
- OPFTUNCRGUEPRZ-UHFFFAOYSA-N (+)-beta-Elemen Natural products CC(=C)C1CCC(C)(C=C)C(C(C)=C)C1 OPFTUNCRGUEPRZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 113
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 67
- 240000006550 Lantana camara Species 0.000 title claims abstract description 59
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 106
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 claims abstract description 92
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 59
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 50
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims abstract description 20
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000007670 refining Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000000199 molecular distillation Methods 0.000 claims abstract description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 167
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 48
- 239000003921 oil Substances 0.000 claims description 41
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims description 39
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 39
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 claims description 36
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 35
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 28
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 26
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- 238000004821 distillation Methods 0.000 claims description 21
- 239000003495 polar organic solvent Substances 0.000 claims description 19
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 18
- 238000000526 short-path distillation Methods 0.000 claims description 13
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 claims description 9
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 9
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 9
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 8
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 claims description 6
- 238000005554 pickling Methods 0.000 claims description 5
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 claims description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 5
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 claims description 5
- 238000000194 supercritical-fluid extraction Methods 0.000 claims description 5
- 238000005187 foaming Methods 0.000 claims description 4
- 238000000874 microwave-assisted extraction Methods 0.000 claims description 4
- 238000007127 saponification reaction Methods 0.000 claims description 4
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000004332 silver Substances 0.000 claims description 4
- -1 silver ions Chemical class 0.000 claims description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 2
- 238000003815 supercritical carbon dioxide extraction Methods 0.000 claims 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 abstract description 8
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 abstract 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 abstract 1
- 230000001473 noxious effect Effects 0.000 abstract 1
- 238000004537 pulping Methods 0.000 abstract 1
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 abstract 1
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 50
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 50
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 20
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 19
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 11
- 229910021536 Zeolite Inorganic materials 0.000 description 10
- HNPSIPDUKPIQMN-UHFFFAOYSA-N dioxosilane;oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical compound O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O HNPSIPDUKPIQMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000010457 zeolite Substances 0.000 description 10
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 8
- 101100313763 Arabidopsis thaliana TIM22-2 gene Proteins 0.000 description 6
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 6
- 240000007311 Commiphora myrrha Species 0.000 description 5
- 235000006965 Commiphora myrrha Nutrition 0.000 description 5
- 240000009138 Curcuma zedoaria Species 0.000 description 5
- 240000004784 Cymbopogon citratus Species 0.000 description 5
- 235000017897 Cymbopogon citratus Nutrition 0.000 description 5
- 235000007265 Myrrhis odorata Nutrition 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 5
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 5
- 238000001256 steam distillation Methods 0.000 description 5
- 230000009514 concussion Effects 0.000 description 4
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 4
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003811 acetone extraction Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 3
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 239000012501 chromatography medium Substances 0.000 description 2
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 235000007639 Anthemis cotula Nutrition 0.000 description 1
- 206010065553 Bone marrow failure Diseases 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- 235000012766 Cannabis sativa ssp. sativa var. sativa Nutrition 0.000 description 1
- 235000012765 Cannabis sativa ssp. sativa var. spontanea Nutrition 0.000 description 1
- 241000530075 Clerodendrum bungei Species 0.000 description 1
- 244000185654 Dichanthium aristatum Species 0.000 description 1
- 240000003218 Eryngium foetidum Species 0.000 description 1
- 235000010283 Eryngium foetidum Nutrition 0.000 description 1
- 241000735527 Eupatorium Species 0.000 description 1
- 239000007832 Na2SO4 Substances 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000003595 Tagetes minuta Nutrition 0.000 description 1
- 235000008214 Thlaspi arvense Nutrition 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 235000009120 camo Nutrition 0.000 description 1
- 235000005607 chanvre indien Nutrition 0.000 description 1
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 239000002389 essential drug Substances 0.000 description 1
- 239000011487 hemp Substances 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000004080 punching Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
Abstract
本发明属于植物提取领域，目的是提供一种利用恶性杂草植物马缨丹为原料，从中提取分离β-榄香烯的方法。本发明方法如下：A、原料准备：以马缨丹的茎、叶为原料，鲜品打浆或干燥粉碎；B、挥发油提取：从步骤A所得原料中得到挥发油；C、柱层析：将步骤B得到的挥发油进行柱层析，收集洗脱液，除去洗脱液中的溶剂，得到β-榄香烯粗品；D、精制：将步骤B得到的挥发油或步骤C得到的粗品，采用分子蒸馏或制备型高效液相色谱系统进行精制获得高纯度的β-榄香烯。本发明提取所得β-榄香烯产品纯度高，产率高，成本低，为马缨丹开发利用和治理以及获得β-榄香烯提供一种全新的、廉价的、有效的途径。
Description
技术领域
本发明属于植物提取领域，具体涉及从植物马缨丹中提取分离β-榄香烯的方法。
背景技术
马缨丹(Lantana camara Linn.)，别名五色梅、山大丹、臭牡丹、杀虫花、毛神花、臭草、五色花、穿墙风等，为马鞭草科马缨丹属植物。该植物在我国云南、广西、四川等地分布广泛，资源极为丰富，属于热带、亚热带入侵杂草植物，给当地农牧业生产造成极大危害，对当地生态安全造成极大威胁。
β-榄香烯，拉丁名为β-Elemenum，英文名为β-elemene，化学名为(1S，2S，4R)1-甲基-1-乙烯基-2，4-二异丙烯基环己烷。结构式如下：
β-榄香烯为我国通过“七五”、“八五”、“九五”等一系列国家科技攻关计划项目，是从传统中药中自主研发出的抗肿瘤新药，已应用于临床，并被列入国家基本药物和全国医保用药目录。临床应用表明，β-榄香烯不仅具有很强的杀灭肿瘤细胞和抑制肿瘤生长作用，还可以通过激活免疫系统使机体获得明显的免疫保护效应，具有抗癌谱广、高效、无肝肾损害、无骨髓抑制、副作用少等特点，是人类今后一个时期内治疗肿瘤的首选药物，国内外市场需求量大。目前，β-榄香烯主要依赖于从中药莪术、没药、香茅、一枝黄花中提取，尚未发现有从紫茎泽兰中提取分离得到β-榄香烯的报道。由于中药莪术、没药、香茅、一枝黄花均为中药，成本相对较高，并且其中β-榄香烯的含量不高，提取纯化的成本较高，故造成该药的价格极为昂贵，严重妨碍了该药的推广应用。
本发明的发明人发现马缨丹中β-榄香烯含量和中药莪术、没药、香茅相当，而远高于一枝黄花，但马缨丹为入侵杂草植物，资源丰富，其原料成本远比这些植物低。故本发明欲提供一种从马缨丹中有效提取β-榄香烯的方法，为大幅度降低β-榄香烯的生产成本、以及开发、利用、治理马缨丹这种世界性恶性杂草植物开辟了新的途径。
发明内容
本发明所解决的技术问题是提供一种从马缨丹中提取分离β-榄香烯的方法。
经发明人检测发现：马缨丹中的β-榄香烯主要分布于其叶和茎中(占总量的90％以上)。其中，以叶中含量最高(约为0.1-0.3％)，而在根、花等其他器官中含量极低或基本没有。并且对比分析结果表明，马缨丹中β-榄香烯含量与中药莪术、没药、香茅相差不大，但远高于一枝黄花的含量。
本发明提取方法中所使用的原料主要为马缨丹的茎、叶中的至少一种或其混合，若原料中混有根、花、果实等其他器官也不会影响提取分离β-榄香烯，但会影响提取方法的收率，故优选以马缨丹兰的茎、叶中的至少一种或其混合为原料。
本发明提取方法如下：
A、原料准备：以马缨丹的茎、叶中的至少一种或其混合为原料，鲜品打浆或干燥粉碎；
B、提取挥发油：从步骤A所得原料中得到挥发油；
C、柱层析：将步骤B得到的挥发油进行柱层析，收集洗脱液，除去洗脱液中的溶剂，得到β-榄香烯粗品。
进一步的，还可以将步骤B得到的挥发油或步骤C得到的β-榄香烯粗品进行进一步精制，得到纯度更高的β-榄香烯精制品。
即精制步骤D为：将步骤B得到的挥发油或步骤C得到的β-榄香烯粗品，采用分子蒸馏或制备型高效液相色谱系统进行精制获得高纯度的β-榄香烯。
采用上述方法处理马缨丹的茎、叶步骤B提取通常可获得β-榄香烯含量大于20％的挥发油；采用柱层析等方法处理通常可获得β-榄香烯含量大于40％，甚至高达60％的β-榄香烯粗品；最终，进一步精制挥发油或β-榄香烯粗品，依据“目标含量”收集含β-榄香烯的纯化成分，通常可获得β-榄香烯含量大于90％，甚至高达98％的β-榄香烯精制品。
其中，提取挥发油时可采用以下五种方法之一提取挥发油：
方法一：水蒸气蒸馏法：
(1)经步骤A处理的原料进行常压蒸馏，得到馏出液；
(2)在馏出液中加入沸点小于60℃的非极性有机溶剂，萃取，收集上层有机相，除去上层有机相中的有机溶剂，即得挥发油。其中，蒸馏时优选以水为主要溶剂，加入提高提取系统沸点和防止皂化起泡，爆沸的材料。如，加入乙二醇是提高蒸馏恒沸液的温度，加入乙醇是消除蒸馏中产生的皂化起泡现象，加入沸石是防止蒸馏时爆沸。故可利用现有的、已知的、常规的、可预料的、具有上述功用的材料替换乙二醇、乙醇、沸石以达到相同的目的。
方法二：浸渍法：
(1)经步骤A处理的原料加入丙酮、石油醚或甲醇中的至少一种或其任意比例混合的有机溶剂浸提、过滤，得浸提液；
(2)浸提液除去溶剂后加入浓度20-80％v/v的乙醇，加入沸点小于60℃的非极性有机溶剂萃取，收集上层有机相，除去上层有机相中的有机溶剂，即得挥发油。
方法三：连续逆流提取法：
(1)经步骤A处理的原料加入丙酮、石油醚或甲醇中的至少一种或其任意比例混合的有机溶剂连续逆流提取，得提取液；
(2)去除提取液中的溶剂后加入浓度20-80％v/v的乙醇，加入沸点小于60℃的非极性有机溶剂萃取，收集上层有机相，除去上层有机相中的有机溶剂，即得挥发油。
方法四：微波萃取法：
(1)经步骤A处理的原料加入丙酮、石油醚或甲醇中的至少一种或其任意比例混合的有机溶剂，在微波萃取装置中，采用功率300-800W萃取300-800s，得提取液；
(2)提取液去除溶剂后加入浓度20-80％v/v的乙醇，加入沸点小于60℃的非极性有机溶剂萃取，收集上层有机相，除去上层有机相中的有机溶剂，即得挥发油。
方法五：超临界萃取法：
(1)经步骤A处理的原料，用超临界CO2流体萃取器进行萃取，萃取压力20-30MPa，萃取温度30-50℃，萃取时间1.5-3h，得萃取产物；
(2)萃取产物中加入浓度20-80％v/v的乙醇，加入沸点小于60℃的非极性有机溶剂萃取，收集上层有机相，除去上层有机相中的有机溶剂，即得挥发油。
上述五种挥发油提取法萃取时采用沸点小于60℃的非极性有机溶剂是因为若沸点高于60℃，除去溶剂时会将β-榄香烯一并除去，故选择沸点小于60℃的非极性有机溶剂萃取分离β-榄香烯。
其中，步骤C柱层析可采用的方法如下：
方法1：将步骤B得到的挥发油上大孔树脂层析柱，用水、甲醇、乙醇、丙酮中的至少一种或其任意比例混合的溶剂洗脱，流速为1-4％柱体积/min，收集含β-榄香烯的洗脱液，去除溶剂，加入浓度20-80％v/v的乙醇后，用沸点小于60℃的非极性有机溶剂萃取，收集上层有机相，除去上层有机相中的有机溶剂，即得β-榄香烯粗品；
或方法2：将步骤B得到的挥发油上硅胶层析柱或银离子硅胶层析柱，用石油醚洗脱，流速为1-4％柱体积/min，收集含β-榄香烯的洗脱液，除去溶剂，得到β-榄香烯粗品。
其中，获得β-榄香烯精制品时，可将步骤B得到的挥发油或步骤D得到的粗品采用下列方法之一进行精制，获得高纯度的β-榄香烯。精制时通常是依据“目标含量”收集含β-榄香烯的纯化成分，通常可获得β-榄香烯含量大于90％，甚至高达98％的β-榄香烯精制品。
方法1：分子蒸馏法时：将步骤B得到的挥发油或步骤C得到的β-榄香烯粗品进行分子蒸馏，收集β-榄香烯达到目标含量的馏出液，即得β-榄香烯精制品。
方法2：高效液相色谱系统制备法：将步骤B得到的挥发油或步骤C得到的β-榄香烯粗品通过制备型高效液相色谱系统进行分离，收集β-榄香烯达到目标含量的流出液，除去溶剂即得β-榄香烯精制品。
本发明提取方法所得β-榄香烯精品纯度至少大于90％，甚至可高达98％，产率可高达60％，为有效利用恶性杂草植物马缨丹提供了一种新的途径，更为获得β-榄香烯提供一种全新的、便宜的、有效的方法。
具体实施方式
发明人采用高效液相色谱精密测定发现：马缨丹中的β-榄香烯主要分布于其叶和茎中(占总量的90％以上)。其中，以叶中含量最高(约为0.1-0.3％)，而在根、花等其他器官中含量极低或基本没有。并且对比分析结果表明，马缨丹中β-榄香烯含量与中药莪术、没药、香茅相差不大，但远高于一枝黄花的含量。
本发明提取方法如下：
A、原料准备：以马缨丹的茎、叶中的至少一种或其混合为原料，鲜品打浆或干燥粉碎；
B、提取挥发油：从步骤A所得原料中得到挥发油；
C、柱层析：将步骤B得到的挥发油进行柱层析，收集洗脱液，除去溶剂，得到β-榄香烯粗品。
精制步骤D为：将步骤B得到的挥发油或步骤C得到的β-榄香烯粗品，采用分子蒸馏或制备型高效液相色谱系统进行精制获得高纯度的β-榄香烯。
一、提取挥发油时可采用以下五种方法之一提取挥发油：
方法一、水蒸气蒸馏法：经步骤A处理的原料加入水为主的溶剂进行常压蒸馏，得到含β-榄香烯的馏出液；在所得馏出液中加入石油醚、环己烷、正己烷、苯、乙醚等沸点小于60℃的非极性有机溶剂，萃取至少2次，收集上层有机相，除去上层有机相中的有机溶剂，即得挥发油。其中，蒸馏时优选以水为主要溶剂，加入乙二醇、乙醇。因地区原因沸点低，加入乙二醇可提高蒸馏恒沸液的温度；加入乙醇是为了消除蒸馏中产生的皂化起泡现象；还可加入沸石是以防止蒸馏时爆沸。故可利用现有的、已知的、常规的、可预料的、具有上述功用的材料替换乙二醇、乙醇、沸石以达到相同的目的。
方法二、浸渍法：经步骤A处理的原料加入丙酮、石油醚、或甲醇等有机溶剂浸提2-4次、过滤，合并提取液并去除溶剂，加入20-80％的乙醇溶液，用石油醚、环己烷、正己烷、苯、乙醚等沸点小于60℃的非极性有机溶剂萃取至少2次，收集上层有机相，除去上层有机相中的有机溶剂，即得挥发油。
方法三、连续逆流提取法：经步骤A处理的原料加入丙酮、石油醚、或甲醇等有机溶剂连续逆流提取3-4次，得到提取液。去除提取液中的溶剂，加入20-80％的乙醇溶液，用石油醚、环己烷、正己烷、苯、乙醚等沸点小于60℃的非极性有机溶剂萃取至少2次，收集上层有机相，除去上层有机相中的有机溶剂，即得挥发油。
方法四、微波萃取法：经步骤A处理的原料加入丙酮、石油醚、或甲醇等有机溶剂，在微波萃取装置中，300-800W的功率下萃取300-800s，萃取2-4次，过滤合并提取液。去除提取液中的溶剂，加入20-80％的乙醇溶液，用石油醚、环己烷、正己烷、苯、乙醚等沸点小于60℃的非极性有机溶剂萃取至少2次，收集上层有机相，除去上层有机相中的有机溶剂，即得挥发油。
方法五、超临界萃取法：经步骤A处理的原料，用超临界CO2流体萃取器进行萃取，萃取压力20-30MPa，萃取温度30-50℃，萃取时间1.5-3h。在萃取产物中，加入20-80％的乙醇溶液，用石油醚、环己烷、正己烷、苯、乙醚等沸点小于60℃的非极性有机溶剂，至少萃取2次，收集上层有机相，除去上层有机相中的有机溶剂，即得挥发油。
经比较，上述五种方法均可从原料中得到挥发油(β-榄香烯含量＞20％)。但最佳的提取方法为连续逆流提取法和水蒸气蒸馏法，其中：连续逆流提取法具有提取率高，溶剂用量较少等优点，但提取所得挥发油中β-榄香烯含量较低；水蒸气蒸馏法具有操作简便、提取所得挥发油中β-榄香烯含量较高的优点，挥发油纯度通常为30％，甚至可达40％，但提取率偏低。萃取溶剂中，因石油醚成本低、环境安全、对人体安全，优先采用石油醚为萃取溶剂。
其中，连续逆流提取条件为：加入原料量(g)3-7倍体积(mL)的丙酮做溶剂，室温下浸泡至少1h，恒温(20-30℃)气浴振荡(100-140r/min)连续逆流提取至少1次，每次不少于1.5h。优化参数为：加入原料量(g)5倍体积(mL)的丙酮做溶剂，室温下浸泡4h，恒温(25℃)气浴振荡(120r/min)连续逆流提取3次，第1次提取2.5h，第2次提取3.5h，第3次提取3h。
水蒸气蒸馏法提取条件为：取步骤A得到的原料，放入蒸馏瓶中，加入原料量(g)3-7倍量(mL)的水、1-3倍量(mL)的乙二醇、少量乙醇、沸石，加温常压蒸馏，收集80-150℃的馏出液。优化参数为：取步骤A得到的原料，放入蒸馏瓶中，加入原料量(g)5倍量(mL)的水、2倍量(mL)的乙二醇、少量乙醇、沸石，加温常压蒸馏，收集80-150℃的馏出液。
二、柱层析方法如下：
柱层析时，发明者采取硅胶、银离子硅胶、D101大孔树脂、HP20大孔树脂做层析介质均可从马缨丹的挥发油中分离得到β-榄香烯粗品，β-榄香烯纯度通常可＞40％。可采用的方法如下：
方法一、大孔树脂法：将步骤B得到的挥发油上大孔树脂层析柱，用水、甲醇、乙醇、丙酮等溶剂或其混合溶液洗脱，流速为1-4％柱体积/min，收集含β-榄香烯的洗脱液，去除溶剂，加入20-80％的乙醇溶液，用石油醚等有机溶剂萃取至少2次，分离上层有机相，除去上层有机相中的有机溶剂，即得β-榄香烯粗品。
方法二、硅胶法：将步骤B得到的挥发油上硅胶层析柱或银离子硅胶层析柱，用石油醚洗脱，流速为1-4％柱体积/min，收集含β-榄香烯的洗脱液，除去溶剂，得到β-榄香烯粗品。
具体的，优化的层析条件为：以HP20为层析介质，先后分别以2倍柱体积的蒸馏水、80％乙醇、85％乙醇、90％乙醇、95％乙醇、无水乙醇进行洗脱，流速2％柱体积/min。按此条件进行柱层析，β-榄香烯粗品的纯度＞60％，回收率＞85％。
三、精制方法如下：
精制时，发明人发现采取分子蒸馏法、高效液相色谱系统制备法均可从挥发油或粗品中，分离获得高纯度的β-榄香烯。
分子蒸馏优选的方法为：将步骤B得到的挥发油或步骤C得到的粗品进行减压分馏，收集76-78℃/40Pa的馏分，即为纯品(纯度＞90％，产率＞70％)。
高效液相色谱系统制备优选的方法之一为：将步骤B得到的挥发油或步骤C得到的粗品用下列高效液相色谱系统进行分离：岛津高效液相色谱仪LC-10A，C18制备柱(10mm×150mm)，洗脱剂为乙醇/水/乙腈＝70/20/10(V/V)，流速为2mL/min，检测波长为210nm；进样体积1mL。收集β-榄香烯流出液，按1∶1比例加入石油醚，反复萃取三次。分离合并石油醚层，加入Na2SO4干燥10-24h，60℃真空旋转抽干溶剂，得到纯品(纯度＞98％，产率＞75％)。
以下通过本发明制备实例说明本发明的有益效果。
实施例1蒸馏法从马缨丹中提取分离β-榄香烯
A、原料准备：收集马缨丹茎和叶，太阳下自然晒干，粉碎，过40目筛。
B、挥发油的提取：取步骤A得到的原料100g，放入蒸馏瓶中，加入去离子水或蒸馏水500mL、乙二醇200mL、乙醇50mL、沸石3-5粒，加温常压蒸馏，收集80-150℃的馏出液。在得到的馏出液中，按1∶1比例加入石油醚(沸程30-60℃)，反复萃取三次。分离合并石油醚层，60℃真空旋转抽干溶剂，得到挥发油(纯度＞20％)。
C、高效液相制备：将步骤B得到的挥发油用下列高效液相色谱系统进行分离：岛津高效液相色谱仪LC-10A，C18制备柱(10mm×150mm)，洗脱剂为乙醇/水/乙腈＝70/20/10(V/V)，流速为2mL/min，检测波长为210nm；进样体积1mL。收集β-榄香烯流出液，按1∶1比例加入石油醚，反复萃取三次。分离合并石油醚层，加入Na2SO4干燥10-24h，60℃真空旋转抽干溶剂，得到纯品(纯度＞95％，产率＞55％)。
实施例2蒸馏法从马缨丹中提取分离β-榄香烯
A、原料准备：收集马缨丹茎和叶，太阳下自然晒干，粉碎，过40目筛。
B、挥发油的提取：取步骤A得到的原料100g，放入蒸馏瓶中，加入去离子水或蒸馏水500mL，乙二醇200mL、乙醇50mL，沸石3-5粒，加温常压蒸馏，收集80-150℃的馏出液。在得到的馏出液中，按1∶1比例加入石油醚(沸程30-60℃)，反复萃取三次。分离合并石油醚层，60℃真空旋转抽干溶剂，得到挥发油(纯度＞30％)。
C、高效液相制备：将步骤B得到的挥发油用下列高效液相色谱系统进行分离：岛津高效液相色谱仪LC-10A，C18制备柱(10mm×150mm)，洗脱剂为乙醇/水/乙腈＝70/20/10(V/V)，流速为2mL/min，检测波长为210nm；进样体积1mL。收集β-榄香烯流出液，按1∶1比例加入石油醚，反复萃取三次。分离合并石油醚层，加入Na2SO4干燥10-24h，60℃真空旋转抽干溶剂，得到纯品(纯度＞95％，产率＞50％)。
实施例3蒸馏法从马缨丹中提取分离β-榄香烯
A、原料准备：收集马缨丹茎和叶，用粉碎机打成浆状。
B、挥发油的提取：取步骤A得到的原料100g，放入蒸馏瓶中，加入去离子水或蒸馏水500mL，乙二醇200mL、乙醇50mL，沸石3-5粒，加温常压蒸馏，收集80-150℃的馏出液。在得到的馏出液中，按1∶1比例加入苯，反复萃取三次。分离合并石油醚层，60℃真空旋转抽干溶剂，得到挥发油(纯度＞30％)。
C、柱层析：将步骤B得到的挥发油，上300mL HP20大孔树脂层析柱，先后分别以600mL的蒸馏水、80％乙醇、85％乙醇、90％乙醇、95％乙醇、无水乙醇进行洗脱，流速6mL/min。收集β-榄香烯含量＞60％的洗脱液，按1∶1比例加入石油醚(沸程30-60℃)，反复萃取三次。分离合并石油醚层，60℃真空旋转抽干溶剂，得到粗品(纯度＞60％)。
D、分子蒸馏：将步骤C得到的粗品进行减压分馏，收集76-78℃/40Pa的馏分，即为纯品(纯度＞92％，产率＞60％)。
实施例4蒸馏法从马缨丹中提取分离β-榄香烯
A、原料准备：收集马缨丹茎和叶，用粉碎机打成浆状。
B、挥发油的提取：取步骤A得到的原料100g，放入蒸馏瓶中，加入去离子水或蒸馏水500mL，乙二醇200mL、乙醇50mL，沸石3-5粒，加温常压蒸馏，收集80-150℃的馏出液。在得到的馏出液中，按1∶1比例加入环己烷，反复萃取三次。分离合并石油醚层，60℃真空旋转抽干溶剂，得到挥发油(纯度＞30％)。
C、分子蒸馏：将步骤B得到的挥发油进行减压分馏，收集76-78℃/40Pa的馏分，即为纯品(纯度＞90％，产率＞55％)。
实施例5连续逆流提取法从马缨丹中提取分离β-榄香烯
A、原料准备：收集新鲜马缨丹茎和叶，用粉碎机打成浆状。
B、连续逆流提取：取步骤A原料100g，放入三角瓶中，连续逆流提取三次，每次加入丙酮500mL，震荡(转速60-100r/min)提取4-8h，温度20-25℃。过滤合并提取液，减压浓缩除去溶剂，加入50％乙醇100mL，再用100mL石油醚(沸程30-60℃)萃取3次。分离合并石油醚层，60℃真空旋转蒸干溶剂，得到挥发油(纯度＞10％)。
C、柱层析：将步骤B得到的挥发油，上300mL HP20大孔树脂层析柱，先后分别以600mL的蒸馏水、80％乙醇、85％乙醇、90％乙醇、95％乙醇、无水乙醇进行洗脱，流速6mL/min。收集β-榄香烯含量＞60％的洗脱液，按1∶1比例加入石油醚(沸程30-60℃)，反复萃取三次。分离合并石油醚层，60℃真空旋转抽干溶剂，得到粗品(纯度＞52％)。
D、分子蒸馏：将步骤C得到的粗品进行减压分馏，收集76-78℃/40Pa的馏分，即为纯品(纯度＞90％，产率＞62％)。
实施例6连续逆流提取法从马缨丹中提取分离β-榄香烯
A、原料准备：收集新鲜马缨丹茎和叶，用粉碎机打成浆状。
B、连续逆流提取：取步骤A原料100g，放入三角瓶中，连续逆流提取三次，每次加入石油醚500mL，震荡(转速60-100r/min)提取4-8h，温度20-25℃。过滤合并提取液，减压浓缩除去溶剂，加入50％乙醇100mL，再用100mL石油醚(沸程30-60℃)萃取3次。分离合并石油醚层，60℃真空旋转蒸干溶剂，得到挥发油(纯度＞10％)。
C、柱层析：将步骤B得到的挥发油，上300mL HP20大孔树脂层析柱，先后分别以600mL的蒸馏水、80％乙醇、85％乙醇、90％乙醇、95％乙醇、无水乙醇进行洗脱，流速6mL/min。收集β-榄香烯含量＞60％的洗脱液，按1∶1比例加入石油醚(沸程30-60℃)，反复萃取三次。分离合并石油醚层，60℃真空旋转抽干溶剂，得到粗品(纯度＞52％)。
D、分子蒸馏：将步骤C得到的粗品进行减压分馏，收集76-78℃/40Pa的馏分，即为纯品(纯度＞90％，产率＞60％)。
实施例7连续逆流提取法从马缨丹中提取分离β-榄香烯
A、原料准备：收集新鲜马缨丹茎和叶，用粉碎机打成浆状。
B、连续逆流提取：取步骤A原料100g，放入三角瓶中，连续逆流提取三次，每次加入甲醇500mL，震荡(转速60-100r/min)提取4-8h，温度20-25℃。过滤合并提取液，减压浓缩除去溶剂，加入50％乙醇100mL，再用100mL石油醚(沸程30-60℃)萃取3次。分离合并石油醚层，60℃真空旋转蒸干溶剂，得到挥发油(纯度＞10％)。
C、柱层析：将步骤B得到的挥发油，上300mL HP20大孔树脂层析柱，先后分别以600mL的蒸馏水、80％乙醇、85％乙醇、90％乙醇、95％乙醇、无水乙醇进行洗脱，流速6mL/min。收集β-榄香烯含量＞60％的洗脱液，按1∶1比例加入石油醚(沸程30-60℃)，反复萃取三次。分离合并石油醚层，60℃真空旋转抽干溶剂，得到粗品(纯度＞52％)。
D、分子蒸馏：将步骤C得到的粗品进行减压分馏，收集76-78℃/40Pa的馏分，即为纯品(纯度＞90％，产率＞60％)。
实施例8连续逆流提取法从马缨丹中提取分离β-榄香烯
A、原料准备：收集新鲜马缨丹茎和叶，太阳下自然晒干，粉碎，过40目筛。
B、连续逆流提取：取步骤A原料100g，放入三角瓶中，连续逆流提取三次，每次加入甲醇500mL，震荡(转速60-100r/min)提取4-8h，温度20-25℃。过滤合并提取液，减压浓缩除去溶剂，加入50％乙醇100mL，再用100mL石油醚(沸程30-60℃)萃取3次。分离合并石油醚层，60℃真空旋转蒸干溶剂，得到挥发油(纯度＞20％)。
C、高效液相制备：将步骤B得到的挥发油用下列高效液相色谱系统进行分离：岛津高效液相色谱仪LC-10A，C18制备柱(10mm×150mm)，洗脱剂为乙醇/水/乙腈＝70/20/10(V/V)，流速为2mL/min，检测波长为210nm；进样体积1mL。收集β-榄香烯流出液，按1∶1比例加入石油醚，反复萃取三次。分离合并石油醚层，加入Na2SO4干燥10-24h，60℃真空旋转抽干溶剂，得到纯品(纯度＞95％，产率＞60％)。
实施例9浸渍法从马缨丹中提取分离β-榄香烯
A、原料准备：收集新鲜马缨丹茎和叶，太阳下自然晒干，粉碎，过40目筛。
B、浸渍法：步骤A处理的原料100g，，加入500ml丙酮浸提3次，每次2小时，过滤，合并提取液并去除丙酮，加入50％乙醇100mL，再用100mL石油醚(沸程30-60℃)萃取2次。分离合并石油醚层，60℃真空旋转蒸干溶剂，得到挥发油(纯度＞20％)。
C、高效液相制备：将步骤B得到的挥发油用下列高效液相色谱系统进行分离：岛津高效液相色谱仪LC-10A，C18制备柱(10mm×150mm)，洗脱剂为乙醇/水/乙腈＝70/20/10(V/V)，流速为2mL/min，检测波长为210nm；进样体积1mL。收集β-榄香烯流出液，按1∶1比例加入石油醚，反复萃取三次。分离合并石油醚层，加入Na2SO4干燥10-24h，60℃真空旋转抽干溶剂，得到纯品(纯度＞95％，产率＞55％)。
其中，步骤B采用石油醚或甲醇浸提时，纯品纯度及产率与采用丙酮浸提相当。
实施例10微波萃取法从马缨丹中提取分离β-榄香烯
A、原料准备：收集新鲜马缨丹茎和叶，太阳下自然晒干，粉碎，过40目筛。
B、微波萃取：步骤A处理的原料100g，，在微波萃取装置中，功率800W萃取400s，加入丙酮萃取3次，过滤合并提取液。去除提取液中的溶剂，加入50％乙醇100mL，再用100mL石油醚(沸程30-60℃)萃取2次。分离合并石油醚层，60℃真空旋转蒸干溶剂，得到挥发油(纯度＞20％)。
C、分子蒸馏：将步骤B得到的挥发油进行减压分馏，收集76-78℃/40Pa的馏分，即为纯品(纯度＞90％，产率＞55％)。
其中，步骤B采用石油醚或甲醇浸提时，纯品纯度及产率与采用丙酮浸提相当。
实施例11超临界萃取法从马缨丹中提取分离β-榄香烯
A、原料准备：收集新鲜马缨丹茎和叶，太阳下自然晒干，粉碎，过40目筛。
B、超临界萃取：步骤A处理的原料100g，，用超临界CO2流体萃取器进行萃取，控制萃取压力20-30MPa，萃取温度30-50℃，萃取时间2h。在萃取产物中，加入50％乙醇100mL，再用100mL石油醚(沸程30-60℃)萃取2次。分离合并石油醚层，60℃真空旋转蒸干溶剂，得到挥发油(纯度＞20％)。
C、分子蒸馏：将步骤B得到的挥发油进行减压分馏，收集76-78℃/40Pa的馏分，即为纯品(纯度＞90％，产率＞55％)。
Claims (10)
1.从马缨丹中提取分离β-榄香烯的方法，其特征在于：步骤如下：
A、原料准备：主要以马缨丹的茎、叶中的至少一种或其混合为原料，鲜品打浆或干燥粉碎；
B、挥发油提取：从步骤A所得原料中提取得到挥发油；
C、柱层析：将步骤B得到的挥发油进行柱层析，收集洗脱液，除去洗脱液中的溶剂，得到β-榄香烯粗品。
2.从马缨丹中提取分离β-榄香烯的方法，其特征在于：步骤如下：
A、原料准备：以马缨丹的茎、叶中的至少一种或其混合为原料，鲜品打浆或干燥粉碎；
B、挥发油提取：从步骤A所得原料中提取得到挥发油；
C、柱层析：将步骤B得到的挥发油进行柱层析，收集洗脱液，除去洗脱液中的溶剂，得到β-榄香烯粗品；
D、精制：将步骤B得到的挥发油或步骤C得到的β-榄香烯粗品，采用分子蒸馏或制备型高效液相色谱系统进行精制获得β-榄香烯精制品。
3.根据权利要求1或2所述的从马缨丹中提取分离β-榄香烯的方法，其特征在于：步骤B采用水蒸气蒸馏提取挥发油时，方法如下：
(1)经步骤A处理的原料进行常压蒸馏，得到馏出液；
(2)在馏出液中加入沸点小于60℃的沸点小于60℃的非极性有机溶剂，萃取，收集上层有机相，除去上层有机相中的有机溶剂，即得挥发油；
蒸馏时优选以水为主要溶剂，溶剂系统中加入提高溶剂系统沸点和防止皂化起泡，爆沸的材料。
4.根据权利要求1或2所述的从马缨丹中提取分离β-榄香烯的方法，其特征在于：步骤B采用浸渍法提取挥发油时，方法如下：
(1)经步骤A处理的原料加入丙酮、石油醚或甲醇中的至少一种或其任意比例混合的有机溶剂浸提、过滤，得浸提液；
(2)浸提液除去溶剂后加入浓度20-80％v/v的乙醇，加入沸点小于60℃的沸点小于60℃的非极性有机溶剂萃取，收集上层有机相，除去上层有机相中的有机溶剂，即得挥发油。
5.根据权利要求1或2所述的从马缨丹中提取分离β-榄香烯的方法，其特征在于：步骤B采用连续逆流提取法提取挥发油时，方法如下：
(1)经步骤A处理的原料加入丙酮、石油醚或甲醇中的至少一种或其任意比例混合的有机溶剂连续逆流提取，得提取液；
(2)去除提取液中的溶剂后加入浓度20-80％v/v的乙醇，加入沸点小于60℃的沸点小于60℃的非极性有机溶剂萃取，收集上层有机相，除去上层有机相中的有机溶剂，即得挥发油。
6.根据权利要求1或2所述的从马缨丹中提取分离β-榄香烯的方法，其特征在于：步骤B采用微波萃取法提取挥发油时，方法如下：
(1)经步骤A处理的原料加入丙酮、石油醚或甲醇中的至少一种或其任意比例混合的有机溶剂，在微波萃取装置中，采用功率300-800W萃取300-800s，得提取液；
(2)提取液去除溶剂后加入浓度20-80％v/v的乙醇，加入沸点小于60℃的非极性有机溶剂萃取，收集上层有机相，除去上层有机相中的有机溶剂，即得挥发油。
7.根据权利要求1或2所述的从马缨丹中提取分离β-榄香烯的方法，其特征在于：步骤B采用超临界萃取法提取挥发油时，方法如下：
(1)经步骤A处理的原料，用超临界CO2流体萃取器进行萃取，萃取压力20-30MPa，萃取温度30-50℃，萃取时间1.5-3h，得萃取产物；
(2)萃取产物中加入浓度20-80％v/v的乙醇，加入沸点小于60℃的非极性有机溶剂萃取，收集上层有机相，除去上层有机相中的有机溶剂，即得挥发油。
8.根据权利要求1或2所述的从马缨丹中提取分离β-榄香烯的方法，其特征在于：步骤C中柱层析采用如下方法分离纯化：
方法1：将步骤B得到的挥发油上大孔树脂层析柱，用水、甲醇、乙醇、丙酮中的至少一种或其任意比例混合的溶剂洗脱，流速为1-4％柱体积/min，收集含β-榄香烯的洗脱液，去除溶剂，加入浓度20-80％v/v的乙醇后，用沸点小于60℃的非极性有机溶剂萃取，收集上层有机相，除去上层有机相中的有机溶剂，即得β-榄香烯粗品；
或采用方法2：将步骤B得到的挥发油上硅胶层析柱或银离子硅胶层析柱，用石油醚洗脱，流速为1-4％柱体积/min，收集含β-榄香烯的洗脱液，除去溶剂，得到β-榄香烯粗品。
9.根据权利要求2所述的从马缨丹中提取分离β-榄香烯的方法，其特征在于：当步骤D采用分子蒸馏法时，方法如下：将步骤B得到的挥发油或步骤C得到的β-榄香烯粗品进行分子蒸馏，收集β-榄香烯达到目标含量的馏出液，即得β-榄香烯精制品。
10.根据权利要求2所述的β-榄香烯精制方法，其特征在于：当步骤D采用高效液相色谱系统制备法时，方法如下：将步骤B得到的挥发油或步骤C得到的β-榄香烯粗品通过制备型高效液相色谱系统进行分离，收集β-榄香烯达到目标含量的流出液，除去流出液中的溶剂即得β-榄香烯精制品。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201110457532.4A CN102432420B (zh) | 2011-12-31 | 2011-12-31 | 从马缨丹中提取分离β-榄香烯的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201110457532.4A CN102432420B (zh) | 2011-12-31 | 2011-12-31 | 从马缨丹中提取分离β-榄香烯的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102432420A true CN102432420A (zh) | 2012-05-02 |
| CN102432420B CN102432420B (zh) | 2014-05-07 |
Family
ID=45980816
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201110457532.4A Active CN102432420B (zh) | 2011-12-31 | 2011-12-31 | 从马缨丹中提取分离β-榄香烯的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102432420B (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103404826A (zh) * | 2013-07-03 | 2013-11-27 | 广州鹰金钱企业集团公司 | 鱼罐头调味液的微波萃取方法 |
| CN103655945A (zh) * | 2013-12-26 | 2014-03-26 | 佛山市梦莎美容化妆品有限公司 | 一种天兰草活性提取物的关键生产技术与鉴别方法 |
| CN109470810A (zh) * | 2017-09-07 | 2019-03-15 | 海南九芝堂药业有限公司 | 一种马缨丹药材的检测方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101531563A (zh) * | 2009-02-16 | 2009-09-16 | 沈阳万爱普利德医药科技有限公司 | 化学络合定向分离纯化法制备高纯度的β-榄香烯原料药 |
-
2011
- 2011-12-31 CN CN201110457532.4A patent/CN102432420B/zh active Active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101531563A (zh) * | 2009-02-16 | 2009-09-16 | 沈阳万爱普利德医药科技有限公司 | 化学络合定向分离纯化法制备高纯度的β-榄香烯原料药 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| M.KHAN ET AL.: "Chemical composition of leaf and flower essential oil of Lantana camara from India", 《FLAVOUR AND FRAGRANCE JOURNAL》 * |
| 周红等: "桂产新鲜马缨丹叶及花的香气成分的HS-SPME-GC-MS分析", 《广西大学学报：自然科学版》 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103404826A (zh) * | 2013-07-03 | 2013-11-27 | 广州鹰金钱企业集团公司 | 鱼罐头调味液的微波萃取方法 |
| CN103404826B (zh) * | 2013-07-03 | 2016-04-27 | 广州鹰金钱企业集团公司 | 鱼罐头调味液的微波萃取方法 |
| CN103655945A (zh) * | 2013-12-26 | 2014-03-26 | 佛山市梦莎美容化妆品有限公司 | 一种天兰草活性提取物的关键生产技术与鉴别方法 |
| CN109470810A (zh) * | 2017-09-07 | 2019-03-15 | 海南九芝堂药业有限公司 | 一种马缨丹药材的检测方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102432420B (zh) | 2014-05-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN109942380B (zh) | 一种利用高速逆流色谱分离纯化制备大麻二酚的方法 | |
| US10662137B2 (en) | Method for preparing high-purity cannabidiol | |
| CN102976909B (zh) | 一种从生姜中提取纯化6-姜酚的方法 | |
| CN102451235A (zh) | 油橄榄叶提取物的制备方法 | |
| CN102001947A (zh) | 一种金银花绿原酸的制备方法 | |
| CN105132172B (zh) | 一种从鸢尾根中制备烟草用鸢尾根黄酮类物质的方法 | |
| CN102060893A (zh) | 从油橄榄叶中同步制备橄榄苦苷和橄榄总黄酮的工艺方法 | |
| CN111960930A (zh) | 一种从工业大麻花叶中分离纯化大麻二酚的方法 | |
| CN102228515B (zh) | 一种分离和富集莲子心总黄酮和总生物碱的方法 | |
| CN102432420B (zh) | 从马缨丹中提取分离β-榄香烯的方法 | |
| CN102731592A (zh) | 一种从橄榄叶提取橄榄苦甙和穗花杉双黄酮的方法 | |
| CN101967119A (zh) | 一种槟榔碱的提纯方法 | |
| CN104211690B (zh) | 一种从白木香树叶中分离纯化芒果苷的方法 | |
| CN102432419B (zh) | 从紫茎泽兰中提取分离β-榄香烯的方法 | |
| CN111848358A (zh) | 一种大孔树脂富集结合动态轴向压缩柱系统制备高纯度大麻二酚的方法 | |
| CN101880301B (zh) | 一种制备芍药苷提取物的方法 | |
| CN106699819B (zh) | 五没食子酰葡萄糖化学对照品的制备方法 | |
| CN105646424A (zh) | 一种提取木犀草素的方法 | |
| CN101974008A (zh) | 小八角莲中提取纯化鬼臼毒素的工艺 | |
| CN105061455B (zh) | 一种可同时大量分离高纯度藤黄酸和新藤黄酸的方法 | |
| CN102391106A (zh) | 一种从下田菊中提取高纯度下田菊酸b的方法 | |
| CN113956228B (zh) | 一种大麻酚的提取分离方法 | |
| CN102093749A (zh) | 五味子天然色素的制备技术 | |
| CN105418384B (zh) | 一种从红花木莲中提取厚朴酚和厚朴碱的方法 | |
| CN103554202A (zh) | 一种制备芍药苷提取物的新方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20201125 Address after: 214500, 6 Industrial Park, Xinqiao Town, Taizhou, Jiangsu, Jingjiang Patentee after: Jingjiang Huatai Machinery Manufacturing Co.,Ltd. Address before: 617000 Airport Road, Panzhihua, Sichuan, No. 10 Patentee before: PANZHIHUA University |
|
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20201228 Address after: Room 1804, building 1, Tongchuang Science Park, No.5 Tianzhi Road, high tech Zone, Hefei City, Anhui Province, 230000 Patentee after: Hefei junhang Technology Information Service Co.,Ltd. Address before: 214500 No.6 Industrial Park, Xinqiao Town, Jingjiang City, Taizhou City, Jiangsu Province Patentee before: Jingjiang Huatai Machinery Manufacturing Co.,Ltd. Effective date of registration: 20201228 Address after: 214500 No.246, Xinqiao street, Xinqiao Town, Jingjiang City, Taizhou City, Jiangsu Province Patentee after: Jiangsu Longli Valve Manufacturing Co.,Ltd. Address before: Room 1804, building 1, Tongchuang Science Park, No.5 Tianzhi Road, high tech Zone, Hefei City, Anhui Province, 230000 Patentee before: Hefei junhang Technology Information Service Co.,Ltd. |
|
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20240127 Address after: No. 26 Xinqiao East Road, Xinqiao Town, Jingjiang City, Taizhou City, Jiangsu Province, 214500 Patentee after: Jingjiang Xinyi New Materials Technology Co.,Ltd. Country or region after: China Address before: 214500 No.246, Xinqiao street, Xinqiao Town, Jingjiang City, Taizhou City, Jiangsu Province Patentee before: Jiangsu Longli Valve Manufacturing Co.,Ltd. Country or region before: China |
|
| TR01 | Transfer of patent right |