CN105646424A - 一种提取木犀草素的方法 - Google Patents

Abstract

一种从含木犀草素植物如苏叶、金银花等天然药材或其提取物中分离提取高纯度木犀草素的方法，其特征在于将所用材料进行水提醇沉处理，回收乙醇得到其提取物。先用木犀草素标准品进样制备型高效液相色谱仪确定木犀草素出峰的保留时间，再将提取物溶液进样制备型高效液相色谱仪，收集与标准品木犀草素一致的保留时间组分，提取物溶液重复进样收集同一组分，低温干燥即得到高纯度木犀草素。本发明的优点是通过水提醇沉及高效液相色谱制备技术，可快速从含木犀草素植物如苏叶、金银花等天然药材或其提取物中分离提取到高纯度的木犀草素。

Description

一种提取木犀草素的方法

技术领域

本发明涉及一种从含木犀草素植物如苏叶、金银花等天然药材或其提取物中分离提取高纯度木犀草素的方法。

背景技术

木犀草素是一种天然黄酮类化合物，存在于苏叶、金银花、荆芥等天然药材及洋白菜、菜花、胡萝卜等蔬菜中，研究表明具有抗炎、抗过敏、抗肿瘤、抗氧化、保护神经系统等多种药理学作用，临床主要用于呼吸系统炎症性疾病、肿瘤疾病及心血管疾病等的治疗。

目前有关木犀草素粗体物的提取方法有酒精浸提法、甲醇浸提法等及进一步的聚酰胺层析法进行提纯。也有相关较高纯度木犀草素的提取方法，如李红霞等（中国专利申请号200910004229.1）公开了“一种分离纯化木犀草素的方法”，步骤包括乙醇粗提，聚合物制备，萃取柱纯化等，操作步骤较复杂，且需要较长的分离提取时间。

本发明以含木犀草素植物如苏叶、金银花等天然药材或其提取物为原料，通过水提醇沉及高效液相色谱制备技术等方法，可快速从中分离提取到高纯度的木犀草素。

发明内容

本发明的目的是提供了一种快速从含木犀草素植物如苏叶、金银花等天然药材或其提取物中分离提取木犀草素的工艺。

本发明的目的是由以下技术方案实现的：

一种从含木犀草素植物如苏叶、金银花等天然药材或其提取物中提取高纯度木犀草素的工艺，其步骤如下：

A.将所用材料分别进行淋洗处理、2-3次煎煮提取，合并2-3次煎煮提取的液体，得到初提物；所述的2-3次煎煮提取中，材料与水的重量比为1:10-20；所述的淋洗处理和煎煮处理均采用蒸馏水，煎煮时间为30-60min；

B.将所述的初提物进行浓缩处理，得到浓缩液；所述的浓缩药液中，材料浓度为1g/ml；所述的浓缩处理中，采用减压浓缩的方法；

C.向所述的浓缩液中加无水乙醇，得到乙醇溶液；所述乙醇溶液中，乙醇浓度为75％；将所述的乙醇溶液进行低温离心处理，得到乙醇上清液和沉淀；所述的低温离心处理中，温度为4℃，离心力为5000g，时间为30min；

D.将所述的乙醇上清液进行回收乙醇处理，得到提取物；所述的提取物中，材料浓度为1g/ml；

E.将所述的提取物用流动相配制成50-300mg/ml的提取物溶液，或材料提取物用流动相配制成5-20mg/ml的溶液，将木犀草素标准品用流动相配制成0.1mg/ml的木犀草素溶液，均过0.45μm微孔滤膜，所述的流动相为甲醇和0.2%乙酸的混合物(体积比为65：35)；

F.将木犀草素标准品进样制备型高效液相色谱仪确定木犀草素出峰的保留时间；将提取物溶液进样制备型高效液相色谱仪，收集与标准品木犀草素一致的保留时间组分，提取物溶液连续重复进样收集同一组分，低温干燥即得到高纯度木犀草素；

G..所述的制备型高效液相色谱条件是：VarianProstar210制备型高效液相色谱仪，色谱柱DynamaxHPLCcolumn,250×21.4mm,Microsorb100-8C18；流速为10ml/min，柱温25℃，检测波长为350nm；流动相为甲醇和0.2%乙酸的混合物(体积比为65：35)，提取物的进样体积为1-2ml。

具体实施方式：

实施例1：

唇形科植物中药苏叶饮片0.5kg以蒸馏水淋洗，饮片与蒸馏水的重量比为1:15，以YZN50型液体真空浓缩煎药机煎煮2次，每次时间1h，合并煎液减压浓缩至生药浓度为1g/ml。加入无水乙醇，得到乙醇浓度为75％苏叶提取液，4℃、5000g离心30min，弃沉淀，得到苏叶乙醇上清液，以YZN50型液体真空浓缩煎药机减压回收乙醇，得到苏叶浓度为1g/ml苏叶提取物。

将苏叶提取物用流动相配制成200mg/ml的苏叶提取物溶液，将木犀草素标准品用流动相配制成0.1mg/ml的木犀草素溶液，均过0.45μm微孔滤膜；将木犀草素标准品进样制备型高效液相色谱仪确定木犀草素出峰的保留时间为14.15min，将苏叶提取物溶液进样制备型高效液相色谱仪，收集与标准品木犀草素一致的保留时间组分，苏叶提取物溶液连续重复进样制备型高效液相色谱仪收集同一组分，低温干燥即得到木犀草素；

将获得的木犀草素用流动相配制成0.1mg/ml的木犀草素溶液；同时，将木犀草素标准品用流动相配制成0.1mg/ml的木犀草素溶液。将木犀草素溶液及标准品，依次进样分析型高效液相色谱仪，检测木犀草素纯度≥95%；分析型高效液相色谱仪为Agilent1100，分析色谱柱为EclipseXDB-C185μm，4.6×150mm。流速为0.8ml/min，检测波长为350nm。流动相为甲醇和0.2%乙酸的混合物(体积比为65：35)，进样体积为10μl。

Claims (2)

1.一种从含木犀草素植物如苏叶、金银花等天然药材或其提取物中提取木犀草素的方法，其特征在于：所述的方法主要涉及水提醇沉技术和高效液相色谱制备技术，与传统水提萃取等方法比较具有速度快、纯度高的特点。

2.根据权利要求1所述的一种从含木犀草素植物如苏叶、金银花等天然药材或其提取物中提取木犀草素的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：

A.将所用材料分别进行淋洗处理、2-3次煎煮提取，合并2-3次煎煮提取的液体，得到初提物；所述的2-3次煎煮提取中，材料与水的重量比为1:10-20；所述的淋洗处理和煎煮处理均采用蒸馏水，煎煮时间为30-60min；

B.将所述的初提物进行浓缩处理，得到浓缩液；所述的浓缩药液中，材料浓度为1g/ml；所述的浓缩处理中，采用减压浓缩的方法；

C.向所述的浓缩液中加无水乙醇，得到乙醇溶液；所述乙醇溶液中，乙醇浓度为75％；将所述的乙醇溶液进行低温离心处理，得到乙醇上清液和沉淀；所述的低温离心处理中，温度为4℃，离心力为5000g，时间为30min；

D.将所述的乙醇上清液进行回收乙醇处理，得到提取物；所述的提取物中，材料浓度为1g/ml；

E.将所述的提取物用流动相配制成50-300mg/ml的提取物溶液，或材料提取物用流动相配制成5-20mg/ml的溶液，将木犀草素标准品用流动相配制成0.1mg/ml的木犀草素溶液，均过0.45μm微孔滤膜，所述的流动相为甲醇和0.2%乙酸的混合物(体积比为65：35)；

F.将木犀草素标准品进样制备型高效液相色谱仪确定木犀草素出峰的保留时间；将提取物溶液进样制备型高效液相色谱仪，收集与标准品木犀草素一致的保留时间组分，提取物溶液连续重复进样收集同一组分，低温干燥即得到高纯度木犀草素；

G..所述的制备型高效液相色谱条件是：VarianProstar210制备型高效液相色谱仪，色谱柱DynamaxHPLCcolumn,250×21.4mm,Microsorb100-8C18；流速为10ml/min，柱温25℃，检测波长为350nm；流动相为甲醇和0.2%乙酸的混合物(体积比为65：35)，提取物的进样体积为1-2ml。