CN102367465A - 一种猪血蛋白肽的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种猪血蛋白肽的提取方法，采用新鲜猪血为主要原料，经过蒸煮、绞碎、配水，加入蛋白酶酶解和风味蛋白酶酶解、灭酶、经脱色、纳滤膜分离分离，将得到的滤液经喷雾干燥后即得到猪血蛋白肽。本发明方法生产周期短、成本低、对环境无污染，而且所得产品安全性高，可广泛应用于保健品、食品和药品等领域。
Description
技术领域
本发明方法涉及猪血的深加工技术领域，具体涉及一种猪血蛋白肽的提取方法，是一种以新鲜猪血为原料，利用纯生物手段获取猪血蛋白肽的方法。
背景技术
猪血是生猪屠宰过程中的一种副产品，其中含有大量蛋白质、血红素、人体生长因子和其他微量元素，营养价值十分可观。普通的食用方法只是简单的蒸煮食用，其营养很难被人体吸收利用，因此，通过生物方法酶解为小分子的寡肽肽物质，开发出对人体有益的产品具有广阔的前景。而目前有关猪血蛋白的提取方法，一般采用简单的酶解手段，然后干燥而成，口感差，盐分高，大部分用于饲料添加剂。
发明内容
本发明要解决的技术问题是针对现有技术中存在的不足，提供一种利用生物酶解手段及纳滤脱盐和浓缩技术提取出食品级猪血蛋白肽的方法。
为了为解决上述技术问题，本发明采取如下技术方案：
1）选取经检验检疫合格的新鲜猪血作为原料，在95℃-98℃条件下，蒸煮30-35min，用绞肉机煮过的血块绞碎，再加入原料重量5-6倍纯化水搅拌均匀；
2）然后升温至50-55℃，用食品级氢氧化钠调节pH 至7.8-8.3，分别加入原料重量1-2%的20U/mg的碱性蛋白酶和0.5-1%的风味蛋白酶，温度保持在50-55℃，反应4-5h，反应过程中保持体系pH值稳定，酶解完后将得到的酶解液升温至90-95℃，保持10-15min灭酶；
3）在酶解液中加入原料猪血重量1.5-2%的食品级粉末状活性炭脱色，搅拌1-1.5h,然后滤除活性炭，得滤液；
4）滤液经纳滤膜分离装置进行分离，脱盐并浓缩；
5）浓缩液干燥后即得猪血蛋白肽干品。
所述的纳滤膜分离装置所用膜孔径为1纳米。
所述的风味蛋白酶是一种端肽酶，它由筛选的经基因改造的米曲霉菌株经深层发酵生产的一种外切蛋白酶和肽酶的复合物。
所述的干燥为喷雾干燥。
与现有技术相比，本发明方法的优点和有益效果如下：
1、有效避开了普通手段所带来的环境污染，以及对猪血资源的浪费；
2、本发明的纳滤膜分离技术，对液态物料进行脱盐和浓缩，均在常温下操作、无相态变化、高效节能，并且生产过程中不产生污染；
3、本发明方法生产出来的猪血蛋白肽产品的纯度高，其总蛋白质中分子量300-1000道尔顿的肽含量达到98%以上，分子量≥1000道尔顿的在5%以内；
4、本发明方法生产出来的猪血蛋白肽的分子量小，人体容易吸收，吸收率达100%；
6、本发明方法的生产周期短、成本低、不产生任何有毒有害物质，安全，无毒副作用，采用双酶酶解技术，其产品口感好，无异味，无苦味，可广泛应用于食品、保健品、药品等领域；
7、本法反应条件温和，操作简便，进一步提高了产品的安全性和利用价值。
具体实施方式
下面通过具体的实施例对本发明方法作进一步的详细说明。
实施例1：
称取经检验检疫合格的新鲜猪血1kg作为原料，在95℃条件下，在反应釜内蒸煮30min，用绞肉机煮过的血块绞碎，再加入5kg纯化水搅拌均匀；然后升温至51℃，用食品级氢氧化钠调节pH 至7.8，分别加入原料重量10g的20U/mg的碱性蛋白酶和5g的风味蛋白酶，温度保持在51℃，反应4h，反应过程中用食品级氢氧化钠保持体系pH值稳定，酶解完后将得到的酶解液升温至90℃，保持15min灭酶；在酶解液中加入15g的食品级粉末状活性炭脱色、除腥，搅拌1h,然后滤除活性炭，得滤液；滤液用孔径为1纳米的纳滤装置脱盐、浓缩；浓缩液经喷雾干燥后即得食品级猪血蛋白肽干品。
表1 实施例1所得产品的检测报告
| 检测项目 | 国家标准规定 | 检测结果 |
| 形态 | 粉末状，无结块现象 | 粉末状，无结块 |
| 色泽 | 棕色 | 棕色 |
| 滋味与气味 | 有产品所具有的滋味与气味 | 无 |
| 杂质 | 无正常视力可见外来杂质 | 无杂质 |
| 总蛋白质 | ≥80.0% | 88.8% |
| 总蛋白质中肽（分子量300-1000道尔顿）含量 | ≥75.0% | 98.8% |
| pH值（10wt%水溶液） | 7.0-8.0 | 7.3 |
| 水分 | ≤7.0% | 3.55% |
| 灰分 | ≤10.0% | 2.60% |
| 砷含量（以As元素计） | ≤0.5mg/kg | 0.10mg/kg |
| 铅含量（以Pb元素计） | ≤0.5mg/kg | 0.13mg/kg |
| 细菌总数 | ≤30000cfu/g | 2000cfu/g |
| 大肠菌群 | ≤40MPN/100g | ＜20MPN/100g |
| 霉菌和酵母 | ≤50cfu/g | ＜20cfu/g |
| 致病菌 | 不得检出 | 未检出 |
自以上检测报告表可以看到：本工艺该批次产品无一般产品的腥味，作为食品口感好，分子量小，几乎全为短肽产品，而其他指标，也高于国家标准。
实施例2：
称取经检验检疫合格的新鲜猪血2kg作为原料，在96℃条件下，在反应釜内蒸煮32min，用绞肉机煮过的血块绞碎，再加入12kg纯化水搅拌均匀；然后升温至52℃，用食品级氢氧化钠调节pH 至8.0，分别加入原料重量20g的20U/mg的碱性蛋白酶和10g的风味蛋白酶，温度保持在52℃，反应4.5h，反应过程中用食品级氢氧化钠保持体系pH值稳定，酶解完后将得到的酶解液升温至92℃，保持14min灭酶；在酶解液中加入30g的食品级粉末状活性炭脱色、除腥，搅拌1.5h,然后滤除活性炭，得滤液；滤液用孔径为1纳米的纳滤装置脱盐、浓缩；浓缩液经喷雾干燥后即得食品级猪血蛋白肽干品。
表2 实施例2所得产品的检测报告
| 检测项目 | 国家标准规定 | 检测结果 |
| 形态 | 粉末状，无结块现象 | 粉末状，无结块 |
| 色泽 | 棕色 | 棕色 |
| 滋味与气味 | 有产品所具有的滋味与气味 | 无 |
| 杂质 | 无正常视力可见外来杂质 | 无杂质 |
| 总蛋白质 | ≥80.0% | 89.2% |
| 总蛋白质中肽（分子量300-1000道尔顿）含量 | ≥75.0% | 98.7% |
| pH值（10wt%水溶液） | 7.0-8.0 | 7.7 |
| 水分 | ≤7.0% | 3.05% |
| 灰分 | ≤10.0% | 3.50% |
| 砷含量（以As元素计） | ≤0.5mg/kg | 0.11mg/kg |
| 铅含量（以Pb元素计） | ≤0.5mg/kg | 0.12mg/kg |
| 细菌总数 | ≤30000cfu/g | 2100cfu/g |
| 大肠菌群 | ≤40MPN/100g | ＜10MPN/100g |
| 霉菌和酵母 | ≤50cfu/g | ＜20cfu/g |
| 致病菌 | 不得检出 | 未检出 |
自以上检测报告表可以看到：本工艺该批次产品无一般产品的腥味，作为食品口感好，分子量小，几乎全为短肽产品，而其他指标，也高于国家标准。
实施例3：
称取经检验检疫合格的新鲜猪血10kg作为原料，在97℃条件下，在反应釜内蒸煮33min，用绞肉机煮过的血块绞碎，再加入50kg纯化水搅拌均匀；然后升温至53℃，用食品级氢氧化钠调节pH 至8.1，分别加入原料重量100g的20U/mg的碱性蛋白酶和50g的风味蛋白酶，温度保持在53℃，反应4.5h，反应过程中用食品级氢氧化钠保持体系pH值稳定，酶解完后将得到的酶解液升温至93℃，保持12min灭酶；在酶解液中加入200g的食品级粉末状活性炭脱色、除腥，搅拌1.5h,然后滤除活性炭，得滤液；滤液用孔径为1纳米的纳滤装置脱盐、浓缩；浓缩液经喷雾干燥后即得食品级猪血蛋白肽干品。
表3 实施例3所得产品的检测报告
| 检测项目 | 国家标准规定 | 检测结果 |
| 形态 | 粉末状，无结块现象 | 粉末状，无结块 |
| 色泽 | 棕色 | 棕色 |
| 滋味与气味 | 有产品所具有的滋味与气味 | 无 |
| 杂质 | 无正常视力可见外来杂质 | 无杂质 |
| 总蛋白质 | ≥80.0% | 90.8% |
| 总蛋白质中肽（分子量300-1000道尔顿）含量 | ≥75.0% | 98.5% |
| pH值（10wt%水溶液） | 7.0-8.0 | 7.2 |
| 水分 | ≤7.0% | 4.00% |
| 灰分 | ≤10.0% | 3.60% |
| 砷含量（以As元素计） | ≤0.5mg/kg | 0.15mg/kg |
| 铅含量（以Pb元素计） | ≤0.5mg/kg | 0.10mg/kg |
| 细菌总数 | ≤30000cfu/g | 1800cfu/g |
| 大肠菌群 | ≤40MPN/100g | ＜20MPN/100g |
| 霉菌和酵母 | ≤50cfu/g | ＜20cfu/g |
| 致病菌 | 不得检出 | 未检出 |
自以上检测报告表可以看到：本工艺该批次产品无一般产品的腥味，作为食品口感好，分子量小，几乎全为短肽产品，而其他指标，也高于国家标准。
实施例4：
称取经检验检疫合格的新鲜猪血100kg作为原料，在98℃条件下，在反应釜内蒸煮35min，用绞肉机煮过的血块绞碎，再加入600kg纯化水搅拌均匀；然后升温至55℃，用食品级氢氧化钠调节pH 至8.3，分别加入原料重量1000g的20U/mg的碱性蛋白酶和500g的风味蛋白酶，温度保持在55℃，反应5h，反应过程中用食品级氢氧化钠保持体系pH值稳定，酶解完后将得到的酶解液升温至95℃，保持11min灭酶；在酶解液中加入1200g的食品级粉末状活性炭脱色、除腥，搅拌1.1h,然后滤除活性炭，得滤液；滤液用孔径为1纳米的纳滤装置脱盐、浓缩；浓缩液经喷雾干燥后即得食品级猪血蛋白肽干品。
表4实施例3所得产品的检测报告
| 检测项目 | 国家标准规定 | 检测结果 |
| 形态 | 粉末状，无结块现象 | 粉末状，无结块 |
| 色泽 | 棕色 | 棕色 |
| 滋味与气味 | 有产品所具有的滋味与气味 | 无 |
| 杂质 | 无正常视力可见外来杂质 | 无杂质 |
| 总蛋白质 | ≥80.0% | 92.3% |
| 总蛋白质中肽（分子量300-1000道尔顿）含量 | ≥75.0% | 96.5% |
| pH值（10wt%水溶液） | 7.0-8.0 | 7.5 |
| 水分 | ≤7.0% | 4.20% |
| 灰分 | ≤10.0% | 3.30% |
| 砷含量（以As元素计） | ≤0.5mg/kg | 0.18mg/kg |
| 铅含量（以Pb元素计） | ≤0.5mg/kg | 0.11mg/kg |
| 细菌总数 | ≤30000cfu/g | 1900cfu/g |
| 大肠菌群 | ≤40MPN/100g | ＜20MPN/100g |
| 霉菌和酵母 | ≤50cfu/g | ＜30cfu/g |
| 致病菌 | 不得检出 | 未检出 |
自以上检测报告表可以看到：本工艺该批次产品无一般产品的腥味，作为食品口感好，分子量小，几乎全为短肽产品，而其他指标，也高于国家标准。
本发明方法中使用的碱性蛋白酶和风味蛋白酶的酶活力分别为：20U/mg和23U/mg；纳滤膜分离装置为通用装置；使用的风味蛋白酶是一种端肽酶，它由筛选的经基因改造的米曲霉菌株经深层发酵生产的一种外切蛋白酶和肽酶的复合物。本发明方法采用双酶酶解，纳滤脱盐，可以有效克服采用简单的酶解手段，然后干燥而成的猪血蛋白肽口感差的缺点。所出产品广泛应用于营养配方食品、保健品、疗效食品、临床营养品、速溶饮品及方便食品等。特别能满足消化道蛋白酶分泌不足患者、老年人、运动员、肥胖症患者、婴儿等特殊人群的需要。它的营养价值表现在：百分之百的直接吸收，直接补充人体蛋白质，营养整合功能好，营养平衡功能。
Claims (4)
1.一种猪血蛋白肽的提取方法，其特征是包括如下步骤：
1）选取经检验检疫合格的新鲜猪血作为原料，在95℃-98℃条件下，蒸煮30-35min，用绞肉机煮过的血块绞碎，再加入原料重量5-6倍纯化水搅拌均匀；
2）然后升温至50-55℃，用食品级氢氧化钠调节pH 至7.8-8.3，分别加入原料重量1-2%的20U/mg的碱性蛋白酶和0.5-1%的风味蛋白酶，温度保持在50-55℃，反应4-5h，反应过程中保持体系pH值稳定，酶解完后将得到的酶解液升温至90-95℃，保持10-15min灭酶；
3）在酶解液中加入原料猪血重量1.5-2%的食品级粉末状活性炭脱色，搅拌1-1.5h,然后滤除活性炭，得滤液；
4）滤液经纳滤膜分离装置进行分离，脱盐并浓缩；
5）浓缩液干燥后即得猪血蛋白肽干品。
2.如权利要求1所述的猪血蛋白肽的提取方法，其特征是所述的纳滤膜分离装置所用膜孔径为1纳米。
3.如权利要求1所述的猪血蛋白肽的提取方法，其特征是所述的风味蛋白酶是一种端肽酶，它由筛选的经基因改造的米曲霉菌株经深层发酵生产的一种外切蛋白酶和肽酶的复合物。
4.如权利要求1所述的猪血蛋白肽的提取方法，其特征是所述的干燥为喷雾干燥。
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