CN101974591B - 一种酶法提取大豆肽的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种酶法提取大豆肽的方法，该方法采用大豆蛋白粉为主要原料，经过配水、加酒精和亚硫酸钠升温蒸煮、过滤、滤液加蛋白酶酶解、灭酶、脱色、膜分离，将得到的滤液经干燥后即获大豆肽。本发明方法生产周期短、成本低、不产生任何有毒有害物质，而且所得产品安全性高，可广泛应用于食品、药品、保健品和生物合成等领域。
Description
技术领域
本发明方法涉及大豆蛋白深加工技术领域，具体涉及一种酶法提取大豆蛋白肽的方法，是一种以市售的大豆蛋白粉为原料，利用生物酶酶解并利用生物酶修饰技术对蛋白肽进行修饰，从而提取大豆肽的方法。
背景技术
大豆蛋白质即大豆类产品所含的蛋白质，含量在38％左右，是谷类食物的4～5倍。大豆蛋白质的氨基酸组成与牛奶蛋白质相近，除蛋氨酸略低外，其余必需氨基酸含量均较丰富，是植物性的完全蛋白质，在营养价值上，可与动物蛋白等同。FAO/WHO(1985)人类试验结果表明，大豆蛋白必需氨基酸组成较适合人体需要，对于两岁以上的人，大豆蛋白的生理效价为100。
大豆蛋白用特殊的蛋白酶酶解后可生产分子量很小但活性很高的短肽分子，是人体细胞的重要组成部分。主要由2-10个氨基酸组成，分子量在3000以下。对生命活动发挥着极其重要的作用，在抗高血压、抗胆固醇、抗血栓形成、消除人体疲劳、保护肝脏、防止动脉硬化、增强人体体能和肌肉力量、增强人体免疫力等方面，以及对糖尿病均有显著的医疗保健作用，是老幼皆宜的功能性保健食品，安全性高，必将受到消费者的欢迎。本发明的目的旨在提高大豆蛋白的利用价值，提供一种无污染，效益高的生产大豆大豆肽的生产方法。
目前获取大豆蛋白肽的方法大多是通过以下步骤来完成：大豆蛋白粉→碱醇处理→高温蒸煮→酶解→过滤→浓缩→喷雾干燥。用到了大量的碱和有机溶剂处理，既带来了严重的环境污染和安全隐患，又破坏了蛋白质的成分；而且现有技术中没有用到膜分离技术，减少了企业的经济效益。
发明内容
针对现有技术中存在的不足，本发明的目的在于提供了一种酶法提取大豆肽的方法，是一种无需用碱处理，而是利用生物酶酶解，并进一步修饰肽键脱苦，再采用膜分离技术脱盐和浓缩，提取大豆肽的方法。
为实现上述目的，本发明的一种酶法提取大豆肽的方法的步骤如下：
1、蒸煮：称取市售大豆蛋白粉作为原料，按原料大豆蛋白粉重量的7-9倍加水，再按大豆蛋白粉重量的5-7％、1.5-2％分别加入95wt％的乙醇和亚硫酸钠搅拌均匀，90-95℃回流蒸煮3-5h；
2、蒸煮完毕，趁热过滤，降温至50-60℃，按原料大豆蛋白粉重量的2-4％加入碱性蛋白酶，调pH值为7-8，搅拌酶解4-6h，酶解过程中保持反应体系pH值稳定；再按原料大豆蛋白粉重量的1.5-2％加入风味蛋白酶，调pH值为7-8，搅拌酶解5-8h，酶解过程中保持反应体系pH值稳定；
3、将得到的酶解液升温至90-100℃，恒温灭酶10-20min；
4、将酶解液过滤，得上清液；
5、将上清液冷却至55℃，按原料大豆蛋白粉重量的2-2.5％加入粉末状活性炭，搅拌吸附1h，然后过滤除去活性炭；
6、将过滤液用膜分离技术脱盐和浓缩；
7、将浓缩液经喷雾干燥，得到产品。
本发明方法中使用的碱性蛋白酶和风味蛋白酶的酶活力分别为：25U/mg和30U/mg。
与现有技术相比，本发明方法的优点和有益效果如下：
1、有效避开了碱和大量有机溶剂处理所带来的环境污染和安全隐患；
2、采用本发明方法生产出来的大豆肽，其总蛋白质中分子量在1000道尔顿以下的肽含量达到98％以上，而小分子量的蛋白肽更利于人体吸收，本法生产的大豆肽的吸收率达90％以上，口感好，特别是在保健品方面，从而能创造更大的收益；
3、本发明方法采用活性炭脱色，既避免了有害物质在产品中的残留，又能保证产品的天然洁白度，所得产品为白色均匀粉末；
4、采用本发明方法的膜分离技术，对液态物料进行分离、浓缩和纯化，均是在常温下操作、无相态变化、高效节能，并且生产过程中不产生污染；
5、本发明生产周期短、成本低、不产生任何有毒有害物质，安全，无毒副作用，可广泛用于食品、药品、保健品和生物合成等领域。
具体实施方式
下面通过具体的实施例对本发明方法做进一步的详细说明。
实施例1：
一种酶法提取大豆肽的方法，其步骤如下：
称取市售大豆蛋白粉(蛋白质≥55％，水份≤7％，脂肪≤1％，灰分≤4％，纤维总量≤4％)1kg、加入7kg蒸馏水、55g 95wt％乙醇以及15g无水亚硫酸钠，搅拌均匀后，升温至90℃回流蒸煮5h，然后趁热过滤；再冷却滤液至50℃，然后加入20g碱性蛋白酶，用0.1M的食品级片状氢氧化钠溶液调pH至7-8，50℃搅拌酶解6h，酶解过程中用上述氢氧化钠溶液保持反应体系的pH值稳定；再加入15g的风味蛋白酶，用上述0.1M的氢氧化钠溶液保持反应体系pH值在7-8，50℃酶解8h；然后升温至90℃，保温14min灭酶；然后将酶解液过滤，得上清液；上清液冷却至55℃，加入20g粉末状活性炭，55℃搅拌吸附1h脱色，滤除活性炭；滤液经孔径为1nm的纳滤膜分离系统进行分离，脱盐并浓缩；浓缩液经喷雾干燥，得到398g白色(本发明中采用活性炭脱色，所得产品的色泽为白色，优于国家标准规定的淡黄色)粉末状大豆肽，所得产品的检测报告见表1。
表1实施例1所得产品的检测报告
实施例2：
一种酶法提取大豆肽的方法，其步骤如下：
称取市售大豆蛋白粉(蛋白质≥55％，水份≤7％，脂肪≤1％，灰分≤4％，纤维总量≤4％)2kg、加入15kg蒸馏水、100g 95wt％乙醇以及30g无水亚硫酸钠，搅拌均匀后，升温至92℃回流蒸煮4h，然后趁热过滤；再冷却滤液至55℃，然后加入60g碱性蛋白酶，用0.1M的食品级片状氢氧化钠溶液调pH至7-8，55℃搅拌酶解5h，酶解过程中用上述氢氧化钠溶液保持反应体系的pH值稳定；再加入30g风味蛋白酶，用上述0.1M的氢氧化钠溶液保持反应体系pH值在7-8，55℃酶解7h；然后升温至95℃，保温16min灭酶；然后将酶解液过滤，得上清液；上清液冷却至55℃，加入45g粉末状活性炭，55℃搅拌吸附1h脱色，滤除活性炭；滤液经孔径为1nm的纳滤膜分离系统进行分离，脱盐并浓缩；浓缩液经喷雾干燥，得到805g白色粉末状大豆肽，所得产品的检测报告见表2。
表2实施例2所得产品的检测报告
实施例3：
一种酶法提取大豆肽的方法，其步骤如下：
称取市售大豆蛋白粉(蛋白质≥55％，水份≤7％，脂肪≤1％，灰分≤4％，纤维总量≤4％)10kg、加入80kg蒸馏水、600g 95wt％的乙醇以及200g无水亚硫酸钠，搅拌均匀后，升温至93℃回流蒸煮4h，然后趁热过滤；再冷却滤液至55℃，然后加入400g碱性蛋白酶，用0.1M的食品级片状氢氧化钠溶液调pH至7-8，55℃搅拌酶解5h，酶解过程中用上述氢氧化钠溶液保持反应体系的pH值稳定；再加入200g风味蛋白酶，用上述0.1M的氢氧化钠溶液保持反应体系pH值在7-8，55℃酶解6h；然后升温至96℃，保温20min灭酶；然后将酶解液过滤，得上清液；上清液冷却至55℃，加入250g粉末状活性炭，55℃搅拌吸附1h脱色，滤除活性炭；滤液经孔径为1nm的纳滤膜分离系统进行分离，脱盐并浓缩；浓缩液经喷雾干燥，得到4.03kg白色粉末状大豆肽，所得产品的检测报告见表3。
表3实施例3所得产品的检测报告
实施例4：
一种酶法提取大豆肽的方法，其步骤如下：
称取市售大豆蛋白粉(蛋白质≥55％，水份≤7％，脂肪≤1％，灰分≤4％，纤维总量≤4％)100kg、加入900kg蒸馏水、7kg 95wt％乙醇以及1600g无水亚硫酸钠，搅拌均匀后，升温至95℃回流蒸煮3h，然后趁热过滤；再冷却滤液至60℃，然后加入3000g碱性蛋白酶，用0.1M的食品级片状氢氧化钠溶液调pH至7-8，60℃搅拌酶解4h，酶解过程中用上述氢氧化钠溶液保持反应体系的pH值稳定；再加入1600g风味蛋白酶，用上述0.1M的氢氧化钠溶液保持反应体系pH值在7-8，60℃酶解5h；然后升温至100℃，保温10min灭酶；然后将酶解液过滤，得上清液；上清液冷却至55℃，加入2.2kg粉末状活性炭，55℃搅拌吸附1h脱色，滤除活性炭；滤液经孔径为1nm的纳滤膜分离系统进行分离，脱盐并浓缩；浓缩液经喷雾干燥，得到40.8kg白色粉末状大豆肽，所得产品的检测报告见表4。
表4实施例4所得产品的检测报告
Claims (2)
1.一种酶法提取大豆肽的方法，其步骤如下：
1）、蒸煮：称取原料大豆蛋白粉，依次按原料大豆蛋白粉重量的7-9倍加水， 5-7%加95wt%的乙醇，1.5-2%加无水亚硫酸钠，然后搅拌均匀，90-95℃回流蒸煮3-5h；
2）、蒸煮完毕，趁热过滤，滤液降温至50-60℃，按原料大豆蛋白粉重量的2-4%加入25U/mg的碱性蛋白酶，调pH值为7-8，搅拌酶解4-6h，酶解过程中保持反应体系pH值稳定；再按原料大豆蛋白粉重量的1.5-2%加入30U/mg的风味蛋白酶，调pH值为7-8，搅拌酶解5-8h，酶解过程中保持反应体系pH值稳定；
3）、将得到的酶解液升温至90-100℃，保温10-20min灭酶；
4）、将酶解液过滤，得上清液；
5）、将上清液冷却至55℃，按原料大豆蛋白粉重量的2-2.5%加入粉末状活性炭，搅拌吸附1h，然后过滤除去活性炭；
6）、将过滤液用膜分离技术脱盐和浓缩；
7）、将浓缩液干燥，得到产品；
所述的膜分离采用的是孔径为1nm的纳滤膜。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的干燥为喷雾干燥。
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