CN102355889B - 基于多不饱和ω-3和ω-6脂肪酸的眼用组合物 - Google Patents

基于多不饱和ω-3和ω-6脂肪酸的眼用组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN102355889B
CN102355889B CN201080012341.0A CN201080012341A CN102355889B CN 102355889 B CN102355889 B CN 102355889B CN 201080012341 A CN201080012341 A CN 201080012341A CN 102355889 B CN102355889 B CN 102355889B
Authority
CN
China
Prior art keywords
ethyl ester
oil
omega
acid
acid ethyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201080012341.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102355889A (zh
Inventor
D·埃里奥
S·巴拉比诺
S·曼吉亚菲科
M·罗兰朵
M·G·A·赛塔
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
TRB CHEMEDICA INTERNATIONAL SA
Original Assignee
TRB CHEMEDICA INTERNATIONAL SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by TRB CHEMEDICA INTERNATIONAL SA filed Critical TRB CHEMEDICA INTERNATIONAL SA
Publication of CN102355889A publication Critical patent/CN102355889A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102355889B publication Critical patent/CN102355889B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0048—Eye, e.g. artificial tears
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N37/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
    • A01N43/02—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • A01N43/04—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom
    • A01N43/14—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom six-membered rings
    • A01N43/16—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom six-membered rings with oxygen as the ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
    • A61K31/201—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids having one or two double bonds, e.g. oleic, linoleic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
    • A61K31/202—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids having three or more double bonds, e.g. linolenic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A61K31/353—3,4-Dihydrobenzopyrans, e.g. chroman, catechin
    • A61K31/355—Tocopherols, e.g. vitamin E
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/32—Macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. carbomers, poly(meth)acrylates, or polyvinyl pyrrolidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/04—Artificial tears; Irrigation solutions

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及预防和治疗眼病理学状况尤其是炎性角膜炎和结膜炎和干眼综合征的局部用组合物，其含有作为活性成分的ω-3和ω-6型多不饱和脂肪酸，并且特别是EPA(二十碳五烯酸)，DHA(二十二碳六烯酸)和GLA(γ-亚麻酸)，与维生素E乙酸酯混合，并配制为水凝胶中的稳定组合物，也即在含水媒介物中的分散形式，所述含水媒介物含有一种或多种胶凝化聚合物。所提出的组合物特别适于用作人工泪液。

Description

基于多不饱和ω-3和ω-6脂肪酸的眼用组合物
本发明涉及眼用组合物，其基于多不饱和的ω-3和ω-6脂肪酸。更特别地，本发明涉及预防和治疗眼病理学状况尤其是炎性角膜炎和结膜炎和干眼综合征的局部用制剂，其含有作为活性成分的ω-3和ω-6型多不饱和脂肪酸，其配制为水凝胶中的稳定组合物。所提出的组合物特别适于用作人工泪液。
正如已知，眼前泪膜是包覆眼球(eyeball)以及眼球(bulbar)和睑结膜的暴露表面的复杂液体结构。上述结构由角膜上皮和多糖包被(也即，上皮细胞的糖蛋白包衣，由它们的分泌物组成)复合结构形成的固体层，与液体层也即泪膜合作形成。所述固体层允许泪膜的液体部分粘着于眼表，而所述液体层又由三个重叠层，即粘液层、含水层和脂质层所形成。
泪膜的内部粘液层由粘弹性水化糖蛋白(粘蛋白)的混合物组成，其附着至所述固体层并形成亲水表面。含水层是泪膜的中间部分，其铺展于所述亲水表面并基本上由水，有机和无机盐，糖，蛋白，酶和其它复合结构的生物聚合物(比如粘蛋白本身)所构成。在该层内溶液中的物质具有结构、渗透、缓冲和营养功能，并引起眼表组织的泪膜防御。薄外部脂质层由蜡，脂肪酸和胆甾醇酯形成，并通过控制由于蒸发的水份损失稳定化泪膜。
上述三层式结构形成复合的生理学系统，其主要功能是保护眼表，保持角膜表面水化、润滑和清洁并协作保证合适的视觉。泪膜的完美平衡和连续更新是其发挥功能的必需条件。尤其是，必须发生自泪液的恒定但并非过度的水份蒸发，以便保持其摩尔渗透压浓度为生理学水平，而作为眨眼的结果泪膜必须连续地再分布于角膜表面。
由于上述层中一种或多种的异常或不平衡，可以发生称为干眼综合征或干眼(干燥性角结膜炎)的病症，其是主要影响老年女性的慢性障碍。干眼是特征为泪膜定性和定量组成变化的多因素病理状况，其引起异物感，刺激(不适)症状，视觉干扰和泪膜不稳定，可能损伤眼表，并伴随泪膜高渗压。实际上，在罹患该病理状况的患者中，发生增加的蒸发和减少的泪液更新，结果是膜摩尔渗透压浓度增加，其水平高达330-340mOsm/l，而普通基线值为约300mOsm/l。还已知的是，干眼综合征倾向于伴发炎性现象，其自眼表扩展至泪腺并至睑板腺。
干眼综合征一般地对罹患该病的患者的生活质量有严重影响并造成大量的社会成本，由于其症状为慢性，导致工作和一般活动(读数，看电视，驾驶)的视觉能力降低，并且有必要频繁求助于眼科医师检查和医学治疗。考虑人类人口平均年龄的逐渐增加，在未来该疾病将具有不断增加的重要性。
干眼综合征的治疗主要集中于恢复泪膜，例如通过将缓释眼用插入物插入结膜袋，并且主要是用液体眼用制剂，一般地称为″人工泪液″，以滴剂形式滴注以便替换或补充天然泪液产生。在最简单的情况中，上述制剂仅具有润湿作用，原因是它们由中性且与泪液等渗的生理盐水溶液组成，其基于仅氯化钠或基于各种电解质的平衡混合物。在另外的情况下，为了克服在结膜袋中减少的滞留的缺点，并润滑组织和更有效地预防角膜上皮干燥区域形成，将用具有稠化剂功能的高分子量组分富集于泪液代用品配制剂。上述组分通常是水可溶的合成、半合成或天然来源聚合物，它们中许多比如透明质酸和纤维素衍生物就所涉及的用途已广为应用。
应注意，在泪膜外部脂质层变更或不足的情况，膜连续暴露于外界环境可以引起含水组分的蒸发，由此将眼表暴露于传染性物质，引起眼表炎症。这些机理是无水综合征临床症状和病征的基础，但是还能够发生在暴露于低湿度和低空气流环境的普通受试者中。
由于干眼综合征中普遍出现炎性因素，将化合物比如尤其是ω-3和ω-6型的多不饱和脂肪酸包括在泪液代用品制剂中是非常有意义的。正如已知，多不饱和脂肪酸或PUFA是含脂族链的羧酸化合物，在上述链中具有两个或更多个双键，其特征是起始自链末端碳原子(ω位)的第一双键位。在多不饱和脂肪酸中，ω-3(或PUFA n-3)和ω-6(或PUFA n-6)是一类必需脂肪酸，是身体正常工作所必需的。ω-3脂肪酸的实例包括α-亚麻酸(C18：3，n-3；ALA)，二十碳五烯酸(C20：5n-3；EPA)和二十二碳六烯酸(C22：6，n-3；DHA)；ω-6脂肪酸的实例包括亚油酸(C18：2，n-6；LA)和γ-亚麻酸(C18：3，n-6；GLA)。
文献中(N.L.J.Verbey，N.J.van Haeringen，P.T.V.M.de Jong.Current Eye Research，1988，7(6)549-556)报告，使用ω3和ω6型不饱和脂肪酸的眼表局部治疗有效地抑制各种过程比如白细胞浸润、新血管形成和角膜水肿，这些过程全都是炎性现象的表现。显示最具活性的脂肪酸是二十碳五烯酸(EPA，ω-3)和γ-亚麻酸(GLA，ω-6)。这些酸的作用机理与花生四烯酸在炎性级联中的作用机理有关：实际上，它们与花生四烯酸竞争地抑制前列腺素E1(PGE1)和促炎性白细胞三烯形成。
鉴于其对心血管、免疫和神经系统的有益活性以及特别是在干眼治疗中用作补充的作用，广泛地使用基于多不饱和脂肪酸的保健品添加剂，上述多不饱和脂肪酸富含来自鱼油(尤其是鲑鱼和鲱鱼油)的ω-3脂肪酸，和大部分为植物(黑醋栗，琉璃苣)来源的ω-6脂肪酸。事实上，最近的研究工作显示EPA和GLA都对干眼综合征发挥显著治疗活性(Aragona，P.，等人，Systemic omega-6 essential fatty acid treatment and PGE1 tearcontent in Sjogren’s syndrome patients.Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.，2005.46(12)：4474-9；Barabino，S.，等人，Systemic linoleic andgamma-linolenic acid therapy in dry eye syndrome with an inflammatorycomponent.Cornea，2003.22(2)：97-101；Creuzot-Gracher，C.，等人，Improvement of dry eye symptoms with polyunsaturated fatty acids.J.Fr.Ophthalmol.，200629(8)：868-73)。应注意，在眼适应症的情况下，所涉及的产品也是经口给药的产品。
尽管证实局部使用ω-3和ω-6脂肪酸引起对眼表疾患的有益效果已有约20年，目前在市场上仍无法获得含有所述脂肪酸的眼用滴剂。明显的是，这种可获得性会引起治疗干眼综合征的显著优势，首先是由于局部眼用产品与影响胃肠道的经口给药产品比较的更佳耐受性。上述无法获得现象应归咎于难于配制EPA和GLA类脂肪酸，其原因主要是这些活性成分的不良水溶解度和不良化学稳定性。
因此，作为高度亲脂和难溶于水的分子，多不饱和脂肪酸，目前是对研究者探求新的局部给药型含水眼用制剂的一项挑战。
已对长期以来用于非经肠道施用的脂质乳液进行研究以便配制数种亲脂活性成分并增强它们的眼生物利用度(T.F.Vandamme，Microemulsions as ocular drug delivery systems：recent developementsand future challenges，Prog.Retin.Eye Res.21(2002)15-34；S.Tamilvanan，R.N.et.al.，Emulsion-based delivery systems for enhanceddrug absorption，Pharm.Tech.131(2002)156-161)。正如已知，乳液是两种不可混合的液体相形成的分散系统，其经由机械搅拌来制备。由于两种液相的不同分子间存在吸引相互作用差异，两种液体接触的各点产生界面张力，由于所述张力所述两种液相倾向于相互分离，以使得接触表面最小化。通过加入至少在形成乳液的两相之一中可溶的两性分子或表面活性剂，界面张力可以得到显著降低。因此，加入适宜的表面活性剂能够避免水相与油相分离，或者至少能够减慢其分离过程。
用作医学制剂的脂质乳液，尤其是用作亲脂活性成分载体的由水包油型乳液组成的药物组合物公开于文献EP 0391369(Yissum ResarchDevelopment Company of the Hebrew University of Jerusalem，inventorsB.Simon and L.Menashe)。所述组合物包含由下述组成的油性媒介物：中链甘油三酯(MCT)，任选地与植物油例如大豆油，以及磷脂(例如，卵磷脂或大豆磷脂)和表面活性剂，尤其是非离子表面活性剂(例如，聚山梨酯80或吐温80)和离子表面活性剂(尤其是胆酸和脱氧胆酸)相组合。
据报告，描述于所引用文献中的组合物导致高稳定性的乳液，并且适于经口、非经肠道以及局部眼给药亲脂活性成分。在这些文献中，实施例描述两性霉素B和咪康唑碱。
在申请人所进行的旨在提供滴眼剂形式的基于多不饱和脂肪酸的眼用产品的研究中，已探寻了通过用专利EP 0391369的脂质乳液模型制备含有作为活性成分的二十碳五烯酸(EPA)和γ-亚麻酸(GLA)酸的组合物的可能性。综合报道的上述实验的结果(参见比较例1)已显示以该方式获得的基于ω-3和ω-6脂肪酸的乳液从物理角度来说非常不稳定，原因是它们倾向于分相；同时从化学角度来说它们也是不稳定的，原因是在冷冻贮藏(温度4℃)第一个月之后两种活性成分的含量显著地减少，这很可能是由于氧化。
由于在所进行的实验中导致EPA和GLA浓度降低的主要降解产品是氧化产品，也已尝试在氮气层下并在抗氧化剂(比如维生素E和Trolox，维生素E的水溶性衍生物)存在下通过在乳化步骤喷射氮来制备所述乳液。然而，在上述方式的情况下，乳液同样是化学上不稳定的并且在室温下贮藏1个月之后EPA和GLA的浓度降低至无法接受的值(参见比较例2)。获得的实验结果证明在室温下和在冷冻条件下都不可能将滴眼剂产品储存药物产品需要的时间间隔。
最近，国际专利申请公开No.WO 2006/007510(R.Dana等人，授予Schepens Eye Research和Johnson & Johnson Vision Care，Inc.)公开基于ω-6和ω-3脂肪酸作活性成分的局部眼用组合物，起始自所述试剂已承认的抗炎活性并且考虑长时间使用的经口给药，其可以是几乎不耐受的或不希望的。
在上述文献举例说明的制剂中，将ω-3和ω-6直接用适宜的表面活性剂比如例如聚乙氧基化的去水山梨糖醇脂肪酸酯(亦即，聚山梨醇酯比如″吐温″)和聚乙氧基化的甲基葡糖苷(比如″Glucam″)乳化。特别地，在公开的制备过程中，将第一表面活性剂加入缓冲盐水溶液，在室温下将混合物保持搅拌足以获得透明溶液的时间；然后将第二表面活性剂加入，随后，在继续混合一段时间之后，很缓慢地加入脂肪酸(或多种脂肪酸，在多于一种的情况下)。最终，加入一滴维生素E(具抗氧化剂功能)，将乳液保持继续搅拌数小时。
相同研究小组最近公开了(S.Rashid et al.，Topical Omega-3 andOmega-6 Fatty Acids for Treatment of Dry Eye.Arch.Ophthalmol.126(2)(2008)219-225)对局部给药α-亚麻酸(ALA)和亚油酸(LA)制剂在治疗干眼中的有效性的临床试验结果，其中通过将活性成分用吐温-80(2，6％)和Glucam E-20(2，6％)在水溶液中乳化获得测试制剂，正如所引用的专利文献中的报告。
然而，在专利公开WO 2006/007510或有关科学文献中都未报告所述眼用制剂中的多不饱和脂肪酸的物理稳定性，并且也未报告其化学稳定性。然而，通过本申请人进行的实验已确认，报告如下(参见比较例3)，根据上述文献教导在乳液中获得的基于EPA，DHA和GLA的制剂同样受氧化问题影响，这与之前描述的含磷脂乳液制剂中观察到的那些类似。
获得的仅通过用显著量的表面活性剂(假定其对角膜表面有毒性)的乳液的物理不稳定性，以及，主要的，有关多不饱和酸的化学不稳定性亟需替代上文描述的现有技术的新药物系统。
在针对本发明进行的研究中，已考虑亲水聚合物形成的含水水凝胶能够在悬浮液中捕捉和保持强烈疏水活性成分，而不需要求助于乳液技术。因此，根据本发明，已发现可能将某些特定的ω-3和ω-6型多不饱和脂肪酸或其适宜衍生物掺入含维生素E类(也即生育酚类及其药学上可接受的酯)抗氧化剂的溶液中，在水凝胶三维网络结构中，从而获得对在冷冻条件和在室温下贮藏都稳定的制剂，可容易地以滴眼剂形式施用的，并在眼中良好耐受。
目前在市场上的几种药物被配制为局部眼用给药的凝胶：比如Timoptol XE(Merck Sharp & Dohme)，基于噻吗洛尔马来酸盐，具有含有胶凝糖胶的胶凝化系统，以及Nyogel(Novartis)，也含有噻吗洛尔马来酸盐作为活性成分，携带于聚乙烯醇(PVA)凝胶和卡波姆974(属于羧基乙烯基聚合物类，也称为″卡波普″)中。然而，迄今这些系统仅出于改善亲水活性成分例如实际上噻吗洛尔马来酸盐生物利用度的目的加以应用以便获得持续释放递送系统，通过所述系统的使用可以减少药物的每日给药，但是它们并未用于改善亲脂活性成分稳定性的意图。
在合成中，根据本发明的眼用制剂由下述组成：作为ω-3和ω-6脂肪酸来源的油和维生素E优选乙酸酯形式在含水媒介中的微米级分散液，通过使用适宜的胶凝化聚合物获得的所述分散液。下文的实验部分将进一步表明，含有生育酚乙酸酯和作为所携带活性成分的多不饱和脂肪酸的水凝胶在贮藏的情况下令人惊讶地稳定，并保持其活性成分含量在长时间段实际上不发生改变。
应注意，由于有关活性成分由脂质分子构成，根据本发明的凝胶中眼用产品除充当抗炎产品载体之外还用于保护和整合泪膜的薄脂质层。脂质组分的整合使得可以减少泪液的过度蒸发，同时恢复外部脂质膜的保护性功能。正如已知，在炎性事件、尤其是睑板腺炎症的情况下，外部脂质膜显得发生变化且不适于抵消含水层的增加蒸发(这是在罹患干燥性角结膜炎的患者中非常频发的事件)。
因此，本发明特别涉及局部型眼用组合物含有作为活性成分的一种或多种ω-3多不饱和脂肪酸和一种或多种ω-6多不饱和脂肪酸，所述脂肪酸具有16至24个碳原子的脂族链，或其药学上可接受的衍生物，所述衍生物选自其与C1-C6烷基的酯，其甘油三酯和其磷脂，在含维生素E或其药学上可接受的酯的溶液中，所述溶液呈水凝胶中的分散形式，所述水凝胶基于含有一种或多种胶凝化聚合物的含水媒介物。
在根据本发明的制剂中，维生素E可以是其类别中八种组分中任一种，α-，β-，γ-，δ-生育酚以及α-，β-，γ-，δ-生育三烯酸，但是鉴于其较广的分布优选α-维生素E。在相应酯中，除琥珀酸酯或长链酸酯之外，最方便且最广泛的产品是乙酸酯。本发明制剂的优选抗氧化剂是α-生育酚乙酸酯，其与相应α-生育酚相比对局部眼用给药来说耐受更好。
需重点注意的是，本文的配制剂中α-生育酚乙酸酯可以大量使用，这不同于可乳化量非常低的典型乳液配制剂。在眼表，α-生育酚乙酸酯通过水解提供α-生育酚(维生素E)，其除具有强抗氧化剂效果之外还是COX-2抑制剂，负责合成地诺前列酮(PGE2)。正如已知，后者在炎症中起重要作用。此外，维生素E还能够抑制负责泪分泌减少的白细胞介素-1形成。
根据本发明的某些特定实施方式，所述ω-3和ω-6脂肪酸各自具有两个或更多个双键和长度18至22个碳原子的脂族链，以及式COOR的羧基末端，其中R可以是氢或线性或支化的C1-C6烷基。此外，R基团的碳原子可以是手性。
端基R优选选自乙基，丙基和异丁基，因此所得化合物是相应多不饱和脂肪酸的乙基，丙基或异丁基酯。
特别地，作为ω-3活性成分，根据本发明的优选组合物在α-生育酚乙酸酯溶液中(该溶液又分散于水凝胶媒介物中)含有二十碳五烯酸(EPA)，二十二碳六烯酸(DHA)或其混合物，或其中之一或两者各自的C1-C6烷基酯，或其中之一或两者各自的甘油三酯或一种或多种各自的磷脂。
类似地，根据本发明的又一优选实施方式，作为ω-6活性成分，本发明组合物在α-生育酚乙酸酯溶液中(该溶液又分散于水凝胶媒介物中)含有γ-亚麻酸(GLA)或其C1-C6烷基酯，或其各自的甘油三酯或磷脂。
优选，根据本发明的眼用组合物含有作为活性成分的EPA，DHA和GLA，或它们的乙基酯，它们的甘油三酯或它们的磷脂。
富含ω-6类(比如GLA)酸的多不饱和脂肪酸来源可以选自植物油的组，其包括：
亚麻籽油，琉璃苣油，麦芽油，大麻籽油，橄榄油，花生油，黑加仑油和大豆油。
富含ω-3类(比如EPA和DHA)酸的多不饱和脂肪酸来源可以在鱼油中以高浓度容易地发现，并且所述鱼油可以选自：
鲑鱼油，鲭油，多脂鱼(例如，沙丁鱼和沙丁鱼)油，鳞虾油及其混合物。
尤其是，鳞虾油是萃取自小甲壳动物(磷虾)的油，磷虾是一类浮游生物，尤其是大量集中生活在极地和冷水域的一种磷虾。与鱼油类似，所述油特别富含ω-3脂肪酸以及磷脂-缀合的ω-3脂肪酸，主要是磷脂酰胆碱(因此，其在膳食补充剂领域常常称为海产卵磷脂)。
ω-3类的脂肪酸通常以40至50％的百分比包含于上述油中，并且还存在于作为ω-6脂肪酸来源的上述植物油中。
尤其是，EPA，GLA和DHA的药物用途可以通过具有高纯度的原料来实施。这需要将所述脂肪酸分离自鱼油和/或植物油的脂肪酸混合物，使其达到EPA和GLA分别90％和70％的纯度。目前已知用于该意图的方法包括：萃取，分子蒸馏和低温结晶。
因此，根据本发明的某些优选实施方式，将制剂中作为活性成分含有的多不饱和ω-3和ω-6脂肪酸包含于一种或多种植物油和/或一种或多种鱼油，又与它们可溶于其中的维生素E抗氧化剂混合，将混合物分散于含水凝胶中的微米级微滴中。优选，植物油选自亚麻籽油，琉璃苣油，麦芽油，大麻籽油，橄榄油，花生油，黑加仑油和大豆油，而鱼油选自鲑鱼油，鲭油，多脂鱼油，鳞虾油及其混合物。
在根据本发明的组合物中，ω-3与ω-6的比率可以是20∶1至1∶20，优选1∶10至10∶1。在尤其优选的组合物中，(EPA+DHA)与GLA的重量比是4∶1至1∶4。
参见下述实施例将更清楚的是，在ω-3和ω-6油性混合物中的维生素E量优选不小于50％重量，在某些优选的配制剂中其占50％至75％重量。基于任选酯化的维生素E的含有多不饱和脂肪酸的制剂可以容易地分布在水凝胶中，所述制剂在其中稳定地分散不发生任意分相，尤其是其继续保持作为溶液的完整性，并因此保持了化学稳定性。含有多不饱和的ω3和6脂肪酸的维生素E乙酸酯溶液的分散液可以令人惊讶地含相对总制剂多至25％重量的所述油性溶液。根据本发明，α-生育酚乙酸酯预先与ω-3和ω-6来源混合，其混合比可以是4∶1至1∶4，优选3∶1至1∶3，和更优选3∶1至1∶1，在制剂中的最终浓度可以是0.1％至20％。
用于根据本发明的水凝胶制剂的胶凝化聚合物优选是已用于一般临床实践的产品，尤其是泪液代用品的组分。所述组分选自不改变泪膜定性组成的产品，并且此外可以具有除多不饱和脂肪酸的抗炎性作用之外辅剂作用。
在可以使用的胶凝化聚合物中，对于本发明眼用组合物优选考虑，羧基乙烯基聚合物(称为卡波普或卡波姆)，透明质酸及其与碱金属和碱土金属的盐，纤维素酯和醚(比如羟丙基纤维素，羟基丙基甲基-纤维素，等。)，黄原胶，藻酸和藻酸盐和胶凝糖，也可相互组合。然而，出于本发明意图也可使用，用于人工泪液配制剂中适于避免含水泪层过度蒸发的其它胶凝化聚合物。
在根据本发明眼用组合物的优选实施方式中，所述胶凝化聚合物属于各种方式交联的羧基乙烯基聚合物称为卡波普(或卡波姆)类。尤其是，在基于EPA和GLA或EPA，DHA和GLA作为主要活性成分的组合物中，使用卡波普980或卡波普974是特别有利的，其浓度范围是总组合物的0.01％至5％重量，优选约0.2％重量，本文描述了其中某些实例。
根据本发明的组合物还可以包含一种或多种高分子乳化剂，例如选自丙烯酸聚合物(比如已知为商品名″Pemulen″的产品，是丙烯酸和长链烷基甲基丙烯酸与季戊四醇的烯丙基酯交联的高分子量共聚物)和泊洛沙姆(嵌段共聚物聚氧乙烯-聚氧丙烯，比如称为″普流罗尼克″的产品)。在根据本发明的基于EPA和GLA或EPA，DHA和GLA的优选组合物，Pemulen优选以总制剂0.001％至2％，优选0.007％重量的浓度使用。
一般地，本发明组合物还可以包含pH调节剂，缓冲液和螯合剂比如EDTA，和渗透剂，它们选自目前用于制药学工艺中的那些。在根据本发明的优选组合物中，使用其量适于获得稍低渗透的制剂的渗透剂比如甘油，该特征可用于抵消眼表上皮的功能不适和解剖学不适。实际上，在过度蒸发或减少的泪产生的情况下，盐浓度的增加引起泪膜摩尔渗透压浓度的增高，从而影响眼表。
最终，根据本发明的某些特定实施方式，根据本发明的多不饱和脂肪酸眼用制剂，除了生育酚乙酸酯之外，还可以含有一种或多种其它的抗氧化剂。
有关制备过程，已知的是，在制备水凝胶期间添加各种赋形剂和活性成分的顺序可以影响组合物本身的许多物理和化学特征，比如粘度、颗粒尺寸、活性成分的分散度以及系统均匀性。在各种可能的配制程序中，下述是最佳的一种：
溶解胶凝化聚合物(例如卡波普)；
加入渗透剂；
可能的溶解高分子乳化剂(例如Pemulen)；
加入多不饱和脂肪酸已与维生素E优选乙酸酯形式混合的混合物；
加入缓冲剂(例如磷酸缓冲剂)；
加入NaOH进行胶凝化。
全部添加在机械搅拌下，优选于200rpm进行。
正如前文所指，根据本发明的多不饱和脂肪酸维生素E溶液分散于水凝胶的眼用组合物，比根据现有技术乳液中的组合物显著地更加贮藏稳定。参见根据本发明优选实施方式的制剂，其包含EPA的乙基酯和乙基酯GLA作为活性成分和α-生育酚乙酸酯作为抗氧化剂，卡波普作为胶凝化聚合物和甘油作为渗透剂，实验显示其具有出人意料的贮藏产品稳定性。
在相同实验条件下，EPA和GLA在乳液中的制剂显示快速降解动力学，导致在1个月之后活性成分浓度平均已为95％，尽管所述制剂已处于氮下并且存在抗氧化剂。同样出人意料的是，现有技术乳液，在低温(4℃)贮藏条件下，比根据本发明储存在25℃的水凝胶更不稳定。
据信，相对现有技术乳液的稳定性，ω-3和ω-6脂肪酸维生素E溶液分散于水凝胶的更佳稳定性是由于，与本发明产品中暴露于氧化的表面相比，经分散油相的乳液微滴(纳米尺寸)表面暴露于氧化要高数千倍。实际上，能够调节形成产品必需的搅拌，以获得约3μm，优选不小于1μm平均尺寸的微滴。在这种数字下，由于多不饱和脂肪酸的维生素E溶液暴露于与水凝胶的界面的高表面，降解现象变得与此有关。因此，分散相在高分子水凝胶中的平均微滴尺寸高于1μm，优选2至5μm。
根据本发明的组合物能够原样用作水凝胶形式，或者它们能够掺入由凝胶、软膏剂、霜剂或脂质体组成的媒介物或载体，或者掺入用于局部型眼用制剂或眼用给药的任意适宜基质，亦即条件是所述系统保持并且不破坏ω3和ω6脂肪酸的维生素E乙酸酯溶液的均匀性。
本发明的具体特征及其优势，在参照下述举例说明的详细描述、本发明实验结果以及与现有技术比较之后，将变得更加明显。某些实验结果也示于附图中，其中：
图1显示直方图，其是对保持在冷冻条件(4℃)下的EPA和GLA在含磷脂乳液中的制剂进行的化学稳定性研究的结果；
图2显示在用根据本发明水凝胶制剂治疗的患者中第0天和第7天的破裂(break-up)时间(BUT)，与含磷脂乳液中的商业泪液代用品也即Lipimix(Tubilux，Italy)比较；
图3显示用Schirmer I试验测量的在用根据本发明水凝胶制剂治疗的患者中第0天和第7天泪分泌，与图2的相同商业产品(含磷脂乳液中的泪液代用品)比较。
在根据本发明的水凝胶系统中配制实施例，其中ω-3和ω-6脂肪酸为各自的乙基酯(EE)形式，将其报告如下。
实施例1
含EPA和GLA的水凝胶
在根据本发明的配制剂中，使用90％纯的EPA和70％纯的GLA，都是乙醇酯形式。所用成分如下：
  组分   ％w/w   功能
  EPA EE   0.40   活性成分
  GLA EE   0.10   活性成分
  α-生育酚乙酸酯   0.50   抗氧化剂
  卡波普980   0.20   胶凝剂
  甘油   1.15   渗透剂
  NaOH   0.07   pH调节剂
  磷酸氢二钠   0.10   pH调节剂
  水，用于可注射制剂   QSP 100   水相
pH＝6.90  mOsm＝155
根据上述程序进行制备。
实施例2
含EPA和GLA，加入Pemulen的水凝胶
为了进行制备，遵循先前的实施例的相同程序。
  组分  ％w/w   功能
  EPA EE  0.40   活性成分
  GLA EE  0.10   活性成分
  α-生育酚乙酸酯 0.30 抗氧化剂
  卡波普980  0.20   胶凝剂
  甘油  1.15   渗透剂
  Pemulen  0.007   高分子乳化剂
  NaOH  0.07   pH调节剂
  磷酸氢二钠  0.10   pH调节剂
  水，用于可注射制剂  QSP 100   水相
pH＝6.96 mOsm＝165
实施例3-7
含EPA、DHA和GLA，加入Pemulen的水凝胶
在下述实施例的制剂中，ω-3多不饱和脂肪酸EPA和DHA，和ω-6多不饱和酸GLA全部以相应乙基酯形式使用。它们可以全部比例与维生素E乙酸酯混合，并且以不同的比率配制于油相中。
随后，根据预先描述的程序，将维生素E乙酸酯中的脂肪酸溶液以各种比例分布在卡波普980/Pemulen水凝胶中，确定油性溶液分散在凝胶中而不存在分相，继续保持溶液完整性，以微米尺寸微滴分散在凝胶中。
各总体组合物，全部在水凝胶中含1％重量油相，具有pH＝7，摩尔渗透压浓度＝155mOsm/kg而油微滴平均尺寸为3μm。
物理特征和稳定性研究
可将水相分散于凝胶中并在媒介物粘度高到在其中阻断(block)油微滴的条件下稳定地保持。本发明进行的研究显示，凝胶能够″捕捉″有用量的由多不饱和ω-3/ω-6脂肪酸的α-生育酚乙酸酯溶液组成的油相，并且保持其物理和化学稳定性。
描述于实施例1-7的所配制的凝胶，在11200g离心力下离心15分钟之后，在经分散的油相与起分散作用的水凝胶相之间不显示任意分相。涉及检测可能分相的光学手段测量也确认该系统出人意料的物理稳定性。
化学稳定性
在温度25℃贮藏1个月之后，包含于实施例1产品的EPA和GLA分别显示100％和101％的浓度。令人惊讶地，也在上述实验条件贮藏3个月之后，浓度基本上保持不变，如下表所报告。
表1
在温度25℃，实施例1的水凝胶的稳定性
比较例1
为了确认根据本发明的制剂与现有技术描述的那些类型乳液中的制剂相比较的特征，尤其是文献EP 0391369，用MCT(中链甘油三酯)作为油相而聚氧乙烯去水山梨糖醇单油酸酯(吐温80)作为表面活性剂制备了含有ω-3和ω-6脂肪酸的乳液，如下文所报告。
含磷脂乳液中的EPA-GLA配制剂实施例
  组分  ％w/w   功能
  EPA  0.4   活性成分
  GLA  0.1   活性成分
  MCT  1.5   油相
  磷脂(Phospholipon)90g  0.375   乳化剂
  吐温80  0.5   表面活性剂
  甘油  1.125   渗透剂
  α-生育酚  0.2   抗氧化剂
  EDTA-Na2  0.1   螯合剂
  水，用于可注射制剂  QSP 100   水相
遵照所引用专利文献的教导来制备制剂。
研究获得的乳液，以评价其理化稳定性。
通过光散射实验，用功率10mW的激光源He-Ne(633nm)跟踪上述乳液的物理稳定性。结果显示乳液颗粒具有110nm的平均流体动力学半径(r)和0,07％的多分散性。对通过电泳淌度测量Z电势进行评价，其是39±3mV。这意味着具有荷大量负电表面的颗粒相互排斥，从而避免任意融合和团聚现象。
在制备1个月之后，上述各值基本上保持不变，从而显示上述乳液系统具有良好的物理稳定性，但是在第2个月进行的实验显示Z电势变得更负而颗粒尺寸显著长大(表2)。
表2
含磷脂乳液EPA-GLA中油性颗粒的尺寸和电势Z稳定性
  时间(月)   尺度(nm)  电势Z(mV)
  0   110  -39
  1   135  -40
  2   176  -24
上述全部显示乳液向分相进展。
为了从化学观点进行乳液稳定性研究，通过气体色谱法测量EPA和GLA浓度。如下表3所示，也如附图中图1所图示，在温度4℃贮藏配制剂之后测量的浓度显示EPA和GLA浓度自第1个月显著降低，其在0时间分别是97.5％和97.4％的浓度。在后续数月已确认降解倾向，如对映相应附图的表3所示。
表3
在4℃含磷脂乳液中EPA-GLA的稳定性
总之，所研究的组合物从物理角度来说是不稳定的，从化学角度来说其不稳定更加戏剧化。
比较例2
由于比较例1中负责EPA和GLA浓度降低的主要降解产品是氧化产品，已通过在乳化步骤期间鼓泡氮和在抗氧化剂存在下按上述方式产生相同制剂以限制产品的可氧化性。
根据先前实施例的相同程序，分析如此获得的含磷脂乳液制备的化学稳定性。如下表所示，在温度25℃储存1个月之后EPA和GLA相对0时间分别显示96％和95.2％的浓度。
表4
在25℃于氮下制备的含磷脂乳液中EPA-GLA的稳定性
尽管在氮下和在其它抗氧化剂存在下制备，该配制剂的化学稳定性数据是令人失望的。对于这种数据，结果是在室温条件和在冷冻条件下都不可能储存滴眼剂用于可能的商业用途。
比较例3
在申请人的实验室中测试根据文献WO 2006/007510的公开借助表面活性剂制备的多不饱和ω-3和ω-6脂肪酸的直接乳液。
尤其是，用来配制活性成分的表面活性剂的最小浓度已得到确定，并且已确定低于1％的值不足以获得从物理角度来说稳定的乳液。具有较高表面活性剂成分的配制剂在任意情况中都会显得是不利的，因为，正如已知，表面活性剂常常导致眼部组织的毒性问题并且在慢性治疗事件中特别不适当。
从化学角度来说，制剂显示与描述于比较例1和2的制剂已观察到的那些类似的氧化问题。实际上，在温度25℃贮藏组合物1个月之后，EPA和GLA分别显示96.5％和97.0％的浓度，从而在该类配制剂中两种″活性成分″也显示随时间的快速降解，如下表所示。
表5
根据WO 2006/007510的乳液中EPA和GLA的稳定性
出于更安全的目的，用EPA和DHA作为ω-3，都是乙基酯和相应甘油三酯(EPA EE，DHA EE，EPA TG，DHA TG)，以及GLA作为ω-6，都是乙基酯和是相应甘油三酯(GLA EE，GLA TG)来重复在下表6复述的描述于WO2006/007510表1的组合物实施例。
表6
根据WO 2006/007510的示例性配制剂
1缓冲溶液：NaCl 0.83％；H3BO3 0.89％；Na2B4O7x10H2O 0.23％；EDTA 0.01％H2O 98.04％。
在4℃或在25℃，得自四种配制剂各自的并且得自三种测试脂肪酸(乙基酯和甘油三酯形式)各自的稳定性数据示于下表7-10。
表7
表6配制剂号1的稳定性
表8
表6配制剂号2的稳定性
表9
表6配制剂号3的稳定性
表10
表6配制剂号4的稳定性
前述数据进一步确认配制于乳液中用于局部使用的多不饱和脂肪酸ω-3和ω-6快速降解，无论它们作为乙基酯包括在配制剂中还是使用相应甘油三酯。所述不稳定性现有技术的其它乳化系统来说是常见的，并且一般地确认文献中报告的多不饱和脂肪酸的化学稳定性。
实施例3-7组合物的稳定性研究
为了在现有技术组合物稳定性与根据本发明的眼用制剂的稳定性之间进行精确比较，首先评价实施例3-7描述的组合物的油相的化学稳定性。相应数据报告在下表中。
表11
根据本发明的实施例3-7的油相的稳定性
在25℃在12个月之后测定PUFA浓度
 实施例号   3   4   5   6   7
 EPA EE   6.25％   5％   20％   25％   12.5
 DHA EE   6.25％   5％   20％   25％   12.5
 GLA EE   12.5％   40％   10％   25％   50
 维生素E乙酸酯   75％   50％   50％   25％   25％
 ω3/6比率   1∶1   1∶4   4∶1   2∶1   1∶2
 总PUFA   25％   50％   50％   75％   75％
 EPA浓度％   100   100   99   97   96
 DHA浓度％   99   99   100   96   96
 GLA浓度％   100   99   100   97   97
前述显示在α-生育酚乙酸酯中具有多不饱和脂肪酸多至50％总浓度的组合物展示出人意料的稳定性。仅在脂肪酸浓度高于50％，而维生素E乙酸酯低于50％的情况下，轻度降解开始变得明显。此外，都是甘油三酯和磷脂(尤其是鳞虾油)的ω-3和ω-6脂肪酸显示甚至更佳的稳定性。因此，上表显示的″最坏″稳定性情况是ω-3和6乙基酯的情况。
尽管极度稳定，由于其低耐受性，多不饱和脂肪酸在维生素E乙酸酯中的配制剂难于用作眼用配制剂，但是它们能够原样储存长时间，甚至超过纯PUFA的稳定性。
起始自描述的油性混合物，加入卡波普980和Pemulen并相应地产生高分子水凝胶就足以获得完美耐受性并且保持组合物稳定性。在实施例3-6(表，实施例3-7，页19)的完整配制剂中的稳定性试验结果报告如下。
表12
根据本发明的实施例3的配制剂稳定性
水凝胶中的浓度1％-油微滴平均尺寸3μm
表13
根据本发明的实施例4配制剂的稳定性
水凝胶中的浓度1％-油微滴平均尺寸3μm
表14
根据本发明的实施例5配制剂的稳定性
水凝胶中的浓度1％-油微滴平均尺寸3μm
表15
根据本发明的实施例6配制剂的稳定性
水凝胶中的浓度1％-油微滴平均尺寸3μm
耐受性和活性测试
根据本发明的滴眼剂的眼急性耐受性
在兔眼中每2小时依次进行三次滴注之后，评价实施例1的水凝胶中的滴眼剂(MDV0705 IDROGEL)的眼耐受性。将2滴产品以2小时的时间间隔滴注在各动物右眼中，总共3次/天。兔子组由8只动物(4雄，4雌)组成。
按照Draize试验观察眼组织病症。
在治疗日第三次滴注之后，并且在第一次滴注之后24，48和72小时进行检查，对结膜、虹膜和角膜的各方面进行人为指定打分。
在整个试验时间段，在用MDV0705 IDROGEL处理的眼中和用安慰剂处理的眼中，在结膜中均未观察到显著变红。
在角膜水平未观察到水肿或不透明。此外，未发现对虹膜的牵连。
引流物质保持在普通水平。
获得的结果显示根据本发明的水凝胶中的眼用制剂在重复滴注(6小时内3次)之后得到良好耐受，未显示与安慰剂的差异。
临床耐受性测试
将MDV0705 IDROGEL滴眼剂滴注于20名普通受试者的组，这些受试者不具备任意眼表病征并且具有普通泪液分泌，不产生任意显著的不希望效果。
特别地，向接受试验滴眼剂的受试者提供含2个问题的问卷，受试者在1、5、10和60分钟之后必须回答这些问题。对于问题1(″在滴注滴眼剂之后你是否感觉到任何疼痛？)100％的受试者在每个控制点(control)都回答″否″；而对于问题2(″在滴注滴眼剂之后你是否感觉到任何损害？″)100％的受试者在每个控制点都回答″否″。
评价根据本发明的水凝胶中的制剂在治疗干眼综合征中的活性。
考虑到含有ω-3和ω-6脂肪酸的制剂MDV0705 IDROGEL显得具有保护眼表和减少炎症的特征，一旦确定其耐受性，则其对治疗罹患干眼综合征的患者的活性也已确定。将产品与由脂质乳液组成的商业泪液代用品即Lipimix滴眼剂(Tubilux，Italia)，目前市场上仅有的含脂质泪液代用品，进行比较。
在患有干眼综合征的患者(n＝5)组中评价MDV0705 IDROGEL的活性，用经Lipimix治疗的患干眼综合征的患者(n＝5)作对照。向患者双眼中以3次/天滴注MDV0705 IDROGEL和Lipimix，在治疗7天之后进行控制(controls)。将右眼用于结果的统计学分析。
按照国际承认的选择标准(The definition and classification of dryeye disease.Subcommittee of the International Dry Eye Workshop.Ocul.Surf.2007；5：75-92)来选择干眼综合征患者，更确切地是：
干眼症状，用合适的问卷进行检测，采用编码系统打分(ShiffmanRM，Dale Christianson M，Jacobsen G，Hirsch JD，Reis BL.Reliabilityand validity of the Ocular Surface Disease Index(OSDI)，Arch.Ophthalmol.2000；118：615-21)；
角膜荧光素染色，根据NEI/Industry workshop等级测定＞3(LempMA，Report of the National Eye Institute/Industry workshop on clinicaltrials in dry eyes.CLAO J.1995；21：221-232)；
破裂时间(BUT)＜10秒；
Schirmer I试验于5分钟＜8mm。
排除标准：传染性角结膜炎，眼变态反应阳性既往症，研究前3个月进行内眼或眼睑手术，鼻-泪病理学状况，在研究前4周使用类固醇型滴眼剂，糖尿病，抗青光眼滴眼剂。
用来与对照相比评价MDV 0705 IDROGEL活性的参数如下：
-干眼症状(用合适的问卷检测)
-泪膜破裂时间(BUT)
-Schirmer I试验
评价破裂时间(BUT)的程序
BUT被认为是泪膜稳定性的指示参数。试验包括在滴注荧光素之后用配有蓝色钴滤光器的裂隙灯观察膜表面。在试验期间，患者保持他/她的眼睛睁开，不眨眼，直视前方，测量自上次眨眼到在角膜表面形成小无水区域(显得更暗)之间逝去的时间，然后计算三次后续(subsequent)检测的平均值。
Schirmer I试验
Schirmer I试验提供泪分泌信息。其在弱光照房间中进行，将纸带置于下部结膜穹窿外侧，在5分钟之后测量其浸湿。由于存在许多影响测值的变量，必须使用标准化程序进行试验。最重要的变量来自这样的事实：吸收纸带的吸收和润湿部分的长度受到毛细作用力和可润湿性其纤维素纤维的影响。这意味着有必要用经验证的纸带进行试验。
有关BUT和Schirmer试验的观察研究结果分别示于附图的图2和3中。第7天的结果证明，相对基线值(第0天)，用MDV0705 IDROGEL治疗的干眼综合征患者的眼表症状和病征有显著改善。此外，在第7天用MDV0705 IDROGEL治疗的患者相比对照组显示症状显著改善(p＜0.05)。
仅在用MDV 0705 IDROGEL治疗的患者组中，第7天的泪膜破裂时间(BUT)(图2)显示相对基线病症(第0天)的显著增加。
仅在用MDV 0705 IDROGEL治疗的患者组中，用Schirmer I试验测得的泪分泌(图3)显示相比初始病症的显著增加，而用Lipimix治疗的患者组于7天显示不显著的泪产生增加。在第7天比较用MDV0705IDROGEL和Lipimix治疗的患者显示第一组相对第二组的显著增加。
总而言之，已确认将ω-3和ω-6脂肪酸用于滴眼剂中的可能性是治疗罹患干眼综合征的患者的重要创新，其不但减少患者报告的症状，还改善泪膜稳定性，并因而改善眼表病症。因为根据本发明的水凝胶中的组合物可获得经改善的存放期，从药学角度来说这种有利的治疗手段可容易地获得。
本发明已具体公开了某些特定实施方式，但是应理解本领域技术人员可以对其进行修饰和变化，而不背离如所附权利要求中所定义的发明范围。

Claims (17)

1.局部型眼用组合物，其含有作为活性成分的一种或多种选自二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的ω-3多不饱和脂肪酸和ω-6多不饱和脂肪酸，或其药学上可接受的衍生物，所述衍生物选自它们的C1-C6烷基酯和它们的甘油三酯，与维生素E或其药学上可接受的酯的溶液，所述溶液呈水凝胶中的分散形式，所述水凝胶基于含有一种或多种胶凝化聚合物的含水媒介物，其中所述一种或多种胶凝化聚合物是卡波普而所述ω-6多不饱和脂肪酸是γ-亚麻酸。
2.根据权利要求1的眼用组合物，其中所述维生素E的药学上可接受的酯是α-生育酚乙酸酯。
3.根据权利要求2的眼用组合物，其中α-生育酚乙酸酯与ω-3和ω-6多不饱和脂肪酸的重量比是4:1至1:4。
4.根据权利要求1或2的眼用组合物，含有作为活性成分的二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸和γ-亚麻酸，或二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸和γ-亚麻酸的乙基酯，或二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸和γ-亚麻酸的甘油三酯。
5.根据权利要求1或2的眼用组合物，含有作为ω-3多不饱和脂肪酸的二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的混合物，并且其中ω-3多不饱和脂肪酸与ω-6多不饱和脂肪酸的重量比是4:1至1:4。
6.根据权利要求1或2的眼用组合物，含有作为活性成分的一种或多种选自二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的ω-3多不饱和脂肪酸和γ-亚麻酸，均为甘油三酯。
7.根据权利要求1或2的眼用组合物，其中ω-3多不饱和脂肪酸与ω-6多不饱和脂肪酸的重量比是20:1至1:20。
8.根据权利要求1或2的眼用组合物，按重量/重量％计由下述成分组成：
-0.40％二十碳五烯酸乙基酯，其纯度为90％；
-0.10％γ-亚麻酸乙基酯，其纯度为70％；
-0.50％α-生育酚乙酸酯；和
-0.20％卡波普980；
-1.15％甘油；
-0.07％NaOH；
-0.10％磷酸氢二钠；和
-补足100％用于可注射制剂的水；
其中乙基酯均为乙醇酯形式。
9.根据权利要求1或2的眼用组合物，也包含一种或多种摩尔渗透压浓度调节剂。
10.根据权利要求1或2的眼用组合物，也包含一种或多种高分子乳化剂。
11.根据权利要求10的眼用组合物，其中所述高分子乳化剂选自泊洛沙姆和丙烯酸聚合物。
12.根据权利要求11的眼用组合物，其中所述高分子乳化剂是丙烯酸聚合物。
13.根据权利要求1的眼用组合物，其中所述配制剂选自下述配制剂组：
-配制剂3，以重量/重量％计由下述成分组成:
-0.0625％二十碳五烯酸乙基酯；
-0.0625％二十二碳六烯酸乙基酯；
-0.125％γ-亚麻酸乙基酯；
-0.75％维生素E乙酸酯；
-0.20％卡波普980；
-1.15％甘油；
-0.007％Pemulen；
-0.07％NaOH；
-0.10％磷酸氢二钠；和
-补足100％纯水；
-配制剂4，以重量/重量％计由下述成分组成:
-0.05％二十碳五烯酸乙基酯；
-0.05％二十二碳六烯酸乙基酯；
-0.40％γ-亚麻酸乙基酯；
-0.50％维生素E乙酸酯；
-0.20％卡波普980；
-1.15％甘油；
-0.007％Pemulen；
-0.07％NaOH；
-0.10％磷酸氢二钠；和
-补足100％纯水；
-配制剂5，以重量/重量％计由下述成分组成：
-0.20％二十碳五烯酸乙基酯；
-0.20％二十二碳六烯酸乙基酯；
-0.10％γ-亚麻酸乙基酯；
-0.50％维生素E乙酸酯；
-0.20％卡波普980；
-1.15％甘油；
-0.007％Pemulen；
-0.07％NaOH；
-0.10％磷酸氢二钠；和
-补足100％纯水；
-配制剂6，以重量/重量％计由下述成分组成：
-0.25％二十碳五烯酸乙基酯；
-0.25％二十二碳六烯酸乙基酯；
-0.25％γ-亚麻酸乙基酯；
-0.25％维生素E乙酸酯；
-0.20％卡波普980；
-1.15％甘油；
-0.007％Pemulen；
-0.07％NaOH；
-0.10％磷酸氢二钠；和
-补足100％纯水；
-配制剂7，以重量/重量％计由下述成分组成：
-0.125％二十碳五烯酸乙基酯；
-0.125％二十二碳六烯酸乙基酯；
-0.50％γ-亚麻酸乙基酯；
-0.25％维生素E乙酸酯；
-0.20％卡波普980；
-1.15％甘油；
-0.007％Pemulen；
-0.07％NaOH；
-0.10％磷酸氢二钠；和
-补足100％纯水；
其中水凝胶中的油相微滴平均尺寸为3μm。
14.根据权利要求10的局部型眼用组合物，包含二十碳五烯酸乙基酯，二十二碳六烯酸乙基酯和γ-亚麻酸乙基酯作为α-生育酚乙酸酯溶液中的活性成分，卡波普作为胶凝化聚合物和Pemulen作为高分子乳化剂。
15.根据权利要求1或2的眼用组合物，其中所述ω-3和ω-6多不饱和脂肪酸包含于一种或多种植物油和/或鱼油和/或鳞虾油中，又与所述维生素E或其酯混合，所得混合物呈所述水凝胶中的分散形式。
16.根据权利要求15的眼用组合物，其中所述植物油选自亚麻籽油，琉璃苣油，麦芽油，大麻籽油，橄榄油，花生油，黑加仑油和大豆油及其混合物，和所述鱼油选自鲑鱼油，鲭油，多脂鱼油及其混合物。
17.根据权利要求1至16中任一项的眼用组合物用于制备药物的用途，所述药物用于预防或治疗选自炎性角膜炎和结膜炎和干眼综合征的眼病理学状况。
CN201080012341.0A 2009-03-19 2010-03-18 基于多不饱和ω-3和ω-6脂肪酸的眼用组合物 Active CN102355889B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
ITRM2009A000119 2009-03-19
ITRM2009A000119A IT1393419B1 (it) 2009-03-19 2009-03-19 Composizioni oftalmiche a base di acidi grassi polinsaturi omega-3 e omega-6.
PCT/IT2010/000119 WO2010106571A2 (en) 2009-03-19 2010-03-18 Ophthalmic compositions based on polyunsaturated omega-3 and omega-6 fatty acids

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102355889A CN102355889A (zh) 2012-02-15
CN102355889B true CN102355889B (zh) 2015-01-28

Family

ID=41213320

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201080012341.0A Active CN102355889B (zh) 2009-03-19 2010-03-18 基于多不饱和ω-3和ω-6脂肪酸的眼用组合物

Country Status (18)

Country Link
US (1) US8957110B2 (zh)
EP (1) EP2408426B1 (zh)
KR (1) KR101677308B1 (zh)
CN (1) CN102355889B (zh)
BR (1) BRPI1009281A2 (zh)
CA (1) CA2754568C (zh)
DK (1) DK2408426T3 (zh)
ES (1) ES2617683T3 (zh)
HK (1) HK1166714A1 (zh)
HU (1) HUE031869T2 (zh)
IT (1) IT1393419B1 (zh)
MX (1) MX2011009740A (zh)
PL (1) PL2408426T3 (zh)
PT (1) PT2408426T (zh)
RS (1) RS55859B1 (zh)
RU (1) RU2545675C2 (zh)
SI (1) SI2408426T1 (zh)
WO (1) WO2010106571A2 (zh)

Families Citing this family (47)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NO2437762T3 (zh) 2009-06-05 2018-01-06
US20130011469A1 (en) 2009-07-23 2013-01-10 U.S. Nutraceuticals, Llc D/B/A Valensa International Krill oil and carotenoid composition, associated method and delivery system
US20130295171A1 (en) 2009-07-23 2013-11-07 U.S NUTRACEUTICALS, LLC d/b/a Valensa International Krill oil and reacted astaxanthin composition and associated method
US20110237548A1 (en) * 2009-07-23 2011-09-29 U.S. Nutraceuticals, Llc D/B/A Valensa International Synergistic composition and method of retarding and ameliorating photo induced retinal damage and cataracts while ameliorating dry eye syndrome using omega choline
KR101616446B1 (ko) 2009-10-30 2016-04-28 샤로스 리미티드 인지질과 중성 지질이 풍부한 크릴 오일을 용매를 사용하지 않고 생산하는 방법
ES2564502T3 (es) 2010-03-17 2016-03-23 Novaliq Gmbh Composición farmacéutica para el tratamiento de la presión intraocular aumentada
EP2444063A1 (en) 2010-10-20 2012-04-25 Novaliq GmbH Liquid pharmaceutical compositions for the delivery of active ingredients
EP2462921A1 (en) 2010-11-11 2012-06-13 Novaliq GmbH Liquid pharmaceutical compositions for the treatment of a posterior eye disease
WO2012160180A2 (en) 2011-05-25 2012-11-29 Novaliq Gmbh Pharmaceutical composition for administration to nails
PT3192501T (pt) 2011-05-25 2020-07-31 Novaliq Gmbh Composição farmacêutica tópica à base de alcanos semifluorados
US8865685B2 (en) * 2011-06-30 2014-10-21 Johnson & Johnson Vision Care, Inc. Esters for treatment of ocular inflammatory conditions
US9381183B2 (en) * 2012-07-18 2016-07-05 Physicians Recommended Nutriceuticals, Llc Methods for improving the quality of the meibum composition of meibomian glands
KR101629670B1 (ko) * 2011-09-12 2016-06-13 타소스 지오지우 질환을 치료하기 위한 오메가 지방산의 용도
CN104271548B (zh) 2011-12-23 2016-06-08 西悉尼大学 眼用制剂
BR112014017719A8 (pt) 2012-01-23 2017-07-11 Novaliq Gmbh Composições de proteína estabilizada baseadas em alcanos semifluorados
MX2015002208A (es) * 2012-08-31 2015-05-08 Bausch & Lomb Composiciones oftalmicas con acidos grasos omega-3.
CN113679698B (zh) 2012-09-12 2022-07-26 诺瓦利克有限责任公司 包含半氟化烷烃的混合物的组合物
PL3181119T3 (pl) 2012-09-12 2020-01-31 Novaliq Gmbh Kompozycje semifluorowanych alkanów do zastosowania w leczeniu suchego zapalenia spojówki i rogówki
AU2014295052B2 (en) 2013-07-23 2018-08-30 Novaliq Gmbh Stabilized antibody compositions
EP3116493A4 (en) * 2014-03-13 2017-11-15 Barry D. Sears Compositions and methods for reducing chronic low-level inflammation
KR102487299B1 (ko) 2014-11-25 2023-01-10 알러간, 인코포레이티드 안정화된 오메가-3 안과용 조성물
EP3280395B1 (en) * 2015-04-08 2019-03-27 For Health Pharma S.r.l. Ophthalmic compositions based on polyunsaturated fatty acids and triacylglycerols
US10966937B2 (en) * 2015-05-04 2021-04-06 Cytometix, Inc. Compositions and methods for delivery of polyunsaturated fatty acid derivatives and analogs
ES2803248T3 (es) 2015-09-30 2021-01-25 Novaliq Gmbh 2-perfluorohexil octano para administración oftálmica
CN111743882A (zh) 2015-09-30 2020-10-09 诺瓦利克有限责任公司 半氟化化合物和其组合物
KR20190009303A (ko) 2016-04-27 2019-01-28 아니카 테라퓨틱스, 인코포레이티드 건 퇴행의 치료에 사용하기 위한 조성물
ES2763121T3 (es) 2016-06-23 2020-05-27 Novaliq Gmbh Método de administración tópica
ES2650981B2 (es) * 2016-07-20 2018-05-04 Ocupharm Diagnostics, Sl Preparación y uso de un extracto de Artemia salina para tratar la superficie ocular
CN109789111B (zh) * 2016-09-21 2021-11-16 埃维克辛公司 药物组合物
ES2969758T3 (es) 2016-09-22 2024-05-22 Novaliq Gmbh Composiciones farmacéuticas para usar en la terapia de la blefaritis
CA3036306C (en) 2016-09-23 2024-05-14 Novaliq Gmbh Ophthalmic compositions comprising ciclosporin
US10786441B2 (en) 2016-11-21 2020-09-29 Skinintegra, Inc. Skin barrier repair and maintenance composition
CN110678207B (zh) 2017-04-21 2024-08-02 德马利克治疗公司 碘组合物
US11278503B2 (en) 2017-05-12 2022-03-22 Novaliq Gmbh Pharmaceutical compositions comprising semifluorinated alkanes for the treatment of contact lense-related conditions
CN111372566A (zh) 2017-09-27 2020-07-03 诺瓦利克有限责任公司 用于治疗眼部疾病的包含拉坦前列素的眼科用组合物
WO2019068763A1 (en) 2017-10-04 2019-04-11 Novaliq Gmbh OPHTHALMIC COMPOSITIONS COMPRISING F6H8
WO2019166631A1 (en) 2018-03-02 2019-09-06 Novaliq Gmbh Pharmaceutical compositions comprising nebivolol
AU2019262061A1 (en) 2018-05-01 2020-11-26 Chibi, Inc. Eye drop formulation and method for sustained delivery of medicament to the retina
JP2021523223A (ja) * 2018-05-01 2021-09-02 チビ，インコーポレイティド 眼への薬物の非侵襲的な持続型送達のための液体デポー
NO345574B1 (en) * 2018-06-19 2021-04-26 Epax Norway As Composition for treatment of dry eye disease and meibomianitis
WO2020074697A1 (en) 2018-10-12 2020-04-16 Novaliq Gmbh Ophthalmic composition for treatment of dry eye disease
US20210369668A1 (en) * 2018-10-22 2021-12-02 Dsm Ip Assets B.V. Composition exhibiting enhanced oxidative stability
KR102275250B1 (ko) * 2018-12-21 2021-07-08 윤영선 셀레늄과 프로폴리스를 유효성분으로 포함하는 안구 건조증 예방 및 치료용 조성물
WO2021194360A1 (en) * 2020-03-27 2021-09-30 Pharmazen Limited Extraction method for bio-active fractions
CN114073670B (zh) * 2020-08-11 2023-02-24 武汉科福新药有限责任公司 马来酸噻吗洛尔凝胶滴眼液及其制备方法
MX2021003369A (es) * 2021-03-22 2022-09-23 Laboratorios Grin S A De C V Lágrima ocular triple.
US11951123B2 (en) 2022-01-12 2024-04-09 Platform Ophthalmic Innovations, LLC Fortified nutritional lubricating drops for dry eye disease

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU614465B2 (en) 1989-04-05 1991-08-29 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Medicinal emulsions
JP2873530B2 (ja) * 1991-12-13 1999-03-24 参天製薬株式会社 ニュートン型粘性を示すカルボキシビニルポリマー含有点眼液基剤
US6201022B1 (en) * 1997-03-27 2001-03-13 Myorx, Inc. Methods for treating neurotransmitter-mediated pain syndromes by topically administering an omega fatty acid
IT1304406B1 (it) * 1998-10-21 2001-03-19 Danital Italia S R L Preparazione per la veicolazione di principi attivi basata su acidigrassi polinsaturi del gruppo omega 3.
PT102509A (pt) * 2000-08-16 2002-02-28 Fundacao Essprit Icarus Composicoes farmaceuticas, cosmeticas e dermo-cosmeticas, de higiene, alimentares e para-alimentares a base de oleo de foca, e sua utilizacao
US20040076695A1 (en) * 2002-07-08 2004-04-22 Advanced Vision Research EPA and DHA enriched omega-3 supplement for the treatment of dry eye, meibomianitis and xerostomia
US20040208939A1 (en) * 2003-04-18 2004-10-21 Barry Sears Novel dietary compositions to reduce inflammation
US7390507B2 (en) * 2004-04-13 2008-06-24 Ruwart Mary J Compositions and methods for the treatment of radiation burns and other traumatic skin conditions
MX2007000208A (es) * 2004-07-01 2007-08-07 Schepens Eye Res Inst Composiciones y metodos para tratar trastornos y condiciones del ojo.
US20090182050A1 (en) * 2005-10-07 2009-07-16 Ocean Nutrition Canada, Ltd. Salts of Fatty Acids and Methods of Making and Using thereof
US20070207116A1 (en) * 2006-03-01 2007-09-06 Brown David C Antioxidant compositions for the eye
EP2010143B1 (en) * 2006-03-17 2015-08-12 Johnson & Johnson Vision Care, Inc. Stabilized ophthalmic compositions comprising oxidatively unstable components

Also Published As

Publication number Publication date
MX2011009740A (es) 2011-09-29
BRPI1009281A2 (pt) 2016-03-08
KR20110130431A (ko) 2011-12-05
WO2010106571A3 (en) 2010-11-18
IT1393419B1 (it) 2012-04-20
WO2010106571A2 (en) 2010-09-23
RS55859B1 (sr) 2017-08-31
EP2408426B1 (en) 2016-12-14
ES2617683T3 (es) 2017-06-19
CA2754568C (en) 2017-07-18
EP2408426A2 (en) 2012-01-25
RU2545675C2 (ru) 2015-04-10
PL2408426T3 (pl) 2017-07-31
RU2011142146A (ru) 2013-04-27
DK2408426T3 (en) 2017-03-27
PT2408426T (pt) 2017-03-06
SI2408426T1 (sl) 2017-04-26
US8957110B2 (en) 2015-02-17
ITRM20090119A1 (it) 2010-09-19
CN102355889A (zh) 2012-02-15
KR101677308B1 (ko) 2016-11-17
HUE031869T2 (en) 2017-08-28
HK1166714A1 (zh) 2012-11-09
CA2754568A1 (en) 2010-09-23
US20120010280A1 (en) 2012-01-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102355889B (zh) 基于多不饱和ω-3和ω-6脂肪酸的眼用组合物
EP1781278B2 (en) Compositions and methods for treating eye disorders and conditions
EP3488847B1 (en) Semifluorinated alkane compositions
JP2018111704A (ja) 半フッ化アルカンの混合物を含む組成物
TWI633883B (zh) 用於治療眼部發炎病症之酯類（一）
JP2007211007A (ja) Ｏ／ｗ型エマルション水性点眼剤
EP3280395B1 (en) Ophthalmic compositions based on polyunsaturated fatty acids and triacylglycerols
CN115463089B (zh) 一种治疗干眼症的眼用微乳及其制备方法与应用
US20230149337A1 (en) Ophthalmic formulation and its use
US11951123B2 (en) Fortified nutritional lubricating drops for dry eye disease
US20240156859A1 (en) Fortified nutritional lubricating drops for dry eye disease
WO2023055321A1 (en) Anti-inflammatory microemulsion eye formulations derived from nigella sativa oil
EL TESIS DOCTORAL/DOCTORAL THESIS
JP6033177B2 (ja) Ｏ／ｗ型エマルション水性点眼剤

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 1166714

Country of ref document: HK

C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: GR

Ref document number: 1166714

Country of ref document: HK