CN102353747B

CN102353747B - 一种中成药、保健食品中罗格列酮或吡格列酮的检测方法

Info

Publication number: CN102353747B
Application number: CN201110182819.0A
Authority: CN
Inventors: 肖树雄; 李杨杰
Original assignee: GUANGDONG INSTITUTE FOR DRUG CONTROL
Current assignee: GUANGDONG INSTITUTE FOR DRUG CONTROL
Priority date: 2011-06-30
Filing date: 2011-06-30
Publication date: 2014-12-03
Anticipated expiration: 2031-06-30
Also published as: CN102353747A

Abstract

本发明涉及定性地检测起降糖作用的中成药、保健食品中是否掺杂噻唑烷二酮类药物的检测方法；步骤：(1)取待测样品，按5～10mL/g_样品加入二氯甲烷，强烈振摇至少40秒，然后过滤；(2)在滤液中加入少量的0.08～0.12mol/L盐酸溶液，上下翻转至少8次，再静置使两相分层；(3)在上述上层液中滴入适量浓度为0.04-0.1g/mL的磷钼酸溶液，如果出现沉淀或浑浊，则表明样品中掺杂有罗格列酮或吡格列酮；相应的试剂盒：试剂1：二氯甲烷；试剂2：0.08～0.12mol/L盐酸溶液；试剂3：0.04-0.1g/mL磷钼酸溶液；这样的检测方法准确可靠，试剂盒便于携带和进行现场检测。

Description

一种中成药、保健食品中罗格列酮或吡格列酮的检测方法

技术领域

本发明涉及定性地检测化学物质存在与否的方法，具体涉及起降糖作用的中成药、保健食品中是否掺杂噻唑烷二酮类药物，主要也就是是否掺杂罗格列酮或吡格列酮的检测方法。

背景技术

治疗糖尿病有很多药物，上世纪80年代初，常使用氯磺丙脲和甲苯磺丁脲，后来发展为很多类别。现有治疗糖尿病药物大致可以分为五大类，即磺酰脲类药物、双胍类药物、α-糖苷酶抑制剂、噻唑烷二酮类(TZD)药物和非磺酰脲类的胰岛素促进分泌剂。服用这些化学药物达到一定量后显示出来的毒副作用就非常明显，如：口服降糖药罗格列酮或吡格列酮(尤其是过量)可能有升高患者心肌梗死和心源性死亡的危险；过量盐酸苯乙双胍浓度会对人体造成严重的乳酸性酸中毒；过量格列本脲可造成低血糖症以及肾上腺皮质功能减退、致畸等一系列严重不良反应。

在这种情况下，市场上就出现了许多起到改善糖尿病症状和治疗糖尿病的中成药和保健食品。这些产品因为大多是天然物质制成，毒副作用小。但为了迎合糖尿病患者既想快速降糖又想副作用小的心理，一些不良厂商打着纯天然的旗号欺瞒患者，在治疗糖尿病的中成药和调节血糖的保健食品中擅自添加降糖西药，患者在不知情的情况下大量服用，其后果极其严重。尤其是如前所述的，如果添加罗格列酮或吡格列酮等噻唑烷二酮类药物，而患者在不知情的情况下过量服用，很容易造成患者心肌梗死和心源性死亡，危害极大。

因此为保障消费者的生命安全，需要对降糖类的中成药和保健食品中是否掺杂了罗格列酮或吡格列酮等噻唑烷二酮类药物进行检测。

作为沉淀剂的磷钼酸试剂(Sonnenschein试剂，H₃PO₄·12MoO₃)可与很多碱性物质反应，生成鲜黄色或棕黄色沉淀，这是本领域技术人员皆知的事实。但直接用来检测降糖类中成药、保健食品中是否掺杂西药降糖成分并不可行。这主要有下列原因：一是掺杂的罗格列酮、吡格列酮的化学碱性很弱，如不经特殊的提取分离步骤，虽然这些降糖的化合物能与沉淀剂发生反应，但产品中共存的其它碱性成分也会反应，掩盖所要的反应现象，造成结果不明显、不清晰，难以作出准确判断。二是降糖成分添加可能是多种类型的复合添加，如噻唑烷二酮类可能与磺酰脲类、双胍类等复合添加，或者单独添加了磺酰脲类、双胍类物质，这些物质也会干扰检测显现，会出现针对噻唑烷二酮类物质出现假阳性；也就是即使检测出阳性，也不能判断是否就是罗格列酮或吡格列酮。

因此，现有技术中进行检测的方法主要是采用质液联用技术进行检测，或者如专利号为ZL200810085068.9的中国发明专利所公开的，使用液相色谱仪，采用高效液相色谱技术进行检测。但这样的检测方法中，检测设备都很昂贵，并且操作维护复杂，检测周期长；尤其不适合现场检测。总体来说也就是检测成本高且操作不方便。

而应用化学方法，使用常用的试剂、器具进行快速检测在行政执法查处等需要现场快速检测的场合极为重要。但这却是本领域技术人员长期以来未能克服的技术难题。换句话说就是现有技术还不能利用常规的化学检测方法进行检测，具体就是不能采用磷钼酸试剂来检测降糖类中成药、保健食品中是否掺杂罗格列酮和吡格列酮。现有技术中没有任何相关的检测降糖类中成药、食品中是否添加罗格列酮或吡格列酮的方法的报道。也没有其它任何文献或信息给出利用磷钼酸试剂检测降糖中成药、保健食品中是否添加罗格列酮或吡格列酮的技术启示。当然，这也就是现有技术中如果需要进行该检测则需要采用复杂的仪器设备的原因。

相近的技术领域中，例如专利申请号为200910192682.X的中国专利申请中记载了检测降压类中成药、食品中是否添加生物碱类降压药的检测方法。从原理上讲：罗格列酮或吡格列酮也呈现生物碱性，或许也可以利用该专利申请的检测技术检测降糖类中成药或保健食品中是否有罗格列酮或吡格列酮添加。但是，根据该专利技术的教导，在乙醇环境中(如其权利要求1的技术方案)或者是在非酸性、非中性环境中进行检测(如其说明书第2页倒数第三段所述)，结果误差也极其明显(检测结果经质液联用技术验证，正确率不到40％)。说明用于起降糖作用的中成药、保健品中是否添加噻唑烷二酮类药物不适合该专利申请中介绍的方法检测。

原因可能是降糖产品的基本成分与该专利中的降压产品不同，也可能是掺杂的其他干扰物质的性质不同，或者降糖中成药、保健食品与降压中成药、保健食品的性质不同，或者多种因素兼具。总之该专利对解决本发明的技术问题并无启示。

发明内容

本发明的目的是提供一种能准确、快速地检测中成药、保健食品中是否添加罗格列酮、吡格列酮的检测方法。

本发明解决上述问题的技术方案是：一种中成药、保健食品中罗格列酮或吡格列酮的检测方法，包括以下步骤：

(1)取待测样品，按5～10mL/g_样品加入二氯甲烷，强烈振摇至少40秒，然后过滤；

(2)在滤液中加入少量的0.08～0.12mol/L盐酸溶液，上下翻转至少8次，再静置使两相分层；

(3)在上述上层液中滴入适量浓度为0.04-0.1g/mL的磷钼酸溶液，如果出现沉淀或浑浊，则表明样品中掺杂有罗格列酮或吡格列酮。或者同时掺杂有罗格列酮和吡格列酮。

采用上述的检测方法，所用器具简单，药品易得，操作也很简单，便于快速检测和现场检测，并且经标准检测手段验证具有很高的检测精准度。至于盐酸溶液、磷钼酸溶液的具体用量，则是本领域技术人员根据经验或者有限的试验即可确定的；通常盐酸溶液用量与二氯甲烷大致相当，磷钼酸溶液作为检测试剂只要数滴即可。只要掌握好了二氯甲烷的量就可以保障检测的精准度。

进一步的，所述的样品加入二氯甲烷后，强烈振摇1分钟；这样既能最充分地提取待检物质又节约时间。

进一步的，所述的滤液中加入2mL的0.1mol/L盐酸溶液；这样的盐酸用量节省并且又保证检测效果。

进一步的，所述的滤液中加盐酸溶液后翻转10次，静置30秒分层；这样检测的效果最好。

进一步的，所述的静置后的上层液中滴入2滴浓度为0.05g/mL的磷钼酸溶液。这样沉淀反应效果最明显并且又节约试剂用量。

本发明的另一目的在于提供应用上述检测方法进行快速检测的试剂盒。

技术方案为：一种应用上述检测方法进行快速检测的试剂盒，特征在于：包括以下试剂：

试剂1：二氯甲烷；

试剂2：0.08～0.12mol/L盐酸溶液；

试剂3：0.04-0.1g/mL磷钼酸溶液。

这样的试剂盒便于携带和进行现场检测；当然这样的试剂盒还可以包括一些常用的试管、注射器等器具，便于检测所用器具的集中收纳和携带。至于试剂的量则根据要检测的样品的量确定，通常越多越好，便于多次取用，进行多此重复检测；也可以每个试剂盒内有多组试剂，这样使用更方便。

相应地，试剂盒的进一步改进是：所述的二氯甲烷的纯度为分析纯；因为二氯甲烷纯度越高肯能产生的干扰也越小，但检测实践证明只要是化学纯以上纯度的产品都能保证检测的准确性。

所述的盐酸溶液浓度为0.1mol/L；

进一步的，所述的磷钼酸溶液浓度为0.05g/mL；

最好是：所述的所述的试剂盒中二氯甲烷为3mL、盐酸溶液为2mL、磷钼酸溶液装于滴液瓶中且不少于2滴。这些用量都是最常规、通用的用量，试剂盒内可以有多组这样的试剂。磷钼酸溶液装在滴液瓶中便于滴加使用，有2滴磷钼酸溶液通常足够判断检测结果。

下面结合优选的试剂盒方案详细说明检测方法：

1、样品前处理

拧开试剂瓶1的瓶盖。胶囊剂取1粒内容物，加入至试剂瓶1的瓶中；片剂取1片，研细或压碎，加入粉末至试剂瓶1的瓶中；丸剂、颗粒剂、散剂等取每次服用量的1/4，研细、剪碎或压碎，加入至试剂瓶1的瓶中。盖紧瓶盖，强烈晃动、也就是大力振摇使得可能存在的待检物质充分溶解到二氯甲烷中，然后静置一会。再打开试剂瓶2瓶盖；取1支注射器，拔出活塞，接滤头，倒入试剂瓶1内的上层液体，用活塞挤压，收集滤液至试剂瓶2瓶中；这样就使盐酸溶液和含提取物的二氯甲烷相混合了。拧紧试剂瓶2瓶盖，将试剂瓶2上下翻转数次使得两种液体均匀接触，打开试剂瓶2的瓶盖，再静置使两相分层；使得溶解在二氯甲烷中的待检物自然就能溶解到盐酸溶液中。

2、检测

滴加几滴试剂3至试剂瓶2的上层溶液中，滴加时勿振摇试剂瓶2，观察试剂瓶2上层溶液是否产生浑浊或沉淀物。

试剂盒中试剂的量的确定无需付出创造性劳动，可以根据经验掌握，况且在某种试剂过量时，直接倒掉部分该试剂即可。

本发明的检测方法操作简单，所用的都是常用试剂和器具，检测速度快，降低了检测成本，尤其适合快速检测。检测结果经标准检测方法验证无误。

检测原理可能是下述的原因：

1、干扰因素的排除

中成药、保健食品中成分复杂，既有大量的脂溶性物质(如色素等)，又有大量的水溶性物质(如苷类)，它们部分能溶于有机溶剂，部分又能溶于水，如不进行适当分离，则会影响结果的判断。

罗格列酮和吡格列酮都含有噻唑烷二酮的碱性基团，见如下的结构式：

罗格列酮吡格列酮

从分子结构上可以看出，噻唑烷二酮母核(见下图)的两个氧原子因S-C-O或N-C-O共轭而带有负电性(或显碱性)；其氮原子上的氢有游离的倾向，可与水形成氢键，尤其是在酸性溶液中，从而获得溶剂化作用。

因此，噻唑烷二酮类化合物可溶解于无机酸溶液中。另一方面，罗格列酮和吡格列酮的存在着多个环状结构和脂链，这决定了它们又能溶解于二氯甲烷等有机溶剂中。

本发明采用二氯甲烷为提取溶剂，可将掺杂在中成药、保健食品产品中的罗格列酮、吡格列酮从制剂辅料中充分溶出，游离于溶剂中，同时与水溶性杂质分离；再转溶于盐酸溶液中，即可与脂溶性杂质分离。由于上面所说原因，通过两步分离后，罗格列酮、吡格列酮仍能够存在于盐酸溶液中，可与磷钼酸反应，又能排除其他杂质的干扰，反应现象容易判断。

本发明中，降糖中成药、保健食品中，假如同时存在复合添加的双胍类盐酸盐，则未能被二氯甲烷提取而弃留在残渣中；假如同时存在复合添加格列本脲等磺酰脲类物质，则虽能被二氯甲烷提取，但不与磷钼酸溶液反应；假如同时存在复合添加瑞格列奈等物质，虽然可以被二氯甲烷提取，但不能转移到盐酸溶液中。这样也就完全排除了其它几类化学降糖药物的干扰。

2、检测的化学反应原理：

噻唑烷二酮类化合物均含有可接受质子的酮基氧原子，在酸性溶液中，接受质子后生成带正电荷、呈游离状态的阳离子(以R⁺表示)，这个推断已被文献(方大树，胡思星，张检，等.罗格列酮油水分配系数的测定.中国药房2010，21(5)：第409-411页)证实：罗格列酮在PH小于4时为酸式盐，水溶性好；PH在5-9时为游离碱，呈脂溶性。

磷钼酸(H₃PO₄·12MoO₃)是一种复杂的化合物，在酸性介质中可形成带负电荷的磷钼酸根(S^-)，与游离态的R⁺反应，生成黄色不溶物，反应明显。反应式为：

R⁺+S^-→RS↓

因此，本发明通过二氯甲烷提取、盐酸萃取两个步骤，可有效排除中成药、保健食品本身所含的生物碱或同时复合添加的降糖物质的干扰。本发明方法简便，所用试剂危险性低，不需要复杂笨重的仪器，适用于现场、快速检测。

当然，这只是理论分析和推理，因化学领域的特殊性，为了更好地理解本发明，下面将通过实验进一步验证本发明方法的检测准确性、精密度和有益技术效果。

A、不同降糖物质在不同溶剂中的反应现象比较

1、实验材料

罗格列酮、吡格列酮、盐酸二甲双胍、盐酸苯乙双胍、格列本脲、瑞格列奈(均购自中国药品生物制品检定所)。阳性药物为唐诺胶囊。阴性药物为糖尿乐胶囊。

2、实验方法

(1)各取3份待测样品；第一份加入3mL二氯甲烷，第二份加入3mL 0.1mol/L盐酸溶液，第三份加入3mL水；强力振摇1分钟，然后过滤；

(2)在第一份样品滤液中滴入2滴浓度为0.05g/mL的磷钼酸无水乙醇溶液；在第二、三份样品滤液中分别滴入2滴浓度为0.05g/mL的磷钼酸溶液。

3、实验结果

结果如表1所示：

表1不同降糖物质在不同溶剂中的反应现象比较

由表1可见，采用二氯甲烷能使罗格列酮和吡格列酮较好溶出，反应现象明显；加了罗格列酮和吡格列酮的阳性样品二氯甲烷提取液呈反应，不加罗格列酮和吡格列酮的阳性样品二氯甲烷提取液不呈反应。复合添加的双胍类盐酸盐，未能被二氯甲烷提取而弃留在残渣中；复合添加格列本脲等磺酰脲类物质，虽能被二氯甲烷提取，但不与磷钼酸溶液反应；瑞格列奈可被二氯甲烷提取并沉淀反应。

总之，也就是说：经过二氯甲烷的提取，可以排除除瑞格列奈以外的所有物质的干扰。采用二氯甲烷还有一个操作上的优点，它与水不溶，比重又大于1，有利于后续的酸萃取操作。

B、不同溶液对萃取的影响

1、实验材料

罗格列酮、吡格列酮(均购自中国药品生物制品检定所)。阳性药物为唐诺胶囊。阴性药物为糖尿乐胶囊。

2、实验方法

(1)取3份待测样品均加入二氯甲烷提取，再加入下列溶液萃取：第一份加入2mL0.1mol/L盐酸溶液，第二份加入2mL0.1mol/L氢氧化钠溶液，第三份加入2mL水。

(2)在上述上层液分别滴入3滴浓度为0.05g/mL的磷钼酸溶液，观察反应现象。

3、实验结果

结果如表2所示：

表2二氯甲烷提取液萃取后发反应现象

由下表可见，采用0.1mol/L盐酸溶液萃取罗格列酮和吡格列酮反应现象明显，而碱和水萃取无效；加了罗格列酮和吡格列酮的阳性样品盐酸萃取液呈反应，不加罗格列酮和吡格列酮的阳性样品盐酸萃取液不呈反应。

同时更重要的还说明一个问题，复合添加的瑞格列奈虽然可以被二氯甲烷提取，但不能转移到盐酸溶液中。这样经过二氯甲烷提取和盐酸萃取的两步操作，完全排除了其它物质可能产生的检测干扰。

C、人为添加罗格列酮和吡格列酮的检测效果

1、实验材料

(1)自制阳性样品：

1#样品：1mg罗格列酮与1粒糖尿乐胶囊混合制成；

2#样品：1mg吡格列酮与1粒糖尿乐胶囊混合制成；

3#样品：1mg罗格列酮、1mg吡格列酮与1粒糖尿乐胶囊混合制成；

4#样品：1mg罗格列酮与1粒降糖宁胶囊混合制成；

5#样品：1mg吡格列酮与1粒降糖宁胶囊混合制成；

(2)阴性对照物质：

阴性对照1：糖尿乐胶囊；

阴性对照2：降糖宁胶囊；

阴性对照3：盐酸二甲双胍和盐酸苯乙双胍各1mg与1粒降糖宁胶囊混合制成；

(3)溶剂对照：二氯甲烷提取，0.1mol/L盐酸萃取液。

2、实验方法

(1)取待测样品，加入二氯甲烷3mL，强烈振摇1分钟，然后过滤；

(2)在滤液中加入2mL的0.1mol/L盐酸溶液，上下翻转10次，静置30秒使两相分层；

(3)在上述上层液中滴入2滴浓度为0.05g/mL的磷钼酸溶液，如果出现沉淀或浑浊，则表明样品中可能掺杂有罗格列酮或吡格列酮，或者两者兼有。

3、实验结果

结果如表3所示：

表3人为添加罗格列酮和吡格列酮的检测效果

样品	反应现象
		1#样品	黄白色混浊
2#样品	黄白色混浊
		3#样品	黄白色混浊
4#样品	黄白色混浊
		5#样品	黄白色混浊
阴性对照1	澄清
		阴性对照2	澄清
阴性对照3	澄清
		溶剂对照	澄清

采用二氯甲烷为提取溶剂，通过对两种阴性样品的人为添加试验，可将掺杂在中成药、保健食品产品中的罗格列酮、吡格列酮从制剂辅料中充分溶出而存在于提取溶剂中，再转溶于0.1mol/L盐酸溶液，与沉淀剂磷钼酸反应十分灵敏，反应现象明显，容易判断。

D、本发明方法最低检测限的确定

1、实验材料

1#样品：0.05mg、0.1mg、0.15mg、0.2mg和0.3mg罗格列酮分别与1粒糖尿乐胶囊混合制成；

2#样品：0.1mg、0.15mg、0.2mg、0.3mg和0.4mg吡格列酮分别与1粒糖尿乐胶囊混合制成；

2、实验方法

(3)在上述上层液中滴入2滴浓度为0.05g/mL的磷钼酸溶液，如果出现沉淀或浑浊，则表明样品中可能掺杂有罗格列酮或吡格列酮。

3、实验结果

结果如表4所示：

表4最低检测限比较

由表4可见：罗格列酮、吡格列酮的最低检出量为0.1mg/片、0.15mg/片。

由上述实验结果可见，本发明的检测方法，不仅成功地排除了检测存在的干扰因素，检测结果准确；并且可检测的物质含量低、检测精度高。

具体实施方式

下面提供利用本发明的检测方法进行检测实践的情况。

实施例1

检测市售糖尿乐胶囊(批号：100501)：国药控股深圳中药有限公司，每瓶0.3g*30s。口服，一次3～4粒，一日3次。

试剂盒组成：

试剂1：二氯甲烷(化学纯)；

试剂2：0.08mol/L盐酸溶液；

试剂3：0.04g/mL的磷钼酸溶液。

取1粒待检样品内容物，加入3mL二氯甲烷强力振摇40秒，然后过滤；在滤液中加入2mL的0.08mol/L盐酸溶液，上下翻转8次，静置30秒使两相分层；在上述上层液中滴入2滴浓度为0.04g/mL的磷钼酸溶液。

结果：无沉淀产生，溶液澄清。

标准方法验证：取1粒待检样品，用液-质联用方法检测，结果显示罗格列酮和吡格列酮均为阴性。

证明本发明的方法检测准确可靠。

实施例2

试剂盒组成：

试剂1：二氯甲烷(化学纯)；

试剂2：0.1mol/L盐酸溶液；

试剂3：0.05g/mL的磷钼酸溶液。

取1粒待检样品内容物，加入3mL二氯甲烷强力振摇1分钟，然后过滤；在滤液中加入2mL的0.1mol/L盐酸溶液，上下翻转10次，静置30秒使两相分层；在上述上层液中滴入2滴浓度为0.05g/mL的磷钼酸溶液。

结果：无沉淀产生，溶液澄清。

证明本发明的方法检测准确可靠。

实施例3

检测市售降糖宁胶囊(批号：1006271)：惠州市罗浮山制药有限公司，每粒装0.4g，48粒/盒。口服，一次4～6粒，一日3次。

试剂盒组成：

试剂1：二氯甲烷(分析纯)；

试剂2：0.12mol/L盐酸溶液；

试剂3：0.1g/mL的磷钼酸溶液。

取1粒待检样品内容物，加入2mL二氯甲烷强力振摇1分钟，然后过滤；在滤液中加入3mL的0.12mol/L盐酸溶液，上下翻转10次，静置45秒使两相分层；在上述上层液中滴入1滴浓度为0.1g/mL的磷钼酸溶液。

结果：无沉淀产生，溶液澄清。

证明本发明的方法检测准确可靠。

实施例4

试剂盒组成：

试剂1：二氯甲烷(化学纯)；

试剂2：0.1mol/L盐酸溶液；

试剂3：0.05g/mL的磷钼酸溶液。

结果：无沉淀产生，溶液澄清。

证明本发明的方法检测准确可靠。

实施例5

检测市售唐诺胶囊(无批号)：四平市颐宫健康食品技术开发有限公司；批准文号：吉四卫食准字(2007)01140120；0.3g×60粒/瓶。每日2次，3粒/次，或者每日3次，分别为早上2-3粒，中午1-2粒，晚上2-3粒。

试剂盒组成：

试剂1：二氯甲烷溶液；

试剂2：0.1mol/L盐酸溶液；

试剂3：0.05g/mL的磷钼酸溶液。

结果：上层液产生黄白色浑浊。

标准方法验证：取1粒待检样品，用液-质联用方法检测，结果显示二甲双胍、格列苯脲、罗格列酮均为阳性。

证明本发明的方法检测准确可靠。

实施例6

检测市售复方蜂胶胶囊(批号：20100705)：北京康诺保健食品厂；批准文号：国食健字G20070332；0.4g/粒。每日2次，每次2粒。

试剂盒组成：

试剂1：二氯甲烷溶液；

试剂2：0.1mol/L盐酸溶液；

试剂3：0.05g/mL的磷钼酸溶液。

结果：上层液产生黄白色浑浊。

标准方法验证：取1粒待检样品，用液-质联用方法检测，结果显示二甲双胍、比格列酮、格列本脲均为阳性。

证明本发明的方法检测准确可靠。

Claims

1.一种中成药、保健食品中罗格列酮或吡格列酮的检测方法，包括以下步骤：

(1)取待测样品，按5～10mL/g样品加入二氯甲烷，强烈振摇至少40秒，然后过滤；

(3)在上述上层液中滴入适量浓度为0.04-0.1g/mL的磷钼酸溶液，如果出现沉淀或浑浊，则表明样品中掺杂有罗格列酮或吡格列酮。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述的样品加入二氯甲烷后，强烈振摇1分钟。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述的滤液中加入2mL的0.1mol/L盐酸溶液。

4.根据权利要求1或3所述的检测方法，其特征在于：所述的滤液中加盐酸溶液后翻转10次，静置30秒分层。

5.根据权利要求1或2或3所述的检测方法，其特征在于：所述的静置后的上层液中滴入2滴浓度为0.05g/mL的磷钼酸溶液。

6.一种应用权利要求1所述的检测方法进行快速检测的试剂盒，包括以下试剂：

试剂1：二氯甲烷；

试剂2：0.08～0.12mol/L盐酸溶液；

试剂3：0.04-0.1g/mL磷钼酸溶液。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于：所述的二氯甲烷的纯度为分析纯。

8.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于：所述的盐酸溶液浓度为0.1mol/L。

9.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于：所述的磷钼酸溶液浓度为0.05g/mL。

10.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒中二氯甲烷为3mL、盐酸溶液为2mL、磷钼酸溶液装于滴液瓶中且不少于2滴。