CN102351956A - 一种巴戟天多糖的提取方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种巴戟天多糖的提取方法，属于中药技术领域。它解决了现有巴戟天多糖的提取方法中存在工艺步骤复杂、去蛋白效果差、得到的巴戟天多糖的产率和纯度低的问题。本发明巴戟天多糖的提取方法包括以下步骤：将巴戟天根茎干燥粉碎至40～80目；取巴戟天粉未加氯仿/甲醇混合溶剂回流提取；过滤所得的滤饼先用醇提，再加水浸提；之后过滤浓缩滤液，浓缩液进行醇沉处理，过滤得巴戟天粗多糖；将巴戟天粗多糖加入正丁醇/三氯乙酸混合溶剂中处理，之后水溶入层析柱洗脱，流出液经浓缩、醇沉、过滤、干燥后得巴戟天多糖。本发明巴戟天多糖的提取方法工艺简单，去蛋白效果佳，所提取的巴戟天多糖所含杂质少，产率和纯度高。

Description

一种巴戟天多糖的提取方法
技术领域
本发明涉及一种中药材的提取物，更具体的说，涉及一种巴戟天多糖的提取方法，属于中药技术领域。
背景技术
巴戟天是一种双子叶植物茜草科，主要分布于广东、广西、福建、海南等地区的热带和亚热带地区，是一种具有多种药理活性的中药材，且具有较高的药用价值，被喻为我国著名的“四大南药”之一。巴戟天作为一种中药，尤其是其具有增加机体免疫功能、提高造血功能、抗衰老、抗抑郁、抗肿瘤、调节神经系统和内分泌系统等多种功效，也越来越多的受到科研工作者的研究。
巴戟天中药材中含有大量的巴戟天多糖，是巴戟天具有药理活性的主要成分之一，尤其以巴戟天根茎中含有的巴戟天多糖最高，一般巴戟天根茎中巴戟天多糖的含量约占41％。多糖是由许多单糖分子，通过苷键连接而成的多于20个糖基的糖链。而巴戟天多糖是由不同的多糖组成的一种组合物，这些多糖主要由果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖等糖单元通过苷键形成的多糖。现有技术中有通过对巴戟天根茎进行提取得到巴戟天多糖，但是由于对巴戟天多糖提取的方法研究较少，且提取出的巴戟天多糖的产率和纯度也较差。
如中国专利申请(公开号：CN 101357949A)公开了一种巴戟天多糖的提取方法及在卷烟中的应用，其具体公开的巴戟天多糖的提取方法，包括以下步骤：将巴戟天烘干，之后粉碎至10～100目；取巴戟天粉末加入水中，在50～100℃条件下，进行浸提；之后过滤、浓缩滤液；将浓缩液加入乙醇中，保持乙醇体积分数为80％，静置沉析、过滤后即得巴戟天粗多糖；将巴戟天粗多糖放入水中进行复溶，再加入体积为粗多糖溶液0.1～1倍的sevag试剂，振荡、静置，分层，去除下层稠状和sevag和蛋白质的混合物；再用氨水将pH值调节至9～10，慢慢加入质量比为30％的双氧水，直至溶液变成淡黄色；进行脱色、浓缩，再加入体积分数为95～100％的乙醇溶液，保持乙醇体积分数为80％(V/V)，静置，沉析24～48小时，过滤得巴戟天多糖。该方法虽然能够提取出巴戟天多糖，但是该方法工艺步骤比较复杂，提取得到的巴戟天多糖所含的杂质较多，去蛋白效果差，且得到的巴戟天多糖的产率和纯度都较低，不利于实际生产应用。
发明内容
本发明目的是针对现有技术中存在的缺陷，提供一种工艺简单，去蛋白效果佳，且产率和纯度都较高的巴戟天多糖的提取方法。
本发明的目的是通过以下技术方案得以实现的，一种巴戟天多糖的提取方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：
A、预处理：选取巴戟天根茎进行洗涤、剔除杂质、干燥处理后，粉碎，过40～80目筛，得到巴戟天粉未；
B、脱脂、脱色：将上述得到的巴戟天粉未加入到氯仿/甲醇混合溶剂中，升温至回流，进行脱脂、脱色处理，过滤，收集滤饼；
C、提取：将步骤B中得到的滤饼加入到醇溶剂中，升温至回流，回流反应2～6小时，过滤，将得到的固体物再加入到水中，升温至50℃～70℃，搅拌，提取0.5～2.0小时，过滤，收集滤液，剩余的残渣可再进行提取；
D、浓缩、干燥：将步骤C中得到的滤液升温至60℃～80℃，进行减压浓缩，得浓缩液，将所得的浓缩液与乙醇溶液混合，进行醇沉处理，过滤，用有机溶剂进行洗涤，得巴戟天粗多糖；
E、分离、纯化：将巴戟天粗多糖加入到正丁醇/三氯乙酸混合溶剂中进行脱蛋白处理后，用水进行溶解后加入到层析柱中，再用0.05mol/L～0.15mol/L的NaCl溶液进行洗脱，收集流出液，减压浓缩、醇沉、过滤、干燥，得巴戟天多糖。
本发明的上述一种巴戟天多糖的提取方法，步骤A中所述的巴戟天经过粉碎后，过筛，更有利于后续的提取，使巴戟天根茎中巴戟天多糖更容易被提取出来，也能提高提取效果，也有利于后续的脱脂、脱蛋白等步骤中的去脂和去蛋白过程，从而也提高了提取的巴戟天多糖的纯度和含量。
作为优选，上述步骤B中所述的氯仿/甲醇混合溶剂与巴戟天粉未的重量比为：氯仿/甲醇混合溶剂∶巴戟天粉未为4～15∶1；所述的氯仿/甲醇混合溶剂的氯仿与甲醇的体积比为：氯仿∶甲醇＝2～4∶1。采用极性的甲醇溶剂和非极性的氯仿溶剂的混合溶剂主要是作为一种脱脂剂，能够使巴戟天中结合态的脂类物质游离出来，同时还能与磷脂等极性较大的脂类物质的亲和性增大，达到有效去除巴戟天中的脂类物质的目的，从而使脱脂更彻底，也有利于提高巴戟天多糖的纯度。现有技术中是先采用水进行提取，这样子操作不仅将巴戟天多糖提取出来，同时也将大部分的脂类物质也提取出来，与巴戟天多糖混合在一起，在后继处理过程中不易除去，影响最终产品的纯度，而且色泽也不好。而本发明利用巴戟天多糖不溶于有机溶剂的原理，同时选用氯仿/甲醇混合溶剂进行提取，能够有效的提取出巴戟天根茎中游离态的脂类物质，又不影响巴戟天根茎中巴戟天多糖的含量，脱脂的效果好，而且采用本发明的氯仿/甲醇混合溶剂在脱脂过程中也能够有效的脱去巴戟天根茎中的其它杂质和杂色素，从而也起到了脱色的作用，有利于提高巴戟天多糖的外观和色泽。在该优选范围内，能更有效的脱除脂类物质，且脱色效果也较好，如果加入的混合溶剂过少，则脱脂不彻底，脱色也达不到要求；如果加入的过多，则增加了生产成本，不利于实际生产。
作为优选，上述步骤C中所述的醇溶剂为75％～85％乙醇水溶液，采用乙醇水溶液先进行回流处理，能有效的去除巴戟天中所含的小分子糖等一些溶于乙醇水溶液的杂质，进一步的保证提取出来的巴戟天多糖的含量和质量。
上述步骤C中采用水对固体物进行提取，因为巴戟天多糖能溶于水，从而能较彻底的提取出巴戟天多糖，同时也能去除一些不溶于水的杂质，有利于提高了巴戟天多糖的产率。作为优选，所述的水为蒸馏水，蒸馏水中杂质含量少，更有利于保证提取出来的巴戟天多糖的产品质量。
上述步骤C中所述的剩余的残渣可再进行提取，具体的过程为：将剩余的残渣加入到水中，升温至50℃～70℃，搅拌，提取0.5～2.0小时，过滤，收集滤液，剩余的残渣可再进行提取；重复提取2～3次，合并收集的滤液。对剩余的残渣进行多次提取，能够提高巴戟天多糖的收率，使巴戟天根茎中的巴戟天多糖能较彻底的被提取出来，但是，提取的次数如果太多，则容易将其他的一些杂质提取出来，从而会影响到产品的质量；另外，提取的次数如果太多，也不利于实际经济效益。
作为优选，上述步骤D中所述的醇沉处理的具体步骤为：往所得的浓缩液中加入90％～100％的乙醇溶液，所述的乙醇溶液与浓缩液的体积比为3～8∶1；搅拌10～30分钟，低温静置8h～15h后，过滤，得巴戟天粗多糖。本发明采用乙醇溶液进行醇沉处理，能更进一步的去除一些溶于醇的残留杂质。同时在醇沉过程中进行搅拌又减少了巴戟天多糖的损失和乙醇的消耗量，提高经济效益。且本发明采用低温静置，有利于加快沉降的速度和沉淀物的析出，从而缩短了工艺时间，同时也防止了乙醇的挥发损耗，同样提高了经济效益。
作为优选，上述步骤D中所述的醇沉处理的具体步骤中所述的低温静置的温度为-10℃～10℃。在本发明的温度范围内，醇沉的效果最好，所需的静置时间较短，乙醇的挥发损耗低。同时，在本发明的温度的范围内，巴戟天的多糖能够较稳定的存在，不易分解，有利于保证所提取的巴戟天多糖的质量。
本发明的上述一种巴戟天多糖的提取方法，其中步骤E中所述的正丁醇/三氯乙酸混合溶剂，采用该混合溶剂，相当于组成一个酸性体系的条件，调节体系的pH值，有利于与蛋白质形成不溶性盐沉淀，同时又能够作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变，暴露出较多的疏水性基团，使之聚集沉淀，从而有效的去除巴戟天粗多糖中所含的蛋白质杂质。作为优选，其中步骤E中所述的正丁醇/三氯乙酸混合溶剂与巴戟天粗多糖的重量比为0.5～1.5∶1，在该范围内，能有效的去除蛋白质，效果更好。作为更进一步的优选，所述的正丁醇/三氯乙酸混合溶剂中正丁醇与三氯乙酸的体积比为10～30∶1。三氯乙酸加入的量如果过多，刺激性会比较大，不利于实际操作，且容易使提取的巴戟天多糖色泽不佳，影响产品的质量；如果加入的太少，则不利于使体系中的蛋白变性改变结构，从而也影响去蛋白的效果。
作为优选，在上述步骤E中所述的脱蛋白之后先采用透析法处理，再用水进行溶解加入到层析柱中。透析法是利用小分子物质在溶液中可通过半透膜，而大分子物质不能通过半透膜的性质，以达到分离、纯化目的的一种方法。本发明脱蛋白之后，先采用透析法处理，能更进一步的除去巴戟天多糖中的小分子物质，而巴戟天多糖是一种大分子物质，不能经过半透膜，从而达到更有效去除杂质的目的，提高产品纯度的同时又不影响巴戟天多糖的收率。
作为优选，本发明的上述一种巴戟天多糖的提取方法，其中步骤E中所述的层析柱为葡聚糖凝胶柱，采用葡聚糖凝胶柱，能更有效的分离出巴戟天多糖，还能有效的阻止未处理尽的蛋白分子，使得到的巴戟天多糖纯度更高。作为更进一步的优选，所述的葡聚糖凝胶柱为Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱、Sephadex G-75葡聚糖凝胶柱或Sephadex G-150葡聚糖凝胶柱中的一种。采用Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱、Sephadex G-75葡聚糖凝胶柱和Sephadex G-150葡聚糖凝胶柱进行洗脱的效果比采用其它葡聚糖凝胶柱效果都更好。
作为优选，上述步骤E中所述的洗脱的速度为0.5mL/min～1.5mL/min。由于巴戟天多糖中各组分的分子量有所不同，在凝胶柱上受到的阻滞作用不同，在洗脱过程中，洗脱出巴戟天多糖的速度也有所不同。而在本发明的上述范围内，能有效的洗脱出巴戟天多糖，且在洗脱过程中流出液的分离效果明显，更有利于提高巴戟天多糖的纯度。
作为优选，上述步骤E中所述的收集流出液采用苯酚—硫酸法跟踪，对流出液进行检测，收集多糖含量大于30％的流出液。步骤E中所述的醇沉可以按照步骤D所述的醇沉处理方法相类似。
综上所述，本发明具有以下优点：
1、本发明一种巴戟天多糖的提取方法，具有去蛋白效果好，脱脂、脱色效果好，且得到的巴戟天多糖的纯度高，药用效果好，且提取的巴戟天多糖产率高。
2、本发明一种巴戟天多糖的提取方法，所需的生产设备均为本领域普通的设备，且工艺过程简单，制造成本低，所需的生产周期短，具有较好的经济价值。
具体实施方式
下面通过具体实施例，对本发明的技术方案做进一步的具体说明，但本发明并不局限于这些实施例。
实施例1
选取巴戟天根茎先进行洗涤、剔除杂质后，在60℃的条件下烘干，然后采用粉碎机进行粉碎至60目，得到巴戟天粉末，称取100g巴戟天粉未加入到400g氯仿/甲醇混合溶剂(氯仿∶甲醇的体积比为2∶1)，升温至在60℃的条件下，回流2小时，进行脱脂、脱色处理，回流结束后，过滤，除去滤液，收集滤饼，将收集的滤饼加入到体积分数为80％的乙醇水溶液中，升温至80℃的条件下回流2小时，回流结束后，过滤，除去滤液，将得到的固体物再加入到100mL蒸馏水中，升温至60℃，搅拌提取1小时，过滤，收集滤液，剩余的残渣可再进行提取；将收集的滤液升温至60℃～70℃的条件下，控制真空度为0.09MPa以上，进行减压蒸馏浓缩，浓缩至约30mL浓缩液，再往浓缩液中加入150mL体积分数为95％的乙醇水溶液，搅拌，降温至0℃，再搅拌30分钟，然后，低温静置12h后，所述的低温静置的温度为-5℃～5℃，静置结束后，采用离心机进行离心，转速为2000rpm/min，离心，再依次用无水乙醇、丙酮进行洗涤，离心甩干后，得巴戟天粗多糖湿品，放入真空干燥机中，控制温度在50℃～55℃，真空度在0.09MPa以上，干燥5小时，得巴戟天粗多糖干品，产率为22.2％。
将上述巴戟天粗多糖干品加入正丁醇/三氯乙酸混合溶剂中，所述的巴戟天粗多糖干品与正丁醇/三氯乙酸混合溶剂的重量比为1∶1，所述的正丁醇/三氯乙酸混合剂中正丁醇与三氯乙酸的体积比为20∶1，然后升温至60℃条件下，回流2小时，进行脱蛋白处理后，再通过透析法去除其中的一些小分子杂质，然后将得到的巴戟天粗多糖加入到蒸馏水中使完全溶解后，再加入到Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱中，用0.1mol/L的NaCl溶液进行洗脱，洗脱速度为1mL/min，采用苯酚-硫酸法进行跟踪，对流出液进行检测，收集多糖含量大于30％的流出液，然后将得到的流出液加入到另外反应容器中，加热，升温至50℃～55℃，真空度在0.09MPa以上，减压浓缩，浓缩至原流出液体积的1/5，得浓缩液，再往浓缩液中加入相当于浓缩液体积5倍量的体积分数为95％的乙醇水溶液，搅拌下，降温至0℃，控制温度在0℃～5℃的条件下，搅拌30分钟，然后静置12h，静置结束后，采用离心机进行离心，转速为2000rpm/min，离心，再依次用无水乙醇、丙酮进行洗涤，离心甩干后，得巴戟天多糖湿品，将得到的巴戟天多糖湿品放入真空干燥机中，控制温度在50℃～55℃，真空度在0.09MPa以上，干燥8小时，得巴戟天多糖成品，经测定分析，巴戟天多糖的纯度为90％。
实施例2
选取巴戟天根茎先进行洗涤、剔除杂质后，在60℃的条件下烘干，然后采用粉碎机进行粉碎至40目，得到巴戟天粉末，称取100g巴戟天粉未加入到1500g氯仿/甲醇混合溶剂(氯仿∶甲醇的体积比为4∶1)，升温至在60℃的条件下，回流2小时，进行脱脂、脱色处理，回流结束后，过滤，除去滤液，收集滤饼，将收集的滤饼加入到体积分数为85％的乙醇水溶液中，升温至80℃的条件下回流2小时，回流结束后，过滤，除去滤液，将得到的固体物再加入到100mL蒸馏水中，升温至50℃，搅拌提取2小时，过滤，收集滤液，将剩余的残渣加入到水中，升温至50℃，搅拌，提取2小时，过滤，收集滤液，剩余的残渣可再进行提取；重复提取2次，合并收集的滤液；将收集的滤液升温至70℃～80℃的条件下，控制真空度为0.09MPa以上，进行减压蒸馏浓缩，浓缩至约30mL浓缩液，再往浓缩液中加入240mL体积分数为90％的乙醇水溶液，搅拌，降温至0℃，再搅拌15分钟，然后，低温静置8h后，所述的低温静置的温度为-10℃～0℃，静置结束后，采用离心机进行离心，转速为2000rpm/min，离心，再依次用无水乙醇、丙酮进行洗涤，离心甩干后，得巴戟天粗多糖湿品，放入真空干燥机中，控制温度在50℃～55℃，真空度在0.09MPa以上，干燥5小时，得巴戟天粗多糖干品，产率为23.2％。
将上述巴戟天粗多糖干品加入正丁醇/三氯乙酸混合溶剂中，所述的巴戟天粗多糖干品与正丁醇/三氯乙酸混合溶剂的重量比为1∶0.5，所述的正丁醇/三氯乙酸混合剂中正丁醇与三氯乙酸的体积比为10∶1，然后升温至60℃条件下，回流2小时，进行脱蛋白处理后，再通过透析法去除其中的一些小分子杂质，然后将得到的巴戟天粗多糖加入到蒸馏水中使完全溶解后，再加入到Sephadex G-75葡聚糖凝胶柱中，用0.05mol/L的NaCl溶液进行洗脱，洗脱速度为1.5mL/min，采用苯酚-硫酸法进行跟踪，对流出液进行检测，收集多糖含量大于30％的流出液，然后将得到的流出液加入到另一反应容器中，加热，升温至50℃～55℃，真空度在0.09MPa以上，减压浓缩，浓缩至原流出液体积的1/5，得浓缩液，再往浓缩液中加入相当于浓缩液体积8倍量的体积分数为95％的乙醇水溶液，搅拌下，降温至0℃，控制温度在5℃～10℃的条件下，搅拌30分钟，然后静置15h，静置结束后，采用离心机进行离心，转速为2000rpm/min，离心，再依次用无水乙醇、丙酮进行洗涤，离心甩干后，得巴戟天多糖湿品，将得到的巴戟天多糖湿品放入真空干燥机中，控制温度在50℃～55℃，真空度在0.09MPa以上，干燥8小时，得巴戟天多糖成品，经测定分析，巴戟天多糖的纯度为85％。
实施例3
选取巴戟天根茎先进行洗涤、剔除杂质后，在60℃的条件下烘干，然后采用粉碎机进行粉碎至80目，得到巴戟天粉末，称取100g巴戟天粉未加入到400g氯仿/甲醇混合溶剂(氯仿∶甲醇的体积比为3∶1)，升温至在60℃的条件下，回流2小时，进行脱脂、脱色处理，回流结束后，过滤，除去滤液，收集滤饼，将收集的滤饼加入到体积分数为75％的乙醇水溶液中，升温至80℃的条件下回流2小时，回流结束后，过滤，除去滤液，将得到的固体物再加入到100mL蒸馏水中，升温至70℃，搅拌提取0.5小时，过滤，收集滤液，将剩余的残渣加入到水中，升温至70℃，搅拌，提取0.5小时，过滤，收集滤液，剩余的残渣可再进行提取；重复提取3次，合并收集的滤液；将收集的滤液升温至60℃～70℃的条件下，控制真空度为0.09MPa以上，进行减压蒸馏浓缩，浓缩至约30mL浓缩液，再往浓缩液中加入90mL体积分数为100％的乙醇水溶液，搅拌，降温至0℃，再搅拌30分钟，然后，低温静置10h后，所述的低温静置的温度为-5℃～0℃，静置结束后，采用离心机进行离心，转速为2000rpm/min，离心，再依次用无水乙醇、丙酮进行洗涤，离心甩干后，得巴戟天粗多糖湿品，放入真空干燥机中，控制温度在50℃～55℃，真空度在0.09MPa以上，干燥5小时，得巴戟天粗多糖干品，产率为23.6％。
将上述巴戟天粗多糖干品加入正丁醇/三氯乙酸混合溶剂中，所述的巴戟天粗多糖干品与正丁醇/三氯乙酸混合溶剂的重量比为1∶1.5，所述的正丁醇/三氯乙酸混合剂中正丁醇与三氯乙酸的体积比为30∶1，然后升温至60℃条件下，回流2小时，进行脱蛋白处理后，再通过透析法去除其中的一些小分子杂质，然后将得到的巴戟天粗多糖加入到蒸馏水中使完全溶解后，再加入到Sephadex G-150葡聚糖凝胶柱中，用0.15mol/L的NaCl溶液进行洗脱，洗脱速度为0.5mL/min，采用苯酚-硫酸法进行跟踪，对流出液进行检测，收集多糖含量大于30％的流出液，然后将得到的流出液加入到另外反应容器中，加热，升温至50℃～55℃，真空度在0.09MPa以上，减压浓缩，浓缩至原流出液体积的1/5，得浓缩液，再往浓缩液中加入相当于浓缩液体积3倍量的体积分数为95％的乙醇水溶液，搅拌下，降温至0℃，控制温度在-5℃～0℃的条件下，搅拌30分钟，然后静置10h，静置结束后，采用离心机进行离心，转速为2000rpm/min，离心，再依次用无水乙醇、丙酮进行洗涤，离心甩干后，得巴戟天多糖湿品，将得到的巴戟天多糖湿品放入真空干燥机中，控制温度在50℃～55℃，真空度在0.09MPa以上，干燥8小时，得巴戟天多糖成品，经测定分析，巴戟天多糖的纯度为88％。
实施例4
选取巴戟天根茎先进行洗涤、剔除杂质后，在60℃的条件下烘干，然后采用粉碎机进行粉碎至50目，得到巴戟天粉末，称取100g巴戟天粉未加入到800g氯仿/甲醇混合溶剂(氯仿∶甲醇的体积比为2∶1)，升温至在60℃的条件下，回流2小时，进行脱脂、脱色处理，回流结束后，过滤，除去滤液，收集滤饼，将收集的滤饼加入到体积分数为85％的乙醇水溶液中，升温至80℃的条件下回流2小时，回流结束后，过滤，除去滤液，将得到的固体物再加入到100mL蒸馏水中，升温至60℃，搅拌提取1小时，过滤，收集滤液，将剩余的残渣加入到水中，升温至70℃，搅拌，提取1小时，过滤，收集滤液，剩余的残渣可再进行提取；重复提取2次，合并收集的滤液；将收集的滤液升温至65℃～70℃的条件下，控制真空度为0.09MPa以上，进行减压蒸馏浓缩，浓缩至约30mL浓缩液，再往浓缩液中加入180mL体积分数为95％的乙醇水溶液，搅拌，降温至0℃，再搅拌30分钟，然后，低温静置11h后，所述的低温静置的温度为-5℃～5℃，静置结束后，采用离心机进行离心，转速为2000rpm/min，离心，再依次用无水乙醇、丙酮进行洗涤，离心甩干后，得巴戟天粗多糖湿品，放入真空干燥机中，控制温度在50℃～55℃，真空度在0.09MPa以上，干燥5小时，得巴戟天粗多糖干品，产率为24.1％。
将上述巴戟天粗多糖干品加入正丁醇/三氯乙酸混合溶剂中，所述的巴戟天粗多糖干品与正丁醇/三氯乙酸混合溶剂的重量比为1∶0.8，所述的正丁醇/三氯乙酸混合剂中正丁醇与三氯乙酸的体积比为25∶1，然后升温至60℃条件下，回流2小时，进行脱蛋白处理后，再通过透析法去除其中的一些小分子杂质，然后将得到的巴戟天粗多糖加入到蒸馏水中使完全溶解后，再加入到Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱中，用0.08mol/L的NaCl溶液进行洗脱，洗脱速度为1mL/min，采用苯酚-硫酸法进行跟踪，对流出液进行检测，收集多糖含量大于30％的流出液，然后将得到的流出液加入到另外反应容器中，加热，升温至50℃～55℃，真空度在0.09MPa以上，减压浓缩，浓缩至原流出液体积的1/5，得浓缩液，再往浓缩液中加入相当于浓缩液体积5倍量的体积分数为95％的乙醇水溶液，搅拌下，降温至0℃，控制温度在-10℃～-5℃的条件下，搅拌30分钟，然后静置9h，静置结束后，采用离心机进行离心，转速为2000rpm/min，离心，再依次用无水乙醇、丙酮进行洗涤，离心甩干后，得巴戟天多糖湿品，将得到的巴戟天多糖湿品放入真空干燥机中，控制温度在50℃～55℃，真空度在0.09MPa以上，干燥8小时，得巴戟天多糖成品，经测定分析，巴戟天多糖的纯度为87％。
实施例5
选取巴戟天根茎先进行洗涤、剔除杂质后，在60℃的条件下烘干，然后采用粉碎机进行粉碎至60目，得到巴戟天粉末，称取100g巴戟天粉未加入到500g氯仿/甲醇混合溶剂(氯仿∶甲醇的体积比为2∶1)，升温至在60℃的条件下，回流2小时，进行脱脂、脱色处理，回流结束后，过滤，除去滤液，收集滤饼，将收集的滤饼加入到体积分数为80％的乙醇水溶液中，升温至80℃的条件下回流2小时，回流结束后，过滤，除去滤液，将得到的固体物再加入到100mL蒸馏水中，升温至60℃，搅拌提取1小时，过滤，收集滤液，将剩余的残渣加入到水中，升温至60℃，搅拌，提取1小时，过滤，收集滤液，剩余的残渣可再进行提取；重复提取2次，合并收集的滤液；将收集的滤液升温至60℃～70℃的条件下，控制真空度为0.09MPa以上，进行减压蒸馏浓缩，浓缩至约30mL浓缩液，再往浓缩液中加入150mL体积分数为95％的乙醇水溶液，搅拌，降温至0℃，再搅拌30分钟，然后，低温静置12h后，所述的低温静置的温度为-5℃～5℃，静置结束后，采用离心机进行离心，转速为2000rpm/min，离心，再依次用无水乙醇、丙酮进行洗涤，离心甩干后，得巴戟天粗多糖湿品，放入真空干燥机中，控制温度在50℃～55℃，真空度在0.09MPa以上，干燥5小时，得巴戟天粗多糖干品，产率为25.2％。
将上述巴戟天粗多糖干品加入正丁醇/三氯乙酸混合溶剂中，所述的巴戟天粗多糖干品与正丁醇/三氯乙酸混合溶剂的重量比为1∶1，所述的正丁醇/三氯乙酸混合剂中正丁醇与三氯乙酸的体积比为20∶1，然后升温至60℃条件下，回流2小时，进行脱蛋白处理后，再通过透析法去除其中的一些小分子杂质，然后将得到的巴戟天粗多糖加入到蒸馏水中使完全溶解后，再加入到Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱中，用0.1mol/L的NaCl溶液进行洗脱，洗脱速度为1mL/min，采用苯酚-硫酸法进行跟踪，对流出液进行检测，收集多糖含量大于30％的流出液，然后将得到的流出液加入到另外反应容器中，加热，升温至50℃～55℃，真空度在0.09MPa以上，减压浓缩，浓缩至原流出液体积的1/5，得浓缩液，再往浓缩液中加入相当于浓缩液体积5倍量的体积分数为95％的乙醇水溶液，搅拌下，降温至0℃，控制温度在-3℃～3℃的条件下，搅拌30分钟，然后静置12h，静置结束后，采用离心机进行离心，转速为2000rpm/min，离心，再依次用无水乙醇、丙酮进行洗涤，离心甩干后，得巴戟天多糖湿品，将得到的巴戟天多糖湿品放入真空干燥机中，控制温度在50℃～55℃，真空度在0.09MPa以上，干燥8小时，得巴戟天多糖成品，经测定分析，巴戟天多糖的纯度为90％。
本发明中所描述的具体实施例仅是对本发明精神作举例说明。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，但并不会偏离本发明的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。
尽管对本发明已作出了详细的说明并引证了一些具体实施例，但是对本领域熟练技术人员来说，只要不离开本发明的精神和范围可作各种变化或修正是显然的。

Claims (10)

1.一种巴戟天多糖的提取方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：
A、预处理：选取巴戟天根茎进行洗涤、剔除杂质、干燥处理后，粉碎，过40～80目筛，得到巴戟天粉未；
B、脱脂、脱色：将上述得到的巴戟天粉未加入到氯仿/甲醇混合溶剂中，升温至回流，进行脱脂、脱色处理，过滤，收集滤饼；
C、提取：将步骤B中得到的滤饼加入到醇溶剂中，升温至回流，回流反应2～6小时，过滤，将得到的固体物再加入到水中，升温至50℃～70℃，搅拌，提取0.5～2.0小时，过滤，收集滤液，剩余的残渣可再进行提取；
D、浓缩、干燥：将步骤C中得到的滤液升温至60℃～80℃，进行减压浓缩，得浓缩液，将所得的浓缩液与乙醇溶液混合，进行醇沉处理，过滤，用有机溶剂进行洗涤，得巴戟天粗多糖；
E、分离、纯化：将巴戟天粗多糖加入到正丁醇/三氯乙酸混合溶剂中进行脱蛋白处理后，用水进行溶解后加入到层析柱中，再用0.05mol/L～0.15mol/L的NaCl溶液进行洗脱，收集流出液，减压浓缩、醇沉、过滤、干燥，得巴戟天多糖。
2.根据权利要求1所述的一种巴戟天多糖的提取方法，其特征在于：步骤B中所述的氯仿/甲醇混合溶剂与巴戟天粉未的重量比为：氯仿/甲醇混合溶剂∶巴戟天粉未为4～15∶1；所述的氯仿/甲醇混合溶剂的氯仿与甲醇的体积比为：氯仿∶甲醇＝2～4∶1。
3.根据权利要求1所述的一种巴戟天多糖的提取方法，其特征在于：步骤C中所述的醇溶剂为75％～85％乙醇水溶液。
4.根据权利要求1或2或3所述的一种巴戟天多糖的提取方法，其特征在于：步骤C中所述的剩余的残渣可再进行提取，具体的过程为：将剩余的残渣加入到水中，升温至50℃～70℃，搅拌，提取0.5～2.0小时，过滤，收集滤液，剩余的残渣可再进行提取；重复提取2～3次，合并收集的滤液。
5.根据权利要求1或2或3所述的一种巴戟天多糖的提取方法，其特征在于：上述步骤D中所述的醇沉处理的具体步骤为：往所得的浓缩液中加入90％～100％的乙醇溶液，所述的乙醇溶液与浓缩液的体积比为3～8∶1；搅拌10～30分钟，低温静置8h～15h后，过滤，得巴戟天粗多糖。
6.根据权利要求5所述的一种巴戟天多糖的提取方法，其特征在于：所述的低温静置的温度为-10℃～10℃。
7.根据权利要求1或2或3所述的一种巴戟天多糖的提取方法，其特征在于：其中步骤E中所述的正丁醇/三氯乙酸混合溶剂与巴戟天粗多糖的重量比为0.5～1.5∶1；所述的正丁醇/三氯乙酸混合溶剂中正丁醇与三氯乙酸的体积比为：正丁醇∶三氯乙酸＝10～30∶1。
8.根据权利要求1所述的一种巴戟天多糖的提取方法，其特征在于：步骤E中所述的层析柱为葡聚糖凝胶柱。
9.根据权利要求8所述的一种巴戟天多糖的提取方法，其特征在于：所述的葡聚糖凝胶柱为Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱、Sephadex G-75葡聚糖凝胶柱或Sephadex G-150葡聚糖凝胶柱中的一种。
10.根据权利要求1或2或3或8所述的一种巴戟天多糖的提取方法，其特征在于：步骤E中所述的洗脱的速度为0.5mL/min～1.5mL/min。
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Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103638162A (zh) * 2013-11-29 2014-03-19 郑州大学 一种巴戟天寡糖4聚糖在制备抗心肌缺血及再灌注损伤药物中的应用
CN104119576A (zh) * 2014-06-19 2014-10-29 无限极（中国）有限公司 一种具有调节肿瘤微环境功效的巴戟天和黄精复合多糖及其制备方法和应用
CN104116026A (zh) * 2014-06-19 2014-10-29 无限极（中国）有限公司 盐制巴戟天多糖在制备具有辅助抑制前列腺癌功效的功能食品中的应用
CN105267356A (zh) * 2014-06-27 2016-01-27 广州万正药业有限公司 一种巴戟天寡糖及其制备方法
CN106668058A (zh) * 2017-03-02 2017-05-17 福建医科大学 一种中药成分巴戟天多糖对雄性生殖系统损伤的修复作用
CN107118283A (zh) * 2017-05-26 2017-09-01 广东药科大学 巴戟天糖聚物及其制备方法和用途
CN107266604A (zh) * 2017-07-29 2017-10-20 安徽博格生物科技有限公司 一种具有抗骨质疏松功效的巴戟天多糖类成分提取方法
CN107455741A (zh) * 2017-08-08 2017-12-12 哈尔滨师范大学 一种具有抗氧化功能的保健食品及其制备方法和应用
CN108752497A (zh) * 2018-06-05 2018-11-06 上海中医药大学附属曙光医院 巴戟天水提物、寡糖和多糖制备，及其应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101348812A (zh) * 2007-07-19 2009-01-21 中国医学科学院放射医学研究所 一种地衣多糖及其制备方法和应用
CN101357949A (zh) * 2008-09-25 2009-02-04 龙岩烟草工业有限责任公司 巴戟天多糖的提取方法及在卷烟中的应用
CN101357950A (zh) * 2008-09-25 2009-02-04 龙岩烟草工业有限责任公司 巴戟天粗多糖提取方法及在卷烟中的应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101348812A (zh) * 2007-07-19 2009-01-21 中国医学科学院放射医学研究所 一种地衣多糖及其制备方法和应用
CN101357949A (zh) * 2008-09-25 2009-02-04 龙岩烟草工业有限责任公司 巴戟天多糖的提取方法及在卷烟中的应用
CN101357950A (zh) * 2008-09-25 2009-02-04 龙岩烟草工业有限责任公司 巴戟天粗多糖提取方法及在卷烟中的应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
何传波等: "巴戟天多糖的提取及纯化研究", 《食品科学》 *
庄江兴等: "巴戟天多糖的分离与纯化新方法", 《厦门大学学报（自然科学版）》 *
江咏等: "巴戟天多糖亲和柱层析纯化的研究", 《食品科学》 *

Cited By (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103638162A (zh) * 2013-11-29 2014-03-19 郑州大学 一种巴戟天寡糖4聚糖在制备抗心肌缺血及再灌注损伤药物中的应用
CN104119576A (zh) * 2014-06-19 2014-10-29 无限极（中国）有限公司 一种具有调节肿瘤微环境功效的巴戟天和黄精复合多糖及其制备方法和应用
CN104116026A (zh) * 2014-06-19 2014-10-29 无限极（中国）有限公司 盐制巴戟天多糖在制备具有辅助抑制前列腺癌功效的功能食品中的应用
CN105267356A (zh) * 2014-06-27 2016-01-27 广州万正药业有限公司 一种巴戟天寡糖及其制备方法
CN105267356B (zh) * 2014-06-27 2019-08-20 广州万正药业有限公司 一种巴戟天寡糖及其制备方法
CN106668058A (zh) * 2017-03-02 2017-05-17 福建医科大学 一种中药成分巴戟天多糖对雄性生殖系统损伤的修复作用
CN107118283A (zh) * 2017-05-26 2017-09-01 广东药科大学 巴戟天糖聚物及其制备方法和用途
CN107266604A (zh) * 2017-07-29 2017-10-20 安徽博格生物科技有限公司 一种具有抗骨质疏松功效的巴戟天多糖类成分提取方法
CN107455741A (zh) * 2017-08-08 2017-12-12 哈尔滨师范大学 一种具有抗氧化功能的保健食品及其制备方法和应用
CN108752497A (zh) * 2018-06-05 2018-11-06 上海中医药大学附属曙光医院 巴戟天水提物、寡糖和多糖制备，及其应用
CN108752497B (zh) * 2018-06-05 2021-06-01 上海中医药大学附属曙光医院 巴戟天水提物、寡糖和多糖制备，及其应用

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