CN102329837A - 具有酪氨酸酶抑制剂和抗氧化剂作用的白僵菌提取物的制备方法 - Google Patents
具有酪氨酸酶抑制剂和抗氧化剂作用的白僵菌提取物的制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及具有酪氨酸酶抑制剂和抗氧化剂作用的白僵菌提取物的制备方法。该方法的操作步骤如下：1、白僵菌（Beauveriasp.）菌种选择和培养，2、发酵物中有效成分的提取和精制，精制分为初步精制和色谱法精制。本发明的白僵菌及白僵菌提取物具有酪氨酸酶抑制和抗氧化活性作用，精制品对酪氨酸酶的最低IC50-为134.5μg/ml，对大鼠肝细胞脂质氧化的最低IC50为87.2μg/ml；可作为日用品添加剂，起增白、抗氧化、抗老化、保鲜、杀菌、消炎等作用；本发明由于采取微生物发酵生产，不受环境和资源影响，易实现工业化、自动化，不受环境和自然资源的影响；本发明工艺方法的生产成本低，工艺简便、工艺稳定、易调控、成功率高；本发明适合多种规模的企业投资。
Description
技术领域
本发明属于生物制品的提取制备技术领域，涉及具有酪氨酸酶抑制剂和抗氧化剂作用的白僵菌提取物的制备方法。
背景技术
白僵菌（Beauveria sp.）的分类: 丝孢目（Hyphomycetales）丛梗孢科白僵菌属（Beauveria Vuillemin）的真菌；该属在我国常见的有三种，如：球孢白僵菌（Beauveria bassiana ）、布氏白僵菌（Beauveria brongniartii）和多形白僵菌（Beauveriaamorpha）等，是重要的昆虫病原真菌，目前主要用来对害虫进行生物防治。其中蚕在感染白僵菌后被称为白僵蚕。白僵蚕在我国传统中药中的作用主要为“祛风解痉，化痰散结”。白僵蚕的主要活性成分被认为是草酸铵，但白僵菌本身尚无药用报道。
酪氨酸酶抑制剂：酪氨酸酶兼有加氧酶和氧化酶的双重功能，在黑色素合成过程中起关键作用。它能够把单酚催化成二酚，并把二酚氧化成醌；醌在非酶促条件下形成最终的反应产物黑色素。酪氨酸酶抑制剂就是通过抑制酪氨酸酶活性从而抑制黑色素生成，因而可用来预防和治疗色素沉着和黑色素瘤等，从而在医药、化妆品和食品工业等领域有着广阔的应用前景。抗氧化剂能够有效地阻止物质的氧化败坏和老化，对于抗老化和延长物品的保质期有着重要作用，被广泛用于食品、药品、日用化学品等中。目前，应用的抗氧化剂主要是一些人工合成产品，有些近年来被发现有致癌作用，如：丁基茴香醚（Butyl bydroxy Amsol）等，正因如此，近年来天然抗氧化剂的研究越来越受到重视。目前发现的天然抗氧化剂主要有：茶多酚、芝麻酚、米糠素、栎精、胚芽油提取物、芸香苷等。由于目前发现的天然抗氧化剂，有些生产成本较高，有些性质不够不稳定，如茶多酚很易自身被氧化，因此，其应用受到一定的限制。正因如此，人们不断地在寻找新型天然高效抗氧化剂。
发明内容
为寻找新型天然高效天然酪氨酸酶抑制剂和抗氧化剂，通过对中国的100余株昆虫病原真菌代谢物进行活性研究，发现了一种白僵菌的提取物具有很强的酪氨酸酶抑制活性和抗氧化活性。本发明旨在，提供一种具有酪氨酸酶抑制剂和抗氧化剂作用的白僵菌提取物的制备方法。
具体的技术解决方案如下：
具有酪氨酸酶抑制剂和抗氧化剂作用的白僵菌提取物的制备方法的操作步骤如下：
1.1、白僵菌（Beauveria sp.）菌种选择和培养
所用的白僵菌（Beauveria sp.）为球孢白僵菌（Beauveria bassiana ）或布氏白僵菌（Beauveria brongniartii）或多形白僵菌（Beauveriaamorpha）；
具体培养方法如下：
1.1.1斜面种子培养
将保藏的白僵菌菌株接种于萨氏（SDAY）斜面培养基，于20～30℃恒温、培养4～7d，得到一级菌种；
1.1.2二级种子培养
将一级菌种接种至液体摇瓶培养基培养；
液体摇瓶培养基：葡萄糖40 g/L，蛋白胨10 g/L，酵母浸出粉10 g/L，蒸馏水定容；
在大于100 ml三角瓶中加入30～50%三角瓶体积的液体培养基，每个三角瓶接种1～3支斜面菌种，接种后置于全温振荡培养箱，温度20～30℃、转速100～200 rpm，培养3～7d，即得到二级菌种；
1.1.3三级种子培养
将二级菌种接种到10L以上发酵罐，装液量为罐体积的50～70%，接种量5～10%，通气量按体积比1:1（v/v），压力0.1MP，20～30℃恒温通气培养2～5天，得到三级菌种；
发酵罐中的培养基同液体摇瓶培养基；
1.1.4发酵罐发酵
将三级菌种压入100L以上发酵罐，发酵罐的初始装液量为按罐容积的50～70%装液，接种量为装液量的5～10%，通气量按体积比1:1（v/v），压力0.1MP，20～30℃恒温通气培养5～15天，得到发酵物；
发酵罐中的培养基同二级种子培养基；
1.2、发酵物中有效成分的提取和精制
1.2.1、预处理
将发酵物在转速大于1000转/分钟条件下离心过滤；将上清液在低于100℃温度条件下，浓缩到原体积的1/2～1/10，得到浓缩液；
1.2.2、去杂
在浓缩液中按体积比加入1～4倍乙醇，于0～40℃条件下静置沉淀5～24小时，然后在转速大于1000转/分钟离心过滤；去沉淀；将上清在温度小于100℃浓缩到原体积的1/2～1/10，得到浓缩脱醇液，同时回收乙醇；
将浓缩脱醇液按1:0.5～5的体积比，加入预处理剂，所述预处理剂为石油醚或己烷或轻汽油，混匀，萃取，去掉上层，下层的水相在温度小于100℃浓缩原体积1/2～1/10倍，得到去杂浓缩液；
1.2.3、初步精制
在去杂浓缩液中，按1:0.5～5的体积比加入萃取剂，萃取剂为丁醇或丁醇和乙酸乙酯混合物，丁醇和乙酸乙酯混合物的体积比为：2-0.5：0.5-2；萃取后去掉水层；有机相部分在低于100℃温度下浓缩到到原体积的1/2～1/10，将浓缩物在不高于170℃条件下干燥，得粗制产品；
粗制产品的性状：浅黄至棕色无定形粉末；
主要有效成分为白僵菌苷（Bauveriaoside），结构式如下，含量5-15%；
其它成分有：白僵菌酮的含量为5～15%；单糖和二糖的含量为5～20%；甾醇类化合物的含量为1～5%；核苷类的含量为5～15%；其它含量为69～30%；
1.2.4、色谱法精制
将粗制产品用甲醇或乙醇溶解，溶液浓度为1～20%，用色谱法分离纯化，具体操作如下：
用键合相为固定相，用乙醇或甲醇和水按0～100：100～0配比进行梯度洗脱，总洗脱体积为色谱柱体积的50到200倍；收集活性洗脱物在低于100℃温度以下浓缩到粘稠状，在低于170℃条件下干燥，得精制品；
所述键合相填料为反相碳十八填料即RPC18，颗粒直径为5～50微米；
精制品性状：白色至浅棕红色粉末或结晶；结构式如下：
主要有效成分为白僵菌苷（Bauveriaoside），含量80～99%；
其它成分有：白僵菌酮的含量为4～0.1%；单糖和二糖的含量为3～0.1%；甾醇类化合物的含量为2～0.1%；核苷类的含量为3～0.1%；其它含量为8～0.6%。
研究发现白僵菌（Beauveria sp.）提取物（包括粗制品和精制品）有以下活性：
1、粗制品
（1）对酪氨酸酶的抑制活性：配制粗制品浓度为0.05、0.10、0.20、0.40、0.80和1.60 mg/ml甲醇溶液，以L-酪氨酸为底物，进行酪氨酸酶抑制试验，经计算得出精制品对酪氨酸酶的半数抑制浓度IC50小于 0.64 mg/ml；
（2）抗氧化作用：将粗制品按0.05、0.10、0.20、0.40、0.80和1.60 mg/ml溶液进行抗大鼠肝细胞脂质氧化试验，结果表明IC50小于0.57 mg/ml。
2、精制品
（1）对酪氨酸酶的抑制活性：配制精制品浓度为10、40、80、120、160、200 μg/ml甲醇溶液，以L-酪氨酸为底物，进行酪氨酸酶抑制试验，经计算得出，不同批次的精制品对酪氨酸酶的半数抑制浓度IC50 134.5-210.7μg/ml；
（2）抗氧化作用：将不同批次的精制品按10、20、40、80、100、120 μg/ml溶液进行抗大鼠肝细胞脂质氧化试验，结果表明IC50为87.2-145.3μg/ml。
本发明的有益技术效果体现在下述几个方面：
1、本发明方法制备的具有酪氨酸酶抑制剂和抗氧化剂作用的白僵菌提取物，开拓了白僵菌及白僵菌提取物一个新的应用领域。它同时具有酪氨酸酶抑制和抗氧化活性。精制品对酪氨酸酶的最低IC50-为134.5μg /ml，对大鼠肝细胞脂质氧化的最低IC50为87.2μg/ml；
2、本发明制备的具有酪氨酸酶抑制剂和抗氧化剂作用的白僵菌提取物用途广泛，可作为日用品添加剂，起增白、抗氧化、抗老化、保鲜、杀菌、消炎等作用；
3、本发明由于采取微生物发酵生产，不受环境和资源影响，易实现工业化、自动化，不受环境和自然资源的影响；
4、按本发明工艺方法生产的产品成本低，工艺简便、工艺稳定、易调控、成功率高；
5、本发明生产设备投资可大可小，生产灵活，适合多种规模的企业投资。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明作进一步地描述。
实施例1：
具有酪氨酸酶抑制剂和抗氧化剂作用的白僵菌提取物的制备方法的操作步骤如下：
1.1、白僵菌菌种选择和培养
所用的白僵菌为球孢白僵菌（Beauveria bassiana ）；
具体培养方法如下：
1.1.1斜面种子培养
将保藏的白僵菌菌株接种于萨氏（SDAY）斜面培养基，于20℃恒温、培养4d，得到一级菌种；
1.1.2二级种子培养
将一级菌种接种至液体摇瓶培养基培养，
液体摇瓶培养基：葡萄糖40 g/L，蛋白胨10 g/L，酵母浸出粉10 g/L，蒸馏水定容；
在大于100 ml三角瓶中加入30%三角瓶体积的液体培养基，每个三角瓶接种1支斜面菌种，接种后置于全温振荡培养箱，温度20℃、转速100 rpm，培养3d，即得到二级菌种；
1.1.3三级种子培养
将二级菌种接种到10L发酵罐，装液量为罐体积的50%，接种量5%，通气量按体积比1:1（v/v），压力0.1MP，20℃恒温通气培养2天，得到三级菌种；
发酵罐中的培养基同液体摇瓶培养基；
1.1.4发酵罐发酵
将三级菌种压入100L发酵罐，发酵罐的初始装液量为按罐容积的50%装液，接种量为装液量的5%，通气量按体积比1:1（v/v），压力0.1MP，20℃恒温通气培养5天，得到发酵物；
发酵罐中的培养基同二级种子培养基；
1.2、发酵物中有效成分的提取和精制
1.2.1、预处理
将发酵物在转速4000转/分钟条件下离心过滤；将上清液在80℃温度条件下，浓缩到原体积的1/2，得到浓缩液；
1.2.2、去杂
在浓缩液中按体积比加入1倍乙醇，于0℃条件下静置沉淀24小时，然后在转速4000转/分钟离心过滤；去沉淀；将上清在温度80℃浓缩到原体积的1/2，得到浓缩脱醇液，同时回收乙醇；
将浓缩脱醇液按1:0.5的体积比，加入预处理剂，所述预处理剂为石油醚，混匀，萃取，去掉上层，下层的水相在温度小于100℃浓缩原体积的1/2，得到去杂浓缩液；
1.2.3、初步精制
在去杂浓缩液中，按1:0.5的体积比加入萃取剂，萃取剂为丁醇；萃取后去掉水层；有机相部分在低于80℃温度下浓缩到到原体积的1/2，将浓缩物在150℃条件下干燥，得粗制产品；
粗制产品的性状：浅黄至棕色无定形粉末；结构式如下：
主要有效成分为白僵菌苷（Bauveriaoside），含量5%；
其它成分有：白僵菌酮的含量为5%；单糖和二糖的含量为20%；甾醇类化合物的含量为1%；核苷类的含量为5%；其它含量为64%；
1.2.4、色谱法精制
将粗制产品用甲醇或乙醇溶解，溶液浓度为1%，用色谱法分离纯化，具体操作如下：
用键合相为固定相，用乙醇或甲醇和水按0～100：100～0配比进行梯度洗脱，总洗脱体积为色谱柱体积的50倍；收集活性洗脱物在80℃温度以下浓缩到粘稠状，在130℃条件下干燥，得精制品；
所述键合相填料为反相碳十八填料即RPC18，颗粒直径为5微米；
精制品性状：白色至浅棕红色粉末或结晶；结构式如下：
主要有效成分为白僵菌苷（Bauveriaoside），含量80%；
其它成分有：白僵菌酮的含量为4%；单糖和二糖的含量为3%；甾醇类化合物的含量为2%；核苷类的含量为3%；其它含量为8%。
实施例2：
具有酪氨酸酶抑制剂和抗氧化剂作用的白僵菌提取物的制备方法的操作步骤如下：
1.1、白僵菌菌种选择和培养
所用的白僵菌为布氏白僵菌（Beauveria brongniartii）；
具体培养方法如下：
1.1.1斜面种子培养
将保藏的白僵菌菌株接种于萨氏（SDAY）斜面培养基，于30℃恒温、培养7d，得到一级菌种；
1.1.2二级种子培养
将一级菌种接种至液体摇瓶培养基培养，
液体摇瓶培养基：葡萄糖40 g/L，蛋白胨10 g/L，酵母浸出粉10 g/L，蒸馏水定容；
在1000 ml三角瓶中加入50%三角瓶体积的液体培养基，每个三角瓶接种3支斜面菌种，接种后置于全温振荡培养箱，温度30℃、转速200 rpm，培养7d，即得到二级菌种；
1.1.3三级种子培养
将二级菌种接种到50L发酵罐，装液量为罐体积的70%，接种量10%，通气量按体积比1:1（v/v），压力0.1MP，30℃恒温通气培养5天，得到三级菌种；
发酵罐中的培养基同液体摇瓶培养基；
1.1.4发酵罐发酵
将三级菌种压入500L发酵罐，发酵罐的初始装液量为按罐容积的70%装液，接种量为装液量的10%，通气量按体积比1:1（v/v），压力0.1MP，30℃恒温通气培养15天，得到发酵物；
发酵罐中的培养基同二级种子培养基；
1.2、发酵物中有效成分的提取和精制
1.2.1、预处理
将发酵物在转速10000转/分钟条件下离心过滤；将上清液在50℃温度条件下，浓缩到原体积的1/10，得到浓缩液；
1.2.2、去杂
在浓缩液中按体积比加入4倍乙醇，于40℃条件下静置沉淀5小时，然后在转速10000转/分钟离心过滤；去沉淀；将上清在50℃浓缩到原体积的1/10，得到浓缩脱醇液，同时回收乙醇；
将浓缩脱醇液按1:5的体积比，加入预处理剂，所述预处理剂为己烷，混匀，萃取，去掉上层，下层的水相在50℃浓缩1/10倍，得到去杂浓缩液；
1.2.3、初步精制
在去杂浓缩液中，按1:5的体积比加入萃取剂，萃取剂为丁醇和乙酸乙酯混合物，丁醇和乙酸乙酯混合物的体积比为：2：0.5；萃取后去掉水层；有机相部分在50℃温度下浓缩到到原体积的1/10倍，将浓缩物在-40℃条件下干燥，得粗制产品；
粗制产品的性状：浅黄至棕色无定形粉末；结构式如下：
主要有效成分为白僵菌苷（Bauveriaoside），含量15%；
其它成分有：白僵菌酮的含量为5%；单糖和二糖的含量为5%；甾醇类化合物的含量为1%；核苷类的含量为5%；其它含量为69%；
1.2.4、色谱法精制
将粗制产品用甲醇或乙醇溶解，溶液浓度为20%，用色谱法分离纯化，具体操作如下：
用键合相为固定相，用乙醇或甲醇和水按0～100：100～0配比进行梯度洗脱，总洗脱体积为色谱柱体积的200倍；收集活性洗脱物在50℃温度以下浓缩到粘稠状，在-40℃条件下干燥，得精制品；
所述键合相填料为反相碳十八填料即RPC18，颗粒直径为50微米；
精制品性状：白色至浅棕红色粉末或结晶；结构式如下：
主要有效成分为白僵菌苷（Bauveriaoside），含量99%；
其它成分有：白僵菌酮的含量为0.1%；单糖和二糖的含量为0.1%；甾醇类化合物的含量为0.1%；核苷类的含量为0.1%；其它含量为0.6%。
实施例3：
具有酪氨酸酶抑制剂和抗氧化剂作用的白僵菌提取物的制备方法的操作步骤如下：
1.1、白僵菌菌种选择和培养
所用的白僵菌为多形白僵菌（Beauveriaamorpha）；
具体培养方法如下：
1.1.1斜面种子培养
将保藏的白僵菌菌株接种于萨氏（SDAY）斜面培养基，于25℃恒温、培养5d，得到一级菌种；
1.1.2二级种子培养
将一级菌种接种至液体摇瓶培养基培养，
液体摇瓶培养基：葡萄糖40 g/L，蛋白胨10 g/L，酵母浸出粉10 g/L，蒸馏水定容；
在250 ml三角瓶中加入40%三角瓶体积的液体培养基，每个三角瓶接种1支斜面菌种，接种后置于全温振荡培养箱，温度25℃、转速150 rpm，培养4d，即得到二级菌种；
1.1.3三级种子培养
将二级菌种接种到30L发酵罐，装液量为罐体积的60%，接种量8%，通气量按体积比1:1（v/v），压力0.1MP，25℃恒温通气培养4天，得到三级菌种；
发酵罐中的培养基同液体摇瓶培养基；
1.1.4发酵罐发酵
将三级菌种压入300L发酵罐，发酵罐的初始装液量为按罐容积的60%装液，接种量为装液量的8%，通气量按体积比1:1（v/v），压力0.1MP，25℃恒温通气培养10天，得到发酵物；
发酵罐中的培养基同二级种子培养基；
1.2、发酵物中有效成分的提取和精制
1.2.1、预处理
将发酵物在转速8000转/分钟条件下离心过滤；将上清液在60℃温度条件下，浓缩到原体积的1/6，得到浓缩液；
1.2.2、去杂
在浓缩液中按体积比加入3倍乙醇，于15℃条件下静置沉淀18小时，然后在转速12000转/分钟离心过滤；去沉淀；将上清在温度60℃浓缩到原体积的1/4得到浓缩脱醇液，同时回收乙醇；
将浓缩脱醇液按1:2体积比，加入预处理剂，所述预处理剂为轻汽油，混匀，萃取，去掉上层，下层的水相在温度50℃浓缩到原体积1/3液；
1.2.3、初步精制
在去杂浓缩液中，按1:1的体积比加入萃取剂，萃取剂为丁醇和乙酸乙酯混合物，丁醇和乙酸乙酯混合物的体积比为：2：0.5；萃取后去掉水层；有机相部分在50℃温度下浓缩到到原体积的1/3，将浓缩物在60℃条件下干燥，得粗制产品；
粗制产品的性状：浅黄至棕色无定形粉末；结构式如下：
主要有效成分为白僵菌苷（Bauveriaoside），含量10%；
其它成分有：白僵菌酮的含量为10%；单糖和二糖的含量为10%；甾醇类化合物的含量为2%；核苷类的含量为10%；其它含量为58%；
1.2.4、色谱法精制
将粗制产品用甲醇或乙醇溶解，溶液浓度为10%，用色谱法分离纯化，具体操作如下：
用键合相为固定相，用乙醇或甲醇和水按0～100：100～0配比进行梯度洗脱，总洗脱体积为色谱柱体积的120倍；收集活性洗脱物在60℃温度以下浓缩到粘稠状，在-40℃条件下干燥，得精制品；
所述键合相填料为反相碳十八填料即RPC18，颗粒直径为10微米。
精制品性状：白色至浅棕红色粉末或结晶；结构式如下：
主要有效成分为白僵菌苷（Bauveriaoside），含量90%；
其它成分有：白僵菌酮的含量为1.0%；单糖和二糖的含量为2.0%；甾醇类化合物的含量为1.0%；核苷类的含量为1.0%；其它含量为5.0%。
Claims (1)
1.具有酪氨酸酶抑制剂和抗氧化剂作用的白僵菌提取物的制备方法，其特征在于包括以下操作步骤：
1.1、白僵菌（Beauveria sp.）菌种选择和培养
所用的白僵菌（Beauveria sp.）为球孢白僵菌（Beauveria bassiana ）或布氏白僵菌（Beauveria brongniartii）或多形白僵菌（Beauveriaamorpha）；
具体培养方法如下：
1.1.1斜面种子培养
将保藏的白僵菌菌株接种于萨氏（SDAY）斜面培养基，于20～30℃恒温、培养4～7d，得到一级菌种；
1.1.2二级种子培养
将一级菌种接种至液体摇瓶培养基培养；
液体摇瓶培养基：葡萄糖40 g/L，蛋白胨10 g/L，酵母浸出粉10 g/L，蒸馏水定容；
在大于100 ml三角瓶中加入30～50%三角瓶体积的液体培养基，每个三角瓶接种1～3支斜面菌种，接种后置于全温振荡培养箱，温度20～30℃、转速100～200 rpm，培养3～7d，即得到二级菌种；
1.1.3三级种子培养
将二级菌种接种到10L以上发酵罐，装液量为罐体积的50～70%，接种量5～10%，通气量按体积比1:1（v/v），压力0.1MP，20～30℃恒温通气培养2～5天，得到三级菌种；
发酵罐中的培养基同液体摇瓶培养基；
1.1.4发酵罐发酵
将三级菌种压入100L以上发酵罐，发酵罐的初始装液量为按罐容积的50～70%装液，接种量为装液量的5～10%，通气量按体积比1:1（v/v），压力0.1MP，20～30℃恒温通气培养5～15天，得到发酵物；
发酵罐中的培养基同二级种子培养基；
1.2、发酵物中有效成分的提取和精制
1.2.1、预处理
将发酵物在转速大于1000转/分钟条件下离心过滤；将上清液在低于100℃温度条件下，浓缩到原体积的1/2～1/10，得到浓缩液；
1.2.2、去杂
在浓缩液中按体积比加入1～4倍乙醇，于0～40℃条件下静置沉淀5～24小时，然后在转速大于1000转/分钟离心过滤；去沉淀；将上清在温度小于100℃浓缩到原体积的1/2～1/10，得到浓缩脱醇液，同时回收乙醇；
将浓缩脱醇液按1:0.5～5的体积比，加入预处理剂，所述预处理剂为石油醚或己烷或轻汽油，混匀，萃取，去掉上层，下层的水相在温度小于100℃浓缩原体积1/2～1/10倍，得到去杂浓缩液；
1.2.3、初步精制
在去杂浓缩液中，按1:0.5～5的体积比加入萃取剂，萃取剂为丁醇或丁醇和乙酸乙酯混合物，丁醇和乙酸乙酯混合物的体积比为：2-0.5：0.5-2；萃取后去掉水层；有机相部分在低于100℃温度下浓缩到到原体积的1/2～1/10，将浓缩物在不高于170℃条件下干燥，得粗制产品；
粗制产品的性状：浅黄至棕色无定形粉末；
主要有效成分为白僵菌苷（Bauveriaoside），结构式如下，含量5-15%；
其它成分有：白僵菌酮的含量为5～15%；单糖和二糖的含量为5～20%；甾醇类化合物的含量为1～5%；核苷类的含量为5～15%；其它含量为69～30%；
1.2.4、色谱法精制
将粗制产品用甲醇或乙醇溶解，溶液浓度为1～20%，用色谱法分离纯化，具体操作如下：
用键合相为固定相，用乙醇或甲醇和水按0～100：100～0配比进行梯度洗脱，总洗脱体积为色谱柱体积的50到200倍；收集活性洗脱物在低于100℃温度以下浓缩到粘稠状，在低于170℃条件下干燥，得精制品；
所述键合相填料为反相碳十八填料即RPC18，颗粒直径为5～50微米；
精制品性状：白色至浅棕红色粉末或结晶；结构式如下：
主要有效成分为白僵菌苷（Bauveriaoside），含量80～99%；
其它成分有：白僵菌酮的含量为4～0.1%；单糖和二糖的含量为3～0.1%；甾醇类化合物的含量为2～0.1%；核苷类的含量为3～0.1%；其它含量为8～0.6%。
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