CN102264351B - 包含水溶性差的药物的聚合胶束组合物的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了制备包含药物的聚合胶束组合物的方法，其包括：将药物和两亲嵌段共聚物溶于有机溶剂中；以及将水溶液加入到在所述有机溶剂中所得的混合物中以形成聚合胶束，其中所述方法不需要在胶束形成之前移除所述有机溶剂的单独操作。所述制备包含药物的聚合胶束组合物的方法简单、缩短了处理时间、并且适于大规模生产。

Description

包含水溶性差的药物的聚合胶束组合物的制备方法

技术领域

本发明涉及制备包含药物的聚合胶束组合物的方法。

背景技术

为了药物的静脉给药的目的，人们已经对利用可生物降解的聚合物的亚微粒药物递送体系进行了研究。近来，已有报道称利用可生物降解的聚合物的纳米粒子体系和聚合胶束体系是有用的技术体系，这些体系改变经静脉给药的药物的体内分布以减少不期望的副作用并提供改善的效率。此外，由于这样的体系能够进行靶向药物递送，因此它们实现了药物向靶器官、靶组织或靶细胞中的控制释放。实际上，已知这样的体系具有与体液优异的相容性，并且改善了水溶性差的药物的溶解能力和药物的生物利用度。

近来，已报道了通过药物化学键合到含有亲水链段和疏水链段的嵌段共聚物上以制备嵌段共聚物胶束的方法。嵌段共聚物是由亲水链段(A)和疏水链段(B)聚合而成的A-B型二嵌段共聚物。可将诸如阿霉素或吲哚美辛的药物物理包封入由所述嵌段共聚物形成的聚合胶束的核内，以便将所述嵌段共聚物胶束用作药物递送体系。然而，由嵌段共聚物形成的聚合胶束在体内施用时引发了许多问题，因为它们无法水解而仅仅在体内被酶分解，而且它们通过引起免疫应答而具有较差的生物相容性等等。

因此，人们千方百计地开发具有改善的生物可降解性和生物相容性的核-壳型药物递送体系。

例如，包含作为亲水性聚合物的聚亚烷基二醇(polyalkyleneglycol)和作为疏水性聚合物的聚乳酸的二嵌段或多嵌段共聚物是本领域技术人员所熟知的。更具体地，将丙烯酸衍生物键合到这样的二嵌段或多嵌段共聚物的端基上以形成共聚物。使所得的共聚物交联以将聚合胶束稳定化。

然而，制备这样的二嵌段或多嵌段共聚物的方法在将交联剂引入A-B或A-B-A型二嵌段或三嵌段共聚物的疏水链段以使聚合物经交联而处于稳定结构中遇到了困难。此外，由于没有在人体内施用交联剂的实例，因此不能确保上述方法中使用的交联剂在人体内是安全的。而且，交联聚合物在体内不能分解，因此无法在体内施用。

除以上所述外，已知的制备聚合胶束组合物的方法还包括乳化工艺、透析工艺和溶剂蒸发工艺。乳化工艺包括将聚乳酸溶于与水不混溶的溶剂中，将药物加入到聚合物溶液中以使药物在其中完全溶解，再向其中加入表面活性剂以形成水包油乳液，并在真空条件下逐渐蒸发该乳液。由于乳化工艺需要形成乳液的设备，因此设定工艺条件是困难且复杂的。此外，由于乳化工艺包括有机溶剂的蒸发，因此其需要很长的处理时间。同时，透析工艺需要消耗大量的水并需要很长的处理时间。此外，溶剂蒸发工艺需要用于移除溶剂的设备(如减压旋转蒸发仪)，并需要花费很长的时间来完全移除溶剂。而且，溶剂蒸发工艺基本上包括将试剂长时间暴露于高温下的操作，因此其可能导致诸如药物活性成分分解或药理作用降低的问题。

发明内容

技术问题

本发明提供了制备包含药物的聚合胶束组合物的方法。

技术方案

本文公开了制备包含药物的聚合胶束组合物的方法，其包括：将药物和两亲嵌段共聚物溶于有机溶剂中；以及将水溶液加入到在所述有机溶剂中所得的混合物中以形成聚合胶束，其中所述方法不需要在胶束形成之前移除所述有机溶剂的单独操作。

有益效果

本文所公开的制备包含药物的聚合胶束组合物的方法简单、缩短了处理时间、并且适于大规模生产。此外，本方法使得能够在低温或室温下制备包含药物的聚合胶束组合物，因此改善了药物的稳定性。

发明实施方式

现在会在下文中参考附图来更全面地描述示例性实施方案，所述附图中示出了示例性实施方案。然而，本发明能够以多种不同形式实施，并不应解释为受限于本文所述的示例性实施方案。相反，提供这些示例性实施方案使得本发明全面而完整，并向本领域技术人员充分表述了本发明的范围。在本说明书中，可能省略公知的特征和技术的细节以避免对所提供的实施方案造成不必要的干扰。

本文所使用的术语仅是为了描述具体实施方案而并非意图限制本发明。除非上下文中另外清楚地指明，本文所用的单数形式“a”、“an”和“the”意图包括复数形式。此外，术语“a”、“an”等的使用并不表示对数量的限制，而是表示存在至少一个所提及的项目。还应当理解，在本说明书中使用时，术语“包含”或“包括”指存在所述的特征、区域、整数、步骤、操作、元素和/或组分，但并未排除一种或多种其它特征、区域、整数、步骤、操作、元素、组分和/或其群组的存在或添加。

除非另外指明，本文所用的所有术语(包括技术术语和科学术语)的含义与本领域技术人员通常所理解的相同。还应理解，这些术语(例如在常用字典中所定义的那些术语)应解释为具有与其在相关领域和本发明的上下文中的含义一致的含义，而且除非在本文中明确定义，不应将其理想化地或过度形式化地加以解释。

一方面，本发明提供制备包含药物的聚合胶束组合物的方法，其包括：

将水溶性差的药物和两亲嵌段共聚物溶于有机溶剂中；以及

将水溶液加入到在所述有机溶剂中所得的混合物中以形成聚合胶束，

其中所述方法不需要在胶束形成之前移除所述有机溶剂的单独操作。

更具体地，根据本文所公开的制备包含药物的聚合胶束组合物的方法，将药物和聚合物溶于机溶剂(特别是可与水混溶的有机溶剂)中，然后将水溶液加入其中，以在该混合的有机溶剂/水中形成聚合胶束。因此，从本文所公开的方法得到的聚合胶束组合物包含药物和两亲嵌段共聚物。此外，所述方法不需要在胶束形成之前移除用于制备聚合胶束的有机溶剂的单独操作。

由于两亲聚合胶束的疏水部分对有机溶剂的高亲和性，因此在胶束形成期间胶束溶液中所述有机溶剂的存在促使胶束解离(de-association)，从而加速了疏水性药物分子的析出。为此，迄今为止已知的制备聚合胶束的方法包括将药物和两亲聚合物溶于有机溶剂中，移除所述有机溶剂，以及向其中加入水溶液以形成胶束。然而，这样的方法需要很长的处理时间来移除所述有机溶剂，并需要诸如减压蒸馏器的辅助设备。此外，即使在移除所述有机溶剂后，在反应系统中仍残留部分有机溶剂。而且，在移除所述有机溶剂的过程中，由于药物长时间暴露于高温下，因此可能导致其分解。

根据本文所公开方法的一实施方案，可以在低温下形成胶束，而不是在胶束形成过程中在高温下移除所述有机溶剂。通常，当加热聚合胶束时，由于两亲聚合物的单聚体(unimer)获得增加的动能，因此缔合两亲聚合物(associatedamphiphilicpolymer)变得易于解离。其结果是，存在于胶束疏水核中的疏水性药物分子易于与水相接触，因此导致药物结晶的形成和析出。相反，本文所公开的方法不需要在形成胶束前蒸发分离溶剂，从而简化了整个工艺并防止了药物的分解。而且，本文所公开的方法是在低温下进行的，从而保持了所得聚合胶束的稳定性。

如在本文所公开的方法中，即使没有将所述有机溶剂移除而是以特定浓度或更高浓度存在，在维持低温的同时形成胶束也可以防止药物析出。这是因为两亲聚合物和有机溶剂分子在这样的低温下具有降低的动能，因此存在于两亲聚合胶束的疏水链段中的药物可能不易暴露于水相中。

在一实施方案中，通过在0-60℃，特别是0-50℃，更特别是0-40℃的温度下，将水溶液加入到在有机溶剂中的药物/两亲聚合物混合物中以形成聚合胶束。

在另一实施方案中，虽然对包封在所述两亲嵌段共聚物的胶束结构内的药物的具体类型没有具体的限制，但所述药物可以是水溶性差的药物。例如，所述药物可以是水溶解度为100mg/mL或更低的水溶性差的药物。这是因为本文所公开的方法是设计为提供组合物，其通过将水溶性差的药物包封入胶束结构内来将所述药物向人体给药。

在又一实施方案中，所述水溶性差的药物可选自抗癌剂。具体而言，所述水溶性差的药物可选自紫杉烷抗癌剂。所述紫杉烷抗癌剂的具体实例可包括紫杉醇、多西紫杉醇、7-表紫杉醇(7-epipaclitaxel)、t-乙酰基紫杉醇(t-acetylpaclitaxel)、10-去乙酰基紫杉醇、10-去乙酰基-7-表紫杉醇、7-木糖基紫杉醇、10-去乙酰基-7-戊二酰基紫杉醇、7-N，N-二甲基甘氨酰基紫杉醇，7-L-丙氨酰基紫杉醇或其混合物。更具体地，所述紫杉烷抗癌剂可以是紫杉醇或多西紫杉醇。

在该方法的一实施方案中，所述两亲嵌段共聚物包括具有以A-B结构的形式彼此连接的亲水嵌段(A)和疏水嵌段(B)的二嵌段聚合物，并且所述两亲嵌段共聚物为非离子型的。此外，所述两亲嵌段共聚物在水性环境中形成核-壳型聚合胶束，其中所述疏水嵌段(B)形成核且所述亲水嵌段(A)形成壳。

在该方法的另一实施方案中，所述两亲嵌段共聚物的亲水嵌段(A)是水溶性聚合物，并包括选自聚亚烷基二醇、聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮、聚丙烯酰胺及其衍生物中的至少一种。具体而言，所述亲水嵌段(A)可以是选自聚亚烷基二醇、单甲氧基聚亚烷基二醇、单乙酰氧基聚亚烷基二醇、聚乙烯-丙二醇共聚物和聚乙烯基吡咯烷酮中的至少一种。更具体地，所述亲水嵌段(A)可以是选自聚乙二醇、单甲氧基聚乙二醇、单乙酰氧基聚乙二醇和聚乙烯-丙二醇共聚物中的至少一种。

所述亲水嵌段(A)的数均分子量为500-50,000道尔顿，特别是1,000-20,000道尔顿，更特别是1,000-10,000道尔顿。

所述两亲嵌段共聚物的疏水嵌段(B)不溶于水，并且可以是具有高生物相容性的生物可降解聚合物。例如，所述疏水嵌段(B)可以是选自聚酯、聚酐、聚氨基酸、聚原酸酯、聚膦嗪(polyphosphazine)及其衍生物中的至少一种。更具体地，所述疏水嵌段(B)可以是选自聚丙交酯、聚乙交酯、聚己内酯、聚二氧杂环己-2-酮(polydioxan-2-one)、聚丙交酯-乙交酯共聚物(polylactic-co-glycolide)、聚丙交酯-二氧杂环己-2-酮共聚物(polylactic-co-dioxane-2-one)、聚丙交酯-己内酯共聚物(polylactic-co-caprolactone)和聚乙交酯-己内酯共聚物(polyglycolic-co-caprolactone)中的至少一种。此外，可以以其在羟基端基用脂肪酸基团取代的衍生物形式提供上文作为疏水嵌段(B)所列的聚合物。所述脂肪酸基团可以选自是丁酸基、丙酸基、乙酸基、硬脂酸基、棕榈酸基、生育酚基和胆固醇基中的至少一种。同时，所述疏水嵌段(B)的数均分子量为500-50,000道尔顿，特别是1,000-20,000道尔顿，更特别是1,000-10,000道尔顿。

在另一实施方案中，为了在水溶液中形成稳定的聚合胶束，所述两亲嵌段共聚物可以以3∶7至8∶2(亲水嵌段(A)∶疏水嵌段(B))，特别是4∶6至7∶3的重量比包含所述亲水嵌段(A)和所述疏水嵌段(B)。当所述亲水嵌段(A)的比例低于上述范围时，所述聚合物不能在水溶液中形成聚合胶束。另一方面，当所述亲水嵌段(A)的比例高于上述范围时，所述聚合物可能由于过于亲水而不能保持其稳定性。

例如，在所述方法中使用的有机溶剂是可与水混溶的有机溶剂，并且可以是选自醇、丙酮、四氢呋喃、乙酸、乙腈和二噁烷中的至少一种。更具体地，所述醇可以是选自甲醇、乙醇、丙醇和丁醇中的至少一种。

在另一实施方案中，虽然需要有机溶剂来溶解所述聚合物和药物，但该方法中的有机溶剂的用量可以很少，因为有机溶剂的存在可能降低胶束的稳定性而加速药物析出。基于未移除该有机溶剂的组合物的总重量，所述有机溶剂的用量可以是0.5-30wt％，特别是0.5-15wt％，更特别是1-10wt％。当所述有机溶剂的用量低于0.5wt％时，可能难以将所述药物溶于有机溶剂中。另一方面，当所述有机溶剂的用量高于30wt％时，可能在复原期间发生药物析出。

可以将所述水溶性差的药物与所述聚合物依次或同时溶于所述有机溶剂中。

在本文所公开的方法中，可以将所述药物和聚合物同时加入并溶于所述有机溶剂中。另外，可以先将所述聚合物溶于所述有机溶剂中，再溶解所述药物，或反之亦然。可以在避免药物分解的任意温度下，将所述药物和聚合物溶于所述有机溶剂中。所述温度可以是0-60℃，特别是0-50℃，更特别是0-40℃。

制备包含水溶性差的药物的聚合胶束组合物的方法的一具体实施方案包括：

将两亲嵌段共聚物溶于有机溶剂中；

将水溶性差的药物溶于所得的聚合物溶液中；以及

将水溶液加入到所得的所述药物与所述聚合物的混合物中以形成胶束，其中所述制备包含药物的聚合胶束组合物的方法不需要在胶束形成之前移除所述有机溶剂的单独操作。

在该方法中所用的水溶液可包括水、蒸馏水、注射用蒸馏水、盐水、5％葡萄糖、缓冲液等。

可以通过在0-60℃，特别是0-50℃，更特别是0-40℃的温度下加入所述水溶液来进行聚合胶束的形成。

在另一实施方案中，可以在形成所述聚合胶束后将冻干助剂加入到所述胶束组合物中以进行冻干。为了使冻干组合物保持饼状，可以加入冻干助剂。在冻干组合物的一实施方案中，所述冻干助剂可以是选自糖和糖醇及其混合物中的至少一种。所述糖可以是选自乳糖、麦芽糖、蔗糖、海藻糖及其组合中的至少一种。所述糖醇可以是选自甘露醇、山梨醇、麦芽糖醇、木糖醇、拉克替醇及其组合中的至少一种。

此外，在冻干组合物复原期间，所述冻干助剂起到促进聚合胶束组合物在短时间内均匀溶解的作用。在本文中，基于冻干组合物的总重量，所述冻干助剂的用量可以是1-99.8wt％，更特别是10-60wt％。

在一实施方案中，基于所述组合物的总干重，所述聚合胶束组合物可包含0.1-30.0wt％的所述药物和70-99.9wt％的所述具有亲水嵌段和疏水嵌段的两亲嵌段共聚物。上述范围是考虑到药物的包封率和所述聚合胶束的稳定性而采用的。

因为避免了移除有机溶剂的单独操作的需要，所以本文所公开的方法简单、缩短了处理时间、并且适于大规模生产。此外，本方法使得能够在低温或室温下制备包含药物的聚合胶束组合物，因此改善了药物的稳定性。

在另一实施方案中，所述包含药物的聚合胶束组合物还可以包含药用赋形剂，如防腐剂、稳定剂、水合剂(hydratingagent)或乳化促进剂、用于调节渗透压的盐和/或缓冲剂，以及其它有治疗作用的物质。可以根据本领域技术人员通常已知的方式将该组合物配制为各种口服或肠胃外制剂。

可以经直肠、局部、经皮、静脉内、肌内、腹膜内、皮下等途径将用于肠胃外给药的制剂给药。肠胃外制剂的典型实例包括等渗水溶液剂或混悬剂形式的注射剂。在一示例性实施方案中，可以提供冻干形式的组合物，可将其用注射用蒸馏水、5％葡萄糖、盐水等复原，以便经血管内注射给药。

用于口服给药的制剂包括片剂、丸剂、硬胶囊剂和软胶囊剂、液体剂、混悬剂、乳剂、糖浆剂、颗粒剂等。这样的制剂除了活性成份外，还可以包含稀释剂(例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素和甘氨酸)、助流剂(例如二氧化硅、滑石、硬脂酸及其镁盐或钙盐以及聚乙二醇)等。片剂可以包含粘合剂，如硅酸镁铝、淀粉糊、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和聚乙烯吡咯烷(polyvinylpyrrolidine)。任选地，片剂可以包含药学可接受的添加剂，其包括崩解剂(如淀粉、琼脂、藻酸盐或其钠盐)、吸收剂、着色剂、芳香剂和甜味剂。可以通过常规的混合、制粒或包衣工艺得到片剂。另外，用于肠胃外给药的制剂的典型实例包括注射剂，如等渗水溶液剂或混悬剂。

现在会对实施例和实验进行描述。以下实施例和实验仅为说明的目的而并非意图限制本发明的范围。

本文所公开的方法中所用的两亲嵌段共聚物是根据如国际专利申请WO03/33592中所述的方法得到的。

实施例1-3包含多西紫杉醇的聚合胶束组合物的制备

制备作为两亲嵌段共聚物的单甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯，其数均分子量为2,000-1,766道尔顿。在60℃下将该两亲嵌段共聚物按照如表1所述的量完全溶解，并且向其中加入0.08mL乙醇，随后充分混合。接着，将生成的混合物冷却至30℃，向其中加入多西紫杉醇，并且搅拌混合物直至获得包含完全溶解于其中的多西紫杉醇的澄清溶液。然后，将溶液冷却至25℃，并且在室温下向其中加入4.0mL纯化水，并且使反应混合物反应直至形成浅蓝色澄清溶液，从而形成聚合胶束。然后，将作为冻干剂的100mgD-甘露醇完全溶于该溶液中，并用孔径为200nm的过滤器过滤所得溶液，随后冻干，得到粉末状的包含多西紫杉醇的聚合胶束组合物。

表1

实施例4-6包含紫杉醇的聚合胶束组合物的制备

制备作为两亲嵌段共聚物的单甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯，其数均分子量为2,000-1,766道尔顿。在80℃下将该两亲嵌段共聚物按照如表2所述的量完全溶解，并且向其中加入乙醇，随后充分混合。接着，向混合物中加入紫杉醇，并且搅拌所得混合物直至获得包含完全溶解于其中的紫杉醇的澄清溶液。然后，将溶液冷却至50℃，并且在室温下向其中加入5.0mL纯化水，并且使反应混合物反应直至形成浅蓝色澄清溶液，从而形成聚合胶束。然后，将作为冻干剂的100mg无水乳糖完全溶于该溶液中，并且用孔径为200nm的过滤器过滤所得溶液，随后冻干，得到粉末状的包含紫杉醇的聚合胶束组合物。

表2

比较例1使用溶剂蒸发工艺制备包含多西紫杉醇的聚合胶束

首先，以与如实施例3中所述的相同量提供多西紫杉醇和所述两亲嵌段共聚物。接着，向多西紫杉醇和该两亲嵌段共聚物中加入5mL乙醇，并且在60℃下搅拌所得混合物直至物料完全溶解以得到澄清溶液。然后，用配有圆底烧瓶的减压旋转蒸发仪在60℃下减压蒸出乙醇，持续3小时。将反应混合物冷却至25℃，在室温下向其中加入4mL纯化水，并使反应混合物反应直至获得浅蓝色澄清溶液，从而形成聚合胶束。然后，将作为冻干剂的100mgD-甘露醇加入到该聚合胶束中以使胶束完全溶解，并用孔径为200nm的过滤器过滤所得混合物，随后冻干，得到粉末状的包含多西紫杉醇的聚合胶束组合物。

比较例2使用溶剂蒸发工艺制备包含紫杉醇的聚合胶束

首先，以与如实施例6所述的相同量提供紫杉醇和所述两亲嵌段共聚物。接着，向紫杉醇和该两亲嵌段共聚物中加入5mL乙醇，并且在60℃下搅拌所得混合物直至物料完全溶解以得到澄清溶液。然后，用配有圆底烧瓶的减压旋转蒸发仪在60℃下减压蒸出乙醇，持续3小时。将反应混合物冷却至50℃，在室温下向其中加入5mL纯化水，并使反应混合物反应直至获得浅蓝色澄清溶液，从而形成聚合胶束。然后，将作为冻干剂的100mg无水乳糖加入到该聚合胶束中以使胶束完全溶解，并用孔径为200nm的过滤器过滤所得混合物，随后冻干，得到粉末状的包含紫杉醇的聚合胶束组合物。

比较例3使用溶剂蒸发工艺制备包含多西紫杉醇的聚合胶束

首先，以与如实施例3中所述的相同量提供多西紫杉醇和所述两亲嵌段共聚物。接着，在60℃下将该两亲嵌段共聚物完全溶解，并且向其中加入5mL乙醇，随后充分混合。将所得混合物冷却至30℃，向其中加入多西紫杉醇，并进一步搅拌混合物直至获得包含完全溶解于其中的多西紫杉醇的澄清溶液。然后，用配有圆底烧瓶的减压旋转蒸发仪减压蒸出乙醇。将反应混合物冷却至25℃，在室温下向其中加入4mL纯化水，并使反应混合物反应直至获得浅蓝色澄清溶液，从而形成聚合胶束。然后，将作为冻干剂的100mgD-甘露醇加入到该聚合胶束中以使胶束完全溶解，并用孔径为200nm的过滤器过滤所得混合物，随后冻干，得到粉末状的包含多西紫杉醇的聚合胶束组合物。

比较例4使用溶剂蒸发工艺制备包含紫杉醇的聚合胶束

首先，以与如实施例6中所述的相同量提供紫杉醇和所述两亲嵌段共聚物。接着，在80℃下使该两亲嵌段共聚物完全溶解，并且向其中加入5mL乙醇，随后充分混合。之后，向其中加入紫杉醇，并进一步搅拌混合物直至获得包含完全溶解于其中的紫杉醇的澄清溶液。然后，用配有圆底烧瓶的减压旋转蒸发仪减压蒸出乙醇。将反应混合物冷却至50℃，在室温下向其中加入5mL纯化水，并使反应混合物反应直至获得浅蓝色澄清溶液，从而形成聚合胶束。然后，将作为冻干剂的100mg无水乳糖加入到该聚合胶束中以使胶束完全溶解，并用孔径为200nm的过滤器过滤所得溶液，随后冻干，得到粉末状的包含紫杉醇的聚合胶束组合物。

比较例5在高温下制备胶束

以与如实施例1所述相同的方式制备包含多西紫杉醇的聚合胶束组合物，不同之处为在加入乙醇溶液后在将温度保持在70℃的同时形成聚合胶束。之后，以如实施例1所述相同的方式冻干该胶束以获得冻干胶束组合物。

比较例6在高温下制备胶束

以与如实施例6所述相同的方式制备包含紫杉醇的聚合胶束组合物，不同之处为在加入乙醇溶液后在将温度保持在70℃的同时形成聚合胶束。之后，以如实施例6所述相同的方式冻干该胶束以获得冻干胶束组合物。

测试例1药物包封量的测定

如表3中所规定的，将实施例1-3和比较例1和3的包含多西紫杉醇的聚合胶束组合物进行HPLC，以测定各组合物中多西紫杉醇的浓度。然后，按照数学式1计算该药物的含量(包封量)。结果见表4。

数学式1：

包封(％)＝(多西紫杉醇的测定量/多西紫杉醇的用量)×100

表3

表4

	多西紫杉醇含量(％)
		实施例1	98.7
实施例2	101.0
		实施例3	99.6
比较例1	57.9
		比较例3	99.1

从上述结果可以看出，在未移除有机溶剂的情况下冻干后获得的实施例1-3的组合物表现出约100％的多西紫杉醇含量。另一方面，在60℃下移除有机溶剂后获得的比较例1的冻干组合物表现出约60％的多西紫杉醇含量。这证明，在高温下蒸发有机溶剂的过程中，通过比较例1的溶剂蒸发工艺所获得的聚合胶束中的多西紫杉醇发生了分解。

此外，在30℃下移除有机溶剂后获得的比较例3的冻干组合物表现出相似的多西紫杉醇含量。因此，可以看出本文所公开的方法在通过避免移除有机溶剂的单独操作的需要而简化了整个工艺的同时，提供了与传统溶剂蒸发工艺相似的药物包封量。

测试例2粒度测定

将实施例4-6和比较例2和4的包含紫杉醇的聚合胶束组合物用5mL盐水复原，并且用粒度分析仪(DLS)在水溶液中测定每种复原的组合物的粒度。结果见表5。

表5

	粒度(nm)
		实施例4	29.9
实施例5	30.5
		实施例6	34.4
比较例2	32.3
		比较例4	32.4

由上述结果可以看出，在未移除有机溶剂的情况下获得的实施例4-6的冻干组合物和移除有机溶剂后获得的比较例2和4的冻干组合物在水溶液中的粒度方面没有显著性差异。

测试例3稳定性测试

就在37℃水溶液中的稳定性而言，将实施例6的包含紫杉醇的聚合胶束组合物与比较例2的包含紫杉醇的聚合胶束组合物进行比较。

将实施例6和比较例2的各组合物用盐水稀释至紫杉醇浓度为1mg/mL。在使各稀释的溶液在37℃下静置的同时，通过HPLC测定各胶束结构中所含紫杉醇随时间的浓度。在如表3所述的相同条件下进行HPLC。结果见表6。

表6

由上述结果可以看出，在未移除有机溶剂的情况下获得的实施例6的冻干组合物和移除有机溶剂后获得的比较例2的冻干组合物在24h内在水溶液中的稳定性方面没有显著性差异。

测试例4

就多西紫杉醇的含量以及相关化合物的含量而言，将实施例1和比较例5的包含多西紫杉醇的聚合胶束组合物进行比较。在如表3和表7所述相同的HPLC条件下分别测定多西紫杉醇的含量和相关化合物的含量。结果见表8。

表7

表8

由上述结果可以看出，高温制备引起多西紫杉醇相关化合物的量增加至在低温制备情况下的那些化合物的量的5倍，从而导致多西紫杉醇含量下降。这意味着高温工艺条件引起了药物的分解。

测试例5

就紫杉醇的含量而言，将实施例6的包含紫杉醇的聚合胶束组合物与比较例6的包含紫杉醇的聚合胶束组合物进行比较。在如表3所述相同的HPLC条件下测定紫杉醇的含量。然后，按照数学式2计算该药物的含量(包封量)。结果见表9。

数学式2：

包封(％)＝(紫杉醇的测定量/紫杉醇的用量)×100

表9

	紫杉醇含量(％)
		实施例6	99.6
比较例6	59.9

根据比较例6，通过在保持70℃高温的同时，在有机溶剂的存在下加入水以形成胶束所获得的聚合胶束组合物引起药物(即紫杉醇)的析出。具体而言，比较例6中的紫杉醇含量比实施例6中的紫杉醇含量低40％或更多。

虽然已显示并描述了示例性实施方案，但本领域的技术人员应当理解，可以在不脱离由所附权利要求所限定的本发明的精神和范围的前提下对本发明的形式和细节做出各种改变。

此外，可以在不脱离其基本范围的前提下根据本发明的教导进行多种修改以适应具体情况或物质。因此，本发明并非意图受限于所公开的作为实施本发明的最佳方式的具体示例性实施方案，而是包含落入所附权利要求范围内的所有实施方案。此外，可以在不脱离其基本范围的前提下根据本发明的教导进行多种修改以适应具体情况或物质。因此，本发明并非意图受限于所公开的作为实施本发明的最佳方式的具体示例性实施方案，而是包括落入所附权利要求范围内的所有实施方案。

Claims (6)

1.制备包含药物的聚合胶束组合物的方法，其包括：

将水溶性差的药物和两亲嵌段共聚物溶于有机溶剂中；以及

将水溶液加入到在所述有机溶剂中所得的混合物中以形成聚合胶束，

其中所述方法不需要移除所述有机溶剂的单独操作，

其中基于所述组合物的总重量，所述有机溶剂的用量为0.5-10wt％，并且

其中所述将水溶液加入到在所述有机溶剂中所得的混合物中以形成胶束是在0℃至50℃下进行的，

其中所述将水溶性差的药物和两亲嵌段共聚物溶于有机溶剂中包括：

将所述两亲嵌段共聚物溶于所述有机溶剂中；以及

将所述水溶性差的药物溶于所得的聚合物溶液中，

其中所述药物是紫杉烷抗癌剂，

其中所述两亲嵌段共聚物为具有亲水嵌段(A)和疏水嵌段(B)的二嵌段共聚物，

所述亲水嵌段(A)为选自聚亚烷基二醇、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮和聚丙烯酰胺中的至少一种，

所述疏水嵌段(B)为选自聚酯、聚酐、聚氨基酸、聚原酸酯和聚膦嗪中的至少一种，

其中所述亲水嵌段(A)的数均分子量为500-50,000道尔顿，并且所述疏水嵌段(B)的数均分子量为500-50,000道尔顿，

其中所述有机溶剂为乙醇，

其中基于所述组合物的总干重，所述包含药物的聚合胶束包含0.1-30.0wt％的所述药物和70-99.9wt％的所述具有亲水嵌段和疏水嵌段的两亲嵌段共聚物。

2.根据权利要求1的制备包含药物的聚合胶束组合物的方法，其中所述紫杉烷抗癌剂为选自紫杉醇、多西紫杉醇、7-表紫杉醇、t-乙酰基紫杉醇、10-去乙酰基紫杉醇、10-去乙酰基-7-表紫杉醇、7-木糖基紫杉醇、10-去乙酰基-7-戊二酰基紫杉醇、7-N,N-二甲基甘氨酰基紫杉醇、7-L-丙氨酰基紫杉醇及其混合物中的至少一种。

3.根据权利要求1的制备包含药物的聚合胶束组合物的方法，其中所述两亲嵌段共聚物为具有亲水嵌段(A)和疏水嵌段(B)的二嵌段共聚物，

所述亲水嵌段(A)为聚亚烷基二醇，

所述疏水嵌段(B)为聚丙交酯。

4.根据权利要求1的制备包含药物的聚合胶束组合物的方法，其中所述亲水嵌段(A)的数均分子量为1,000-20,000道尔顿，并且所述疏水嵌段(B)的数均分子量为1,000-20,000道尔顿。

5.根据权利要求1的制备包含药物的聚合胶束组合物的方法，其中所述两亲嵌段共聚物以3:7至8:2的重量比(A:B)包含所述亲水嵌段(A)和所述疏水嵌段(B)。

6.根据权利要求1的制备包含药物的聚合胶束组合物的方法，其还包括在形成所述胶束后通过将冻干助剂加入到所述胶束组合物中而进行所述胶束组合物的冻干。