CN102204678A - 一种具有增强免疫力功效的即食燕窝粉及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种具有增强免疫力功效的即食燕窝粉及其制备方法，属于保健食品领域。本发明以纯天然燕窝为原料，经涨发、低温烘干、粗粉、灭菌、微粉、包装等工艺加工而成。本发明制得的即食燕窝粉为5～400nm的超微细粉末，直接加温开水冲服即可，服用方便，无毒副作用，不含防腐剂，易吸收，达到相同效果时的用量更小，从而节约了成本。

Description

一种具有增强免疫力功效的即食燕窝粉及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种具有增强免疫力功效的保健食品，尤其是一种即食燕窝粉及其制备方法。

背景技术

从生理学、免疫学、病理学及药理学等相关知识可知道：免疫力是人体自身的防御机制，是人体识别和消灭外来侵入的任何异物（病毒、细菌等）；处理衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞以及识别和处理体内突变细胞和病毒感染细胞的能力。现代免疫学认为，免疫力是人体识别和排除“异己”的生理反应。随着现代社会的竞争加剧，节奏加快，现代人长期处于紧张的生活环境，工作压力大及过度疲劳，加上不正常的生活饮食习惯，造成免疫力普遍减弱并导致内分泌、神经系统、消化系统失调，免疫力逐渐降低、加之老龄化人群越来越多，如何增强免疫力，成为全社会都关注的问题。

从国家食品药品监督管理局基础数据库查询得知，申报保健功能为增强免疫力的保健品有1080个，如德辉牌灵芝孢子粉胶囊、维妥立牌蜂胶软胶囊、同仁堂牌人参乌鸡口服液（桔子口味）、天树牌蜂胶软胶囊、参灵草牌参灵草口服液等。其中多为中药保健品，其处方用原料主要有灵芝、蜂胶、阿胶、西洋参、人参、枸杞子、蜂蜜、葡萄籽、茯苓、黄芪、松花、制何首乌、当归、三七、铁皮石斛、大豆蛋白、大蒜油、氨基酸、维生素等。

本发明采用即食燕窝粉用于治疗增强免疫力，目前未见报道，经试验证实该保健食品可以起到增强免疫力之功效的作用。

燕窝为雨燕科动物金丝燕及多种同属燕类用唾液与绒羽等混合凝结所筑成的巢窝。燕窝又是一味名贵药材，有滋阴补肾、生津益血、强胃健脾、止带治泻的功效。可用于肺阴虚、肺结核所致的潮热、盗汗、干咳或咳血。以及胃阴不足所致的噎隔反胃、盗汗等症。在《本草逢原》上说：“调补虚劳，治咳吐红痰”。中医认为其能“入肺生气，入肾滋水，入胃补中”，“大补元气，大养肺阴”，对于“病后诸虚，尤为妙品”。

燕窝营养丰富，内含蛋白质49.85%，碳水化合物30.55%及少量脂肪和磷、硫、钙、铁等元素。燕窝又含氨基己糖及类似粘蛋白的物质。燕窝向以贵重药材及美味佳肴而在民间广为流传使用，是宜药宜膳的高级保健品。总之，燕窝的主要成分为蛋白质和碳氢化合物，这些成分统称为燕窝素，且国外有研究表明燕窝的水提物具有增强心肌收缩力而强心的作用。

燕窝作为一种贵重药材及美味，由于产量有限，使其应用受到了限制。由于燕窝价格昂贵，利用纳米技术将涨发烘干后的燕窝制成纳米级的微粉，可有效地提高该药的生物有效性，减少服用量，节约资源。

发明内容

本发明旨在克服现有技术的不足，提供一种具有增强免疫力功效的即食燕窝粉及其制备方法。该燕窝粉具有方便快捷且高效的特点。

本发明采用的具体技术方案如下：

一种具有增强免疫力功效的即食燕窝粉的制备方法，其特征在于它是以纯天然燕窝为原料，经涨发、低温烘干、粗粉、灭菌、微粉及包装工艺加工而成。

所述工艺的具体步骤如下：

①购买经传统方法净化、干燥的纯天然燕窝，先通过以下方法涨发后低温烘干：纯天然燕窝用清水浸泡4小时至涨，过滤；固形物加清水大火蒸22～28分钟，取出过滤，固形物放入清水浸泡2小时过滤，固形物加清水大火蒸20～25分钟，取出过滤；固形物加清水大火蒸22～28分钟，取出过滤，固形物放入清水浸泡2小时过滤，固形物加清水大火蒸20～25分钟，取出过滤；固形物加清水大火蒸22～28分钟，取出过滤，固形物放入清水浸泡2小时过滤，固形物加清水大火蒸20～25分钟，取出过滤；固形物放入清水中，用竹签或镊子挑去杂质；清洗干净的燕窝用小火煲30～35分钟，取出过滤，固形物于48±2℃低温烘干至其水分含量与涨发前的天然燕窝一致。

② 取涨发烘干后的燕窝用普通粉碎机粉碎过40目筛得粗粉，该粗粉用微波灭菌方法灭菌后密封备用。

③ 取灭菌后燕窝粗粉用高能球磨机进行微粉化得到5～400nm的超微细燕窝粉末，含量为93%以上，备用。

④ 在常温、相对湿度控制在<30%的环境下，将步骤③获得的超微细燕窝粉末填充胶囊制成胶囊剂，或者直接制成片剂、颗粒剂、丸剂或大包装即食燕窝粉末，经检验合格后即得到即食燕窝粉成品。

本发明的优点在于：

1、即食燕窝粉与普通燕窝相比存在以下优势：① 使用便捷：传统的燕窝（包

括市场上销售的燕盏、燕条、血燕等产品）使用起来比较麻烦，需要经过涨发、摘毛、烹调等复杂过程，往往要10多个小时才可以烹调好。现代人生活节奏都很快，往往没有这种耐心来烹调燕窝。而本品是以纯天然燕窝为原料，经涨发、低温烘干、粗粉、灭菌、微粉等工艺加工而成的超微细粉末，直接加温开水冲服即可，节省了大量的烹调时间。② 易吸收并且经济实惠：燕窝的主要成分是蛋白质、碳水化合物、氨基酸和各种微量元素，燕窝的价值就在于此。燕窝营养价值虽高，也要看身体是否能高效的吸收这些营养价值。传统的燕窝，由于其颗粒大，因此人体每日最多也只能吸收30%左右。例如，一人一天吃10g燕窝，那么真正被身体吸收的只有3g，7g是身体所无法吸收的。如果按照一克燕窝60元计算，那么每天就白白浪费了420元！而燕窝粉是通过纳米微粉技术制成的超微细粉末，这种可以让人身体100%的吸收，也就是所谓的被动吸收。因此，即食燕窝粉比传统的燕窝更易吸收并且经济实惠。

2、即食燕窝粉与现代化纳米燕窝粉（未经传统涨发烘干工艺处理直接打粉）相比存在以下优势：虽然两者均为纳米级的超微细粉末，但即食燕窝粉的传统涨发工艺遵循了传统养生学原理，使得燕窝营养更丰富，吸收更彻底，且经传统涨发工艺处理的燕窝杂质更少，食用更放心。

3、在同等剂量条件下，本发明制得的即食燕窝粉对于增强免疫力的效果更佳。

4、本发明制得的即食燕窝粉不含防腐剂，易吸收，达到相同效果时的用量更

小，从而节约了成本。

具体实施方式

实施例1

①购买经传统方法净化、干燥的纯天然燕窝先通过以下方法涨发后低温烘干：纯天然燕窝用清水浸泡4小时至涨，过滤；固形物加清水大火蒸22～28分钟，取出过滤，固形物放入清水浸泡2小时过滤，固形物加清水大火蒸20～25分钟，取出过滤；固形物加清水大火蒸22～28分钟，取出过滤，固形物放入清水浸泡2小时过滤，固形物加清水大火蒸20～25分钟，取出过滤；固形物加清水大火蒸22～28分钟，取出过滤，固形物放入清水浸泡2小时过滤，固形物加清水大火蒸20～25分钟，取出过滤；固形物放入清水中，用竹签或镊子挑去杂质。清洗干净的燕窝用小火煲30～35分钟，取出过滤，固形物于46-50℃低温烘干，其水分含量与涨发前的天然燕窝一致。

② 取涨发烘干后的燕窝用普通粉碎机粉碎过40目筛得粗粉，该粗粉用微波灭菌方法灭菌后密封备用。

③ 取灭菌后燕窝粗粉用高能球磨机进行微粉化得到5～400nm的超微细燕窝粉末，其含量为93%以上，备用。

④ 在常温、相对湿度控制在<30%的环境下，将步骤③获得的超微细燕窝粉按30g/瓶包装，经检验合格后即为成品。

燕窝超微细粉     1000g

共制成           30瓶

每瓶配以定量勺，0.5g/勺；用法用量：1g/日，1勺/次，2次/日，早晚各一次，温开水冲服。

实施例2（在功能学试验中作为燕窝对照组1）

购买经传统方法净化、干燥的纯天然燕窝，先用普通粉碎机粉碎过40目筛得粗粉，该粗粉用微波灭菌方法灭菌后用高能球磨机进行微粉化得到5～400nm的超微细燕窝粉末含量为93%以上，在常温、相对湿度控制在<30%的环境下，将该获得的超微细燕窝粉按30g/瓶包装，经检验合格后即为成品。

实施例3（在功能学试验中作为燕窝对照组2）

购买经传统方法净化、干燥的纯天然燕窝先通过以下方法涨发后低温烘干：纯天然燕窝用清水浸泡4小时至涨，过滤；固形物加清水大火蒸22～28分钟，取出过滤，固形物放入清水浸泡2小时过滤，固形物加清水大火蒸20～25分钟，取出过滤；固形物加清水大火蒸22～28分钟，取出过滤，固形物放入清水浸泡2小时过滤，固形物加清水大火蒸20～25分钟，取出过滤；固形物加清水大火蒸22～28分钟，取出过滤，固形物放入清水浸泡2小时过滤，固形物加清水大火蒸20～25分钟，取出过滤；固形物放入清水中，用竹签或镊子挑去杂质。清洗干净的燕窝用小火煲30～35分钟，取出过滤，固形物于46-50℃低温烘干至其水分含量与涨发前的天然燕窝一致，不打粉直接服用。

实施例4  增强免疫力功能的功能学试验研究

试验依据：《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）

1、材料和方法

1.1 受试样品：取实施例1制备的产品为受试样品，用蒸馏水配制成所需浓度的灌胃液。

1.2 试验动物：雄性小鼠360只，体重为18～22g，随机分为5批，每批72只。

免疫Ⅰ组：雄性小鼠72只，随机分为6组，每组12只，进行小鼠ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化、NK细胞活性试验；

免疫Ⅱ组：雄性小鼠72只，随机分为6组，每组12只，进行二硝基氟苯诱导小鼠DTH实验；

免疫Ⅲ组：雄性小鼠72只，随机分为6组，每组12只，进行小鼠半数溶血值（HC₅₀）试验；

免疫Ⅳ组：雄性小鼠72只，随机分为6组，每组12只，进行小鼠碳廓清试；

免疫Ⅴ组：雄性小鼠72只，随机分为6组，每组12只，进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验；

1.3 剂量选择：

人体推荐剂量为1g/日，2次/日，早晚各一次，，即每日16.7mg/Kg。小鼠剂量相当于人体推荐剂量的10倍，即每日摄入量167mg/Kg为低剂量组，再按照低剂量的2倍和3倍各设一个剂量组，即334mg/(Kg.d)为中剂量组，501mg/(Kg.d)为剂量组。等量蒸馏水为阴性对照组。另设两个燕窝对照组：燕窝对照组1，取实施例2制备的产品，用蒸馏水配制成所需浓度的灌胃液，最终剂量为燕窝167mg/(Kg.d)，该剂量与上述低剂量中的燕窝剂量相同；燕窝对照组2，取实施例3制备的产品，用蒸馏水配制成所需浓度的灌胃液，最终剂量为燕窝167mg/(Kg.d)，该剂量与上述低剂量中的燕窝剂量相同；

1.4 试验方法：

依据卫生部《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）中增强免疫力功能检验方法。试验设6个组，即3个试验组、1个阴性对照组、2个燕窝对照组，每组12只小鼠。采用灌胃法，每天以0.2ml/10g.BW的容量给小鼠灌胃不同剂量的受试物，阴性对照组给予等量蒸馏水。每天1次，连续30天，末次给样1h后进行各项免疫指标的测定。

1.4.1 ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验（MTT法）

各组动物连续灌胃30天，颈椎脱臼处死动物，无菌取脾，置于盛有适量无菌Hank’s液的小平皿中，研磨脾脏，制成单细胞悬液。经200目筛网过滤，用Hank’s液洗3次，每次离心10min（1000r/min），然后将细胞悬浮于1mlRPMI1640完全培养液中，用台酚兰染色计数活细胞数（应在95%以上），调整细胞浓度为5×10⁶个/ml。将细胞悬液分两孔加入24培养板中，每孔1ml，一孔加75μlConA液，另一孔作对照，置于5%CO₂37%℃孵箱中培养72h。培养结束前4h，每孔轻轻吸取上清液0.7ml，加入0.7ml不含小牛血清的RPMI1640培养液，同时加入MTT（5MG/ML）50μl/孔，继续培养4h。；培养结束后，每孔加入1ml酸性异丙醇，吹打混匀，使紫色结晶完全溶解。然后将溶解液直接移入比色皿中，风光光度计在波长570nm测定OD值。

用家ConA孔的OD值减去不加ConA孔的OD值代表淋巴细胞的增值能力，受试组的OD差值显著高于对照组的OD差值，可判定该项试验结果阳性。

1.4.2 二硝基氟苯（DNFB）诱导小鼠迟发型变态反应（DTH）（耳肿胀法）

各剂量组连续灌胃30天，每鼠用剪刀将腹部毛剪去，范围约3cm×3cm，用1%DNFB溶液50μl均匀涂抹致敏。5日后用1%DNFB溶液10μl均匀涂抹于小鼠右耳（两面）进行攻击，同时用不含1%DNFB溶液10μl均匀涂抹于小鼠左耳（两面）作对照。攻击后24h颈椎脱臼处死小鼠，剪下左右耳壳，用打孔器取下制剂8mm耳片，称重。

用左右耳重量之差表示DTH的程度。受试组的重量差值显著高于对照组的重量差值，可判定该项试验结果阳性。

1.4.3 血清溶血素测定

各剂量组连续灌胃30天，制备2%（V/V）的绵羊红细胞（SRBC）悬液，每只鼠腹腔注射0.2ml进行免疫，4天后摘除眼球取血于离心管内，放置1h，2000r/min离心10min，分离并收集血清。血清200倍稀释后，按检验方法测定样品管及SRBC半数溶血时的光密度值。

溶血素的量以半数溶血值（HC₅₀）表示，按下列公式计算，受试组的HC₅₀显著高于对照组的HC₅₀，可判定该项试验结果阳性。

1.4.4 小鼠碳廓清试验

各剂量组连续灌胃30天，每鼠尾静脉注入3倍稀释的印度墨汁（0.1ml/10g.BW），待墨汁注入，立即计时。注入墨汁后2min及10min分别从眼内眦静脉丛取血20μl，并将其加到2ml0.1%Na₂CO₃溶液中，用分光光度计在600nm波长处测光密度值，以Na₂CO₃溶液作空白对照。

将小鼠处死，取肝脏和脾脏，用滤纸吸干脏器表面血污，分别称重。

以吞噬指数表示小鼠碳廓清的能力。按下式计算吞噬指数a。受试组的吞噬指数显著高于对照组的吞噬指数，可判定该项试验结果阳性。

1.4.5 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验（半体内法）

各剂量组连续灌胃30天，制备20%（V/V）的鸡红细胞悬液，每只鼠腹腔注射1ml，间隔30min，颈椎脱臼处死小鼠，将其仰位固定于鼠板上，正中剪开腹壁皮肤，经腹腔注入生理盐水2ml，转动鼠板1min，然后吸出腹腔洗液1ml，平均分滴于2片载玻片上，放入垫有湿纱布的搪瓷盒内，移置37℃温箱孵育30min，然后于生理盐水中漂洗，晾干，以1∶1丙酮甲醇溶液固定，4%（V/V）Giemsa-磷酸缓冲液染色3min，再用蒸馏水漂洗晾干。

油镜下计数巨噬细胞，每张片计数100个，按下式计算吞噬百分率和吞噬指数。

吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数

受试组的吞噬百分率或吞噬指数与对照组比较，差异均有显著性，方可判定该项试验结果阳性。

1.4.6 NK细胞活性测定（乳酸脱氢酶测定法）

各组动物连续灌胃30天，颈椎脱臼处死动物，无菌取脾，置于盛有适量无菌Hank’s液的小平皿中，研磨脾脏，制成单细胞悬液。经200目筛网过滤，用Hank’s液洗2次，每次离心10min（1000r/min），弃上清液将细胞浆弹起，加入0.5ml灭菌水洗20秒，裂解红细胞后再加入0.5ml2倍Hank’s液及8mlHank’s液，离心10min（1000r/min），用1ml含10%小牛血清的RPMI1640完全培养液重悬，用1%冰醋酸稀释后计数，用台酚兰染色计数活细胞数（应在95%以上），用RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为2×10⁷个/ml。

实验前24h将靶细胞（YAC-1细胞）传代培养，应用前以Hank’s液洗3次，用RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为4×10⁵个/ml。取YAC-1细胞和脾细胞各100μl（效靶比50∶1）加入U型96孔培养板中，YAC-1细胞自然释放孔加入RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为2×10⁷个/ml和培养液各100μl，YAC-1细胞最大稀释孔加YAC-1细胞和1%NP40各100μl，上述各项均设三个平行孔，于37℃、50%CO₂培养箱中培养4h，然后将96孔培养板以1500r/min离心5min，每孔吸取上清液100μl置平底96孔培养板中，同时加入LDH基质液100μl，反应5min，每孔加入1mol/L的HCl30μl，在酶标仪490nm处测定光密度值（OD）。

按下式计算NK细胞活性吗，受试组的NK细胞活性显著高于对照组的NK细胞活性，即可判定该项试验结果阳性。

1.5 饲养条件：小鼠在温度为18-22℃、相对湿度45-65%的环境中饲养。

1.6 数据分析：试验数据采用t检验进行统计。

2、试验结果

① 细胞免疫功能试验表明，在脾淋巴细胞转化试验中，三个剂量组OD差值均显著高于阴性对照组（低剂量组和中剂量P<0.05，高剂量P<0.01），呈阳性结果；迟发型变态反应试验表明，耳肿程度与阴性对照组比较，三个剂量组差异显著（低剂量组和中剂量P<0.05，高剂量P<0.01），呈阳性结果。

② 体液免疫功能试验中，小鼠半数溶血值测定表明，三个剂量组的HC50值与阴性对照组比较均有显著差异（低剂量组P<0.05，中剂量和高剂量P<0.01），呈阳性结果。

③ 单核—巨噬细胞功能试验表明，在小鼠碳廓清试验中，三个剂量组的吞噬指数均显著高于阴性对照组（低剂量组和中剂量P<0.05，高剂量P<0.01），呈阳性结果；小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验表明，三个剂量组的吞噬百分率及吞噬指数均显著高于阴性对照组（低剂量组和中剂量P<0.05，高剂量P<0.01），呈阳性结果。

④ NK细胞活性测定试验表明，与阴性对照组比较，三个剂量组NK细胞的活性均显著升高（低剂量组P<0.05，中剂量和高剂量P<0.01），呈阳性结果。

⑤ 细胞免疫功能试验表明，在脾淋巴细胞转化试验中，低剂量组（10倍）OD差值显著高于燕窝对照组1和燕窝对照组2（均P<0.05）；迟发型变态反应试验表明，耳肿程度与燕窝对照组1和燕窝对照组2比较，低剂量组差异显著（均P<0.05）。

⑥ 体液免疫功能试验中，小鼠半数溶血值测定表明，低剂量组的HC50值与燕窝对照组1和燕窝对照组2比较有显著差异（均P<0.05）。

⑦ 单核—巨噬细胞功能试验表明，在小鼠碳廓清试验中，低剂量组的吞噬指数显著高于燕窝对照组1和燕窝对照组2（均P<0.05）；小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验表明，低剂量组的吞噬百分率及吞噬指数显著高于燕窝对照组1和燕窝对照组2（均P<0.05）。

⑧ NK细胞活性测定试验表明，与燕窝对照组1和燕窝对照组2比较，低剂量组NK细胞的活性显著升高（均P<0.05）。

本发明对小鼠免疫功能的影响总体评价见表-1。

表-1   本发明（实施例1制备）对小鼠免疫功能的影响总体评价表

注： “*”表示与阴性对照组比较有显著性差异，其中*P<0.05，**P<0.01；

“△”表示低剂量组与燕窝对照组1比较有显著性差异，其中△P<0.05，△△P<0.01；

“○”表示低剂量组与燕窝对照组2比较有显著性差异，其中○P<0.05，○○P<0.01；

“-”表示与阴性对照组比较无显著性差异；

3、结论

根据《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）中有关“增强免疫力”的功能学检验评价方法，由以上结果可判定本发明（实施例1制备）具有增强免疫力的功效，且与未经传统涨发烘干处理直接打粉的燕窝微粉相比具有显著差异，与经传统涨发烘干处理未打粉直接服用的燕窝相比也具有显著差异。

Claims (3)

1.一种具有增强免疫力功效的即食燕窝粉的制备方法，其特征在于它是以纯天然燕窝为原料，经涨发、低温烘干、粗粉、灭菌、微粉及包装工艺加工而成。

2.按权利要求1所述的具有增强免疫力功效的即食燕窝粉的制备方法，其特征在于具体工艺步骤如下：

①购买经传统方法净化、干燥的纯天然燕窝，先通过以下方法涨发后低温烘干：纯天然燕窝用清水浸泡4小时至涨，过滤；固形物加清水大火蒸22～28分钟，取出过滤，固形物放入清水浸泡2小时过滤，固形物加清水大火蒸20～25分钟，取出过滤；固形物加清水大火蒸22～28分钟，取出过滤，固形物放入清水浸泡2小时过滤，固形物加清水大火蒸20～25分钟，取出过滤；固形物加清水大火蒸22～28分钟，取出过滤，固形物放入清水浸泡2小时过滤，固形物加清水大火蒸20～25分钟，取出过滤；固形物放入清水中，用竹签或镊子挑去杂质；清洗干净的燕窝用小火煲30～35分钟，取出过滤，固形物于46-50℃低温烘干至其水分含量与涨发前的天然燕窝一致；

② 取涨发烘干后的燕窝用普通粉碎机粉碎过40目筛得粗粉，该粗粉用微波灭菌方法灭菌后密封备用；

③ 取灭菌后燕窝粗粉用高能球磨机进行微粉化得到5～400nm的超微细燕窝粉末，含量为93%以上，备用；

④ 在常温、相对湿度控制在<30%的环境下，将步骤③获得的超微细燕窝粉末填充胶囊制成胶囊剂，或者直接制成片剂、颗粒剂、丸剂或大包装即食燕窝粉末，经检验合格后即得到即食燕窝粉成品。

3.按权利要求1或2所述的具有增强免疫力功效的即食燕窝粉的制备方法，其特征在于所述燕窝粉为即食产品，可直接加温开水冲服，同等剂量下，具有更佳的增强免疫力效果。