CN102180861A - 双环醇缬氨酸酯及其制备方法和其药物组合物与用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及药学和有机化学，公开了可用于医药的新化合物双环醇缬氨酸酯化合物及其制备方法，该方法包括双环醇和氨基保护的L-缬氨酸在偶联剂、催化剂中的缩合以及脱保护制备双环醇缬氨酸酯化合物的反应过程，按本发明方法制备的双环醇缬氨酸酯化合物可用于肝炎病的临床治疗。

Description

双环醇缬氨酸酯及其制备方法和其药物组合物与用途

技术领域本发明涉及药学和有机化学，特别是本发明涉及双环醇缬氨酸酯化合物及其制备方法，以及在临床上的应用。

背景技术双环醇(Bicyclol)，化学名称为4，4’-二甲氧基-5，6，5’，6’-双(亚甲二氧基)-2-羟甲基-2’-甲氧羰基联苯，为联苯双酯结构类似药物。具有显著保肝作用和一定抗肝炎病毒效果，作用机制是通过清除自由基保护肝细胞膜，使肝细胞DNA免受损伤及减少细胞凋亡的发生，从而起到保肝的作用，表现为对四氯化碳、D-氨基半乳糖胺、扑热息痛引起的小鼠急性肝损伤以及小鼠免疫性肝炎等4种动物模型均有显著的降低血清转氨酶水平的作用，肝脏组织病理形态学损害有不同程度的减轻。此外，对大鼠慢性四氯化碳肝损伤模型，双环醇除有降低血清转氨酶作用外，兼有改善血清白蛋白/球蛋白比值及肝脏脯氨酸含量的效果，即有减轻肝纤维化的作用。双环醇片(百赛诺)是中国科学医学科学院药物研究所研制的国家一类抗慢性病毒性肝炎化学新药，已在14个国家和我国台湾地区获得专利保护，临床适用于治疗慢性乙型和慢性丙型肝炎。

尽管双环醇对慢性乙型肝炎和慢性丙型肝炎均有较好的改善症状和降低血清氨基转移酶的效果，但其难溶于水，生物利用度比较低。

发明内容本发明正是为了克服上述现有技术中的不足之处而提供一种水溶解性增强的双环醇缬氨酸酯化合物及其制备方法，提高双环醇的生物利用度。

一种双环醇缬氨酸酯化合物及其盐，其特征是化学结构式如(I)所示：

本发明的双环醇缬氨酸酯化合物的制备方法，其特征是双环醇在偶联剂、催化剂作用下与氨基保护的L-缬氨酸进行缩合反应，然后脱除氨基保护得双环醇缬氨酸酯(I)。偶联剂可以选自1，3-二环己基碳二亚胺、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐。催化剂可以选自4-二甲氨基吡啶、四氢吡咯基吡啶、2，6-二氨基吡啶。

本发明的双环醇缬氨酸酯化合物，包括它以盐形式存在的(I)化合物，如(I)化合物的盐酸盐、硫酸盐、富马酸盐、马来酸盐、对甲基苯磺酸盐、甘草酸盐、葡萄糖醛酸盐、齐墩果酸盐。

本发明的双环醇缬氨酸酯化合物，可与一种或多种固体或液体药物或赋形剂和/或辅剂结合，制成可作为人药使用的适当的施用形式或剂量形式。

本发明化合物或含有它的药物组合可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮肤、腹膜或直肠等，优选口服。

本发明化合物或含有它的药物组合物的给药途径可为注射给药。注射包括静脉注射、肌肉注射、皮下注射、皮内注射等。

给药剂型可以是液体剂型、固体剂型。如液体剂型可以是溶液类、胶体类、微粒剂型、乳剂剂型、混悬剂型。其它剂型例如片剂、胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂，粉剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、栓剂、冻干粉针剂等。其给药途经、剂量和给药次数可根据患者年龄、体重和疾病适当调整。

本发明化合物可以制成普通制剂、也可以是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂、及各种微粒给药系统。

为了将单位给药制成制剂形式，可以广泛使用本领域公知的药学上可接受的载体，例如赋形剂、稀释剂等药物辅助剂。

用于口服给药单剂量制剂形式可以是片剂和胶囊，并可含有常规赋形剂诸如粘合剂，例如糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨醇、黄芪胶或聚乙烯吡咯烷酮；填充剂，例如乳糖、糖，玉米淀粉、磷酸钙、山梨醇或甘氨酸；压片润滑剂，例如硬脂酸镁；崩解剂，例如淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、淀粉乙醇酸钠、或微晶纤维素；或药学上可接受的润湿剂，诸如十二烷基硫酸钠。

固体口服组合物可以用常规的混合、填充或压片制备。重复混合操作可用于将活性剂充分分布到大量填充剂量组合物中。片剂可以按常规制备方法制得包衣片或素片。

本发明的双环醇缬氨酸酯化合物，在制备抗肝炎药物中的应用。

本发明的双环醇缬氨酸酯化合物能够增加双环醇的水溶解性，提高其生物利用度。制备方法简单，条件易于控制。

具体实施方式以下实施例仅对本发明进行进一步的说明，不应理解为对本发明进一步的限制。

实施例1双环醇缬氨酸酯及其盐酸盐的制备

将N-苄氧羰基-L-缬氨酸(12.4g，48mmol)，4-二甲氨基吡啶(0.8g，6.4mmol)溶解在二甲基甲酰胺(120ml)中，加入双环醇(14g，35.9mmol)搅拌下向该反应混合液中滴加溶于二甲基甲酰胺(50ml)的1，3-二环己基碳二亚胺(20g，96mmol)的溶液，0℃反应9小时，减压过滤，真空浓缩至油状物，加入乙醇(100ml)，-5℃搅拌过夜，减压过滤，真空干燥得N-苄氧羰基-L-缬氨酸-双环醇(19.5g，93％)。

将N-苄氧羰基-L-缬氨酸-双环醇(20g，33.8mmol)加入到含有甲醇50ml，水50ml的混合溶液中，加入5％钯碳5g，室温搅拌，反应中不断有气体冒出，保温5小时，加入浓盐酸(25ml)，继续搅拌1小时，减压过滤，滤液中加入异丙醇(500ml)0℃搅拌过夜，减压过滤，得到白色固体，真空干燥得双环醇缬氨酸酯盐酸盐(13g，76％)。

实施例2双环醇缬氨酸酯及其盐酸盐的制备

将N-叔丁氧羰基-L-缬氨酸(8.7g，39.6mmol)、双环醇(11.7g，30mmol)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(9.0g，45mmol)、4-二甲氨基吡啶(0.6g，4.8mmol)和三乙胺(4.2g，41.7mmol)在二甲基甲酰胺(100ml)中，在0～5℃搅拌9小时，然后向该反应混合物中补加N-叔丁氧羰基-L-缬氨酸(1.5g，6.8mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-2乙基碳二亚胺盐酸盐(1.5g，7.5mmol)，继续搅拌12小时，在0℃下加入稀盐酸溶液200ml，然后在0℃搅拌1小时.滤出沉淀并减压干燥，得到N-叔丁氧羰基-L-缬氨酸双环醇(18g，96％)。将N-叔丁氧羰基-L-缬氨酸双环醇(30g，48mmol)和水(80ml)加入反应瓶中，然后0℃下滴加8N盐酸溶液，室温下搅拌5小时，冷却至-5℃，加入异丙醇(600ml)混合，搅拌下形成沉淀。将所得悬浮液在0℃下搅拌4小时。滤出白色沉淀，真空干燥至恒重，得到双环醇缬氨酸酯盐酸盐(17.6，72％)。

实施例3双环醇缬氨酸酯及其对甲基苯磺酸盐的制备

将N-苄氧羰基-L-缬氨酸(12.4g，48mmol)，2，6-二氨基吡啶(2.8g)溶解在二甲基甲酰胺(120ml)中，加入双环醇(14g，35.9mmol)搅拌下向该反应混合液中滴加溶于二甲基甲酰胺(50ml)的1，3一二环己基碳二亚胺(20g，96mmol)的溶液，0℃反应9小时，减压过滤，真空浓缩至油状物，加入乙醇(100ml)，-5℃搅拌过夜，减压过滤，真空干燥得N-苄氧羰基-L-缬氨酸-双环醇(18.5g，89％)。

将N-苄氧羰基-L-缬氨酸-双环醇(20g，33.8mmol)加入到含有甲醇50ml，水50ml的混合溶液中，加入5％钯碳5g，室温搅拌，反应中不断有气体冒出，保温5小时，加入对甲基苯磺酸(10g)，继续搅拌1小时，减压过滤，滤液中加入异丙醇(500ml)0℃搅拌过夜，减压过滤，得到白色固体，真空干燥得双环醇缬氨酸酯对甲基苯磺酸盐(15g，80％)。

实施例4双环醇缬氨酸酯片的制备

双环醇缬氨酸酯盐酸盐  60g

预胶化淀粉            3g

羟丙纤维素            5g

羧甲基淀粉钠          1.5g

微晶纤维素            1g

硬脂酸镁              0.5g

将双环醇缬氨酸酯盐酸盐及上述辅料分别过80目筛，用等量递加法充分混匀后，用2％羟丙基甲基纤维素水溶液制软材，20目筛制粒；湿颗粒在70℃干燥约100分钟，用20目筛整粒，干颗粒加硬脂酸镁，压片即得。

实施例5双环醇缬氨酸酯胶囊的制备

双环醇缬氨酸酯盐酸盐    60g

淀粉                    8g

微晶纤维素              3g

硬脂酸镁                1g

将双环醇缬氨酸酯盐酸盐及上述辅料分别过80目筛，用等量递加法充分混匀后，分装入硬胶囊中，即得。

实施例6环醇缬氨酸酯颗粒剂的制备

双环醇缬氨酸酯盐酸盐    60g

蔗糖                    10g

糊精                    2g

淀粉                    20g

阿司帕坦                0.1g

将双环醇缬氨酸酯盐酸盐及上述辅料分别过80目筛，用等量递加法充分混匀后，用1％羟丙甲纤维素的乙醇溶液(乙醇浓度为60％，用前配制)制软材，16目筛制粒；湿颗粒在70℃干燥约90分钟，16目筛整粒，65目筛筛除细粉，灌装即得。

药理实验例1

下面给出了本发明化合物(I)用于小鼠四氯化碳肝损伤治疗的药效试验研究数据。

实验方法：

小鼠分组：将小鼠随机分为4组，每组10只，雌雄各半，体重为25±2g。分别设为正常对照组，CCL₄损伤模型对照组、阳性对照药双环醇组、受试药双环醇缬氨酸酯组。

治疗方法：小鼠于ip 0.1％CCL₄(10ml·kg^-1)24小时前，除正常对照组及模型对照组外，其余2组分别ig阳性对照药双环醇、受试药双环醇缬氨酸酯2次，前后间隔6小时，剂量以双环醇计均为100mg·kg^-1，正常对照组和模型对照组ig生理盐水(N.S)，给药体积均为20ml·kg^-1。

指标观察：于腹腔注射CCL₄16小时后，眼眶取血，分离血清，用血液生化分析仪测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)，天门冬氨酸氨基转移酶(AST)。每日记录动物死亡情况，共记录96小时。实验记录完成后用颈总动脉放血及气管切断法处死小鼠，肝脏取材，做病理形态学检查。

统计处理方法：组间比较用t检验。

实验结果：

实验过程中所有受试动物均无任何异常反应，也无一只动物死亡，丙氨酸氨基转移酶(ALT)，天门冬氨酸氨基转移酶(AST)测定结果如下表1。

表1双环醇及双环醇缬氨酸酯对小鼠四氯化碳肝损伤保护作用的比较

注：^a为与正常对照组相比p＜0.05，^b为与模型对照组相比p＜0.05。

结论：

生化指标检测结果显示模型对照组ALT，AST显著高于正常对照(p＜0.05)，表明本次实验造模成功。根据生化指标，受试药及阳性对照组的ALT，AST值与模型对照组相比有较明显降低，且该二组间无显著差异，同时病理形态学检查结果显示，受试药及阳性对照组肝损伤程度普遍轻于模型对照组。

本发明的双环醇缬氨酸酯化合物对小鼠四氯化碳急性肝损伤引起的ALT和AST升高均有明显的降低作用，使丙氨酸氨基转移酶与天门冬氨酸氨基转移酶水平接近正常对照组水平，表明双环醇缬氨酸酯能作为抗肝炎药物应用。

Claims (8)

1.一种新抗肝炎活性如(I)所示的化合物

2.根据权利要求1化合物的制备方法是：双环醇在偶联剂、催化剂作用下与氨基保护的L-缬氨酸进行缩合反应，然后脱除氨基保护得双环醇缬氨酸酯(I)。

3.根据权利要求2所述的偶联剂选自1，3-二环己基碳二亚胺、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐。

4.根据权利要求2所述的催化剂选自4-二甲氨基吡啶、四氢吡咯基吡啶、2，6-二氨基吡啶。

5.根据权利要求1所述化合物，包括它以盐形式存在的(I)化合物。

6.根据权利要求5所述的盐包括(I)化合物盐酸盐、硫酸盐、富马酸盐、马来酸盐、对甲基苯磺酸盐、甘草酸盐、葡萄糖醛酸盐、齐墩果酸盐。

7.一种药物组合物，含有有效剂量的(I)化合物及其盐，以及药效学上可接受的载体。

8.根据权利要求1所述化合物及其盐，在制备抗肝炎药物中的应用。