CN102168006B - 益智保健酒及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种益智保健酒的制备方法，包括以下步骤：①按重量比称取下述原料：益智5～30、黄芪1～5、巴戟天1～5、女贞子1～4、甘草1～5；②将各原料晾干，粉碎，全部加入酒中提取，过滤除渣；③步骤②中滤液在60℃～70℃下保持4～6小时，冷却至8℃以下，过滤，滤液为益智保健酒。本发明益智保健酒具有滋补肌体、增强免疫力、美容养颜功效，且口感良好，价格低廉，适合普通消费者使用。

Description

益智保健酒及其制备方法

技术领域

本发明涉及保健酒技术领域，尤其是一种益智保健酒及其制备方法。

背景技术

益智，为多生热带雨林半阴性草本药用植物，是姜科(Zingiberaceae)山姜属植物益智(Alpinia oxyphylla Miq.)的干燥成熟果实。益智是四大南药之一，也是卫生部1998年公布的既是食品又是药品的一种天然植物，无毒，是开发新型保健食品的良好资源。

益智作为中药，在古今中外各类医药书籍中早有收载，如缩泉丸，健胃剂；作为食品可以增加食欲、减轻疲劳、滋补肌体、延年益寿。目前专家学者已对益智主要化学成分和药理功能进行了较深入的研究，发现益智含有萜类、二芳基庚烷、黄酮、精油、矿物质等多种生物活性成分。

虽然目前保健酒随着人们消费意识和生活水平的提高而得到重视，市场规模越来越大，也形成了保健酒的龙头企业，如劲酒、椰岛鹿龟、郎酒、御酒堂、黄金酒等。这些酒均有一定的保健作用，深受大众喜爱。但国内外尚未见有关益智保健酒出现。

发明内容

本发明针对不足，提出一种益智保健酒的制备方法，得到的益智保健酒具有抗氧化、增强抵抗力的效果。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：一种益智保健酒的制备方法，包括以下步骤：

①、按重量比称取下述原料：

益智      5～30

黄芪      1～5

巴戟天    1～5

女贞子    1～4

甘草      1～5；

②、将各原料晾干，粉碎，全部加入酒中提取，过滤除渣；

③、步骤②中滤液在60℃～70℃下保持4～6小时，冷却至8℃以下，过滤，滤液为益智保健酒。

优选的，该制备方法还包括将步骤③的滤液勾兑酒，得到益智保健酒；所述酒用量为滤液体积的0.5～2倍。

优选的，所述酒的度数为40～60度。

优选的，步骤②酒的用量为原料总重量的4～10倍。

优选的，所述酒选自米酒、白酒、黄酒、葡萄酒或果酒中的一种或多种。

优选的，所述酒的度数为10度～60度。

优选的，步骤②的提取为浸渍提取，浸渍时间为5天～7天。

优选的，步骤②的提取为加热回流提取，回流提取时间为60min～120min。

优选的，所述加热回流提取的次数为2次。

与现有技术相比，本发明将益智、黄芪、巴戟天、女贞子和甘草按照一定的重量比配制后加入母酒浸提或加热回流提取，取其提取液制备得益智保健酒。所用母酒为米酒、白酒、黄酒、葡萄酒、果酒中的一种或几种混合物。

本发明保健酒是在传统中药理论指导下，结合现代药理研究组方而成的。益智温脾暖肾，固气涩精；黄芪补气固表，利尿生肌；巴戟天补肾助阳，强健筋骨，祛风除湿；女贞子滋补肝肾，乌须明目；甘草和中缓急，补脾益气，润肺解毒，调和诸药。现代药理研究表明，益智中多种成分具有抗癌、抗氧化和抗衰老作用；黄芪具有提高肾小球滤过率，改善多种疾病状态下的水钠潴留，以及调节机体免疫淋巴细胞等作用；巴戟天具有保护脑缺氧损伤、调节内分泌、抗衰老、抗疲劳等功效；女贞子具有抗氧化、抗衰老和调节免疫的作用；甘草具有解毒、抗炎、抗病毒、调节免疫等作用。方中各药综合作用，可滋补肌体、增强免疫力、美容养颜。

本发明制备益智保健酒的方法，操作简单，适合于家庭和产业制作，采用有机溶剂和无机溶剂混合的溶剂——酒作为提取剂，能有效地将原料中的功能成分提取出来，再经过常规高温灭活和低温絮沉，过滤除渣即得到益智保健酒；也可将该滤液勾兑白酒使用。制得的益智保健酒具有滋补肌体、增强免疫力、美容养颜功效，且口感良好，价格低廉，适合普通消费者使用。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行详细描述，本部分的描述仅是示范性和解释性，不应对本发明的保护范围有任何的限制作用。

本发明的益智保健酒制作方法为：

1、按照如下重量份的配比称取各原料：

益智    5～30

黄芪    1～5

巴戟天  1～5

女贞子  1～4

甘草    1～5；

2、将各原料清洗，晒干，粉碎至20目。按照1份原料总和加4～10倍量的母酒浸渍5～7天或加热回流提取2次，每次回流提取60min～120min。过滤，将滤液60℃高温处理4小时以灭菌。然后8℃以下低温处理，使不溶物絮凝沉淀。过滤，直接灌装，或加入白酒勾兑后灌装，气密保存，即得益智保健酒。

其中，提取所用母酒为米酒、白酒、黄酒、葡萄酒、果酒中的一种或几种混合物，度数为10～60度。

勾兑用白酒量为滤液体积的0.5～2倍，所用白酒度数为40～60度。

实施例1

按照重量比称取益智20份，黄芪3份，巴戟天2份，女贞子2份，甘草2份。将药材清洗，晒干，粉碎至20目，混匀。称取原料混合粉末1000g，于8000mL的黄酒中浸泡5天，滤去残渣。将滤液60℃高温处理6小时，6℃低温处理后，过滤，灌装，气密保存，即得到益智保健酒。

实施例2

按照重量比称取益智10份，黄芪2份，巴戟天2份，女贞子2份，甘草1份，清洗，晒干，粉碎至20目，混匀。称取原料混合粉末1000g，于3000mL的米酒和2000m1果酒的混合酒中浸泡6天，滤去残渣。将滤液70℃高温处理4小时，7℃低温处理后，过滤，加入3000mL的40度白酒勾兑，罐装，气密保存，即得到益智保健酒。

实施例3

按照重量比称取益智30份，黄芪3份，巴戟天2份，女贞子2份，甘草1份，清洗，晒干，粉碎至20目，混匀。称取原料混合粉末1000g，于4000mL的60度白酒中回流提取两次，回流提取时间分别为80min和120min，滤去残渣。将滤液65℃高温处理5小时，5℃低温处理后，过滤，加入4000mL的40度白酒勾兑，罐装，气密保存，即得到益智保健酒。

试验例1

本发明保健酒的药理和药效学试验

1、实验动物：昆明种小鼠160只，购自海南医学院实验动物中心。雌雄各半，平均体重为20g。

2、实验分组：将小鼠分为4组，分别为本发明保健酒试验组1(实施例1所制备的保健酒)、本发明保健酒试验组2(实施例2所制备的保健酒)2、本发明药物保健酒试验组3(实施例3所制备的保健酒)和空白对照组，每组雌雄各半。

3、本发明保健酒的抗氧化作用

(1)DPPH法

取2ml 0.1mm的DPPH溶液，加入0.1ml DMSO，在517nm处检测其光吸收，得A₀；

取2ml 0.1mm的DPPH溶液，加入0.1ml梯度样品液(溶于DMSO)，在517nm处检测其光吸收，得Ai；

取2ml 0.1mm的DMSO，加入0.1ml梯度样品液(溶于DMSO)，在517nm处检测其光吸收，得Aj。

清除率(％)＝1-(Ai-Aj)/A₀。分别测6个梯度样品液，测其EC₅₀值。取Vc作阳性对照。

(2)ABTS法

取5ml 7mm的ABTS，加入88μl 140mm K₂S₂O₈的溶液，适当稀释，避光，静置过夜，制备成ABTS自由基储备液。用20mm的pH4.5的磷酸缓冲液将ABTS自由基储备液适当稀释，制成ABTS自由基工作液。取30μl样品液加入3mlABTS自由基储备液，反应10s。以磷酸缓冲液作参比，在734nm处测其光吸收。取Vc作阳性对照。结果如表1所示。

表1.本发明保健酒的抗氧化作用

由表1所示的结果可知，本发明保健酒对DPPH和ABTS的清除率均接近或强于阳性对照Vc。因此说明本发明益智保健酒具有抗氧化能力。

4、本发明保健酒对肝癌H₂₂荷瘤小鼠免疫功能的影响

(1)本发明保健酒对肝癌H₂₂荷瘤小鼠脾淋巴细胞转化功能的影响

取腹腔内传代7天的肝癌H₂₂荷瘤小鼠，在无菌条件下抽取瘤细胞，并用生理盐水洗涤3次。调瘤细胞浓度为1×10⁷/ml。接种于昆明种小鼠腹股沟下，每只小鼠接种0.2ml。接种次日起给药，连续给药10天，末次给药24h后，取出小鼠脾脏，分组研磨，用IMDM培养液调脾脏细胞浓度为1×10⁷个/ml。取96孔板，每只鼠设：

A：对照孔，3复孔，每只孔加100μl IMDM培养液

B：ConA刺激孔，3复孔，每只孔加100μl ConA(10μg/ml)。

然后每孔加100μl脾细胞悬液，在37℃，5％CO₂培养箱中培养72h，终止培养前4h加入MTT溶液(5mg/ml)10μl/孔。终止培养后，小心吸取孔内上清液，每孔加入100μl DMSO，振荡10min，使结晶物充分溶解，在570nm处测定其光吸收(OD值)，计算刺激指数SI。

SI＝ConA孔OD值/对照孔OD值

(2)本发明保健酒对肝癌H₂₂荷瘤小鼠NK细胞毒百分率的影响

取上述脾细胞悬浮液，制备常规YAC-1细胞悬浮液，调浓度为1×10⁶个/ml.取96孔板，每只鼠设：

A：效应细胞∶靶细胞(10∶1)孔，加50μl脾细胞悬浮液，100μl YAC-1细胞悬浮液，50μl IMDM培养液；效应细胞对照孔，加50μl脾细胞悬浮液，150μl IMDM培养液。

B：效应细胞∶靶细胞(20∶1)孔，加100μl脾细胞悬浮液，100μl YAC-1细胞悬浮液；效应细胞对照孔，加100μl脾细胞悬浮液，100μl IMDM培养液。

C：靶细胞对照孔，加入100μl YAC-1细胞悬浮液，100μl IMDM培养液。

上述各组均设三复孔，将培养板于37℃，5％CO₂及100％湿度的培养箱中孵育24h，各孔加入MTT溶液(5mg/ml)10μl，同样条件下继续孵育4h后终止培养。然后小心吸弃孔内上清液，每孔加入100μl DMSO，振荡10min，用酶标仪在490nm波长处测定OD值，计算NK细胞毒百分率

NK细胞毒％＝[1-(效靶OD值-效对OD值)/靶对OD值]×100％

(3)本发明保健酒对肝癌H₂₂荷瘤小鼠IL-2活性的影响

A：小鼠脾细胞IL-2诱生制备脾细胞悬浮液，方法同上，冲洗一次后调细胞浓度为0.5×10⁷/ml。加入终浓度为5-10μg/ml的ConA，3000rpm离心10min收获细胞培养上清(其中含IL-2)。

B：IL-2活性测定将IL-2标准品用培养液倍比稀释，以3复孔加入96孔板，每孔100μl。将待测样品1；2稀释，亦按3复孔加入到96孔板内。将生长状态良好的CTLL2细胞离心洗涤两遍，用含10％小牛血清的IMDM培养液配成5×10⁵/ml浓度的细胞悬浮液。向每孔加入100μl细胞悬浮液。置于37℃，5％CO₂培养箱中孵育22h后，各孔加入MTT溶液(5mg/ml)10μl，同样条件下继续孵育4h后终止培养，小心吸弃孔内上清液，每孔加入100μl的DMSO，振荡10min。用酶标仪在570nm波长处测其OD值。用log2稀释度(X)和各稀释度对应的OD值(Y)作直线回归，分析计算待测样品的IL-2浓度。结果如表2所示。

表2  本发明保健酒对肝癌H₂₂荷瘤小鼠免疫功能的影响

由表2所示结果，本发明保健酒浓缩物(试验组2和3)对小鼠灌胃10天后，ConA诱导的小鼠淋巴细胞增殖反应明显增高，小鼠NK细胞活性也明显增高，CTLL2诱导的产生的IL-2的量也明显增加。

试验例2本发明保健酒的毒性研究试验

(1)急性毒性研究

取昆明种小鼠，按10ml/kg灌胃给予本发明保健酒(实施例1所制备的保健酒)，1天连续灌胃4次，每次间隔6h，然后给予正常饮食，对各个器官进行病理性检查，未发现脏器病变。

(2)长期毒性研究

取昆明种小鼠，按中、大剂量组(4ml/kg，8ml/kg)灌胃给予本发明保健酒(实施例1所制备的保健酒)，每天1次，连续灌胃14天后，测定小鼠体重、心功能、肝功能、肾功能、心电图等指标，给药组分别与对照组比较，未见明显异常。病理学检查心、肝、肾、脾、肺、胃、十二指肠、大肠、小肠、肾上腺和生殖器等脏器，给药组分别与对照组比较，均未见明显中毒性改变。以上结果提示该保健酒安全无毒，可长期饮用。

以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种益智保健酒的制备方法，包括以下步骤：

①、按重量比称取下述原料：

②、将各原料晾干，粉碎，全部加入酒中提取，过滤除渣；

③、步骤②中滤液在60℃～70℃下保持4～6小时，冷却至8℃以下，过滤，滤液为益智保健酒。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：该制备方法还包括将步骤③的滤液勾兑酒，得到益智保健酒；所述酒用量为滤液体积的0.5～2倍。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述酒的度数为40～60度。

4.如权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于：步骤②酒的用量为原料总重量的4～10倍。

5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述酒选自米酒、白酒、黄酒或果酒中的一种或多种。

6.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述酒的度数为10度～60度。

7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤②的提取为浸渍提取，浸渍时间为5天～7天。

8.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤②的提取为加热回流提取，回流提取时间为60min～120min。

9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于：所述加热回流提取的次数为2次。

10.一种如权利要求1或2所述制备方法制得的益智保健酒。