CN103462123B

CN103462123B - 椰汁组合物及其制备方法

Info

Publication number: CN103462123B
Application number: CN201310337778.7A
Authority: CN
Inventors: 曾艳波; 戴好富; 梅文莉; 王辉
Original assignee: Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences
Current assignee: Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences
Priority date: 2013-08-06
Filing date: 2013-08-06
Publication date: 2015-11-04
Anticipated expiration: 2033-08-06
Also published as: CN103462123A

Abstract

本发明提供了一种椰汁组合物，包括：椰汁和中药提取物，所述中药提取物为益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草的提取物。本发明还提供了一种椰汁组合物的制备方法。本发明在椰汁中添加了益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草的提取物，其中，益智温脾暖肾，固气涩精；黄芪补气固表，利尿生肌；枸杞子滋补肝肾，益精明目；麦冬养阴生津，润肺清心；女贞子滋补肝肾，乌须明目；甘草和中缓急，补脾益气，润肺解毒，调和诸药；上述各味中药提取物与椰汁混合后使得到的椰汁组合物具有滋补肌体、增强免疫力、美容养颜的功效。结果表明，本发明提供的椰汁组合物具有抗氧化能力，能够增强肝癌H₂₂荷瘤小鼠的免疫功能，且无急性毒性和长期毒性。

Description

椰汁组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于椰汁技术领域，尤其涉及一种椰汁组合物及其制备方法。

背景技术

椰汁是棕榈科植物椰树的果实椰果的抽取汁液，具有汁清如水、相当清甜、晶莹透亮，清凉解渴的特点。一个好的椰子，大约能够抽取得到两玻璃杯椰汁，该椰汁内含有糖、蛋白质、脂肪、维生素C及钙、磷、铁、钾、镁、钠等矿物质，是营养极为丰富的饮料。椰汁有很好的清凉消暑、生津止渴的功效，还有强心、利尿、驱虫、止呕止泻的功效。目前市场上天然椰汁饮料很多，但大多口感单一，且没有发现具有增强免疫力、美容养颜功效的椰汁。

益智，为多年生热带雨林半阴性草本药用植物，是姜科（Zingiberaceae）山姜属植物益智(Alpinia oxyphylla Miq.)的干燥成熟果实。益智是四大南药之一，也是卫生部1998年公布的既是食品又是药品的一种天然植物，无毒，是开发新型保健食品的良好资源。益智作为中药，在古今中外各类医药书籍中早有收载，如缩泉丸，健胃剂；作为食品可以增加食欲、减轻疲劳、滋补肌体、延年益寿。目前专家学者已对益智主要化学成分和药理功能进行了较深入的研究，发现益智含有萜类、二芳基庚烷、黄酮、精油、矿物质等多种生物活性成分。本申请人考虑，可以将益智加入到椰汁中，制备得到口感良好、且具有特殊功效的椰汁。

发明内容

本发明的目的在于提供一种椰汁组合物及其制备方法，本发明提供的椰汁组合物具有增强免疫力、美容养颜的功效。

本发明提供了一种椰汁组合物，包括：椰汁和中药提取物，所述中药提取物为益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草的提取物。

优选的，所述益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草的重量比为5～30:1～5:1～5:1～4:1～4:1～5。

优选的，所述中药提取物与椰汁的质量体积比为20～35g/1L。

优选的，所述中药提取物为益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草在酒精中提取得到的浸膏。

本发明还提供了一种椰汁组合物的制备方法，包括以下步骤：

将中药提取物加入到椰汁中，灭菌后得到椰汁组合物，所述中药提取物为益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草的提取物。

优选的，所述中药提取物按照以下方法提取：

将益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草在酒精中提取，过滤、除渣，浓缩后得到浸膏。

优选的，所述酒精为食用酒精，所述食用酒精的度数为40～60度。

优选的，所述益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草与所述酒精的重量比为1:4～10；所述益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草的重量比为5～30:1～5:1～5:1～4:1～4:1～5。

优选的，所述提取为浸渍提取，所述浸渍的时间为5天～7天。

优选的，所述提取为加热回流提取，所述加热回流提取的时间为60min～120min，所述加热回流提取的次数为两次。

与现有技术相比，本发明在椰汁中添加了益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草的提取物，其中，益智温脾暖肾，固气涩精；黄芪补气固表，利尿生肌；枸杞子滋补肝肾，益精明目；麦冬养阴生津，润肺清心；女贞子滋补肝肾，乌须明目；甘草和中缓急，补脾益气，润肺解毒，调和诸药；上述各味中药提取物与椰汁混合后使得到的椰汁组合物具有滋补肌体、增强免疫力、美容养颜的功效。同时，本发明提供的椰汁组合物具有口感良好、价格低廉、适合普通消费者使用的特点。另外，本发明提供的制备方法，操作简单，适于家庭和产业制作。结果表明，本发明提供的椰汁组合物具有抗氧化能力，能够增强肝癌H₂₂荷瘤小鼠的免疫功能，且无急性毒性和长期毒性。

具体实施方式

本发明提供的椰汁组合物包括椰汁，本发明对所述椰汁没有特殊限制，本领域技术人员熟知的椰汁即可。

本发明提供的椰汁组合物包括中药提取物，所述中药提取物为益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草的提取物。其中，益智温脾暖肾，固气涩精，其提取物具有抗癌、抗氧化和抗衰老作用；黄芪补气固表，利尿生肌，其具有提高肾小球滤过率，改善多种疾病状态下的水钠潴留，以及调节机体免疫淋巴细胞等作用；枸杞子滋补肝肾，益精明目，其提取物具有防止四氯化碳引起的肝功能紊乱，促进肝细胞新生的作用；麦冬养阴生津，润肺清心，具有调节免疫、强心、降糖和抗缺氧的作用；女贞子滋补肝肾，乌须明目；甘草和中缓急，补脾益气，润肺解毒，调和诸药，具有解毒、抗炎、抗病毒、调节免疫等作用。在本发明中，所述益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草的重量比为5～30:1～5:1～5:1～4:1～4:1～5，优选为10～30:3～5:1～3:1～2:1～4:1～2。上述各味中药综合作用，可滋补肌体、增强免疫力、美容养颜。

在本发明中，所述中药提取物为益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草在酒精中提取得到的浸膏，优选按照以下方法提取：

本发明以益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草为原料，将其清洗、晒干、粉碎、混合均匀后得到中药混合物。本发明优选将各味中药粉碎至10目～30目，更优选粉碎至20目。

得到中药混合物后，将其在酒精中提取。在本发明中，所述酒精优选为使用酒精，其度数优选为40～60度。所述益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草与所述酒精的重量比为1:4～10，优选为1:4～8。

具体而言，所述中药混合物可以在酒精中浸渍提取，即将中药混合物浸渍于酒精中，所述浸渍的时间优选为5天～7天，浸渍的温度为室温即可。所述中药组合物也可以在酒精中加热回流提取，所述加热回流提取的时间为60min～120min，优选为80min～100min，所述加热回流提取的次数优选为2次。

提取完毕后，将得到的混合物按照本领域技术人员熟知的方法过滤除去滤渣，然后将滤液浓缩得到浸膏，即可得到中药提取物。

在本发明中，也可以分别在酒精中提取益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草，得到提取物后再混合。分别提取的提取参数可参考上述同时提取的参数，本发明在此不再赘述。

将得到的中药提取物加入到椰汁中，灭菌后即可得到椰汁组合物。在本发明中，所述中药提取物与椰汁的质量体积比为20～35g/1L，优选为25～30g/1L。

得到椰汁组合物后，本发明对其进行抗氧化能力检测，结果表明，其具有良好的抗氧化能力；

得到椰汁组合物后，本发明对其对肝癌H₂₂荷瘤小鼠的免疫功能的影响进行检测，结果表明，其能够增强肝癌H₂₂荷瘤小鼠的免疫功能；

得到椰汁组合物后，本发明对其进行急性毒性和长期毒性检测，结果表明，其无急性毒性和长期毒性。

将得到的中药提取物加入到椰汁中，灭菌后即可得到椰汁组合物。在本发明中，所述中药提取物与椰汁的质量体积比为20～35g/1L，优选为25～30g/1L。本发明对所述椰汁没有特殊限制，本领域技术人员熟知的椰汁即可。

本发明在椰汁中添加了益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草的提取物，其中，益智温脾暖肾，固气涩精；黄芪补气固表，利尿生肌；枸杞子滋补肝肾，益精明目；麦冬养阴生津，润肺清心；女贞子滋补肝肾，乌须明目；甘草和中缓急，补脾益气，润肺解毒，调和诸药；上述各味中药提取物与椰汁混合后使得到的椰汁组合物具有滋补肌体、增强免疫力、美容养颜的功效。同时，本发明提供的椰汁组合物具有口感良好、价格低廉、适合普通消费者使用的特点。另外，本发明提供的制备方法，操作简单，适于家庭和产业制作。

为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的椰汁组合物及其制备方法进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。

实施例1

按照重量比称取益智20份，黄芪3份，枸杞子2份，麦冬2份，女贞子2份，甘草2份；将各味药材清洗，晒干，粉碎至20目，混匀，得到原料混合粉末；称取原料混合粉末1000g，于8000mL40度的食用酒精中浸泡5天，滤去残渣。将滤液浓缩成浸膏，加入到40L椰汁中，灭菌，灌装，气密保存，即得到益智椰汁。

实施例2

按照重量比称取益智10份，黄芪3份，枸杞子3份，麦冬1份，女贞子2份，甘草1份；将各味药材清洗，晒干，粉碎至20目，混匀，得到原料混合粉末；称取原料混合粉末1000g，于5000mL50度的食用酒精中浸泡6天，滤去残渣。将滤液浓缩成浸膏，加入到50L椰汁中，灭菌，灌装，气密保存，即得到益智椰汁。

实施例3

按照重量比称取益智30份，黄芪5份，枸杞子1份，麦冬4份，女贞子2份，甘草1份，将各味药材清洗，晒干，粉碎至20目，混匀，得到原料混合粉末；称取原料混合粉末1000g，于4000mL的40度白酒中回流提取两次，回流提取时间分别为80min和120min，滤去残渣。将滤液浓缩成浸膏，加入到30L椰汁中，灭菌，灌装，气密保存，即得到益智椰汁。

试验例1

本发明椰汁的药理和药效学试验

1、实验动物：昆明种小鼠160只，购自海南医学院实验动物中心。雌雄各半，平均体重为20g。

2、实验分组：将小鼠分为4组，分别为本发明椰汁试验组1（实施例1所制备的椰汁）、本发明椰汁试验组2（实施例2所制备的椰汁）、本发明药物椰汁试验组3（实施例3所制备的椰汁）和空白对照组，每组雌雄各半。

3、本发明椰汁的抗氧化作用

（1）DPPH法

取2ml0.1mm的DPPH溶液，加入0.1ml DMSO，在517nm处检测其光吸收，得A₀；

取2ml0.1mm的DPPH溶液，加入0.1ml梯度样品液（溶于DMSO），在517nm处检测其光吸收，得Ai；

取2ml0.1mm的DMSO，加入0.1ml梯度样品液（溶于DMSO），在517nm处检测其光吸收，得Aj。

清除率（%）=1-（Ai-Aj）/A₀。

分别测6个梯度样品液，测其EC₅₀值。

取Vc作阳性对照。

（2）ABTS法

取5ml7mm的ABTS，加入88μl140mm K₂S₂O₈的溶液，适当稀释，避光，静置过夜，制备成ABTS自由基储备液。用20mm的pH4.5的磷酸缓冲液将ABTS自由基储备液适当稀释，制成ABTS自由基工作液。取30μl样品液加入3mlABTS自由基储备液，反应10s。以磷酸缓冲液作参比，在734nm处测其光吸收。取Vc作阳性对照。结果如表1所示。

表1本发明椰汁的抗氧化作用

由表1所示的结果可知，本发明椰汁对DPPH和ABTS的清除率均接近阳性对照Vc，说明本发明提供的益智椰汁具有抗氧化能力。

4、本发明椰汁对肝癌H₂₂荷瘤小鼠免疫功能的影响

（1）本发明椰汁对肝癌H₂₂荷瘤小鼠脾淋巴细胞转化功能的影响

取腹腔内传代7天的肝癌H₂₂荷瘤小鼠，在无菌条件下抽取瘤细胞，并用生理盐水洗涤3次。调瘤细胞浓度为1×10⁷/ml。接种于昆明种小鼠腹股沟下，每只小鼠接种0.2ml。取各实施例所制备的原料药提取浸膏，在接种次日起每日给药两次，每次给药0.08g/kg，连续给药10天，末次给药24h后，取出小鼠脾脏，分组研磨，用IMDM培养液调脾脏细胞浓度为1×10⁷个/ml。取96孔板，每只鼠设：

A：对照孔，3复孔，每只孔加100μl IMDM培养液。

B：ConA刺激孔，3复孔，每只孔加100μl ConA（10μg/ml）。

然后每孔加100μl脾细胞悬液，在37℃，5%CO₂培养箱中培养72h，终止培养前4h加入MTT溶液（5mg/ml）10μl/孔。终止培养后，小心吸取孔内上清液，每孔加入100μl DMSO，振荡10min，使结晶物充分溶解，在570nm处测定其光吸收（OD值），计算刺激指数SI。

SI=ConA孔OD值/对照孔OD值

（2）本发明椰汁对肝癌H₂₂荷瘤小鼠NK细胞毒百分率的影响

取上述脾细胞悬浮液，制备常规YAC-1细胞悬浮液，调浓度为1×10⁶个/ml.取96孔板，每只鼠设：

A：效应细胞：靶细胞（10：1）孔，加50μl脾细胞悬浮液，100μl YAC-1细胞悬浮液，50μl IMDM培养液；效应细胞对照孔，加50μl脾细胞悬浮液，150μl IMDM培养液。

B：效应细胞：靶细胞（20：1）孔，加100μl脾细胞悬浮液，100μl YAC-1细胞悬浮液；效应细胞对照孔，加100μl脾细胞悬浮液，100μl IMDM培养液。

C：靶细胞对照孔，加入100μl YAC-1细胞悬浮液，100μl IMDM培养液。

上述各组均设三复孔，将培养板于37℃，5%CO₂及100%湿度的培养箱中孵育24h，各孔加入MTT溶液（5mg/ml）10μl，同样条件下继续孵育4h后终止培养。然后小心吸弃孔内上清液，每孔加入100μl DMSO，振荡10min，用酶标仪在490nm波长处测定OD值，计算NK细胞毒百分率

NK细胞毒%=[1-(效靶OD值-效对OD值)/靶对OD值]×100%

（3）本发明椰汁对肝癌H₂₂荷瘤小鼠IL-2活性的影响

A：小鼠脾细胞IL-2诱生

制备脾细胞悬浮液，方法同上，冲洗一次后调细胞浓度为0.5×10⁷/ml。加入终浓度为5-10μg/ml的ConA，3000rpm离心10min收获细胞培养上清（其中含IL-2）。

B：IL-2活性测定

将IL-2标准品用培养液倍比稀释，以3复孔加入96孔板，每孔100μl。将待测样品1：2稀释，亦按3复孔加入到96孔板内。将生长状态良好的CTLL2细胞离心洗涤两遍，用含10%小牛血清的IMDM培养液配成5×10⁵/ml浓度的细胞悬浮液。向每孔加入100μl细胞悬浮液。置于37℃，5%CO₂培养箱中孵育22h后，各孔加入MTT溶液（5mg/ml）10μl，同样条件下继续孵育4h后终止培养，小心吸弃孔内上清液，每孔加入100μl的DMSO，振荡10min。用酶标仪在570nm波长处测其OD值。用log2稀释度（X）和各稀释度对应的OD值(Y)作直线回归，分析计算待测样品的IL-2浓度。结果如表2所示。

表2本发明椰汁对肝癌H₂₂荷瘤小鼠免疫功能的影响

由表2所示结果，本发明实施例2和实施例3提供的益智椰汁对小鼠灌胃10天后，ConA诱导的小鼠淋巴细胞增殖反应明显增高，小鼠NK细胞活性也明显增高，CTLL2诱导的产生的IL-2的量也明显增加。

试验例2本发明椰汁的毒性研究试验

（1）急性毒性研究

取昆明种小鼠，按10ml/kg灌胃给予本发明实施例2所制备的椰汁，1天连续灌胃4次，每次间隔6h，然后给予正常饮食，对各个器官进行病理性检查，未发现脏器病变。

（2）长期毒性研究

取昆明种小鼠，按中、大剂量组（4ml/kg，8ml/kg）灌胃给予本发明实施例2所制备的椰汁，每天1次，连续灌胃14天后，测定小鼠体重、心功能、肝功能、肾功能、心电图等指标，给药组分别与对照组比较，未见明显异常。病理学检查心、肝、肾、脾、肺、胃、十二指肠、大肠、小肠、肾上腺和生殖器等脏器，给药组分别与对照组比较，均未见明显中毒性改变。以上结果提示该椰汁安全无毒，可长期饮用。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.一种椰汁组合物，包括：椰汁和中药提取物，所述中药提取物为益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草的提取物；所述益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草的重量比为5～30:1～5:1～5:1～4:1～4:1～5。

2.根据权利要求1所述的椰汁组合物，其特征在于，所述中药提取物与椰汁的质量体积比为20～35g/1L。

3.根据权利要求1所述的椰汁组合物，其特征在于，所述中药提取物为益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草在酒精中提取得到的浸膏。

4.一种椰汁组合物的制备方法，包括以下步骤：

将中药提取物加入到椰汁中，灭菌后得到椰汁组合物，所述中药提取物为益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草的提取物；所述益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草的重量比为5～30:1～5:1～5:1～4:1～4:1～5。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述中药提取物按照以下方法提取：

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述酒精为食用酒精，所述食用酒精的度数为40～60度。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述益智、黄芪、枸杞子、女贞子、麦冬和甘草与所述酒精的重量比为1:4～10。

8.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述提取为浸渍提取，所述浸渍的时间为5天～7天。

9.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述提取为加热回流提取，所述加热回流提取的时间为60min～120min，所述加热回流提取的次数为两次。