CN102100850A - 精制银翘解毒片的质量控制方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种精制银翘解毒片的质量控制方法，步骤是：采用薄层色谱法，鉴别精制银翘解毒片处方中是否含连翘、牛蒡子、甘草等成分，再以柚皮苷为对照品，用液相色谱法检测精制银翘解毒片处方中乙酰氨基酚、牛蒡苷的含量。本发明在原标准基础上，增加了连翘、牛蒡子、甘草的薄层鉴别方法和以牛蒡苷为对照品，制定了牛蒡子的含量测定方法，由于在长期的检验中发现对乙酰氨基酚的检测方法不理想，因此对原有的对乙酰氨基酚含量测定方法进行了修改，修订后的质量标准，提高了药品的质量控制，使药品的定性和定量检测更加准确。
Description
技术领域
本发明属于中药技术领域，涉及中药的检测方法，尤其是一种精制银翘解毒片的质量控制方法。
背景技术
精制银翘解毒片由对乙酰氨基酚、黄芩、桔梗、连翘、淡豆豉、甘草、淡竹叶、金银花、牛蒡子、荆芥穗、薄荷脑组成，制备方法：以上十味，对乙酰氨基酚、桔梗分别粉碎成细粉；荆芥穗提取挥发油，将荆芥穗油、薄荷脑用适量乙醇溶解；其余连翘等六味加水煎煮二次，滤过，合并滤液，滤液浓缩至适量，加入桔梗、对乙酰氨基酚粉末及辅料适量，混匀，制成颗粒，烘干，放冷；或将浓缩液喷雾干燥成干膏粉，加入桔梗、对乙酰氨基酚粉末及辅料适量，混匀，制成颗粒。加入荆芥穗油、薄荷脑乙醇溶液，混匀，压制成1000片，包衣，即得。功能与主治：清热散风，解毒退烧，用于流行感冒，发冷发烧，四肢酸懒，头痛咳嗽，咽喉肿痛，温毒发颐，两腮赤肿。
目前国际上虽然尚无植物类中药的国际标准，但是美国、欧盟、我国及传统出口中药的东南亚地区均有提高中药标准的趋势，在此情况下，需要提出适合我国产品质量的标准以适应国际标准，我国有数千年的中药使用历史，世界各国在制订相应的植物药产品质量标准中多参考我国的中药标准，所以完善、提高中药的质量标准更已经迫在眉睫。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种能够定性、定量检测药物成分的精制银翘解毒片的质量控制方法，本方法具有检测手段简单、检测结果准确的特点。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种精制银翘解毒片的质量控制方法，步骤是：
(1)薄层色谱法鉴别精制银翘解毒片中是否含有连翘成分；
(2)薄层色谱法鉴别精制银翘解毒片中是否含有牛蒡子、甘草成分；
(3)高效液相色谱法检测精制银翘解毒片中对乙酰氨基酚的含量；
(4)高效液相色谱法检测精制银翘解毒片中牛蒡苷含量；
而且，所述连翘的薄层色谱鉴别的方法为：
①供试品溶液的制备：取精制银翘解毒片样品10片，去包衣，研细，加乙醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，过滤，滤液作为供试品溶液；
②对照药材溶液的制备：取连翘对照药材2g，加水40ml，置水浴中浸渍1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为对照药材溶液；
③薄层色谱条件及结果：薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液4μl，对照药材溶液2μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇＝6∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，检视供试品色谱中在与对照药材色谱相应位置上是否显相同颜色的斑点，确定供试样品中是否含有连翘成分。
而且，所述牛蒡子、甘草的薄层色谱鉴别的方法为：
①供试品溶液的制备：取连翘鉴别项下供试品溶液；
②对照药材溶液的制备：取牛蒡子对照药材1.2g、甘草对照药材1g，分别加乙醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣分别加乙醇2ml使溶解，作为对照药材溶液；
③薄层色谱条件及结果：薄层色谱试验，吸取供试品溶液，对照药材溶液2μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝40∶10∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，检视供试品色谱中在与对照药材色谱相应的位置上是否显相同颜色的斑点，确定供试样品中是否含有牛蒡子、甘草成分。
而且，所述高效液相色谱法对乙酰氨基酚含量测定的方法为：
①色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：乙腈∶水∶冰醋酸＝20∶80∶1；检测波长为248nm；柱温：40℃；流速：1.0ml/min，理论板数按对乙酰氨基酚峰计算应不低于3000；
②对照品溶液的制备：精密称取对乙酰氨基酚对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得；
③供试品溶液的制备：取精制银翘解毒片样品20片，除去包衣，精密称定，研细，精密称取0.1g，置50ml量瓶中，精密加甲醇50ml，称定重量，超声60分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；
④检测结果：取上述2种溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，本品含对乙酰氨基酚为标示量的90.0％～110.0％。
而且，所述高效液相色谱法牛蒡苷含量测定的方法为：
①色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：乙腈∶水＝25∶75；检测波长为280nm，柱温：40℃；流速：1.0ml/min，理论板数按牛蒡苷峰计算不低于3000；
②对照品溶液的制备：取牛蒡苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得；
③供试品溶液的制备：取精制银翘解毒片样品20片，除去包衣，精密称定，研细，精密称取0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇20ml，密塞，称定重量，超声60分钟，放冷，再称定重量，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
④结果：分别精密吸取对照品、供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得，本品每片0.25g含牛蒡子以牛蒡苷C27H34O11计，不少于1.62mg。
本发明的优点和积极效果是：
本发明在原标准基础上，增加了连翘、牛蒡子、甘草的薄层鉴别方法和以牛蒡苷为对照品，制定了牛蒡子的含量测定方法，由于在长期的检验中发现对乙酰氨基酚的检测方法不理想，因此对原有的对乙酰氨基酚含量测定方法进行了修改，修订后的质量标准，提高了药品的质量控制，使药品的定性和定量检测更加准确。
附图说明
图1为本发明连翘薄层色谱鉴别的色谱图，从左至右依次为：1精制银翘解毒片样品(批号为0601359)、2精制银翘解毒片样品(批号为0609380)、3精制银翘解毒片样品(批号为0610395)、4连翘对照药材、5精制银翘解毒片样品连翘阴性样品；
图2为本发明牛蒡子、甘草薄层色谱鉴别色谱图，从左至右依次为：1精制银翘解毒片样品(批号为0601359)、2精制银翘解毒片样品(批号为0609380)、3精制银翘解毒片样品(批号为0610395)、4甘草对照药材、5精制银翘解毒片样品甘草阴性样品；
图3为本发明牛蒡子、甘草薄层色谱鉴别色谱图，从左至右依次为：1精制银翘解毒片样品(批号为0601359)、2精制银翘解毒片样品(批号为0609380)、3精制银翘解毒片样品(批号为0610395)、4牛蒡子对照药材、5精制银翘解毒片样品牛蒡子阴性样品；
图4为本发明对乙酰氨基酚薄层色谱鉴别色谱图，从左至右依次为：1精制银翘解毒片样品(批号为0601359)、2精制银翘解毒片样品(批号为0609380)、3精制银翘解毒片样品(批号为0610395)、4对乙酰氨基酚对照品、5精制银翘解毒片样品对乙酰氨基酚阴性样品；
图5为本发明对乙酰氨基酚对照品色谱图；
图6为本发明对乙酰氨基酚供试样品溶液色谱图；
图7为本发明对乙酰氨基酚阴性样品溶液色谱图；
图8为本发明牛蒡苷对照品色谱图；
图9为本发明牛蒡子供试品色谱图；
图10为本发明牛蒡子阴性对照色谱图。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明进一步说明，下述实施例是说明性的，不是限定性的，不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。
一种精制银翘解毒片的质量控制方法，其方法的步骤是：
(1)连翘的薄层色谱鉴别
①供试品溶液的制备：取本品10片，去包衣，研细，加乙醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，过滤，滤液作为供试品溶液。
②对照药材溶液的制备：取连翘对照药材2g，加水40ml，置水浴中浸渍1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为对照药材溶液。
③阴性样品溶液的制备：按处方配比，取除去连翘的其他味药材，按制法项下的工艺制成样品，再按上述供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液。
④薄层色谱条件及结果：照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液、阴性样品溶液各4μl，对照药材溶液2μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇＝6∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点，阴性样品无干扰，结果见图1。
(2)牛蒡子、甘草的薄层色谱鉴别
①供试品溶液的制备：取连翘鉴别项下供试品溶液。
②对照药材溶液的制备：取牛蒡子对照药材1.2g、甘草对照药材1g，分别加乙醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣分别加乙醇2ml使溶解，作为对照药材溶液。
③阴性样品溶液的制备：按处方配比，取分别除去牛蒡子、甘草的其他味药材，按制法项下的工艺制成样品，再按上述供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液。
④薄层色谱条件及结果：照薄层色谱法(中国药典2005版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液、阴性样品溶液各4μl，对照药材溶液2μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝40∶10∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性样品无干扰，结果见图2和图3。
(3)对乙酰氨基酚的薄层色谱鉴别
本方法为复核原方法实验，故不将其纳入质量控制方法。
①供试品溶液的制备：取对乙酰氨基酚含量测定项下的供试品溶液。
②对照品溶液的制备：取对乙酰氨基酚含量测定项下的对照品溶液。
③阴性样品溶液的制备：按处方配比，取除去对乙酰氨基酚的其他味药材，按制法项下的工艺制成样品，再按上述供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液。
④薄层色谱条件及结果：照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液、阴性样品溶液及对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以丙酮∶三氯甲烷＝15∶4为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性样品无干扰，结果见图4。
(4)对乙酰氨基酚含量测定
①色谱条件：YMC-Pack ODS-A C18柱(150×4.6mmI.D.，5μm)；流动相：乙腈∶水∶冰醋酸＝20∶80∶1；检测波长为248nm；柱温：40℃；流速：1.0ml/min，理论板数按对乙酰氨基酚峰计算应不低于3000；
②对照品溶液的制备：精密称取对乙酰氨基酚对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。
③供试品溶液的制备：取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，精密称取0.1g，置50ml量瓶中，精密加甲醇50ml，称定重量，超声60分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
④阴性样品溶液的制备：按处方取除对乙酰氨基酚的各味药材，按制法制得样品，再按供试品溶液制备方法，制得阴性样品溶液。
⑤检测结果：取上述3种溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，结果见图4、图5、图6，本实验做了10批样品的检测，从结果可以看出，每片样品0.25g中对乙酰氨基酚的含量为标示量的97.2％-102.4％，，10批样品中的对乙酰氨基酚的平均含量为标示量的99.3％，因此将其含量限度定为90.0％-110.0％，本实验中每片含对乙酰氨基酚44mg
(5)牛蒡苷含量测定
①色谱条件：YMC-Pack ODS-A C18柱(150×4.6mmI.D.，5μm)；流动相：乙腈∶水＝25∶75；检测波长为280nm，柱温：40℃；流速：1.0ml/min，理论板数按牛蒡苷峰计算应不低于3000。
②对照品溶液的制备：取牛蒡苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。
③供试品溶液的制备：取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，精密称取0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇20ml，密塞，称定重量，超声60分钟，放冷，再称定重量，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
④阴性样品溶液的制备：按处方取除牛蒡子的各味药材，按制法制得样品，再按供试品溶液制备方法，制得阴性样品溶液。
⑤结果：结果可以看出，每片样品重0.25g中牛蒡苷的含量在2.23-2.62mg之间，10批样品中的对牛蒡苷的含量平均值为2.32mg/片，其含量限度定为2.32×70％＝1.62mg/片。即：本品每片(0.25g)含牛蒡子以牛蒡苷(C27H34O11)计，不得少于1.62mg，其他依次类推。
Claims (5)
1.一种精制银翘解毒片的质量控制方法，其特征在于：其方法的步骤是：
(1)薄层色谱法鉴别精制银翘解毒片中是否含有连翘成分；
(2)薄层色谱法鉴别精制银翘解毒片中是否含有牛蒡子、甘草成分；
(3)高效液相色谱法检测精制银翘解毒片中对乙酰氨基酚的含量；
(4)高效液相色谱法检测精制银翘解毒片中牛蒡苷含量；
2.根据权利要求1所述的精制银翘解毒片的质量控制方法，其特征在于：所述连翘的薄层色谱鉴别的方法为：
①供试品溶液的制备：取精制银翘解毒片样品10片，去包衣，研细，加乙醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，过滤，滤液作为供试品溶液；
②对照药材溶液的制备：取连翘对照药材2g，加水40ml，置水浴中浸渍1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为对照药材溶液；
③薄层色谱条件及结果：薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液4μl，对照药材溶液2μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇＝6∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，检视供试品色谱中在与对照药材色谱相应位置上是否显相同颜色的斑点，确定供试样品中是否含有连翘成分。
3.根据权利要求1所述的精制银翘解毒片的质量控制方法，其特征在于：所述牛蒡子、甘草的薄层色谱鉴别的方法为：
①供试品溶液的制备：取连翘鉴别项下供试品溶液；
②对照药材溶液的制备：取牛蒡子对照药材1.2g、甘草对照药材1g，分别加乙醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣分别加乙醇2ml使溶解，作为对照药材溶液；
③薄层色谱条件及结果：薄层色谱试验，吸取供试品溶液，对照药材溶液2μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝40∶10∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，检视供试品色谱中在与对照药材色谱相应的位置上是否显相同颜色的斑点，确定供试样品中是否含有牛蒡子、甘草成分。
4.根据权利要求1所述的精制银翘解毒片的质量控制方法，其特征在于：所述高效液相色谱法对乙酰氨基酚含量测定的方法为：
①色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：乙腈∶水∶冰醋酸＝20∶80∶1；检测波长为248nm；柱温：40℃；流速：1.0ml/min，理论板数按对乙酰氨基酚峰计算应不低于3000；
②对照品溶液的制备：精密称取对乙酰氨基酚对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得；
③供试品溶液的制备：取精制银翘解毒片样品20片，除去包衣，精密称定，研细，精密称取0.1g，置50ml量瓶中，精密加甲醇50ml，称定重量，超声60分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；
④检测结果：取上述2种溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，本品含对乙酰氨基酚为标示量的90.0％～110.0％。
5.根据权利要求1所述的精制银翘解毒片的质量控制方法，其特征在于：所述高效液相色谱法牛蒡苷含量测定的方法为：
①色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：乙腈∶水＝25∶75；检测波长为280nm，柱温：40℃；流速：1.0ml/min，理论板数按牛蒡苷峰计算不低于3000；
②对照品溶液的制备：取牛蒡苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得；
③供试品溶液的制备：取精制银翘解毒片样品20片，除去包衣，精密称定，研细，精密称取0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇20ml，密塞，称定重量，超声60分钟，放冷，再称定重量，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
④结果：分别精密吸取对照品、供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得，本品每片0.25g含牛蒡子以牛蒡苷C27H34O11计，不得少于1.62mg。
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