CN104931642A - 一种连翘药材及其水提取物的快速多信息薄层鉴别方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种连翘药材及其水提取物的快速多信息薄层鉴别方法。其特征在于：用简便、快捷的前处理方法得到供试品与对照药材溶液，在同一块薄层板上，分别获得连翘药材与提取物在2种检视条件下各自的多信息薄层鉴别图；各斑点清晰，相互交错，但又互不干扰。与常规的单信息薄层相比，不但大幅度提高了被鉴别物的质量可控性，有利于质量监督，而且方法简便、快捷，效率高，成本低，无环境污染。

Description

一种连翘药材及其水提取物的快速多信息薄层鉴别方法

技术领域

本发明涉及一种连翘药材及其水提取物的快速多信息薄层鉴别方法。

背景技术

中药连翘及其提取制剂的薄层鉴别方法，其样品和对照药材的前处理都比较繁琐复杂，需要用有机溶剂反复纯化处理，仅样品的前处理就要花费数小时，数百ml的有机试剂，效率低、环境污染、危害操作人员的身体健康。以中国药典2010年版药典一部为例，就其药材与其制剂的薄层鉴别方法，随机摘录列举3例：

1.连翘单味药材薄层鉴别

取本品1g，加石油醚(30～60℃)20ml，密塞，超声处理15分钟，滤过，弃去石油醚液，残渣挥干石油醚，加甲醇20ml，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。另取连翘对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取连翘苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.25mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇(8∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。

该鉴别方法鉴别一批样品，其前处理需花费时间1.2小时、有机溶剂90ml。

2.制剂中连翘薄层鉴别

A.小儿退热颗粒中连翘薄层鉴别

取本品10g，研细，加水20ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次20ml，弃去乙醚液，再用水饱和的正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用0.25％氢氧化钠溶液洗涤3次，每次20ml，再用正丁醇饱和水洗涤2次，每次20ml，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取连翘苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10～20μl、对照品溶液10μl，分别点于点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-甲醇-甲酸(12∶2.5∶2∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

该鉴别方法是以连翘苷对照品为对照，只样品的前处理就要花费时间4小时、有机溶剂122ml。

B.小儿感冒茶中连翘薄层鉴别

取本品12g，研细，加甲醇30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加0.2％氢氧化钠溶液20ml，加热使溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，每次30ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加0.2％氢氧化钠溶液20ml，加热使溶解，用三氯甲烷振摇提取2次，每次30ml，合并三氯甲烷提取液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取连翘苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10～15μl、对照品溶液10μl，分别点于点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸(9∶1∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

该鉴别方法是以连翘苷对照品为对照，只样品前处理就要花费时间3.5小时，有机溶剂152ml。

由上述随机列举的连翘单味药材的薄层鉴别以及其在制剂中的薄层鉴别实例，印证了目前为止，其鉴别的繁琐性、复杂性、费时性、对周围环境的污染性以及高成本、低效率。所以提高检测效率、降低检测成本、减少环境污染，创建连翘药材及其水提取物的快速多信息薄层鉴别方法，成了检测人员刻不容缓的奋斗目标，我们就是在该背景条件下，发明了连翘药材及其水提取物的快速多信息薄层鉴别方法。

连翘药材水提取物或配方颗粒的制备方法取连翘饮片13500-14500g，分别加水8倍量，煎煮提取二次，每次1-2小时，滤过，滤液70℃减压浓缩，浓缩液喷雾干燥或70℃减压干燥，得水提取物干膏粉；或加糊精适量，混匀，制粒，分别制成1000g，分装，得水提取物配方颗粒。

发明内容

本发明就是针对连翘药材及其在复方制剂中薄层鉴别繁琐、费时、方法污染环境和高成本的弊端，发明了一种连翘药材及其水提取物的快速多信息薄层鉴别方法。即，用最简便、快捷的前处理方法得到供试品与对照药材溶液，在同一块薄层板上，获得连翘药材喷雾体积比为1∶6的5％香草醛硫酸溶液-乙醇的混合溶液显色后，日光和透过灯光检视的多信息薄层色谱图；连翘水提取物在紫外光灯254nm、以及喷雾体积比为1∶6的5％香草醛硫酸溶液-乙醇的混合溶液显色后日光，2种检视条件下的多信息薄层鉴别图，斑点清晰，相互交错，但又互不干扰(见图1、2)。与常规的单信息薄层相比，不但大幅度提高了连翘及其提取物的质量可控性，有利于质量监督，而且还提高了检测效率、节约了成本，减少了环境污染。

本发明解决其技术问题所采用的方案为：

(1)连翘药材的薄层鉴别 取连翘药材与对照药材各0.2g，分别加80％甲醇2ml，超声处理15分钟，上清液分别作为供试品溶液和对照药材溶液；吸取供试品溶液与对照药材溶液各3～5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为14∶6∶3∶3∶0.5的环己烷乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-氨水为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以体积比为1∶6的5％香草醛硫酸溶液-乙醇的混合溶液，105℃热风吹至斑点显色清晰，日光或透过灯光检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；

(2)连翘水提取物的薄层鉴别 取连翘水提取物0.3g，研细，加甲醇4ml，超声处理10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取连翘对照药材0.3g，加水50ml，小火煎煮30分钟，棉花滤过，滤液蒸干，残留物加甲醇1ml，使溶解，作为对照药材溶液；吸取对照药材溶液与供试品溶液各5～6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以以体积比为12∶6∶3∶3∶1的环己烷-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-氨水为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；再喷以体积比为1∶6的5％香草醛硫酸溶液-乙醇的混合溶液，105℃热风吹至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。

本发明的原理如下：

依据中药各有效成分的化学结构与性质，遵循相似相容的提取原则，采用适宜的提取溶剂，简便、快捷地制备供试品与对照药材溶液。再通过展开剂的移动，各成分在薄层板上的吸附、解吸附能力的不同，使其斑点得以分离。又借助各成分极性大小，选取极性近似的有效成分，在不同的检视条件下，呈现不同的斑点颜色，在同一块薄层板上，不同的检视条件下，获得多信息的薄层色谱图。

本发明的创新点及有益效果如下：

1.连翘药材的前处理方法是：取0.2g连翘药材与对照药材，分别加80％甲醇2ml，超声处理后，上清液即为供试品溶液与对照药材溶液；简便、快捷，只花费前处理时间15分钟、有机溶剂4ml。与报道方法相比，每检测一批药材，节约时间1小时、有机溶剂86ml。

2.连翘水提取物的前处理方法也是：取少量连翘水提取物，加适量甲醇，超声处理后，滤液作为供试品溶液；为与连翘水提取物薄层图谱一致，对照药材溶液用水煎煮后，蒸干，加甲醇溶解即可；共花费前处理时间1小时、有机溶剂5ml。与报道方法相比，每检测一批样品，节约时间2.5-3小时、有机溶剂117-147ml。

3.不论药材还是提取物，样品与对照药材的前处理都避开了有机溶剂浓缩与蒸干操作，无大气与环境污染。

4.药材经薄层展开后，在紫外光灯下是无任何信息的，喷雾香草醛硫酸溶液显色后，日光或透过灯光，薄层板呈现出2-3个不同颜色斑点；水提取物由于经过提取、浓缩、加热，部分成分分解，在紫外光灯254nm呈现出2个颜色斑点，喷雾香草醛硫酸溶液显色后，呈现出四个不同颜色的信息斑点，信息量之多，比单一的连翘苷对照品为指标，更具有实用价值。

5.本鉴别方法与已报道方法的不同之处还在于：本鉴别的展开剂是碱性展开剂，而已报道方法是偏酸性或中性展开剂。本鉴别利用了展开剂的碱性，可以将一些酸性的物质，托在原点，使其不随展开剂移动或移动缓慢，克服薄层板的背景干扰，实现样品和对照药材不经纯化处理，也能获得清晰的薄层色谱图。

(5)本发明与报道的薄层鉴别方法相比，检测效率高，花费时间短，检测成本低，无环境污染，为一部具有推广应用前景的示范性检测方法。

附图说明

图1为连翘药材与及对照药材显色后日光下的薄层TLC图。

图2为连翘药材与及对照药材显色后灯光下的薄层TLC图。

图3为连翘及其水提取物紫外光灯254nm下的薄层TLC图。

图4为连翘及其水提取物显色后日光下的薄层TLC图。

图1、2为同一块薄层板，不同检视条件下的薄层色谱图，其中，1.2.3。5.6.7为连翘药材；4.为连翘对照药材

图3、4为同一块薄层板，不同检视条件下的薄层色谱图，其中，1.2.3.5.6.7为连翘水提取物；4.为连翘对照药材

本发明具体实施方式如下：

(1)连翘药材的薄层鉴别 取连翘药材与对照药材各0.2g，分别加80％甲醇2ml，超声处理15分钟，上清液分别作为供试品溶液和对照药材溶液；吸取供试品溶液与对照药材溶液各3～5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为14∶6∶3∶3∶0.5的环己烷-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-氨水为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以体积比为1∶6的5％香草醛硫酸溶液-乙醇的混合溶液，105℃热风吹至斑点显色清晰，日光或透过灯光检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。

(2)连翘水提取物的薄层鉴别 取连翘水提取物0.3g，研细，加甲醇4ml，超声处理10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取连翘对照药材0.3g，加水50ml，小火煎煮30分钟，棉花滤过，滤液蒸干，残留物加甲醇1ml，使溶解，作为对照药材溶液；吸取对照药材溶液与供试品溶液各5～6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以以体积比为12∶6∶3∶3∶1的环己烷-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-氨水为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；再喷以体积比为1∶6的5％香草醛硫酸溶液-乙醇的混合溶液，105℃热风吹至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。

Claims (3)

1.本发明涉及一种连翘药材及其水提取物的快速多信息薄层鉴别方法，其特征在于：

(1)连翘药材的薄层鉴别 取连翘药材与对照药材各0.2g，分别加80％甲醇2ml，超声处理15分钟，上清液分别作为供试品溶液和对照药材溶液；吸取供试品溶液与对照药材溶液各3～5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为14∶6∶3∶3∶0.5的环己烷-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-氨水为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以体积比为1∶6的5％香草醛硫酸溶液-乙醇的混合溶液，105℃热风吹至斑点显色清晰，日光或透过灯光检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；

(2)连翘水提取物的薄层鉴别 取连翘水提取物0.3g，研细，加甲醇4ml，超声处理10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取连翘对照药材0.3g，加水50ml，小火煎煮30分钟，棉花滤过，滤液蒸干，残留物加甲醇1ml，使溶解，作为对照药材溶液；吸取对照药材溶液与供试品溶液各5～6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为12∶6∶3∶3∶1的环己烷-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-氨水为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；再喷以体积比为1∶6的5％香草醛硫酸溶液-乙醇的混合溶液，105℃热风吹至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。

2.根据权利要求1所述的一种连翘药材及其水提取物的快速多信息薄层鉴别方法，其特征在于所述的连翘水提取物每1g相当原生药材13.5～14.5g。

3.根据权利要求1所述的一种连翘药材及其水提取物的快速多信息薄层鉴别方法，其特征在于所述水提取物也可以是其水提取的配方颗粒。