CN102068599A - 祛痰平喘止咳糖浆的质量控制方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于中成药的技术领域，涉及以中药材为原料制成的祛痰平喘止咳糖浆的质量控制方法，质量标准中设置以满山红为对照药材、以黄芩苷为对照品，薄层色谱法鉴别祛痰平喘止咳糖浆(长城止咳喘糖浆)处方中是否含有满山红、黄芩成分；可更加准确地检验出假药和劣药，提高了使用中的安全性；高效液相色谱法检测祛痰平喘止咳糖浆处方中黄芩苷的含量，每ml含黄芩苷不得少于0.6mg的定量指标及检验方法，提高了祛痰平喘止咳糖浆质量标准的可控性，进一步确保产品内在质量和疗效，使质量标准较为完善，修订后的质量标准，提高了药品的质量控制。
Description
技术领域
本发明属于中成药的技术领域，涉及以中药材为原料制成的祛痰平喘止咳糖浆的质量控制方法。
背景技术
长城止咳喘糖浆(本发明命名：祛痰平喘止咳糖浆的质量控制方法)1998年收载于《中华人民共和国卫生部标准(中药成方制剂)》第二十册。长城止咳喘糖浆在收载于部颁标准时，未公开处方量，记载组分质量标准：
满山红 鱼腥草 款冬花 连翘 黄芩 麦冬
罂粟壳 玄参 甘草；
制法：以上九味，满山红用乙醇渗漉，渗漉液滤过，其余款冬花等八味加水煎煮，滤过，滤液浓缩至适量，与上述乙醇渗漉液合并，静置，吸取上清液，沉淀中加入乙醇，静置，滤过，滤液与上清液合并，回收乙醇至适量，调整含醇量，兑入单糖浆900ml，加入苯甲酸钠5.4g，搅匀，静置，吸取上清液，调整总量至1800ml，灌装，即得。
目前与长城止咳喘糖浆标准记载组分相似，功效相似的产品文献很多，但是未见记载组分相同，功效相同的产品文献，但是上述标准存在如下问题：长城止咳喘糖浆原质量标准中无鉴别项，存在定性分析差；另外没有反映药物内在质量的指标成分的含量测定项，对于质量控制标准而言，还是有所欠缺，为提高中药的产品质量，需要完善产品质量标准。
发明内容
本发明的目的是本发明的目的在于克服现有技术的长城止咳喘糖浆标准不足之处，提供一种能够定性、定量检测药物成分的祛痰平喘止咳糖浆(长城止咳喘糖浆)的质量控制方法。
为了达到本发明的目的采用的技术方案是：一种祛痰平喘止咳糖浆的质量控制方法，其中所述的药物配方由中药材：
满山红 鱼腥草 款冬花 连翘 黄芩
麦冬 罂粟壳 玄参 甘草
制法：以上九味，满山红用乙醇渗漉，渗漉液滤过，其余款冬花等八味加水煎煮，滤过，滤液浓缩至适量，与上述乙醇渗漉液合并，静置，吸取上清液，沉淀中加入乙醇，静置，滤过，滤液与上清液合并，回收乙醇至适量，调整含醇量，兑入单糖浆900ml，加入苯甲酸钠5.4g，搅匀，静置，吸取上清液，调整总量至1800ml，灌装，即得，其特征在于：其方法的步骤是：
(1)以满山红为对照药材、以黄芩苷为对照品，薄层色谱法鉴别祛痰平喘止咳糖浆处方中是否含有满山红、黄芩成分；
(2)以黄芩苷为对照品，高效液相色谱法检测祛痰平喘止咳糖浆处方中黄芩苷的含量。
所述的祛痰平喘止咳糖浆的质量控制方法，其特征在于：所述的薄层色谱法鉴别祛痰平喘止咳糖浆处方中否含有苍术的方法为：取样品6ml，加乙醇50ml，超声处理25分钟，滤过，滤液挥干，残渣加40％乙醇，分3次置水浴上加热溶解，每次10ml，趁热滤过，合并滤液，蒸去乙醇，水溶液加乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取满山红对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸＝10∶2∶0.5，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
所述的薄层色谱法鉴别健胃宽胸丸处方中是否含有厚朴成分的方法为：取本品10ml，加甲醇溶液30ml，加热回流30分钟，放冷。滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，取上清液作为供试品溶液；另取黄芩对照药材1g，同法制成对照药材溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯一乙酸乙酯一甲醇-甲酸为展开剂，甲苯∶乙酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝10∶3∶10∶1，预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以5％三氯化铁乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
所述的祛痰平喘止咳糖浆的质量控制方法，其特征在于：以黄芩苷为对照品，液相色谱法检测祛痰平喘止咳糖浆处方中黄芩苷的含量的方法为：
(1)色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶水∶磷酸＝50∶50∶0.2为流动相；检测波长为280nm；理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000；
(2)对照品溶液的制备：取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.06mg的溶液，即得；
(3)供试品溶液的制备：精密吸取本品1ml置10ml容量瓶中，用70％乙醇定容至刻度，充分振摇，离心，滤过，作为供试品溶液；
(4)测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每ml含黄芩苷不得少于0.6mg。
发明有益效果：质量标准中设置以满山红为对照药材、以黄芩苷为对照品，薄层色谱法鉴别祛痰平喘止咳糖浆(长城止咳喘糖浆)处方中是否含有满山红、黄芩成分；可更加准确地检验出假药和劣药，提高了使用中的安全性；高效液相色谱法检测祛痰平喘止咳糖浆处方中黄芩苷的含量，每ml含黄芩苷不得少于0.6mg的定量指标及检验方法，提高了祛痰平喘止咳糖浆质量标准的可控性，进一步确保产品内在质量和疗效，使质量标准较为完善，修订后的质量标准，提高了药品的质量控制。
附图说明
图1满山红薄层鉴别谱图。
图2黄芩薄层鉴别谱图。
图3黄芩苷对照品的HPLC图谱。
图4供试品的HPLC图谱。
图5空白对照品的HPLC图谱。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明进一步说明，实施例1改进后的祛痰平喘止咳糖浆的质量控制方法(长城止咳喘糖浆)质量标准：
处方：满山红 鱼腥草 款冬花
连翘 黄芩 麦冬
罂粟壳 玄参 甘草
制法：以上九味，满山红用乙醇渗漉，渗漉液滤过，其余款冬花等八味加水煎煮，滤过，滤液浓缩至适量，与上述乙醇渗漉液合并，静置，吸取上清液，沉淀中加入乙醇，静置，滤过，滤液与上清液合并，回收乙醇至适量，调整含醇量，兑入单糖浆900ml，加入苯甲酸钠5.4g，搅匀，静置，吸取上清液，调整总量至1800ml，灌装，即得。
性状：本品为深棕色的澄清液体；气芳香，味甘、微苦。
检查：乙醇量 应为14～20％(附录IX M)。
相对密度 应为1.15～1.20(附录VII A)。其他应符合糖浆剂项下有关的各项规定(附录IH)。
鉴别：(1)取样品6ml，加乙醇50ml，超声处理25分钟，滤过，滤液挥干，残渣加40％乙醇，分3次置水浴上加热溶解，每次10ml，趁热滤过，合并滤液，蒸去乙醇，水溶液加乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取满山红对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(10∶2∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(2)取本品10ml，加甲醇溶液30ml，加热回流30分钟，放冷。滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，取上清液作为供试品溶液。另取黄芩对照药材1g，同法制成对照药材溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯一乙酸乙酯一甲醇-甲酸(10∶3∶10∶1)为展开剂，预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以5％三氯化铁乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
含量测定：照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸(50∶50∶0.2)为流动相；检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.06mg的溶液，即得。
供试品溶液的制备精密吸取本品1ml置10ml容量瓶中，用70％乙醇定容至刻度，充分振摇，离心，滤过，作为供试品溶液。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每ml含黄芩苷不得少于0.6mg。
功能与主治：消炎止咳，祛痰平喘。用于轻、中型慢性气管炎、咳喘症。用法与用量：口服，一次10ml，一日2次。规格：每瓶装100ml；贮藏：密封，置阴凉处。
实施例2长城止咳喘糖浆质量标准起草说明：长城止咳喘糖浆原质量标准中无鉴别和含量测定，对满山红、黄芩的薄层鉴别以及黄芩的含量测定方法进行研究试验，结果增加满山红、黄芩的薄层鉴别；此外，采用HPLC法对长城止咳喘糖浆中的黄芩苷进行含量测定，并确定黄芩苷的含量。
二.薄层鉴别
1.满山红的鉴别
1.1材料与试剂
乙醇、乙醚、甲苯、乙酸乙酯、甲酸：分析纯
满山红对照药材：中国药品生物制品检定所，批号：1035-200003高效硅胶G薄层板：青岛海洋化工厂分厂
1.2供试品溶液的制备
取样品6ml，加乙醇50ml，超声处理25分钟，挥干，残渣加40％乙醇，分3次置水浴上加热溶解，每次10ml，趁热滤过，合并滤液，蒸去乙醇，水溶液加乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
1.3对照药材溶液的制备
取满山红对照药材1g，照供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。
1.4空白对照品溶液的制备
按处方、工艺，除满山红外制备空白对照品，再按照供试品溶液制备方法制备空白对照品溶液。
1.5实验方法
照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(10∶2∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，空白对照品色谱无干扰。结果见图1。1：对照药材 2：供试品 3：空白对照品
2.黄芩的鉴别
2.1材料与试剂
甲醇、乙酸乙酯、甲苯、甲酸：分析纯
黄芩对照药材：中国药品生物制品检定所，批号：120955-200406
聚酰胺薄膜：天津思利达色谱技术开发公司
2.2供试品溶液的制备
取本品10ml，加甲醇溶液30ml，加热回流30分钟，放冷。滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，取上清液作为供试品溶液。
2.3对照药材及对照品溶液的制备
取黄芩对照药材1g，照供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
2.4空白对照品溶液的制备
按处方、工艺，除黄芩外制备空白对照品，再按照供试品溶液制备方法制备空白对照品溶液。
2.5实验方法
照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述四种溶液各10μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯一乙酸乙酯一甲醇-甲酸(10∶3∶10∶1)为展开剂，预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以5％三氯化铁乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。空白对照品色谱无干扰。结果见图2。1：对照品 2：对照药材 3：供试品 4：空白对照品
三.黄芩苷的含量测定
3.1仪器与材料
仪器：Waters 2695高效液相色谱仪，Waters 2487检测器Sartorius CP224S.电子天平.
材料：色谱柱：Diamonsil C18，5μ 250×4.6mm
黄芩苷对照品：批号：110715-200514由中国药品生物制品检验所生产
磷酸二氢钾：分析纯
甲醇为色谱纯
去离子水
3.2实验方法
3.2.1色谱条件：选用C18色谱柱，柱温为30℃，检测波长参考《中国药典》2005年版一部黄芩药材含量测定项下的检测波长，为280nm，流速为1.0ml/min。
3.2.2流动相的选择：结果显示：综合考虑目标峰分离情况，最终选择流动相3为最佳比例。
表1流动相的选择
3.2.3对照品溶液的制备
取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.06mg的溶液，作为对照品溶液。见图3
供试品的HPLC色谱峰结果
| 名字 | 保留时间 | 面积 | 峰高 | 含量 | 单位 | |
| 1 | 黄芩苷 | 17.585 | 1496601 | 239012 |
3.2.4供试品溶液制备
3.2.4.1提取溶剂的选择：结果显示采用方法3制备样品，黄芩苷含量较高，提取充分。
表2提取溶剂的选择
3.2.4.2确定供试品溶液的制备方法：精密吸取本品1ml置10ml容量瓶中，用70％乙醇定容至刻度，充分振摇，离心，滤过，即得。见图4
黄芩苷对照品的HPLC色谱峰结果
| 名字 | 保留时间 | 面积 | 峰高 | 含量 | 单位 | |
| 1 | 黄芩苷 | 17.531 | 1012132 | 26909 |
3.2.4.3空白对照品溶液制备：按处方、工艺，除去黄芩制备空白对照品，再按供试品溶液制备方法制备空白对照品溶液。见图5
空白对照品的HPLC色谱峰结果
| 名字 | 保留时间 | 面积 | 峰高 | 含量 | 单位 | |
| 1 | 黄芩苷 | 17.584 |
3.3方法学考察
3.3.1线性关系：取黄芩苷对照品溶液(浓度：0.06mg/ml)分别进样2μl，4μl，6μl，8μl，10μl注入高效液相色谱仪，以进样体积为横坐标，以峰面积为纵坐标做线性回归。结果见表3。
表3 线性考察结果
由数据得回归方程为：y＝A+Bx＝233437.8x-27943.84，r＝0.9999
结果表明黄芩苷在0.12～0.60μg范围内线性关系良好。
3.3.2精密度实验：对同一供试品溶液连续进样6次，测定相对标准偏差RSD＝0.4％，表明精密度良好。结果见表5
表5 精密度实验
3.3.3重现性实验：取同一批样品6份，按照供试品溶液的制备方法制备，每一份样品溶液进样两次取其峰面积的平均值，测定黄芩苷含量的RSD为1.28％，结果表明重现性良好，结果见表6。
表6重现性实验
3.3.4稳定性实验：同一供试品溶液每隔2小时进样一次，连续进样6次，分别进行含量测定，RSD值为0.4％，结果显示在10小时内供试品溶液稳定性良好，结果见如表7。
表7 稳定性实验
3.3.5回收率实验：取同一批已知含量的长城止咳喘糖浆样品(含量：0.655mg/ml)6份，每份0.5ml，精密量取，各加入黄芩苷0.3090 mg(取浓度为0.618mg/ml的黄芩苷对照品溶液，精密量取0.5ml加入供试品中)，按供试品溶液制备方法制备，注入高效液相色谱仪中测定。用6个测定结果进行评价。平均回收率为99.0％，RSD值＝2.3％，结果显示样品回收率良好，结果见表8。
表8回收率实验
3.3.6样品含量测定
取三批样品，分别按照供试品溶液制备方法进行制备，测定五批样品含量，结果见表9。
表9三批样品含量测定结果
0.747×80％＝0.60mg/ml
根据以上三批的检测结果，确定长城止咳喘糖浆中黄芩苷的含量为每1ml不得低于0.60mg。
Claims (3)
1.一种祛痰平喘止咳糖浆的质量控制方法，其中所述的药物配方由中药材：
满山红 鱼腥草 款冬花 连翘 黄芩
麦冬 罂粟壳 玄参 甘草
制法：以上九味，满山红用乙醇渗漉，渗漉液滤过，其余款冬花等八味加水煎煮，滤过，滤液浓缩至适量，与上述乙醇渗漉液合并，静置，吸取上清液，沉淀中加入乙醇，静置，滤过，滤液与上清液合并，回收乙醇至适量，调整含醇量，兑入单糖浆900ml，加入苯甲酸钠5.4g，搅匀，静置，吸取上清液，调整总量至1800ml，灌装，即得，其特征在于：其方法的步骤是：
(1)以满山红为对照药材、以黄芩苷为对照品，薄层色谱法鉴别祛痰平喘止咳糖浆处方中是否含有满山红、黄芩成分；
(2)以黄芩苷为对照品，高效液相色谱法检测祛痰平喘止咳糖浆处方中黄芩苷的含量。
2.根据权利要求1所述的祛痰平喘止咳糖浆的质量控制方法，其特征在于：所述的薄层色谱法鉴别祛痰平喘止咳糖浆处方中否含有苍术的方法为：取样品6ml，加乙醇50ml，超声处理25分钟，滤过，滤液挥干，残渣加40％乙醇，分3次置水浴上加热溶解，每次10ml，趁热滤过，合并滤液，蒸去乙醇，水溶液加乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取满山红对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸＝10∶2∶0.5，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
所述的薄层色谱法鉴别健胃宽胸丸处方中是否含有厚朴成分的方法为：取本品10ml，加甲醇溶液30ml，加热回流30分钟，放冷；滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，取上清液作为供试品溶液；另取黄芩对照药材1g，同法制成对照药材溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯一乙酸乙酯一甲醇-甲酸为展开剂，甲苯∶乙酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝10∶3∶10∶1，预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以5％三氯化铁乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
3.根据权利要求1所述的祛痰平喘止咳糖浆的质量控制方法，其特征在于：以黄芩苷为对照品，液相色谱法检测祛痰平喘止咳糖浆处方中黄芩苷的含量的方法为：
(1)色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶水∶磷酸＝50∶50∶0.2为流动相；检测波长为280nm；理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000；
(2)对照品溶液的制备：取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.06mg的溶液，即得；
(3)供试品溶液的制备：精密吸取本品1ml置10ml容量瓶中，用70％乙醇定容至刻度，充分振摇，离心，滤过，作为供试品溶液；
(4)测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每ml含黄芩苷不得少于0.6mg。
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| CN114563519A (zh) * | 2020-11-27 | 2022-05-31 | 四川好医生攀西药业有限责任公司 | 一种小儿止咳糖浆检测方法 |
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| CN102068599B (zh) | 2012-03-07 |
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