CN102040673B

CN102040673B - 一种依诺肝素的精制提纯方法

Info

Publication number: CN102040673B
Application number: CN2010105032829A
Authority: CN
Inventors: 姚成盛
Original assignee: SHANDONG YUCONG BIOTECHNOLOGY CO Ltd
Current assignee: SHANDONG YUCONG BIOTECHNOLOGY CO Ltd
Priority date: 2010-10-11
Filing date: 2010-10-11
Publication date: 2012-08-01
Anticipated expiration: 2030-10-11
Also published as: CN102040673A

Abstract

本发明公开了一种依诺肝素的精制提纯方法。它是以水为溶剂，把依诺肝素粗品用水溶解，配制成溶液，用合适频率及功率的微波照射依诺肝素的溶液，然后添加适量晶种在低温条件下养晶一段时间，然后经过滤、烘干，得产品。以本发明制备的依诺肝素成品符合欧洲药典的标准，制剂质量与目前市场上销售的进口的同类产品相比质量要好，价格低。同时它还减少有机溶剂的使用量，降低生产成本，提高了产品的重结晶收率。

Description

一种依诺肝素的精制提纯方法

技术领域

本发明涉及一种药物的精制提纯的方法，具体涉及一种依诺肝素的精制提纯方法，属于化工技术领域。

背景技术

微波，一般指分米波、厘米波、毫米波波段(频率为300-300000兆赫)的无线电波。作为一种传输介质和加热能源，微波已被广泛应用于化学领域，形成了微波化学，近年来发展很快，并得到愈来愈多的关注。著名的Nature杂志2003年初一篇评论，讨论了当前微波化学的优势和研究热点。美国麻省理工学院的研究人员通过计算机模拟发现，微波加热是一种廉价且节能的促使化学反应发生的方法。他们的研究重点是分离吸附在沸石上的混合物，取得很好的效果。赵岩岩等人研究了微波辐照对硫酸钙结晶的影响及特殊效应，取得一些可喜的成果。微波化学以降低能源消耗、减少污染、改良产物特性的优势，因此被誉为“绿色化学”，有着巨大的应用前景。

依诺肝素是一种抗凝和抗血栓药物，属于低分子肝素钠的衍生物。通常地，依诺肝素是以肝素为原料，通过肝素的季铵化、酯化，最终通过在碱溶液中β-消除得到。依诺肝素在临床上使用的剂型是小容量注射剂，对原料药的纯度及其他指标有很严格的要求。中国专利(授权号CN100582123C)公开了一种伊诺肝素粗品精制方法：将依诺肝素粗品洛于7～11倍水中，调pH至8.0～11.0，加热至30～55℃，加过氧化氢的量为水溶液的1％～2％，调pH至8.0～11.0，反应0.5～3小时，调pH至7.0～8.0，加入10.0％氯化钠，溶解后膜滤，以2倍量的甲醇析出沉淀，抽滤，洗涤后烘干，得依诺肝素精品。中国专利(授权号：CN100436483C)公开了伊诺肝素的另一种精制提纯方法：称取30克依诺肝素粗品，加水溶解，比色接近于欧洲药典4规定的黄色3号色。将依诺肝素溶液上XAD-7HP极性大孔聚烷酯吸附树脂柱(Rohm Haas公司生产)，柱床体积为120ml，用水洗脱，收集目标峰。再上柱洗脱2次，收集目标峰，比色为欧洲药典4定义的黄色4号色。加入活性炭，100rpm搅拌40分钟，先用滤纸过滤除去活性炭，然后再用微孔滤膜过滤除去残余的活性炭，比色优于欧洲药典4规定的黄色5号色。收集液经乙醇沉淀，过滤、冻干后，称重得26.4克。上述方法均为工业上常用的产品的提纯精制方法。这些方法的不足之处也是很明显的：生产工艺复杂，成本高，产品质量不稳定等，尤其是现有的技术生产的产品的晶体颗粒均匀度很不好，平均只有45～63.3％左右，这是制约制剂临床使用的一个很关键的因素。

针对这些不足，开发全新的依诺肝素的精制提纯技术，对于提高产品质量，降低生产成本有很好的前景。

发明内容

本发明的目的在于提供一种依诺肝素的精制提纯的方法，以解决现有技术的生产工艺复杂、成本高、产品质量不稳定、污染大等的不足，大幅度提高产品晶体颗粒的均匀度，使制剂能够很好的满足临床使用的需要。

本发明的技术方案是：一种依诺肝素的精制提纯方法，其特征是，以水为溶剂，把依诺肝素粗品用水溶解，配制成溶液，用合适频率及功率的微波照射依诺肝素的溶液，然后添加适量晶种在低温条件下养晶一段时间，然后经过滤、烘干，得产品。本发明的具体步骤如下：

1)将依诺肝素粗品用去离子水溶解，配制成溶液，浓度控制在5.0～36.0％；

2)上述溶液在搅拌的条件下用微波照射，照射条件是微波振荡频率300～900MHz，微波功率50～350W，时间5～30秒，温度18～36℃；

3)向上述水溶液中加入依诺肝素粗品重量0.0001～0.0003的依诺肝素晶种；

4)上述溶液缓慢降温至0～6℃，养晶2～4小时；

5)物料过滤，烘干，得产品。

以本发明制备的依诺肝素成品符合欧洲药典的标准，制剂质量与目前市场上销售的进口的同类产品相比质量要好，价格低。产品的平均指标如下：

平均分子量：4800道尔顿；

分子量分布：分子量小于2000道尔顿的多糖分子含量为≤12.0％，分子量2000-8000道尔顿之间的多糖分子含量为≥78.3％。

抗Xa/抗II：4.6；

抗Xa：118.4IU/mg；

231nm吸收值：14.56。

本发明与现有技术相比的显著效果有：

1、减少有机溶剂的使用量，降低生产成本。

2、大幅度提高产品质量，产品晶体颗粒的均匀度可达86.8％，比现有技术提高30个百分点。

3、产品的重结晶收率高，平均收率可达95.3％，比现有技术提高20个百分点。

4、易于操作，提高生产效率。

本发明的析晶原理：晶体生成的过程一般先生成晶核，而后再逐渐长大。一般认为晶体从液相或者气相中的生成有三个阶段：①介质达到过饱和、过冷却阶段；②成核阶段；③成长阶段。

在单位时间内，单位体积中所形成的核的数目称成核速度。它决定物质的过饱和度或者过冷度。过饱和度或过冷度越高，成核速度越大。成核速度还与介质的粘度有关，粘度大会阻碍成和速度。由于微波独特的选择性加热方式和化学反应速率对温度的敏感性，因此人们自然联想到将微波应用于化学反应以提高反应速率。目前微波已经被广泛应用于化工各个领域。微波的作用分为热效应与非热效应。微波析晶主要是利用了微波的非热效应。微波照射影响了溶液体系的分子势能，导致液体表面张力和年粘度系数的下降，引起成核速度的增大和相应临界成核半径的减小。本发明中添加晶种、低温养晶，促进了晶体的析出。当母液残留低于1000ppm时，析晶完全。

具体实施方式

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明的上述主题的范围仅限于以下的实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

实施例1

取5g依诺肝素粗品，用20g去离子水溶解，配制成均相溶液；溶液在搅拌状态下用微波照射，微波频率400MHz，功率170W，照射时间6s；向溶液中添加依诺肝素纯品0.0005g；物料缓慢降温至5℃，养晶3小时；检测母液残留低于1000ppm时，物料过滤，烘干，得产品。收率98.4％。经检测产品各指标均满足欧洲药典的标准。

平均分子量：4800道尔顿；

分子量分布：分子量小于2000道尔顿的多糖分子含量为11.8.0％，分子量2000-8000道尔顿之间的多糖分子含量为80.3％。

抗Xa/抗II：4.6；

抗Xa：118.4IU/mg；

231nm吸收值：14.56。

实施例2

取5g依诺肝素粗品，用15g去离子水溶解，配制成均相溶液；溶液在搅拌状态下用微波间歇照射，微波频率400MHz，功率170W，照射时间6s；向溶液添加依诺肝素纯品0.0005g；物料缓慢降温至5℃，养晶3小时；检测母液残留低于1000ppm时，物料过滤，烘干，得产品。收率97.3％。经检测产品各指标均满足欧洲药典的标准。

平均分子量：4800道尔顿；

分子量分布：分子量小于2000道尔顿的多糖分子含量为10.8.0％，分子量2000-8000道尔顿之间的多糖分子含量为79.0％。

抗Xa/抗II：4.6；

抗Xa：118.4IU/mg；

231nm吸收值：14.56。

实施例3

取5g依诺肝素粗品，用20g去离子水溶解，配制成均相溶液；溶液在搅拌状态下用微波照射，微波频率380Mhz，功率170W，照射时间6s；向溶液添加依诺肝素纯品0.001g；物料缓慢降温至0℃，养晶3小时；检测母液残留低于1000ppm时，物料过滤，烘干，得产品。收率98.0％。经检测产品各指标均满足欧洲药典的标准。

平均分子量：4800道尔顿；

分子量分布：分子量小于2000道尔顿的多糖分子含量为11.3.0％，分子量在2000-8000道尔顿之间的多糖分子含量为79.5％。

抗Xa/抗II：4.6；

抗Xa：118.4IU/mg；

231nm吸收值：14.56。

实施例4

取5g依诺肝素粗品，用15g去离子水溶解，配制成均相溶液；溶液在搅拌状态下用微波间歇照射，微波频率380Mhz，功率170W，照射时间6s；向溶液中添加依诺肝素纯品0.001g；物料缓慢降温至0℃，养晶3小时；检测母液残留低于1000ppm时，物料过滤，烘干，得产品。收率97.8％。经检测产品各指标均满足欧洲药典的标准。

平均分子量：4800道尔顿；

分子量分布：分子量小于2000道尔顿的多糖分子含量为10.8.0％，分子量2000-8000道尔顿之间的多糖分子含量为79.4％。

抗Xa/抗II：4.6；

抗Xa：118.4IU/mg；

231nm吸收值：14.56。

实施例5

取5g依诺肝素粗品，用20g去离子水溶解，配制成均相溶液；溶液在搅拌状态下用微波照射，微波频率400MHz，功率170W，照射时间12s；向溶液中添加依诺肝素纯品0.001g；物料缓慢降温至5℃，养晶2.5小时；检测母液残留低于1000ppm时，物料过滤，烘干，得产品。收率98.0％。经检测产品各指标均满足欧洲药典的标准。

平均分子量：4800道尔顿；

分子量分布：分子量小于2000道尔顿的多糖分子含量为10.4％，分子量在2000-8000道尔顿之间的多糖分子含量为78.9％。

抗Xa/抗II：4.6；

抗Xa：118.4IU/mg；

231nm吸收值：14.56。

实施例6

取5g依诺肝素粗品，用15g去离子水溶解，配制成均相溶液；溶液在搅拌状态下用微波间歇照射，微波频率400Mhz，功率170W，照射时间12s；向溶液中添加依诺肝素纯品0.001g；物料缓慢降温至5℃，养晶2.5小时；检测母液残留低于1000ppm时，物料过滤，烘干，得产品。收率98.6％。经检测产品各指标均满足欧洲药典的标准。

平均分子量：4800道尔顿；

分子量分布：分子量小于2000道尔顿的多糖分子含量为12.0％，分子量在2000-8000道尔顿之间的多糖分子含量为78.8％。

抗Xa/抗II：4.6；

抗Xa：118.4IU/mg；

231nm吸收值：14.56。

实施例7

取5g依诺肝素粗品，用20g去离子水溶解，配制成均相溶液；溶液在搅拌状态下用微波照射，微波频率380Mhz，功率170W，照射时间12s；向溶液中添加依诺肝素纯品0.001g；物料缓慢降温至5℃，养晶2.5小时；检测母液残留低于1000ppm时，物料过滤，烘干，得产品。收率98.4％。经检测产品各指标均满足欧洲药典的标准。

平均分子量：4800道尔顿；

分子量分布：分子量小于2000道尔顿的多糖分子含量为10.7％，分子量2000-8000道尔顿之间的多糖分子含量为78.8％。

抗Xa/抗II：4.6；

抗Xa：118.4IU/mg；

231nm吸收值：14.56。

实施例8

取5g依诺肝素粗品，用15g去离子水溶解，配制成均相溶液；向溶液中添加依诺肝素纯品0.001g；溶液在搅拌状态下用微波间歇照射，微波频率380Mhz，功率170W，照射时间12s；向溶液中添加依诺肝素纯品0.001g；物料缓慢降温至5℃，养晶2.5小时；检测母液残留低于1000ppm时，物料过滤，烘干，得产品。收率98.8％。经检测产品各指标均满足欧洲药典的标准。

平均分子量：4800道尔顿；

分子量分布：分子量小于2000道尔顿的多糖分子含量为11.0％，分子量在2000-8000道尔顿之间的多糖分子含量为80.3％。

抗Xa/抗II：4.6；

抗Xa：118.4IU/mg；

231nm吸收值：14.56。

Claims

1.一种依诺肝素的精制提纯方法，其特征是，包括以下步骤：

1）将依诺肝素粗品用去离子水溶解，配制成溶液，浓度控制在5.0～36.0%；

2）将步骤1）形成的溶液在搅拌的条件下用微波照射，照射条件是微波振荡频率300～900MHz，微波功率50～350W，时间5～30秒，温度18～36℃；

3）向步骤2）的溶液中加入依诺肝素粗品重量0.0001～0.0003倍的依诺肝素晶种；

4）然后溶液缓慢降温至0～6℃，养晶2～4小时；

5）物料过滤，烘干，得产品。