CN102018675B - 一种卡络磺钠冻干粉针及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种卡络磺钠冻干粉针剂及其制备方法，该卡络磺钠冻干粉针剂由卡络磺钠、甘露醇和缓冲盐组成，制备溶剂为注射用水。经大量试验，仅加缓冲盐便解决了卡络磺钠冻干粉针在制备过程中pH值不稳定和贮存过程中澄清度不合格的问题。本发明处方工艺克服现有技术不足之处，提供一种处方简单、质量保证、稳定性好、可应用于临床的卡络磺钠冻干粉针。其优势：①处方简单，处方中除主药卡络磺钠外，辅料仅甘露醇、缓冲盐；②处方中所使用原、辅料均为国家食品药品监督管理局规定的药用注射级的，消除非药用辅料带来的不可预知的不良反应风险；③稳定性好，运输和贮存比较方便；④经过敏性、溶血性、血管刺激性等特珠安全性试验，未见溶血及凝集、刺激性、过敏性反应。

Description

一种卡络磺钠冻干粉针及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种卡络磺钠冻干粉针及其制备方法，属于医药制剂的技术领域。 

背景技术

卡络磺钠为一新型的止血药，它是临床常用止血药。卡络磺钠的化学名称为：1-甲基-6-氧代-2，3，5，6-四氢吲哚-5-缩氨脲-2-磺酸钠盐三水合物，其化学结构式为： 

卡络磺钠药理作用的机理是通过增加毛细血管弹性，降低通透性，增加其收缩力；促进凝血酶的活性和纤维蛋白元的溶解，进而使出血的部位形成血栓而达到止血的目的。该药在临床上应用广泛，用于泌尿系统、上消化道、呼吸道和妇产科疾病出血。对泌尿系统出血疗效较为显著，亦可用于外伤和手术出血。 

经专利检索，通过专利申请的：①CN 1332660C(发明人：周桂荣；专利号：ZL200610012582.0；授权公告日：2007年8月22日)公开了一种止血药卡络磺钠注射液及其制备方法，其特征是通过添加助溶剂以提高溶液的稳定性，且生产过程需要通氮气以增加药品的稳定性；②专利申请200510037254.1(申请人：王海燕，公开号：CN 1759832A，公开日：2006年4月19日)公开了卡络磺钠注射液及其制备方法，其特征是通过添加抗氧剂和pH调节剂等解决卡络磺钠的稳定性问题，但其公布的灭菌温度要求110℃以下，且灭菌时间短，远低于国家药监局对注射剂的灭菌要求；③专利申请200710191009.5(申请人：江苏吴中医药集团有限公司苏州第六制药厂，公开号：CN 101254174A，公开日：2008年9月3日)公开了一种卡络磺钠的冻干粉针及其制备方法，其特征是通过添加硫脲和/或甲醛合次硫酸氢钠、甘露醇、赋形剂等解决卡络磺钠的稳定性问题，但由于处方中加入非药用级别辅料，可能导致在临床注射使用中发生不可预知的安全风险。 

发明内容

本发明处方工艺克服现有技术不足之处，提供一种处方简单、质量保证、稳定性好、可应用于临床的卡络磺钠冻干粉针。优势： 

①处方简单，处方中除主药卡络磺钠外，辅料仅甘露醇、缓冲盐。 

②处方中所使用原、辅料均为国家食品药品监督管理局规定的药用注射级的，消除非药用辅料带来的不可预知的不良反应风险。 

③稳定性好，运输和贮存比较方便。 

④经过敏性、溶血性、血管刺激性等特殊安全性试验表明，未见溶血及凝集、刺激、过敏反应。 

在卡络磺钠冻干粉针的处方工艺研究中，本发明人发现一个影响卡络磺钠冻干粉针质量的关键问题：卡络磺钠溶液在加入活性炭和冻干前、后其pH值均会较大升高，且导致贮藏过程中澄清度的不合格，这样大大增加了在临床使用的不良反应风险。 

为克服这一缺陷，本发明研究人员经大量试验研究，意外地发现添加少量的常用缓冲盐可以解决其加入活性炭吸附和冻干后pH值升高的问题。并对不添加缓冲盐、添加缓冲盐及缓冲盐种类进行筛选研究、影响因素考察和稳定性试验。 

不添加缓冲盐及添加不同种类缓冲盐的处方、制备过程的pH值监测数据见表1、2。 

表1不同处方数据对比 

处方1	处方2	处方3	处方4	处方5
					卡络磺钠  (10g)+甘露  醇(50g)+  注射用水加  至500ml	卡络磺钠(10g)+ 甘露醇(50g)+ 磷酸氢二钠-枸橼 酸缓冲液(50ml) +注射用水加至 500ml	卡络磺钠(10g)+  甘露醇(50g)+  枸橼酸-枸橼酸钠  缓冲液(50ml)+  注射用水加至  500ml	卡络磺钠(10g)  +甘露醇(50g)+  醋酸-醋酸钠  (50ml)+注射用  水加至500ml	卡络磺钠(10g)  +甘露醇(50g)+  磷酸盐缓冲液  (50ml)+注射用  水加至500ml

表2制备过程中pH值的变化情况 

	原料溶解后	加甘露醇后	加缓冲液后	脱炭后	冻干后
						处方1	5.60	5.61	-	6.14	6.68

[0018] 

处方2	5.61	5.60	5.03	5.09	5.32
						处方3	5.60	5.59	5.05	5.15	5.31
处方4	5.64	5.67	4.99	5.04	5.85
						处方5	5.61	5.62	5.06	5.13	5.40

由试验结果可以看出：卡络磺钠溶液不加缓冲盐经脱炭后其pH值明显升高，而添加缓冲盐脱炭后其pH值变化不大；冻干前后不加缓冲盐pH值明显升高，加醋酸-醋酸钠缓冲盐次之，加枸橼酸-枸橼酸钠缓冲盐、磷酸盐缓冲盐、磷酸氢二钠-枸橼酸缓冲盐pH值变化较小。 

为进一步考察、筛选最优处方工艺，实验设计影响因素考察：条件60℃放置10天，按照中国药典2005年版二部附录稳定性研究指导原则的要求试验，结果见表3。 

表3影响因素考察结果 

经影响因素试验考察结果可以看出：处方1不加缓冲盐的处方样品pH值经高温考察后又有一定程度的升高，澄清度不合格，含量有所下降，有关物质有所增加；处方4加醋酸-醋酸钠缓冲盐经高温考察后其pH值亦有所升高，其澄清度变差；而处方2、3和5经高温考察后其澄清度澄清，其他各项指标均变化不大。 

综合考虑，本发明的卡络磺钠冻干粉针剂选用的缓冲盐为枸橼酸-枸橼酸钠缓冲盐、磷酸盐缓冲盐任一种或两种混合使用均可。 

本发明提供的卡络磺钠冻干粉针是由卡络磺钠、缓冲盐、甘露醇组成。配制用溶剂为注射用水。 

缓冲盐的种类仅限于适于药用的磷酸缓冲盐、枸橼酸-枸橼酸钠两种，可以单独使用，也可以以任何方式混合使用；用量没有特别限制，缓冲盐加入卡络磺钠溶液后pH达到4.5～6.5，优选5.0～6.0，特别优选为5.5左右即可。在使用中可以先配制成缓冲液，然后加入卡络磺钠水溶液中，也可以直接将缓冲盐固体与卡络磺钠直接加入注射用水配制成本发明的注射液。 

本发明卡络磺钠冻干粉针处方中活性成分卡络磺钠的含量也没有特别限制，可以是适于药用的任何规格，例如每1000支中含有5～200g卡络磺钠，优选含有10～100g，最优选含有20～50g，如果换算成单位剂量，则每单位剂量(例如每支)中含有5mg～200mg卡络磺钠，优选10～100mg，最优选20～50mg。 

本发明的另一目的还在于提供卡络磺钠冻干粉针的制备方法。其具体操作步骤为： 

a、先称取处方量的卡络磺钠，加入处方量的注射用水，50℃搅拌溶解。 

b、再称取处方量的甘露醇，搅拌溶解。 

c、加入处方量的缓冲液，再加入0.05％～0.5％活性炭，搅拌循环30分钟。 

d、过滤脱碳，再用0.22μm滤膜过滤。 

e、取精滤液进行中间体检测。 

f、合格后灌装、冻干、加盖、检验、包装，即得卡络磺钠冻干粉针成品。 

本发明的卡络磺钠冻干粉针还可以通过下列方法制备，制备工艺包括如下步骤： 

a、在适量的50℃注射用水中加入处方量的卡络磺钠，搅拌至完全溶解； 

b、再称取处方量的甘露醇，搅拌溶解。 

c、取处方量的缓冲盐溶于适量的注射用水中，将其加入步骤b所得溶液中，搅拌并补加水至处方量，加入0.05％～0.5％的活性炭，搅拌循环30分钟； 

d、过滤脱炭，再经0.22μm微孔滤芯过滤除菌； 

e、取精滤液进行中间体检测。 

f、合格后灌装、冻干、加盖、检验、包装，即得卡络磺钠冻干粉针成品。 

具体实施方式

以下实施例仅对本发明进行进一步的说明，不应理解为是对本发明的进一步的限制。 

实施例1 

卡络磺钠                  20g 

甘露醇                    100g 

枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液     100ml 

注射用水加至              1000ml 

制成                      1000支 

制备工艺：称取处方量的卡洛磺钠，加入处方量的注射用水，50℃搅拌溶解，再称取处方量的甘露醇，搅拌溶解，加入处方量的枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液，再加入处方量的活性炭，搅拌30分钟，先过滤脱碳，再用0.22um滤膜过滤，检测中间体，灌装、冻干、加盖、检验、包装，即得卡络磺钠冻干粉针成品。 

实施例2 

卡络磺钠                  40g 

甘露醇                    200g 

磷酸二氢钠                5.5g 

氢氧化钠试液              适量 

注射用水加至              2000ml 

制成                      1000支 

制备工艺：a、称取处方量的卡洛磺钠，加入适量的注射用水，50℃搅拌溶 解，再加入处方量的甘露醇，搅拌溶解；b、处方量的磷酸二氢钠用适量注射用水溶解，氢氧化钠试液调pH值5.0后，加入a溶液中，然后补加水至全量，再加入0.1％的活性炭，搅拌30分钟，先过滤脱碳，再用0.22um滤膜过滤，检测中间体，灌装、冻干加盖、检验、包装，即得卡络磺钠冻干粉针成品。 

实施例3 

卡络磺钠               20g 

甘露醇                 100g 

枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液  50ml 

磷酸盐缓冲液           50ml 

注射用水加至           1000ml 

制备工艺：称取处方量的卡洛磺钠，加入处方量的注射用水，50℃搅拌溶解，再称取处方量的甘露醇，搅拌溶解，加入处方量的枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液和磷酸盐缓冲液，再加入0.1％的活性炭，搅拌30分钟，先过滤脱碳，再用0.22um滤膜过滤检测中间体，灌装、冻干加盖、检验、包装，即得卡络磺钠冻干粉针成品。 

用中国药典2005年版二部附录中的稳定性指导原则的方法对本发明卡络磺钠冻干粉针进行了稳定性考察，结果见表4。 

表4本发明卡络磺钠冻干粉针的稳定性考察结果 

全身用药的过敏性、溶血性、局部刺激性等试验研究 

试验目的 检查卡络磺钠冻干粉针有无溶血和凝集等反应，判断该药作为静脉注射用药的安全性。观察家兔耳缘静脉缓慢滴注及股四头肌注射卡络磺钠后对血管及股四头肌产生的刺激反应情况。考察卡络磺钠冻干粉针对豚鼠的全身过敏反应情况。 

1溶血性试验 

1.1试验材料 

(1)试验动物  日本大耳白雄性家兔1只，2.0kg，长沙市开福区东创实验动物科技服务部提供。实验动物生产许可证号：SCXK(湘)2006-0001。 

(2)试验药物  卡络磺钠冻干粉针，黄色疏松块状物，实施例1、2、3中卡络磺钠冻干粉针。避光密封保存，临用前根据需要用0.9％氯化钠注射液稀释成所需浓度。 

1.2试验方法 

(1)2％兔血细胞混悬液的制备：取家兔心脏血20ml，放入含玻璃珠的三角烧瓶中振摇10分钟，除去纤维蛋白原，使成脱纤血液。移入刻度离心管内，加生理盐水，摇匀，1500r/min离心15分钟，除去上清液，沉淀的红细胞再用生理盐水洗至上清液呈无色透明为止，按血球体积，用生理盐水将其稀释成2％ (v/v)的混悬液。 

(2)溶血性试验：取试管7支，按表1加入各种液体，第6管不加入供试品溶液，用生理盐水作空白对照，第7管用蒸馏水代替生理盐水，作为溶血的阳性对照。各管轻轻摇匀后送入37℃恒温水浴箱中孵育，记录0.25h、0.5h、0.75h、1h、2h、3h、4h结果，若试验中的溶液呈澄明红色，管底无细胞残留或有少量红细胞残留，表明有溶血发生；如红细胞全部下沉，上清液体无色澄明，表明无溶血发生。若溶液中有棕红色或红棕色絮状沉淀，振摇后不分散，表明有红细胞凝聚发生。。如有红细胞凝聚的现象，可按下法进一步判定是真凝聚还是假凝聚。若凝聚物在试管振荡后又能均匀分散，或将凝聚物放在载玻片上，在盖玻片边缘滴加2滴0.9％氯化钠溶液，置显微镜下观察，凝聚红细胞能被冲散者为假凝聚，若凝聚物不被摇散或在玻片上不被冲散者为真凝聚。 

1.3试验结果综述 

从表5可见浓度为1.6mg/ml卡络磺钠冻干粉针，在0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml管，37℃保温4h，上层液均为黄色澄明，红细胞全部下沉，表明1.6mg/ml的卡络磺钠冻干粉针无明显溶血作用，经振摇后可见红细胞均匀散开，证明无红细胞凝聚。表明符合静脉注射用安全性检查的要求。 

表5卡络磺钠冻干粉针(浓度为1.6mg/ml)溶血性试验结果综述 

注：结果中“-”表示不溶血，“+”表示溶血，“△”表示不凝集，“▲”表示凝集。 

2刺激性试验 

2.1试验材料 

(1)试验动物  日本大耳白家兔，雌雄不拘(雌性兔无孕)，2.0～2.5kg，长沙市开福区东创实验动物科技服务部提供。实验动物生产许可证号：SCXK(湘)2006-0001。 

(2)试验药物  同1.1(2)项下。肌肉注射，用前每支加灭菌注射用水溶解至所需浓度。 

2.2剂量设计 

以50kg成人临床静脉缓慢滴注每日最大用量80mg。通过meeh-rubner公式换算可得2.5kg家兔剂量为4.138mg/kg。放大剂量后即按0.8mg/ml浓度、6ml/kg静脉缓慢滴注。 

以50kg成人临床肌肉注射每日最大用量80mg。通过meeh-rubner公式换算可得2.5kg家兔剂量为4.138mg/kg。放大剂量后即按10mg/ml浓度、0.5ml/kg肌肉注射。 

2.3试验方法 

(1)家兔耳缘静脉血管刺激试验 

采取同体双侧比较法进行试验，取家兔3只，每日每只兔一侧耳缘静脉按无菌操作方法分别静脉缓慢滴注浓度为0.8mg/ml的卡络磺钠冻干粉针6ml/kg，另侧同法给与等体积的0.9％氯化钠注射液，每日1次，连续7日，每次给药前后观察注射部位血管及周围组织有无充血、水肿、变色坏死等现象。于末次给药24h后放血处死家兔，处死后立即于注射部位近心端1.5cm至3cm处剪取耳缘(含耳缘静脉血管)，10％甲醛固定，送病理组织学检查，观察有无组织变性或坏死等显著性刺激反应。 

(2)家兔股四头肌刺激试验 

采取同体双侧比较法进行试验，取家兔2只，每只于一侧股四头肌肉按无菌操作方法注入浓度为10mg/ml的卡络磺钠冻干粉针0.5ml/kg，另一侧注射等体积的灭菌注射用水，48h后放血处死，观察受试物的刺激反应，按下表换算成相应的反应分值，以算出股四头肌反应分值的总和。 

表6肌肉刺激反应评分标准 

2.3试验结果综述 

(1)家兔耳缘血管刺激试验 

家兔每日耳缘静脉缓慢滴注浓度为0.8mg/ml的卡络磺钠冻干粉针6ml/kg，另侧同法给与等体积的0.9％氯化钠注射液，每日1次，连续7日，末次给药后24h内注射部位血管未见明显充血及水肿，血管纹路清晰，病理组织检查未见组织变性及坏死等病理改变。 

(2)家兔股四头肌刺激试验 

家兔一侧股四头肌注射10mg/ml的卡络磺钠冻干粉针0.5ml/kg，另侧注射等体积的灭菌注射用水，给药后48h，取股四头肌观察均未见明显刺激反应，反应分值均为0，病理组织检查未见组织变性及坏死等病理改变。 

3全身过敏试验 

3.1试验材料 

(1)试验动物  白化豚鼠，雌雄兼用(雌性豚鼠无孕)，体重300-350g，长沙市开福区东创实验动物科技服务部提供。实验动物生产许可证号：SCXK(湘)2006-0001。 

(2)试验药物  同1.1(2)项下。 

(3)鸡蛋，购自市场，使用时按无菌操作取出鸡蛋清，加生理盐水配制成100ml/L鸡蛋清溶液。 

3.2剂量设计 

以50kg成人临床静脉给药每日最大用量80mg。通过meeh-rubner公式换算可得350g豚鼠剂量为7.733mg/kg。即350g豚鼠给药剂量为2.707mg，放大剂量后，定以1.6mg/ml、2ml/只为足趾静脉推注激发高剂量。 

3.3试验方法 

取白化无伤豚鼠24只，均分4组，取第1组(设为低剂量组)豚鼠按无菌操作隔日每只腹腔注射浓度为0.8mg/ml的卡络磺钠冻干粉针1ml/只致敏，连续3次。取第2组(设为高剂量组)豚鼠按无菌操作隔日每只腹腔注射浓度为 1.6mg/ml的卡络磺钠冻干粉针1ml/只致敏，连续3次。第1、2组于末次注射后第10d，静脉注射给予为2ml/只的卡络磺钠冻干粉针进行激发攻击；取第3组(设为阴性对照组)豚鼠隔日每只腹腔注射0.9％氯化钠注射液1ml/只，共3次，于末次注射后第10d静脉注射给予0.9％氯化钠注射液2ml/只进行攻击；取第4组(设为阳性对照组)豚鼠隔日每只腹腔注射100ml/L鸡蛋清溶液1ml/只，共3次，于末次注射后第10d静脉注射给予100ml/L鸡蛋清溶液2ml/只进行攻击。各组豚鼠注射攻击后30min内，按表3症状详细观察每只动物的反应，症状的出现及消失时间，最长观察3小时。然后按表8判断过敏反应发生程度。根据过敏反应发生率和发生程度进行综合判断。 

表7过敏反应症状 

0正常	7呼吸急促	14步态不稳
			1躁动	8排尿	15跳跃
2竖毛	9排粪	16喘息
			3颤抖	10流泪	17痉挛
4搔鼻	11呼吸困难	18旋转
			5喷嚏	12哮鸣音	19潮式呼吸
6咳嗽	13紫癜	20死亡

表8全身致敏性评价标准 

0	-	过敏反应阴性
			1-4症状	+	过敏反应弱阳性
5-10症状	++	过敏反应阳性
			11-19症状	+++	过敏反应强阳性
20	++++	过敏反应极强阳性

3.3试验结果综述 

从表9可见第1组(低剂量组)豚鼠静脉给予卡络磺钠冻干粉针进行攻击后，动物未见兴奋不安、搔鼻、竖毛、咳嗽、呼吸困难和颤抖等明显过敏反应症状，过敏反应为阴性；第2组(高剂量组)豚鼠静脉给予卡络磺钠冻干粉针进行攻击后，除1只豚鼠出现搔鼻、竖毛症状外其余动物未见兴奋不安、搔鼻、竖毛、咳嗽、呼吸困难和颤抖等明显过敏反应症状；阴性对照组动物攻击后也未见明显过敏反应症状，过敏反应也为阴性；而阳性对照组用鸡蛋清攻击后，6只豚鼠均发生搔鼻、竖毛、颤抖或呼吸困难等过敏反应症状，并且5/6只豚鼠出现死亡， 过敏反应为极强阳性。 

表9卡络磺钠冻干粉针过敏试验结果综述 

浓度为1.6mg/ml的卡络磺钠冻干粉针未见溶血作用，其结果符合静脉注射用药安全性要求。 

家兔每日耳缘静脉缓慢滴注浓度为0.8mg/ml的卡络磺钠冻干粉针6ml/kg，另侧同法给与等体积的0.9％氯化钠注射液，每日1次，连续7日，于末次给药后观察家兔耳缘静脉未见明显刺激反应。以10mg/ml的浓度对家兔股四头肌注射0.5ml/kg也未见明显刺激反应，表明在本试验条件下卡络磺钠冻干粉针的局部刺激试验符合规定。 

受试药高、低剂量组豚鼠从静脉给予卡络磺钠冻干粉针进行攻击后，除高剂量组1只豚鼠出现搔鼻、竖毛反应外，其余豚鼠均未见兴奋不安、搔鼻、竖毛、咳嗽、呼吸困难和颤抖等明显过敏反应症状，表明在本试验条件下该药过敏试验符合要求。 

经各种研究表明，本品制备工艺成熟可行，处方简单，可满足大生产的需求；且质量保证，稳定性好；药理实验研究无过敏性、刺激性和溶血性反应。 

Claims (5)

1.一种卡络磺钠冻干粉针制剂，其特征在于：该冻干粉针制剂由卡络磺钠、甘露醇和缓冲盐组成，所述缓冲盐为枸橼酸-枸橼酸钠缓冲盐、磷酸盐缓冲盐中的一种，或两种任何比例的混合，配制用溶剂为注射用水，卡络磺钠与甘露醇的重量比为1∶5，并且缓冲盐加入卡络磺钠溶液后使pH达到5.5。

2.根据权利要求1所述的卡络磺钠冻干粉针制剂，其特征在于每1000支中含有卡络磺钠20g～40g。

3.根据权利要求1或2所述的卡络磺钠冻干粉针制剂，其特征在于每支中含有卡络磺钠20mg～40mg。

4.根据权利要求1～3中任意一项所述的卡络磺钠冻干粉针制剂的制备方法，其特征在于该方法包括下列步骤：

a、先称取处方量的卡络磺钠，加入处方量的注射用水，50℃搅拌溶解；

b、再称取处方量的甘露醇，搅拌溶解；

c、加入处方量的缓冲液，再加入0.05％～0.5％活性炭，搅拌循环15分钟以上；

d、过滤脱碳，再用0.22μm滤膜过滤；

e、取精滤液进行中间体检测；

f、合格后灌装、冻干、加盖、检验、包装，即得卡络磺钠冻干粉针制剂成品。

5.权利要求1～3中任意一项所述的卡络磺钠冻干粉针制剂的制备方法，其特征在于该方法包括下列步骤：

a、在适量的50℃注射用水中加入处方量的卡络磺钠，搅拌至完全溶解；

b、再称取处方量的甘露醇，搅拌溶解；

c、取处方量的缓冲盐溶于适量的注射用水中，将其加入步骤b所得溶液中，搅拌并补加水至处方量，加入0.05％～0.5％的活性炭，搅拌循环30分钟；

d、过滤脱炭，再经0.22μm微孔滤芯过滤除菌；

e、取精滤液进行中间体检测；

f、合格后灌装、冻干、加盖、检验、包装，即得卡络磺钠冻干粉针制剂成品。