CN102018670A

CN102018670A - 一种抗癌制剂及其制备方法

Info

Publication number: CN102018670A
Application number: CN2010105478030A
Authority: CN
Inventors: 胡雯; 李莉娥; 徐华斌; 袁靖
Original assignee: Yichang Humanwell Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Yichang Humanwell Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2010-11-15
Filing date: 2010-11-15
Publication date: 2011-04-20
Anticipated expiration: 2030-11-15
Also published as: CN102018670B

Abstract

本发明公开了一种供注射用的抗癌药物的亚微乳制剂及制备方法。本发明的抗癌药物的亚微乳制剂平均粒径100～300nm，具有亲水表面修饰，不仅载药量高、包封率高、稳定性好、安全性高，而且能在血液中的保留较长的时间，具有一定的淋巴靶向性。

Description

一种抗癌制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及药物制剂技术，更具体地说，涉及一种抗癌药物的亚微乳制剂及其制备方法。

背景技术

恶性肿瘤是严重威胁人类健康的常见病和多发病。目前国内外已研究的抗肿瘤药众多，临床常用的亦不下60多种。尽管药物化学治疗是目前临床针对肿瘤治疗的主要手段之一，但当前所采用的抗肿瘤药物存在的一个主要问题在于其针对肿瘤组织的作用有限，在杀死肿瘤细胞的同时往往也杀死了正常的特别是增生相对旺盛的细胞(如骨髓细胞和小肠内皮细胞)，导致严重毒副作用。因此理想的抗肿瘤药物应能特异性进入肿瘤细胞。

另外，难溶性抗癌药物如多烯紫杉醇、长春瑞滨等，现有市售制剂中的溶剂，如聚氧乙烯氢化蓖麻油，易引起严重过敏反应，且临床配制和给药均存在不便。其他一些因素如注射部位疼痛、体内不稳定的环境以及高剂量导致的毒性等也限制了抗肿瘤药物的应用。

因此，我们需要选择一种合适的药物载体，以解决抗癌药物存在的上述问题。与众多载体相比，亚微乳载药量高、包封率高、稳定性好、安全性好、使用与贮存方便，且大生产工艺相对成熟。因此，将亚微乳作为抗癌药物的载体已经成为了目前该领域的一个研究热点。专利CN1709236A、CN1857222A、CN1965820A、CN100998559A、CN101433533A、CN1289078C、CN1602854A等公开了供静脉注射用的多西紫杉醇、紫杉醇或长春瑞滨的乳化制剂和(或)其冻干制剂及其制备方法，大多不同程度地提高了水溶性、改善了溶剂引起的过敏性反应、降低了毒性，但对于作用特异性的问题仍没有得到很好地解决。

静脉注射O/W型乳剂其内相油滴与癌细胞有较好的亲和力，并能在癌细胞的周围黏附较长的时间，这有助于药物向癌细胞内渗入的机会，产生较高杀灭或抑制癌细胞的效果。然而，普通乳剂注射给药后，易被网状内皮系统巨噬细胞吞噬并富集于肝、脾等处。

发明内容

本发明提供了一种可供临床使用的安全稳定的供注射用的抗癌亚微乳制剂。该制剂具有合适的粒径大小和一定的表面亲水修饰，解决了普通抗癌乳剂易被网状内皮系统巨噬细胞吞噬清除的缺点，使其能更多地作用于癌细胞，能有效靶向淋巴病灶，克服了现有技术存在的不足。

本发明的目的是提供一种安全稳定、具有一定靶向性的抗癌亚微乳制剂。

本发明的另一个目的是提供上述制剂的制备方法。

具体地说，本发明提供了一种抗癌药物的亚微乳制剂，其包含抗癌药物、油性成分、乳化剂和亲水修饰性表面活性剂，而且，该制剂的平均粒径在100～300nm。

本发明所提供的抗癌亚微乳制剂，进一步地包含稳定剂、pH调节剂、渗透压调节剂、或抗氧剂，或者它们二种以上的组合。

本发明提供的抗癌亚微乳制剂，每100体积的该制剂由以下重量份数比的原辅料组分配制而成：

抗癌药物 0.1～50优选1～30

油性成分 5～50优选10～30

乳化剂 0.1～3优选0.8～2

稳定剂 0～1优选0.03～0.6

亲水性修饰活性剂 0.01～15优选0.03～6

pH调节剂，将该制剂pH调至4～9优选6～8.5

渗透压调节剂 0～25

抗氧剂 0～2优选0.1～1

金属螯合剂 0～1优选0.01～0.3

注射用水余量，加至100体积，

而且，该制剂的平均粒径在100～300nm。

优选地，本发明提供的抗癌亚微乳制剂，每100体积的该制剂由以下重量份数比的原辅料组分配制而成：

抗癌药物 1～30

油性成分 10～30

乳化剂 0.8～2

稳定剂 0.03～0.6

亲水性修饰活性剂 0.03～6

pH调节剂，将该制剂pH调至6～8.5

渗透压调节剂 0～25

抗氧剂 0.1～1

金属螯合剂 0.01～0.3

注射用水余量，加至100体积，

而且，该制剂的平均粒径在100～300nm。

在本发明的所提供的抗癌亚微乳制剂中，所述抗癌药物选自紫杉醇、多稀紫杉醇、长春瑞滨、喜树碱、羟基喜树碱、丝裂霉素C(MMC)、氟尿嘧啶(5-Fu)、氨甲喋呤(MTX)、环磷酰胺(CTX)、多柔比星(ADR)、博来霉素(BLM)、阿柔比星、顺铂；优选地，所述抗癌药物为紫杉醇、多烯紫杉醇、长春瑞滨。

在本发明的所提供的抗癌亚微乳制剂中，所述油性成分选自长链甘油三酯、中链甘油三酯、结构甘油三酯(一个甘油分子的三个碳链上结合不同链长的脂肪酸)；长链甘油三酯如大豆油、橄榄油、鱼油、维生素E、葵花油、花生油、芝麻油等；中链甘油三酯来源主要是椰子油和棕榈仁油；油性成分也可选自中药挥发油(如鸦胆子油、莪术油、柴胡挥发油、荆棘油、大蒜挥发油、灵芝孢子油、薏苡仁油、榄香烯油、姜黄油、亚麻子油、月见草油、沙棘油、香叶油、青蒿油、香茅油、菌陈油、鱼腥草油、红花油、砂仁油、酸枣仁油、橙皮油、苍术油、蛇床子油、郁金油、桉叶油、肉桂油、芥茉油、香附油、艾叶油、芥穗油、当归油、沉香油、葡萄籽油、肉豆蔻油、红景天叶油或冷杉油)中的一种或几种；优选地，油性成分为大豆油、中链甘油三酸脂、结构甘油三酯、橄榄油、鱼油中的一种或几种的组合。

在本发明的所提供的抗癌亚微乳制剂中，所述乳化剂选自天然蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、天然大豆磷脂、氢化大豆磷脂、或合成磷脂。

在本发明的所提供的抗癌亚微乳制剂中，所述亲水性修饰活性剂选自聚乙二醇磷脂衍生物，为聚乙二醇分子通过共价键与磷脂分子上的活性基团结合而形成。这里，所述聚乙二醇磷脂衍生物的磷脂部分的脂肪酸包含10～24个碳原子，脂肪酸链是饱和的或部分饱和的，优选地，脂肪酸链为月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸或油酸或亚油酸；所述聚乙二醇磷脂衍生物中的磷脂为磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、磷脂酸肌醇、磷脂酰丝氨酸、二磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、二油酰磷脂酰乙醇胺；所述聚乙二醇磷脂衍生物中聚乙二醇分子量范围为200～20000，优选地，1000～5000，更有选的聚乙二醇分子量为2000～3000。聚乙二醇磷脂衍生物优选为聚乙二醇2000二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG2000-DSPE)或聚乙二醇2000磷脂酰乙醇胺(PEG2000-PE)。

在本发明的所提供的抗癌亚微乳制剂中，所述pH调节剂选自氢氧化钠、碳酸钠、柠檬酸、盐酸或碳酸氢钠，优选地，pH调节剂为氢氧化钠、盐酸。

在本发明的所提供的抗癌亚微乳制剂中，所述稳定剂选自油酸、油酸钠盐、油酸钾盐；所述渗透压调节剂为甘油、山梨醇、木糖醇、葡萄糖或氯化钠中的一种或几种，调节到与人体液等渗，优选地，渗透压调节剂为甘油；所述抗氧剂选自dl-α-生育酚、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠，优选地，抗氧剂为dl-α-生育酚或焦亚硫酸钠。

在本发明的所提供的抗癌亚微乳制剂中，所述金属螯合剂能减缓细菌生长。对于革兰氏阴性菌或阳性菌，二价阳离子对细胞壁的稳定性及其复制是必要的。它能够通过影响细胞壁的稳定性而抑制其繁殖，因此，加入金属螯合剂EDTA或EDTA-2Na能提高临床使用乳剂的安全性。

在本发明提供的一种优选实施方案中，本发明提供了一种抗癌亚微乳制剂，每100体积的该制剂由以下重量份数比的原辅料组分配制：

抗癌药物 0.1～50优选1～30

油性成分 5～50优选10～30

乳化剂 0.1～3优选0.8～2

稳定剂 0～1优选0.03～0.6

亲水性修饰活性剂 0.01～15优选0.03～6

pH调节剂，pH调至4～9优选6～8.5

渗透压调节剂 0～25

抗氧剂 0～2优选0.1～1

金属螯合剂 0～1优选0.01～0.3

注射用水余量，加至100体积，

而且，该制剂的平均粒径在100～300nm；

这里，所述抗癌药物选自紫杉醇、多烯紫杉醇、长春瑞滨；

所述油性成分选自大豆油、中链甘油三酸脂、橄榄油、鱼油中的一种或几种的组合；

所述乳化剂选自天然蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、天然大豆磷脂、氢化大豆磷脂、或合成磷脂；

所述亲水性修饰活性剂选自聚乙二醇磷脂衍生物，为聚乙二醇分子通过共价键与磷脂分子上的活性基团结合而形成，这里，所述聚乙二醇磷脂衍生物的磷脂部分的脂肪酸包含10～24个碳原子，脂肪酸链是饱和的或部分饱和的，优选地，脂肪酸链为月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸或油酸或亚油酸；聚乙二醇磷脂衍生物中的磷脂为磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、磷脂酸肌醇、磷脂酰丝氨酸、二磷脂酰甘油、缩酸磷脂、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、二油酰磷脂酰乙醇胺；所述聚乙二醇磷脂衍生物中聚乙二醇分子量范围为200～20000，优选地，1000～5000，更优选的聚乙二醇分子量为2000～3000；特别优选地，聚乙二醇磷脂衍生物优选为聚乙二醇2000二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG2000-DSPE)或聚乙二醇2000磷脂酰乙醇胺(PEG2000-PE)；

所述pH调节剂选自氢氧化钠、碳酸钠、柠檬酸、盐酸或碳酸氢钠，优选地，pH调节剂为氢氧化钠、或盐酸；

所述稳定剂选自油酸、油酸钠盐、油酸钾盐；

所述渗透压调节剂为甘油、山梨醇、木糖醇、葡萄糖或氯化钠中的一种或几种，调节到与人体液等渗，优选地，渗透压调节剂为甘油；

所述抗氧剂选自dl-α-生育酚、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠，优选地，抗氧剂为dl-α-生育酚、焦亚硫酸钠；

所述金属螯合剂选自EDTA或EDTA-2Na；

所述金属螯合剂能减缓细菌生长。对于革兰氏阴性菌或阳性菌，二价阳离子对细胞壁的稳定性及其复制是必要的。它能够通过影响细胞壁的稳定性而抑制其繁殖，因此，加入金属螯合剂EDTA-2Na能提高临床使用乳剂的安全性。

另一方面，本发明还提供了上述制剂的制备方法，包括以下步骤：

a.制备油相：将油性成分、活性成分加入到油相配制罐中，调节温度，搅拌或剪切至溶解，得油相；

b.制备水相：将水溶性成分加入水相配制罐中，搅拌至溶解得水相；

c.制备初乳：油相与水相混合，搅拌、超声或剪切，调节pH，定容，得初乳；

d.制备精乳：用高压均质机或微射流设备进行均质，至达到合适的粒度要求，必要时再经微孔滤膜过滤；

e.除菌，根据所属剂型要求、药物及制剂性质要求，可选择无菌生产或湿热灭菌；

在本发明提供的上述制备方法中，上述制备油相、水相、初乳时的温度为30～80℃，制备过程需氮气保护。

在本发明提供的上述制备方法中，乳化剂可以在油相中加入，也可以在水相中加入。

本发明提供了上述该制剂的用途，该制剂可供静脉或腔内给药。

本发明提供的制剂中紫杉醇和多西紫杉醇可广泛用于世界最为常见的三种肿瘤即乳腺癌、非小细胞肺癌和前列腺癌的多种适应症，可单独或并用用于卵巢癌的一线和二线治疗，早期乳腺癌的辅助治疗，转移性乳腺癌的二线治疗，Her2过度表达转移性乳腺癌的一线治疗，恶性淋巴瘤的治疗，非小细胞肺癌的一线治疗，激素非依赖性前列腺癌的治疗，对小细胞肺癌、胃癌、软组织肉瘤、食管癌、膀胱癌、头颈部肿瘤、子宫颈癌、转移性胰腺癌、睾丸胚细胞癌亦有效，临床使用本发明中的紫杉醇亚微乳制剂静脉滴注，单药或联合用药推荐剂量一次100～300mg/m²。临床使用本发明中的多西紫杉醇亚微乳制剂静脉滴注，推荐每三周50～100mg/m²滴注0.5～2h。

本发明制剂中的长春瑞滨用于乳腺癌、睾丸癌、卵巢上皮细胞癌、非小细胞性肺癌的治疗。临床使用本发明中的长春瑞滨亚微乳制剂，推荐静脉输入一次5～50mg/m²。

本发明制剂中的的喜树碱和羟基喜树碱用于原发性肝癌，胃癌，头颈部癌，膀胱癌及直肠癌。临床使用本发明中的喜树碱类亚微乳制剂，推荐静脉注射5～50mg/次，膀胱注射5～15mg/次，胸腹腔注射5～30mg/次。

本发明制剂中的丝裂霉素适用于胃癌、肺癌、乳腺癌，也适用于肝癌、结直肠癌、食管癌、卵巢癌及癌性腔内积液。临床使用本发明中的丝裂霉素亚微乳制剂，推荐静脉和动脉注射5～30mg/次，腔内注射5～15mg/次。

本发明制剂中的氟尿嘧啶(5-Fu)抗瘤谱较广，主要用于治疗消化道类肿瘤，或较大剂量氟尿嘧啶治疗绒毛膜上皮癌，亦常用于治疗乳腺癌、卵巢癌、肺癌、宫颈癌、膀胱癌、及皮肤癌等。临床使用本发明中的氟尿嘧啶亚微乳制剂，推荐静脉注射一日5～30mg/kg，静脉滴注一日200～600mg/m²，腹腔内注射一次400～700mg/m²。

本发明制剂中的氨甲喋呤(MTX)用于各型急性白血病，尤其是急性淋巴细胞性白血病，恶性淋巴瘤，非何杰金淋巴瘤和蕈肉芽肿瘤，多发性骨髓病；对恶性葡萄胎，绒毛膜上皮癌，乳腺癌，卵巢癌，宫颈癌，睾丸癌，头颈部癌，支气管肺癌、各种软组织肉瘤也有较好的疗效；高剂量用于骨肉病；鞘内注射可用于预防和治疗脑膜白血病以及恶性淋巴瘤的神经侵犯，对银屑病也有一定疗效。本发明中的氨甲喋呤亚微乳制剂临床可供静脉、肌内、动脉、鞘内注射。用于急性白血病，推荐肌肉或静脉注射，每次5～50mg；儿童每日10～40mg/m²；用于绒毛膜上皮癌或恶性葡萄胎，推荐每日5～30mg，总量40mg～150mg；用于脑膜白血病，推荐鞘内注射每次3～10mg/m²，成人2～15mg，最大不＞15mg；用于预防脑膜白血病时，推荐每日5～30mg；用于实体瘤，推荐静脉10～30mg/m²/次。

本发明制剂中的环磷酰胺(CTX)对恶性淋巴瘤、急性或慢性淋巴细胞白血病、多发性骨髓瘤有较好的疗效，对乳腺癌、睾丸肿瘤、卵巢癌、肺癌、头颈部鳞癌、鼻咽癌、神经母细胞瘤、横纹肌肉瘤及骨肉瘤均有一定的疗效。本发明中的环磷酰胺亚微乳制剂，推荐使用剂量静注50～250mg/次。

本发明制剂中的多柔比星(ADR)能成功地诱导多种恶性肿瘤的缓解，包括急性白血病、淋巴瘤、软组织和骨肉瘤、儿童恶性肿瘤及成人实体瘤，尤其用于乳腺癌和肺癌。本发明中的多柔比星亚微乳制剂，推荐使用剂量静注30～100mg/m²。

本发明制剂中的多柔比星亚微乳制剂，主要用于急性白血病、恶性淋巴瘤，推荐剂量使用10～50mg/日，也可适用于其他实体瘤，推荐使用剂量静注20～50mg/次。

本发明制剂中的顺铂对膀胱癌、卵巢癌、睾丸癌有较好的疗效，对乳腺癌、宫颈癌、子宫内膜癌、肾上腺皮质癌、胃癌、肺癌、前列腺癌、头颈部鳞癌、以及儿童的神经母细胞瘤、骨肉瘤、卵巢生殖细胞瘤、黑色素瘤均有一定的疗效。临床上使用本发明中的顺铂亚微乳制剂，推荐静脉注射，单次剂量静注10mg/m²～150mg/m²。)

选择平均粒径在100～300nm的本发明所述制剂克服了现有技术中抗癌药物的微乳制剂存在的下列问题：一些平均粒径过小，小于100nm时，淋巴结滤过截留差，靶向效果不理想；另一些平均粒径过大，大于300nm甚至微米时，被巨噬细胞捕获的机会增加，肝、脾聚集增加，与此同时，腹腔注射大粒径乳剂造成腹膜粘连的风险也增加。此外，本发明提供的抗癌亚微乳制剂粒子表面有聚乙二醇磷脂衍生物修饰，稳定性好，且进一步延长了亚微乳在体循环中的保留时间，增强了药物的被动靶向功能，因而增强了药物的临床疗效，减少了副作用。

附图说明

图1为本发明实施例1长春瑞滨亚微乳制剂粒径分布图

图2为本发明实施例3多烯紫杉醇亚微乳制剂粒径分布图

图3为本发明实施例1和3加速6个月的粒径变化

图4市售多烯紫杉醇注射液腹腔注射6～12h后各脏器平均药物浓度

图5普通多烯紫杉醇亚微乳注射液腹腔注射6～12h后各脏器平均药物浓度

图6本发明实施例3多烯紫杉醇亚微乳制剂腹腔注射10～12h后各脏器平均药物浓度

图7表示小鼠尾iv 5mg/kg 1～48h的网状内皮系统吞噬变化情况

图8表示鼠尾iv 5mg/kg 1～48h的血液清除率变化情况

具体实施方式

下面通过具体的实例来说明本发明的技术方案，所述的实施例仅用于对本发明中所述制剂的制备进行描述和说明，但并不限于以下示例。

实施例1长春瑞滨亚微乳制剂(中长链)

处方：

长春瑞滨 6.00g

大豆油 100.0g

中链油 100.0g

蛋黄卵磷脂 12.0g

油酸 3.0g

_PEG2000-DSPE 5.0g

甘油 22g

注射用水至 1000ml

取大豆油、中链油各100.0g，加入12.0g蛋黄卵磷脂、5.0gPEG2000-DSPE、油酸3.0g在氮气保护下加热至75℃，搅拌至完全溶解。再加入长春瑞滨6.00g，搅拌至溶解。取甘油22g溶于700ml注射用水中，加热至与油相同温。氮气保护条件下，边剪切边将溶有药物的油相加入水相中，制成初乳，定容至1000ml，调节pH值至8.0～9.0。高压均质机在700bar压力下均质6遍，得到平均粒径为257nm。过滤，充氮灌封。115℃30min旋转灭菌，灯检合格后，包装，2～25℃贮存。

实施例2紫杉醇亚微乳制剂(长链)

处方：

紫杉醇 5.00g

大豆油 100.0g

蛋黄卵磷脂 10.0g

PEG2000-DSPE 4.0g

甘油 22g

注射用水至 1000ml

取大豆油100.0g，加入蛋黄卵磷脂10.0g、PEG2000-DSPE 4.0g，在氮气保护下加热至65℃，搅拌至完全溶解。再加入紫杉醇5.00g，搅拌至溶解。取甘油22g溶于700ml注射用水中，加热至与油相同温。氮气保护条件下，边剪切边将溶有药物的油相加入水相中，制成初乳，定容至1000ml，调节pH值至8.0～9.0。高压均质机在500bar压力下均质7遍，得到平均粒径为190nm。过滤，充氮灌封。121℃15min旋转灭菌，灯检合格后，包装，2～25℃贮存。

实施例3多烯紫杉醇亚微乳制剂(长链)

处方：

多烯紫杉醇 20.00g

大豆油 200.0g

蛋黄卵磷脂 10.0g

PEG2000-DSPE 3.0g

甘油 22g

注射用水至 1000ml

取大豆油200.0g，加入10.0g蛋黄卵磷脂、3.0g PEG2000-DSPE在氮气保护下加热至70℃，搅拌至完全溶解。再加入多烯紫杉醇20.00g，搅拌至溶解。取甘油22g溶于700ml注射用水中，加热至与油相同温。氮气保护条件下，边剪切边将溶有药物的油相加入水相中，制成初乳，定容至1000ml，调节pH值至8.0～9.0。高压均质机在600bar压力下均质6遍，得到平均粒径为266nm。过滤，充氮灌封。115℃30min旋转灭菌，灯检合格后，包装，2～25℃贮存。

实施例4多烯紫杉醇亚微乳制剂(中长链)

多烯紫杉醇 25.00g

大豆油 100.0g

中链油 100.0g

蛋黄卵磷脂 12.0g

油酸钠 0.5g

PEG2000-DSPE 5.0g

甘油 22g

EDTA-2Na 0.05g

注射用水至 1000ml

取大豆油、中链油各100.0g，加入12.0g蛋黄卵磷脂、5.0gPEG2000-DSPE在氮气保护下加热至75℃，搅拌至完全溶解。再加入多烯紫杉醇25.00g，搅拌至溶解。取甘油22g、油酸钠0.5g、EDTA-2Na 0.05g溶于700ml注射用水中，加热至与油相同温。氮气保护条件下，边剪切边将溶有药物的油相加入水相中，制成初乳，定容至1000ml，调节pH值至8.0～9.0。高压均质机在600bar压力下均质6遍，得到平均粒径为216nm。过滤，充氮灌封。115℃30min旋转灭菌，灯检合格后，包装，2～25℃贮存。实施例5长春瑞滨亚微乳制剂(长链)

处方：

长春瑞滨 5.00g

大豆油 100.0g

蛋黄卵磷脂 10.0g

油酸 2.0g

_PEG2000-PE 8.0g

甘油 22g

注射用水至 1000ml

取大豆油100.0g，加入蛋黄卵磷脂10.0g、PEG2000-PE 8.0g、油酸2.0g，在氮气保护下加热至75℃，搅拌至完全溶解。再加入长春瑞滨5.00g，搅拌至溶解。取甘油22g溶于700ml注射用水中，加热至与油相同温。氮气保护条件下，边剪切边将溶有药物的油相加入水相中，制成初乳，定容至1000ml，调节pH值至8.0～9.0。高压均质机在600bar压力下均质6遍，得到平均粒径为232nm。过滤，充氮灌封。121℃15min旋转灭菌，灯检合格后，包装，2～25℃贮存。

实施例6紫杉醇亚微乳制剂(中长链)

处方：

紫杉醇 2.00g

大豆油 50.0g

中链油 50.0g

蛋黄卵磷脂 12.0g

PEG2000-PE 5.0g

甘油 22g

dl-α-生育酚 0.1g

注射用水至 1000ml

取大豆油、中链油各50.0g，加入蛋黄卵磷脂12.0g、PEG2000-PE 5.0g、dl-α-生育酚0.1g，在氮气保护下加热至70℃，搅拌至完全溶解。再加入紫杉醇2.00g，搅拌至溶解。取甘油22g溶于700ml注射用水中，加热至与油相同温。氮气保护条件下，边剪切边将溶有药物的油相加入水相中，制成初乳，定容至1000ml，调节pH值至8.0～9.0。高压均质机在600bar压力下均质5遍，得到平均粒径为203nm。过滤，充氮灌封。121℃15min旋转灭菌，灯检合格后，包装，2～25℃贮存。

实施例7多烯紫杉醇亚微乳制剂(长链)

处方：

多烯紫杉醇 20.00g

大豆油 150.0g

蛋黄卵磷脂 10.0g

PEG2000-PE 4.0g

甘油 22g

注射用水至 1000ml

取大豆油150.0g，加入蛋黄卵磷脂10.0g、PEG2000-PE 4.0g，在氮气保护下加热至75℃，搅拌至完全溶解。再加入多烯紫杉醇20.00g，搅拌至溶解。取甘油22g溶于700ml注射用水中，加热至与油相同温。氮气保护条件下，边剪切边将溶有药物的油相加入水相中，制成初乳，定容至1000ml，调节pH值至8.0～9.0。高压均质机在700bar压力下均质5遍，得到平均粒径为221nm。过滤，充氮灌封。121℃15min旋转灭菌，灯检合格后，包装，2～25℃贮存。

实施例8羟基喜树碱亚微乳制剂(长链)

处方：

羟基喜树碱 5.00g

大豆油 50.0g

中链油 50.0g

蛋黄卵磷脂 12.0g

油酸 3.0g

_PEG2000-DSPE 4.0g

甘油 22g

注射用水至 1000ml

取大豆油、中链油各50.0g，加入蛋黄卵磷脂12.0g、PEG2000-DSPE4.0g、油酸3.0g，在氮气保护下加热至75℃，搅拌至完全溶解。再加入羟基喜树碱5.00g，搅拌至溶解。取甘油22g溶于700ml注射用水中，加热至与油相同温。氮气保护条件下，边剪切边将溶有药物的油相加入水相中，制成初乳，定容至1000ml，调节pH值至8.0～9.0。高压均质机在500bar压力下均质6遍，得到平均粒径为286nm。过滤，充氮灌封。115℃30min旋转灭菌，灯检合格后，包装，2～25℃贮存。

实施例9多柔比星亚微乳制剂(长链)

处方：

多柔比星 1.00g

大豆油 200.0g

蛋黄卵磷脂 10.0g

PEG2000-DSPE 3.0g

甘油 22g

注射用水至 1000ml

取大豆油200.0g，加入10.0g蛋黄卵磷脂、3.0g PEG2000-DSPE在氮气保护下加热至70℃，搅拌至完全溶解。再加入多柔比星1.00g，搅拌至溶解。取甘油22g溶于700ml注射用水中，加热至与油相同温。氮气保护条件下，边剪切边将溶有药物的油相加入水相中，制成初乳，定容至1000ml，调节pH值至8.0～9.0。高压均质机在700bar压力下均质6遍，得到平均粒径为211nm。过滤，充氮灌封。121℃15min旋转灭菌，灯检合格后，包装，2～25℃贮存。

实施例10初步稳定性评价

1.取制得的乳液1ml置离心管中，3000rpm/min离心10min，无分层现象。

2.实施例1、3处方于30±2℃放置，分别于0、1、2、3、6个月取样用粒径分析仪测其平均粒径，无显著变化。粒径变化如图3。

实施例11本发明以实施例3的多烯紫杉醇亚微乳制剂(长链)为例。

SD大鼠30只，雌雄各半，随机分3组，分别为市售多烯紫杉醇注射液组、多烯紫杉醇普通亚微乳注射液组(按实施例3处方不加聚乙二醇磷脂酰乙醇胺，同法制备，粒径400～500nm)和本发明制剂组。均给予5mg/kg剂量腹腔给药，6-12h后处死。分别取淋巴结(髂淋巴结和颈淋巴结)、心、肝、脾、肺、肾等组织，洗净、吸干、精确称重，组织匀浆，处理后HPLC检测药物含量。结果见图4、图5和图6。

结果显示，与同等剂量的多烯紫杉醇注射液、多烯紫杉醇普通亚微乳注射液组相比，本发明制剂在淋巴结和脾脏中的药物浓度明显较高，而肝脏中的药物浓度低，表明亲水性表面修饰后的多烯紫杉醇亚微乳有效地避开了肝脏巨噬细胞的吞噬，而更多的趋向于淋巴结和淋巴器官。另外，本发明制剂组的其他组织中药物含量也不同程度地低于其他两组，降低了药物对这些器官的毒副作用。

实施例12本发明以实施例3的多西紫杉醇亚微乳制剂(长链)为例。

昆明小鼠，雌雄各半。市售多烯紫杉醇注射液、普通多烯紫杉醇亚微乳注射液(按实施例3处方不加聚乙二醇磷脂酰乙醇胺，同法制备，粒径400～500nm)和本发明制剂，每种制剂分别分为肝、脾和血浆3组，每组12只。均给予5mg/kg剂量尾静脉注射，1，3，6，12，24，48h取血，并分别摘取肝、脾，清除脏器周围结缔组织后洗净、吸干、精确称重，组织匀浆，处理后HPLC检测药物含量。

将多烯紫杉醇注射液、多烯紫杉醇普通亚微乳和本发明制剂尾iv 48h，小鼠肝脾和血液的药时曲线下面积及血液-网状内皮系统比值(Blood/RES)见表1。

表1三种制剂在小鼠体内的组织分布(5mg·kg^-1，AUC_0～48，n＝12，

)

RES：网状内皮系统

血液药时曲线下面积(AUC)数值表明，本发明制剂约为多烯紫杉醇普通亚微乳的1.97倍，Blood/RES比值前者为后者的3.30倍。

两种载药乳剂的网状内皮系统吞噬和血液清除率见图7、图8。

iv本发明制剂24h后，其中的30％以上剂量驻留在血液中，富含网状内皮细胞的肝脾组织只摄取不到10％；而普通亚微乳在血液中驻留不足10％，肝脾组织摄取了50％以上。

Claims

1.一种抗癌药物的亚微乳制剂，包含抗癌药物、油性成分、乳化剂、和亲水修饰性表面活性剂，而且，该制剂的平均粒径在100～300nm。

2.如权利要求1所述的亚微乳制剂，还包括稳定剂、pH调节剂、渗透压调节剂、或抗氧剂，或者它们二种以上的组合。

3.如权利要求2所述的亚微乳制剂，每100体积的该制剂由以下重量份数比的原辅料组分配制而成：

抗癌药物 0.1～50

油性成分 5～50

乳化剂 0.1～3

稳定剂 0～1

亲水性修饰活性剂 0.01～15

pH调节剂，将该制剂pH调至4～9

渗透压调节剂 0～25

抗氧剂 0～2

金属螯合剂 0～1

注射用水余量，加至100体积。

4.如权利要求3所述亚微乳制剂，其中，所述抗癌药物选自紫杉醇、多稀紫杉醇、长春瑞滨、喜树碱、羟基喜树碱、丝裂霉素C、氟尿嘧啶、氨甲喋呤、环磷酰胺、多柔比星、博来霉素、阿柔比星、顺铂，优选地为紫杉醇、多烯紫杉醇、或长春瑞滨。

5.如权利要求3所述的亚微乳制剂，其中，所述油性成分选自长链甘油三酯、中链甘油三酯和结构甘油三酯中的一种或几种。

6.如权利要求3所述的亚微乳制剂，其中，所述乳化剂选自天然蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、天然大豆磷脂、氢化大豆磷脂、以及合成磷脂中的一种或几种的混合物。

7.如权利要求3所述的亚微乳制剂，其中，所述亲水性修饰活性剂选自聚乙二醇磷脂衍生物，为聚乙二醇分子通过共价键与磷脂分子上的活性基团结合而形成。

8.如权利要求7所述的亚微乳制剂，其中所述聚乙二醇磷脂衍生物中磷脂部分的脂肪酸包含10～24个碳原子，脂肪酸链是饱和的或部分饱和的，优选地，脂肪酸链为月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸或油酸或亚油酸；

所述的聚乙二醇磷脂衍生物中磷脂为磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、磷脂酸肌醇、磷脂酰丝氨酸、二磷脂酰甘油、缩酸磷脂、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、二油酰磷脂酰乙醇胺；

所述的聚乙二醇磷脂衍生物中聚乙二醇分子量范围为200～20000。

9.如权利要求8所述的亚微乳制剂，其中，所述聚乙二醇磷脂衍生物为聚乙二醇2000二硬脂酰磷脂酰乙醇胺或聚乙二醇2000磷脂酰乙醇胺。

10.如权利要求3所述的亚微乳制剂，其中，所述稳定剂选自油酸、油酸钠盐、油酸钾盐；

所述渗透压调节剂为甘油、山梨醇、木糖醇、葡萄糖或氯化钠中的一种或几种，调节到与人体液等渗，优选为甘油；

pH调节剂选自氢氧化钠、碳酸钠、柠檬酸、盐酸或碳酸氢钠，优选为氢氧化钠、盐酸；所述抗氧剂选自dl-α-生育酚、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠，优选地，抗氧剂为dl-α-生育酚、焦亚硫酸钠；

所述金属螯合剂选自EDTA或EDTA-2Na。

11.如权利要求1至10中任一权利要求所述亚微乳制剂的制备方法，包括以下步骤：

e.除菌，根据所属剂型要求、药物及制剂性质要求，选择无菌生产或湿热灭菌；

上述制备油相、水相、初乳时的温度为30～80℃，制备过程需氮气保护。