CN102015723B

CN102015723B - 蛋白酪氨酸激酶活性的抑制剂

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Publication number: CN102015723B
Application number: CN200980107358.1A
Authority: CN
Inventors: 迈克尔·曼尼恩; 斯蒂芬·雷佩尔; 斯蒂芬·W·克拉里奇; 弗雷德里克·高德特; 战莉洁; 利朱博米尔·伊萨科维克; 奥斯卡·M·萨维德拉; 宇野哲之; 岸田雅司; 阿卡迪·韦斯伯格
Original assignee: Methylgene Inc
Current assignee: Methylgene Inc
Priority date: 2008-03-05
Filing date: 2009-02-27
Publication date: 2014-07-30
Anticipated expiration: 2029-02-27
Also published as: RU2010145459A; US20140179632A1; IL208882A0; UA101362C2; MX2010009729A; US20110077240A1; SG182146A1; WO2009109035A1; NZ588355A; RU2498988C2; ZA201005868B; TW201113288A; EP2332536A1; US8729268B2; CN102161663A; US20110098293A1; RU2533827C2; BRPI0908573A2; EP2262815A4; NZ589336A

Abstract

本发明涉及抑制蛋白酪氨酸激酶活性的化合物。尤其是，本发明涉及抑制生长因子受体的蛋白酪氨酸激酶活性的化合物，导致受体信号传导的抑制，例如，VEGF受体信号的抑制。本发明还提供了治疗细胞增殖疾病和病症以及眼科疾病、障碍和病症的化合物、组合物和方法。

Description

蛋白酪氨酸激酶活性的抑制剂

发明背景

相关技术的概述

可以将酪氨酸激酶归类为生长因子受体(例如EGFR，PDGFR，FGFR和erbB2)或非受体(例如c-src和bcr-abl)激酶。受体类型酪氨酸激酶构成大约20个不同的亚家族。非受体类型酪氨酸激酶构成很多亚家族。这些酪氨酸激酶具有不同的生物活性。受体酪氨酸激酶是大的跨细胞膜的酶，并且具有对于生长因子的胞外结合区域、跨膜结构域和胞内部分，该胞内部分具有使蛋白中特异性酪氨酸残基磷酸化的激酶的作用，并由此影响细胞增殖。异常或不合适的蛋白激酶活性可以促进与这种异常激酶活性有关的疾病状态的产生。

血管生成是某些正常生理学过程(例如胚胎形成和创伤愈合)的重要组成部分，但异常的血管生成会有助于一些病理性的病症，尤其是肿瘤生长。VEGF-A(血管内皮生长因子A)是促进肿瘤的新生血管形成(血管生成)的主要因素。VEGF通过两种高度亲合性受体(fms类酪氨酸激酶受体Flt-1和包含激酶嵌入区域的受体KDR)传导信号而引起内皮细胞增殖和迁移。这些信号响应决定性地依赖于内部受体酪氨酸激酶(RTK)活性的二聚作用和激活作用。以二硫化物连接的同源二聚体形式结合的VEGF刺激RTK区域的受体二聚作用和激活作用。激酶活性使胞浆受体酪氨酸残基自动磷酸化，然后其充当参与信号级联反应传播的分子的结合位点。对于两种受体而言，虽然可能解释许多途径，但最广泛研究的是KDR信号，同时促有丝分裂反应表明与ERK-1和ERK-2促分裂原活化蛋白激酶有关。

VEGF受体信号的中断在癌症中是具有高度吸引力的治疗靶点，这是因为血管生成是所有实体瘤生长的前提，而且成熟内皮保持相对的静态(除雌性生殖体系和创伤愈合之外)。人们已经检验了许多抑制VEGF信号的实验方法，包括使用中和抗体、受体拮抗剂、可溶性受体、反义结构和显性负性的策略。

虽然利用单独VEGF抑制来抗血管生成的治疗是有吸引力的，但一些问题可能限制了这种方法。VEGF表达水平本身可以通过很多不同的刺激而升高，或许最重要的是，由于VEGFr抑制而引起的肿瘤的低氧状态，可以诱导本身促进肿瘤侵入和转移的因素，由此潜在地破坏VEGF抑制剂作为癌症治疗的效果。

HGF(肝细胞生长因子)和HGF受体c-met与肿瘤细胞破坏VEGF抑制的活性的能力有关。衍生自肿瘤细胞周围的基质纤维母细胞或由肿瘤本身表达的HGF在肿瘤的血管生成、侵入和转移过程中起到关键性作用。例如，某些癌细胞的侵略性生长通过肿瘤-基质的相互作用(与HGF/c-Met(HGF受体)途径有关)而得到急速提高。HGF(最初将其确定为肝细胞的有效分裂素)主要由基质细胞分泌，并且分泌的HGF可以促进以副分泌方式表达c-Met的各种癌细胞的活动性和侵入性。HGF与c-Met的结合导致受体磷酸化和Ras/促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号途径的激活作用，由此增加癌细胞的恶性行为。此外，HGF/c-met途径本身的刺激可以诱导VEGF表达，本身直接有助于血管生成的活性。

由此，靶向VEGF/VEGFr信号传导或HGF/c-met信号传导的抗肿瘤抗血管生成策略或方法可以代表改进的癌症治疗。

酪氨酸激酶还促进眼科疾病、障碍和病症(例如年龄相关的黄斑变性(AMD)和糖尿病性视网膜病(DR))的病理。这种疾病所造成的失明与视网膜新生血管形成的异常有关系。新血管的形成是由生长因子例如VEGF和HGF调节的，所述生长因子例如VEGF和HGF活化受体酪氨酸激酶，引起信号传导途径的起始，导致血浆渗漏成为斑点，引起视力丧失。由此，激酶是治疗与新生血管形成有关的眼病的有吸引力的靶点。

由此，还需要开发控制眼睛的新生血管生成的策略，和开发治疗眼睛疾病的策略。

在这里，我们描述了作为蛋白酪氨酸激酶活性的有效抑制剂的小分子。

发明概述

本发明提供了治疗对抑制激酶活性有响应的疾病的新化合物和方法，所述疾病例如对抑制蛋白酪氨酸激酶活性有响应的疾病，例如对抑制生长因子受体的蛋白酪氨酸激酶活性有响应的疾病，例如对抑制受体类型酪氨酸激酶信号传导有响应的疾病，或例如对抑制VEGF受体信号传导有响应的疾病。在一个实施方案中，疾病是细胞增殖疾病。在另一个实施方案中，疾病是眼科疾病。本发明的化合物是激酶活性的抑制剂，所述激酶活性例如蛋白酪氨酸激酶活性，例如生长因子受体的蛋白酪氨酸激酶活性，或例如受体类型酪氨酸激酶信号传导。

在第一个方面，本发明提供了用作激酶抑制剂的式(I)化合物：

及其N-氧化物、水合物、溶剂合物、可药用盐、前药和复合物，和外消旋与非外消旋(scalemic)混合物，其非对映异构体和对映异构体，其中D、M、Z、Ar和G如本文所定义。因为本发明的化合物用作激酶抑制剂，因此，它们是研究正常和疾病状态下激酶作用的有效研究工具。在一些实施方案中，本发明提供了用作VEGF受体信号传导抑制剂的化合物，并因此作为研究正常和疾病状态下的VEGF作用的研究工具。

关于“式(I)化合物”(或相当于“按照第一个方面的化合物”，或者“本发明的化合物”，等等)，应理解为包括其N-氧化物、水合物、溶剂合物、可药用盐、前药和复合物，和外消旋与非外消旋混合物，其非对映异构体、对映异构体和互变异构体，除非另有陈述。

在第二个方面，本发明提供了组合物，其包含按照本发明的化合物和可药用载体、赋形剂或稀释剂。例如，本发明提供了组合物，其包含作为VEGF受体信号传导的抑制剂的化合物、或其可药用盐和可药用载体、赋形剂或稀释剂。

在第三个方面，本发明提供了抑制激酶活性的方法，所述激酶活性例如蛋白酪氨酸激酶，例如生长因子受体的酪氨酸激酶活性，该方法包括：使激酶与按照本发明的化合物接触，或与按照本发明的组合物接触。在该方面的一些实施方案中，本发明提供了抑制受体类型酪氨酸激酶信号传导(例如，抑制VEGF受体信号传导)的方法。抑制可以在细胞或多细胞有机体中。如果在细胞中，按照本发明该方面的方法包括：使细胞与按照本发明的化合物接触，或与按照本发明的组合物接触。如果在多细胞有机体中，按照本发明该方面的方法包括：向有机体给药按照本发明的化合物，或按照本发明的组合物。在一些实施方案中，所述有机体是哺乳动物，例如，灵长类，例如人。

在第四个方面，本发明提供了抑制血管生成的方法，该方法包括：向有此需要的患者给药治疗有效量的按照本发明的化合物，或治疗有效量的按照本发明的组合物。在该方面的一些实施方案中，待抑制的血管生成涉及肿瘤生长。在一些其它实施方案中，待抑制的血管生成为视网膜血管生成。在该方面的一些实施方案中，所述患者是哺乳动物，例如灵长类，例如人。

在第五个方面，本发明提供了治疗对抑制激酶活性有响应的疾病的方法，所述疾病例如对抑制蛋白酪氨酸激酶活性有响应的疾病，例如对抑制生长因子受体的蛋白酪氨酸激酶活性有响应的疾病。在该方面的一些实施方案中，本发明提供了治疗对抑制受体类型酪氨酸激酶信号传导有响应的疾病(例如，对抑制VEGF受体信号传导有响应的疾病)的方法，该方法包括：向有此需要的有机体给药治疗有效量的按照本发明的化合物，或按照本发明的组合物。在该方面的一些实施方案中，所述有机体是哺乳动物，例如灵长类，例如人。

在第六个方面，本发明提供了治疗细胞增殖疾病的方法，该方法包括：向有此需要的患者给药治疗有效量的按照本发明的化合物，或治疗有效量的按照本发明的组合物。在该方面的一些实施方案中，细胞增殖疾病是癌症。在一些实施方案中，所述患者是哺乳动物，例如灵长类，例如人。

在第七个方面，本发明提供了治疗眼睛疾病、障碍或病症的方法，该方法包括：向有此需要的患者给药治疗有效量的按照本发明的化合物，或治疗有效量的按照本发明的组合物。在该方面的一些实施方案中，所述疾病是由脉络膜的血管生成所引起的疾病。在该方面的一些实施方案中，所述患者是哺乳动物，例如灵长类，例如人。

在第八个方面，本发明提供了按照本发明的化合物用于或在药物制备中的用途，该药物用于抑制激酶活性，例如抑制蛋白酪氨酸激酶活性，例如抑制生长因子受体的蛋白酪氨酸激酶活性。在该方面的一些实施方案中，本发明提供了按照本发明的化合物用于或在药物制备中的用途，该药物用于抑制受体类型酪氨酸激酶信号传导，例如抑制VEGF受体信号传导。在该方面的一些实施方案中，本发明提供了按照本发明的化合物用于或在药物制备中的用途，该药物用于治疗对抑制激酶活性有响应的疾病。在该方面的一些实施方案中，所述疾病对抑制蛋白酪氨酸激酶活性有响应，例如抑制生长因子受体的蛋白酪氨酸激酶活性。在该方面的一些实施方案中，所述疾病对抑制受体类型酪氨酸激酶信号传导(例如VEGF受体信号传导)有响应。在一些实施方案中，所述疾病是细胞增殖疾病，例如癌症。在该方面的一些实施方案中，所述疾病是眼睛疾病、障碍或病症。在该方面的一些实施方案中，所述眼睛疾病、障碍或病症是由脉络膜的血管生成所引起的。在该方面的一些实施方案中，所述疾病是年龄相关的黄斑变性、糖尿病性视网膜病或视网膜网膜水肿。

在第九个方面，本发明提供了按照本发明的化合物或其组合物抑制激酶活性的用途，例如抑制受体类型酪氨酸激酶活性，例如抑制生长因子受体的蛋白酪氨酸激酶活性。在该方面的一些实施方案中，本发明提供了按照本发明的化合物或其组合物抑制受体类型酪氨酸激酶信号传导的用途，例如抑制VEGF受体信号传导。

在第十个方面，本发明提供了按照本发明的化合物或其组合物用于治疗对抑制激酶活性有响应的疾病的用途，例如对抑制蛋白酪氨酸激酶活性有响应的疾病，例如对抑制生长因子受体的蛋白酪氨酸激酶活性有响应的疾病。在该方面的一些实施方案中，本发明提供了按照本发明的化合物或其组合物用于治疗对抑制受体类型酪氨酸激酶信号传导有响应的疾病的用途，例如对抑制VEGF受体信号传导有响应的疾病。在该方面的一些实施方案中，所述疾病是细胞增殖疾病，例如癌症。在该方面的一些实施方案中，所述疾病是眼睛疾病、障碍或病症。在该方面的一些实施方案中，眼睛疾病、障碍或病症是由脉络膜的血管生成所引起的。

上文仅仅总结了本发明的一些方面，本质上并不是用来加以限制。下面将更充分地描述这些方面及其它方面和实施方案。

详细说明

本发明提供了抑制激酶活性的化合物、组合物和方法，所述激酶活性例如蛋白酪氨酸激酶活性，例如受体蛋白激酶活性，例如VEGF受体KDR。本发明还提供了抑制血管生成、治疗对抑制激酶活性有响应的疾病、治疗细胞增殖疾病和病症和治疗眼睛疾病、障碍和病症的化合物、组合物和方法。在本文中涉及的专利和科学文献反映本领域技术人员可以获得的知识。本文引用的授权的专利、公开的专利申请和参考文献以如同每个是具体地和单独地注明的程度在本文中引入作为参考。在不一致的情况下，以本公开为准。

对本发明来说，使用下列定义(除非另外明确地陈述)：

为简单起见，将化学部分进行定义，并且主要指的是一价化学部分(例如，烷基，芳基，等等)。然而，这种术语在本领域技术人员清楚的合适结构情况下还用于表达相应的多价部分。例如，尽管“烷基”部分泛指一价基团(例如CH₃-CH₂-)，但在某些情况下，二价连接部分可以是“烷基”，在这样的情况下，本领域技术人员可以理解，烷基是二价基团(例如，-CH₂-CH₂-)，其相当于术语“亚烷基”。类似地，在需要二价部分并且陈述为“芳基”的情况下，本领域技术人员可以理解，术语“芳基”是指相应的二价部分(亚芳基)。应该理解，所有原子具有其用于键形成的正常的价键数值(即，碳：4，N：3，O：2，S：2、4或6，取决于S的氧化态)。有时，可以将部分定义为例如(A)_a-B-，其中a是0或1。在这种情况下，当a是0时，该部分是B-，当a是1时，组成部分是A-B-。

为简单起见，“C_n-C_m”杂环基或“C_n-C_m”杂芳基是指具有“n”至“m”个环原子的杂环基或杂芳基，其中“n”和“m”是整数。由此，例如，C₅-C₆杂环基是具有至少一个杂原子的5-或6-元环，并且包括吡咯烷基(C₅)和哌嗪基和哌啶基(C₆)；C₆杂芳基包括，例如，吡啶基和嘧啶基。

术语“烃基”是指直链、支链或环状烷基、烯基或炔基，每个如本文所定义。“C₀”烃基是指共价键。由此，“C₀-C₃烃基”包括共价键，甲基，乙基，乙烯基，乙炔基，丙基，丙烯基，丙炔基和环丙基。

术语“烷基”是指直链或支链脂肪族基团，其具有1至12个碳原子，或者1-8个碳原子，或者1-6个碳原子。在一些实施方案中，烷基具有2至12个碳原子，或者2-8个碳原子，或者2-6个碳原子。烷基的实例包括但不限于：甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，异丁基，仲丁基，叔丁基，戊基，己基等等。“C₀”烷基(例如在“C₀-C₃烷基”中)是共价键。

术语“烯基”是指具有一个或多个碳-碳双键的直链或支链脂肪族基团，其具有2至12个碳原子，或者2-8个碳原子，或者2-6个碳原子。烯基的实例包括但不限于：乙烯基，丙烯基，丁烯基，戊烯基和己烯基。

术语“炔基”是指具有一个或多个碳-碳叁键的直链或支链脂肪族基团，其具有2至12个碳原子，或者2-8个碳原子，或者2-6个碳原子。炔基的实例包括但不限于：乙炔基，丙炔基，丁炔基，戊炔基和己炔基。

本文使用的术语“亚烷基”、“亚烯基”或“亚炔基”是指位于两个其它化学基团之间并且连接两个其它化学基团的上文分别定义的烷基、烯基或炔基。亚烷基的实例包括但不限于：亚甲基，亚乙基，亚丙基和亚丁基。亚烯基的实例包括但不限于：亚乙烯基，亚丙烯基和亚丁烯基。亚炔基的实例包括但不限于：亚乙炔基，亚丙炔基和亚丁炔基。

本文使用的术语“碳环”是指环烷基或芳基部分。

术语“环烷基”是指饱和、部分不饱和或不饱和的单、二、三或多环烃基，其具有大约3至15个碳，或者具有3至12个碳，或者3至8个碳，或者3至6个碳，或者5或6个碳。在一些实施方案中，环烷基与芳基、杂芳基或杂环基稠合。环烷基的实例包括但不限于：环戊烯-2-烯酮，环戊烯-2-烯醇，环己-2-烯酮，环己-2-烯醇，环丙基，环丁基，环丁烯基，环戊基，环戊烯基，环己基，环己烯基，环庚基，环辛基，等等。

术语“杂烷基”是指饱和、部分不饱和或不饱和的直链或支链脂肪族基团，其中基团中的一个或多个碳原子独立地被选自O、S和N的杂原子取代。

术语“芳基”是指包含一个至三个芳香环的单、二、三或多环芳香部分。在一些实施方案中，芳基是C₆-C₁₄芳香部分，或者芳基是C₆-C₁₀芳基，或者C₆芳基。芳基的实例包括但不限于：苯基，萘基，蒽基和芴基。

术语“芳烷基”或“芳基烷基”是指包含芳基的基团，其中芳基与烷基共价连接。如果芳烷基被描述为“任选取代的”，则芳基和烷基部分中的一个或两个可以独立地是任选取代的或未取代的。在一些实施方案中，芳烷基是(C₁-C₆)烷基(C₆-C₁₀)芳基，包括但不限于：苄基，苯乙基和萘甲基。为简单起见，在写成“芳烷基”时，该术语和与其相关的术语用来表示化合物中的基团的顺序为“芳基-烷基”。类似地，“烷基-芳基”用来表示化合物中的基团的顺序为“烷基-芳基”。

术语“杂环基”、“杂环的”或“杂环”是指单、二或多环结构的基团，其具有大约3至大约14个原子，或者3至8个原子，或者4至7个原子，或者5或6个原子，其中一个或多个原子(例如，1或2个原子)独立地选自N、O和S，剩下的环构成原子是碳原子。环结构可以是饱和、不饱和或部分不饱和的。在一些实施方案中，杂环基团是非芳香的杂环基团，在这样的情况下，该基团亦称为杂环烷基。在双环或多环结构中，一个或多个环可以是芳香环；例如，双环杂环的一个环或三环杂环的一或两个环可以是芳香环，例如，在茚满和9，10-二氢蒽中。杂环基团的实例包括但不限于：环氧基，氮丙啶基，四氢呋喃基，吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，噻唑烷基，唑烷基，唑烷酮基，吗啉代，噻吩基，吡啶基，1，2，3-三唑基，咪唑基，异唑基，吡唑基，哌嗪子基(piperazino)，哌啶基，哌啶子基，吗啉基，高哌嗪基，高哌嗪子基，硫吗啉基，硫吗啉子基，四氢吡咯基和氮杂环庚烷基。在一些实施方案中，杂环基与芳基、杂芳基或环烷基稠合。这种稠杂环的实例包括但不限于：四氢喹啉和二氢苯并呋喃。被该术语范围具体排除的是其中环的O或S原子与另一个O或S原子相邻的化合物。

在一些实施方案中，杂环基团是杂芳基。本文使用的术语“杂芳基”是指具有5至14个环原子的单、二、三或多环基团，或者5、6、9或10个环原子；在环序列中共享例如6、10或14个π电子；且除了碳原子之外，具有一个或多个独立地选自N、O和S的杂原子。例如，杂芳基包括但不限于：嘧啶基，吡啶基，苯并咪唑基，噻吩基，苯并噻唑基，苯并呋喃基和二氢吲哚基。杂芳基的其它实例包括但不限于：噻吩基，苯并噻吩基，呋喃基，苯并呋喃基，双苯并呋喃基，吡咯基，咪唑基，吡唑基，吡啶基，吡嗪基，嘧啶基，吲哚基，喹啉基，异喹啉基，喹喔啉基，四唑基，唑基，噻唑基和异唑基。

术语“亚芳基”、“亚杂芳基”或“亚杂环基”是指位于两个其它化学基团之间并且用来连接两个其它化学基团的上文分别定义的芳基、杂芳基或杂环基。

杂环基和杂芳基的实例包括但不局限于：氮杂基，氮杂环丁烷基，吖啶基，吖辛因基，苯并吲哚基，苯并咪唑基，苯并呋喃基(benzofuranyl)，苯并呋咱基，苯并呋喃基(benzofuryl)，苯并硫呋喃基(benzothiofuranyl)，苯并噻吩基(benzothiophenyl)，苯并唑基，苯并噻唑基，苯并噻吩基(benzothienyl)，苯并三唑基，苯并四唑基，苯并异唑基，苯并异噻唑基，苯并咪唑啉基，苯并唑基，苯并二唑基，苯并吡喃基，咔唑基，4aH-咔唑基，咔啉基，苯并二氢吡喃基，色烯基，噌琳基，香豆素基，十氢喹啉基，1，3-二氧戊环，2H，6H-1，5，2-二噻嗪基，二氢呋喃并[2，3-b]四氢呋喃，二氢异吲哚基，二氢喹唑啉基(例如3，4-二氢-4-氧代-喹唑啉基)，呋喃基，呋喃并吡啶基(例如呋喃并[2，3-c]吡啶基，呋喃并[3，2-b]吡啶基或呋喃并[2，3-b]吡啶基)，呋喃基，呋咱基，六氢二氮杂基，咪唑烷基，咪唑啉基，咪唑基，吲唑基，1H-吲唑基，吲哚烯基(indolenyl)，二氢吲哚基，吲嗪基，吲哚基，3H-吲哚基，异苯并呋喃基，异苯并二氢吡喃基，异吲唑基，异二氢吲哚基，异吲哚基，异喹啉基，异噻唑烷基，异噻唑基，异唑啉基(isoxazolinyl)，异唑基，亚甲基二氧基苯基，吗啉基，二氮杂萘基，八氢异喹啉基，二唑基，1，2，3- 二唑基，1，2，4- 二唑基，1，2，5- 二唑基，1，3，4- 二唑基，唑烷基，唑基，唑烷基，氧杂环丁烷基，2-氧代氮杂基，2-氧代哌嗪基，2-氧代哌啶基，2-氧代吡咯烷基，嘧啶基，菲啶基，菲咯啉基，吩嗪基，吩噻嗪基，吩噻基(phenoxathiinyl)，吩嗪基，酞嗪基，哌嗪基，哌啶基，哌啶酮基，4-哌啶酮基，胡椒基，蝶啶基，嘌呤基，吡喃基，吡嗪基，吡唑烷基，吡唑啉基，吡唑基，哒嗪基，吡啶并唑，吡啶并咪唑，吡啶并噻唑，吡啶基(pyridinyl)，吡啶基(pyridyl)，嘧啶基，吡咯烷基，吡咯啉基，吡咯并吡啶基，2H-吡咯基，吡咯基，喹唑啉基，喹啉基，4H-喹嗪基，喹喔啉基，奎宁环基，四氢-1，1-二氧代噻吩基，四氢呋喃基(tetrahydrofuranyl)，四氢呋喃基(tetrahydrofuryl)，四氢异喹啉基，四氢喹啉基，四氢吡喃基，四唑基，噻唑烷基，6H-1，2，5-噻二嗪基，噻二唑基(例如，1，2，3-噻二唑基，1，2，4-噻二唑基，1，2，5-噻二唑基，1，3，4-噻二唑基)，硫杂吗啉基(thiamorpholinyl)，硫吗啉基亚砜，硫吗啉基(thiamorpholuiyl)砜，噻蒽基，噻唑基，噻吩基，噻吩并噻唑基，噻吩并唑基，噻吩并咪唑基，噻吩基，三嗪基，三嗪基氮杂基，三唑基(例如，1，2，3-三唑基，1，2，4-三唑基，1，2，5-三唑基，1，3，4-三唑基)，和呫吨基。

本文使用的术语“唑基(azolyl)”是指含有两个或多个杂原子作为环原子的5元饱和或不饱和杂环基团，所述杂原子选自氮、硫和氧，其中至少一个杂原子是氮原子。唑基的实例包括但不局限于：任选取代的咪唑基，唑基，噻唑基，吡唑基，异唑基，异噻唑基，1，3，4-噻二唑基，1，2，4-噻二唑基，1，2，4- 二唑基和1，3，4- 二唑基。

除非另有说明，当本文使用的部分(例如，烷基，杂烷基，环烷基，芳基，杂芳基，杂环基，等等)描述为“任选取代的”时，是指基团任选具有一个至四个、或者一个至三个、或者一或两个独立选择的非氢取代基。合适的取代基包括但不限于：卤素，羟基，氧代基团(例如，被氧代基团取代的环-CH-是-C(O)-)，硝基，卤代烃基，烃基，烷基，环烷基，杂环基，芳基，杂芳基，芳烷基，烷氧基，芳氧基，氨基，酰氨基，烷基氨基甲酰基，芳基氨基甲酰基，氨基烷基，酰基，羧基，羟烷基，烷磺酰基，芳磺酰基，烷磺酰氨基，芳磺酰氨基，芳烷基磺酰氨基，烷基羰基，酰氧基，氰基和脲基。

本身不被进一步取代(除非另外明确地陈述)的取代基的实例是：

(a)卤素，氰基，氧代基团，羧基，甲酰基，硝基，氨基，脒基，胍基，

(b)C₁-C₅烷基或烯基或芳烷基亚氨基，氨基甲酰基，叠氮基，羧酰氨基，巯基，羟基，羟烷基，烷基芳基，芳烷基，C₁-C₈烷基，C₁-C₈烯基，C₁-C₈烷氧基，C₁-C₈烷基氨基，C₁-C₈烷氧羰基，芳氧羰基，C₂-C₈酰基，C₂-C₈酰氨基，C₁-C₈烷硫基，芳基烷硫基，芳硫基，C₁-C₈烷基亚磺酰基，芳烷基亚磺酰基，芳基亚磺酰基，C₁-C₈烷基磺酰基，芳基烷基磺酰基，芳基磺酰基，C₀-C₆N-烷基氨基甲酰基，C₂-C₁₅N，N-二烷基氨基甲酰基，C₃-C₇环烷基，芳酰基，芳氧基，芳烷基醚，芳基，与环烷基或杂环或其它芳基环稠合的芳基，C₃-C₇杂环，C₅-C₁₅杂芳基或与环烷基、杂环基或芳基稠合或螺合的任何这些环，其中上述中的每一个进一步任选被一个或多个列于上面(a)的部分取代；和

(c)-(CR³²R³³)_s-NR³⁰R³¹，

其中s是0(其中氮直接与被取代的部分键合)至6，

R³²和R³³各自独立地是：氢，卤素，羟基或C₁-C₄烷基，且R³⁰和R³¹各自独立地是氢，氰基，氧代基团，羟基，C₁-C₈烷基，C₁-C₈杂烷基，C₁-C₈烯基，羧酰氨基，C₁-C₃烷基-羧酰氨基，羧酰氨基-C₁-C₃烷基，脒基，C₂-C₈羟烷基，C₁-C₃烷基芳基，芳基-C₁-C₃烷基，C₁-C₃烷基杂芳基，杂芳基-C₁-C₃烷基，C₁-C₃烷基杂环基，杂环基-C₁-C₃烷基C₁-C₃烷基环烷基，环烷基-C₁-C₃烷基，C₂-C₈烷氧基，C₂-C₈烷氧基-C₁-C₄烷基，C₁-C₈烷氧羰基，芳氧羰基，芳基-C₁-C₃烷氧羰基，杂芳基氧羰基，杂芳基-C₁-C₃烷氧羰基，C₁-C₈酰基，C₀-C₈烷基-羰基，芳基-C₀-C₈烷基-羰基，杂芳基-C₀-C₈烷基-羰基，环烷基-C₀-C₈烷基-羰基，C₀-C₈烷基-NH-羰基，芳基-C₀-C₈烷基-NH-羰基，杂芳基-C₀-C₈烷基-NH-羰基，环烷基-C₀-C₈烷基-NH-羰基，C₀-C₈烷基-O-羰基，芳基-C₀-C₈烷基-O-羰基，杂芳基-C₀-C₈烷基-O-羰基，环烷基-C₀-C₈烷基-O-羰基，C₁-C₈烷基磺酰基，芳基烷基磺酰基，芳基磺酰基，杂芳基烷基磺酰基，杂芳基磺酰基，C₁-C₈烷基-NH-磺酰基，芳烷基-NH-磺酰基，芳基-NH-磺酰基，杂芳烷基-NH-磺酰基，杂芳基-NH-磺酰基芳酰基，芳基，环烷基，杂环基，杂芳基，芳基-C₁-C₃烷基-，环烷基-C₁-C₃烷基-，杂环基-C₁-C₃烷基-，杂芳基-C₁-C₃烷基-，或保护基，其中上述中的每一个进一步任选被一个或多个列于上面(a)的部分取代；或

R³⁰和R³¹与它们相连接的N结合在一起，形成杂环基或杂芳基，每个任选被1至3个选自上面(a)、保护基和(X³⁰-Y³¹-)的取代基取代，其中所述杂环基还可以是桥联的(与亚甲基、亚乙基或亚丙基桥形成双环部分)；其中

X³⁰选自：C₁-C₈烷基，C₂-C₈烯基-，C₂-C₈炔基-，-C₀-C₃烷基-C₂-C₈烯基-C₀-C₃烷基，C₀-C₃烷基-C₂-C₈炔基-C₀-C₃烷基，C₀-C₃烷基-O-C₀-C₃烷基-，HO-C₀-C₃烷基-，C₀-C₄烷基-N(R³⁰)-C₀-C₃烷基-，N(R³⁰)(R³¹)-C₀-C₃烷基-，N(R³⁰)(R³¹)-C₀-C₃烯基-，N(R³⁰)(R³¹)-C₀-C₃炔基-，(N(R³⁰)(R³¹))₂-C＝N-，C₀-C₃烷基-S(O)_0-2-C₀-C₃烷基-，CF₃-C₀-C₃烷基-，C₁-C₈杂烷基，芳基，环烷基，杂环基，杂芳基，芳基-C₁-C₃烷基-，环烷基-C₁-C₃烷基-，杂环基-C₁-C₃烷基-，杂芳基-C₁-C₃烷基-，N(R³⁰)(R³¹)-杂环基-C₁-C₃烷基-，其中芳基、环烷基、杂芳基和杂环基任选被1至3个(a)中的取代基取代；和

Y³¹选自直接键、-O-、-N(R³⁰)-、-C(O)-、-O-C(O)-、-C(O)-O-、-N(R³⁰)-C(O)-、-C(O)-N(R³⁰)-、-N(R³⁰)-C(S)-、-C(S)-N(R³⁰)-、-N(R³⁰)-C(O)-N(R³¹)-、-N(R³⁰)-C(NR³⁰)-N(R³¹)-、-N(R³⁰)-C(NR³¹)-、-C(NR³¹)-N(R³⁰)-、-N(R³⁰)-C(S)-N(R³¹)-、-N(R³⁰)-C(O)-O-、-O-C(O)-N(R³¹)-、-N(R³⁰)-C(S)-O-、-O-C(S)-N(R³¹)-、-S(O)_0-2-、-SO₂N(R³¹)-、-N(R³¹)-SO₂-和-N(R³⁰)-SO₂N(R³¹)-。

被取代的部分是其中一个或多个(例如一个至四个，或者一个至三个，或者一或两个)氢被其它化学取代基取代的部分。作为非限制性实例，取代的苯基包括2-氟苯基，3，4-二氯苯基，3-氯-4-氟-苯基，2-氟-3-丙基苯基。作为另一个非限制性实例，取代的正辛基包括2，4-二甲基-5-乙基-辛基和3-环戊基-辛基。包括在该定义内的是被氧取代的亚甲基(-CH₂-)以形成羰基-CO-。

当有两个任选的取代基与环状结构(例如，苯基、噻吩基或吡啶基)的相邻原子键合时，取代基与它们键合的原子一起任选形成5或6元环烷基或具有1、2或3个环杂原子的杂环。

在一些实施方案中，烃基、杂烷基、杂环和/或芳基是未取代的。

在一些实施方案中，烃基、杂烷基、杂环和/或芳基被1至3个独立选择的取代基取代。

烷基上的取代基的实例包括但不局限于：羟基，卤素(例如，单个卤素取代基或多个卤素取代基；在后者的情况下，基团例如CF₃或携带Cl₃的烷基)，氧代基团，氰基，硝基，烷基，环烷基，烯基，环烯基，炔基，杂环，芳基，-OR^a，-SR^a，-S(＝O)R^e，-S(＝O)₂R^e，-P(＝O)₂R^e，-S(＝O)₂OR^e，-P(＝O)₂OR^e，-NR^bR^c，-NR^bS(＝O)₂R^e，-NR^bP(＝O)₂R^e，-S(＝O)₂NR^bR^c，-P(＝O)₂NR^bR^c，-C(＝O)OR^e，-C(＝O)R^a，-C(＝O)NR^bR^c，-OC(＝O)R^a，-OC(＝O)NR^bR^c，-NR^bC(＝O)OR^e，-NR^dC(＝O)NR^bR^c，-NR^dS(＝O)₂NR^bR^c，-NR^dP(＝O)₂NR^bR^c，-NR^bC(＝O)R^a或-NR^bP(＝O)₂R^e，其中R^a是氢，烷基，环烷基，烯基，环烯基，炔基，杂环或芳基；R^b、R^c和R^d独立地是氢，烷基，环烷基，杂环或芳基，或所述R^b和R^c与它们键合的N一起任选形成杂环；且R^e是烷基，环烷基，烯基，环烯基，炔基，杂环或芳基。在上述示例性的取代基中，基团例如烷基、环烷基、烯基、炔基、环烯基、杂环和芳基本身可以是任选取代的。

烯基和炔基上的取代基实例包括但不局限于：烷基或取代的烷基，以及作为烷基取代基的实例所列举的那些基团。

环烷基上的取代基的实例包括但不局限于：硝基，氰基，烷基或取代的烷基，以及上面作为烷基取代基的实例所列举的那些基团。取代基的其它实例包括但不局限于：螺连接的或稠合的环状取代基，例如，螺连接的环烷基，螺连接的环烯基，螺连接的杂环(杂芳基除外)，稠合的环烷基，稠合的环烯基，稠杂环或稠合的芳基，其中上述的环烷基、环烯基、杂环和芳基取代基本身可以是任选取代的。

环烯基上的取代基的实例包括但不局限于：硝基，氰基，烷基或取代的烷基，以及作为烷基取代基的实例所列举的那些基团。取代基的其它实例包括但不局限于：螺连接的或稠合的环状取代基，例如螺连接的环烷基，螺连接的环烯基，螺连接的杂环(杂芳基除外)，稠合的环烷基，稠合的环烯基，稠杂环，或稠合的芳基，其中上述的环烷基、环烯基、杂环和芳基取代基本身可以是任选取代的。

芳基上的取代基的实例包括但不局限于：硝基，环烷基或取代的环烷基，环烯基或取代的环烯基，氰基，烷基或取代的烷基，以及上面作为烷基取代基的实例所列举的那些基团。取代基的其它实例包括但不局限于：稠合的环基团，例如稠合的环烷基，稠合的环烯基，稠杂环，或稠合的芳基，其中上述的环烷基、环烯基、杂环和芳基取代基本身可以是任选取代的。芳基(苯基，作为非限制性实例)上的取代基的其它实例包括但不局限于：卤代烷基和作为烷基取代基的实例所列举的那些基团。

杂环上的取代基的实例包括但不局限于：环烷基，取代的环烷基，环烯基，取代的环烯基，硝基，氧代基团(即，＝O)，氰基，烷基，取代烷基，以及作为烷基取代基的实例所列举的那些基团。杂环基团上的取代基的其它实例包括但不局限于：在任何有效点或连结点的螺连接的或稠合的环取代基，例如螺连接的环烷基，螺连接的环烯基，螺连接的杂环(杂芳基除外)，稠合的环烷基，稠合的环烯基，稠杂环和稠合的芳基，其中上述的环烷基、环烯基、杂环和芳基取代基本身可以是任选取代的。

在一些实施方案中，在杂环基团的碳、氮和/或硫的一个或多个位置上被取代。氮上的取代基的实例包括但不局限于：烷基，芳基，芳烷基，烷基羰基，烷基磺酰基，芳基羰基，芳基磺酰基，烷氧羰基，或芳烷氧基羰基。硫上的取代基的实例包括但不局限于：氧代基团和C_1-6烷基。在一些实施方案中，氮和硫杂原子可以独立地任选被氧化，且氮杂原子可以独立地任选被季铵化。

在一些实施方案中，环基团上的取代基，例如芳基、杂芳基、环烷基和杂环基，包括卤素、烷氧基和/或烷基。

在一些实施方案中，烷基上的取代基包括卤素和/或羟基。

本文使用的“卤代烃基”是其中一个至所有的氢被一个或多个卤素取代的烃基部分。

本文使用的术语“卤素”或“卤”是指氯、溴、氟或碘。本文使用的术语“酰基”是指烷基羰基或芳基羰基取代基。术语“酰氨基”是指连接在氮原子上的酰氨基(即，R-CO-NH-)。术语“氨基甲酰基”是指连接在羰基碳原子上的酰氨基(即，NH₂-CO-)。酰氨基或氨基甲酰基取代基的氮原子也可以是任选取代的。术语“磺酰氨基”是指通过硫或氮原子连接的磺酰胺取代基。术语“氨基”包括NH₂，烷基氨基，二烷基氨基(其中每个烷基可以相同或不同)，芳氨基和环氨基。本文使用的术语“脲基”是指取代或未取代的脲部分。

本文使用的术语“残基”是指包含一个或多个未成对电子的化学部分。

如果任选的取代基选自“一个或多个”基团，应理解，该定义包括所有的选自所列举基团之一或选自所有列举基团的组合的取代基。

另外，环部分(即，环烷基，杂环基，芳基，杂芳基)上的取代基包括5至6元单环和9至14元二环部分，其与母体环部分稠合形成二或三环稠环体系。环部分上的取代基还包括5至6元单环和9至14元二环部分，其通过共价键与母体环部分连接形成二或三环的双环体系。例如，任选取代的苯基包括但不局限于下列：

“未取代的”部分(例如，未取代的环烷基，未取代的杂芳基，等等)是指不具有任何任选的取代基的如上所述部分。

饱和、部分不饱和或不饱和的三至八元碳环是例如四至七元、或五或六元饱和或不饱和碳环。饱和或不饱和三至八元碳环的实例包括苯基，环丙基，环丁基，环戊基，环己基和环庚基。

饱和或不饱和羧基和杂环基团可以与另一个饱和或杂环基团缩合形成双环基团，例如，饱和或不饱和9至12元双环碳环或杂环基团。双环基团包括萘基，喹啉基，1，2，3，4-四氢喹啉基，1，4-苯并嗪基，茚满基，吲哚基和1，2，3，4-四氢萘基。

当碳环或杂环基团被两个C₁-C₆烷基取代时，两个烷基可以结合在一起，形成亚烷基链，例如C₁-C₃亚烷基链。具有交联结构的碳环或杂环基团包括二环[2.2.2]辛基和降冰片基。

术语“激酶抑制剂”和“激酶活性的抑制剂”，等等，用于鉴定能够与激酶相互作用并抑制其酶活性的化合物。

术语“抑制激酶酶活性”是指降低激酶从供体分子例如ATP将磷酸基转移至特异靶分子(底物)的能力。例如，激酶活性的抑制可以至少为大约10％。在本发明的一些实施方案中，激酶活性的这种降低至少为大约25％，或者至少大约50％，或者至少大约75％，或者至少大约90％。在其它实施方案中，激酶活性降低至少95％，或者至少99％。IC₅₀值是可将激酶活性降低至未受抑制的酶活性的50％的激酶抑制剂的浓度。

术语“VEGF受体信号传导的抑制剂”用于鉴定具有本文所定义结构的化合物，其能够与VEGF受体相互作用并能够抑制VEGF受体的活性。在一些实施方案中，这种降低至少为大约50％，或者至少大约75％，或者至少大约90％。在一些实施方案中，活性降低至少95％，或者至少99％。

术语“抑制有效量”代表足够导致抑制激酶活性的剂量。构成“抑制有效量”的本发明化合物的量将根据化合物、激酶等等而有所不同。抑制有效量通常可以由本领域普通技术人员来确定。激酶可以在细胞中，其也可以在多细胞有机体中。多细胞有机体可以是：例如，植物，真菌或动物，例如，哺乳动物，例如，人。真菌可以是感染的植物或哺乳动物，例如人，并且可以因此位于植物或哺乳动物中和/或位于其上。

在示例性的实施方案中，这种抑制是特异性抑制，即，激酶抑制剂降低激酶从供体分子例如ATP将磷酸基转移至特异靶分子(底物)的能力，其浓度比产生其它无关生物学效应所要求的抑制剂的浓度低。例如，与产生无关生物学效应所要求的浓度相比，激酶抑制活性所需要的浓度为1/2以下，或者为1/5以下，或者1/10以下，或者1/20以下。

由此，本发明提供了抑制激酶活性的方法，该方法包括：使激酶与抑制有效量的按照本发明的化合物或组合物接触。在一些实施方案中，激酶在有机体中。由此，本发明提供了抑制有机体中激酶活性的方法，该方法包括：给予有机体抑制有效量的按照本发明的化合物或组合物。在一些实施方案中，有机体是哺乳动物，例如驯养的哺乳动物。在一些实施方案中，有机体是人。

本文使用的术语“治疗有效量”是本发明化合物的量，当给予患者时，该量可以引起所需要的治疗效果。治疗效果取决于所治疗的疾病和所需要的结果。因此，治疗效果可以是疾病状态的治疗。进一步的，治疗效果可以是抑制激酶活性。构成“治疗有效量”的本发明化合物的量将根据化合物、疾病状态和它的严重程度、所治疗患者的年龄等等而有所不同。治疗有效量通常可以由本领域普通技术人员来确定。

在一些实施方案中，治疗效果是抑制血管生成。短语“血管生成的抑制”用于表示按照本发明化合物阻止血管生长的能力，例如，接触抑制剂的血管与未接触抑制剂的血管进行比较。在一些实施方案中，血管生成是肿瘤血管生成。短语“肿瘤血管生成”是指渗入例如肿瘤或者接触癌性生长的肿瘤的血管的增殖。在一些实施方案中，血管生成是眼睛中的异常的血管形成。

在示例性的实施方案中，与未接触抑制剂的血管的血管生成相比较，血管生成被阻止至少25％，或者至少50％，或者至少75％，或者至少90％，或者至少95％，或者至少99％。或者，血管生成得到100％抑制(即，血管的大小或数量没有增加)。在一些实施方案中，与未接触抑制剂的血管相比较，短语“血管生成的抑制”包括血管的数量或大小衰退。由此，抑制血管生成的按照本发明的化合物可以引起血管生长迟缓、血管生长停止，或引起血管生长的衰退。

由此，本发明提供了抑制动物血管生成的方法，该方法包括：给予需要这种治疗的动物治疗有效量的本发明的化合物或组合物。在一些实施方案中，动物是哺乳动物，例如驯养的哺乳动物。在一些实施方案中，动物是人。

在一些实施方案中，治疗效果是治疗眼睛疾病、障碍或病症。短语“眼睛疾病、障碍或病症的治疗”是指按照本发明的化合物治疗下列的能力：渗出性的和/或炎性的眼睛疾病、障碍或病症，与视网膜血管渗透性和/或完整性削弱有关的病症，与导致灶性出血的视网膜血管破裂有关的病症，眼睛后面(the back of the eye)的疾病，视网膜疾病，或眼睛前面(the front of the eye)的疾病，或其它眼睛疾病、障碍或病症。

在一些实施方案中，眼睛疾病、障碍或病症包括但不局限于：年龄相关的黄斑变性(ARMD)，渗出性的黄斑变性(亦称“湿式”或新生血管性年龄-相关的黄斑变性(湿式-AMD)，黄斑水肿，老年黄斑盘状变性，黄斑囊样水肿，眼睑水肿，视网膜水肿，糖尿病性视网膜病，急性黄斑视神经网膜病，中心浆液性脉络膜视网膜病，脉络膜视网膜病，脉络膜的新生血管形成，新生血管性黄斑病，新生血管性青光眼，梗阻性的动脉和静脉视网膜病(例如视网膜静脉堵塞或视网膜动脉阻塞)，中心视网膜静脉堵塞，弥散性血管内凝血，视网膜分支静脉阻塞，高血压性的眼底改变，眼睛缺血性综合症，视网膜动脉小动脉瘤，Coat′s疾病，近窝区的毛细血管扩张，半侧视网膜静脉阻塞，视(神经)乳头病(Papillophlebitis)，中心视网膜动脉堵塞，视网膜分枝动脉堵塞，颈动脉疾病(CAD)，霜样树枝状视网膜血管炎，镰状细胞视网膜病及其它血红蛋白病，血管样纹，以病原结果例如疾病形式存在的斑点性水肿(例如，糖尿病性的斑点性水肿)，眼外伤或眼睛手术，由创伤、损伤或肿瘤造成的视网膜局部缺血或退化，葡萄膜炎，虹膜炎，视网膜血管炎，眼内炎，全眼球炎，转移性眼炎，脉络膜炎，视网膜色素上皮炎，结膜炎，睫状体炎，巩膜炎，巩膜外层炎，视神经炎，眼球后的视神经炎，角膜炎，睑炎，渗出性视网膜脱离，角膜溃疡，结膜溃疡，慢性钱币形角膜炎，Thygeson角膜炎，进行性角膜侵蚀性溃疡，由细菌或病毒感染或眼睛手术所引起的眼睛炎性疾病，由对眼睛的物理伤害所引起的眼睛炎性疾病，和由眼睛炎性疾病所引起的症状，包括发痒、潮红、水肿和溃疡，红斑，渗出性多形红斑，结节性红斑，环形红斑，硬化病，皮炎，急性自发水肿，喉水肿，声门水肿，声门下喉炎，支气管炎，鼻炎，咽炎，窦炎，喉炎或中耳炎。

在一些实施方案中，眼睛疾病、障碍或病症包括但不局限于：年龄相关的黄斑变性，糖尿病性视网膜病，视网膜水肿，视网膜静脉堵塞，新生血管性青光眼，早产儿视网膜病变，视网膜色素性变性，葡萄膜炎，角膜新生血管形成或增殖性视网膜病变。

在一些实施方案中，眼睛疾病、障碍或病症是年龄相关的黄斑变性、糖尿病性视网膜病或视网膜水肿。

由此，本发明提供了治疗动物的眼睛疾病、障碍或病症的方法，该方法包括：给予需要这种治疗的动物治疗有效量的本发明的化合物或组合物。在一些实施方案中，动物是哺乳动物，例如驯养的哺乳动物。在一些实施方案中，动物是人。

在一些实施方案中，治疗效果是抑制视网膜新生血管形成。短语“视网膜新生血管形成的抑制”是指按照本发明的化合物阻止眼睛中血管生长的能力，例如，源于视网膜静脉的新血管，例如，阻止源于视网膜静脉的新血管的生长和沿着视网膜的内部(玻璃体)表面的扩展。

在示例性的实施方案中，与非接触的血管的视网膜新生血管形成相比较，视网膜新生血管形成被迟缓至少25％，或者至少50％，或者至少75％，或者至少90％，或者至少95％，或者至少99％。或者，视网膜新生血管形成得到100％抑制(即，血管的大小或数量没有增加)。在一些实施方案中，与未接触抑制剂的血管相比较，短语“视网膜新生血管形成的抑制”包括血管的数量或大小衰退。由此，抑制视网膜新生血管形成的按照本发明的化合物可以引起血管生长迟缓、血管生长停止，或引起血管生长的衰退。

由此，本发明提供了抑制动物的视网膜新生血管形成的方法，该方法包括：给予需要这种治疗的动物治疗有效量的本发明的化合物或组合物。在一些实施方案中，动物是哺乳动物，例如驯养的哺乳动物。在一些实施方案中，动物是人。

在一些实施方案中，治疗效果是抑制细胞增殖。短语“抑制细胞增殖”用于表示按照本发明的化合物阻止与抑制剂接触的细胞生长的能力(与未接触抑制剂的细胞进行比较)。可以如下进行细胞增殖的评估：使用Coulter细胞计数装置(Coulter，Miami，Fla.)或血细胞计数器，统计接触和未接触抑制剂的细胞。如果细胞以实体生长(例如，实体瘤或器官)，细胞增殖的这种评估可以如下进行：用卡尺测定生长，或将接触抑制剂的细胞与未接触抑制剂的细胞的生长大小进行比较。

在示例性的实施方案中，与未接触抑制剂的细胞的生长相比较，与抑制剂接触的细胞的生长被迟缓至少25％，或者至少50％，或者至少75％，或者至少90％，或者至少95％，或者至少99％。或者，细胞增殖得到100％抑制(即，接触抑制剂的细胞的数量没有增加)。在一些实施方案中，与未接触抑制剂的细胞相比较，短语“抑制细胞增殖”包括：接触抑制剂的细胞的数量或大小得到降低。由此，抑制细胞增殖(在接触抑制剂的细胞中)的按照本发明的化合物可以引起接触抑制剂的细胞的生长迟缓、生长停止、细胞程序死亡(即，细胞凋亡)或坏死性的细胞死亡。

在一些实施方案中，接触的细胞是新生瘤细胞(neoplastic cell)。术语“新生瘤细胞”用于表示显示出异常细胞生长的细胞。在一些实施方案中，新生瘤细胞的异常性细胞生长是增加的细胞生长。新生瘤细胞可以是增生性的细胞、显示出缺乏体外生长的接触性抑制的细胞、不能体内转移的良性肿瘤细胞、或能够体内转移并且在尝试除去之后可以复发的癌细胞。术语“肿瘤生成”用于表示可导致肿瘤生长发展的细胞增殖的诱导。

在一些实施方案中，接触的细胞是动物中的细胞。由此，本发明提供了治疗动物的细胞增殖疾病或病症的方法，该方法包括：给予需要这种治疗的动物治疗有效量的本发明的化合物或组合物。在一些实施方案中，动物是哺乳动物，例如驯养的哺乳动物。在一些实施方案中，动物是人。

术语“细胞增殖疾病或病症”是指以异常细胞生长为特征的任何病症，例如，异常增加的细胞增殖。应该抑制和治疗的这种细胞增殖疾病或病症的实例包括但不局限于癌症。癌症的具体类型的实例包括但不局限于：乳腺癌，肺癌，结肠癌，直肠癌，膀胱癌，前列腺癌，血癌和肾癌。在一些实施方案中，本发明提供了抑制动物的新生瘤细胞增殖的方法，该方法包括：给予具有至少一种新生瘤细胞存在于身体中的动物治疗有效量的本发明的化合物或其组合物。

对于本发明的目的来说，本文使用的术语“患者”包括人及其它动物，例如哺乳动物，及其它有机体。由此，本发明的化合物、组合物和方法适用于人类治疗和兽用。在一些实施方案中，患者是哺乳患者，例如人。

本文使用的术语“治疗”、“医治”等等，包括有机体中的疾病状态的治疗，并且包括下列中的至少一种：(i)预防疾病状态出现，尤其是，当动物有感染疾病的倾向、但还没有确诊时；(ii)抑制疾病状态，即，部分或完全停止其发展；(iii)减轻疾病状态，即，引起疾病状态的症状的衰退，或改善疾病的症状；和(iv)使疾病状态得到逆转或衰退，例如，消除或治愈疾病。在本发明的一些实施方案中，有机体是动物，例如，哺乳动物，例如，灵长类，例如，人。正如本领域所已知的那样，相对于局部递送的全身性调节，年龄、体重、综合健康状况、性别、饮食、给药时间、药物相互作用、病症的严重程度等等是必要的，并且本领域普通技术人员可用常规实验确定。在一些实施方案中，本文使用的术语“治疗”、“医治”等等，包括治疗有机体的疾病状态，并且包括上面(ii)、(iii)和(iv)中的至少一种。

对于非眼睛的疾病、障碍或病症，可以通过任何途径给药，包括但不限于：肠胃外，口服，舌下，透皮，局部，鼻内，气管内或直肠内。在一些实施方案中，在医院环境中静脉内给予本发明的化合物。在一些实施方案中，可以通过口服途径给药。

眼睛疾病、障碍和病症的给药途径的实例包括但不局限于：全身性给药，眼周给药，眼球后给药，小管内给药，玻璃体腔注射，局部给药(例如，滴眼剂)，结膜下注射，Tenon囊下给药(subtenon)，巩膜睫状体给药(transcleral)，前眼房给药(intracameral)，视网膜下给药，电穿孔法给药和缓释植入物。眼睛状况的其它给药途径、其它注射部位或其它给药形式对本领域技术人员来说是已知的或在他们的考虑范围，并且在本发明范围之内。

在本发明的一些实施方案中，眼睛疾病、障碍和病症的给药途径包括：局部给药，结膜下注射，眼内注射，或其它眼睛途径、全身途径，或本领域技术人员已知的患者眼睛手术之后的其它方法。

在本发明的其它实施方案中，眼睛疾病、障碍和病症的给药途径包括：局部给药，眼内给药，巩膜睫状体给药，眼周给药，结膜给药，结膜下给药(subtenon)，前眼房给药，视网膜下给药，结膜下给药，眼球后给药或小管内给药。

在本发明的一些实施方案中，眼睛疾病、障碍和病症的给药途径包括：局部给药(例如，滴眼剂)，全身性给药(例如，口服或静脉内)，结膜下注射，眼周注射，眼内注射和手术植入。

在本发明的一些实施方案中，眼睛疾病、障碍和病症的给药途径包括：眼内注射，眼周注射和缓释植入物。

在本发明的一些实施方案中，眼球内注射可以注射到玻璃体(眼内)中、结膜下面(结膜下)、眼睛后面(眼球后)、巩膜内、Tenon囊下面(sub-Tenon)，或可以是储存形式。

本发明的化合物可以形成盐，其也在本发明范围内。关于本发明的化合物，例如式(I)化合物，应理解，包括其盐，除非另有陈述。

本文使用的术语“盐”表示与无机和/或有机酸和碱形成的酸和/或碱盐。另外，当本发明的化合物含有碱性部分(例如但不局限于：吡啶或咪唑)和酸性部分(例如但不局限于：羧酸)时，可以形成两性离子(“内盐”)，并且包括在本文所使用的术语“盐”的范围之内。可药用(即，无毒的(显示出最小或没有不希望有的毒理学效果)，生理学可接受的)盐是优选的，不过其它盐也是有用的，例如，在制备期间可以使用的分离或纯化步骤中。可以如下形成本发明化合物的盐：例如，在介质中，例如，在盐沉淀的介质或水性介质中，本发明的化合物与适量的酸或碱进行反应，例如等量反应，而后冷冻干燥。

含有碱性部分的本发明的化合物(例如但不局限于胺或吡啶或咪唑环)可以与各种有机和无机酸形成盐。酸加成盐的实例包括乙酸盐(例如，与乙酸或三卤乙酸例如三氟乙酸形成的那些盐)，己二酸盐，海藻酸盐，抗坏血酸盐，天冬氨酸，苯甲酸盐，苯磺酸盐，硫酸氢盐，硼酸盐，丁酸盐，柠檬酸盐，樟脑酸盐，樟脑磺酸盐，环戊烷丙酸盐，二葡糖酸盐，十二烷基硫酸盐，乙磺酸盐，富马酸盐，葡庚糖酸盐，甘油磷酸盐，半硫酸盐，庚酸盐，己酸盐，盐酸盐，氢溴酸盐，氢碘酸盐，羟基乙磺酸盐(例如，2-羟基乙磺酸盐)，乳酸盐，马来酸盐，甲磺酸盐，萘磺酸盐(例如，2-萘磺酸盐)，烟酸盐，硝酸盐，草酸盐，果胶酯酸盐(pectinate)，过硫酸盐，苯丙酸盐(例如，3-苯丙酸盐)，磷酸盐，苦味酸盐，新戊酸盐，丙酸酯，水杨酸盐，琥珀酸盐，硫酸盐(例如，与硫酸形成的那些盐)，磺酸盐，酒石酸盐，硫氰酸盐，甲苯磺酸盐，例如甲苯磺酸盐，十一烷酸盐，等等。

含有酸性部分的本发明的化合物(例如但不局限于羧酸)可以与各种有机和无机碱形成盐。碱盐的实例包括铵盐，碱金属盐例如钠、锂和钾盐，碱土金属盐例如钙和镁盐，与有机碱(例如，有机胺)成的盐，例如苯乍生(benzathines)，二环己基胺，哈胺(hydrabamines)(与N，N-二(去氢枞基)乙二胺形成的盐)，N-甲基-D-葡糖胺，N-甲基-D-咪唑双酰胺(glycamides)，叔丁胺，和与氨基酸例如精氨酸、赖氨酸等等成的盐。可以用试剂例如低级烷基卤化物(例如甲基、乙基、丙基和丁基氯化物，溴化物和碘化物)、二烷基硫酸酯(例如二甲基、二乙基、二丁基和二戊基硫酸酯)、长链卤化物(例如癸基、月桂基、十四烷基和硬脂酰基氯化物、溴化物和碘化物)、芳烷基卤化物(例如苄基和苯乙基溴化物)及其它试剂将含有碱性氮的基团季铵化。

本文使用的术语“可药用盐”是指可以保持上述鉴定化合物的所需生物活性、并显示出最小或没有不希望的毒理学效果的盐。这种盐的实例包括但不局限于：与无机酸(例如，盐酸，氢溴酸，硫酸，磷酸，硝酸，等等)形成的盐，和与有机酸形成的盐，所述有机酸例如乙酸，草酸，酒石酸，琥珀酸，苹果酸，抗环血酸，苯甲酸，鞣酸，棕榈酸，海藻酸，聚谷氨酸，萘磺酸，萘二磺酸，甲磺酸，对甲苯磺酸和多聚半乳糖醛酸。其它盐包括：本领域技术人员已知的可药用季铵盐，其具体地包括式--NR+Z--的季铵盐，其中R是氢、烷基或苄基，Z是反离子，包括氯离子、溴离子、碘离子、--O-烷基、甲苯磺酸根、甲磺酸根、磺酸根、磷酸根、或羧酸根(例如苯甲酸根，琥珀酸根，乙酸根，乙醇酸根，马来酸根，苹果酸根，柠檬酸根，酒石酸根，抗坏血酸根，苯甲酸根，桂皮酸根，扁桃酸根，苯甲酸根(benzyloate)和联苯乙酸根)。

本发明的另一个方面提供了包含按照本发明化合物的组合物。例如，在本发明的一些实施方案中，组合物包含按照本发明的化合物、按照本发明化合物的N-氧化物、水合物、溶剂合物、可药用盐、复合物或前药，以至少大约30％对映异构体或非对映异构体过量的形式存在。在本发明的一些实施方案中，化合物、N-氧化物、水合物、溶剂合物、可药用盐、复合物或前药以至少大约50％、至少大约80％或甚至至少大约90％对映异构体或非对映异构体过量的形式存在。在本发明的一些实施方案中，化合物、N-氧化物、水合物、溶剂合物、可药用盐、复合物或前药以至少大约95％、或者至少大约98％和或者至少大约99％对映异构体或非对映异构体过量的形式存在。在本发明的其它实施方案中，化合物、N-氧化物、水合物、溶剂合物、可药用盐、复合物或前药以基本上外消旋混合物的形式存在。

本发明的一些化合物可以具有手性中心和/或几何异构中心(E-和Z-异构体)，本发明包括所有这种旋光异构体、对映异构体、非对映异构体和几何异构体。本发明还包括本文所公开化合物的所有互变异构形式。如果本发明的化合物包含手性中心，本发明包括这种化合物的对映异构体和/或非对映异构体纯的异构体、这种化合物的对映异构体和/或非对映异构体富集混合物和这种化合物的外消旋和非外消旋(scalemic)混合物。例如，组合物可以以至少大约30％非对映异构体或对映异构体过量形式包含式(I)化合物的对映异构体或非对映异构体的混合物。在本发明的一些实施方案中，化合物以至少大约50％对映异构体或非对映异构体过量、至少大约80％对映异构体或非对映异构体过量、或甚至至少大约90％对映异构体或非对映异构体过量的形式存在。在本发明的一些实施方案中，化合物以至少大约95％或者至少大约98％对映异构体或非对映异构体过量、和或者至少大约99％对映异构体或非对映异构体过量的形式存在。

本发明的手性中心可以具有S或R构型。外消旋形式可以通过物理方法进行拆分，例如，非对映异构体衍生物的分级结晶、分离或结晶或手性柱色谱分离。单一旋光异构体可以如下获得：从手性前体/中间体或从消旋体起始，利用任何合适的方法，包括但不限于：常规方法，例如，与光学活性的酸形成盐，而后结晶。

本发明还包括本发明化合物的前药。术语“前药”代表与载体共价键合的化合物，当给予哺乳动物受试者前药时，前药能够释放活性组分。活性组分的释放发生在体内。前药可以利用本领域技术人员已知的技术制备。这些技术通常可以修饰给定化合物中的合适官能团。然而，这些修饰的官能团通过常规操作或在体内可以恢复初始官能团。本发明化合物的前药包括其中羟基、氨基、羧基或类似基团被修饰的化合物。前药的实例包括但不局限于：酯(例如，醋酸酯、甲酸酯和苯甲酸酯衍生物)，本发明化合物中的羟基或氨基官能团的氨基甲酸酯(例如，N，N-二甲基氨基羰基)，酰胺(例如，三氟乙酰基氨基，乙酰胺，等等)，等等。

本发明的化合物可以原态给予，或以前药形式给予，例如，以体内可水解的酯或体内可水解的酰胺形式给予。包含羧基或羟基的本发明化合物的体内可水解的酯是，例如，在人或动物体内可水解产生母体酸或醇的可药用酯。羧基的合适的可药用酯包括：C₁-C₆烷氧基甲基酯(例如，甲氧基甲基)，C₁-C₆烷酰氧基甲基酯(例如，新戊酰氧基甲基)，酞基酯，C₃-C₈环烷氧基羰基氧基-C₁-C₆烷基酯(例如，1-环己基羰基氧基乙基)；1，3-二氧杂环戊烯-2-酮基甲基酯(例如，5-甲基-1，3-二氧杂环戊烯-2-酮基甲基；和C₁-C₆烷氧羰基氧基乙酯(例如，1-甲氧羰基氧基乙基)，并且可以在本发明化合物的任何合适羧基处形成。

含有羟基的本发明化合物的体内可水解的酯包括：无机酯，例如磷酸酯和α-酰氧烷基醚和相关化合物，作为酯的体内水解的结果，其发生分解，得到母体羟基。α-酰氧烷基醚的实例包括乙酰氧基甲氧基醚和2，2-二甲基丙酰氧基-甲氧基醚。可形成羟基的体内可水解酯的选择包括：烷酰基，苯甲酰基，苯乙酰基和取代的苯甲酰基和苯乙酰基，烷氧羰基(得到碳酸烷基酯)，二烷基氨基甲酰基和N-(N，N-二烷基氨基乙基)-N-烷基氨基甲酰基(得到氨基甲酸酯)，N，N-二烷基氨基乙酰基和羧基乙酰基。苯甲酰基上的取代基的实例包括吗啉代和哌嗪子基(piperazino)，其通过亚甲基连接环氮原子与苯甲酰基环的3-或4-位。含有羧基的本发明化合物的体内可水解的酰胺的合适意义是，例如，N-C₁-C₆烷基或N，N-二-C₁-C₆烷基酰胺，例如N-甲基，N-乙基，N-丙基，N，N-二甲基，N-乙基-N-甲基或N，N-二乙基酰胺。

当给予受试者前药时，通过代谢或化学过程，前药进行化学转化，得到本发明的化合物，例如，其盐和/或溶剂合物。本发明化合物的溶剂合物包括，例如，水合物。

在整个说明书中，一个或多个化学取代基的实施方案是确定的。还包括的是各种实施方案的组合。例如，本发明描述了化合物中的D的一些实施方案，并且描述了基团G的一些实施方案。由此，例如，在本发明范围内，还包括描述了D的实例和描述了基团G的实例的化合物。

化合物

按照一个实施方案，本发明提供了式(I)化合物：

包括其N-氧化物、水合物、溶剂合物、可药用盐、前药和复合物，和外消旋与非外消旋混合物，其非对映异构体和对映异构体，其中，

D选自芳香环、杂芳香环、环烷基环或杂环体系，每个任选被1至5个独立选择的R³⁸取代；

M是任选取代的稠合杂环部分；

Z是-O-；

Ar是5至7元芳香环体系，其任选被0至4个R²基团取代；和

G是基团B-L-T，其中

B是-N(R¹³)-或-C(＝S)-；

L选自-C(＝O)N(R¹³)-，-C(＝O)C₀-C₁烷基-C(＝O)N(R¹³)-和-C(＝O)-，其中上述L基团的烷基是任选取代的；和

T选自：-C₀-C₅烷基，-C₀-C₅烷基-Q，-O-C₀-C₅烷基-Q，-O-C₀-C₅烷基，-C(＝S)-N(R¹³)-C₀-C₅烷基-Q，-C₀-C₅烷基-S(O)₂-Q，和-C(＝S)-N(R¹³)-C₀-C₅烷基，其中每个C₀-C₅烷基是任选取代的；

其中

每个R³⁸独立地选自卤素，任选取代的C₁-C₆烷基，-C₀-C₆烷基-(任选取代的杂环)，任选取代的-C₂-C₆烯基＝N-杂环-C₁-C₆烷基，任选取代的-CH＝N-杂环，-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_nR³⁶，-C(O)(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_nR³⁶，-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_i[O(CH₂)_i]_x(CH₂)_jR⁹⁹，-(CH₂)_jNR³⁹C(O)(CH₂)_jO(CH₂)_jOR³，-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_j(CH)(NH₂)(COOH)，-(CH₂)_jNR³⁹CH(CH₃)(CH₂)_jR⁹⁹和-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_jCOOH；

其中

每个j独立地是0至4、或者1-2的整数，

n是0-6的整数，

x是从0-6或者2-3的整数，

每个i独立地是2或3，和

上述R³⁸基团的-(CH₂)_n-部分任选被C₁-C₆烷基取代；

R³⁶是H或-(CH₂)_n3OR³⁷；

其中

n3是0-6的整数；

条件是，当R³⁶和R³⁹两个都与相同的氮连接时，则R³⁶和R³⁹两个不都直接通过氧与氮键合；

每个R³⁷独立地选自：H，C₁-C₆烷基，-(CH₂)_nO(CH₂)_aO-C₁-C₆烷基，-(CH₂)_nCH(NH)(CH₂)_nO-C₁-C₆烷基，-(CH₂)_nCH(NH)(CH₂)_nC₁-C₆烷基，-(CH₂)_nO(CH₂)_aO-C₃-C₁₀环烷基，-(CH₂)_nCH(NH)(CH₂)_nO-C₃-C₁₀环烷基和-(CH₂)_nCH(NH)(CH₂)_nC₃-C₁₀环烷基，其中每个n独立地是0至6的整数，a是2至6的整数，其中上述R³⁷基团的烷基和环烷基部分任选被一个或多个独立选择的取代基取代；

R³⁹选自H，C₁-C₆烷基，-SO₂-C₁-C₆烷基，-C(O)-C₁-C₆烷基，-C(O)O-C₁-C₆烷基，-C(O)-C₁-C₆烷基-NR³R³，-C₁-C₆烷基-O-C₁-C₆烷基，-C(O)(CH₂)_0-4O(CH₂)_1-4OC₁-C₆烷基，-C(O)-C₁-C₆烷基-OH，-C(O)-CF₃和-C(O)CH[CH(C₁-C₆烷基)₂]NR³R³和用于保护仲氨基的保护基，条件是，当R³⁶和R³⁹两个都与相同的氮连接时，则R³⁶和R³⁹两个不都直接通过氧与氮键合；

R⁹⁹在每次出现时独立地是-H、-NH₂或-OR³；

R²在每次出现时独立地选自-H和卤素；

每个R³独立地选自-H和R⁴；

R⁴是(C₁-C₆)烷基；

每个R¹³独立地选自-H，-C(O)NR³R³和C₁-C₆烷基；

Q是三至十元环体系，任选被零至四个R²⁰取代；和

每个R²⁰独立地选自-H，卤素，三卤甲基，-OR³，-S(O)_0-2R³，-S(O)₂NR³R³，-C(O)OR³，-C(O)NR³R³，-(CH₂)_0-5(杂芳基)，C₁-C₆烷基，-(CH₂)_nP(＝O)(C₁-C₆烷基)₂，其中n是0至6的整数，杂芳基和C₁-C₆烷基是任选取代的。

在按照本发明化合物的一些实施方案中，D是芳香环或杂芳香环体系，每个被1或2个独立选择的R³⁸基团取代。

在按照本发明化合物的一些实施方案中，D是5或6元杂芳香环体系，每个被1或2个独立选择的R³⁸基团取代。

在按照本发明化合物的一些实施方案中，D是6元芳香环或6元杂芳香环体系，每个被1或2个独立选择的R³⁸基团取代。

在按照本发明化合物的一些实施方案中，D是6元芳香环体系，被1或2个独立选择的R³⁸基团取代。

在按照本发明化合物的一些实施方案中，D是6元杂芳香环体系，被1或2个独立选择的R³⁸基团取代。

在按照本发明化合物的一些实施方案中，D是5元杂芳香环体系，被1或2个独立选择的R³⁸基团取代。

在本发明的一些实施方案中，D选自

其中所述基团的成员被1或2个独立选择的R³⁸基团取代。

在本发明的一些实施方案中，D选自

其中所述基团的成员被1或2个独立选择的R³⁸基团取代。

在按照本发明的一些实施方案中，D被一个R³⁸基团取代。

在本发明的一些实施方案中，D是苯基，吡啶基，咪唑基或四氢吡啶基，每个被1或2个独立选择的R³⁸基团取代。

在按照本发明的一些实施方案中，R³⁸是

在按照本发明的一些实施方案中，D是苯基，被1个R³⁸基团取代。

在按照本发明的一些实施方案中，D是吡啶基，被1或2个独立选择的R³⁸基团取代。

在按照本发明的一些实施方案中，D是吡啶基，被一个R³⁸基团取代。

在按照本发明的一些实施方案中，D是咪唑基，被一或两个R³⁸基团取代。

在按照本发明的一些实施方案中，D是咪唑基，被两个R³⁸基团取代。

在本发明的一些实施方案中，D是四氢吡啶基，被1个R³⁸基团取代。

在本发明的一些实施方案中，每个R³⁸独立地选自：C₁-C₆烷基，-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_j(CH)(CH₂)(COOH)，-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_jCOOH，-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_i[O(CH₂)_i]_x(CH₂)_jR⁹⁹，-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_nR³⁶和-C₀-C₆烷基-(任选取代的杂环)。

在本发明的一些实施方案中，每个R38独立地选自：C₁-C₆烷基，-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_i[O(CH₂)_i]_x(CH₂)_jR⁹⁹和-(CH₂)jNR³⁹(CH₂)_nR³⁶。

在本发明的一些实施方案中，每个R³⁸独立地是：-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_i[O(CH₂)_i]_x(CH₂)_jR⁹⁹或-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_nR³⁶。

在本发明的一些实施方案中，R³⁸是-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_nR³⁶，其中j是1，n是2。

在本发明的一些实施方案中，R³⁸是-(CH₂)NR³⁹(CH₂)₂OCH₃。

在本发明的一些实施方案中，R³⁸是-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_i[O(CH₂)_i]_x(CH₂)_jR⁹⁹。

在本发明的一些实施方案中，R³⁸是-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_i[O(CH₂)_i]_x(CH₂)_jR⁹⁹，其中j是1，i是2，x是2或3。

在本发明的一些实施方案中，D是吡啶基，被一个-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_nR³⁶取代，或者被一个-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_nR³⁶取代，其中j是1，且n是2。

在本发明的一些实施方案中，D是吡啶基，被一个-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_i[O(CH₂)_i]_x(CH₂)_jR⁹⁹取代，或者被一个-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_i[O(CH₂)_i]_x(CH₂)_jOMe取代，其中j是1，i是2，x是2或3。

在本发明的一些实施方案中，D是吡啶基，被一个-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_j(CH)(NH₂)(COOH)取代。

在本发明的一些实施方案中，D是吡啶基，被一个-C₀-C₆烷基-(任选取代的杂环)取代，例如-C₀-C₆烷基-(被一个氧代基团取代的杂环)。

在本发明的一些实施方案中，D是吡啶基，被一个-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_jCOOH取代。

在本发明的一些实施方案中，D是吡啶基，被一个-(CH₂)_jNR³⁹C(O)(CH₂)_jO(CH₂)_jOR³取代。

在本发明的一些实施方案中，D是四氢吡啶基，被一个任选取代的-CH＝N-杂环取代。

在本发明的一些实施方案中，D是四氢吡啶基，被一个-C(O)(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_nR³⁶取代。

在本发明的一些实施方案中，D是咪唑基，被一个C₁-C₆烷基和一个-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_nR³⁶取代。

在本发明的一些实施方案中，D是苯基，被一个-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_i[O(CH₂)_i]_x(CH₂)_jR⁹⁹取代。

在本发明的一些实施方案中，R³⁹选自H，-C(O)-C₁-C₆烷基(例如，-C(O)-Me)，-C(O)-O-C₁-C₆烷基，-C(O)-C₁-C₆烷基-NH₂，-SO₂-Me，-C(O)(CH₂)_0-4O(CH₂)_1-4OC₁-C₆烷基和-C(O)CH[CH(C₁-C₆烷基)₂]NR³R³。

在本发明的另一个实施方案中，R³⁹选自H，-C(O)-Me，-C(O)(CH₂)O(CH₂)₂OC₁烷基和-C(O)CH(CHMe₂)NH₂。

在本发明的一些实施方案中，R³⁹是H或-C(O)-Me。

在本发明的一些实施方案中，R³⁹是H。

在本发明的一些实施方案中，R³⁶是-OMe。

在本发明的一些实施方案中，R⁹⁹是-OMe。

在本发明的一些实施方案中，M是

其中

^*代表与D的连结点；和

代表与Z的连结点。

在本发明的一些实施方案中，Ar选自苯基，吡嗪，哒嗪，嘧啶和吡啶，其中所述苯基、吡嗪、哒嗪、嘧啶和吡啶中的每一个任选被0至4个R²基团取代。

在本发明的一些实施方案中，Ar是苯基，任选被0至4个R²基团、或者1或2个R²基团、或者0、1或2个卤素取代。

在本发明的一些实施方案中，Ar是苯基，被一个卤素例如一个F取代。

在本发明的一些实施方案中，G选自

在本发明的一些实施方案中，Q选自苯基，环丙基，异唑基，环己基，噻唑基，四氢呋喃，吡唑基，环丁基和环戊基，任选被零至两个R²⁰取代。

在本发明的一些实施方案中，Q是苯基，任选被一或两个R²⁰取代。

在本发明的一些实施方案中，Q是环丙基。

在本发明的一些实施方案中，Q是四氢呋喃。

在本发明的一些实施方案中，Q是任选被一个R²⁰取代的吡唑基。

在本发明的一些实施方案中，每个R²⁰独立地选自：-P(＝O)(Me)₂，甲基，卤素(例如F)，三卤甲基，甲氧基，-C(O)NH₂，杂芳基，-COOH， -SO₂HN₂，-C(O)NH₂，-COOMe，-C(O)N(H)(Me)，-C(O)N(Me)₂和-SO₂Me。

在本发明的一些实施方案中，Q被一个选自下列的R²⁰取代：-P(＝O)(Me)₂，甲基和甲氧基。

在本发明的一些实施方案中，Q是被一个-P(＝O)(Me)₂取代的苯基。在本发明的一些实施方案中，Q是被一个甲基取代的吡唑基、异唑基或噻唑基。

在本发明的一些实施方案中，D是苯基，吡啶基，咪唑基或四氢吡啶基，每个被1或2个独立选择的R³⁸基团取代；

M是

Z是-O-；

Ar是任选被0至4个R²基团取代的苯基，例如，被零至四个卤素取代；和

G选自

其中Q任选被0至4个独立选择的R²⁰取代。

在本发明的一些实施方案中，

D是被下列取代的吡啶基：-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_nR³⁶，-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_i[O(CH₂)_i]_x(CH₂)_jR⁹⁹，-C₀-C₆烷基-(任选被一或两个氧代基团取代的杂环)，-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_jCOOH，-(CH₂)_jNR³⁹CH(CH₃)(CH₂)_jR⁹⁹或-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_j(CH)(NH₂)(COOH)；

M是

Z是-O-；

Ar是任选被0至4个R²基团(例如一个F)取代的苯基；和

G是

其中Q任选被0至4个独立选择的R²⁰取代。

在本发明的一些实施方案中，

D是被下列取代的吡啶基：-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_nR³⁶，-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_i[O(CH₂)_i]_x(CH₂)_jR⁹⁹，-C₀-C₆烷基-(被一个氧代基团取代的杂环)，-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_jCOOH或-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_j(CH)(NH₂)(COOH)；

R⁹⁹是OMe；

M是

Z是-O-；

Ar是任选被0至4个R²基团取代的苯基，例如，被一个F取代的苯基；和

G是

其中

R¹³是H；和

Q是任选被1或2个独立选择的R²⁰取代的苯基，其中每个R²⁰独立地选自-P(＝O)(Me)₂，甲基，卤素(例如F)，三卤甲基，甲氧基，-C(O)NH₂，杂芳基，-COOH，-SO₂HN₂，-C(O)NH₂，-COOMe，-C(O)N(H)(Me)，-C(O)N(Me)₂和-SO₂Me，或Q是任选被甲基取代的吡唑基，或Q是环丙基，环丁基或四氢呋喃，或Q是被甲基取代的异唑基。

在本发明的一些实施方案中，

R⁹⁹是OMe；

M是

Z是-O-；

G是

其中

R¹³是H；和

Q是环丙基。

在本发明的一些实施方案中，

D是被-C₀-C₆烷基-(任选取代的杂环)取代的吡啶基；

M是

Z是-O-；

G是

其中

R¹³是H；和

Q是环丙基。

在本发明的一些实施方案中，

D是被-C₀-C₆烷基-(任选被一或两个氧代基团取代的杂环)(例如-CH₂-(被0、1或2个氧代基团取代的5或6元杂环基))取代的吡啶基；

M是

Z是-O-；

G是

其中

R¹³是H；和

Q是环丙基。

在本发明的一些实施方案中，

D是被下列取代的吡啶基：

M是

Z是-O-；

G是

其中

R¹³是H；和

Q是环丙基。

在本发明的一些实施方案中，

D是被下列取代的吡啶基：-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_i[O(CH₂)_i]_x(CH₂)_jR⁹⁹；

R⁹⁹是OMe；

M是

Z是-O-；

G是

其中

R¹³是H；和

Q是环丙基。

在本发明的一些实施方案中，

D是被一个C₁-C₆烷基和一个-(CH₂)_jNR³⁹(CH₂)_nR³⁶取代的咪唑基。

M是

Z是-O-；

Ar是任选被0至4个R²基团(例如一个F)取代的苯基；和

G是

其中Q任选被0至4个独立选择的R²⁰取代。

在本发明的一些实施方案中，

M是

Z是-O-；

G是

其中

R¹³是H；和

Q是任选被0至4个独立选择的R²⁰取代的苯基。

在本发明的一些实施方案中，

M是

Z是-O-；

G是

其中

R¹³是H；和

Q是任选被一或两个独立选自下列的基团取代的苯基：-P(O)Me₂，甲基，卤素(例如F)，三卤甲基(例如三氟甲基)，甲氧基，-C(O)NH₂和杂芳基(例如唑基)，或Q是环丙基。

上式的化合物通常可以按照下列反应路线制备。上式化合物的互变异构体和溶剂合物(例如水合物)也在本发明范围内。溶剂化的方法在本领域通常是已知的。因此，本发明的化合物可以是游离、水合物或盐形式，并且可以利用下面反应路线中所说明的方法来获得。

下列实施例和制备描述了制备和使用本发明的方法，并且是说明性的，而不是限制性的。应该理解，可以有属于如本文附加权利要求所定义的本发明的精神和范围内的其它实施方案。

按照本发明的化合物包括但不局限于下面实施例中所描述的那些化合物。化合物使用Chemdraw Ultra 10.0版或8.0.3版(可通过Cambridgesoft.com，100Cambridge Park Drive，Cambridge，MA02140获得)命名，或是由此衍生而来的。

本文提供的数据显示了本发明的激酶抑制剂的抑制效果。这些数据使人们可以合理地预期，本发明的化合物不但可以用于抑制激酶活性、蛋白酪氨酸激酶活性或其实施方案(例如，VEGF受体信号传导)，而且可以用作治疗增殖疾病(包括癌症和肿瘤生长)和眼科疾病、障碍和病症的治疗剂。

合成反应路线和试验方法

可以使用本领域普通技术人员已知的方法、按照下面说明的反应路线或实施例来制备本发明的化合物。这些反应路线用来说明可用于制备本发明化合物的一些方法。本领域技术人员能够认识到，可以使用其它普通的合成方法。本发明的化合物可以由可商购的起始组份来制备。对于起始组份，可以进行任何种类的替代，以便按照本领域技术人员清楚了解的方法获得本发明的化合物。

具体实施例

反应路线1

(2-(7-(4-氨基-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(46)

步骤1.5-(1，3-二烷-2-基)-1-甲基-1H-咪唑(38)[Shafiee A.，Rastkary N.，Jorjani M.，Shafaghi B.，Arch.Pharm.Pharm.Med.Chem.2002，2，69-76]

向1-甲基-1H-咪唑-5-甲醛(2.9g，26.3mmol)的甲苯(20mL)溶液中加入丙烷-1，3-二醇(4.01g，52.7mmol)和CSA(0.306g，1.317mmol)，并将反应混合物加热至回流，保持24小时，同时共沸除去析出的水。将反应混合物冷却至RT，用DCM稀释，用NaHCO₃溶液洗涤。然后用Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。用柱色谱纯化(80％EtOAc/己烷至EtOAc)，得到38(2.53g，57％产率) 黄色油状物，其静置时凝固为黄色固体。MS(m/z)：169.2(M+H)。

步骤2.5-(1，3-二烷-2-基)-2-碘-1-甲基-1H-咪唑(39)

在-78℃，向38(295g，1.754mmol)的无水THF(10mL)溶液中加入正丁基锂(0.772mL，1.929mmol，2.5M溶液，在己烷中)，并搅拌反应混合物20分钟。慢慢地逐滴加入碘(445mg，1.754mmol)的THF(2mL)溶液，同时保持温度在-78℃，进一步搅拌反应混合物30分钟，通过加入水猝灭反应，然后用EtOAc提取。用硫代硫酸钠溶液洗涤有机相，分离，用Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。用柱色谱纯化(20％EtOAc/己烷)，得到39(305mg，59％产率)白色固体。MS(m/z)：294.1(M+H)。

步骤3.2-(5-(1，3-二烷-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)-7-氯噻吩并[3，2-b]吡啶(40)

在-78℃，向7-氯噻吩并[3，2-b]吡啶(1)[Klemm，L.H.；Louris，J.N.；Boisvert，W.；Higgins，C.；Muchiri，D.R.；J.Heterocyclic Chem.，22，1985，1249-1252](11.7g，，69.0mmol)的THF(300mL)溶液中加入正丁基锂(30.46mL，76mmol，2.5M，在己烷中)溶液，并搅拌反应混合物10分钟。加入ZnCl₂溶液(76.15mL，76mmol，1.0M，在Et₂O中)，并在RT搅拌混合物10分钟。加入Pd(PPh₃)₄(2.287mg，0.104mmol)以及39(5.82g，19.79mmol)的THF(20mL)溶液，并在N₂氛围下将反应混合物加热至回流，保持4小时。然后将反应冷却至RT，用氢氧化铵和EtOAc稀释。收集有机相，用Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。将得到的物质用Et₂O研磨，得到标题化合物40(5.79g，87％产率)白色固体。MS(m/z)：336.1(M+H)。

步骤4.2-(5-(1，3-二烷-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)-7-(2-氟-4-硝基苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶(41)

将40(5.9g，17.57mmol)、2-氟-4-硝基苯酚(5.52g，35.1mmol)和NaHCO₃(1.346g，16.02mmol)的混合物在Ph₂O(7mL)中加热至180℃，保持4小时。将反应混合物冷却至RT，用DCM稀释，过滤，浓缩。用柱色谱纯化残余物(洗脱液EtOAc)，得到41(2.5g，31％产率)黄色固体。MS(m/z)：457.1(M+H)。

步骤5.2-(5-(二甲氧基甲基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)-7-(2-氟-4-硝基苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶(42)

向41(2.5g，5.48mmol)的MeOH(200mL)溶液中加入CSA(127mg， 0.548mmol)，并将反应混合物加热至回流，保持5小时。然后将其冷却至RT，并加入固体NaHCO₃。过滤混合物，浓缩滤液至干。将残余的固体溶于DCM中，用水洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。将得到的固体用Et₂O研磨，得到42(1.8g，74％产率)，其不用更进一步纯化就可以使用。MS(m/z)：445.1(M+H)。

步骤6.2-(7-(2-氟-4-硝基苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-甲醛(43)

向42(1.8g，4.05mmol)的丙酮(100mL)和水(100mL)溶液中加入稀HCl(20mL，2M，40.0mmol)，并在RT搅拌反应混合物过夜。然后将它浓缩至干。将残余的固体溶于DCM中，用水洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。将得到的固体用Et₂O研磨，得到43(1.3g，81％产率)，其不用另外纯化就可以使用。MS(m/z)：399.2(M+H)。

步骤7.N-((2-(7-(2-氟-4-硝基苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基)-2-甲氧基乙胺(44)

在室温，向43(1.3g，3.26mmol)的无水DCM(50mL)悬浮液中加入2-甲氧基乙胺(1.226g，16.32mmol)、乙酸(0.98g，16.32mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(3.46g，16.32mmol)，并在RT搅拌反应混合物24小时。然后将其用额外的DCM稀释，用饱和NaHCO₃溶液洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩至干，得到44(1.5g，100％产率)，为黄色油状物，其是不用另外纯化就可以在下一步使用的粗品。MS(m/z)：458.2(M+H)。

步骤8.(2-(7-(2-氟-4-硝基苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(45)

在室温，向44(1.5g，3.28mmol)的DCM(50mL)溶液中加入Boc₂O(1.073mg，4.92mmol)，并在RT搅拌反应混合物过夜。将混合物浓缩至干，用柱色谱纯化残余物(洗脱液EtOAc)，得到45(1.3g，71％产率)，为黄色固体。MS(m/z)：558.2(M+H)。

步骤9.(2-(7-(4-氨基-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(46)

向45(1.1g，0.717mmol)的MeOH(30mL)和水(10mL)溶液中加入氯化铵(211mg，3.95mmol)和锌(1.61g，17.76mmol)，并将反应混合物加热至回流，保持24小时。将反应混合物冷却至RT，然后浓缩至干。将残余物在 DCM和水之间分配，收集有机相，用Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，得到标题化合物46(1.04g，100％产率)，其是不用额外纯化就可在下一步使用的粗品。MS(m/z)：528.1(M+H)。

反应路线9

(6-(7-(4-氨基-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(126)

步骤1.N-((6-溴吡啶-3-基)甲基)-2-甲氧基乙胺(143)

向6-溴吡啶-3-甲醛(5g，26.9mmol)的DCM(40mL)溶液中加入2-甲氧基乙基胺(2.80mL，32.3mmol)。10分钟之后，将三乙酰氧基硼氢化钠(7.98g，37.6mmol)加入到混合物中，并在室温搅拌17小时。将DCM(100mL水(50mL和NH₄Cl(50mL)加入到反应混合物中。收集有机相，将水层用DCM(3x100mL)萃取。用盐水洗涤合并的有机溶液，并减压浓缩。用快速柱色谱纯化残余物，洗脱液98/2至95/5DCM/MeOH，得到标题143(2.958g，45％产率)，为棕色油状物。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ(ppm)：8.31(dd，J＝2.6，0.6Hz，1H)，7.70(dd，J＝8.2，2.6Hz，1H)，7.58(d，J＝8.4Hz，1H)，3.69(s，2H)，3.37(t， J＝5.8Hz，2H)，3.22(s，3H)，2.60(t，J＝5.8Hz，2H)。MS(m/z)：245.1(M+H)。

步骤2.(6-溴吡啶-3-基)甲基(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(144)

向143(13.072g，53.3mmol)的THF(40mL)溶液中加入焦碳酸二叔丁基酯(di-tert-butyl dicarbonate)(14.86mL，64.0mmol)。将混合物在室温搅拌16小时，减压浓缩。用快速柱色谱纯化残余物，洗脱液己烷/EtOAc：7/3、6/4、5/5，得到标题化合物144(16.196g，88％产率)，为黄色油状物。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ(ppm)：8.26(dd，J＝2.4，0.8Hz，1H)，7.64-7.58(m，2H)，4.39(s，2H)，3.40-3.33(m，4H)，3.20(s，3H)，1.41-1.31(m，9H)。MS(m/z)：345.2(M+H)。

步骤3.(6-(7-氯噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(145)

在-78℃，向7-氯噻吩并[3，2-b]吡啶(1)(8.84g，52.1mmol)的THF(100mL)溶液中加入正丁基锂(20.86mL，52.1mmol)。30分钟之后，在-78℃加入氯化锌(52.1mL，52.1mmol)(1M，在乙醚中)，并将反应混合物加热至室温。1小时之后，加入四(三苯基膦)合钯(1.004g，0.869mmol)和144(6g，17.38mmol)的THF(25mL)溶液，并将混合物加热至回流，保持1小时。然后将其在饱和NaHCO₃水溶液和EtOAc之间分配。收集有机层，用EtOAc(3x100mL)萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，并减压蒸发。用快速柱色谱纯化残余物，洗脱液己烷/EtOAc：5/5、3/3、0/10，得到化合物145(5.41g，72％产率)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δ(ppm)：8.65(d，J＝5.1Hz，1H)，8.52(d，J＝1.6Hz，1H)，8.39(s，1H)，8.27(d，J＝8.0Hz，1H)，7.80(dd，J＝8.1，2.1Hz，1H)，7.58(d，J＝5.1Hz，1H)，4.48(s，2H)，3.43-3.35(m，4H)，3.22(s，3H)，1.43-1.33(m，9H)。MS(m/z)：434.2(M+H)。

步骤4.(6-(7-(4-氨基-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(126)

向4-氨基-2-氟苯酚(1.933g，15.21mmol)的DMSO(30mL)溶液中加入叔丁醇钾(2.017g，17.97mmol)。30分钟之后，加入氯化物145(6g，13.83mmol)，并在100℃将反应混合物加热45分钟。将混合物冷却，然后在40-45℃倾倒在水(250mL)中，搅拌30分钟。过滤收集沉淀，用水(2x30mL)洗涤，干燥过夜。用Et₂O(50mL)将粗品固体研磨1小时，得到标题化合物126(4.18g，58％产率)，为褐色固体。MS(m/z)：525.2(M+H)。

反应路线14

实施例179

1-(3-(二甲基膦酰基)苯基)-3-(3-氟-4-(2-(5-((2-甲氧基乙氨基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(289)

步骤1.1-(二甲基膦酰基)-3-硝基苯(286)

在耐压瓶中，在氮气氛围中，在室温下，向1-碘-3-硝基苯(2.4g，9.6mmol)的无水1，4-二烷(24mL)溶液中加入二甲基膦氧化物[WO2005/009348](1.5g，19.2mmol)、Pd₂(dba)₃(0.44g，0.48mmol)、4，5-双(二苯基膦)-9，9-二甲基氧杂蒽(Xantphos)(0.56g，0.96mmol)和碳酸铯(4.38g，13.5mmol)。通过向溶液中鼓入氮气(10分钟)将混合物脱气。将耐压瓶封闭，并在90℃加热3小时。减压除去溶剂，通过Biotage纯化残余物(线性梯度0-20％，甲醇/乙酸乙酯；25M柱)，得到标题化合物286，为褐色固体(1.52g，7.63mmol，79％)。MS(m/z)：200.1(M+H)。

步骤2.3-(二甲基膦酰基)苯胺(287)

在氮气氛围中，在室温下，向化合物286(1.5g，7.5mmol)的甲醇(62mL) 和水(12mL)溶液中加入氯化铵(0.604g，11.3mmol)和铁(1.68g，30.1mmol)。将得到的混合物加热至回流，保持30分钟，然后通过硅藻土过滤。用甲醇冲洗硅藻土垫。将滤液和洗液合并，浓缩，通过Biotage纯化残余物(线性梯度0-20％，甲醇/二氯甲烷；25M柱)，得到化合物287，为黄色固体(1.27g，7.51mmol，定量)。MS(m/z)：170.1(M+H)。

步骤3.(6-(7-(4-(3-(3-(二甲基膦酰基)苯基)脲基)-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(288)

在氮气氛围中，在-20℃，向化合物126(反应路线6或9)(200mg，0.381mmol)的无水四氢呋喃(8mL)溶液中加入4-硝基苯基氯甲酸酯(115mg，0.572mmol)。在-20℃搅拌反应混合物2小时。在-20℃，加入3-(二甲基膦酰基)苯胺287(97mg，0.57mmol)和N，N′-二异丙基乙胺(0.200mL，1.14mmol)在无水四氢呋喃(2mL)和无水N，N′-二甲基甲酰胺(2mL)的混合物中的溶液，并使反应混合物慢慢地升温至室温，额外继续搅拌16小时。减压除去溶剂；用乙酸乙酯稀释残余物，用饱和氯化铵水溶液洗涤，用无水硫酸钠干燥，浓缩。通过Biotage纯化(线性梯度0-20％，甲醇/二氯甲烷；25M柱)，得到化合物288(230mg，0.32mmol，84％)。MS(m/z)：720.4(M+H)。

步骤4.1-(3-(二甲基膦酰基)苯基)-3-(3-氟-4-(2-(5-((2-甲氧基乙氨基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(289)

在氮气氛围中，在室温下，向化合物288(230mg，0.32mmol)的二氯甲烷(7mL)溶液中加入三氟乙酸(2.5mL，32mmol)。在室温下将反应混合物搅拌16小时。减压除去溶剂，加入饱和碳酸氢钠水溶液。用乙酸乙酯萃取水相(3X)，将合并的有机层浓缩。通过Biotage纯化残余物(线性梯度0-20％，甲醇/二氯甲烷；25M柱)，得到化合物289，为类白色固体(75.3mg，0.122mmol，38.0％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ(ppm)：9.15(s，1H)，9.06(s，1H)，8.57(d，J＝1.6Hz，1H)，8.53(d，J＝5.6Hz，1H)，8.31(s，1H)，8.23(d，J＝8.0Hz，1H)，7.92-7.83(m，2H)，7.76(dd，J＝13.2，2.4Hz，1H)，7.67-7.62(m，1H)，7.49-7.42(m，2H)，7.41-7.33(m，1H)，7.32-7.26(m，1H)，6.67(d，J＝5.6Hz，1H)，3.78(s，2H)，3.54-3.34(2H，隐藏在水信号下面)，3.24(s，3H)，2.65(t，J＝5.6Hz，2H)，1.65(d，J＝13.2Hz，6H)。MS(m/z)：620.4(M+H)。

实施例180

1-(4-(二甲基膦酰基)苯基)-3-(3-氟-4-(2-(5-((2-甲氧基乙氨基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(290)

按照上面化合物289描述的方法(实施例179)，获得化合物290。化合物290和化合物295-300的特征提供于表1中。

表1

反应路线16

实施例202

步骤1.(2-(7-(2-氟-4-(3-异丙基脲基)苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(314)

在微波反应器中，将苯胺46(200mg，0.379mmol)和2-异氰酰丙烷(64.5mg，0.758mmol)的反应混合物加热至100℃，保持15分钟。将反应混合物直接装填到Biotage(Silicycle，HR，12g柱，50-100％EA/己烷，然后MeOH/EA，0-20％)上。收集馏份，得到目标产物314(150mg，0.245mmol，64.6％产率)，为白色固体。MS：613(MH)⁺，非常弱的信号。

步骤2.1-(3-氟-4-(2-(5-((2-甲氧基乙氨基)甲基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)-3-异丙基脲(315)

在室温下，将脲314(150mg，0.245mmol)和TFA(1mL，12.98mmol)的DCM(20mL)溶液搅拌4小时，并浓缩。将残余物在EtOAc/NaHCO₃饱和溶液之间分配。过滤收集固体，并与有机层合并。浓缩混合物，并通过Biotage纯化残余物(EA/MeOH 0-40％，12g Silicycle HR柱)。收集馏份，得到目标产物315(70mg，0.137mmol，55.8％产率)，为白色固体。¹HNMR(dmso-d₆)δ(ppm)1H：8.67(s，1H)，8.48(d，1H，J＝5.5Hz)，7.91(s，1H)，7.65(dd，1H，J1＝13.7Hz，J2＝2.6Hz)，7.32(t，1H，J＝9.0Hz)，7.07(m，2H)，6.63(d，1H，J＝5.5Hz)，6.13(d，1H，J＝7.6Hz)，4.04(s，br，2H)，3.08(s，3H)，3.72(m，1H)，3.47(t，2H，J＝5.2Hz)，3.24(s，3H)，2.94(m，2H)，1.07(s，3H，1.05(s，3H)(推测是单TFA盐)。MS：513.4(MH)⁺

反应路线17

步骤4.4-(2-(5-(1，3-二烷-2-基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)-3-氟苯胺(319)

步骤1.2-溴-5-(1，3-二烷-2-基)吡啶(316)

向6-溴吡啶-3-甲醛(25g，134mmol)的甲苯(130mL)溶液中加入1，3-丙二醇(20.45g，269mmol)和10-樟脑磺酸(3.12g，13.44mmol)。将反应混合物加热至回流，同时共沸除去析出的水，保持50分钟，冷却至室温，并浓缩。将残余物在EtOAc(150mL)和饱和NaHCO₃水溶液(100mL)之间分配。收集有机相，用EtOAc(2x150mL)萃取水相。用盐水(100mL)洗涤合并的有机馏份，用Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，得到褐色固体，将其用Et₂O和己烷(10/200mL)研磨，得到中间体316(27.7g，84％产率)，为米色固体。MS(m/z)：244.1，246.1(M+H)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)(ppm)：8.40(d，J＝2.4Hz，1H)，7.35(dd，J＝8.0，2.4Hz，1H)，7.66(dd，J＝8.0，0.4Hz，1H)，5.61(s，1H)，4.15(ddd，J＝11.8，5.0，1.2Hz，2H)，3.98-3.91(m，2H)，2.028-1.95(m，1H)，1.46(d五重峰，J＝13.2，1.2Hz，1H)。

步骤2.2-(5-(1，3-二烷-2-基)吡啶-2-基)-7-氯噻吩并[3，2-b]吡啶(317)

在-5℃/-10℃，用50分钟向7-氯噻吩并[3，2-b]吡啶(1)(13.33g，79mmol)的THF(204mL)溶液中加入正丁基锂(2.5M，在己烷中，31.6mL，79mmol)。30分钟之后，在-5℃/-10℃，用50分钟加入氯化锌的醚溶液(1M，79mL，79mmol)，并将反应混合物加热至室温。45分钟之后，加入2-溴-5-(1，3-二烷-2-基)吡啶(316)(15.98g，65.5mmol)和四(三苯基膦)合钯(2.27g，1.964mmol)的THF(28mL)溶液，并将混合物加热至回流，保持2小时，冷却至室温，浓缩。将残余物用DCM(600mL)、水(500mL)和NH₄OH(100mL)稀释，在室温搅拌1小时，并分离各相。用DCM(2x100mL)萃取水相；用无水Na₂SO₄干燥合并的有机相，过滤，浓缩。用MTBE(150mL)研磨残余物，得到中间体317(12.796g，59％产率)，为米色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ(ppm)：8.66-8.65(m，2H)，8.43(d，J＝0.8Hz，1H)，8.30(d，J＝8.4Hz，1H)，7.94(d，J＝8.4Hz，1H)，7.59(dd，J＝5.0，0.6Hz，1H)，5.68(s，1H)，4.19(dd，J＝11.6，4.8Hz，2H)，3.99(t，J＝11.4Hz，2H)，2.07-2.01(m，1H)，1.49(d，J＝13.2Hz，1H)。MS(m/z)：333.1(M+H)。

步骤3.2-(5-(1，3-二烷-2-基)吡啶-2-基)-7-(2-氟-4-硝基苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶(318)

向317(22.48g，67.5mmol)的苯基醚(65mL)悬浮液中加入碳酸钠(14.32g，135mmol)和2-氟-4-硝基苯酚(15.92g，101mmol)。将反应混合物在180℃加热2小时，冷却至40℃，用DCM(300mL)稀释，在室温搅拌15分钟，过滤。收集滤液，浓缩至最小体积；加入Et₂O(200mL)，并将形成的悬浮液搅拌30分钟。过滤收集固体物质，得到中间体318(25.20g，55.6mmol，82％产率)，为米色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ(ppm)：8.63-8.62(m，2H)，8.48(dd，J＝10.6，2.6Hz，1H)，8.43(s，1H)，8.31(d，J＝8.0Hz，1H)，8.21(dt，J＝8.8，1.2Hz，1H)，7.94(dd，J＝8.4，2.0Hz，1H)，7.71(t，J＝8.6Hz，1H)，6.98(d，J＝5.2Hz，1H)，5.67(s，1H)，4.19(dd，J＝10.8，5.2Hz，2H)，3.98(td，J＝12.0，2.0Hz，2H)，2.08-1.99(m，1H)，1.46(d，J＝13.6Hz，1H)。MS(m/z)：454.2(M+H)。

方法A

向318(10g，22.05mmol)的EtOH(216mL)和水(108mL)悬浮液中加入铁粉(10.47g，187mmol)和氯化铵(1.015g，18.97mmol)。将混合物加热至回流，保持30分钟，过滤，同时加热，并用乙醚(200mL)洗涤固体。将滤液和洗液合并，浓缩，得到标题化合物319(9.62g，99％产率)，为米色固体。该物质不用额外纯化就可以在下一步(反应路线18)中使用。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ(ppm)：8.64(d，J＝2.0Hz，1H)，8.51(dd，J＝5.6，2.0Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.28(dd，J＝8.0，0.8Hz，1H)，7.93(dd，J＝8.4，2.0Hz，1H)，7.13(t，J＝9.0Hz，1H)，6.61(dd，J＝5.4，0.6Hz，1H)，6.54(dd，J＝13.2，2.4Hz，1H)，6.46(ddd，J＝8.8，2.8，0.6Hz，1H)，5.67(s，1H)，5.56(s，2H)，4.19(dd，J＝10.6，5.0Hz，2H)，3.98(td，J＝12.0，2.5Hz，2H)，2.09-1.99(m，1H)，1.49(dt，J＝13.2，1.3Hz，1H)。MS(m/z)：424.1(M+H)。

方法B

向4-氨基-2-氟苯酚(7.42g，58.4mmol)的DMSO(65mL)溶液中加入叔丁醇钾(7.75g，69.0mmol)。30分钟之后，加入中间体317(17.67g，53.1mmol)，在100℃加热反应混合物1.5小时，冷却至室温，在40-45℃倾倒在水(300mL)中，搅拌30分钟。过滤收集固体，用水(2x30mL)洗涤，干燥2小时。用乙醚(60mL)研磨该物质，得到标题化合物319(19.80g，88％产率)，为褐色固体。MS(m/z)：424.1(M+H)。

反应路线18

实施例203

1-(4-(2-(5-5，8，11，14-四氧杂-2-氮杂十五烷基吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)-3-氟苯基)-3-环丙基脲(323)

步骤1：1-(4-(2-(5-(1，3-二烷-2-基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)-3-氟苯基)-3-环丙基脲(320)

将100mL圆底烧瓶装入319(0.55g，1.3mmol)和DIPEA(0.91mL，5.2mmol)(在无水四氢呋喃(55mL)中)，得到无色溶液。将反应混合物冷却至0℃，然后加入三光气(0.154g，0.520mmol)。在0℃搅拌反应混合物1小时，然后加入环丙胺(1.8mL，26mmol)。最后，将反应混合物在室温搅拌3小时，然后浓缩。将残余物在水和乙酸乙酯之间分配，形成稠白色固体。将其通过抽滤分离，用水和乙酸乙酯冲洗，真空干燥，得到粗品320(0.65g，1.2mmol，99％产率)，其不用进一步纯化就可以使用。MS：507.2(M+H)。

步骤2：1-环丙基-3-(3-氟-4-(2-(5-甲酰基吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(321)

将320(0.65g，1.3mmol)的5∶2∶1丙酮/水/TFA(100mL)悬浮液加热至回流，保持6小时。然后将混合物冷却，浓缩。将得到的固体残余物悬浮在水中，通过抽滤分离，用乙酸乙酯洗涤，真空干燥，得到321(0.49g，1.1mmol，85％产率)，其不用进一步纯化就可以在下一步使用。MS：449.0(M+H)。

步骤3.2，5，8，11-四氧杂十三-13-胺(322)

将四乙二醇一甲基醚(10.0mL，47.5mmol)、邻苯二酰亚胺(7.20g，48.9mmol)和三苯基膦(12.8g，48.8mmol)悬浮在无水四氢呋喃(200mL)中，得到无色悬浮液。通过注射器逐滴加入偶氮二羧酸二乙基酯(8.0mL，50.5mmol)，并在室温搅拌混合物18小时。然后加入乙醇(50mL)，进一步搅拌混合物30分钟，然后减压浓缩。将残余物溶于1∶1乙酸乙酯/己烷(100mL)中，在0℃搅拌2小时，并通过抽滤将得到的白色沉淀除去。浓缩滤液(13.5g，40.0mmol，84％产率)，其不用进一步纯化就可以在下一步使用。

将上述粗品溶于乙醇(100mL)中，得到无色溶液。加入水合肼(2.3mL，40mmol)，并将混合物加热至回流，保持4小时。然后将其冷却，加入浓HCl(10.0mL)，并将混合物回流1小时以上。然后将其冷却至室温，通过抽滤除去白色沉淀，浓缩滤液。在水和乙醚之间分配残余物。用乙醚萃取水相(有机相，通过MS分析含有大部分PPh₃O(MS)，将其除去)，然后用3M NaOH(50mL)碱化至pH＝13。用氯化钠饱和水相，用二氯甲烷(～10x50mL)重复萃取。将有机萃取物干燥(MgSO₄)，浓缩，得到322(7.0g，33.8mmol，84％产率，71％，2步)。该物质不用进一步纯化就可以在随后的步骤中使用。MS(m+1)＝208.1。

步骤4：1-(4-(2-(5-5，8，11，14-四氧杂-2-氮杂十五烷基吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)-3-氟苯基)-3-环丙基脲(323)

向甲醛321(0.45g，1.0mmol)和胺322(1.4g，6.75mmol)的二氯甲烷(75mL)悬浮液中加入乙酸(0.12mL，2.0mmol)。搅拌反应混合物1小时，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.64g，3.0mmol)，并将得到的混合物搅拌18小时。然后将混合物在水和二氯甲烷之间分配，用1M NaOH和盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，减压浓缩。通过Gilson反相HPLC纯化残余物(35-75％MeOH/水，Aquasil C18，30分钟)，并冷冻干燥。将纯产物(含有一些甲酸(HPLC))在热二氯甲烷和1M NaOH之间分配。干燥(MgSO₄)有机相，过滤，浓缩，得到标题化合物323(0.264g，0.413mmol，41.1％产率)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ(ppm)¹H：8.80(s，1H)；8.57(s，1H)；8.51(d，J＝5.5，1H)；8.31(s，1H)；8.23(d，J＝8.0，1H)；7.89(dd，J＝8.0，1.5，1H)；7.73(dd，J＝13.5，2.2，1H)；7.38(t，J＝9.0，1H)；7.20(d，J＝8.2，1H)；6.67(d，J＝2.7，1H)；6.64(d，J＝5.5，1H)；3.78(s，2H)；3.56-45(m，12H)；3.41(t，J＝5.7，2H)；3.21(s，3H)；2.66(d，J＝5.7，2H)；2.58-2.51(m，1H)；0.66-0.62(m，2H)；0.44-0.41(m，2H)。LRMS：640.5(M+H)。

反应路线19

实施例204

(S)-2-氨基-6-((6-(7-(4-(3-环丙基脲基)-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基氨基)己酸(324)

向321(0.26g，0.58mmol)和N-Boc-赖氨酸(1.1g，4.6mmol)的二氯甲烷(75mL)悬浮液中加入乙酸(0.066mL，1.2mmol)。搅拌反应混合物1小时，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.37g，1.7mmol)，并将得到的混合物搅拌18小时。然后将混合物在水和二氯甲烷之间分配，通过硅藻土抽滤除去固体沉淀。产物主要是固体滤饼形式，因此，通过用1∶1二氯甲烷/甲醇洗涤将其溶解。将此溶液浓缩，并通过Gilson反相HPLC纯化残余物(35-75％MeOH/ 水，Aquasil C₁₈，30分钟)，冷冻干燥，得到BOC-保护的产物。将其溶于二氯甲烷(75mL)和三氟乙酸(3mL)中，并在室温搅拌3小时。浓缩混合物，通过Gilson反相HPLC纯化残余物(35-75％MeOH/H₂O，Aquasil C₁₈，30分钟)，冷冻干燥，得到标题化合物324(44mg，69％产率)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ(ppm) ¹H：9.02(s，1H)；8.66(s，1H)；8.53(d，J＝5.3，1H)；8.35(s，1H)；8.28(d，J＝8.4，1H)；7.98(d，J＝6.3，1H)；7.72(dd，J＝13.5，2.3，1H)；7.37(t，J＝9.0，1H)；7.21(d，J＝10.0，1H)；6.89(s，1H)；6.68(d，J＝5.3，1H)；4.00(s，2H)；2.75-2.70(m，2H)；2.55-2.52(m，1H)；2.45(m，1H)；1.70-1.30(m，6H)；0.67-0.62(m，2H)；0.44-0.40(m，2H)。LRMS：579.5(M+H)。

反应路线20

实施例205

1-环丙基-3-(3-氟-4-(2-(5-((2-(2-甲氧基乙氧基)乙氨基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲

步骤1：6-(7-(2-氟-4-硝基苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)烟甲醛(325)

在90℃，将318(2.64g，5.82mmol)在80％乙酸水溶液(42mL)中的悬浮液加热18小时。将反应混合物冷却至室温，用水稀释。通过抽滤收集得到的沉淀。将固体转入圆底烧瓶中，通过与甲苯共沸蒸馏除去水(4次)，真空干燥固体，得到325(1.76g，76％)。LRMS(M+H)：396.3

步骤2：2-(2-甲氧基乙氧基)乙胺(326)

将二乙二醇一甲醚(9.8mL，83mmol)、邻苯二酰亚胺(14.7g，100mmol)和三苯基膦(26.2g，100mmol)悬浮在无水四氢呋喃(200mL)中，得到无色悬浮液(参见反应路线18，步骤3)。通过注射器逐滴加入偶氮二羧酸二乙基酯(15.8mL，100mmol)，并在室温搅拌混合物18小时。然后加入乙醇(50mL)，进一步搅拌混合物30分钟，然后减压浓缩。将残余物溶于1∶1乙酸乙酯/己烷(100mL)中，在0℃搅拌2小时，并通过抽滤将得到的白色沉淀除去。浓缩滤液，其不用进一步纯化就可以在下一步中使用。

将上述粗品溶于乙醇(200mL)中，得到无色溶液。加入水合肼(5.1mL，104mmol)，并将混合物加热至回流，保持4小时。然后将其冷却，加入浓HCl(16mL)，并将混合物回流1小时以上。然后将其冷却至室温，通过抽滤除去白色沉淀，浓缩滤液。在水和乙酸乙酯之间分配残余物。用乙酸乙酯萃取水相(有机相，含有大部分PPh₃O(MS)，将其除去)，然后用3M NaOH(50mL)碱化至pH＝13。用氯化钠饱和水相，用二氯甲烷(～10x50mL)重复萃取。将有机提取物干燥(MgSO₄)，浓缩，得到326(6.6g，56mmol，67％产率，2步)。该物质不用进一步纯化就可以在随后的反应中使用。MS(m+1)＝120.2。

步骤3：N-((6-(7-(2-氟-4-硝基苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基)-2-(2-甲氧基乙氧基)乙胺(327)

在室温下，将甲醛325(0.50g，1.3mmol)、胺326(0.30g，2.5mmol)和乙酸(0.14mL，2.5mmol)在二氯甲烷(20mL)中的悬浮液搅拌1小时。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.80g，3.8mmol)，并在室温搅拌16小时。然后进一步加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.0g)，并继续搅拌2小时。在二氯甲烷和1NNaOH之间分配反应混合物。过滤除去黄色悬浮液，并用二氯甲烷和1N NaOH冲洗。用无水硫酸钠干燥有机萃取物，过滤，浓缩。通过Biotage纯化残余物(线性梯度0-20％，甲醇/二氯甲烷；Snap 100g柱)，得到327(280mg，0.562mmol，44％)，为黄色固体。LRMS(M+H)：499.4

步骤4：(6-(7-(2-氟-4-硝基苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-(2-甲氧基乙氧基)乙基)氨基甲酸叔丁基酯(328)

在室温下，向化合物327(0.28g，0.56mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液中加入三乙胺(0.25mL，1.7mmol)、DMAP(0.017g，0.14mmol)和Boc₂O(0.26g，1.1mmol)。在室温下搅拌反应混合物2小时，然后用水、饱和氯化铵和盐水顺序洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩。用硅胶色谱纯化残余物(乙酸乙酯)，得到化合物328(0.20g，60％产率)。LRMS(M+H)：599.5

步骤5：(6-(7-(4-氨基-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-(2-甲氧基乙氧基)乙基)氨基甲酸叔丁基酯(329)

向硝基化合物328(0.20g，0.33mmol)的MeOH(75mL)溶液中加入铁屑(0.37g，6.7mmol)和氯化铵(0.089g，1.7mmol)(在水(5mL)中)。将得到的混合物加热至回流，保持4小时，然后冷却，通过硅藻土过滤，浓缩。将残余物在乙酸乙酯和水之间分配，用盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩。产物329(0.18g，95％)是可以在下一步中使用的粗品。LRMS(M+H)：569.5

步骤6：(6-(7-(4-(3-环丙基脲基)-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-(2-甲氧基乙氧基)乙基)氨基甲酸叔丁基酯(330)

在0℃，向胺330(0.17g，0.30mmol)和DIPEA(0.16mL，0.12g，0.90mmol)的四氢呋喃(25mL)溶液中加入三光气(0.035g，0.12mmol)，并将得到的溶液在0℃搅拌1小时。加入环丙胺(0.26g，4.6mmol)，并将混合物加热至室温，搅拌18小时，然后减压浓缩。将残余物在二氯甲烷和水之间分配，用饱和NH₄Cl_(aq)和盐水洗涤有机相，用MgSO₄干燥，过滤，浓缩，得到粗品330(0.15g，77％产率)。LRMS(M+H)：652.6

步骤7：1-环丙基-3-(3-氟-4-(2-(5-((2-(2-甲氧基乙氧基)乙氨基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(331)

将化合物330(0.15g，0.23mmol)溶于二氯甲烷(20mL)和三氟乙酸(0.9mL)中，并将反应混合物在室温搅拌12小时。浓缩混合物，通过Gilson反相HPLC纯化残余物(40-80％MeOH/H₂O，Aquasil C18，30分钟)，冷冻干燥。将纯产物(含有一些甲酸(HPLC))在热二氯甲烷和1M NaOH之间分配。干燥 (MgSO₄)有机相，过滤，浓缩，得到标题化合物331(0.110g，72％产率)(尽管用NaOH处理，仍得到单TFA盐)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ(ppm)¹H：8.84(s，1H)；8.65(d，J＝1.3，1H)；8.53(d，J＝5.5，1H)；8.37(s，1H)；8.30(d，J＝8.2，1H)；7.99(dd，J＝8.2，2.0，1H)；7.73(dd，J＝13.7，2.5，1H)；7.38(t，J＝9.0，1H)；7.22-7.18(m，1H)；6.68-6.64(m，2H)；4.03(s，2H)；3.60-3.52(m，4H)；3.48-3.44(m，2H)；3.25(s，3H)；2.92-2.88(m，2H)；2.55(七重峰，J＝3.1，1H)；0.69-0.62(m，2H)；0.44-0.40(m，2H)。LRMS：(M+H)：552.5。

反应路线21

实施例206和207

4-((6-(7-(4-(3-环丙基脲基)-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基氨基)丁酸(332)，和1-环丙基-3-(3-氟-4-(2-(5-((2-氧代吡咯烷-1-基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(333)

向甲醛321(0.20g，0.45mmol)和4-氨基丁酸(1.0g，9.7mmol)的二氯甲烷(75mL)悬浮液中加入乙酸(0.051mL，0.89mmol)。搅拌反应混合物1小时，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.38g，1.8mmol)，并将得到的混合物搅拌18小时。然后将混合物在水和二氯甲烷之间分配，通过硅藻土抽滤除去固体沉淀。MS分析显示：环化产物333在滤液中，而酸产物332主要在固体滤饼中。将滤液中的有机相浓缩，通过硅胶色谱纯化残余物(10％MeOH/乙酸乙酯)，提供纯333(35mg，15％产率)。通过用1∶1二氯甲烷/甲醇洗涤，将硅藻土滤饼中的产物溶解。浓缩此溶液，通过Gilson反相HPLC纯化残余物(35-75％MeOH/H₂O，Aquasil C₁₈，30分钟)，冷冻干燥，得到酸332(44mg，69％产率)。化合物332和333的表征提供于下面。

化合物332(实施例206)：¹H NMR(DMSO-d₆)δ(ppm)¹H：9.23(s，1H)；8.58(s，1H)；8.51(d，J＝5.4，1H)；8.36(s，1H)；8.32(s，1H)；8.24(d，J＝8.2，1H)；7.91(dd，J＝8.4，2.0，1H)；7.74(dd，J＝13.7，2.3，1H)；7.37(t，J＝9.0，1H)；7.22(d，J＝9.0，1H)；6.63(d，J＝5.3，1H)；3.79(s，2H)；2.56(t，J＝5.1，2H)；2.47-2.43(m，1H)；2.27(t，J＝7.2，2H)；1.65(五重峰，J＝6.7，2H)；0.66-0.61(m，2H)；0.44-0.40(m，2H)。LRMS：(M+H)536.4。

化合物333(实施例207)：¹H NMR(DMSO-d₆)δ(ppm)¹H：8.76(s，1H)；8.52(s，1H)；8.52(d，J＝5.5，1H)；8.35(s，1H)；8.26(d，J＝8.2，1H)；7.79(dd，J＝8.2，2.1，1H)；7.73(dd，J＝13.5，2.5，1H)；7.38(t，J＝9.2，1H)；7.20(d，J＝8.4，1H)；6.65(d，J＝5.3，1H)；6.62(s，1H)；4.46(s，2H)；3.30-3.20(t，2H，被水峰遮蔽？)；2.55(五重峰，J＝3.3，1H)；2.31(t，J＝7.8，2H)；1.95(五重峰，J＝7.6，2H)；0.67-0.62(m，2H)；0.45-0.40(m，2H)。LRMS：(M+H)518.4

反应路线22

实施例208和209

步骤1.(S)-1-环丙基-3-(3-氟-4-(2-(5-((1-甲氧基丙-2-基氨基)甲基)-吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(334)

在室温，在氮气氛围中，向甲醛321(336mg，0.749mmol)、(S)-1-甲氧基-2-氨基丙胺(200mg，2.248mmol)和乙酸(68mg，1.124mmol)的DCM(20mL)搅拌悬浮液中加入NaBH(OAc)₃(418mg，1.873mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，并用10％HCl溶液淬灭。分离各层；收集水层，用DCM洗涤两次，用4N NaOH碱化(pH12)，形成悬浮液，将其搅拌30分钟。过滤收集固体，用水冲洗，空气干燥，通过硅胶快速柱色谱纯化(洗脱液2％氢氧化铵-MeOH/DCM：10/90)，得到标题化合物334(182mg，0.35mmol，46％产率)，为黄色绒毛状固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ(ppm)：8.71(s，1H)，8.58(d，J＝1.6Hz，1H)，8.51(d，J＝5.5Hz，1H)，8.31(s，1H)，8.23(d，J＝8.2Hz，1H)，7.91(dd，J＝8.2，2.2Hz，1H)，7.73(dd，J＝13.6，2.4Hz，1H)，7.38(t，J＝9.0Hz，1H)，7.23-7.17(m，1H)，6.64(d，J＝5.5Hz，1H)，6.57(bd，J＝2.7Hz，1H)，3.84(d，J＝14.5Hz，1H)，3.78(d，J＝14.5Hz，1H)，3.27(dd，J＝9.4，6.3Hz，1H)，3.24(s，3H)，3.19(dd，J＝9.2，5.5Hz，1H)，2.81-2.71(m，1H)，2.59-2.51(m，1H)，2.36-2.10(m，1H)，0.98(d，J＝6.3Hz，3H)，0.69-0.62(m，2H)，0.46-0.40(m，2H)。MS(m/z)：522.4(M+H)。

步骤2.(S)-N-((6-(7-(4-(3-环丙基脲基)-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基)-N-(1-甲氧基丙-2-基)乙酰胺(335)

将脲334(66mg，0.127mmol)的乙酸酐(2mL)悬浮液在室温搅拌2天。通过加入甲醇和水来猝灭反应混合物，并用AcOEt分配。分离之后，收集有机层，用水、1N NaOH(x4)、水和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩。通过硅胶快速柱色谱纯化粗品(洗脱液2％氢氧化铵-MeOH/DCM：05/90至10/90)，得到标题化合物335(46mg，0.08mmol，64％产率)，为类白色绒毛状固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ(ppm)：旋转异构体的混合物，8.70(s，1H)，8.58-8.48(m，2H)，8.34和8.30(2s，1H)，8.27和8.19(2d，J＝8.3Hz，1H)，7.85-7.69(m，2H)，7.38(t，J＝9.0Hz，1H)，7.20(bd，J＝9.0Hz，1H)，6.67-6.54(m，2H)，4.74-4.16(m，3H)，3.41-3.22(m，2H)，3.15和3.13(2s，3H)，2.59-2.52(m，1H)，2.16和1.96(2s，3H)，1.09和1.04(2d，J＝6.9Hz，3H)，0.72-0.58(m，2H)，0.50-0.36(m，2H)。MS(m/z)：564.4(M+H)。

反应路线23

实施例210

N-(3-氟-4-(2-(5-((2-甲氧基乙氨基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)环丙烷甲酰胺(337)

步骤1.(6-(7-(4-(环丙烷甲酰氨基)-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(336)

在氮气氛围中，在0℃，向苯胺126(200mg，0.36mmol)的DCM(10mL)溶液中加入DIPEA(127μl，0.72mmol)和环丙羰基氯(50μL，0.54mmol)。将反应混合物慢慢地加热至室温，在室温下搅拌过夜。在AcOEt中稀释反应混合物，连续地用饱和氯化铵水溶液(x4)、1N NaOH(x2)、水和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩。将粗品残余物在最少量的AcOEt/己烷中共沉淀。过滤收集固体，用己烷冲洗，空气干燥，高真空干燥，得到标题化合物A(定量产率)，为淡褐色固体。MS(m/z)：593.4(M+H)。

步骤2.N-(3-氟-4-(2-(5-((2-甲氧基乙氨基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)环丙烷甲酰胺(337)

向酰胺336(215mg，粗品混合物)的DCM(10mL)溶液中加入TFA(2mL)。在室温下搅拌反应混合物2小时，浓缩，在水和AcOEt之间分配，用1N NaOH溶液碱化。分离各层之后，收集有机层，用1N NaOH(x2)、水和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩。通过硅胶快速柱色谱纯化残余物(洗脱液：2％氢氧化铵-MeOH/DCM：05/95至15/95)，得到标题化合物336(87mg，0.177mmol，48％产率)赭色粘性固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ(ppm)：10.57(s，1H)，8.57(d，J＝1.6Hz，，1H)，8.52(d，J＝5.5Hz，1H)，8.32(s，1H)，8.23(d，J＝8.0Hz，1H)，7.93-7.83(m，2H)，7.47(t，J＝8.9Hz，1H)，7.41(dd，J＝8.9，2.0，1H)，6.66(d，J＝5.3Hz，1H)，3.78(s，2H)，3.41(t，J＝5.6Hz，2H)，3.24(s，3H)，2.66(t，J＝5.7Hz，2H)，1.79(五重峰，J＝6.2Hz，1H)，0.90-0.80(m，4H)，有一个NH缺失。MS(m/z)：493.4(M+H)。

反应路线24

实施例340和341

(6-(7-(4-(3-环丙基脲基)-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-甲氧基乙基)氨基甲酸甲酯(340)和

(R)-2-氨基-N-((6-(7-(4-(3-环丙基脲基)-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基)-N-(2-甲氧基乙基)-3-甲基丁酰胺(341)

步骤1：(6-(7-(4-(3-环丙基脲基)-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(338)

在0℃，向胺126(0.24g，0.46mmol)的四氢呋喃(60mL)溶液中加入三光气(0.054g，0.18mmol)，并将得到的溶液在0℃搅拌1小时。顺序加入DIPEA(0.40mL，0.30g，2.3mmol)和环丙胺(0.26g，4.6mmol)，并将混合物加热至室温，搅拌3小时，然后减压浓缩。将残余物在二氯甲烷和水之间分配，收集有机相，用饱和NH₄Cl_(aq)和盐水洗涤，用MgSO₄干燥，过滤，浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化残余物(乙酸乙酯至5％甲醇/乙酸乙酯)，得到338(0.19g，67％产率)。MS(m/z)：608.4(M+H)。

步骤2：1-环丙基-3-(3-氟-4-(2-(5-((2-甲氧基乙氨基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(339)

向338(0.19g，0.31mmol)的二氯甲烷(40mL)溶液中加入TFA(3mL)。将溶液搅拌6小时，然后浓缩。在98∶2二氯甲烷/甲醇混合物和1M NaOH_(aq)之间分配残余物，用盐水洗涤，用MgSO₄干燥，过滤，浓缩。将得到的油状物用乙醚和乙酸乙酯研磨，得到339(0.13g，82％产率)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ(ppm)：¹H：8.80(s，1H)；8.57(s，1H)；8.51(d，J＝5.5，1H)；8.31(s，1H)；8.23(d，J＝8.0，1H)；7.89(dd，J＝8.0，1.5，1H)；7.73(dd，J＝13.5，2.2，1H)；7.38(t，J＝9.0，1H)；7.20(d，J＝8.2，1H)；6.66-6.62(m，2H)；3.78(s，2H)；3.41(t，J＝5.7，2H)；3.24(s，3H)；2.65(d，J＝5.7，2H)；2.57-2.51(m，1H)；0.66-0.62(m，2H)；0.44-0.41(m，2H)。MS(m/z)：508.3(M+H)。

步骤3.(6-(7-(4-(3-环丙基脲基)-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-甲氧基乙基)氨基甲酸甲酯(340)

向化合物339(220mg，0.433mmol)和氯甲酸甲酯(50.2μl，0.65mmol)的THF(4mL)溶液中加入DIPEA(227μl，1.30mmol)，并在室温下搅拌该混合物18小时。减压除去溶剂，用MeOH研磨残余物，过滤收集固体悬浮液，通过Biotage纯化(线性梯度0-20％，甲醇/二氯甲烷；Snap 25g柱)，得到化合物340(123.1mg，0.218mmol，50.2％产率)米色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ(ppm)：8.70(s，1H)，8.56-8.50(m，2H)，8.33(s，1H)，8.25(d，J＝8.0Hz，1H)，7.84-7.77(m，1H)，7.73(dd，J＝13.6，2.4Hz，1H)，7.38(t，J＝9.2Hz，1H)，7.20(dd，J＝8.8，1.2Hz，1H)，6.65(d，J＝5.6Hz，1H)，6.56(d，J＝2.8Hz，1H)，4.54(s，2H)，3.64(s，2H)，3.44(s，3H)，3.22(s，2H)，2.59-2.51(m，1H)，0.69-0.62(m，2H)， 0.46-0.40(m，2H)。MS(m/z)：566.4(M+H)。

步骤4：(R)-2-氨基-N-((6-(7-(4-(3-环丙基脲基)-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基)-N-(2-甲氧基乙基)-3-甲基丁酰胺(341)

向339(48mg，0.095mmol)、N-Boc-缬氨酸(41mg，0.19mmol)和DIPEA(0.083mL，0.47mmol)的DMF(20mL)溶液中加入HATU(90mg，0.236mmol)。在室温下将得到的溶液搅拌3小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配，用1M HCl和盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，浓缩，得到粗品Boc-保护的产物。将该物质溶于二氯甲烷(75mL)和三氟乙酸(3mL)中，并在室温搅拌3小时。然后浓缩混合物，通过Gilson反相HPLC纯化残余物(35-95％MeOH/H₂O，Aquasil C₁₈，30分钟)，冷冻干燥。将残余物(含有一些甲酸(HPLC))在二氯甲烷和1M NaOH之间分配。干燥(MgSO₄)有机相，过滤，浓缩，得到341(18mg，50％产率)，通过1H NMR证明其是旋转异构体的7∶3混合物。¹HNMR(DMSO-d₆)δ(ppm)¹H：8.73(s，1H)；8.57-8.51(m，2H)；8.36(s，0.3H)；8.32(s，0.7H)；8，29-8.24(m，1H)；7.84-7.71(m，2H)；7.38(t，J＝8.8，1H)；7.21(d，J＝8.3，1H)；6.66-6.64(m，1H)；6.59(s，1H)；4.90(d，J＝17.6，0.3H)；4.73(d，J＝15.6，0.7H)；4.64(d，J＝17.1，0.3H)；4.53(d，J＝15.6，0.7H)；3.73-3.39(m，5H)；3.25(s，2.2H)；3.22(s，1.1H)；2.58-2.52(m，1H)；1.80-1.70(m，1H)；0.89-0.84(m，6H)；0.68-0.64(m，2H)；0.45-0.41(m，2H)。LRMS：(M+H)607.5。

反应路线25

实施例213和214

N¹-(3-氟-4-(2-(5-((2-甲氧基乙氨基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)-N³-(3-(甲基磺酰基)苯基)丙二酰胺(345)和

N ¹ -(3-氟-4-(2-(5-((N-(2-甲氧基乙基)乙酰氨基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)-N ³ -(3-(甲基磺酰基)苯基)丙二酰胺(346)

步骤1：3-(4-(2-(5-((叔丁氧羰基(2-甲氧基乙基)氨基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)-3-氟苯基氨基)-3-氧代丙酸甲酯(342)

在室温下，向化合物126(480mg，0.915mmol)和DIPEA(479μl，2.74mmol)的DCM(9mL)溶液中加入甲基丙二酰氯(196μl，1.83mmol)。搅拌混合物18小时。加入饱和氯化铵水溶液，用DCM萃取水相两次。合并有机层，用无水硫酸钠干燥，浓缩。通过Biotage纯化残余物(线性梯度0-20％，甲醇/二氯甲烷；Snap 50g柱)，得到化合物342(540mg，0.86mmol，94％产率)，黄色油状物。MS(m/z)：625.5(M+H)。

步骤2.3-(4-(2-(5-((叔丁氧羰基(2-甲氧基乙基)氨基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)-3-氟苯基氨基)-3-氧代丙酸(343)

向化合物342(540mg，0.864mmol)的THF(12mL)和水(6mL)溶液中加入LiOH一水合物(363mg，8.64mmol)。在室温下搅拌混合物48小时，减压除去THF。将水溶液用水(10ml)稀释，使用1N HCl酸化至pH 4。过滤悬浮液，高真空干燥沉淀，得到化合物343(485mg，0.79mmol，92％产率)，为米色固体。MS(m/z)：611.5(M+H)。

步骤3和4.N ¹ -(3-氟-4-(2-(5-((2-甲氧基乙氨基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)-N ³ -(3-甲基磺酰基)苯基)丙二酰胺(345)

向化合物343(120mg，0.197mmol)、3-甲基磺酰基苯胺盐酸盐(82mg，0.393mmol)和DIPEA(172μl，0.983mmol)的DMF(4mL)溶液中加入BOP试剂(261mg，0.59mmol)，并在室温下搅拌混合物18小时。加入饱和氯化铵水溶液，用乙酸乙酯萃取水相两次。用盐水洗涤合并的有机萃取物，用无水硫酸钠干燥，减压除去溶剂。通过Biotage纯化残余物(线性梯度0-20％，甲醇/二氯甲烷；Snap25g柱)，得到化合物344黄色固体(未鉴定)，将其溶于DCM(10ml)中，并用TFA(4.5mL，59mmol)处理。在室温下搅拌混合物18小时。减压除去溶剂，用乙酸乙酯稀释残余物，用1N NaOH萃取有机层。用乙酸乙酯萃取水相3次，将合并的有机层浓缩。通过Biotage纯化残余物(线性梯度0-30％，甲醇/二氯甲烷；Snap50g柱)，得到化合物345(39mg，0.059mmol，29.9％产率)，为米色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ(ppm)：10.65(s，1H)，10.61(s，1H)，8.57(d，J＝1.6Hz，1H)，8.52(d，J＝5.2Hz，1H)，8.33(s，1H)，8.28(s，1H)，8.24(d，J＝8.0Hz，1H)，7.92-7.85(m，3H)，7.66-7.60(m，2H)，7.51(t，J＝8.8Hz，1H)，7.45(dd，J＝9.2，1.6Hz，1H)，6.68(dd，J＝5.2，0.8Hz，1H)，3.79(s，2H)，3.57(s，2H)，3.41(t，J＝5.6Hz，2H)，3.24(s，3H)，3.21(s，3H)，2.66(t，J＝5.6Hz，2H)。MS(m/z)：664.5(M+H)。

步骤5.N ¹ -(3-氟-4-(2-(5-((N-(2-甲氧基乙基)乙酰氨基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)-N ³ -(3-(甲基磺酰基)苯基)丙二酰胺(346)

将化合物345(18.5mg，0.028mmol)的乙酸酐(1.31mL，13.9mmol)溶液在室温下搅拌60小时。减压除去溶剂，并用水研磨残余物3小时。过滤固体悬浮液，用水冲洗沉淀，高真空干燥，得到化合物346(6.4mg，9.07？mol，32.5％)，为米色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ(ppm)：旋转异构体的混合物，10.64(s，1H)，10.60(s，1H)，8.55-8.49(m，2H)，8.38-8.21(m，3H)，7.91-7.86(m，2H)，7.78(td，J＝8.8，2.0Hz，1H)，7.66-7.60(m，2H)，7.51(t，J＝8.8Hz，1H)，7.44(dd，J＝9.2，1.6Hz，1H)，6.71-6.67(m，1H)，4.71和4.59(2s，2H)，3.58-3.23(m，14H)，3.21(s，3H)，2.13和2.05(2s，3H)。.MS(m/z)：706.5(M+H)。

反应路线26

实施例215

N-((2-(7-(4-(3-环丙基脲基)-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基)-N-(2-甲氧基乙基)甲磺酰胺(349)

步骤1：(2-(7-(4-(3-环丙基脲基)-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(347)

向苯胺46(400mg，0.758mmol)溶液中加入三光气(1125mg，5eq，3.79mmol)和iPr₂NEt(490mg，5eq，3.79mmol)，并在室温搅拌反应混合物一小时。加入环丙胺(6103mg，141eq，107mmol)，并在室温搅拌反应混合物过夜。浓缩混合物，然后用DCM稀释，用水洗涤。收集有机相，用Na₂SO₄干燥，过滤，蒸发。用柱色谱纯化残余物(洗脱液20％MeOH/EtOAc)，得到目标化合物347，为黄色油状物(426mg，92％产率)。MS(m/z)＝611.4(M+H)。

步骤2：1-环丙基-3-(3-氟-4-(2-(5-((2-甲氧基乙氨基)甲基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(348)

向347(426mg，0.698mmol)的DCM(10mL)溶液中加入HCl/二烷(0.7mL，4.01eq，2.80mmol，4M，在二烷中)，并在室温搅拌反应混合物3小时。将混合物用水稀释，并加入固体NaHCO₃。用EtOAc充分萃取反应混合物，然后收集有机相，用Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。用柱色谱纯化残余物(洗脱液：25％MeOH/EtOAc至50％MeOH/EtOAc)，得到目标化合物348，为黄色粉末(211mg，59％产率)。MS(m/z)＝511.4(M+H)。

步骤3：N-((2-(7-(4-(3-环丙基脲基)-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基)-N-(2-甲氧基乙基)甲磺酰胺(349)

向胺348(61mg，0.119mmol)的DCM(5mL)悬浮液中加入甲磺酰氯(20.53mg，1.5eq，0.179mmol)和iPr₂NEt(46.3mg，3eq，0.358mmol)，并在室温搅拌反应混合物3小时。用EtOAc稀释混合物，然后用饱和NH₄Cl溶液、饱和NaHCO₃溶液和盐水洗涤。收集有机相，用Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。用柱色谱纯化残余物(洗脱液：25％MeOH/EtOAc)，得到目标化合物349，为浅黄色固体(34mg，48％)。¹H NMR(d₆DMSO)8.27(s，1H)，8.10(d，J＝5.48Hz，1H)，7.53(s，1H)，7.25(m，1H)，6.95(t，J＝9.0Hz，1H)，6.76(m，1H)，6.71(s，1H)，6.24(d，J＝5.48Hz，1H)，6.14(s，1H)，4.06(s，2H)，3.49(s，3H)，2.72(s，3H)，2.63(s，3H)，2.12(m，3H)，0.23(m，2H)，0.00(s，2H)。

反应路线27

实施例216

步骤1：(2-(7-(4-(3-(2，4-二氟苯基)脲基)-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(350)

向苯胺46(500mg，0.948mmol)的DCM(10mL)溶液中加入2，4-二氟-1-异氰酰苯(441mg，3eq，2.84mmol)，并在室温搅拌反应混合物24小时。浓缩混合物，通过柱色谱纯化(洗脱液：10％MeOH/EtOAc)，得到350(600mg，93％)，为白色固体。MS(m/z)＝683.7(M+H)

步骤2：1-(2，4-二氟苯基)-3-(3-氟-4-(2-(5-((2-甲氧基乙氨基)甲基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(351)

向350(600mg，0.879mmol)的DCM(15mL)溶液中加入HCl/二烷(2mL，7.17eq，8mmol，4M，在二烷中)，并在室温搅拌反应混合物3小时。将混合物用水稀释，并加入固体NaHCO₃。用EtOAc充分萃取反应混合物，然后收集有机相，用Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。用EtOAc研磨残余物，得到目标化合物351，为类白色固体(314mg，61％产率)。¹H NMR(d₆-DMSO)：10.90(s，1H)，8.89(s，1H)，8.50(d，J＝5.48Hz，1H)，7.98(m，1H)，7.95(s，1H)，7.72(m，1H)，7.41(m，1H)，7.28-7.20(m，3H)，7.04(m，1H)，6.68(d，J＝5.28Hz，1H)，4.28(s，2H)，3.92(s，3H)，3.61(m，2H)，3.27(s，3H)，3.13(m，2H)。

步骤3：(S)-1-(((2-(7-(4-(3-(2，4-二氟苯基)脲基)-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基)(2-甲氧基乙基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁基酯(352)

向化合物351(280mg，0.481mmol)的DMF(10mL)溶液中加入(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-甲基丁酸(209mg，2eq，0.961mmol)、iPr₂NEt(0.252mL，3eq，0.1.442mmol)和HATU(365mg，2eq，0.961mmol)，并将反应混合物搅拌过夜。用EtOAc稀释反应混合物，用水、饱和NAHCO₃溶液、然后盐水洗涤。收集有机相，用Na₂SO₄干燥，过滤，然后浓缩。用柱色谱纯化残余物(洗脱液：20％MeOH/EtOAc)，得到目标化合物352，为类白色固体(200mg，53％产率)。MS(m/z)＝782.7(M+H)。

步骤4：(S)-2-氨基-N-((2-(7-(4-(3-(2，4-二氟苯基)脲基)-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基)-N-(2-甲氧基乙基)-3-甲基丁酰胺(353)

向化合物352(200mg，0.256mmol)的DCM(10mL)悬浮液中加入HCl/二烷(0.7mL，10.95eq，2.80mmol，4M，在二烷中)，并在室温搅拌反应混合物3小时。将混合物用水稀释，并加入固体NaHCO₃。用EtOAc萃取反应混合物，然后收集有机相，用Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。用柱色谱纯化残余物(洗脱液：30％MeOH/EtOAc)，得到目标化合物353，为浅黄色粉末(155mg，89％产率)。¹H NMR(d₆-DMSO)9.36(s，1H)，8.60(s，1H)，8.49(m，1H)，8.01(m，1H)，7.87(s，1H)，7.71(m，1H)，7.41(t，J＝8.99Hz，1H)，7.31(m，1H)，7.20(m，1H)，7.02(m，1H)，6.98(s，1H)，6.65(d，J＝5.09Hz，1H)，4.83(d，J＝15.65Hz，1H)，4.48(d，J＝15.65Hz，1H)，3.81(s，1H)，3.80(s，2H)，3.40(m，1H)，3.39-3.295(m，6H)，1.71(m，2H)，0.81(m，6H)。

反应路线28

实施例217

N1-(3-氟-4-(2-(5-((2-甲氧基乙氨基)甲基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)-N3-(2-氟苯基)丙二酰胺(355)

步骤1.(2-(7-(2-氟-4-(3-(2-氟苯基氨基)-3-氧代丙酰氨基)苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(354)

向苯胺46(300mg，0.569mmol)、酸2(224mg，1.137mmol)和DIPEA(0.397mL，2.274mmol)的DMF(15mL)溶液中加入HATU(540mg，1.422mmol)。在室温搅拌反应混合物16小时，然后在乙酸乙酯和水之间分配；收集有机层，用水、1M NaOH和盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，然后过滤，浓缩。通过Biotage纯化残余物(洗脱液：1-30％MeOH/EA，Silicycle 12g柱)，得到354(230mg，0.325mmol，57.2％产率)，为米色固体。

TLC：R_f＝0.35(洗脱液：10％MeOH/EtOAc)，

步骤2.N1-(3-氟-4-(2-(5-((2-甲氧基乙氨基)甲基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)-N3-(2-氟苯基)丙二酰胺(355)

向354(230mg，0.325mmol)的DCM(3mL)溶液中加入TFA(0.5mL)。在室温下搅拌反应混合物过夜，然后浓缩。将残余物在EtOAc和NaHCO₃饱和溶液之间分配。收集有机层，干燥，浓缩。通过Biotage纯化残余物(0-50％MeOH/EA；10g SNAP柱)，得到微红固体，将其再次通过快速柱色谱纯化(洗脱液：MeOH/EA，20-25％)，得到浅黄色固体，将其用乙醚研磨，得到标题化合物355(80mg，0.132mmol，40.5％产率)，为类白色固体。HNMR(dmso)d(ppm)1H：10.53(s，1H)，10.01(s，1H)，8.47(d，1H，J＝5.5Hz)，7.95(m，1H)，7.85-7.81(m，2H)，7.46(t，1H，J＝8.8Hz)，7.39(d，1H，J＝10.9Hz)，7.15-7.09(m，2H)，6.91(s，1H)，6.65(d，1H，J＝5.5Hz)，3.81(s，3H)，3.72(s，2H)，3.58(s，2H)，3.35(t，2H，J＝5.6Hz)，3.20(s，3H)，2.64(t，2H，J＝5.6Hz)。MS：607.2(MH)⁺。

实施例218

2-氟-N-(3-氟-4-(2-(5-((2-甲氧基乙氨基)甲基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)苯甲酰胺(357)

步骤1.(2-(7-(2-氟-4-(2-氟苯甲酰氨基)苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(356)

在0℃，向苯胺46(300mg，0.569mmol)的DCM(10mL)溶液中加入 DIPEA(0.199mL，1.137mmol)和2-氟苯甲酰基氯(135mg，0.853mmol)，并在室温下搅拌该悬浮液过夜。将反应混合物浓缩，并将残余物在EtOAc和水之间分配。收集有机层，干燥，浓缩。使用Biotage纯化残余物(洗脱液：EtOAc，25g Silicycle HR柱)，提供标题化合物356(400mg，0.616mmol，定量产率)，为白色固体。

MS：650(MH)+。

步骤2.2-氟-N-(3-氟-4-(2-(5-((2-甲氧基乙氨基)甲基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)苯甲酰胺(357)

将356(400mg，0.616mmol)和TFA(0.047mL，0.616mmol)的DCM(15mL)溶液在室温下搅拌过夜，然后浓缩。将残余物在EtOAc和NaHCO₃饱和溶液之间分配。在两个层中都发现了产物。将有机层合并，浓缩。用MeOH萃取残余物，滤出无机固体。浓缩滤液，使用Biotage纯化残余物(洗脱液：MeOH/EtOAc，10-50％，25g Silicycle柱)，得到固体，将其用EtOAc/乙醚的混合物研磨，得到358(40mg，0.073mmol，11.82％产率)，为白色固体。HNMR：(dmso)d(ppm)1H：10.77(s，1H)，8.51(d，1H，J＝5.5Hz)，7.94-7.91(m，2H)，7.68-7.63(m，1H)，7.60-7.56(m，2H)，7.49(t，1H)，J＝8.8Hz)，7.36-7.30(m，2H)，7.15(s，1H)，6.70(d，1H，J＝5.5Hz)，4.13(s，2H)，3.89(s，3H)，3.51(t，2H，J＝5.3Hz)，3.26(s，3H)，3.01(m，2H)。MS：550(MH)⁺

反应路线29

实施例219

1-环丙基-3-(3-氟-4-(2-(5-(吗啉代甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(360)

步骤1.4-((6-(7-(2-氟-4-硝基苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基)吗啉(358)

向甲醛321(0.5g，1.265mmol)的DCM(12.65mL)悬浮液中加入吗啉(0.220mL，2.53mmol)和乙酸(0.145mL，2.53mmol)，并在室温下搅拌混合物1小时，而后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.804g，3.79mmol)。继续搅拌过夜。然后将混合物在DCM和1N NaOH之间分配。分离各相；收集有机层，用硫酸钠干燥，浓缩。通过Biotage纯化残余物(线性梯度0-20％，MeOH/EtOAc；10g SNAP柱)，得到标题化合物358(341mg，0.731mmol，57.8％产率)，为米色固体。MS：467(MH)+。

步骤2.3-氟-4-(2-(5-(吗啉基甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯胺(359)

将硝基化合物358(432mg，0.926mmol)、铁粉(440mg，7.87mmol)和氯化铵(42.6mg，0.796mmol)的混合物在水(3.00mL)和乙醇(6mL)的混合物中加热至80℃，保持30分钟。然后过滤反应混合物，趁热通过硅藻土垫。浓缩滤液，使用Biotage纯化残余物(洗脱液：0-20％EtOAc/MeOH，10g SNAP柱)，得到胺359(136mg，0.312mmol，33.6％产率)，为白色固体。MS：437(MH)+。

步骤3.1-环丙基-3-(3-氟-4-(2-(5-(吗啉代甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(360)

将苯胺359(136mg，0.312mmol)和DIPEA(0.218mL，1.246mmol)的THF(6mL)溶液冷却至0℃，然后加入三光气(46.2mg，0.156mmol)，并在0℃搅拌反应混合物1小时，而后加入环丙胺(89mg，1.558mmol)。在室温额外搅拌反应混合物3小时，然后浓缩，在水和乙酸乙酯之间分配。形成粘性固体，通过抽滤将其分离，用水和乙酸乙酯冲洗，真空干燥。然后使用Gilson纯化该物质(洗脱液：20-95％MeOH/水，1小时)，得到标题化合物360(30mg，0.058mmol，18.53％产率)，为白色固体。¹HNMR(DMSO-d₆)d(ppm)¹H：HNMR9.16(s，br，1H)，8.16(d，1H，J＝1.6HZ)，8.11(d，1H，J＝5.4Hz)，7.91(s，1H)，7.83(d，1H，J＝8.2Hz)，7.46(dd，1H，J1＝2.1Hz，J2＝8.2Hz)，7.34(dd，1H，J1＝2.6Hz， J2＝13.9Hz)，6.97-7.45(m，2H)，6.84-6.81(m，1H)，6.23(d，1H，J＝4.7Hz)，3.18(t，4H)，3.14(s，2H)，2.15-2.12(m，1H)，1.98(m，4H)，0.23-0.19(m，2H)，0.02-0.005(m，2H)。MS：520.4(MH)+。

反应路线30

实施例220

1-(4-(2-(4-5，8，11-三氧杂-2-氮杂十二烷基苯基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)-3-氟苯基)-3-(5-甲基异唑-3-基)脲(368)

步骤1：4-(7-(2-氟-4-硝基苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)苯甲醛(362)

将碘噻吩并吡啶361(US 2006/0287343)(2.10g，5.05mmol)、4-甲酰基苯基硼酸(1.51g，10.1mmol)和四(三苯基膦)合钯(0.29g，0.25mmol)溶于无水二烷(80mL)中。将氟化铯(0.92g，6.1mmol)和碳酸氢钠(2.12g，25.2mmol)溶于水(各自5mL)，并加入到反应混合物中，用N₂流将其脱气，然后加热到回流，保持3小时，冷却，浓缩。将残余物在乙酸乙酯和水之间分配，形成粘性沉淀。将其通过抽滤分离，用水和乙酸乙酯冲洗，得到362(1.92g， 96％)。LRMS(M+H)：395.2

步骤2：N，N-(4-(7-(2-氟-4-硝基苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)苄基)-2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙胺(364)

将362(0.90g，2.3mmol)、胺363(0.93g，5.7mmol)[已经按照合成胺322(反应路线18)和326(反应路线20)所使用的方法合成胺363]和乙酸(0.26mL，4.6mmol)的二氯甲烷(50mL)悬浮液在室温下搅拌1小时。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.45g，6.85mmol)，并在室温搅拌混合物16小时。然后进一步加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.5g)，并继续搅拌2小时。在二氯甲烷和1N HCl之间分配反应混合物。除去有机相。用3M NaOH碱化水相(pH＝13)，并用二氯甲烷萃取。用无水硫酸钠干燥有机萃取物，过滤，浓缩，得到364(0.72g，58％)，为黄色固体。LRMS(M+H)：542.4

步骤3：4-(7-(2-氟-4-硝基苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)苄基(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)氨基甲酸叔丁基酯(365)

在室温下，向364(0.72g，1.3mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液中加入DMAP(0.041g，0.33mmol)和Boc₂O(0.58g，2.7mmol)。在室温下搅拌反应混合物2小时，然后用水和盐水顺序洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩。用硅胶色谱纯化残余物(洗脱液：EtOAc，然后1％MeOH/EtOAc)，得到化合物365(0.51g，60％产率)。LRMS(M+H)：642.5

步骤4：4-(7-(4-氨基-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)苄基(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)氨基甲酸叔丁基酯(366)

向365(0.49g，0.76mmol)的MeOH(100mL)溶液中加入铁屑(0.43g，7.6mmol)和氯化铵(0.12g，2.3mmol)的水溶液(5mL)。将得到的混合物加热至回流，保持4小时，然后冷却，通过硅藻土垫过滤，浓缩。将残余物在二氯甲烷和水之间分配；收集有机相，用盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩。用硅胶色谱纯化残余物(洗脱液：2％MeOH/EtOAc)，得到366(0.41g，88％产率)。LRMS(M+H)：612.6

步骤5：4-(7-(2-氟-4-(3-(5-甲基异唑-3-基)脲基)苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)苄基(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)氨基甲酸叔丁基酯(367)

在0℃，向366(0.15g，0.25mmol)和DIPEA(0.11mL，0.080g，0.61mmol)的四氢呋喃(50mL)溶液中加入三光气(0.029g，0.098mmol)，并在0℃将得到的溶液搅拌1小时。加入3-氨基-5-甲基异唑(0.025g，0.25mmol)，并将混合物加热至室温，搅拌3小时，然后用1mL水淬灭，减压浓缩。将残余物在乙酸乙酯和水之间分配；收集有机相，用盐水洗涤，用MgSO₄干燥，过滤，浓缩。用硅胶色谱纯化产物(洗脱液：2％MeOH/EtOAc)，得到367(0.074g，4％产率)。

步骤7：1-(4-(2-(4-5，8，11-三氧杂-2-氮杂十二烷基苯基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)-3-氟苯基)-3-(5-甲基异唑-3-基)脲(368)

向367(0.074g，0.10mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液中加入三氟乙酸(1.0mL)。在室温搅拌反应混合物3小时，然后浓缩，在二氯甲烷和饱和NaHCO₃之间分配残余物。收集有机相，用盐水洗涤，用MgSO₄干燥，过滤，浓缩。通过Gilson反相HPLC纯化残余物(35-75％MeOH/水，Aquasil C₁₈，30分钟)，并冷冻干燥。将纯产物(含有一些甲酸(HPLC))在二氯甲烷和1M NaOH之间分配。收集有机相，干燥(MgSO₄)，过滤，浓缩，得到化合物368(0.033g，0.052mmol，52％产率)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ(ppm)¹H：9.71(s，1H)；9.31(s，1H)；8.48(d，J＝5.5，1H)；8.01(s，1H)；7.82-7.79(m，2H)；7.73(dd，J＝13.1，2.5，1H)7.46-7.41(m，3H)；7.28-7.26(m，1H)；6.60(d，J＝5.5，1H)；6.54(d，J＝0.8，1H)；3.75(s，2H)；3.51-3.45(m，8H)；3.41-3.35(m，2H)；3.20(s，3H)；2.63(t，J＝5.7，2H)；2.35(d，J＝0.6，3H)。LRMS(M+H)：636.5

反应路线31

实施例221

N-(4-(7-(2-氟-4-(3-(5-甲基异唑-3-基)脲基)苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)苄基)-N-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)乙酰胺(371)

步骤1：N-(4-(7-(2-氟-4-硝基苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)苄基)-N-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)乙酰胺(369)

向364(0.50g，0.92mmol)的无水四氢呋喃(50mL)溶液中加入乙酸酐(1.0mL，11mmol)。在室温下搅拌反应混合物24小时，然后浓缩。将残余物在乙酸乙酯和水之间分配；收集有机相，用饱和NaHCO₃、盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，浓缩。用硅胶色谱纯化残余物(洗脱液：EtOAc)，得到369(0.36g，67％产率)。LRMS(M+H)：584.4

步骤2：N-(4-(7-(4-氨基-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)苄基)-N-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)乙酰胺(370)

向369(0.36g，0.62mmol)的MeOH(100mL)溶液中加入铁屑(0.68g，12mmol)和氯化铵(0.13g，2.5mmol)水溶液(5mL)。将得到的混合物加热至回流，保持4小时，然后冷却，通过硅藻土过滤，浓缩。将残余物在二氯甲烷和水之间分配；收集有机相，用盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩。用硅胶色谱纯化产物(洗脱液：2％MeOH/EtOAc)，得到370(0.35g，100％产率)。LRMS(M+H)：554.4

步骤3：N-(4-(7-(2-氟-4-(3-(5-甲基异唑-3-基)脲基)苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)苄基)-N-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)乙酰胺(371)

在0℃，向370(0.14g，0.25mmol)和DIPEA(0.11mL，0.080g，0.61mmol)的四氢呋喃(50mL)溶液中加入三光气(0.030g，0.10mmol)，并将得到的溶液在0℃搅拌0.5小时。加入3-氨基-5-甲基异唑(0.074g，0.76mmol)，并将混合物加热至室温，搅拌3小时，然后用1mL水淬灭，减压浓缩。将残余物在乙酸乙酯和水之间分配；收集有机相，用盐水洗涤，用MgSO₄干燥，过滤，浓缩。通过硅胶色谱纯化产物(10％MeOH/EtOAc)，而后通过Gilson反相HLC纯化(35-65％乙腈/水，Aquasil C₁₈，30分钟)，冷冻干燥。将残余物(含有一些甲酸(HPLC))在二氯甲烷和1M NaOH之间分配。干燥(MgSO₄)有机相，过滤，浓缩，得到371(65mg，38％产率)，通过1H NMR证明其是旋转异构体的2∶1混合物。¹H NMR(DMSO-d₆)δ(ppm)¹H：9.64(s，1H)；9.19(s，1H)； 8.50-8.48(m，1H)；8.04(s，0.4H)；8.01(s，0.6H)；7.89(d，J＝8.2，0.4H)；7.82(d，J＝8.2，0.6H)；7.72(dd，J＝12.9，2.5，1H)；7.45(t，J＝9.2，1H)；7.33(d，J＝8.4，2H)；7.27-7.24(m，1H)；6.61-6.59(m，1H)；6.54(d，J＝0.8，1H)；4.68(s，0.4H)；4.59(s，0.6H)；3.52-3.38(m，12H)；3.21(s，1.8H)；3.20(s，1.2H)；2.35(d，J＝0.4，3H)；2.12(s，1.8H)；2.00(1.2H)。LRMS(M+H)：678.8

反应路线32

实施例222

3-氟-4-(2-(5-((2-甲氧基乙氨基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基氨基甲酸2，2，2-三氟乙基酯(373)

步骤1.4-(2-(5-((叔丁氧羰基(2-甲氧基乙基)氨基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)-3-氟苯基2，2，2-三氟乙基甲基氨基甲酸酯(372)

将双光气(0.017mL，0.143mmol)加入到苯胺126(0.15g，0.286mmol)的THF(2.86mL)溶液中，并将反应混合物大力搅拌2小时。向反应混合物中加入2，2，2-三氟乙醇(0.042mL，0.572mmol)和DIPEA(0.100mL，0.572mmol)的THF(2.86mL)溶液。大力搅拌反应混合物过夜，用DCM稀释，用饱和氯化铵溶液洗涤，用无水硫酸钠干燥，浓缩至干。通过快速色谱法纯化残余物(Biotage，Snap 10柱，梯度：3％10CV，3％至5％2CV，5％10CV MeOH/DCM)，得到372(0.1097g，0.169mmol，59.0％产率)浅棕色固体。m/z：651.4(M+H)⁺。

步骤2.3-氟-4-(2-(5-((2-甲氧基乙氨基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基氨基甲酸2，2，2-三氟乙基酯(373)

向372(0.1097g，0.169mmol)的DCM(1.0mL)悬浮液中加入TFA(1.0mL，12.98mmol)，并在室温下搅拌反应混合物2小时。减压浓缩反应混合物，将残余物溶于DCM中，用1N NaOH溶液、水洗涤，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到373(0.0543g，0.097mmol，57.3％产率)，为白色固体。 ¹H-NMR(DMSO-D₆，400MHz)10.55(s，1H)，8.57(s，1H)，8.52(d，J＝5.62Hz，1H)，8.32(s，1H)，8.23(d，J＝8.1Hz，1H)，7.90(d，J＝8.10Hz，1H)，7.63(d，J＝9Hz，1H)，7.52(d，J＝13.5Hz，1H)，7.39(t，J＝9.0Hz，1H)，6.66(d，J＝6.7Hz，1H)，4.85(q，J＝9.0Hz，2H)，3.79(s，2H)，3.41(t，J＝5.5Hz，2H)，3.24(s，3H)，2.66(t，J＝5.5Hz，2H)。m/z：(M+H)⁺551.4。

反应路线33

实施例223

N-(3-氟-4-(2-(5-((2-甲氧基乙氨基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7- 基氧基)苯氨基甲酰基)环丙磺酰胺(376)

步骤1：环丙基磺酰基氨基甲酸乙基酯(374)

向环丙磺酰胺(Li，J.等人；Synlett 2006，5，725-728)(800mg，6.60mmol)的丙酮(25mL)溶液中加入碳酸钾(2.738g，3eq，19.81mmol)和氯甲酸乙酯(1.075g，1.5eq，9.90mmol)，并在室温搅拌反应混合物过夜。将反应混合物倒入水中，用浓HCl使其显酸性(pH1)，然后用EtOAc萃取。收集萃取物，用Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。用柱色谱纯化残余物(洗脱液：30％EtOAc/己烷)，得到374无色油状物(800mg，63％)。¹H NMR(DMSO，d₆)11.47(s，1H)，4.10(q，J＝10.27Hz，2H)，2.90(m，1H)，1.19(t，J＝7.24Hz，3H)，1.039(m，4H)。

步骤2：(6-(7-(4-(3-(环丙基磺酰基)脲基)-2-氟苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(375)

向胺126(500mg，0.953mmol)的DME(4mL)溶液中加入氨基甲酸酯374(460mg，2.5eq，2.383mmol)，并将反应混合物加热至120℃，保持1天。将混合物冷却至室温，用EtOAc和水稀释，收集有机相，用Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。用柱色谱纯化残余物(洗脱液：EtOAc至50％丙酮/EtOAc)，得到375棕色油状物(130mg，55％)。MS(m/z)＝672.5(M+H)

步骤3：N-(3-氟-4-(2-(5-((2-甲氧基乙氨基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)苯基氨基甲酰基)环丙磺酰胺(376)

向375(140mg，0.208mmol)的DCM(5mL)溶液中加入HCl/二烷(0.5mL，2mmol，9.6eq，4M，在二烷中)，并搅拌反应混合物4小时。用EtOAc稀释混合物，用NaHCO₃溶液使其显碱性，用EtOAc/丙酮萃取。收集有机相，并除去。浓缩水相，并将残余物悬浮在DCM和丙酮的混合物中。收集溶液相，用Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，进一步用Et₂O研磨之后，得到376，为米色固体(产率8mg，7％)。¹H NMR(DMSO-d6)：8.67(s，1H)，8.56(s，1H)，8.47(d，J＝5.28，1H)，8.27(s，1H)，8.19(d，J＝8.02Hz，1H)，7.85(m，2H)，7.80(s，1H)，7.22(m，2H)，6.59(d，J＝5.28Hz，1H)，3.76(s，2H)，3.40(m，2H)，3.20(s，3H)，2.76(m，1H)，2.60(m，2H)，0.75(m，2H)，0.65(m，2H)。LRMS(ESI)：(计算值)571.64(实测值)572.58(MH)⁺。

按照本发明的其它化合物包括表2中的那些化合物。

表2

按照本发明的其它化合物包括表3中的那些化合物。

表3

按照本发明的其它化合物包括表4中的那些化合物。

表4

按照本发明的其它化合物包括表5中的那些化合物。

表5

按照本发明的其它化合物包括表5a中的那些化合物。

药物组合物

在一些实施方案中，本发明提供了药物组合物，其包含按照本发明的化合物和可药用载体、赋形剂或稀释剂。可以利用本领域众所周知的任何方法配制本发明的组合物，并且可以通过任何途径给药，包括但不限于：肠胃外，口服，舌下，透皮，局部，鼻内，气管内或直肠内。在一些实施方案中，在医院环境中静脉内给予本发明的组合物。在一些实施方案中，可以通过口服途径给药。

载体、赋形剂或稀释剂的特性取决于给药途径。本文使用的术语“可药用”是指与生物系统(例如细胞、细胞培养物、组织或有机体)相容的无毒物质，而且不会妨碍活性组分的生物活性的效果。由此，除了抑制剂之外，按照本发明的组合物还可以含有稀释剂，填充剂，盐，缓冲液，稳定剂，增溶剂，及本领域众所周知的其它物质。可药用制剂的制备描述在例如下列中：Remington′s Pharmaceutical Sciences，第十八版，A.Gennaro，Mack PublishingCo.，Easton，Pa.，1990。

活性化合物包含在可药用载体、赋形剂或稀释剂中，其数量应该足够给予患者治疗有效量，并且在所治疗的患者中不会引起严重的毒性作用。可以基于所递送的母体化合物的重量，计算可药用衍生物的有效剂量范围。如果衍生物本身显示出活性，则可以按照上面的方法、使用衍生物的重量来估计有效剂量，或用本领域技术人员已知的其它方式。

VEGF受体信号传导的抑制

在一些实施方案中，本发明提供了在细胞中抑制VEGF受体信号传导的方法，该方法包括：使想要抑制VEGF受体信号传导的细胞与按照本发明的VEGF受体信号传导的抑制剂接触。因为本发明的化合物抑制VEGF受体信号，所以，它们可用于VEGF受体信号传导在生物过程中作用的体外研究的研究工具。

在一些实施方案中，抑制VEGF受体信号可以抑制接触抑制剂细胞的细胞增殖。

试验实施例

VEGF活性的抑制

下列方案用于试验本发明的化合物。

试验实施例1

体外受体酪氨酸激酶试验(VEGF受体KDR)

该试验测定了化合物抑制重组体人类VEGF受体酶活性的能力。

将1.6-kb cDNA(相当于VEGFR2(KDR)的催化区域)(Genbank登录号 AF035121氨基酸806至1356)克隆到pDEST20Gateway载体(Invitrogen)的PstI位点上，用于制备该酶的GST-标记的型式。按照制造商的说明书(Invitrogen)，使用Bac-至-BacTM体系，该结构用于产生重组体杆状病毒。

用重组体杆状病毒构建体(construct)感染后，GST-VEGFR2806-1356蛋白在Sf9细胞(Spodoptera frugiperda)中表达。简要地说，在72小时期间，在27℃，在旋转振荡器上以120rpm的速度搅拌，使生长在悬浮液中、并保持在无血清培养基(Sf900II，补充有庆大霉素)中的Sf9细胞(细胞密度大约2X10⁶个细胞/ml)感染上述病毒(0.1的多重性感染(MOI))。在398g下离心采集受感染细胞(采集15分钟)。将细胞沉淀在-80℃冷冻，直到进行纯化为止。

在细胞提取和纯化中描述的所有步骤是在4℃进行的。将感染上GST-VEGFR2806-1356重组体杆状病毒的冷冻Sf9细胞沉淀解冻，并平缓地再悬浮在缓冲液A(PBS，pH7.3，补充有1μg/ml胃酶抑素，2μg/ml抑肽酶和亮肽素，50μg/ml PMSF，50μg/ml TLCK和10μM E64和0.5mM DTT)中，每克细胞使用3ml缓冲液。将悬浮液用Dounce进行均化，并将1％Triton X-100加入到匀浆中，而后将其在22500g下、在4℃离心30分钟。上清液(细胞提取物)用作GST-VEGFR2806-1356纯化的起始原料。

将上清液装填到用PBS(pH7.3)平衡的GST-琼脂糖柱(Sigma)上。用PBS(pH7.3)+1％Triton X-100洗涤四倍柱体积(CV)、用缓冲液B(50mM Tris，pH8.0，20％甘油和100mM NaCl)洗涤4CV之后，将结合的蛋白用5CV的缓冲液B(补充有5mM DTT和15mM谷胱甘肽)逐步洗脱。将得自于该色谱步骤的富集GST-VEGFR2806-1356的馏分进行收集(基于U.V.示踪，即具有高O.D.280的馏份)。最后的GST-VEGFR2806-1356蛋白制剂浓度大约为0.7mg/ml，纯度大约70％。将纯化的GST-VEGFR2806-1356蛋白原料制成等分样品，并在-80℃冷冻，而后在酶催试验中使用。

在DELFIATM试验(Perkin Elmer)中测定VEGFR/KDR的抑制。将底物聚(Glu4，Tyr)固定到黑色高度结合的聚苯乙烯96孔板中。将涂覆的板洗涤，并在4℃保存。在试验期间，将酶在冰上、在聚丙烯96孔板中用抑制剂和Mg-ATP预先培养4分钟，然后转入涂覆的板中。随后在30℃进行激酶反应10-30分钟。对于VEGFR/KDR，试验中的ATP浓度是0.6uM(2X Km)。酶浓度是5nM。培养之后，用EDTA淬灭激酶反应，并洗涤板。通过用铕标记的抗磷酸酪氨酸MoAb进行培养，检测磷酸化产物。洗涤板之后，利用时间分辨荧光法，在Gemini SpectraMax读数器(Molecular Devices)中检测结合的MoAb。在浓度范围内评价化合物，并测定IC₅₀值(得到50％酶活性抑制的化合物的浓度)。结果示于表6中。在该表中，“a”表示浓度小于250纳摩尔浓度的抑制活性；“b”表示浓度大于或等于250但小于500纳摩尔浓度的抑制活性；“c”表示浓度大于或等于500但小于1000纳摩尔浓度的抑制活性；“d”表示浓度大于或等于1000纳摩尔浓度的抑制活性。

试验实施例2

VEGF-依赖性Erk磷酸化

细胞和生长因子：HUVEC细胞购买于Cambrex Bio Science Walkersville，Inc，并且按照供应商说明书进行培养。对于表达Sf9细胞的杆状病毒，使用Gateway克隆技术(Invitrogen)，克隆VEGF₁₆₅的全长编码序列。用条件培养基(conditioned media)纯化VEGF₁₆₅，使用NaCl梯度洗脱(HiTrap肝素柱(GEHealthcare Life Sciences))，而后使用咪唑梯度洗脱(HiTrap螯合柱(GEHealthcare Life Sciences))，然后缓冲保存在PBS(补充有0.1％BSA并过滤消毒)中。

细胞试验：将细胞接种在96孔板中(8000个细胞/孔)，并生长48小时。然后将细胞在血清和不含生长因子的介质中培育过夜，并接触化合物稀释物1.5小时。在介质中培养15分钟之后，将VEGF165(150ng/ml)细胞溶解在冰冷的溶解缓冲液(50mM HEPES，pH7.4，150mM NaCl，1.5mM MgCl₂，1％Triton X-100，10％甘油)中，该缓冲液含有1mM 4-(2氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐、200μM原钒酸钠、1mM氟化钠、10μg/mL亮肽素、10μg/mL抑肽酶、1μg/mL胃酶抑素和50μg/mLNa-对甲苯磺酰基-L-赖氨酸氯甲基酮盐酸盐，并进行Western印迹，以便检测抗磷酸基ERK1/2(T202/Y204)(Cell SignalingTechnologies)。

Western印迹分析：将得自于单处理孔的溶解产物样品在5-20％SDS-PAGE凝胶上分离，按照制造商说明书，使用Immobilon聚偏氟乙烯膜(Amersham)进行免疫印迹。在Tris-缓冲盐水(含有0.1％Tween 20净化剂(TBST))中洗涤印记，并探测对磷酸基-Thr202/Tyr204-ERK(细胞信号传导技术)的抗体。按照制造商的说明书，使用成像和密度测定分析的Storm显像密度计(GE Healthcare；800PMT，100nM分辩率)，进行化学荧光检测 (Amersham，ECL plus)。使用4-参数拟合模型，在稀释度范围内的值用于制作IC₅₀曲线。使用GraFit 5.0软件，计算这些曲线。结果示于表6中。在该表中，“a”表示浓度小于250纳摩尔浓度的抑制活性；“b”表示浓度大于或等于250但小于500纳摩尔浓度的抑制活性；“c”表示浓度大于或等于500但小于1000纳摩尔浓度的抑制活性；“d”表示浓度大于或等于1000纳摩尔浓度的抑制活性。

表6

试验实施例3

体内实体瘤疾病模型

该试验测定了化合物抑制实体瘤生长的能力。

通过皮下注射1X106U87、A431或SKLMS细胞/小鼠，将肿瘤异种移植物建立在雌性无胸腺CD1小鼠(Charles River Inc.)的侧腹部。建立后，然后在裸小鼠宿主中，肿瘤连续皮下传代(passaged s.c.)。得自于这些宿主动物的肿瘤片段在随后的化合物评价实验中使用。对于化合物评价实验，通过手术将重量大约20g的雌性裸小鼠皮下植入～30mg(得自于供体肿瘤)的肿瘤片段。当肿瘤大约100mm³大小时(植入之后～7-10天)，将动物随机分成治疗和对照组。每组有6-8只携带肿瘤的小鼠，在整个实验过程中，将每个小鼠的耳朵进行标记并分别跟踪。

将小鼠称重，利用卡尺进行肿瘤测定，每周三次，在第1天开始。利用众所周知的公式(L+W/4)3 4/3π，将这些肿瘤测量数据转变为肿瘤体积。当对照组肿瘤达到大约1500mm³时，实验结束。在该模型中，对于每个试验化合物，用100减去化合物治疗组的平均肿瘤体积变化/对照组(非治疗或溶媒治疗组)的平均肿瘤体积变化x100(ΔT/ΔC)，得到百分比肿瘤生长抑制(％TGI)。除了肿瘤体积之外，还监测动物的体重，每周两次，监测至多3周。

试验实施例4

体内脉络膜的新生血管形成(CNV)模型

该试验测定了化合物抑制CNV进展的能力。CNV是造成患有年龄相关的黄斑变性(AMD)的患者严重视力丧失的主要原因。

雄性Brown-Norway大鼠(Japan Clea Co.，Ltd.)用于这些研究。

通过腹膜内注射戊巴比妥使大鼠麻醉，并用0.5％托比卡胺和0.5％盐酸去氧肾上腺素(phenylephrine hydrochloride)使右侧散瞳。使用Green laserPhotocoagulator(Nidex Inc.，Japan)的狭缝灯输送体系，在视网膜血管之间使右眼接受6次激光灼伤，Healon^TM(AMO Inc)的显微镜玻片用作接触镜。激光功率是100或200mW(0.1秒)，斑点直径是100μm。在激光灼伤的时候，观察到鼓泡产生，这是Bruch′s膜破裂的迹象，其对于CNV产生是重要的。

激光辐照之后(第0天)，使用SAS软件(SAS institute Japan，R8.1)，基于体重将大鼠分到各个组中。动物麻醉和右侧散瞳(上述)之后，通过在第3天注射(10μL/眼睛)30nmol/眼睛的剂量，使动物的右眼接受化合物或溶媒。将化合物溶解或悬浮在CBS、PBS或其它合适的溶媒中，而后注射。

在第10天，用乙醚使动物麻醉，通过尾静脉注射高分子量异硫氰酸荧光素(FITC)-葡聚糖(SIGMA，2×10⁶MW)(20mg/大鼠)。FITC-葡聚糖注射之后大约30分钟，用乙醚或二氧化碳将动物安乐死，去除眼睛，并用10％福尔马林中性缓冲溶液固定。固定超过1小时之后，通过从眼球上除去角膜、晶状体和视网膜，获得RPE-脉络膜-巩膜铺片。在显微镜载玻片上，将铺片固定在50％甘油中，使用荧光显微镜(Nikon Corporation，激发滤片：465-495nm，吸收滤片：515-555nm)，给激光灼伤的部分照像。使用Scion成像，通过测定在像片上观察到的过荧光面积，获得CNV面积。

6个灼伤的平均CNV面积用作CNV面积的独立单位值，将化合物治疗组的平均CNV面积与赋形剂治疗组的平均CNV面积进行比较。本发明一些化合物的结果示于表7中，并且表示为CNV进展的％抑制(“A”表示大于或等于60％抑制，“B”表示≥40％至＜60％抑制)。

表7

Claims

1.式(I)化合物，或其可药用盐：

其中，

D选自吡啶基或咪唑基，每个任选被1至2个独立选择的R³⁸取代；

苯环被0至4个R²基团取代，其中R²为卤素；

R³⁸为-C₀-C₆烷基-(任选取代的杂环)；

Q为环丙基

其中杂环表示单环结构的基团，其具有5或6个原子，其中1或2个原子独立地选自N、O和S，剩下的环构成原子是碳原子，

杂环上的取代基选自＝O。

2.按照权利要求1的化合物，其中

D是吡啶基。

3.按照权利要求1的化合物，其中

D是咪唑基。

4.按照权利要求1的化合物，其中

D是被下列取代的吡啶基：

和

Q是环丙基。

5.化合物，其选自：

1-(4-(2-(5-(1，3-二烷-2-基)吡啶-2-基)噻吩并[3，2-b]吡啶-7-基氧基)-3-氟苯基)-3-环丙基脲(418)，

或其可药用盐。

6.组合物，其包含按照权利要求1至5中任一项的化合物。

7.权利要求1至5中任一项的化合物或其组合物在制备用于抑制血管生成的药物中的用途。

8.权利要求1至5中任一项的化合物或其组合物在制备用于治疗对抑制蛋白酪氨酸激酶活性有响应的疾病的药物中的用途。

9.权利要求1至5中任一项的化合物或其组合物在制备用于治疗细胞增殖疾病的药物中的用途。

10.权利要求1至5中任一项的化合物或其组合物在制备用于治疗眼疾病、病症或障碍的药物中的用途。