CN101995476B

CN101995476B - 临床化学检验用液体质控血清

Info

Publication number: CN101995476B
Application number: CN 200910165746
Authority: CN
Inventors: 宋耀虹; 齐志宏
Original assignee: Peking Union Medical College Hospital Chinese Academy of Medical Sciences
Current assignee: Peking Union Medical College Hospital Chinese Academy of Medical Sciences
Priority date: 2009-08-10
Filing date: 2009-08-10
Publication date: 2013-07-03
Anticipated expiration: 2029-08-10
Also published as: CN101995476A

Abstract

本发明涉及临床化学检验用液体质控血清。具体地说，本发明涉及乙二醇和丙二醇的组合在制备液体质控血清中的用途，使用乙二醇和丙二醇的组合来稳定液体质控血清的方法，包含作为保护剂的乙二醇和丙二醇的液体质控血清，以及制备所述液体质控血清的方法。根据本发明制备的液体质控血清在-20℃下保存稳定性可达至少1年，在2～8℃下保存使用稳定性至少达2周，在室温存放下能稳定4小时并且某些质控指标优于现有技术制备的或者市售的液体质控血清。

Description

临床化学检验用液体质控血清

技术领域

本发明涉及用于临床实验室常规化学部分检验项目的液体质控血清。具体涉及乙二醇和丙二醇的组合在制备液体质控血清中的用途，使用乙二醇和丙二醇的组合来稳定液体质控血清的方法，使用乙二醇和丙二醇的组合来稳定的液体质控血清，以及制备所述液体质控血清的方法。

背景技术

在临床实验室检验特别是化学检验工作中，多年以来为了使不同实验室、不同仪器、不同方法学的化验结果能在可靠、一致的基础上有可比性，正确地评价实验室间的工作质量以及实验室内的质量控制，就必须有良好的质控血清。质控血清(即，质量控制血清)一般分为两类：一类有靶值，一类无靶值。在每次的常规检验中加入一份或数份，与患者标本同时测定，通过所得结果来了解本次检验的情况。质控血清检验的结果如能控制其误差在一定范围内，就说明该检验没有发生不允许的误差。如果出现超过允许误差范围的异常结果，提示该检验不合格，应寻找原因，纠正后，重检待测标本。因此质控血清在质控工作中起重要作用。

目前，国内临床生化学室间评价和室内质控中大多使用冻干质控血清，而且大部分是进口的。由于冻干质控血清在制作和使用过程中，因分装、冻干及复溶时都会产生误差，而使整个质量质控和质量评价过程产生偏差。而由于液体质控血清避免了分装、冻干和复溶等操作过程所引起的误差，所以在质量质控和质量评价过程中各项检测指标的变异均较小。因此，近年来国内外均对液体质控血清替代冻干血清的问题进行了研究。液体质控血清由于其中加入了特定的成分，使血清的冰点大大降低，即使在-20℃下也不会结冰，而且在此低温下血清中的成分特别是酶类成分比较稳定，从而使得质控血清在制备、保存、使用过程中不必经历分装、冷冻干燥、复溶等可能引起误差的操作过程，因此液体质控血清有其独特的优点。

液体质控血清通常采用人或动物血清，经反复冻融后抽滤或透析等方法去掉约1/3的水份，然后再加入约1/3的乙二醇作稳定剂补足水份来制备的(例如，参见，林增文，等.陕西医学检验.2000，15(2)：47-48；滑艳，等.陕西医学检验.2000，15(3)：42；以及P.Premachandra，et，al.Preparation and Stability of Low-cost LiquidQuality-control Serum Stabilized with Ethanediol.Clin.Chem.1987，33(6)：851-852)。此外，CN1149772A(中国专利申请号：95117435.5，申请日：1995年11月9日，公开日：1997年5月4日)公开了一种多项液体质量控制猪血清及其制备方法，该血清选用新鲜猪血为原料，经分离、冰冻、调整成分，加入乙二醇作为稳定剂，据说该发明的产品含有质控血清所需的多项成分，克服了冻干猪血清分装和复溶时的误差，适用于医学检验的需要。另有文献(CN1316521A，中国专利申请号：01107739.5，申请日：2001年1月11日，公开日：2001年10月10日)报道了一种保护临床化学用质量控制血清中酶活性的方法，该方法包括以动物血清为原料制备所述血清的常规工艺步骤，在制备过程中液体血清冷冻或脱水之前加入海藻糖作为血清酶的稳定剂，按每升液体血清计，海藻糖的加入量为0.10-0.25mol，由此得到的质控血清可作为血清成分例如血清酶的质量控制物，据该发明人说该质控血清在血清酶检验结果的质量控制中使用效果良好，但是这种以海藻糖为保护剂的液体质控血清产品并未见实际使用。

虽然液体质控血清可以避免冻干质控血清的诸多缺点，但当前市场上液体质控血清的商品并不多，目前国内市场仅能买到伯乐(BIO-RAD)公司生产的液体质控血清进口品，该进口品价格昂贵，许多基层实验室难以承受，因而影响了室内质控持续有效的开展。

此外，本发明人发现，以乙二醇为保护剂制备的液体质控血清对于某些检测项目的稳定性并不理想，特别在是用于制备检测ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、TBA等12项目的液体质控血清中，某些项目的稳定性在期望的有效期内仍存在波动。因此，提供一种稳定的液体质控血清仍然是本领域技术人员所期盼的。

发明内容

本发明所要解决的问题是提供一种稳定的液体质控血清。本发明人令人惊奇地发现，使用乙二醇和丙二醇组合作为保护剂来制备液体质控血清，通过一年的观察，包括ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、TBA等12项生化常规项目在-20℃和2～8℃下存放，使用，其稳定性能完全可以满足临床要求，并且在某些项目的稳定性方面优于现有的液体质控血清，本发明基于此发现而得以完成。

为此，本发明第一方面提供了乙二醇和丙二醇的组合在制备液体质控血清中的用途。

根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比为约1∶1.5～约1∶2.5(v/v，体积/体积，下文如未特别说明，均为v/v)。

根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比为约1∶1.8～约1∶2.2(v/v)。

根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比为约1∶2(v/v)。

根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约30％～约40％(v/v，体积/体积，下文如未特别说明，均为v/v)。

根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约30％～约38％(v/v)。

根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约32％～约36％(v/v)。

根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约32％～约35％(v/v)。

根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约33％～约35％(v/v)。

根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述液体质控血清的被检测项目包括，但不限于，下列生化常规检测项目的至少一种：ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA。

根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述液体质控血清的被检测项目包括下列生化常规检测项目：ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA。

根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述液体质控血清是包括，但不限于，下列生化常规检测项目的至少一种的高值质量控制血清：ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA。

根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述液体质控血清的血清原料对于ALT指标显示正常并且对于以下指标呈阴性：HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、HCV-Ab、HIV-Ab、和RPR。

本发明第二方面提供了使用乙二醇和丙二醇的组合来稳定液体质控血清的方法。

根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比为约1∶1.5～约1∶2.5(v/v)。

根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比为约1∶1.8～约1∶2.2(v/v)。

根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比为约1∶2(v/v)。

根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约30％～约40％(v/v)。

根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约30％～约38％(v/v)。

根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约32％～约36％(v/v)。

根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约32％～约35％(v/v)。

根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约33％～约35％(v/v)。

根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述液体质控血清的被检测项目包括，但不限于，下列生化常规检测项目的至少一种：ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA。

根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述液体质控血清的被检测项目包括下列生化常规检测项目：ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA。

根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述液体质控血清是包括，但不限于，下列生化常规检测项目的至少一种的高值质控血清：ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA。

根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述液体质控血清的血清原料对于ALT指标显示正常并且对于以下指标呈阴性：HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、HCV-Ab、HIV-Ab、和RPR。

根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述液体质控血清在制备过程中使用蔗糖透析脱水。

本发明第三方面提供一种液体质控血清，其中包含乙二醇和丙二醇。其中所述的乙二醇和丙二醇可以作为保护剂存在于该液体质控血清中。

根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比为约1∶1.5～约1∶2.5(v/v)。

根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比为约1∶1.8～约1∶2.2(v/v)。

根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比为约1∶2(v/v)。

根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约30％～约40％(v/v)。

根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约30％～约38％(v/v)。

根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约32％～约36％(v/v)。

根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约32％～约35％(v/v)。

根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约33％～约35％(v/v)。

根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其中所述液体质控血清的被检测项目包括，但不限于，下列生化常规检测项目的至少一种：ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA。

根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其中所述液体质控血清的被检测项目包括下列生化常规检测项目：ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA。

根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其中所述液体质控血清是包括，但不限于，下列生化常规检测项目的至少一种的高值质量控制血清：ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA。

根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其对于ALT指标显示正常并且对于以下指标呈阴性：HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、HCV-Ab、HIV-Ab、和RPR。

根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其在制备过程中使用蔗糖透析脱水。

进一步的，本发明第四方面提供制备本发明第三方面任一项所述液体质控血清的方法，其包括在血清脱水之后加入保护剂的乙二醇和丙二醇的步骤。

根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比为约1∶1.5～约1∶2.5(v/v)。

根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比为约1∶1.8～约1∶2.2(v/v)。

根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比为约1∶2(v/v)。

根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述的血清脱水量为原血清总量的约30％～约40％(v/v)。

根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述的血清脱水量为原血清总量的约30％～约38％(v/v)。

根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述的血清脱水量为原血清总量的约32％～约36％(v/v)。

根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述的血清脱水量为原血清总量的约32％～约35％(v/v)。

根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述的血清脱水量为原血清总量的约33％～约35％(v/v)。

根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约30％～约40％(v/v)。

根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约30％～约38％(v/v)。

根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约32％～约36％(v/v)。

根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约32％～约35％(v/v)。

根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约33％～约35％(v/v)。

根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述液体质控血清的被检测项目包括，但不限于，下列生化常规检测项目的至少一种：ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA。

根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述液体质控血清的被检测项目包括下列生化常规检测项目：ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA。

根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述液体质控血清是包括，但不限于，下列生化常规检测项目的至少一种的高值质量控制血清：ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA。

根据本发明第四方面任一项所述的方法，其对于ALT指标显示正常并且对于以下指标呈阴性：HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、HCV-Ab、HIV-Ab、和RPR。

根据本发明第四方面任一项所述的方法，其在制备过程中使用蔗糖透析脱水。

根据本发明第四方面任一项所述的方法，其包括以下步骤：

a)取ALT指标显示正常并且以下指标呈阴性的动物(特别是人)的血清：HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、HCV-Ab、HIV-Ab、和RPR，备用；

b)对透析袋按常规方法进行预处理，将血清装入透析袋中，捆紧，记录血清初始体积(Vo，ml)；

c)将蔗糖放入器皿中，然后将装有混合血清的透析袋放在蔗糖中进行脱水；

d)待血清脱去约30％～约40％(v/v)(例如，约30％～约38％、约32％～约36％、约32％～约35％、约33％～约35％)的水分时，取出，计算脱水量(Vw，ml)；

e)向以上脱水血清中加入与步骤d)所述脱水量(Vw，ml)相当的乙二醇和丙二醇或其混合物(Vep，ml)，混匀，任选加入有效量的防腐剂叠氮化钠，分装，即得。

下面对本发明作进一步的描述。

本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。

本文中使用的术语“丙二醇”是指1，2-丙二醇。

根据本发明，其中所述的乙二醇和丙二醇可以是以任意的先后次序加至脱水血清中的，也可以是以此二者的混合物加至脱水血清中的。

本文中使用的术语“约”，例如在修饰乙二醇和丙二醇的用量比为时，例如在短语“约1∶1.5～约1∶2.5(v/v)”中使用的，是指本领域允许的误差范围，例如±10％，例如±5％，例如±2％。

本文中使用的术语“质控血清”，具有本领域技术人员公知的含义，该术语有时亦称为“质量控制血清”。此外，本文中使用的术语“液体质控血清”，具有本领域技术人员公知的含义，其是相对于“冻干质控血清”，其在制备、保存、使用过程中呈液态，特别是由于其中加入了保护剂而使其熔点大大降低，在长时间(例如1年)保存条件(例如，-20℃)下仍然呈液态，从而避免冷冻干燥、复溶等操作对质控血清的检测稳定性造成影响。

本文中使用的短语“乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约30％～约40％”，是指所在本发明终产品液体质控血清中，所加入的乙二醇和丙二醇二者量之和占本发明终产品液体质控血清的体积百分数。

本文中使用的术语“保护剂”，例如在指代乙二醇和丙二醇时所使用的，是指使血清特别是本发明液体质控血清保持稳定的物质，特别是使本发明液体质控血清中的待检测成分保持稳定的物质，所述的待检测物质包括但不限于ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA。该术语“保护剂”有时也可称为“稳定剂”。

本发明液体质控血清可以用于检测包括(但不限于)下列生化常规检测项目的至少一种：ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA。尤其是可以用于检测包括下列生化常规检测项目：ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA。

根据本发明的液体质控血清，其还可以用于例如但不限于下列指标的高值质控血清：ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA。

本文中使用的术语“高值质控血清”，是指病理状态下血清中被检测项目的浓度，例如ALT高值质控血清一般情况下是正常参考范围上限的2～3倍。

在本发明中，制备所述液体质控血清的血清原料，该血清原料对于ALT指标显示为本领域技术人员公知的正常范围(例如在定量时小于40U/L)；并且该血清原料对于以下指标呈阴性：HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、HCV-Ab、HIV-Ab、和RPR。此外，该血清原料的其它质量标准也是优选需要控制的，例如该原料血清采自排除了传染病、常见病的健康人，并且无溶血、无黄疸等，外观清澈透明。

本发明的目的是提供临床化学常规检测项目使用的液体质控血清，其检测项目包括：ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、TBA等12项。针对反复冻融血清进行脱水方法易使血清中酶活性失活的问题，本发明人选用了非渗透性冷冻保护剂-蔗糖脱去收集的正常人血清(也可以是动物例如猪的血清)中约30％～约40％(v/v)(例如，约30％～约38％、约32％～约36％、约32％～约35％、约33％～约35％)的水分，此方法脱水简单、快速、稳定。此外，本发明人发现采用乙二醇和丙二醇组合用作保护剂可以有效地提供液体质控血清。乙二醇和丙二醇同属低分子中性物质，是一种渗透性冷冻保护剂，目前国内外尚未见将这两种保护剂组合使用于液体质控血清。本发明人将乙二醇和丙二醇结合起来补充脱去的水份，并与乙二醇单独使用以及市售品的稳定性做了对比研究，发现本发明乙二醇和丙二醇组合使用作保护剂可以获得更好的稳定效果。本发明的研究结果表明，根据本发明制备的液体质控血清在-20℃下保存稳定性可达至少1年，在2～8℃下保存使用稳定性至少达2周，在室温存放下能稳定4小时。此外，根据本发明制备的液体质控血清，其中的某些质控指标优于现有技术制备的或者市售的液体质控血清。

在本发明中使用的缩写具有下面的含义：

ALT 丙氨酸氨基转移酶

AST 天门冬氨酸氨基转移酶

CK 肌酸激酶

Glu 葡萄糖

BUN 尿素氮

CR 肌酐

CA 钙

P 无机磷

K 钾

NA 钠

TC 总胆固醇

TBA 总胆汁酸

HBsAg 乙型肝炎表面抗原

HBsAb 乙型肝炎表面抗体

HBeAg 乙型肝炎e抗原

HBeAb 乙型肝炎e抗体

HBcAb 乙型肝炎核心抗体

HCV-Ab 丙型肝炎抗体

HIV-Ab 艾滋病病毒抗体

RPR 梅毒反应素试验

具体实施方式

下面通过具体的实施例和实验例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实施例和实验例仅仅是用于更详细具体地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。

本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。本领域技术人员清楚，在下文中，如果未特别说明，本发明所用材料和操作方法是本领域公知的。

实施例1、液体质控血清的制备

a)取血清原料1000ml，该血清原料来自健康人志愿者，其ALT 指标显示正常(40U/L以下)，并且以下指标呈阴性：HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、HCV-Ab、HIV-Ab、和RPR，这些血清均是用带分离胶的真空采血管取血离心后取得，将这些血清充分混匀，将此混合血清置-20℃冰箱保存，使用之前将-20℃存放的混合血清置2～8℃冰箱过夜融化后，在室温中充分混匀，备用；

b)对透析袋按常规方法进行预处理，将2～3cm宽的透析袋放入烧杯，用无离子水浸泡约半小时，然后将烧杯置电磁炉上煮沸10分钟，用无离子水清洗3次，再煮10分钟，再清洗3次后备用；将血清装入透析袋中，捆紧，记录血清初始体积(Vo，ml)；

c)将蔗糖放入搪瓷盘中，然后将装有混合血清的透析袋放在蔗糖中进行脱水；

d)待血清原料脱去约34％水分时，取出，将袋中血清倒入量筒，记下体积，计算脱去的水分量(Vw，ml)；

e)向以上脱水血清中加入与步骤d)所述脱水量(Vw，ml)相当的乙二醇和丙二醇的混合物(其中乙二醇为1/3，1，2-丙二醇为2/3)，混匀，加入0.1％的防腐剂叠氮化钠；

f)使步骤e)的混合物置室温混匀2小时，置2～8℃冰箱平衡3天，每天混匀数次；再将该混合物分装成1ml/管，即得本发明的液体质控血清。

将由此制得的液体质控血清置-20℃冰箱保存。

实施例2、液体质控血清的制备

参考实施例1的方法制备本实施例的液体质控血清，但不同的以以下操作过程中采用以下参数：

1)步骤d)中血清原料脱去约30％水分；

2)步骤e)使用与步骤d)所述脱水量相当的乙二醇和丙二醇的混合物，其中乙二醇∶丙二醇＝1∶1.5(v/v)。

将由此制得的液体质控血清置-20℃冰箱保存。

实施例3、液体质控血清的制备

1)步骤d)中血清原料脱去约35％水分；

2)步骤e)使用与步骤d)所述脱水量相当的乙二醇和丙二醇的混合物，其中乙二醇∶丙二醇＝1∶1.8(v/v)。

将由此制得的液体质控血清置-20℃冰箱保存。

实施例4、液体质控血清的制备

1)步骤d)中血清原料脱去约38％水分；

2)步骤e)使用与步骤d)所述脱水量相当的乙二醇和丙二醇的混合物，其中乙二醇∶丙二醇＝1∶2.2(v/v)。

将由此制得的液体质控血清置-20℃冰箱保存。

实施例5、液体质控血清的制备

1)步骤d)中血清原料脱去约40％水分；

2)步骤e)使用与步骤d)所述脱水量相当的乙二醇和丙二醇的混合物，其中乙二醇∶丙二醇＝1∶2.5(v/v)。

将由此制得的液体质控血清置-20℃冰箱保存。

试验例1、液体质控血清的稳定性考察

1、测试样品：

a)不同保存条件下、不同保存时间的实施例1的液体质控血清

b)参照实施例1方法，仅用乙二醇作为保护剂制备的液体质控血清；

c)市售品液体质控血清(BIO-RAD)产品，进口品，商品名为Liquichek Unassayed Chemistry Control(Human)，规格为10mL，批号为16390)。

2、样品保存条件和取样时间点：

参见下文各试验结果表。

3、测试方法：

使用OLYMPUS 2700自动生化分析仪测定各测试样品的以下生化项目：ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、TBA。

4、测试结果：

使实施例1制备的液体质控血清分别与乙二醇法和进口的BIO-RAD液体质控血清稳定性进行了比对试验，结果分别见表1至表5。

5、稳定性统计方法：

采用SPSS 11.0软件(例如，参见《统计基础和SPSS 11.0入门与提高》，清华大学出版社，东方人华等编，2004年11月出版，ISBN7-302-09645-7/TP.6688)统计，以测定浓度(Y)相对测定时间(X)进行直线回归分析，当斜率的95％可信区间包括“0”时，认为该分析物的浓度随时间没有发生变化。说明该质控血清项目是稳定的。斜率为正数，表明分析物浓度随时间增高，斜率为负数，表明分析物浓度随时间下降。

6、结论：

本发明实施例1的12项检测指标在一年内稳定，乙二醇补充水份的液体质控血清在一年内ALT、BUN、TBA升高，BIO-RAD液体质控血清在一年内Glu、P下降。

此外，本发明人还发现，根据以上试验例1的液体质控血清的稳定性考察方法，本发明其它实施例制备的液体质控血清(包括实施例2至5的样品)的稳定性结果与实施例1的结果相同或相类。

本发明不仅仅局限于以上实施例，本发明也可以根据本发明的精神和范围获得本发明的其它变型实施方案中，而不会脱离本发明的精神和范围。

表1：本发明液体质控血清室温稳定性

续表1

表2：本发明液体质控血清2～8℃稳定性

续表2

表3：本发明液体质控血清-20℃稳定性

续表3

表4：乙二醇补充脱去水份的液体质控血清-20℃稳定性

续表4

表5：BIO-RAD液体质控血清-20℃稳定性

续表5

Claims

1.乙二醇和1，2-丙二醇的组合在制备液体质控血清中的用途，其中按照体积比计算，所述的乙二醇和1，2-丙二醇的用量比为1∶1.5～1∶2.5。

2.根据权利要求1的用途，其中按照体积比计算，所述的乙二醇和1，2-丙二醇的用量比为1∶1.8～1∶2.2。

3.根据权利要求1的用途，其中按照体积比计算，所述的乙二醇和1，2-丙二醇的用量比为1∶2。

4.根据权利要求1至3任一项的用途，其中按照体积比计算，所述乙二醇和1，2-丙二醇的总量占所述液体质控血清的30％～40％。

5.根据权利要求1至3任一项的用途，其中按照体积比计算，所述乙二醇和1，2-丙二醇的总量占所述液体质控血清的30％～38％。

6.根据权利要求1至3任一项的用途，其中按照体积比计算，所述乙二醇和1，2-丙二醇的总量占所述液体质控血清的32％～36％。

7.根据权利要求1至3任一项的用途，其中按照体积比计算，所述乙二醇和1，2-丙二醇的总量占所述液体质控血清的32％～35％。

8.根据权利要求1至3任一项的用途，其中按照体积比计算，所述乙二醇和1，2-丙二醇的总量占所述液体质控血清的33％～35％。

9.根据权利要求4的用途，其中所述液体质控血清的被检测项目包括下列生化常规检测项目的至少一种：丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、肌酸激酶、葡萄糖、尿素氮、肌酐、钙、无机磷、钾、钠、总胆固醇和总胆汁酸。

10.根据权利要求4的用途，其中所述液体质控血清的被检测项目包括下列生化常规检测项目：丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、肌酸激酶、葡萄糖、尿素氮、肌酐、钙、无机磷、钾、钠、总胆固醇和总胆汁酸。

11.根据权利要求4的用途，其中所述液体质控血清是包括下列生化常规检测项目的至少一种的高值质量控制血清：丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、肌酸激酶、葡萄糖、尿素氮、肌酐、钙、无机磷、钾、钠、总胆固醇和总胆汁酸。

12.使用乙二醇和1，2-丙二醇的组合来稳定液体质控血清的方法，其中按照体积比计算，所述的乙二醇和1，2-丙二醇的用量比为1∶1.5～1∶2.5。

13.根据权利要求12的方法，其中按照体积比计算，所述的乙二醇和1，2-丙二醇的用量比为1∶1.8～1∶2.2。

14.根据权利要求12的方法，其中按照体积比计算，所述的乙二醇和1，2-丙二醇的用量比为1∶2。

15.根据权利要求12至14中任一项的方法，其中按照体积比计算，所述乙二醇和1，2-丙二醇的总量占所述液体质控血清的30％～40％。

16.根据权利要求12至14中任一项的方法，其中按照体积比计算，所述乙二醇和1，2-丙二醇的总量占所述液体质控血清的30％～38％。

17.根据权利要求12至14中任一项的方法，其中按照体积比计算，所述乙二醇和1，2-丙二醇的总量占所述液体质控血清的32％～36％。

18.根据权利要求12至14中任一项的方法，其中按照体积比计算，所述乙二醇和1，2-丙二醇的总量占所述液体质控血清的32％～35％。

19.根据权利要求12至14中任一项的方法，其中按照体积比计算，所述乙二醇和1，2-丙二醇的总量占所述液体质控血清的33％～35％。

20.根据权利要求12至14中任一项的方法，其中，所述液体质控血清的被检测项目包括下列生化常规检测项目的至少一种：丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、肌酸激酶、葡萄糖、尿素氮、肌酐、钙、无机磷、钾、钠、总胆固醇和总胆汁酸。

21.根据权利要求12至14中任一项的方法，其中，所述液体质控血清的被检测项目包括下列生化常规检测项目：丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、肌酸激酶、葡萄糖、尿素氮、肌酐、钙、无机磷、钾、钠、总胆固醇和总胆汁酸。

22.根据权利要求12至14中任一项的方法，其中，所述液体质控血清的血清原料对于ALT指标显示正常并且对于以下指标呈阴性：乙型肝炎表面抗原、乙型肝炎表面抗体、乙型肝炎e抗原、乙型肝炎e抗体、乙型肝炎核心抗体、丙型肝炎抗体、艾滋病病毒抗体和梅毒反应素试验。

23.根据权利要求12至14中任一项的方法，其中，所述液体质控血清在制备过程中使用蔗糖透析脱水。

24.一种液体质控血清，其中包含乙二醇和1，2-丙二醇，其中按照体积比计算，所述的乙二醇和1，2-丙二醇的用量比为1∶1.5～1∶2.5。

25.根据权利要求24的液体质控血清，其中按照体积比计算，所述的乙二醇和1，2-丙二醇的用量比为1∶1.8～1∶2.2。

26.根据权利要求24的液体质控血清，其中按照体积比计算，所述的乙二醇和1，2-丙二醇的用量比为1∶2。

27.根据权利要求24至26中任一项的液体质控血清，其中按照体积比计算，所述乙二醇和1，2-丙二醇的总量占所述液体质控血清的30％～40％。

28.根据权利要求24至26中任一项的液体质控血清，其中按照体积比计算，所述乙二醇和1，2-丙二醇的总量占所述液体质控血清的30％～38％。

29.根据权利要求24至26中任一项的液体质控血清，其中按照体积比计算，所述乙二醇和1，2-丙二醇的总量占所述液体质控血清的32％～36％。

30.根据权利要求24至26中任一项的液体质控血清，其中按照体积比计算，所述乙二醇和1，2-丙二醇的总量占所述液体质控血清的32％～35％。

31.根据权利要求24至26中任一项的液体质控血清，其中按照体积比计算，所述乙二醇和1，2-丙二醇的总量占所述液体质控血清的33％～35％。

32.根据权利要求24至26中任一项的液体质控血清，其中，所述液体质控血清的被检测项目包括下列生化常规检测项目的至少一种：丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、肌酸激酶、葡萄糖、尿素氮、肌酐、钙、无机磷、钾、钠、总胆固醇和总胆汁酸。

33.根据权利要求24至26中任一项的液体质控血清，其中，所述液体质控血清的被检测项目包括下列生化常规检测项目：丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、肌酸激酶、葡萄糖、尿素氮、肌酐、钙、无机磷、钾、钠、总胆固醇和总胆汁酸。

34.根据权利要求24至26中任一项的液体质控血清，其中，所述液体质控血清是包括下列生化常规检测项目的至少一种的高值质量控制血清：丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、肌酸激酶、葡萄糖、尿素氮、肌酐、钙、无机磷、钾、钠、总胆固醇和总胆汁酸。

35.根据权利要求24至26中任一项的液体质控血清，其中，所述液体质控血清对于ALT指标显示正常并且对于以下指标呈阴性：乙型肝炎表面抗原、乙型肝炎表面抗体、乙型肝炎e抗原、乙型肝炎e抗体、乙型肝炎核心抗体、丙型肝炎抗体、艾滋病病毒抗体和梅毒反应素试验。

36.根据权利要求24至26中任一项的液体质控血清，其中，所述液体质控血清在制备过程中使用蔗糖透析脱水。

37.制备权利要求24至36中任一项所述液体质控血清的方法，该方法包括以下步骤：

a)取ALT指标显示正常并且以下指标呈阴性的动物的血清：乙型肝炎表面抗原、乙型肝炎表面抗体、乙型肝炎e抗原、乙型肝炎e抗体、乙型肝炎核心抗体、丙型肝炎抗体、艾滋病病毒抗体和梅毒反应素试验，备用；

b)对透析袋按常规方法进行预处理，将血清装入透析袋中，捆紧，记录血清初始体积；

d)待血清脱去按照体积比计算30％～40％的水分时，取出，计算脱水量；

e)向以上脱水血清中加入与步骤d)所述脱水量相当的乙二醇和1，2-丙二醇的混合物，混匀，任选加入有效量的防腐剂叠氮化钠，分装，即得。

38.根据权利要求37所述的方法，其中，步骤a)中所述动物是人。

39.根据权利要求37或38所述的方法，其中，步骤d)中，待血清脱去按照体积比计算30％～38％的水分时，取出，计算脱水量。

40.根据权利要求37或38所述的方法，其中，步骤d)中，待血清脱去按照体积比计算32％～36％的水分时，取出，计算脱水量。

41.根据权利要求37或38所述的方法，其中，步骤d)中，待血清脱去按照体积比计算32％～35％的水分时，取出，计算脱水量。

42.根据权利要求37或38所述的方法，其中，步骤d)中，待血清脱去按照体积比计算33％～35％的水分时，取出，计算脱水量。