CN101993437B - 从芒果叶中提取芒果苷的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于药物制备领域，具体涉及从芒果叶中提取芒果苷的方法，该方法通过合理的提取工艺，提高了芒果苷的产量，该方法可以按照如下顺序进行：预先将芒果叶粉碎成芒果叶粗粉，然后用碱性水溶液对芒果叶粗粉进行温热提取，对得到的提取液进行过滤处理，随后用稀酸酸化提取液，浓缩，加醇配成含醇10％～30％，离心，对离心后的上清液过Sephadex LH-20柱，先用水洗，然后用质量百分比浓度为90％～95％的醇洗脱，洗脱液蒸干后再经过醇重结晶便得到芒果苷，方法简便、成本低、得率高，得到的芒果苷纯度高。
Description
技术领域
本发明属于药物制备领域，具体涉及从芒果叶中提取芒果苷的方法。
背景技术
芒果叶是漆树科植物芒果Mangifera indica L的叶子，为广西地方习用中药，收载于《广西中药材标准》1990年版，所含芒果苷(mangiferin)是芒果叶止咳、化痰、抗炎的主要活性成分[中医药学刊，2002，7(12)：37]，还有抗脂质过氧化、抗病毒、抗肿瘤作用[广西中医学院学报，2003，6(2)：44]，有报道用90％乙醇提取、大孔树脂脱色的方法(CN200610079234.5)来从芒果叶中提取芒果苷。芒果苷水溶性差，易溶于稀醇、热的甲醇和乙醇，易溶于稀碱液；通常伴有其量5％的芒果苷7-O-葡萄糖苷(Mangiferin-7-O-β-D-glucopyranoside)共存于叶中。因结构中的3位羟基酸性较强，故两化合物均易溶于碱性水液中，芒果苷7-O-葡萄糖苷也可在碱性水液中水解成芒果苷，从而可提高芒果苷的得率和纯度。由于芒果叶具有分布地域广，药材资源丰富，易得，价格低廉，甚至四季可采的优点。并对α-葡萄糖苷酶活性有很强的抑制作用，有希望开发成抗糖尿病、抗肿瘤、抗病毒药物。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种从芒果叶中提取芒果苷的方法，该方法通过合理的提取工艺，提高了芒果苷的产量。
该方法可以按照如下顺序进行：预先将芒果叶粉碎成芒果叶粗粉，然后用碱性水溶液对芒果叶粗粉进行水浴提取，对得到的提取液进行过滤处理，随后用酸液酸化提取液，浓缩，加醇使含醇约10％～30％，并离心，对离心后的上清液通过凝胶柱，先用水洗杂质，然后用高浓度醇洗脱，蒸干洗脱液，再通过重结晶便得到芒果苷。
所用的醇都是些低级醇，例如可以用乙醇、甲醇，用少量甲醇或乙醇进行重结晶。
对于水浴提取次数，提取时间，重结晶次数，技术人员可以根据具体情况自行调整，例如可以提取3次，每次1～3小时，重结晶也可以做2～3遍。
酸液酸化提取液步骤后，提取液的pH值一般调节到6～7比较合适。
芒果苷(I)通常与芒果苷7-O-葡萄糖苷(II)(mangiferin-7-O-β-D-glucopyranoside)共存于芒果叶中，其含量一般为芒果苷(I)的5％，其化学结构式为：
由于芒果苷(I)和芒果苷7-O-葡萄糖苷(II)的结构中的3位羟基酸性较强，故两者均易溶于碱性水液中，本发明在提取过程中选用碱性水溶液作为提取剂，能使芒果粗粉中的芒果苷(I)和芒果苷7-O-葡萄糖苷(II)被溶解而提取完全，并使芒果苷7-O-葡萄糖苷(II)能被水解转化为芒果苷(I)。本发明用碱性水溶液中所用的碱为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钙、碳酸钙中的任意一种或两种以上的混合物，其质量百分比浓度最好在0.5％～2％之间，芒果叶粗粉与碱性水溶液的重量比一般控制在1∶8～10之间，水浴的温度一般设定在80℃以上。
作为一种优化选择，本发明建议碱性水溶液使用质量百分比浓度为0.5％～2％氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液，或者饱和的氢氧化钙溶液中的任意一种或一种以上。
采用上述技术方案后，以理论上按芒果叶粗粉中所含芒果苷的量计，本发明芒果苷的提取得率都在60％以上。
为了提高芒果苷的纯度，本发明对离心后的上清液进行柱层析可以这样进行：将上清液通过SephadexLH-20柱，然后用2～4倍柱体积去离子水洗柱，最后用2～4倍柱体积的乙醇洗脱，Sephadex LH-20中的担体与上清液所代表的药材重量比为1∶1～2之间，乙醇的浓度一般在90％以上。
通过本发明工艺步骤后，所得到的芒果苷的纯度一般都在96％以上，而且工艺比较简单，只需用SephadexLH-20柱进行柱层析，其余均为常规操作，所用试剂例如乙醇等均为低毒试剂，对环境的影响较少，另外，SephadexLH-20柱经过洗脱后能反复使用。
具体实施方式
实施例1
下面对本发明做进一步的说明：
取100g芒果叶粗粉，加1000ml饱和氢氧化钙水液，于水浴中加热提取3次，每次1.5小时，合并水提取液，用稀盐酸调pH为6左右，于60℃减压浓缩至100ml，加酒精调含酒精量为20％，总体积在300ml，放冷后，5000转/分，离心20分钟，上清液通过Sephadex LH-20柱(柱含100ml担体，先用去离子水平衡)，然后用2倍柱体积的去离子水洗后，用3倍柱体积95％乙醇洗脱，收集有色流份约400ml，减压回收乙醇至干，残留物用80ml甲醇重结晶，得淡黄色芒果苷纯品0.82g，含量97％，提取得率62.1％。
实施例2
取100g芒果叶粗粉，加1200ml饱和氢氧化钙水液，于水浴中加热提取3次，每次2h，合并碱水提取液，用稀盐酸调pH为7左右，于60℃减压浓缩至100ml，加酒精调含乙酒精量为20％，总体积在350ml，放冷后，5000转/分，离心20分钟，上清液通过Sephadex LH-20柱(柱含150ml担体，先用去离子水平衡)，然后用2倍柱体积的去离子水洗后，用95％乙醇洗脱，收集有色流份约450ml，减压回收乙醇至干，残留物用100ml甲醇重结晶，得淡黄色芒果苷纯品0.85g，含量98％，提取得率64.4％。
应当理解，在阅读了本发明的讲授上述内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
Claims (9)
1.从芒果叶中提取芒果苷的方法，其特征在于该方法步骤包括：将芒果叶粉碎成粗粉，用碱性水溶液对芒果叶粗粉进行水浴提取，对提取液过滤，用稀矿酸酸化提取液，浓缩，加醇使含醇10％～30％，并离心，对离心后的上清液通过凝胶柱，水洗后用高浓度醇洗脱，蒸干洗脱液，用醇重结晶得到芒果苷；
所述高浓度醇为浓度在90％以上的乙醇。
2.根据权利要求1所述的从芒果叶中提出芒果苷的方法，其特征在于，所述碱性水溶液中所用的碱为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钙、碳酸钙中的任意一种或两种以上的混合物。
3.根据权利要求1所述的从芒果叶中提取芒果苷的方法，其特征在于所述碱性水溶液的质量百分比浓度为0.5％～2％，芒果叶粗粉与碱性水溶液的重量比为1∶8～10。
4.根据权利要求1所述的从芒果叶中提取芒果苷的方法，其特征在于所述对离心后的上清液通过的凝胶柱是采用SephadexLH-20凝胶柱。
5.根据权利要求4所述的从芒果叶中提取芒果苷的方法，其特征在于所述对离心后的上清液进行柱层析：将上清液通过SephadexLH-20柱，然后用2～4倍柱体积去离子水洗柱，最后用2～4倍柱体积90％以上酒精洗脱。
6.根据权利要求1所述的从芒果叶中提取芒果苷的方法，其特征在于所述凝胶柱为SephadexLH-20，SephadexLH-20中的担体与上清液所代表的药材重量比为1∶1～2。
7.根据权利要求1所述的从芒果叶中提取芒果苷的方法，其特征在于用稀矿酸酸化提取液到pH值为6～7。
8.根据权利要求1所述的从芒果叶中提取芒果苷的方法，其特征在于所述稀矿酸为稀盐酸、稀硫酸、稀硝酸中的一种。
9.根据权利要求1所述的从芒果叶中提取芒果苷的方法，其特征在于芒果苷用醇进行重结晶时，所用的醇为甲醇或乙醇。
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