CN101974047A - 一种从连翘叶中提取连翘苷的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种从连翘叶中提取连翘苷的方法，方法是以连翘叶为原料，粉碎，加入6-15倍量氢氧化钙溶液，加热50-70℃，动态提取1-3小时，提取2-3次，提取液保温80-1℃调至中性，滤过加入大孔树脂柱吸附，水洗脱杂质，50-80％乙醇溶液洗脱连翘苷，浓缩结晶，乙醇溶解过氧化铝短柱及重结晶等工序制得连翘苷。采用本方法生产连翘苷，所得产品含量高、成本低，可以直接用作保健品药品原料。该方法易于工业化。

Description

一种从连翘叶中提取连翘苷的方法

技术领域：

本发明涉属于植物提取技术领域，具体涉及一种从连翘叶中提取连翘苷的方法。

背景技术：

连翘是中国临床常用传统中药之一，又名黄花条、连壳、青翘、落翘、黄奇丹等。《中华人民共和国药典》2005年版一部收载的连翘为木犀科连翘属植物连翘的干燥果实，果实初熟尚带绿色时采收称为青翘，果实熟透颜色发黄时采收称为老翘。

连翘有抗菌、强心、利尿、镇吐等药理作用，风热感冒，发热，心烦，咽喉肿痛，斑疹，丹毒，瘰疬，痈疮肿毒，急性肾炎，热淋。

连翘苷是木质素苷类化合物，分子式：C27H34O11，分子量：534，

物理性质：熔点1℃，难溶于水，溶于甲醇、乙醇等有机试剂。

连翘苷是连翘果实的主要成分之一，也是国家药典所规定的连翘质量控制指标成分，连翘苷具有抗菌、降血脂及减肥功能。

连翘果实中连翘苷含量低，在0.7％左右，而连翘叶中连翘苷含量4％左右。李发荣等发表的“中药连翘及连翘叶中连翘苷含量的比较研究”，该文献对青翘、老翘及叶子做了含量对比研究，叶子中连翘苷高达4.7％，是老翘的40倍。

现有连翘苷提取方法有醋酸铅法、氧化镁法、水提萃取法、醇提柱色谱法。

中国专利(申请号200610027331.X)“一种连翘提取物的制备方法”，该发明方法是连翘加水煎煮提取，醇沉法初步纯化，最后采用水饱和正丁醇萃取法进一步精制。

张杲发表的论文“连翘(Forsythia suspensa)叶药用价值及其药用活性组分的初步研究”，该文献对连翘叶中连翘苷的快速纯化工艺做了研究对比，该文献认为乙醇提取法可以达到较高的得率和较高的纯度，得率可以达到2.5％以上，纯度可高达85％，与传统的醋酸铅法和氧化镁法等提取分离方法相比较，消耗较少，而且无污染，是比较适合工业化生产的提取工艺路线。

柴渭莉发表论文“连翘叶中苷类成分的分离鉴定及其抗疲劳作用的研究”，该文献提取连翘苷的方法是乙醇提取，石油醚萃取，大孔树脂吸附等工序。

如上所述，现有工艺存在重金属超标或含量低或有机试剂种类多。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是提供一种从连翘叶中提取连翘苷的方法，该工艺能够减少有机试剂用量和种类，提高产品质量和品质。

本发明的技术方案是这样来实现的：

一种从连翘叶中提取连翘苷的方法，其特征在于由以下步骤组成：

1)碱水提取：取连翘叶粉碎，加入6-15倍量碱性水溶液，加热50-7℃，动态提取1-3小时，提取2-3次；

2)大孔树脂吸附：将上述提取液保温80-1℃滤过调至中性，加入大孔树脂柱吸附，先用8-10BV水洗杂质，再用5-8BV50-80％乙醇溶液洗脱连翘苷，洗脱液回收乙醇，放置结晶，滤出得粗结晶；

3)氧化铝短柱分离：将上述粗结晶用95％-99％乙醇溶解过氧化铝短粗柱，下注液减压回收乙醇至1/3-1/5体积结晶，得二次结晶物；

4)重结晶：将上述二次结晶物用95％-99％乙醇回流溶解常温结晶2-3次，减压真空干燥即得产品。

所述步骤1)中的碱性水溶液为ph9-10的氢氧化钙水溶液。

所述步骤2)调节ph的酸可选盐酸、硫酸、磷酸、醋酸或柠檬酸中的一种。

所述步骤2)中大孔树脂可选HZ801、D4020、X-5、ADS-8中的任一种，上柱流速1-4BV/h，洗脱速度为1-3BV/h。

所述步骤3)中氧化铝为120-200目中性氧化铝。

综上所述，本发明存在以下优点：

1)原料采用连翘叶和碱性水溶液替代有机试剂提取，大幅度降低生产成本。

2)大孔树脂富集替代有机试剂萃取，除杂效果好，操作简单，也符合当前药品生产要求。

3)过氧化铝短柱和重结晶，比硅胶柱层析成本低、处理量大。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

连翘叶挑拣去杂粉碎，取5kg投入小型提取罐，加入60Lph10的饱和石灰水加热到50℃，搅拌提取1小时，提取3次，合并提取液保温8℃滤过调至盐酸调解中性，加入3LHZ801大孔树脂柱吸附，上柱流速3L/h，先用30L水洗杂质，再用15L80％乙醇溶液洗脱连翘苷，洗脱速度为9L/h。，收集洗脱液回收乙醇，放置结晶，滤出得粗结晶。将粗结晶用99％乙醇溶解过氧化铝短粗柱(120-200目中性氧化铝800g，径高比1∶3)，下注液减压回收乙醇至1/5体积结晶结晶，得二次结晶物。将二次结晶物用95％乙醇回流溶解常温结晶3次，滤出结晶物减压真空干燥得连翘苷82g，含量98.5％。

实施例2：

连翘叶挑拣去杂粉碎，取5kg投入小型提取罐，加入40Lph9的饱和石灰水加热到7℃，搅拌提取2小时，提取3次，合并提取液保温100℃滤过调至硫酸调解中性，加入4L D4020大孔树脂柱吸附，上柱流速8L/h，先用40L水洗杂质，再用32L50％乙醇溶液洗脱连翘苷，洗脱速度为4L/h。，收集洗脱液回收乙醇，放置结晶，滤出得粗结晶。将粗结晶用95％乙醇溶解过氧化铝短粗柱(120-200目中性氧化铝800g，径高比1∶3)，下注液减压回收乙醇至1/3体积结晶结晶，得二次结晶物。将二次结晶物用99％乙醇回流溶解常温结晶2次，滤出结晶物减压真空干燥得连翘苷87g，含量99％。

实施例3：

连翘叶挑拣去杂粉碎，取5kg投入小型提取罐，加入75Lph10的饱和石灰水加热到60℃，搅拌提取2小时，提取2次，合并提取液保温8℃滤过调至磷酸调解中性，加入3L X-5大孔树脂柱吸附，上柱流速6L/h，先用30L水洗杂质，再用21L60％乙醇溶液洗脱连翘苷，洗脱速度为3L/h。，收集洗脱液回收乙醇，放置结晶，滤出得粗结晶。将粗结晶用95％乙醇溶解过氧化铝短粗柱(120-200目中性氧化铝700g，径高比1∶2)，下注液减压回收乙醇至1/5体积结晶结晶，得二次结晶物。将二次结晶物用95％乙醇回流溶解常温结晶3次，滤出结晶物减压真空干燥得连翘苷90g，含量98％。

实施例4：

连翘叶挑拣去杂粉碎，取5kg投入小型提取罐，加入40Lph9的饱和石灰水加热到65℃，搅拌提取2小时，提取3次，合并提取液保温90℃滤过调至柠檬酸酸调解中性，加入3LADS-8大孔树脂柱吸附，上柱流速6L/h，先用30L水洗杂质，再用18L70％乙醇溶液洗脱连翘苷，洗脱速度为5L/h。，收集洗脱液回收乙醇，放置结晶，滤出得粗结晶。将粗结晶用95％乙醇溶解过氧化铝短粗柱(120-200目中性氧化铝1000g，径高比1∶2)，下注液减压回收乙醇至1/3体积结晶结晶，得二次结晶物。将二次结晶物用95％乙醇回流溶解常温结晶2次，滤出结晶物减压真空干燥得连翘苷78g，含量98.3％。

实施例5：

连翘叶挑拣去杂粉碎，取10kg投入小型提取罐，加入60Lph10的饱和石灰水加热到60℃，搅拌提取2小时，提取3次，合并提取液保温8℃滤过调至醋酸调解中性，加入6LX-5大孔树脂柱吸附，上柱流速8L/h，先用60L水洗杂质，再用42L70％乙醇溶液洗脱连翘苷，洗脱速度为10L/h。，收集洗脱液回收乙醇，放置结晶，滤出得粗结晶。将粗结晶用99％乙醇溶解过氧化铝短粗柱(120-200目中性氧化铝800g，径高比1∶3)，下注液减压回收乙醇至1/3体积结晶结晶，得二次结晶物。将二次结晶物用95％乙醇回流溶解常温结晶3次，滤出结晶物减压真空干燥得连翘苷187g，含量99％。

Claims (5)

1.一种从连翘叶中提取连翘苷的方法，其特征在于由以下步骤组成：

1)碱水提取：取连翘叶粉碎，加入6-15倍量碱性水溶液，加热50-70℃，动态提取1-3小时，提取2-3次；

2)大孔树脂吸附：将上述提取液保温80-100℃滤过调至中性，加入大孔树脂柱吸附，先用8-10BV水洗杂质，再用5-8BV50-80％乙醇溶液洗脱连翘苷，洗脱液回收乙醇，放置结晶，滤出得粗结晶；

3)氧化铝短柱分离：将上述粗结晶用95％-99％乙醇溶解过氧化铝短粗柱，下注液减压回收乙醇至1/3-1/5体积结晶，得二次结晶物；

4)重结晶：将上述二次结晶物用95％-99％乙醇回流溶解常温结晶2-3次，减压真空干燥即得产品。

2.根据权利要求1所述从连翘叶中提取连翘苷的方法，其特征在于所述步骤1)中的碱性水溶液为ph9-10的氢氧化钙水溶液。

3.根据权利要求1所述从连翘叶中提取连翘苷的方法，其特征在于所述步骤2)调节ph的酸可选盐酸、硫酸、磷酸、醋酸或柠檬酸中的一种。

4.根据权利要求1所述从连翘叶中提取连翘苷的方法，其特征在于所述步骤2)中大孔树脂可选HZ801、D4020、X-5、ADS-8中的任一种，上柱流速1-4BV/h，洗脱速度为1-3BV/h。

5.根据权利要求1所述从连翘叶中提取连翘苷的方法，其特征在于所述步骤3)中氧化铝为120-200目中性氧化铝，径高比1∶2-5。