CN101972246A

CN101972246A - 治疗癌症的药物,其制备方法和在制药中的应用

Info

Publication number: CN101972246A
Application number: CN 201010501091
Authority: CN
Inventors: 邱明华; 陈进雄; 李艳
Original assignee: Kunming Institute of Botany of CAS
Current assignee: Kunming Institute of Botany of CAS
Priority date: 2010-10-09
Filing date: 2010-10-09
Publication date: 2011-02-16
Anticipated expiration: 2030-10-09
Also published as: CN101972246B

Abstract

抗肿瘤药物，含有治疗有效量的印楝三萜化合物1或2或3和药物上可接受的载体，化合物1-3及含其的药物的制备方法，它们在制备治疗和预防肿瘤疾病的药物中的应用。药理试验结果证明本发明化合物1-3具有很好的抗肿瘤生物活性，为印楝植物的综合利用，以及治疗和预防癌症药物的研制开发提供了新的途径。

Description

治疗癌症的药物,其制备方法和在制药中的应用

技术领域

本发明属于药物技术领域，具体地，涉及一种以印楝三萜化合物为有效成分的抗肿瘤药物，其制备方法和其在制备治疗和预防癌症的药物中的应用。

背景技术

印楝Azadirachta indica A.系楝科常绿乔木，原产南亚东南亚，印度、缅甸等国家热带地区分布较多，常绿乔木。印楝Azadirachta indica A.，系楝科植物，原产南亚东南亚，常绿乔木。印楝在国外分布于印度、巴基斯坦、泰国和缅甸等干旱地区。在20世纪20年代作为干旱地区防治沙漠化树种被引种至非洲等地。本世纪初我国云南、四川、海南等一些干热河谷地区大规模引种成功，并已经有规模化种植。印楝属于喜温、耐旱、耐贫脊土地，在无霜，年降雨量1200mm以下地区，热带雨林地区生长良好，生长速度快，是热带亚热带的速生树种，可以高达20余米。分枝早，冠幅大，枝叶蓬密，主干短，根系发达。生长速度极快，一年幼树可以达4-6米，次年即开始结籽，7-8年进入繁盛期，产果可高达每株50公斤，规模化种植产量也很高。

1968年Butterworth等从引楝种子首次分离鉴定了印楝素Azadirachtin，并确定了其化学结构，这是一种新型的活性极强的昆虫拒食物质。随后兴起了印楝中杀虫活性物质的研究热潮，从中发现了200余个化合物，主要分布在种籽、树皮、树叶、枝条等部位，活性物质以印楝素结构类型化合物为主，其他主要结构Salannin和Nimbin也有活性，这三个结构类型都是楝科三萜的基本类型。印楝杀虫谱广，印楝提取物的活性成分在结构和成分上与昆虫体内许多激素类物质相似。当害虫吸食这些印楝活性成分后，在身体内激素平衡被破坏，内分泌系统运转失常，新陈代谢、生长发育失调，大脑和身体各部分功能紊乱，以致生殖功能丧失，不能繁衍后代，最终使昆虫群体数量下降。这是比较公认的印楝提取物的杀虫作用机理。印楝提取物符合生态综合防治的要求，使它具有广泛的应用前景，是未来人工合成农药的理想替代品。因而印楝提取物成为备受生态时代关注的绿色农药。本世纪除，我国云南、四川、海南等一些干热河谷地进行了印楝植物大规模推广种植，目前云南元谋等地已经具有大量的印楝植物农药原料。然而，迄今为止，未发现楝科三萜具有抗肿瘤的活性，更没有以其为有效成分制成的抗癌药物的报道。

发明内容

本发明目的旨在于提供以化合物1-3为有效成分的抗肿瘤药物，化合物1-3及含其组成的药物的制备方法，及其在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明用下述的技术方案来实现上述的发明目的：

抗肿瘤药物，含有治疗有效量的下述结构式所示的印楝三萜化合物1或2或3和药物上可接受的载体，

结构式1-3所示的化合物1-3的制备方法，取印楝枝叶，粉碎，用95％甲醇冷浸提取3-4次，每次半天或1天，合并提取液，减压浓缩至无甲醇蒸出，得到浸膏；浸膏用蒸馏水稀释后，用石油醚萃取3-4次，减压回收石油醚，得石油醚萃取部分；剩下的水层用乙酸乙酯萃取3-4次，减压回收后得到富集三萜类化合物的乙酸乙酯萃取部分；乙酸乙酯萃取部分经常压硅胶柱上柱层析，用氯仿-甲醇梯度洗脱进行粗分，用TLC检测，得到4-6个部分；收集50∶1的氯仿-甲醇部分，减压浓缩溶剂，得到浸膏部分，用大孔吸附树脂DA101柱层析分段，用90％甲醇/水溶液洗脱，得活性化合物部位；该活性部位用C-18反相硅胶柱层析分离，收集50％-55％MeOH/H₂O溶剂洗脱馏分；上两次硅胶柱，分别用氯仿-丙酮，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，收集50∶1的氯仿∶丙酮，2∶1的石油醚∶乙酸乙酯梯度洗脱洗出部分，分别得化合物1、化合物2和部分的化合物3；化合物3主要来源于C-18反相硅胶柱层析分离时，收集65％-70％MeOH/H₂O溶剂洗脱馏份中。

本发明以化合物1-3为有效成分组成的药物的制备方法，取印楝枝叶，粉碎，用95％甲醇冷浸提取3-4次，每次半天或1天，合并提取液，减压浓缩至无甲醇蒸出，得到浸膏；浸膏用蒸馏水稀释后，用石油醚萃取3-4次，减压回收石油醚，得石油醚萃取部分；剩下的水层用乙酸乙酯萃取3-4次，减压回收后得到富集三萜类化合物的乙酸乙酯萃取部分；乙酸乙酯萃取部分经常压硅胶柱上柱层析，用氯仿-甲醇梯度洗脱进行粗分，用TLC检测，得到4-6个部分；收集50∶1的氯仿-甲醇部分，减压浓缩溶剂，得到浸膏部分，用大孔吸附树脂DA101柱层析分段，用90％甲醇/水溶液洗脱，得活性化合物部位；该活性部位用C-18反相硅胶柱层析分离，收集50％-55％MeOH/H₂O溶剂洗脱馏分；上两次硅胶柱，分别用氯仿-丙酮，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，收集50∶1的氯仿∶丙酮，2∶1的石油醚∶乙酸乙酯梯度洗脱洗出部分，分别得化合物1、化合物2和部分的化合物3；化合物3主要来源于C-18反相硅胶柱层析分离时，收集65％-70％MeOH/H₂O溶剂洗脱馏份中；分别将上述得到的化合物1-3与药学上可接受的载体配制成药物制剂。

下述结构式所示的印楝三萜化合物1或2或3在制备治疗或预防癌症疾病的药物中的应用，

上述应用中，所指的癌症为白血病、肝癌、肺癌、乳腺癌。

本发明含化合物1-3为有效成分组成的药物在制备治疗或预防癌症疾病的药物中的应用。

上述应用中，所指的癌症为白血病、肝癌、肺癌、乳腺癌。

上文所述药学中可接受的载体是指药学领域常规的药物载体，例如：稀释剂、赋形剂如水等，填充剂如淀粉、蔗糖等；黏合剂如纤维表衍生物、藻酸盐、明胶和聚乙烯吡咯烷酮；湿润剂如甘油；崩解剂如琼脂、碳酸钙和碳酸氢钠；吸收促进剂如季铵化合物；表面活性剂如十六烷醇；吸附载体如高岭土和皂黏土；润滑剂如滑石粉、硬脂酸钙和镁、聚乙二醇等。另外还可以在药物中加入其他辅剂如香味剂、甜味剂等。

本发明化合物1-3可以组合物的形式通过口服、鼻吸入、直肠或肠胃外给药的方式施于需要这种治疗的患者。用于口服时，可将其制成常规的固体制剂如片剂、粉剂、粒剂、胶囊等，制成液体制剂如水或油悬浮剂或其他液体制剂如糖浆、酏剂等；用于肠胃外给药时，可将其制成注射用的溶液、水或油性悬浮剂等。

本发明药物的各种剂型可以按照药学领域的常规生产方法制备。例如命名活性成分与一种或多种载体混合，然后将其制成所需的剂型。

本发明的药物优选含重量比为0.1％-99％的活性成分，最优选含有重量比为0.5％-95％的活性成分。

本发明化合物的施用量可根据用药途径、患者的年龄、体重、所治疗的疾病的类型和严重程度等变化，其日剂量可以是0.01-10mg/kg体重，优选0.1-5mg/kg体重。可以一次或多次施用。

具体实施方式

下面的实施例可能使本领域专业技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1：

抗肿瘤活性印楝三萜化合物1-3的制备方法：

本发明的制备工艺可简述为：

从采集自云南、及各地的栽培印楝(Azadirachta indica A.)枝叶部分，粉碎后用95％甲醇冷浸提取3-4次，每次半天或1天，合并提取液，减压浓缩至无甲醇蒸出，得到浸膏。浸膏用一定量的蒸馏水稀释后，用石油醚萃取3-4次，减压回收石油醚后，得到石油醚萃取部分；剩下的水层用乙酸乙酯萃取3-4次，减压回收后得到富集三萜类化合物的乙酸乙酯萃取部分。乙酸乙酯部分经常压硅胶柱上柱层析，用氯仿-甲醇梯度洗脱进行粗分，用TLC检测，得到4-6个部分。收集氯仿-甲醇(50∶1)部分，减压浓缩溶剂，得到浸膏部分用大孔吸附树脂DA101柱层析分段，用90％甲醇/水溶液洗脱部分，得到活性化合物部位。该活性部位用C-18反相硅胶柱层析分离，收集50％-55％MeOH/H₂O溶剂洗脱馏分。上两次硅胶柱，分别用氯仿-丙酮，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，收集氯仿∶丙酮(50∶1)，石油醚∶乙酸乙酯(2∶1)梯度洗脱洗出部分，就可以分别得到化合物1，化合物2；同时可以得到少量化合物3。化合物3属于典型三萜，本工艺出来的只是植物所含的一部分，主要分布于C-18反相硅胶柱层析分离时，收集65％-70％MeOH/H₂O溶剂洗脱馏份中。

具体制备本发明抗肿瘤活性印楝三萜化合物1-3的步骤为：

1.样品：

2009年5月从云南省元谋县采集的栽培印楝(Azadirachta indica A.)枝叶部分47Kg。

2.分离：

印楝(Azadirachta indica A.)枝叶47Kg，粉碎后用95％甲醇140L冷浸提取4次，头2次每次萃取20小时，后2次每次萃取12小时；合并提取液，减压浓缩至无甲醇蒸出，加2倍量水，过滤，滤液用等量乙酸乙酯萃取3次，减压回收乙酸乙酯萃取溶剂，得到浸膏1250g。乙酸乙酯萃取部分(1250g)用硅胶2000g拌样，在常压硅胶柱(硅胶3000g)经柱层析氯仿-甲醇(100∶0，50∶1，20∶1，10∶1，4∶1)梯度洗脱，用TLC检测，得到5个部分(Fr.1-Fr.5)。其中氯仿-甲醇50∶1洗脱液洗下的Fr-2(497g)为主要部分，用大孔吸附树脂DA101柱层析分段，用90％甲醇/水溶液洗脱部分，浓缩得到浸膏Fr-2-2约303g。此部分继续用硅胶柱层析，用石油醚-丙酮从100∶0至50∶50梯度洗脱，得到Fr-2-2-A至Fr-2-2-E五个部分，其中Fr-2-2-B部分约110g，Fr-2-2-C部分约96g.

Fr-2-2-B(110g)用C-18反相硅胶柱层析，50％-55％MeOH/H₂O洗脱部分，再反复用硅胶柱层析，用氯仿∶丙酮(100∶1至5∶1)，石油醚∶乙酸乙酯(20∶1至5∶3)洗脱溶剂系统，梯度洗脱洗出部分，分部分馏份收集，石油醚∶乙酸乙酯2∶1洗出部位，，得到化合物1约3g，以及少许化合物3(90mg)。Fr-2-2-C(96g)用C-18反相硅胶柱层析，50％-55％MeOH/H₂O洗脱部分，再反复用硅胶柱层析，用氯仿∶丙酮(100∶1至5∶1)，石油醚∶乙酸乙酯(20∶1至5∶3)洗脱溶剂系统，梯度洗脱洗出部分，分部分馏份收集，石油醚∶乙酸乙酯 2∶1洗出部位，，得到化合物2约5.5g，以及少许化合物3(210mg)。两部分化合物3合并，得化合物3约300mg。

3、化合物1-3的结构鉴定和表征：

化合物1，Nim bolide，无色晶体(CH₃OH)，C₂₇H₃₀O₇，¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ_H7.30(1H，m，H-21)，7.26(1H，d，J＝9.7Hz，H-3)，7.20(1H，m，H-23)，6.24(1H，m，H-22)，5.91(1H，d，J＝9.7Hz，H-2)，5.51(1H，m，H-15)，4.62(1H，dd，J＝3.7，12.5Hz，H-6)，4.26(1H，d，J＝3.6Hz，H-7)，3.65(1H，m，H-17)，3.52(3H，s，COOCH ₃)，3.24(1H，dd，J＝5.5，16.2Hz，H-11β)，3.17(1H，d，J＝12.5Hz，H-5)，2.72(2H，t，J＝5.5Hz，H-9)，2.36(1H，dd，J＝5.5，16.2Hz，H-11α)，2.18(1H，m，H-16β)，2.08(1H，m，H-16α)，1.69(3H，d，J＝0.9Hz H-18)，1.46(3H，s，H-29)，1.35(3H，s，H-30)，1.21(3H，s，H-19)；¹³C NMR(CDCl₃，100MHz)δ_c200.8(s，C-1)，131.0(d，C-2)，149.6(d，C-3)，43.6(s，C-4)，47.7(d，C-5)，73.4(d，C-6)，82.8(d，C-7)，50.3(s，C-8)，41.1(d，C-9)，45.2(s，C-10)，32.1(t，C-11)，172.9(s，C-12)，136.4(s，C-13)，144.7(s，C-14)，88.4(d，C-15)，41.2(t，C-16)，49.4(d，C-17)，12.9(q，C-18)，15.1(q，C-19)，126.5(s，C-20)，138.8(d，C-21)，110.3(d，C-22)，143.1(d，C-23)，174.9(s，C-28)，18.5(q，C-29)，17.1(q，C-30)，51.8(q，OCH₃).^[1]

化合物2，28-deoxonimbolid，无色针晶(丙酮)，C₂₇H₃₂O₆，¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ_H7.30(1H，m，H-21)，7.20(1H，m，H-23)，7.05(1H，d，J＝9.7Hz，H-3)，6.26(1H，m，H-22)，5.88(1H，d，J＝9.7Hz，H-2)，5.49(1H，m，H-15)，4.12(1H，dd，J＝12.5，3.4Hz，H-6)，4.12(1H，dd，J＝12.5，3.4Hz，H-6)，3.79(1H，d，J＝7.2Hz，H-28β)，3.72(1H，d，J＝7.1Hz，H-28α)，3.63(1H，d，J＝8.4Hz，H-17)，3.53(3H，s，12-COOCH3)，3.25(1H，dd，J＝16.1，5.4Hz，H-11β)，2.80(1H，d，J＝12.6Hz，H-5)，2.63(2H，t，J＝5.4Hz，H-9)，2.35(1H，dd，J＝16.2，5.6Hz，H-11α)，2.16(1H，m，H-16β)，2.09(1H，m，H-16α)，1.68(3H，d，J＝1.4Hz，H-18)，1.33(3H，s，H-29)，1.29(3H，s，H-28)，1.14(3H，s，H-19)；¹³C NMR(CDCl₃，100MHz)δ_c202.4(s，C-1)，130.22(d，C-2)，152.0(d，C-3)，41.9(s，C-4)，48.9(d，C-5)，72.5(t，C-6)，85.3(d，C-7)，50.6(s，C-8)，41.2(d，C-9)，46.1(s，C-10)，32.3(t，C-11)，173.4(s，C-12)，135.1(s，C-13)，145.9(s，C-14)，87.8(d，C-15)，41.4(t，C-16)，49.3(d，C-17)，12.8(q，C-18)，14.5(q，C-19)，126.8(s，C-20)，138.8(d，C-21)，110.4(d，C-22)，143.0(d，C-23)，79.2(t，C-28)，20.5(q，C-29)，17.3(q，C-30)，51.6(q，-OCH₃).

化合物3，24-methylenecycloartane-3，28-diol，无色针晶(丙酮)，C₃₁H₅₂O₂，¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ_H 4.71(1H，s，H-31a)，4.66(1H，s，H-31b)，3.75(1H，d，J＝11.4，3.9Hz，H-3)，3.73(1H，d，J＝10.7Hz，H-28a)，3.52(1H，d，J＝10.3Hz，H-28b)，1.03(3H，d，J＝2.8Hz，H-26)，1.01(3H，d，J＝2.8Hz，H-27)，0.96(3H，s，H-18)，0.93(3H，s，H-29)，0.89(3H，d，J＝5.3Hz，H-21)，0.88(3H，s，H-30)，0.58(1H，d，J＝4.0Hz，H-19endo)，0.38(1H，d，J＝4.2Hz，H-19exo)；¹³C NMR(CDCl₃，100MHz)δ_c31.7(t，C-1)，30.1(t，C-2)，77.0(d，C-3)，43.6(t，C-4)，42.4(d，C-5)，20.9(t，C-6)，25.7(t，C-7)，47.9(d，C-8)，19.9(s，C-9)，25.2(s，C-10)，28.1(t，C-11)，35.5(t，C-12)，45.2(s，C-13)，48.7(s，C-14)，32.8(t，C-15)，26.4(t，C-16)，52.2(d，C-17)，18.0(q，C-18)，30.0(t，C-19)，36.3(d，C-20)，18.3(q，C-21)，34.9(t，C-22)，31.3(t，C-23)，156.9(s，C-24)，33.8(d，C-25)，21.8(q，C-26)，22.0(q，C-27)，71.0(t，C-28)，10.1(q，C-29)，19.3(q，C-29)，105.9(t，C-31).

实施例2：

片剂：按照本领域已知的方法制备片剂，每片含有下述成分：

实施例1所得化合物1-3任一种 50mg

乳糖 70mg

硬脂酸镁 3mg

聚乙烯吡咯烷酮 7mg

合计 130mg

如果需要，片剂可用羟丙基甲基纤维素、滑石和着色剂进行膜包覆。

实施例3：

片剂：实施例1所得化合物1或2或310mg，乳糖180mg，淀粉55mg，硬脂酸镁5mg；

制备方法：将化合物1或2或3、乳糖和淀粉混合，用水均匀湿润，把湿润后的混合物过筛并干燥，再过筛，加入硬脂酸镁，然后将混合物压片，每片重250mg，化合物含量为10mg。

实施例4：

安瓿剂：实施例1所得化合物1或2或32mg，氯化钠10mg；

制备方法：将化合物1或2或3和氯化钠溶解于适量的注射用水中，过滤所得溶液，在无菌条件下装入安瓿瓶中。

实施例5：

胶囊剂：实施例1所得化合物1或2或310mg，乳糖187mg，硬脂酸镁3mg；

制备方法：将化合物1或2或3与助剂混合，过筛，均匀混合，把得到的混合物装入硬明胶胶囊，每个胶囊重200mg，活性成分含量为10mg。

实施例6：

胶囊：按照本领域已知的方法制备胶囊剂，每个胶囊中含有下述成分：

实施例1所得化合物1-3任一种 50mg

乳糖 70mg

玉米淀粉 25mg

硬脂酸镁 1mg

聚乙烯吡咯烷酮 4mg

合计 150mg

实施例7：

注射剂：按实施例1的方法先制得本发明化合物1-3，取化合物1-3中任一种按本领域已知的方法制备注射剂，加注射用水，精滤，灌封灭菌制成注射液。

实施例8：

一、本发明化合物1-3的细胞毒活性实验方法：

1、实验方法(MTT法)

1.接种细胞：用含10％胎牛血清的培养液(DMEM或者RMPI1640)配成单个细胞悬液，以每孔5000-10000个细胞接种到96孔板，每孔体积100μl，贴壁细胞提前12小时接种培养。

2.加入待测化合物(本发明化合物1-3)溶液(固定浓度40μM初筛，在该浓度对肿瘤细胞生长抑制在50％附近的化合物设5个浓度进入梯度复筛)，每孔终体积200μl，每种处理均设3个复孔。

3.显色：37摄氏度培养48小时后，每孔加MTT溶液20μl。继续孵育4小时，终止培养，吸弃孔内培养上清液，每孔加200μl的SDS溶液(10％)，过夜孵育(温度37℃)，使结晶物充分融解。

4.比色：选择595nm波长，酶联免疫检测仪(Bio-Rad 680)读取各孔光吸收值，记录结果，以浓度为横坐标，细胞存活率为纵坐标绘制细胞生长曲线，应用两点法(Reed and Muench法)计算化合物的IC₅₀值。

药物对肿瘤细胞生长抑制的计算如下：

当Ti≥Tz时，在药物浓度i的生长抑制率为：[(Ti-Tz)/(C-Tz)]×100；

当Ti≤Tz时，在药物浓度i的生长抑制率为：[(Ti-Tz)/Tz]×100；

反映量效的三个参数的计算如下：

GI50(生长抑制50％)可由[(Ti-Tz)/(C-Tz)]×100＝50计算得出。其反映药物导致试验组蛋白增加比对照组增加减少50％时的药物浓度。

TGI(生长完全抑制)可由Ti＝Tz计算得出。

LC50(导致药物处理后蛋白的含量比处理前减少50％的药物浓度)，显示处理后细胞的净损失，其可以由[(Ti-Tz)/Tz]×100＝50计算得出。如果活性达到一定水平的话，可以计算出这三个参数值。如果活性太低或者太高，参数的值可以用大于或者小于最大或者最小的试验浓度来表示。

二、本发明化合物1-3的肿瘤细胞抑制活性实验结果：

表1化合物1-3对不同细胞株的细胞毒活性IC₅₀(μM)

从表1中数据可以看出：在肿瘤细胞株HL-60(白血病)、SMMC-7721(人肝癌)、A-549(人肺癌)、MCF-7(人乳腺癌)、SW480(人结肠癌)的细胞毒活性筛选实验中，化合物1对上述5种肿瘤细胞毒活性，IC₅₀分别达到0.83，2.07，2.86，6.67，2.23μM；化合物2则对SMMC-7721(人肝癌)、SW480(人结肠癌)也表现肿瘤细胞毒活性，IC₅₀分别达到7.62，13.03μM；化合物3则对SMMC-7721(人肝癌)、MCF-7(人乳腺癌)、SW480(人结肠癌)也表现肿瘤细胞毒活性，IC₅₀分别达到0.56，2.89，8.31μM；而阳性对照之一，广泛使用的临床药物顺铂(Cisplatin)对HL-60(白血病)、SMMC-7721(人肝癌)、A-549(人肺癌)、MCF-7(人乳腺癌)、SW480(人结肠癌)肿瘤细胞毒活性，IC₅₀分别为1.50，14.75，14.75，15.68，25.57μM。由此可见化合物1对上述5种肿瘤细胞抑制作用，均比阳性对照之一顺铂(Cisplatin)要显著。化合物3对SMMC-7721(人肝癌)的细胞毒活性(IC₅₀0.56μM)，比阳性对照之一顺铂(Cisplatin)对SMMC-7721(人肝癌)的细胞毒活性(IC₅₀14.75μM)相差26倍，活性十分显著。

化合物1-3对HL-60(白血病)、SMMC-7721(人肝癌)、A-549(人肺癌)、MCF-7(人乳腺癌)、SW480(人结肠癌)的细胞毒活性属本发明首次报道。

本发明对印楝种籽原料和印楝枝叶进行了化学成分比较和结构研究。从印楝枝叶中得到的一些化合物，在肿瘤细胞株HL-60(白血病)、SMMC-7721(人肝癌)、A-549(人肺癌)、MCF-7(人乳腺癌)、SW480(人结肠癌)的细胞毒活性筛选实验中，有一组化合物具有较强的肿瘤细胞抑制活性，其中化合物1-3对不同肿瘤细胞的抑制活性，强于阳性对照Cisplatin(顺铂)，其结构分别为：Nimbolide(1)，28-deoxonimbolid(2)，24-methylenecycloartane-3，28-diol(3)。

上述试验结果证明本发明化合物1-3具有很好的抗肿瘤的生物活性，为印楝植物的综合利用，治疗癌症药物开发方面，提供了新药物和新的途径。

Claims

1.抗肿瘤药物，含有治疗有效量的下述结构式所示的印楝三萜化合物1或2或3和药学上可接受的载体，

2.权利要求1中结构式1-3所示的化合物1-3的制备方法，取印楝枝叶，粉碎，用95％甲醇冷浸提取3-4次，每次半天或1天，合并提取液，减压浓缩至无甲醇蒸出，得到浸膏；浸膏用蒸馏水稀释后，用石油醚萃取3-4次，减压回收石油醚，得石油醚萃取部分；剩下的水层用乙酸乙酯萃取3-4次，减压回收后得到富集三萜类化合物的乙酸乙酯萃取部分；乙酸乙酯萃取部分经常压硅胶柱上柱层析，用氯仿-甲醇梯度洗脱进行粗分，用TLC检测，得到4-6个部分；收集50∶1的氯仿-甲醇部分，减压浓缩溶剂，得到浸膏部分，用大孔吸附树脂DA101柱层析分段，用90％甲醇/水溶液洗脱，得活性化合物部位；该活性部位用C-18反相硅胶柱层析分离，收集50％-55％MeOH/H₂O溶剂洗脱馏分；上两次硅胶柱，分别用氯仿-丙酮，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，收集50∶1的氯仿∶丙酮，2∶1的石油醚∶乙酸乙酯梯度洗脱洗出部分，分别得化合物1、化合物2和部分的化合物3；化合物3主要来源于C-18反相硅胶柱层析分离时，收集65％-70％MeOH/H₂O溶剂洗脱馏份中。

3.权利要求1所述的药物的制备方法，取印楝枝叶，粉碎，用95％甲醇冷浸提取3-4次，每次半天或1天，合并提取液，减压浓缩至无甲醇蒸出，得到浸膏；浸膏用蒸馏水稀释后，用石油醚萃取3-4次，减压回收石油醚，得石油醚萃取部分；剩下的水层用乙酸乙酯萃取3-4次，减压回收后得到富集三萜类化合物的乙酸乙酯萃取部分；乙酸乙酯萃取部分经常压硅胶柱上柱层析，用氯仿-甲醇梯度洗脱进行粗分，用TLC检测，得到4-6个部分；收集50∶1的氯仿-甲醇部分，减压浓缩溶剂，得到浸膏部分，用大孔吸附树脂DA101柱层析分段，用90％甲醇/水溶液洗脱，得活性化合物部位；该活性部位用C-18反相硅胶柱层析分离，收集50％-55％MeOH/H₂O溶剂洗脱馏分；上两次硅胶柱，分别用氯仿-丙酮，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，收集50∶1的氯仿∶丙酮，2∶1的石油醚∶乙酸乙酯梯度洗脱洗出部分，分别得化合物1、化合物2和部分的化合物3；化合物3主要来源于C-18反相硅胶柱层析分离时，收集65％-70％MeOH/H₂O溶剂洗脱馏份中；分别将得到的化合物1-3与药学上可接受的载体配制成药物常用制剂。

4.下述结构式所示的印楝三萜化合物1或2或3在制备治疗或预防癌症疾病的药物中的应用，

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于所述癌症为白血病、肝癌、肺癌、乳腺癌。

6.权利要求1所述的药物在制备治疗或预防癌症疾病的药物中的应用。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于所述癌症为白血病、肝癌、肺癌、乳腺癌。