CN101967254B - 一种医用微孔海绵及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种医用微孔海绵及其制备方法,主要是由PVA、丝素蛋白和甲醛在酸性溶液中进行缩聚反应制得，制备方法包括以下步骤：PVA溶液与丝素蛋白溶液混合，搅拌成均匀的混合溶液，并缓慢加热；向混合溶液中搅拌加入一定体积的甲醛水溶液，继续搅拌一定时间，再加入一定体积酸溶液，PVA和丝素蛋白在酸性条件和甲醛的作用下，发生缩醛反应，分子之间发生交联；调整搅拌速度至停止：固化成型；脱模洗涤；最后冷冻干燥并加工成型。本发明制备的医用海绵孔径均匀，约为180-500um，吸水率高达1200%-4000%。采用机械发泡的方法可减少发泡剂或致孔剂的使用，避免发泡剂或致孔剂的残留对伤口的伤害。

Description

一种医用微孔海绵及其制备方法

技术领域

本发明涉及生物医用敷料领域，尤其是指一种医用微孔海绵及其制备方法及其联接器。

背景技术

PVA泡沫海绵由于具备优异的吸水性，吸水后质地柔软且有较好的耐热、耐磨性，因此可应用过滤材料、隔音和隔热材料、擦拭布以及医用卫生材料等等。但是目前合成PVA海绵都是采用在PVA中加入成孔剂、发泡剂等，其原理是通过化学反应产生的气体，如二氧化碳，来发泡。但是作为医用材料使用时，尤其是与伤口接触时，材料内不能含有有毒或有刺激性的物质溶出，因此PVA泡沫材料作为医用敷料使用时必须将发泡剂和致孔剂等伤口溶出的物质除去，确保有毒或有害的物质达到国家相关规定的标准。另外PVA泡沫塑料作为医用敷料使用时，主要是用于止血、吸液，因此需要该材料具备良好的吸水性，而决定该材料吸水性主要是由孔径和孔隙率决定的。而现有的化学发泡法制备PVA海绵导致孔隙不均匀、发泡剂或致孔剂难于清除而残留等问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：提供一种医用微孔海绵的制备方法，解决现有医用海绵孔隙不均匀，发泡剂或致孔剂难于清除而残留等问题。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：一种医用微孔海绵，主要由聚乙烯醇PVA，丝素蛋白，甲醛在酸性水溶液中缩聚反应而成，海绵孔径为180-500 um，主要结构式如下式II：

（II）

其中m，n为正整数。

较佳地，所述反应体系包括以下质量比体积百分数的组份：

PVA                      5%-12%

丝素蛋白                  0-5%

甲醛                      2.7%-7.4%

酸                        3%-19% 

余量为水。

优选地，所述反应体系进一步包括质量体积百分比为0.05%~0.71%的烷基酚聚氧乙烯醚（OP）。

所述PVA采用的是药用级，分子量的范围在10万-22万，醇解度为98%～100％；丝素蛋白质量比体积百分数为1-1.5%；所述酸选自盐酸、硫酸、磷酸和醋酸中一种或几种的组合。

所述的医用微孔海绵，其制备方法主要包括以下步骤：

1）PVA溶液与丝素蛋白溶液混合，搅拌成均匀的混合溶液，并缓慢加热；

2）缩醛反应：搅拌一定时间，向步骤1的混合溶液中加入一定体积的甲醛水溶液，继续搅拌一定时间，再加入一定体积酸溶液，PVA和丝素蛋白在酸性条件和甲醛的作用下，发生缩醛反应，分子之间发生交联；

3）调整搅拌速度至停止： 

4）固化成型；

5）脱模洗涤；

6）冷冻干燥和加工成型。

其中，第1步骤中进一步包括向混合溶液中搅拌加入OP; 制备过程中所使用的机械搅拌的浆叶至少为2-3层，转速为200-1400转/分钟。

在一较佳实施方式中，所述第1步骤中，混合溶液加热到50-70℃，将机械搅拌速度调整至600-1400转/分钟的转速，搅拌一定时间后每100ml混合溶液中加入OP 1-5克；第2步骤中，搅拌一定时间后加入37%的甲醛溶液，加入量为每100毫升混合溶液加入10-25ml甲醛溶液，继续搅拌一定时间再加入浓度为20-60%酸溶液，酸加入量为每100毫升溶液加入20-50ml酸溶液；第4步骤中，缩聚反应形成的交联体系倒入模具，放入烘箱中固化成型一定时间。

更优选地，第1步骤溶液加热到55-65℃后，将机械搅拌速度调整至800-1300转/分钟的转速，搅拌4-12分钟后，每100ml混合液中加入OP 2-3克；所述第2步骤中，搅拌4-15分钟后，加入37%的甲醛溶液，加入量为每100毫升溶液加入22ml甲醛溶液，继续搅拌4-8分钟，再加入浓度为50%硫酸溶液25-30ml；第3步骤中，交联体系搅拌一定时间后开始降低搅拌速度，搅拌速度降至200r/min，1min后停止搅拌；第4步骤中，放入60℃烘箱中固化成型约5小时；第5步骤中，固化成型后的海绵在高温下不可直接挤压，在冷水中浸泡降温后方可挤压洗涤，洗涤至海绵不会产生稳定气泡为止，洗涤液最后呈中性。

在另一较佳实施方式中，所述医用微孔海绵的制备方法，具体包括如下步骤：

1）取20g的PVA与200g去离子水混合，机械搅拌，使PVA逐步溶解，制备出PVA溶液，然后加入1%的丝素蛋白溶液3ml，搅拌均匀，缓慢加热到60℃后，将机械搅拌速度调整至800转/分钟的转速，搅拌均匀后，每100ml混合液中加入OP 3克；

2）搅拌均匀后，向步骤1的混合溶液中加入37%的甲醛溶液，加入量为每100毫升溶液加入11ml甲醛溶液，继续搅拌一定时间后再加入浓度为50%硫酸溶液，酸加入量为每100毫升溶液加入12ml酸溶液；

3）搅拌一定时间后开始降低搅拌速度，降至200r/min搅拌一定时间后停止搅拌；

4）倒入模具，放入60℃烘箱中固化成型5h；

5）脱模洗涤，固化成型后的海绵在高温下不可直接挤压，在冷水中浸泡降温后方可挤压洗涤，洗涤至海绵不会产生稳定气泡为止，洗涤液最后呈中性；

6）冷冻干燥和加工成型。

再一较佳实施方式中，所述制备方法，具体包括如下步骤：

1）取25g的PVA与220g去离子水混合，机械搅拌，使PVA逐步溶解，制备出PVA溶液，然后加入4%浓度的丝素蛋白溶液2ml，搅拌均匀，缓慢加热到50℃后，将机械搅拌速度调整至1000转/分钟的转速，搅拌均匀，按每100ml混合液中加入OP 1克；

2）搅拌均匀后，向步骤1的混合溶液中加入37%的甲醛溶液，加入量为每100毫升溶液加入10ml甲醛溶液，继续搅拌一定时间后再加入浓度为37%盐酸溶液，酸加入量为每100毫升溶液加入 50ml酸溶液；

3）搅拌一定时间后开始降低搅拌速度，降至200r/min搅拌一定时间后停止搅拌；

4）倒入模具，放入60℃烘箱中固化成型5h；

5）脱模洗涤，固化成型后的海绵在高温下不可直接挤压，在冷水中浸泡降温后方可挤压洗涤，洗涤至海绵不会产生稳定气泡为止，洗涤液最后呈中性；

6）冷冻干燥和加工成型。

再一较佳实施方式中，所述制备方法，具体包括如下步骤：

1）取17g的PVA与200g去离子水混合，机械搅拌，使PVA逐步溶解，制备出PVA溶液，然后加入5% 丝素蛋白溶液1 ml，搅拌均匀，缓慢加热到70℃后，将机械搅拌速度调整至1400转/分钟的转速，搅拌9分钟后，每100ml混合液中加入 OP 3克；

2）搅拌 15分钟后，加入37%的甲醛溶液，加入量为每100毫升溶液加入25ml甲醛溶液，继续搅拌8分钟后，再加入浓度为20%磷酸溶液，酸加入量为每100毫升溶液加入20ml酸溶液；

3）搅拌10分钟后开始降低搅拌速度，5分钟内搅拌速度降至200r/min，1min后停止搅拌；

4）倒入模具，放入60℃烘箱中固化成型5h；

5）脱模洗涤，固化成型后的海绵在高温下不可直接挤压，在冷水中浸泡降温后方可挤压洗涤，洗涤至海绵不会产生稳定气泡为止，洗涤液至中性；

6）冷冻干燥和加工成型。

本发明的有益效果如下：本发明采用丝素蛋白与完全醇解的高粘度PVA，在酸催化的作用下发生聚合反应，在反应的过程中利用机械搅拌的方式进行发泡，经过固化，洗涤，干燥，再加工成型，该制备方法可避免了发泡剂的使用，可减少原料的使用。该材料具备均匀的孔隙，孔径的尺寸范围为180-500微米，有极强的吸水性，吸水率为1200%-4000%, 吸水后质地柔软，该材料可用于外科手术的吸血、止血和吸液，高档清洗用材，污染物吸附和过滤分离材料等等。

另外，采用机械发泡的方法制备医用微孔泡沫可减少发泡剂或致孔剂的使用，避免发泡剂或致孔剂的残留对伤口的伤害。

附图说明

图1是本发明PVA微孔海绵扫描电镜下的结构。

具体实施方式

本发明通过机械发泡法制备的医用PVA微孔海绵，是由下述质量比体积百分数的成份进行缩聚反应制得：

PVA                      5%-12%

丝素蛋白                  0-5%

甲醛                      2.7%-7.4%

酸                        3%-19% 

余量为水。

较佳地，反应体系包括以下质量比体积百分数的组份：

PVA                      5%-12%

丝素蛋白                  0-5%

烷基酚聚氧乙烯醚OP       0.05%~0.71% 

甲醛                      2.7%-7.4%

酸                        3%-19% 

余量为水。

其中，所述PVA采用的是药用级，分子量的范围在10万-22万，醇解度为98%～100％。PVA先与去离子水混合，机械搅拌，使PVA逐步溶解，形成PVA溶液，PVA溶液的浓度范围是5%-12%。

所述的丝素蛋白原料采用的是现有技术已报道的方法制备（参照中国专利申请号第200910223209.3号），制备浓度为0-5%丝素蛋白溶液，优选为0-1.5%。 

PVA与丝素蛋白的溶液的体积比为（20-100）：1混合。

优选地，分子量15万的PVA 与去离子水混合，制备出浓度为6%-9%PVA溶液，然后每100ml的 PVA加入4%的丝素蛋白溶液0-5ml。以 37%的甲醛溶液按每100毫升溶液加入10-25ml甲醛溶液加入反应体系中，后再加入浓度为20-60%酸溶液，酸加入量为每100毫升溶液加入20-50ml酸溶液，酸选自盐酸、硫酸、磷酸和醋酸中的任何一种。

化学反应原理如下式（I）: 

（I）

其中m，n，p为正整数。聚乙烯分子中的羟基和丝素蛋白中的氨基在酸性条件下，与甲醛反应，两种高分子之间和分子内部的羟基和氨基发生缩醛化反并最终导致材料的固化成型。同时，反应溶液在机械搅拌作用下，带入大量的气泡，溶液的高粘度和OP的共同作用把气泡稳定在溶液内，最终固化形成微孔海绵。所制得的医用PVA微孔海绵其孔径约为180-500 um，具有较好的吸水性，材料在扫描电镜下的结构见图1。

主要产物的结构式如下式II：

（II）

其中m，n为正整数。敷料与单纯的PVA对比，红外光谱中有明显的氨基官能团的吸收峰出现，其中3300-3500 cm^-1 位置峰强增强，出现了1620cm^-1和1520cm^-1两处的吸收峰随着丝素蛋白的含量的增加而不断增强。核磁共振¹³C的δ_C中出现74.4ppm和91.4ppm，即证明有-O-CH2-O-和-O-CH2-HN-的存在，说明本发明制备的敷料是以分子式（II）的聚合形式存在的。

该材料可用于制备止血、吸液医用敷料，过滤材料等。采用机械发泡的方法制备本发明的医用微孔泡沫可减少发泡剂或致孔剂的使用，避免发泡剂或致孔剂的残留对伤口的伤害。丝素蛋白是蚕丝中的主要成分，具有良好的稳定性和优异的力学性能，另外，丝素蛋白与PVA复合制备的泡沫材料，可进一步提高PVA泡沫的孔隙均匀性，从而提高其吸水率。

所述的医用微孔海绵，其制备方法主要包括以下步骤：

1）PVA溶液与丝素蛋白溶液混合，搅拌成均匀的混合溶液，并缓慢加热；

2）缩醛反应：搅拌一定时间，向步骤1的混合溶液中加入一定体积的甲醛水溶液，继续搅拌一定时间，再加入一定体积酸溶液，PVA和丝素蛋白在酸性条件和甲醛的作用下，发生缩醛反应，分子之间发生交联；

3）调整搅拌速度至停止： 

4）固化成型；

5）脱模洗涤；

6）冷冻干燥和加工成型。

其中，第1步骤中可进一步包括向混合溶液中搅拌加入烷基酚聚氧乙烯醚OP; 制备过程中所使用的机械搅拌的浆叶至少为2-3层，转速为200-1400转/分钟，对应的制备方法包括：

（1）PVA溶液与丝素蛋白溶液的搅拌混合：一定质量的PVA与去离子水混合，机械搅拌，使PVA逐步溶解，制备出PVA溶液，然后加入一定浓度的丝素蛋白溶液，搅拌均匀，缓慢加热到一定温度后，将机械搅拌速度调整至200-1400转/分钟，搅拌一定时间后加入烷基酚聚氧乙烯醚（简称OP），OP主要起稳定泡沫的作用；

（2）缩醛反应：搅拌一定时间，向步骤2制备的体系中加入一定体积的甲醛水溶液，继续搅拌一定时间，再加入一定体积酸溶液，PVA和丝素蛋白在酸性条件和甲醛的作用下，发生缩醛反应，分子之间发生交联；

（3）调整搅拌速度至停止：第2步骤中的交联体系搅拌一定时间后开始降低搅拌速度，搅拌速度降至200r/min，再搅拌一定时间，如1min后停止搅拌；

（4）固化成型：倒入模具，放入60℃（但不限于60℃）烘箱中固化成型一定时间，如（但不限于）5小时左右；

（5）脱模洗涤：固化成型后的海绵在高温下不可直接挤压，在冷水中浸泡降温后方可挤压洗涤，洗涤至海绵不会产生稳定气泡为止，洗涤液最后呈中性，从而得到具有上式（II）的PVA微孔海绵；

（6）冷冻干燥和加工成型：洗涤后的PVA海绵经冷冻，干燥，并在加工机械上进行切割和裁剪，制备得到预订尺寸的产品。

其第1步骤中，所述PVA采用的是药用级，分子量的范围在10万-22万，醇解度为98%～100％，PVA溶液的浓度范围是5%-12%。所述丝素蛋白浓度范围为0-5%。PVA与丝素蛋白溶液的体积比为（20-100）:1。

优选地，第1步骤中，分子量15万的PVA 与去离子水混合，机械搅拌，使PVA逐渐溶解，制备出浓度为6%-9%PVA溶液，然后每100ml的 PVA加入4%的丝素蛋白溶液0-5ml，搅拌均匀，缓慢加热到50-70℃后，将机械搅拌速度调整至600-1400转/分钟的转速，搅拌（但不限于）4-12分钟后，加入OP，总反应体系中OP浓度范围0.05%~0.71%，该步骤中，按每100ml混合液中加入OP 1-5克。

更优选地，溶液加热到55-65℃后，将机械搅拌速度调整至800-1300转/分钟的转速，搅拌（但不限于）6-9分钟后，每100ml混合液中加入OP 2-3克。

第2步骤中，搅拌（但不限于）4-15分钟后，加入37%的甲醛溶液，甲醛加入后，总反应体系混合溶液中甲醛的浓度为量2.7%-7.4%，继续搅拌（但不限于）4-8分钟后，再加入浓度为20-60%酸溶液，总反应体系中酸的浓度为3%-19%，酸选自盐酸、硫酸、磷酸和醋酸中的任何一种。在本步骤中，优选地搅拌4-15分钟后，加入37%的甲醛溶液，加入量为每100毫升溶液加入10-25ml甲醛溶液，继续搅拌4-8分钟，后再加入浓度为20-60%酸溶液，酸加入量为每100毫升溶液加入20-50ml酸溶液。

更优选地，所述第2步骤中，搅拌5-9分钟后，加入37%的甲醛溶液，加入量为每100毫升溶液加入22ml甲醛溶液，继续搅拌5-7分钟后，再加入浓度为50%硫酸溶液25-30ml。

所述第3步骤中，搅拌（但不限于）6-10分钟后开始降低搅拌速度，3-5分钟内（但不限于3-5分钟）搅拌速度降至200r/min，1min（但不限于1分钟）后停止搅拌。

在上述作用的机械搅拌的浆叶有2-3层，能保证搅拌的溶液的各部位能够搅拌均匀。通过多层搅拌桨高速搅拌将空气带入溶液，且含丝素蛋白的PVA溶液粘度较大，对溶液中的气泡有较好的稳定性，因此通过机械发泡的方法可制的孔径均匀的微孔泡沫。由上述方法制备的医用PVA微孔海绵，孔径约为180-500 um，整体孔径均一，可避免化学发泡带来的部分孔径过大，不均匀的现象。

下面结合实例进一步说明本发明的医用微孔海绵及其制备方法，但不作为本发明的限制。

例1

机械发泡法制备生物医用微孔泡沫具体的制备方法包括如下步骤：

（1）取20g的PVA与200g去离子水混合，机械搅拌，使PVA逐步溶解，制备出PVA溶液，然后加入1%的丝素蛋白溶液3ml，搅拌均匀，缓慢加热到60℃后，将机械搅拌速度调整至800转/分钟的转速，搅拌6分钟后，每100ml混合液中加入OP 3克；

（2）搅拌5分钟后，加入37%的甲醛溶液，加入量为每100毫升溶液加入11ml甲醛溶液，继续搅拌5分钟后，后再加入浓度为50%硫酸溶液，酸加入量为每100毫升溶液加入12ml酸溶液；

（3）搅拌8分钟后开始降低搅拌速度，5分钟内搅拌速度降至200r/min，1min后停止搅拌；

（4）倒入模具，放入60℃烘箱中固化成型5h；

（5）脱模洗涤，固化成型后的海绵在高温下不可直接挤压，在冷水中浸泡降温后方可挤压洗涤，洗涤至海绵不会产生稳定气泡为止，洗涤液最后呈中性；

（6）冷冻干燥和加工成型。

例 2

机械发泡法制备生物医用微孔泡沫具体的制备方法包括如下步骤：

（1）取25g的PVA与220g去离子水混合，机械搅拌，使PVA逐步溶解，制备出PVA溶液，然后加入4%浓度的丝素蛋白溶液2ml，搅拌均匀，缓慢加热到50℃后，将机械搅拌速度调整至1000转/分钟的转速，搅拌5分钟后，每100ml混合液中加入OP 1克；

（2）搅拌4分钟后，加入37%的甲醛溶液，加入量为每100毫升溶液加入10ml甲醛溶液，继续搅拌4 分钟后，再加入浓度为37%盐酸溶液，酸加入量为每100毫升溶液加入 50ml酸溶液；

（3）搅拌6分钟后开始降低搅拌速度，5分钟内搅拌速度降至200r/min，1min后停止搅拌；

（4）倒入模具，放入60℃烘箱中固化成型5h；

（5）脱模洗涤，固化成型后的海绵在高温下不可直接挤压，在冷水中浸泡降温后方可挤压洗涤，洗涤至海绵不会产生稳定气泡为止，洗涤液最后呈中性；

（6）冷冻干燥和加工成型。

例 3

机械发泡法制备生物医用微孔泡沫具体的制备方法包括如下步骤：

（1）取17g的PVA与200g去离子水混合，机械搅拌，使PVA逐步溶解，制备出PVA溶液，然后加入5% 丝素蛋白溶液1 ml，搅拌均匀，缓慢加热到70℃后，将机械搅拌速度调整至1400转/分钟的转速，搅拌9分钟后，每100ml混合液中加入 OP 3克；

（2）搅拌 15分钟后，加入37%的甲醛溶液，加入量为每100毫升溶液加入25ml甲醛溶液，继续搅拌8分钟后，再加入浓度为20%磷酸溶液，酸加入量为每100毫升溶液加入20ml酸溶液；

（3）搅拌10分钟后开始降低搅拌速度，5分钟内降至200r/min，1min后停止搅拌；

（4）倒入模具，放入60℃烘箱中固化成型5h；

（5）脱模洗涤，固化成型后的海绵在高温下不可直接挤压，在冷水中浸泡降温后方可挤压洗涤，洗涤至海绵不会产生稳定气泡为止，洗涤液最后呈中性；

（6）冷冻干燥和加工成型。  

Claims (10)

1.一种医用微孔海绵，主要由聚乙烯醇PVA，丝素蛋白，烷基酚聚氧乙烯醚OP，甲醛在酸性水溶液中缩聚反应而成；所述PVA采用的是药用级，PVA分子量的范围在10万-22万，醇解度为98%～100％；海绵孔径为180-500 μm，主要结构式如下式II：

（II）

其中m，n为正整数。

2.如权利要求1所述的医用微孔海绵，其特征在于：所述反应体系包括以下质量比体积百分数的组份：

PVA                      5%-12%

丝素蛋白                  0-5%，但大于0

甲醛                      2.7%-7.4%

酸                        3%-19% 

余量为烷基酚聚氧乙烯醚OP和水。

3.如权利要求2所述的医用微孔海绵，其特征在于：所述反应体系进一步包括质量体积百分比为0.05%~0.71%的烷基酚聚氧乙烯醚OP；丝素蛋白质量比体积百分数为1-1.5%；所述酸选自盐酸、硫酸、磷酸和醋酸中一种或几种的组合。

4.如权利要求1-3中任意一项所述的医用微孔海绵的制备方法，主要包括以下步骤：

1）PVA溶液与丝素蛋白溶液混合，搅拌成均匀的混合溶液，进一步向混合溶液中搅拌加入OP，并缓慢加热；

2）缩醛反应：搅拌一定时间，向步骤1的混合溶液中加入一定体积的甲醛水溶液，继续搅拌一定时间，再加入一定体积酸溶液，PVA和丝素蛋白在酸性条件和甲醛的作用下，发生缩醛反应，分子之间发生交联；

3）调整搅拌速度至停止： 

4）固化成型；

5）脱模洗涤；

6）冷冻干燥和加工成型。

5.如权利要求4所述的医用微孔海绵的制备方法，其特征在于：制备过程中所使用的机械搅拌的浆叶至少为2层，转速为200-1400转/分钟。

6.如权利要求5所述的医用微孔海绵的制备方法，其特征在于：所述第1步骤中，混合溶液加热到50-70℃，将机械搅拌速度调整至600-1400转/分钟的转速，搅拌一定时间后每100mL混合溶液中加入OP 1-5克；第2步骤中，搅拌一定时间后加入37%的甲醛溶液，加入量为每100毫升混合溶液加入10-25mL甲醛溶液，继续搅拌一定时间再加入浓度为20-60%酸溶液，酸加入量为每100毫升溶液加入20-50mL酸溶液；第4步骤中，缩聚反应形成的交联体系倒入模具，放入烘箱中固化成型一定时间。

7.如权利要求4所述的医用微孔海绵的制备方法，其特征在于：第1步骤溶液加热到55-65℃后，将机械搅拌速度调整至800-1300转/分钟的转速，搅拌4-12分钟后，每100mL混合液中加入OP 2-3克；所述第2步骤中，搅拌4-15分钟后，加入37%的甲醛溶液，加入量为每100毫升溶液加入22mL甲醛溶液，继续搅拌4-8分钟，再加入浓度为50%硫酸溶液25-30mL；第3步骤中，交联体系搅拌一定时间后开始降低搅拌速度，搅拌速度降至200r/min，1min后停止搅拌；第4步骤中，放入60℃烘箱中固化成型5小时；第5步骤中，固化成型后的海绵在高温下不可直接挤压，在冷水中浸泡降温后方可挤压洗涤，洗涤至海绵不会产生稳定气泡为止，洗涤液最后呈中性。

8.如权利要求4所述的医用微孔海绵的制备方法，其特征在于：具体包括如下步骤：

1）取20g的PVA与200g去离子水混合，机械搅拌，使PVA逐步溶解，制备出PVA溶液，然后加入1%的丝素蛋白溶液3mL，搅拌均匀，缓慢加热到60℃后，将机械搅拌速度调整至800转/分钟的转速，搅拌均匀后，每100mL混合液中加入OP 3克；

2）搅拌均匀后，向步骤1的混合溶液中加入37%的甲醛溶液，加入量为每100毫升溶液加入11mL甲醛溶液，继续搅拌一定时间后再加入浓度为50%硫酸溶液，酸加入量为每100毫升溶液加入12mL酸溶液；

3）搅拌一定时间后开始降低搅拌速度，降至200r/min搅拌一定时间后停止搅拌；

4）倒入模具，放入60℃烘箱中固化成型5h；

5）脱模洗涤，固化成型后的海绵在高温下不可直接挤压，在冷水中浸泡降温后方可挤压洗涤，洗涤至海绵不会产生稳定气泡为止，洗涤液最后呈中性；

6）冷冻干燥和加工成型。

9.如权利要求6所述的医用微孔海绵的制备方法，其特征在于：具体包括如下步骤：

1）取25g的PVA与220g去离子水混合，机械搅拌，使PVA逐步溶解，制备出PVA溶液，然后加入4%浓度的丝素蛋白溶液2mL，搅拌均匀，缓慢加热到50℃后，将机械搅拌速度调整至1000转/分钟的转速，搅拌均匀，按每100mL混合液中加入OP 1克；

2）搅拌均匀后，向步骤1的混合溶液中加入37%的甲醛溶液，加入量为每100毫升溶液加入10mL甲醛溶液，继续搅拌一定时间后再加入浓度为37%盐酸溶液，酸加入量为每100毫升溶液加入 50mL酸溶液；

3）搅拌一定时间后开始降低搅拌速度，降至200r/min搅拌一定时间后停止搅拌；

4）倒入模具，放入60℃烘箱中固化成型5h；

5）脱模洗涤，固化成型后的海绵在高温下不可直接挤压，在冷水中浸泡降温后方可挤压洗涤，洗涤至海绵不会产生稳定气泡为止，洗涤液最后呈中性；

6）冷冻干燥和加工成型。

10.如权利要求6所述的医用微孔海绵的制备方法，其特征在于：具体包括如下步骤：

1）取17g的PVA与200g去离子水混合，机械搅拌，使PVA逐步溶解，制备出PVA溶液，然后加入5% 丝素蛋白溶液1 mL，搅拌均匀，缓慢加热到70℃后，将机械搅拌速度调整至1400转/分钟的转速，搅拌9分钟后，每100mL混合液中加入 OP 3克；

2）搅拌 15分钟后，加入37%的甲醛溶液，加入量为每100毫升溶液加入25mL甲醛溶液，继续搅拌8分钟后，再加入浓度为20%磷酸溶液，酸加入量为每100毫升溶液加入20mL酸溶液；

3）搅拌10分钟后开始降低搅拌速度，5分钟内搅拌速度降至200r/min，1min后停止搅拌；

4）倒入模具，放入60℃烘箱中固化成型5h；

5）脱模洗涤，固化成型后的海绵在高温下不可直接挤压，在冷水中浸泡降温后方可挤压洗涤，洗涤至海绵不会产生稳定气泡为止，洗涤液至中性；

6）冷冻干燥和加工成型。

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