CN101966218A - 一种三七三醇组皂苷提取物及其制备工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种三七三醇组皂苷提取物及其制备工艺，所述的提取物Rg1(C42H72O14)含量范围占总提取物40～70％，三七皂苷R1(C47H80O18)含量范围占总提取物10～30％，人参皂苷Re(C48H82O18)含量范围占总提取物5～10％。上述提取物的制备方法为：将原料以乙醇渗漉，渗漉液浓缩，离心，上清液经大孔弱极性树脂处理，收集30％～40％乙醇洗脱液，浓缩后上脱色树脂处理，得三七皂苷三醇组提取物。本发明的提取物具有纯度高，疗效好，质量稳定，同时制备方法分离效果佳，含量高，工艺简单，操作方便，成本低廉，适合工业化生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药提取物及其制备方法，特别涉及中药三七的提取物三七三醇皂苷提取物及其制备。
背景技术
三七：又名田七，为五加科人参属植物，是中医治疗心、脑血管疾病及各种血症的“圣药”。
《本草纲目》1578年明代李时珍著：“味微甘而苦，颇似人参之味......故能治一切血病。”
《本草纲目拾遗》1765年清代赵学敏著：“人参补气第一，三七补血第一，味同而功亦等，故称人参三七，为中药之最珍贵者。”
《中药大辞典》(1997年版)“三七功用补血，去瘀损，止血衄，能通能补，功效最良，是方药中之最珍贵者。三七生吃，去瘀生新，消肿定痛，并有止血不留瘀血，行血不伤新的优点；熟服可补益健体。”
三七的药理作用主要表现为具有保护心脏，明显提高心肌供氧能力，增加冠脉流量，防治脑缺血，降血压，扩张心脏血管，耐缺氧，改善心肌微循环，抗心律失常，抑制动脉硬化和抗休克等作用；具有良好的止血功效，能增加血小板数目，提高造血功能，有明显的活血和溶血作用；有明显的镇痛作用表现在还能提高脑力活动，增强学习和记忆能力；具有延缓衰老及抗疲劳作用。此外，三七还有促进蛋白质和DNA、RNA的合成，保护肝脏，双向调节血糖等功能。
三七的药理试验及临床应用从本世纪三十年代开始，特别是近20多年来，国内外学者对三七进行了广泛的药理研究和临床实验，取得了大量的新成果，使三七的医学应用领域得到了有力的拓展。现代药理研究表明，三七含有多种类型的化学成分，皂苷为三七的主要有效成分之一，具有多种药理活性，皂苷为达玛烷型。三七中总皂苷含量可达8％～12％，其中所含单体有人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1、Rg2、Rh等9种，但以Rb1和Rg1为主。皂苷元为人参二醇和人参三醇，以人参三醇含量为高。但Rb1的苷元为20(s)-原人参二醇，Rg1的苷元为20(s)-原人参三醇。
以三七单体皂苷Rg1为代表的原人参三醇皂苷具有兴奋中枢神经、增强记忆、恢复疲劳，促进DNA，RNA合成，抗血小板凝集等作用，该成分在三七中含量为1.9％。
三七中Rg1还具有免疫调节剂的作用，能使过高或过低的免疫反应恢复到正常，并活化人体内的淋巴球细胞，但不干扰人体正常的免疫反应。三七皂苷Rg1还可提高大鼠肠上皮细胞线粒体编码基因COX I，COX II的表达，对失血性休克肠上皮细胞线粒体损伤有明显的保护作用。Rg1可以抑制肿瘤坏死因子平滑肌血管增生，藉以抑制肿瘤细胞汲取养分，达到抑制肿瘤生长的目的。
Rg1和雌激素即女性荷尔蒙(Estrogen)有类似相同的结构，可以和雌激素受体结合，和雌激素产生竞争抑制，减少雌激素和受体结合所引起的乳癌及其降低发生率，同时Rb1也具有相同的作用，也具有抑制血管新生的功能。
以Rb1为代表的原人参二醇皂苷，促进神经纤维的形成并维持其功能，防止性功能减退，抑制中枢神经系统，具有抗紧张、抑制中枢的镇静、安神、解热、促进睡眠作用；促进血清蛋白合成，促进胆甾醇的合成与分解，抑制中性脂肪分解，抗溶血。该成分在三七中含量达1.8％。
三七花中的人参皂苷Rb1，Rb3，Rc和Rg3可以协同大肠癌治疗药物氟嘧啶二酮(5-Fluorouracil)诱导大肠癌细胞细胞凋亡，以补氟嘧啶二酮无法诱导细胞凋亡之不足。
三七中其它成分的作用如下：
人参皂苷Rb2抑制中枢神经，促进DNA，RNA合成，抗溶血，抗糖尿病。人参皂苷Rc抑制中枢神经，促进DNA，RNA合成，促进血清蛋白合成。人参皂苷Rd增强免疫功能，抑制癌细胞成长。人参皂苷Rh2促进癌细胞转化为非癌细胞。四环三萜达玛烷型原人参三醇组皂苷人参皂甙Re抑制中枢神经，促进DNA，RNA合成。人参皂苷Rg2抗血小板凝集。人参皂苷Rh1促进癌细胞转化为非癌细胞。三七皂苷R1诱导白血病细胞分化。
由于三七具有以上的优点，现在对三七的开发利用也成为医药领域内的热点。中国专利200410073881.6公开了一种三七三醇组皂苷组合物及制备方法。该专利采用大孔吸附树脂分离，不能将三七三醇和三七二醇进行有效的分离，提取物中Rb1的含量过高。
中国专利200610066204.0公开了一种用于治疗心血管疾病的三七总皂苷组合物。该专利的提取工艺采用D型大孔吸附树脂分离，在该专利的工艺条件下提取的三七总皂苷组合物Rg135％-50％，Rb120％-35％。三七三醇和三七二醇没有进行有效的分离，三七二醇的含量过高。
由于以上工艺分离三七三醇和三七二醇效果不佳，因此，需要对现有提取技术进行改进，使三七三醇和三七二醇能够进行有效的分离，制备出三七三醇含量高的提取物。
发明内容
为解决上述问题，本发明人在对三七三醇皂苷进行研究过程中，试验出一组新的三七三醇组皂甙提取物及其制备方法，能够实现三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷的有效分离。
本发明的目的是提供一种治疗心脑血管疾病的含有三七三醇组皂苷提取物的中药组合物。
为实现所述上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种三七三醇组皂苷提取物，其中含Rg1(C42H72O14)含量占总提取物40～70％，三七皂苷R1(C47H80O18)含量占总提取物10～30％，人参皂苷Re(C48H82O18)含量占总提取物5～10％。
优选地，Rg1不少于50～65％，三七皂苷R1不少于15～25％，人参皂苷Re不少于5～8％。
上述Rg1(C42H72O14)，三七皂苷R1(C47H80O18)和人参皂苷Re含量总和小于100％
优选地，本发明提取物中将总皂苷含量控制在80％以上；更优选地，将总皂苷含量控制在85％以上。
优选地，本发明提取物中Rb1不多于10％；更优选地，Rb1不多于8％。
优选地，本发明提取物中总皂苷含量控制在80％以上，Rb1不多于10％。
优选地，本发明提取物中总皂苷含量控制在85％以上，Rb1不多于8％。
上述三七三醇组皂苷提取物性状为淡黄色或棕褐色粉末，味苦；水分不超过10.0％。
本发明的另一个目的是提供一种治疗心脑血管疾病的含有上述三七三醇组皂苷提取物的药物。所述的药物由上述三七三醇组皂苷提取物及药学上可接受的辅料制成。
所述药物可接受的辅料可以选自：甘露醇、山梨醇、焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、盐酸半胱氨酸、巯基乙酸、蛋氨酸、维生素C、EDTA二钠、EDTA钙钠，一价碱金属的碳酸盐、醋酸盐、磷酸盐或其水溶液、盐酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化钠、氯化钾、乳酸钠、木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纤维素及其衍生物、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土温80、琼脂、碳酸钙、碳酸氢钙、表面活性剂、聚乙二醇、环糊精、β-环糊精、磷脂类材料、高岭土、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁等。
本发明药物的活性组分可以加入制备不同剂型时所需的各种常规辅料，如崩解剂、润滑剂、粘合剂等以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用剂型，如粉针剂、片剂、丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂、糖浆、滴丸剂、口服液及其它药学上可以接受的剂型，如口含剂、冲剂、膏剂、丹剂、混悬剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂等。
本发明的另一目的是提供一种三七三醇组皂苷提取物的制备方法。本发明所述的三七三醇组皂苷的制备方法包括以下步骤：
a.取三七，粉碎成粗颗粒，加3-10倍量45％-95％乙醇浸泡6-16小时，装渗漉桶渗漉，收集20-40倍量乙醇渗漉液，渗漉流速为1BV/h；
b.渗漉液于70℃以下减压浓缩至药材量的1-2倍体积；
c.静置至室温，3500-6000rpm，20min离心或100-300目过滤，分离出上清液；
d.上清液上大孔弱极性性树脂，树脂与原料药重量比1∶1；新树脂先用95％醇溶胀，装柱后用水冲至无醇味，上样流速为0.5～1BV/h，4～8倍柱体积水洗，水洗流速为1～1.5BV/h，水洗液弃去，以8-20倍柱体积浓度为30％～40％乙醇洗脱，洗脱流速为1～1.5BV/h，收集洗脱液。
e.回收洗脱液至无醇味，上脱色树脂脱色；优选的，脱色树脂为D941树脂，树脂与原料药重量比0.5～1∶1；上样流速为0.5～1.5BV/h，5-10倍柱体积，流速1～1.5BV/h，水洗；
f.收集上样流出液和洗脱液，70℃以下真空减压浓缩至干或采用冻干或喷干，即得。
由于三七的地下部分以含人参皂苷Rg1和Rb1为主，三七的地上部分只分离到原人参二醇的皂苷，未发现五环三萜皂苷，因此本发明所用的材料优选的是三七根。
上述制备方法中，优选步骤a中将原料加乙醇渗漉时，加3倍量70％乙醇，浸泡8小时。
上述制备方法中，优选步骤b和f中55-70℃减压浓缩；优选地，70℃减压浓缩。
上述制备方法中，步骤d中大孔弱极性性树脂优选D101大孔吸附树脂。
本发明所述的制备方法所提取的活性成分，Rg1和R1的含量大大提高，能够实现三醇组和二醇组的分离；将二醇组皂苷Rb1含量限制在10％以下；总皂苷提取物中成分明确，结构明确的成分占80％以上；成品脱色后颜色比现有工艺浅，适宜做冻干粉针。这些三七三醇皂苷提取物具有纯度高，疗效好，质量稳定，同时制备方法分离效果佳，含量高，工艺简单，操作方便，成本低廉，适合工业化生产。
具体实施方式
本实施例是为了便于理解本发明，而不以任何方式限制本发明的权利要求和核心内容。
实施例1
取三七20.0g，粉碎成粗颗粒，加3倍量70％乙醇浸泡8小时，装渗漉桶渗漉，收集30倍量渗漉液，渗漉流速为1BV/h；渗漉液于60℃减压浓缩至药材的1.5倍，4200rpm，20min，离心，上清液上D101大孔吸附树脂，树脂与原料药重量比1∶1，上样流速为0.5BV/h，4倍柱体积水洗，水洗流速为1BV/h，水洗液弃去，以8倍柱体积30％乙醇洗脱，洗脱流速为1.5BV/h，收集洗脱液。回收洗脱液至无醇味，上D941树脂，树脂与药材重量比0.8∶1，上样流速为1BV/h，10倍柱体积，流速1.5BV/h，水洗；收集上样流出液和洗脱液，60℃真空减压浓缩至干或常规方法冻干、喷干，即得。
高效液相色谱法测定提取物含量
实施例2
取三七20.0，粉碎成粗颗粒，加4倍量70％乙醇浸泡6小时，装渗漉桶渗漉，收集20倍量渗漉液，渗漉流速为1BV/h；渗漉液于55℃减压浓缩至药材的1.2倍，4000rpm，20min，离心，上清液上D101大孔吸附树脂，树脂与原料药重量比1∶1，上样流速为0.5BV/h，4倍柱体积水洗，水洗流速为1BV/h，水洗液弃去，以20倍柱体积30％乙醇洗脱，洗脱流速为1.5BV/h，收集洗脱液。回收洗脱液至无醇味，上D941树脂，树脂与药材重量比0.5∶1上样流速为1BV/h，5倍柱体积，流速1.5BV/h，水洗；收集上样流出液和洗脱液，65℃真空减压浓缩至干或常规方法冻干、喷干，即得。
高效液相色谱法测定提取物含量
实施例3
取三七100.0g，粉碎成粗颗粒，加8倍量70％乙醇浸泡10小时，装渗漉桶渗漉，收集20倍量渗漉液，渗漉流速为1BV/h；渗漉液于65℃减压浓缩至药材的1.6倍，6000rpm，20min，离心，上清液上D101大孔吸附树脂，树脂与原料药重量比1∶1，上样流速为0.5BV/h，4倍柱体积水洗，水洗流速为1BV/h，水洗液弃去，以10倍柱体积30％乙醇洗脱，洗脱流速为1.5BV/h，收集洗脱液。回收洗脱液至无醇味，上D941树脂，树脂与药材重量比1∶1，上样流速为1BV/h，8倍柱体积，流速1.5BV/h，水洗；收集上样流出液和洗脱液，55℃真空减压浓缩至干或常规方法冻干、喷干，即得。
高效液相色谱法测定提取物含量
实施例4
取三七50.0g，粉碎成粗颗粒，加8倍量50％乙醇浸泡16小时，装渗漉桶渗漉，收集40倍量渗漉液，渗漉流速为1BV/h；渗漉液于65℃减压浓缩至药材的1.9倍，5500rpm，20min，离心，上清液上D101大孔吸附树脂，树脂与原料药重量比1∶1，上样流速为0.5BV/h，4倍柱体积水洗，水洗流速为1BV/h，水洗液弃去，以15倍柱体积30％乙醇洗脱，洗脱流速为1.5BV/h，收集洗脱液。回收洗脱液至无醇味，上D941树脂，树脂与药材重量比0.8∶1，上样流速为1BV/h，6倍柱体积，流速1.5BV/h，水洗；收集上样流出液和洗脱液，63℃真空减压浓缩至干或常规方法冻干、喷干，即得。
高效液相色谱法测定提取物含量
实施例5
取三七30g，粉碎成粗颗粒，加6倍量95％乙醇浸泡14小时，装渗漉桶渗漉，收集20倍量渗漉液，渗漉流速为1BV/h；渗漉液于64℃减压浓缩至药材的1.2倍，4200rpm，20min，离心，上清液上D101大孔吸附树脂，树脂与原料药重量比1∶1，上样流速为0.5BV/h，4倍柱体积水洗，水洗流速为1BV/h，水洗液弃去，以18倍柱体积30％乙醇洗脱，洗脱流速为1.5BV/h，收集洗脱液。回收洗脱液至无醇味，上D941树脂，树脂与药材重量比0.9∶1，上样流速为1BV/h，9倍柱体积，流速1.5BV/h，水洗；收集上样流出液和洗脱液，62℃真空减压浓缩至干或常规方法冻干、喷干，即得。
高效液相色谱法测定提取物含量
实施例6
取三七25g，粉碎成粗颗粒，加10倍量70％乙醇浸泡12小时，装渗漉桶渗漉，收集25倍量渗漉液，渗漉流速为1BV/h；渗漉液于70℃以下减压浓缩至药材的1.8倍，4200rpm，20min，离心或过滤，上清液上D101大孔吸附树脂，树脂与原料药重量比1∶1，上样流速为0.5BV/h，4倍柱体积水洗，水洗流速为1BV/h，水洗液弃去，以9倍柱体积30％乙醇洗脱，洗脱流速为1.5BV/h，收集洗脱液。回收洗脱液至无醇味，上D941树脂，树脂与药材重量比0.7∶1上样流速为1BV/h，8倍柱体积，流速1.5BV/h，水洗；收集上样流出液和洗脱液，61℃真空减压浓缩至干或常规方法冻干、喷干，即得。
高效液相色谱法测定提取物含量
实施例7
取三七40g，粉碎成粗颗粒，加8倍量75％乙醇浸泡10小时，装渗漉桶渗漉，收集30倍量渗漉液，渗漉流速为1BV/h；渗漉液于56℃减压浓缩至药材的1.5倍，5000rpm，20min，离心，上清液上D101大孔吸附树脂，树脂与原料药重量比1∶1，上样流速为0.5BV/h，4倍柱体积水洗，水洗流速为1BV/h，水洗液弃去，以11倍柱体积30％乙醇洗脱，洗脱流速为1.5BV/h，收集洗脱液。回收洗脱液至无醇味，上D941树脂，树脂与原料药重量比0.8∶1，上样流速为1BV/h，7倍柱体积，流速1.5BV/h，水洗；收集上样流出液和洗脱液，60℃真空减压浓缩至干或常规方法冻干、喷干，即得。
高效液相色谱法测定提取物含量
实施例8
取三七80g，粉碎成粗颗粒，加6倍量70％乙醇浸泡9小时，装渗漉桶渗漉，收集35倍量渗漉液，渗漉流速为1BV/h；渗漉液于58℃减压浓缩至药材的1倍，6000rpm，20min，离心，上清液上D101大孔吸附树脂，树脂与原料药重量比1∶1，上样流速为0.5BV/h，4倍柱体积水洗，水洗流速为1BV/h，水洗液弃去，以19倍柱体积30％乙醇洗脱，洗脱流速为1.5BV/h，收集洗脱液。回收洗脱液至无醇味，上D941树脂，树脂与原料药重量比0.8∶1，上样流速为1BV/h，5倍柱体积，流速1.5BV/h，水洗；收集上样流出液和洗脱液，68℃真空减压浓缩至干或常规方法冻干、喷干，即得。
高效液相色谱法测定提取物含量
实施例9
取三七70g，粉碎成粗颗粒，加6倍量75％乙醇浸泡11小时，装渗漉桶渗漉，收集30倍量渗漉液，渗漉流速为1BV/h；渗漉液于62℃以下减压浓缩至药材的1.5倍，4200rpm，20min，离心，上清液上D101大孔吸附树脂，树脂与原料药重量比1∶1，上样流速为0.5BV/h，4倍柱体积水洗，水洗流速为1BV/h，水洗液弃去，以17倍柱体积30％乙醇洗脱，洗脱流速为1.5BV/h，收集洗脱液。回收洗脱液至无醇味，上D941树脂，树脂与原料药重量比1∶1，上样流速为1BV/h，10倍柱体积，流速1.5BV/h，水洗；收集上样流出液和洗脱液，68℃真空减压浓缩至干或常规方法冻干、喷干，即得。
高效液相色谱法测定提取物含量
实施例10
取三七65g，粉碎成粗颗粒，加5倍量70％乙醇浸泡15小时，装渗漉桶渗漉，收集25倍量渗漉液，渗漉流速为1BV/h；渗漉液于61℃减压浓缩至药材的1.5倍，4500rpm，20min，离心，上清液上D101大孔吸附树脂，树脂与原料药重量比1∶1，上样流速为0.5BV/h，4倍
柱体积水洗，水洗流速为1BV/h，水洗液弃去，以16倍柱体积30％乙醇洗脱，洗脱流速为1.5BV/h，收集洗脱液。回收洗脱液至无醇味，上D941树脂，树脂与原料药重量比0.6∶1，上样流速为1BV/h，10倍柱体积，流速1.5BV/h，水洗；收集上样流出液和洗脱液，60℃真空减压浓缩至干或常规方法冻干、喷干，即得。
高效液相色谱法测定提取物含量
实施例11
取三七55，粉碎成粗颗粒，加10倍量80％乙醇浸泡13小时，装渗漉桶渗漉，收集30倍量渗漉液，渗漉流速为1BV/h；渗漉液于60℃减压浓缩至药材的1.5倍，4600rpm，20min，离心，上清液上D101大孔吸附树脂，树脂与原料药重量比1∶1，上样流速为0.5BV/h，4倍柱体积水洗，水洗流速为1BV/h，水洗液弃去，以14倍柱体积30％乙醇洗脱，洗脱流速为1.5BV/h，收集洗脱液。回收洗脱液至无醇味，上D941树脂，树脂与原料药重量比0.8∶1，上样流速为1BV/h，8倍柱体积，流速1.5BV/h，水洗；收集上样流出液和洗脱液，66℃真空减压浓缩至干或常规方法冻干、喷干，即得。
高效液相色谱法测定提取物含量
实施例12
取三七15g，粉碎成粗颗粒，加3倍量90％乙醇浸泡7小时，装渗漉桶渗漉，收集20倍量渗漉液，渗漉流速为1BV/h；渗漉液于68℃减压浓缩至药材的2倍，4800rpm，20min，离心，上清液上D101大孔吸附树脂，树脂与原料药重量比1∶1，上样流速为0.5BV/h，4倍柱体积水洗，水洗流速为1BV/h，水洗液弃去，以13倍柱体积30％乙醇洗脱，洗脱流速为1.5BV/h，收集洗脱液。回收洗脱液至无醇味，上D941树脂树脂与原料药重量比0.8∶1，上样流速为1BV/h，9倍柱体积，流速1.5BV/h，水洗；收集上样流出液和洗脱液，56℃真空减压浓缩至干或常规方法冻干、喷干，即得。
高效液相色谱法测定提取物含量
实施例13
取三七45g，粉碎成粗颗粒，加8倍量70％乙醇浸泡8小时，装渗漉桶渗漉，收集33倍量渗漉液，渗漉流速为1BV/h；渗漉液于69℃减压浓缩至药材的1.5倍，300目过滤，上清液上D101大孔吸附树脂，树脂与原料药重量比1∶1，上样流速为0.5BV/h，4倍柱体积水洗，水洗流速为1BV/h，水洗液弃去，以12倍柱体积30％乙醇洗脱，洗脱流速为1.5BV/h，收集洗脱液。回收洗脱液至无醇味，上D941树脂，树脂与原料药重量比0.9∶1，上样流速为1BV/h，5倍柱体积，流速1.5BV/h，水洗；收集上样流出液和洗脱液，60℃真空减压浓缩至干或常规方法冻干、喷干，即得。
高效液相色谱法测定提取物含量
实施例14
取三七90g，粉碎成粗颗粒，加4倍量50％乙醇浸泡6小时，装渗漉桶渗漉，收集20倍量渗漉液，渗漉流速为1BV/h；渗漉液于57℃减压浓缩至药材的1.5倍，200目过滤，上清液上D101大孔吸附树脂，树脂与原料药重量比1∶1，上样流速为0.5BV/h，4倍柱体积水洗，水洗流速为1BV/h，水洗液弃去，以10倍柱体积30％乙醇洗脱，洗脱流速为1.5BV/h，收集洗脱液。回收洗脱液至无醇味，上D941树脂，树脂与原料药重量比1∶1，上样流速为1BV/h，6倍柱体积，流速1.5BV/h，水洗；收集上样流出液和洗脱液，57℃真空减压浓缩至干或常规方法冻干、喷干，即得。
高效液相色谱法测定提取物含量
试验例
高效液相色谱法测定Rg1、Rb1、三七皂苷R1、人参皂苷Re的含量
【含量测定】照高效液相色谱法测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05％磷酸溶液(99∶400)为流动相；检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于2500。
对照品溶液的制备 分别精密称取人参皂苷Rg1，人参皂苷Re和三七皂苷R1适量。加甲醇分别制成每1ml含人参皂苷Rg1 1.3mg、人参皂苷Re 0.2mg的溶液、三七皂苷R1 0.6mg，即得。
供试品溶液的制备 实施例1和2制得的提取物分别作为本试验第一批和第二批的样品。其它实施例制备的提取物以及其它采用本发明的制备方法得到的提取物经过发明人的验证，和实施例1和2的样品具有相同的效果。
取本品粉末0.05g至25ml容量瓶中，精密称定，加20ml甲醇溶解，超声处理，放冷后加甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，即得。
测定法分别精密吸取上述对照品溶液各10μl与供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本发明所述的制备方法所提取的活性成分，Rg1和R1的含量大大提高，能够实现三醇组和二醇组的分离；将二醇组皂苷Rb1含量限制在10％以下；总皂苷提取物中成分明确，结构明确的成分占80％以上；成品脱色后颜色比现有工艺浅，适宜做冻干粉针。这些三七三醇皂苷提取物具有纯度高，疗效好，质量稳定，同时制备方法分离效果佳，含量高，工艺简单，操作方便，成本低廉，适合工业化生产。
产品特征
本品为淡黄色粉末，收率1～4％，总皂苷80％以上(Rg1+R1+Re)
Claims (10)
1.一种三七三醇组皂苷提取物，其特征在于，Rg1(C42H72O14)含量范围占总提取物40～70％，三七皂苷R1(C47H80O18)含量范围占总提取物10～30％，人参皂苷Re(C48H82O18)含量范围占总提取物5～10％。
2.根据权利要求1所述的三七三醇组皂苷提取物，其特征在于，Rg1含量占总提取物50～65％，三七皂苷R1含量占总提取物15～25％，人参皂苷Re含量占总提取物5～8％。
3.根据权利要求1所述的三七三醇组皂苷提取物，其特征在于，提取物中水分不超过10.0％。
4.根据权利要求1-3所述的任一三七三醇组皂苷提取物，其特征在于，三七总皂苷含量在80％以上，三七总皂苷中Rb1不多于10％。
5.根据权利要求4所述的任一三七三醇组皂苷提取物，其特征在于，三七总皂苷含量在85％以上，三七总皂苷中Rb1不多于8％。
6.权利要求1所述的三七三醇组皂苷提取物的制备方法，包括以下步骤：将原料以乙醇渗漉，渗漉液浓缩，离心，上清液经大孔弱极性性树脂处理，收集30％～40％乙醇洗脱液，浓缩后上脱色树脂处理，得三七皂苷三醇组提取物。
7.根据权利要求10所述的三七三醇组皂苷提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
a.取三七，粉碎成粗颗粒，加3-10倍量45％-95％乙醇浸泡6-16小时，装渗漉桶渗漉，收集20～40倍量乙醇渗漉液，渗漉流速为1BV/h；
所述的将原料加乙醇渗漉时，加3倍量70％乙醇浸泡；
b.收集渗漉液，70℃以下减压浓缩至药材量的1～2倍体积；
c.静置至室温，3500-6000rpm，20min离心或100-300目过滤，分离出上清液；
d.上清液上大孔弱极性性树脂，水洗，乙醇洗脱，收集洗脱液；
所述的大孔弱极性性树脂先用95％醇溶胀，装柱后用水冲至无醇味，树脂与原料药重量比例为1∶1；
所述的上样流速为0.5～1BV/h，4～8倍柱体积水洗，水洗流速为1～1.5BV/h，水洗液弃去，以8-20倍柱体积浓度为30％～40％乙醇洗脱，洗脱流速为1～1.5BV/h；
e.洗脱液上D941树脂，水洗；
所述的树脂与原料药重量比为0.5～1∶1，上样流速为0.5～1.5BV/h，5-10倍柱体积，流速1～1.5BV/h水洗；
f.收集上样流出液和洗脱液，70℃以下真空减压浓缩至干或采用冻干或喷干，即得；
所述的减压温度是55-70℃。
8.根据权利要求11所述的三七三醇组皂苷提取物的制备方法，其特征在于，步骤a中的原料为三七根。
9.根据权利要求11或15所述的任一三七三醇组皂苷提取物的制备方法，其特征在于，所述的大孔弱极性性树脂是D101大孔吸附树脂。
10.权利要求1所述的三七三醇皂苷提取物所制成的药物。
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