CN101357203B - 一种治疗癌症及恶性肿瘤的制剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种复方斑蝥制剂及其制备方法，它由斑蝥、人参、黄芪、刺五加、三棱、半枝莲、莪术、山茱萸、女贞子、熊胆粉、甘草及适当辅料制备而成。本发明以氯仿浸泡、逆流超声的方法提取斑蝥药材，提取率高，稳定性好；采用乙醇为溶剂提取除熊胆粉、斑蝥外的其余九味药材，并对提取后的药渣采用水提醇沉的方法进行提纯，然后将提取的有效成分混合并用大孔树脂柱进行纯化。本发明对药材中的有效成分进行了充分的提取，利用大孔树脂吸附有效去除了药物中的无效成分及杂质，得到的药物有效成分含量较高，从而提高了药物的生物利用度和稳定性，使药效更加显著。
Description
技术领域：本发明涉及一种治疗癌症及恶性肿瘤的制剂及其制备方法，属于中药制药的技术领域。
背景技术：恶性肿瘤是一种严重危害人类健康的疾病，几十年来人类一直在不断的研究和开发新的药物以有效的抑制恶性肿瘤的生长。在研究过程中，有效的筛选出具有抗肿瘤作用的药物就显得尤为重要。复方斑蝥制剂一种具有破血消瘦、攻毒蚀疮的作用的药物，是治疗原发性肝癌、肺癌、直肠癌、恶性淋巴瘤、妇科恶性肿瘤等的较好药物之一。目前《国家卫生部药品标准》中药成方制剂第十七册中收载的品种复方斑蝥胶囊，方由斑蝥、人参、黄芪、刺五加、三棱、半枝莲、莪术、山茱萸、女贞子、熊胆粉、甘草共十一味药物组成。
生产复方斑蝥制剂的大致方法有：方中君药斑蝥的提取有粉末直接入药、氯仿浸泡提取或氯仿渗漉法提取；人参、山茱萸、女贞子、半枝莲四味药材或粉碎成细粉入药，或采用水提/醇提方法获得清膏浓缩液；黄芪等五味加水煎煮浓缩成稠膏；熊胆粉加水溶解。但是经研究发现，上述剂型工艺中还存在药物直接入药导致杂质含量高、制备工艺中有效成分提取分离不完善、无效成份含量高等缺点，不利于产品的质量控制。
发明内容：
针对以上现有技术的不足，本发明研究人员经过大量的实验，在已有技术的基础上，完善制备工艺，提供了一种杂质含量更低、稳定性更好、疗效更佳的复方斑蝥制剂及其制备方法，大大减少了药物中的无效成份。本发明中复方斑蝥制剂中的斑蝥采用氯仿浸泡、逆流循环超声的方法进行提取；对除熊胆粉、斑蝥外的其余九味药材，本发明采用乙醇回流提取、浓缩的方法来进行提取；对提取后的药渣采用水煎煮、浓缩、醇沉、干燥滤过的方法获得清膏粗品；然后将上述步骤获得的人参等九味的提取物清膏合并，滤过，滤液通过大孔树脂吸附柱洗脱，洗脱液经浓缩干燥，与斑蝥稠膏、熊胆粉混合即得有效成分。本发明所述的制备方法使得制剂中的斑蝥素与简单氯仿提取的含量比较有明显提高，采用醇提的方法对药材中的有效成分进行了充分的提取，利用大孔树脂柱有效去除了药物中的无效成分及杂质，使得到的药物有效成分含量较高，从而提高了药物的生物利用度和稳定性。
本发明的目的是公开一种复方斑蝥制剂。本发明的另一个目的是公开这种复方斑蝥制剂的制备方法。这种制剂包括胶囊剂、片剂、颗粒剂和口服液等。本发明方法制备的复方斑蝥制剂有效成份含量较高，可达到提高生物利用度的效果。
本发明复方斑蝥制剂是这样构成的：按重量组份计算：本发明药物主要由斑蝥4-12份、人参10-30份、黄芪50-150份、刺五加50-150份、三棱16-48份、半枝莲60-180份、莪术16-48份、山茱萸20-60份、女贞子20-60份、熊胆粉0.4-1.2份、甘草10-30份及适当辅料组成。
其制备方法为：方中十一味，除熊胆粉外，斑蝥粉碎成粗粉，投入逆流循环超声提取罐中，用氯仿浸泡后，在常温下逆流循环超声提取，合并提取液，过滤，回收氯仿，浓缩至稠膏状；
其余人参等9味用乙醇水回流提取，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，备用；将滤出的药渣加水煎煮，煎煮液滤过，滤液减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，加乙醇，搅拌，静置，滤过，沉淀物用适当乙醇洗涤，滤过，沉淀物干燥备用；将滤液、洗液合并，回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.15-1.25的清膏，与前述醇提后的清膏合并，滤过，再将滤液通过大孔树脂吸附柱，先用水洗至无色，再换用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥备用；
将熊胆粉加80℃水溶解后，加入上述斑蝥稠膏、人参等的干燥提取物，混合搅匀，即可得到复方斑蝥中间产品，再加入不同辅料，产生不同剂型的药物。
具体的制备方法为：方中十一味，除熊胆粉外，斑蝥粉碎成40-60目的粗粉，投入逆流循环超声提取罐中，用20-70ml氯仿浸泡48-96小时后，在常温下逆流循环超声提取2-5次，搅拌速度为100-300r/min，提取时间为0.5-1.5小时，合并提取液，过滤，回收氯仿，浓缩至稠膏状；
其余人参等9味用75-95％的乙醇水回流提取2-3次，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，备用；将滤出的药渣加水煎煮，煎煮液滤过，滤液减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，加乙醇至含醇量达50-90％，搅拌，静置12-24小时，滤过，沉淀物用适当乙醇洗涤，滤过，沉淀物干燥备用；将滤液、洗液合并，回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.15-1.25的清膏，与前述醇提后的清膏合并，滤过，再将滤液通过大孔树脂吸附柱，先用水洗至无色，再换用50％-90％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥备用；
将熊胆粉加80℃水溶解后，加入上述斑蝥稠膏、人参等的干燥提取物，混合搅匀，即可得到复方斑蝥中间产品，再加入不同辅料，产生不同剂型的药物。
本制剂中可加入辅料，也可不加入辅料。
本发明制剂包括胶囊剂、片剂、颗粒剂和口服液。
本发明所述胶囊剂的制备方法为：方中十一味，除熊胆粉外，斑蝥粉碎成40-60目的粗粉，投入逆流循环超声提取罐中，用20-70ml氯仿浸泡48-96小时后，在常温下逆流循环超声提取2-5次，搅拌速度为100-300r/min，提取时间为0.5-1.5小时，合并提取液，过滤，回收氯仿，浓缩至稠膏状；其余人参等9味用75-95％的乙醇水回流提取2-3次，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，备用；将滤出的药渣加水煎煮，煎煮液滤过，滤液减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，加乙醇至含醇量达50-90％，搅拌，静置12-24小时，滤过，沉淀物用适当乙醇洗涤，滤过，沉淀物干燥备用；将滤液、洗液合并，回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.15-1.25的清膏，与前述醇提后的清膏合并，滤过，再将滤液通过大孔树脂吸附柱，先用水洗至无色，再换用50％-90％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥备用；将熊胆粉加80℃水溶解后，加入上述斑蝥稠膏、人参等的干燥提取物，混合搅匀，在100℃以下烘干，粉碎成细粉，装入胶囊，制成1000粒，即得胶囊剂。
本发明所述片剂的制备方法为：方中十一味，除熊胆粉外，斑蝥粉碎成40-60目的粗粉，投入逆流循环超声提取罐中，用20-70ml氯仿浸泡48-96小时后，在常温下逆流循环超声提取2-5次，搅拌速度为100-300r/min，提取时间为0.5-1.5小时，合并提取液，过滤，回收氯仿，浓缩至稠膏状；其余人参等9味用75-95％的乙醇水回流提取2-3次，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，备用；将滤出的药渣加水煎煮，煎煮液滤过，滤液减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，加乙醇至含醇量达50-90％，搅拌，静置12-24小时，滤过，沉淀物用适当乙醇洗涤，滤过，沉淀物干燥备用；将滤液、洗液合并，回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.15-1.25的清膏，与前述醇提后的清膏合并，滤过，再将滤液通过大孔树脂吸附柱，先用水洗至无色，再换用50％-90％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥备用；将熊胆粉加80℃水溶解后，加入上述斑蝥稠膏、人参等的干燥提取物，混合搅匀，减压(50～60℃，-0.08MPa)干燥，粉碎成细粉，再加入预胶化淀粉适量，混匀，以80％乙醇为润湿剂24目筛制成颗粒，干燥，压制成1000片，包薄膜衣，即得片剂。
本发明所述颗粒剂的制备方法为：方中十一味，除熊胆粉外，斑蝥粉碎成40-60目的粗粉，投入逆流循环超声提取罐中，用20-70ml氯仿浸泡48-96小时后，在常温下逆流循环超声提取2-5次，搅拌速度为100-300r/min，提取时间为0.5-1.5小时，合并提取液，过滤，回收氯仿，浓缩至稠膏状；其余人参等9味用75-95％的乙醇水回流提取2-3次，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，备用；将滤出的药渣加水煎煮，煎煮液滤过，滤液减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，加乙醇至含醇量达50-90％，搅拌，静置12-24小时，滤过，沉淀物用适当乙醇洗涤，滤过，沉淀物干燥备用；将滤液、洗液合并，回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.15-1.25的清膏，与前述醇提后的清膏合并，滤过，再将滤液通过大孔树脂吸附柱，先用水洗至无色，再换用50％-90％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥备用；将斑蝥稠膏与熊胆粉混合后，加蔗糖粉适量，混匀，加入人参等的干燥提取物制粒，干燥，制成1000g即得颗粒剂。
本发明所述口服液的制备方法为：方中十一味，除熊胆粉外，斑蝥粉碎成40-60目的粗粉，投入逆流循环超声提取罐中，用20-70ml氯仿浸泡48-96小时后，在常温下逆流循环超声提取2-5次，搅拌速度为100-300r/min，提取时间为0.5-1.5小时，合并提取液，过滤，回收氯仿，浓缩至稠膏状；其余人参等9味用75-95％的乙醇水回流提取2-3次，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，备用；将滤出的药渣加水煎煮，煎煮液滤过，滤液减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，加乙醇至含醇量达50-90％，搅拌，静置12-24小时，滤过，沉淀物用适当乙醇洗涤，滤过，沉淀物干燥备用；将滤液、洗液合并，回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.15-1.25的清膏，与前述醇提后的清膏合并，滤过，再将滤液通过大孔树脂吸附柱，先用水洗至无色，再换用50％-90％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，备用；取浓缩液，加入熊胆粉使溶解，加入斑蝥稠膏混匀，单糖浆加至含糖量10％，加入0.2％苯甲酸钠，煮沸溶解，加蒸馏水至全量，混匀，滤过，灌封，即制备成口服液。
与现有技术相比，本发明以现有公开的复方斑蝥制剂的制备工艺为基础，运用现代科学方法，将传统的中药与先进的制剂工艺相结合，在现有工艺基础之上完善制备方法，使提取工艺更加精炼，更加有效。本发明以氯仿浸泡、逆流循环超声的方法提取斑蝥药材，提取率高，稳定性好；采用乙醇回流提取除熊胆粉、斑蝥外的其余九味药材，对提取后的药渣采用水煎煮、醇沉的方法获取清膏粗品，然后将人参等九味的醇提、水提取物合并，用大孔树脂吸附柱洗脱，对药材中的有效成分进行了充分的提取，利用大孔树脂吸附有效去除了药物中的无效成分及杂质，得到的药物有效成分含量较高，从而提高了药物的生物利用度和稳定性，药效更加显著。
针对本发明所述制备工艺，申请人进行了大量的试验研究，具体如下：
实验1：斑蝥提取工艺实验研究
1、提取方法
斑蝥中所含的主要成分为斑蝥素等，参照部颁标准和公开专利，我们同时选用了不同的提取方法对斑蝥中所含的斑蝥素进行提取，以斑蝥素的含量为指标，对不同方法进行比较，结果如下：
| 试验方法 | 氯仿浸泡后提取 | 氯仿浸泡、逆流超声提取 | 氯仿直接提取 |
| 斑蝥素含量(mg/g) | 12.7 | 14.6 | 11.3 |
由以上含量测定结果可以看出，采用本发明所述的提取方法制备斑蝥提取物，其含量高于氯仿直接提取和浸泡后提取，故选择本发明制备方法对斑蝥中有效成分的提取是合理的。
2、药材粉碎度的考察
样品制备：分别称取斑蝥饮片，斑蝥粉(40~60目)，斑蝥细粉(80~100目)各30g，同等氯仿逆流超声提取1小时，滤过，分别回收氯仿，收集滤液。
总固形物得率的测定：精密吸取浓缩液20ml置已恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，于105℃干燥3小时，置干燥器中冷却0.5小时，迅速称重，按下试计算干膏率。结果见下表。
式中：W1为干膏重量，V为定容的体积
V1为精密吸取的体积，W为煎煮药材的重量
斑蝥素含量测定：照气相色谱法(中国药典2000年版一部附录VIE)测定。结果见下表。
药材粉碎度-斑蝥素含量、总固形物得率表
| 药材性状 | 斑蝥素含量(mg/g药材) | 总固形物得率(％) |
| 饮片 | 8.26 | 10.1 |
| (40~60目)粉 | 13.84 | 15.3 |
| (80~100目)粉 | 14.05 | 15.8 |
表中结果可以看出，斑蝥药材未经粉碎，提取效果差，粉碎后斑蝥素和其他物质都能较好的溶出，其中40~60目的斑蝥粉与80~100目的粉对于提取结果无大的差别，实验过程中发现：80~100目的斑蝥粉，因为粉体较细，提取后较难过滤，从方便大生产考虑，选择斑蝥粉碎为40~60目的粉提取。
3、提取次数的考察
样品制备：称取斑蝥粉(40~60目)30g，逆流超声提取5次，每次1小时，分别收集每次的氯仿液，滤过，回收氯仿。
斑蝥素含量和总固形物得率测定方法同上2。结果见下表。
提取次数-斑蝥素含量、总固形物得率表
| 提取次数 | 斑蝥素含量(mg/g药材) | 总固形物得率(％) |
| 1 | 12.44 | 16.0 |
| 2 | 1.48 | 6.9 |
| 3 | 0.62 | 2.8 |
| 4 | 0.11 | 0.6 |
| 5 | 0.03 | 0.3 |
表中数据显示，提取五次时，斑蝥中斑蝥素及其他物质几乎已经提取完全，因此确定斑蝥提取次数为2-5次，其中提取三次为最佳工艺，较经济合理。
4、斑蝥提取工艺验证
样品制备：称取同批斑蝥粉(40~60目)30g，共三份，氯仿逆流超声提取三次，第一次加48ml氯仿，浸泡72小时，提取1.5小时，第二次加32ml氯仿，提取1小时，第三次加32ml氯仿，提取0.5小时，滤过，合并滤液，回收氯仿。
斑蝥素含量和总固形物得率测定方法同上2。结果见下表。
斑蝥提取工艺验证实验结果
| 试验号 | 斑蝥素含量(mg/g药材) | 总固形物得率(％) |
| 1 | 14.35 | 16.8 |
| 2 | 13.80 | 17.4 |
| 3 | 14.26 | 16.5 |
| 平均值 | 14.14 | 16.9 |
| RSD(％) | 2.1 | 2.7 |
斑蝥提取工艺验证实验结果，斑蝥素平均含量为14.14mg/g药材，RSD为2.1％，平均总固形物得率为16.9，RSD为2.7％，证明该工艺稳定可行，质量可控。
实验2：人参等九味提取工艺研究
按照本发明所述的工艺条件，制备三批人参、黄芪等的提取物，以野黄芩苷的含量和总固形物得率为指标，总固形物得率测定方法同上2，野黄芩苷含量测定：照中国药典高效液相色谱法测定。结果见下表。
提取工艺实验结果
| 试验号 | 野黄芩苷含量(mg/g) | 总固形物得率(％) |
| 1 | 1.3126 | 72.5 |
| 2 | 1.3427 | 73.6 |
| 3 | 1.3593 | 74.8 |
| 平均值 | 1.3382 | 73.6 |
| RSD(％) | 1.77 | 1.56 |
由实验结果可见，野黄芩苷平均含量为1.3382，RSD为1.77％，总固形物得率为73.6％，RSD1.56为％，证明该工艺稳定可行，质量可控。
实验3：本发明制剂对实验小鼠移植性肿瘤S180、H22的抑制作用
实验3：本发明制剂对实验小鼠移植性肿瘤S180、H22的抑制作用
一、材料
1、动物：实验动物：昆明种小鼠，体重18-22g，雌雄各半。
2、药物：本发明复方斑蝥制剂、市售复方斑蝥胶囊。
二、方法与结果
1、对小鼠移植性肿瘤S180的影响：
取肿瘤生长良好的S180小鼠，无菌条件下抽取腹水，用无菌生理盐水按1∶3稀释，显微镜下计数，调瘤细胞数为1.0×107个/ml(置冰浴中)。然后取0.2ml小鼠腋部皮下接种，24小时后称重。取试验药物，给药剂量为对照组：生理盐水20ml/kg；市售复方斑蝥胶囊组：2.0g/kg；本发明胶囊组：2.0g/kg。每日给药一次，连续十天，末次给药后24小时，取小鼠按常规方法处死解剖肿瘤，称重。结果见下表。
对小鼠实体瘤S180的影响
| 组别 | 瘤体重量(g) | 抑制率(％) |
| 对照组 | 1.82 | - |
| 市售 | 1.34 | 26.37 |
| 本发明胶囊组 | 1.15 | 36.81 |
2、对小鼠移植性肿瘤H22的影响：
取传代后生长良好的H22小鼠，无菌条件下抽取腹水，加4倍量无菌生理盐水混匀，接种于小鼠右前肢腋窝处皮下，每支接种0.2ml，24小时后随机分组，灌胃给药，剂量同上，每日给药一次，连续十天。末次给药后逐日记录各组小鼠死亡情况，计算各组小鼠平均生存天数，计算生命延长率。结果见下表。
对小鼠H22腹水瘤的影响
| 组别 | 平均生存天数 | 延长率(％) |
| 对照组 | 11.6 | - |
| 市售 | 14.8 | 27.58 |
| 本发明片剂组 | 15.4 | 32.76 |
根据以上实验结果，本发明复方斑蝥制剂可明显抑制小鼠抑制性肿瘤S180的生长，降低瘤重；对小鼠接种H22腹水瘤后的生存期有一定的延长作用。由于治疗组间有显著性差异(P<0.05)，故本发明制剂组与市售复方斑蝥胶囊组比较，在临床用量相同的情况下，本发明制剂组对比市售复方斑蝥胶囊的疗效更好，生物利用度更高。
经试验研究表明：本发明所述制备工艺具有较强的科学性、可行性，所得样品质量稳定，符合治疗的质量要求。
具体实施方式：
本发明实施例1：斑蝥7.9g、人参19.8g、黄芪99.2g、刺五加99.2g、三棱31.7g、半枝莲119g、莪术31.7g、山茱萸39.7g、女贞子39.7g、熊胆粉0.8g、甘草19.8g
制备方法为：方中十一味，除熊胆粉外，斑蝥粉碎成40目的粗粉，投入逆流循环超声提取罐中，用31.7ml氯仿浸泡72小时后，在常温下逆流循环超声提取3次，搅拌速度为100-300r/min，提取时间为1.5小时，合并提取液，过滤，回收氯仿，浓缩至稠膏状；其余人参等9味用90％的乙醇水回流提取3次，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.15的清膏，备用；将滤出的药渣加水煎煮，煎煮液滤过，滤液减压浓缩至相对密度在60℃为1.15的清膏，加乙醇至含醇量达90％，搅拌，静置24小时，滤过，沉淀物用适当乙醇洗涤，滤过，沉淀物干燥备用；将滤液、洗液合并，回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.20的清膏，与前述醇提后的清膏合并，滤过，再将滤液通过大孔树脂吸附柱，先用水洗至无色，再换用90％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥备用；将熊胆粉加80℃水溶解后，加入上述斑蝥稠膏、人参等的干燥提取物，混合搅匀，在80℃以下烘干，粉碎成细粉，装入胶囊，制成1000粒，即得胶囊剂。用法用量：该制剂口服，一次3粒，一日2次。
本发明实施例2：斑蝥4g、人参10g、黄芪50g、刺五加50g、三棱16g、半枝莲60g、莪术16g、山茱萸20g、女贞子20g、熊胆粉0.4g、甘草10g
制备方法为：方中十一味，除熊胆粉外，斑蝥粉碎成40目的粗粉，投入逆流循环超声提取罐中，用20ml氯仿浸泡48小时后，在常温下逆流循环超声提取2次，搅拌速度为100-300r/min，提取时间为0.5小时，合并提取液，过滤，回收氯仿，浓缩至稠膏状；其余人参等9味用75％的乙醇水回流提取2次，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.05的清膏，备用；将滤出的药渣加水煎煮，煎煮液滤过，滤液减压浓缩至相对密度在60℃为1.05的清膏，加乙醇至含醇量达50％，搅拌，静置12小时，滤过，沉淀物用适当乙醇洗涤，滤过，沉淀物干燥备用；将滤液、洗液合并，回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.15的清膏，与前述醇提后的清膏合并，滤过，再将滤液通过大孔树脂吸附柱，先用水洗至无色，再换用50％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥备用；将熊胆粉加80℃水溶解后，加入上述斑蝥稠膏、人参等的干燥提取物，混合搅匀，减压(50～60℃，-0.08MPa)干燥，粉碎成细粉，再加入预胶化淀粉适量，混匀，以80％乙醇为润湿剂24目筛制成颗粒，干燥，压制成1000片，包薄膜衣，即得片剂。用法用量：该制剂口服，一次3片，一日2次。
本发明实施例3：斑蝥12g、人参30g、黄芪150g、刺五加150g、三棱48g、半枝莲180g、莪术48g、山茱萸60g、女贞子60g、熊胆粉1.2g、甘草30g
制备方法为：方中十一味，除熊胆粉外，斑蝥粉碎成60目的粗粉，投入逆流循环超声提取罐中，用70ml氯仿浸泡96小时后，在常温下逆流循环超声提取5次，搅拌速度为100-300r/min，提取时间为1.5小时，合并提取液，过滤，回收氯仿，浓缩至稠膏状；其余人参等9味用95％的乙醇水回流提取3次，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.20的清膏，备用；将滤出的药渣加水煎煮，煎煮液滤过，滤液减压浓缩至相对密度在60℃为1.20的清膏，加乙醇至含醇量达90％，搅拌，静置24小时，滤过，沉淀物用适当乙醇洗涤，滤过，沉淀物干燥备用；将滤液、洗液合并，回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.25的清膏，与前述醇提后的清膏合并，滤过，再将滤液通过大孔树脂吸附柱，先用水洗至无色，再换用90％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥备用；将斑蝥稠膏与熊胆粉混合后，加蔗糖粉适量，混匀，加入人参等的干燥提取物制粒，干燥，制成1000g，即得颗粒剂。用法用量：该制剂开水冲服，一次3g，一日2次。
本发明实施例4：斑蝥9.9g、人参24.8g、黄芪124.2g、刺五加124.2g、三棱39.7g、半枝莲149g、莪术39.7g、山茱萸49.7g、女贞子49.7g、熊胆粉1.0g、甘草24.8g
制备方法为：方中十一味，除熊胆粉外，斑蝥粉碎成40目的粗粉，投入逆流循环超声提取罐中，用50ml氯仿浸泡60小时后，在常温下逆流循环超声提取4次，搅拌速度为100-300r/min，提取时间为1.0小时，合并提取液，过滤，回收氯仿，浓缩至稠膏状；其余人参等9味用85％的乙醇水回流提取2次，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.10的清膏，备用；将滤出的药渣加水煎煮，煎煮液滤过，滤液减压浓缩至相对密度在60℃为1.10的清膏，加乙醇至含醇量达80％，搅拌，静置18小时，滤过，沉淀物用适当乙醇洗涤，滤过，沉淀物干燥备用；将滤液、洗液合并，回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.15的清膏，与前述醇提后的清膏合并，滤过，再将滤液通过大孔树脂吸附柱，先用水洗至无色，再换用80％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，备用；取浓缩液，加入熊胆粉使溶解，加入斑蝥稠膏混匀，单糖浆加至含糖量10％，加入0.2％苯甲酸钠，煮沸溶解，加蒸馏水至全量，混匀，滤过，灌封，即制备成口服液1000ml。用法用量：该制剂口服，一次10ml，一日2次。
本发明实施例5：斑蝥7.9g、人参19.8g、黄芪99.2g、刺五加99.2g、三棱31.7g、半枝莲119g、莪术31.7g、山茱萸39.7g、女贞子39.7g、熊胆粉0.8g、甘草19.8g
制备方法为：方中十一味，除熊胆粉外，斑蝥粉碎成60目的粗粉，投入逆流循环超声提取罐中，用40ml氯仿浸泡96小时后，在常温下逆流循环超声提取4次，搅拌速度为100-300r/min，提取时间为0.5小时，合并提取液，过滤，回收氯仿，浓缩至稠膏状；其余人参等9味用80％的乙醇水回流提取3次，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.10的清膏，备用；将滤出的药渣加水煎煮，煎煮液滤过，滤液减压浓缩至相对密度在60℃为1.10的清膏，加乙醇至含醇量达85％，搅拌，静置12小时，滤过，沉淀物用适当乙醇洗涤，滤过，沉淀物干燥备用；将滤液、洗液合并，回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.20的清膏，与前述醇提后的清膏合并，滤过，冉将滤液通过大扎树脂吸附柱，先用水洗至无色，再换用85％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥备用；将熊胆粉加80℃水溶解后，加入上述斑蝥稠膏、人参等的干燥提取物，混合搅匀，在100℃以下烘干，粉碎成细粉，装入胶囊，制成1000粒，即得胶囊剂。
本发明实施例6：斑蝥6g、人参15g、黄芪75g、刺五加75g、三棱24g、半枝莲90g、莪术24g、山茱萸30g、女贞子30g、熊胆粉0.6g、甘草15g
制备方法为：方中十一味，除熊胆粉外，斑蝥粉碎成40目的粗粉，投入逆流循环超声提取罐中，用30ml氯仿浸泡84小时后，在常温下逆流循环超声提取2次，搅拌速度为100-300r/min，提取时间为1.0小时，合并提取液，过滤，回收氯仿，浓缩至稠膏状；其余人参等9味用90％的乙醇水回流提取3次，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.15的清膏，备用；将滤出的药渣加水煎煮，煎煮液滤过，滤液减压浓缩至相对密度在60℃为1.15的清膏，加乙醇至含醇量达55％，搅拌，静置18小时，滤过，沉淀物用适当乙醇洗涤，滤过，沉淀物干燥备用；将滤液、洗液合并，回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.25的清膏，与前述醇提后的清膏合并，滤过，再将滤液通过大孔树脂吸附柱，先用水洗至无色，再换用55％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥备用；将熊胆粉加80℃水溶解后，加入上述斑蝥稠膏、人参等的干燥提取物，混合搅匀，减压(50～60℃，-0.08MPa)干燥，粉碎成细粉，再加入预胶化淀粉适量，混匀，以80％乙醇为润湿剂24目筛制成颗粒，干燥，压制成1000片，包薄膜衣，即得片剂。
本发明实施例7：斑蝥12g、人参30g、黄芪150g、刺五加150g、三棱48g、半枝莲180g、莪术48g、山茱萸60g、女贞子60g、熊胆粉1.2g、甘草30g
制备方法为：方中十一味，除熊胆粉外，斑蝥粉碎成60目的粗粉，投入逆流循环超声提取罐中，用60ml氯仿浸泡72小时后，在常温下逆流循环超声提取3次，搅拌速度为100-300r/min，提取时间为1.5小时，合并提取液，过滤，回收氯仿，浓缩至稠膏状；其余人参等9味用75％的乙醇水回流提取2次，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.05的清膏，备用；将滤出的药渣加水煎煮，煎煮液滤过，滤液减压浓缩至相对密度在60℃为1.05的清膏，加乙醇至含醇量达75％，搅拌，静置12小时，滤过，沉淀物用适当乙醇洗涤，滤过，沉淀物干燥备用；将滤液、洗液合并，回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.15的清膏，与前述醇提后的清膏合并，滤过，再将滤液通过大孔树脂吸附柱，先用水洗至无色，再换用75％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，备用；取浓缩液，加入熊胆粉使溶解，加入斑蝥稠膏混匀，单糖浆加至含糖量10％，加入0.2％苯甲酸钠，煮沸溶解，加蒸馏水至全量，混匀，滤过，灌封，即制备成口服液1000ml。
本发明实施例8：斑蝥8g、人参20g、黄芪100g、刺五加100g、三棱32g、半枝莲120g、莪术32g、山茱萸40g、女贞子40g、熊胆粉0.8g、甘草20g
制备方法为：方中十一味，除熊胆粉外，斑蝥粉碎成60目的粗粉，投入逆流循环超声提取罐中，用35ml氯仿浸泡60小时后，在常温下逆流循环超声提取5次，搅拌速度为100-300r/min，提取时间为1.0小时，合并提取液，过滤，回收氯仿，浓缩至稠膏状；其余人参等9味用85％的乙醇水回流提取2次，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.20的清膏，备用；将滤出的药渣加水煎煮，煎煮液滤过，滤液减压浓缩至相对密度在60℃为1.20的清膏，加乙醇至含醇量达70％，搅拌，静置24小时，滤过，沉淀物用适当乙醇洗涤，滤过，沉淀物干燥备用；将滤液、洗液合并，回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.25的清膏，与前述醇提后的清膏合并，滤过，再将滤液通过大孔树脂吸附柱，先用水洗至无色，再换用70％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥备用；将斑蝥稠膏与熊胆粉混合后，加蔗糖粉适量，混匀，加入人参等的干燥提取物制粒，干燥，制成1000g，即得颗粒剂。
Claims (8)
1.一种复方斑蝥制剂，按照重量组份计算：它是以斑蝥4-12份、人参10-30份、黄芪50-150份、刺五加50-150份、三棱16-48份、半枝莲60-180份、莪术16-48份、山茱萸20-60份、女贞子20-60份、熊胆粉0.4-1.2份、甘草10-30份为原料药材制备而成的，其特征在于：其中的斑蝥采用氯仿浸泡、逆流循环超声的方法进行提取；对除熊胆粉、斑蝥外的其余九味药材，采用75-95％的乙醇与水的混合物回流提取、浓缩的方法来进行提取；对提取后的药渣采用水煎煮、浓缩、醇沉、干燥滤过的方法获得清膏粗品；然后将上述步骤获得的人参等九味的提取物合并，滤过，滤液通过大孔树脂吸附柱洗脱，洗脱液经浓缩干燥，与斑蝥稠膏、熊胆粉混合即得有效成分。
2.权利要求1所述的复方斑蝥制剂，其特征是，制备方法包括以下步骤：
(1)处方：按照重量组份计算：斑蝥4-12份、人参10-30份、黄芪50-150份、刺五加50-150份、三棱16-48份、半枝莲60-180份、莪术16-48份、山茱萸20-60份、女贞子20-60份、熊胆粉0.4-1.2份、甘草10-30份；
(2)制备工艺：方中十一味，除熊胆粉外，斑蝥粉碎成粗粉，投入逆流循环超声提取罐中，用氯仿浸泡后，在常温下逆流循环超声提取，合并提取液，过滤，回收氯仿，浓缩至稠膏状；
其余人参等9味用75-95％的乙醇溶液回流提取，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，备用；将滤出的药渣加水煎煮，煎煮液滤过，滤液减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，加乙醇，搅拌，静置，滤过，沉淀物用适当乙醇洗涤，滤过，沉淀物干燥备用；将滤液、洗液合并，回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.15-1.25的清膏，与前述醇提后的清膏合并，滤过，再将滤液通过大孔树脂吸附柱，先用水洗至无色，再换用50-90％乙醇与水的混合物洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，干燥备用；
将熊胆粉加80℃水溶解后，加入上述斑蝥稠膏、人参等的干燥提取物，混合搅匀，即可得到复方斑蝥中间产品，再加入不同辅料，产生不同剂型的药物。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征是还包括以下步骤：
具体的制备方法为：方中十一味，除熊胆粉外，斑蝥粉碎成40-60目的粗粉，投入逆流循环超声提取罐中，用20-70ml氯仿浸泡48-96小时后，在常温下逆流循环超声提取2-5次，搅拌速度为100-300r/min，提取时间为0.5-1.5小时，合并提取液，过滤，回收氯仿，浓缩至稠膏状；
其余人参等9味用75-95％的乙醇水回流提取2-3次，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，备用；将滤出的药渣加水煎煮，煎煮液滤过，滤液减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，加乙醇至含醇量达50-90％，搅拌，静置12-24小时，滤过，沉淀物用适当乙醇洗涤，滤过，沉淀物干燥备用；将滤液、洗液合并，回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.15-1.25的清膏，与前述醇提后的清膏合并，滤过，再将滤液通过大孔树脂吸附柱，先用水洗至无色，再换用50％-90％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥备用；
将熊胆粉加80℃水溶解后，加入上述斑蝥稠膏、人参等的干燥提取物，混合搅匀，即可得到复方斑蝥中间产品，再加入不同辅料，产生不同剂型的药物。
4.根据权利要求1所述的复方斑蝥制剂，其特征是：制剂包括胶囊剂、片剂、颗粒剂和口服液。
5.根据权利要求2或3所述的复方斑蝥制剂的制备方法，其特征是：
所述胶囊剂的制备方法为：斑蝥4-12g、人参10-30g、黄芪50-150g、刺五加50-150g、三棱16-48g、半枝莲60-180g、莪术16-48g、山茱萸20-60g、女贞子20-60g、熊胆粉0.4-1.2g、甘草10-30g；方中十一味，除熊胆粉外，斑蝥粉碎成40-60目的粗粉，投入逆流循环超声提取罐中，用20-70ml氯仿浸泡48-96小时后，在常温下逆流循环超声提取2-5次，搅拌速度为100-300r/min，提取时间为0.5-1.5小时，合并提取液，过滤，回收氯仿，浓缩至稠膏状；其余人参等9味用75-95％的乙醇水回流提取2-3次，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，备用；将滤出的药渣加水煎煮，煎煮液滤过，滤液减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，加乙醇至含醇量达50-90％，搅拌，静置12-24小时，滤过，沉淀物用适当乙醇洗涤，滤过，沉淀物干燥备用；将滤液、洗液合并，回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.15-1.25的清膏，与前述醇提后的清膏合并，滤过，再将滤液通过大孔树脂吸附柱，先用水洗至无色，再换用50％-90％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥备用；将熊胆粉加80℃水溶解后，加入上述斑蝥稠膏、人参等的干燥提取物，混合搅匀，在100℃以下烘干，粉碎成细粉，装入胶囊，制成1000粒，即得胶囊剂。
6.根据权利要求2或3所述的复方斑蝥制剂的制备方法，其特征是：
所述片剂的制备方法为：斑蝥4-12g、人参10-30g、黄芪50-150g、刺五加50-150g、三棱16-48g、半枝莲60-180g、莪术16-48g、山茱萸20-60g、女贞子20-60g、熊胆粉0.4-1.2g、甘草10-30g；方中十一味，除熊胆粉外，斑蝥粉碎成40-60目的粗粉，投入逆流循环超声提取罐中，用20-70ml氯仿浸泡48-96小时后，在常温下逆流循环超声提取2-5次，搅拌速度为100-300r/min，提取时间为0.5-1.5小时，合并提取液，过滤，回收氯仿，浓缩至稠膏状；其余人参等9味用75-95％的乙醇水回流提取2-3次，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，备用；将滤出的药渣加水煎煮，煎煮液滤过，滤液减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，加乙醇至含醇量达50-90％，搅拌，静置12-24小时，滤过，沉淀物用适当乙醇洗涤，滤过，沉淀物干燥备用；将滤液、洗液合并，回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.15-1.25的清膏，与前述醇提后的清膏合并，滤过，再将滤液通过大孔树脂吸附柱，先用水洗至无色，再换用50％-90％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥备用；将熊胆粉加80℃水溶解后，加入上述斑蝥稠膏、人参等的干燥提取物，混合搅匀，在50～60℃、-0.08MPa条件下减压干燥，粉碎成细粉，再加入预胶化淀粉适量，混匀，以80％乙醇为润湿剂24目筛制成颗粒，干燥，压制成1000片，包薄膜衣，即得片剂。
7.根据权利要求2或3所述的复方斑蝥制剂的制备方法，其特征是：
所述颗粒剂的制备方法为：斑蝥4-12g、人参10-30g、黄芪50-150g、刺五加50-150g、三棱16-48g、半枝莲60-180g、莪术16-48g、山茱萸20-60g、女贞子20-60g、熊胆粉0.4-1.2g、甘草10-30g；方中十一味，除熊胆粉外，斑蝥粉碎成40-60目的粗粉，投入逆流循环超声提取罐中，用20-70ml氯仿浸泡48-96小时后，在常温下逆流循环超声提取2-5次，搅拌速度为100-300r/min，提取时间为0.5-1.5小时，合并提取液，过滤，回收氯仿，浓缩至稠膏状；其余人参等9味用75-95％的乙醇水回流提取2-3次，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，备用；将滤出的药渣加水煎煮，煎煮液滤过，滤液减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，加乙醇至含醇量达50-90％，搅拌，静置12-24小时，滤过，沉淀物用适当乙醇洗涤，滤过，沉淀物干燥备用；将滤液、洗液合并，回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.15-1.25的清膏，与前述醇提后的清膏合并，滤过，再将滤液通过大孔树脂吸附柱，先用水洗至无色，再换用50％-90％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥备用；将斑蝥稠膏与熊胆粉混合后，加蔗糖粉适量，混匀，加入人参等的干燥提取物制粒，干燥，制成1000g即得颗粒剂。
8.根据权利要求2或3所述的复方斑蝥制剂的制备方法，其特征是：
所述口服液的制备方法为：斑蝥4-12g、人参10-30g、黄芪50-150g、刺五加50-150g、三棱16-48g、半枝莲60-180g、莪术16-48g、山茱萸20-60g、女贞子20-60g、熊胆粉0.4-1.2g、甘草10-30g；方中十一味，除熊胆粉外，斑蝥粉碎成40-60目的粗粉，投入逆流循环超声提取罐中，用20-70ml氯仿浸泡48-96小时后，在常温下逆流循环超声提取2-5次，搅拌速度为100-300r/min，提取时间为0.5-1.5小时，合并提取液，过滤，回收氯仿，浓缩至稠膏状；其余人参等9味用75-95％的乙醇水回流提取2-3次，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，备用；将滤出的药渣加水煎煮，煎煮液滤过，滤液减压浓缩至相对密度在60℃为1.05-1.20的清膏，加乙醇至含醇量达50-90％，搅拌，静置12-24小时，滤过，沉淀物用适当乙醇洗涤，滤过，沉淀物干燥备用；将滤液、洗液合并，回收乙醇后减压浓缩至相对密度在60℃为1.15-1.25的清膏，与前述醇提后的清膏合并，滤过，再将滤液通过大孔树脂吸附柱，先用水洗至无色，再换用50％-90％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，备用；取浓缩液，加入熊胆粉使溶解，加入斑蝥稠膏混匀，单糖浆加至含糖量10％，加入0.2％苯甲酸钠，煮沸溶解，加蒸馏水至全量，混匀，滤过，灌封，即制备成口服液。
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| CN1994455A (zh) * | 2006-12-22 | 2007-07-11 | 北京亚东生物制药有限公司 | 治疗癌症的中药肠溶胶囊剂及其制备方法 |
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| CN101357203A (zh) | 2009-02-04 |
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