CN101623313B - 一种补血中药制剂的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种补血中药制剂的制备方法，该方法包括：将当归和白术用水蒸气蒸馏或超临界萃取装置萃取，所得亲脂性提取物进一步环糊精包合；其残渣与黄芪、党参、熟地黄煮提，所得亲水性提取液中加入絮凝澄清剂，静置后过滤分离或离心分离；所得药液浓缩后与阿胶细粉及前述环糊精包合物混匀；添加适宜辅料，制成口服固体制剂。本发明应用超临界萃取技术萃取当归和白术，并环糊精包合，采用絮凝澄清技术及离心技术精制药液，避免了某些成分的分解变化及损失；与传统的醇沉工艺相比，可缩短生产周期，降低成本；且产品质量稳定，抗血虚的药理作用更优。

Description

一种补血中药制剂的制备方法

技术领域

本发明属于中药制药技术领域，具体涉及一种补血中药制剂的制备方法。

背景技术

中医所指的血虚，即现代医学中单位容积血液内的红血球数和红血蛋白量减少而言，包括缺铁性贫血、失血性贫血、抗贫血因子缺乏所致的贫血以及再生障碍性贫血多种原因的贫血。中医统称为血虚。其原因很多，如失血、饮食失调、病后体虚等可耗伤气血，而致脾肾亏虚，不能生化气血所致。临床主要表现为面色萎黄、口唇苍白、头晕耳鸣、困倦乏力、心慌气短、失眠、血液红血球总数及血红蛋白减少。本病症临床上发病率很高，如产后、术后、病后，无论在农村或城市，均有大量的患者，是一种常见病。

处方由阿胶、当归、白术、黄芪、党参、熟地黄六味中药组成的补血中药制剂(驴胶补血制剂)，其功效在于滋阴补血，健脾益气，调经养血，用于久病体虚，血亏气虚，妇女血虚，经闭、经少等症。处方中的白术的主要成分为挥发油，油中成分复杂，以苍术酮的含量最高；当归的主要成分当归挥发油具有镇静大脑、兴奋和麻痹延髓中枢的作用，并可弛缓子宫肌肉，治疗月经不调、痛经等病症，藁本内酯是当归提取物中的主要成分，这类成分一般具有相对分子量较小、亲脂性、低沸点性、易分解性等特点。其传统的提取方法主要有水蒸气蒸馏法、溶剂提取法和压榨法，其中以水蒸气蒸馏法最为常用，但因其加热时间长、温度高、收率低、挥发性成分的大量损失及某些成分的分解变化而使挥发油的出油率低。处方中，黄芪、党参和熟地黄提取液的精制采用醇沉后过滤分离的工艺，鞣质等大分子物质不仅未被除去而多糖等类有效成分却被除去，且生产周期长，乙醇耗用量大，成本高，存在安全生产的隐患。

发明内容

本发明的目的是采用先进的中药制剂技术，提供质量稳定、服用方便的补血中药制剂的制备方法。

实现本发明的补血中药制剂的制备方法，主要包含步骤：

1)将生药当归和白术进行提取处理，得亲脂性提取物；

2)步骤1)所述亲脂性提取物与环糊精包合得环糊精包合物；

3)将步骤1)中进行提取处理后的当归和白术的残渣与生药黄芪、党参、熟地黄加水煎煮，得亲水性提取液；

4)步骤3)所述亲水性提取液浓缩后加入絮凝澄清剂，静置后分离得药液；

5)浓缩步骤4)所述药液；

6)将阿胶粉碎成细粉，加入步骤2)所述环糊精包合物和步骤5)所述浓缩后的药液，制得所述补血中药制剂。

本发明所述的方法，步骤1)中所述提取处理采用水蒸汽蒸馏或超临界萃取中的至少一种。其中超临界萃取可以采用CO₂超临界萃取。

本发明的优选实施例中，上述CO₂超临界萃取的萃取压力为35-55Mpa，更佳地为45Mpa，萃取温度为37-55℃，更佳地为45℃，解析压力为5-15Mpa，更佳地为7Mpa，解析温度为45-65℃，更佳地为55℃。

本发明所述的方法，步骤2)中所述亲脂性提取物与环糊精的重量比为1∶6-10，更佳为1∶7-9，最佳为1∶8。

本发明所述的方法，步骤2)中还包括在所述亲脂性提取物中加入体积为所述提取物的15-45％的乙醇，更佳地为30-35％的乙醇，制成亲脂性提取物醇溶液，然后进行包合，包合时间为30-50分钟，更佳地为40-45分钟。

本发明的优选实施例中，步骤4)中所述亲水性提取液浓缩后的毫升数与步骤1)，3)及6)中所述生药的总克数之比为2-10∶1，更佳地为6-7∶1，最佳为4-5∶1；浓缩后的亲水性提取液的pH为3-7，更佳地为5.5-6.5，最佳为4.5。

本发明所述的方法，步骤4)中所述絮凝澄清剂包含壳聚糖、ZTC1+1-II型天然澄清剂、ZTC1+1-III型天然澄清剂、果汁澄清剂中的至少一种。

本发明的优选实施例中，步骤4)中所述亲水性提取液浓缩后的温度为40-80℃，更佳地，为50-75℃，最佳为60-70℃。

本发明的优选实施例中，步骤4)中所述分离采用过滤分离或离心分离中的至少一种。其中过滤分离采用板框过滤、纱布过滤或绒布过滤中的至少一种；离心分离采用管式离心机、蝶式离心机、台式离心机或卧式自动离心机中的至少一种，所述离心分离时采用的离心速度范围为1000rpm-50000rpm。

本发明的优选实施例中，步骤5)中所述浓缩后的药液制成浸膏，其中浸膏的相对密度为1.13-1.36，更佳地为1.20-1.32，最佳为1.28-1.30。

本发明的优选实施例中，步骤6)中所述补血中药制剂为口服制剂，更佳地为口服固体制剂。

本发明的优选实施例中，上述口服固体制剂为颗粒剂、片剂、胶囊剂、浓缩丸或滴丸。

本发明总的技术构思是：对补血中药制剂(驴胶补血制剂)传统的制备工艺进行革新，将超临界CO₂应用于当归和白术的提取，所得亲脂性提取物进一步用环糊精包合，将絮凝澄清技术和离心技术应用于提取液的精制，将环糊精包合物及精制后的药液添加适宜药用辅料，制剂成型。

本发明具有积极的效果：

1)当本发明应用超临界萃取技术提取当归和白术，克服了传统提取方法中存在的苍术酮和藁本内酯等挥发性成分的大量损失及某些成分的分解变化。

2)当本发明采用增加絮凝澄清步骤的技术方案时，取消了原有的醇沉步骤，缩短沉降时间，而且成品的溶化性好，与传统的醇沉工艺相比，可减少工序、节约原料(尤其是乙醇)降低成本，有利于环境保护和解决工厂的安全隐患问题。

3)当本发明在取消醇沉步骤后，增加絮凝澄清步骤和离心分离步骤，既去除了鞣质等大分子物质，又保留了多糖等类的有效成分，解决了药液粘度大，固液难分离的问题。为生产出服用方便、质量稳定的补血中药制剂提供技术方法，以更好为广大患者服务。

具体实施方式

以下通过具体实施例来进一步说明本发明，实施例仅用于说明，不能限制本发明的范围。

本发明所述的补血中药制剂，其主要成分及重量配比为阿胶180-280、当归50-90、白术50-120、黄芪160-240、党参130-240、熟地黄80-180。优选的重量配比为阿胶200-250、当归40-80、白术60-100、黄芪180-220、党参160-220、熟地黄100-150。最佳的重量配比为阿胶216、当归40-80、白术60-100、黄芪180、党参180、熟地黄120。

本发明所述的补血中药制剂的制备方法的具体步骤可以为：

当归和白术用水蒸汽蒸馏2-6小时；或用CO₂超临界萃取装置萃取，萃取压力35-55Mpa，萃取温度37-55℃，解析压力5-15Mpa，解析温度45-65℃，时间2-5小时，所得亲脂性提取物与β-环糊精以重量比为1∶6-10的比例取料，在β-环糊精中加入2-4倍量β-环糊精重量的水研磨均匀，制成β-环糊精水溶液；亲脂性提取物中加入体积为亲脂性提取物15-45％的乙醇，制成亲脂性提取物醇溶液；采用研磨法进行包合，控制包合时间为30-50分钟，包合物经抽滤、洗涤，于40℃真空干燥，即得环糊精包合物，备用。

将当归和白术的残渣与黄芪、党参、熟地黄加水煎煮2-3次，每次1.5-4小时，合并煎液。将煎液滤过，滤液浓缩至其毫升数与全部生药的克数之比为2-10∶1；在调提取液pH为3-7后，加入絮凝剂后静置6-48小时，加入时的物料温度为40-80℃。加入的絮凝剂包括：甲壳素(南通兴成生物制品厂)、壳聚糖(南通兴成生物制品厂)、ZTC1+1-II型天然澄清剂(天津正天成澄清技术有限公司)、ZTC1+1-III型天然澄清剂(天津正天成澄清技术有限公司)和101果汁澄清剂(上海华逊应用生物化学研究所)等。

在絮凝澄清之后采用普通过滤分离或离心分离。其中，普通过滤分离包括：板框过滤、纱布过滤或绒布过滤；离心分离的速度范围为1000rpm-50000rpm，所采用的离心分离设备包括药剂学常用的管式离心机、蝶式离心机和卧式自动离心机等。本发明优选管式离心机分离絮凝澄清后的药液。

分离后浓缩得到浸膏，添加适宜辅料，制成颗粒剂、片剂、胶囊剂、浓缩丸或滴丸等。

本发明是采用现代中药生产技术中的超临界流体技术、包合技术、絮凝澄清技术和离心技术，将上述原料药制备成颗粒剂、胶囊剂、片剂、浓缩丸或滴丸等剂型。

实施例1

处方：本实施例的药材有6味生药，它们的名称及用量是：阿胶216g、当归60g、白术90g、黄芪180g、党参180g、熟地黄120g。

制法：取当归和白术用CO₂超临界萃取装置萃取，萃取压力45Mpa，萃取温度45℃，解析压力10Mpa，解析温度60℃，时间3小时；所得当归和白术的亲脂性提取物与β-环糊精以重量比为1∶8的比例取料，在β-环糊精中加入3倍量β-环糊精重量的水研磨均匀，制成β-环糊精水溶液；亲脂性提取物中加入体积为亲脂性提取物30％的乙醇，制成亲脂性提取物醇溶液；采用研磨法进行包合，控制包合时间为40分钟，包合物经抽滤、洗涤，于40℃真空干燥，即得环糊精包合物，备用；将当归和白术的残渣与黄芪、党参、熟地黄加水煎煮2次，每次2.5小时，合并煎液，滤过，得到提取液；将提取液加热至70℃，减压蒸馏浓缩至其毫升数与全部生药的克数之比为6∶1；在调提取液pH为5.0后，趁热在70℃时，加入药液8％量的壳聚糖溶液(1％)，搅拌15分钟，保温1小时，取出，静置室温30小时，采用管式离心机离心分离药液，所得药液浓缩至相对密度1.28-1.30；将阿胶粉碎成细粉，与蔗糖粉适量混匀，加入上述浸膏与环糊精包合物，混匀，由制粒机将物料干燥成颗粒，干燥，过筛，即得本发明的补血中药颗粒。

实施例2

处方：与实施例1的处方相同。

制法：取当归和白术用CO₂超临界萃取装置萃取，萃取压力35Mpa，萃取温度45℃，解析压力5Mpa，解析温度55℃，时间2小时；所得当归和白术亲脂性提取物与β-环糊精以重量比为1∶6的比例取料，在β-环糊精中加入2倍量β-环糊精重量的水研磨均匀，制成β-环糊精水溶液；亲脂性提取物中加入体积为亲脂性提取物15％的乙醇，制成亲脂性提取物醇溶液；采用研磨法进行包合，控制包合时间为30分钟，包合物经抽滤、洗涤，于40℃真空干燥，即得环糊精包合物，备用；将当归和白术的残渣与黄芪、党参、熟地黄加水煎煮2次，每次4小时，合并煎液，滤过，得到提取液；将提取液加热至70℃，减压蒸馏浓缩至其毫升数与全部生药的克数之比为2∶1；以全部生药的量计按每克生药加入0.4-1.0ml的量加入甲壳素，在调提取液pH为7.0后，趁热在60℃时，加入药液8％量的甲壳素溶液(1％)，加入时的搅拌速度为300-400rpm，继续搅拌的时间为20-30分钟，搅拌速度为300-400rpm，静置15-30小时。采用纱布过滤分离药液，所属技术领域的技术人员应该了解到，板框过滤或绒布过滤也是合适的，所得药液浓缩至相对密度1.20-1.32；将阿胶粉碎成细粉，与蔗糖粉适量混匀，加入上述浸膏与环糊精包合物，混匀，由制粒机将物料干燥成颗粒，干燥，过筛，即得本发明的补血中药颗粒。

实施例3

处方：与实施例1的处方相同。

制法：取当归和白术用水蒸气蒸馏2-6小时，收集亲脂性提取物备用，所得亲脂性提取物与β-环糊精以重量比为1∶10的比例取料，在β-环糊精中加入3倍量β-环糊精重量的水研磨均匀，制成β-环糊精水溶液；亲脂性提取物加入体积为亲脂性提取物45％的乙醇，制成亲脂性提取物醇溶液；采用研磨法进行包合，控制包合时间为40分钟，包合物经抽滤、洗涤，于40℃真空干燥，即得环糊精包合物，备用；将当归和白术的残渣与黄芪、党参、熟地黄加水煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，得到提取液；提取液浓缩至生药量∶药液＝1∶10，在调提取液pH为3.0后，药液加热至40℃，加入重量百分比浓度为1％的ZTC1+1-IIA组份粘胶液的加入量为每100ml提取液为8ml，搅拌5分钟后对物料第一次静置，静置2小时后，搅拌下在物料温度为60℃时加入重量百分比浓度为1％ZTC1+1-IIB组份粘胶液，加入量为每100ml提取液为4ml，搅拌10分钟后；进行保温，保温20分钟；继续搅拌5分钟，然后对物料进行第二次静置，静置时间为6小时，接着采用蝶式离心机离心分离药液，所得药液浓缩至相对密度为1.28-1.30的浸膏；将阿胶粉碎成细粉，与蔗糖粉适量混匀，加入上述浸膏与环糊精包合物，混匀，由制粒机将物料干燥成颗粒，干燥，过筛，即得本发明的补血中药颗粒。

实施例4

处方：与实施例1的处方相同。

制法：取当归和白术用CO₂超临界萃取装置萃取亲脂性提取物，萃取压力45Mpa，萃取温度55℃，解析压力15Mpa，解析温度65℃，时间4小时；当归和白术提取的亲脂性提取物与β-环糊精重量比为1∶6的比例去亲脂性提取物和β-环糊精，在β-环糊精中加入重量比β-环糊精重量3倍量的水研磨均匀，制成β-环糊精水溶液；亲脂性提取物加入体积为亲脂性提取物15％的乙醇，制成亲脂性提取物醇溶液；采用研磨法进行包合，控制包合时间为45分钟，包合物经抽滤、洗涤，于40℃真空干燥，即得环糊精包合物，备用；将当归和白术的残渣与黄芪、党参、熟地黄加水煎煮3次，每次2.5小时，合并煎液，滤过，得到提取液；在加入ZTC1+1-IIA组份粘胶液之前，将提取液浓缩至其毫升数与全部生药的克数之比为6∶1，在调提取液pH为4.0后，；ZTC1+1-IIA组份粘胶液的加入量为每100ml提取液为7-9ml，加入时的搅拌速度为50-200rpm，加入后的搅拌速度和搅拌时间分别为50-200rpm，3-10分钟，第一次静置的时间为1-5小时；ZTC1+1-IIB组份粘胶液的加入量为每100ml提取液为3-5ml，加入时的搅拌速度为50-200rpm，加入后的搅拌速度和搅拌时间分别为50-200rpm，3-10分钟；进行保温前先将物料加热至80℃，然后再保温；继续搅拌的时间为2-10分钟，搅拌速度为50-200rpm，第二次静置的时间为4-10小时。采用管式离心机离心分离分离药液，所得药液浓缩至相对密度1.13-1.36；将阿胶粉碎成细粉，与淀粉适量混匀，加入上述浸膏与环糊精包合物，混匀，制粒、干燥、整粒和装入胶囊，即得本发明的补血中药胶囊。

实施例5

处方：与实施例1的处方相同。

制法：取当归和白术用CO₂超临界萃取装置萃取，萃取压力55Mpa，萃取温度37℃，解析压力15Mpa，解析温度45℃，时间5小时；当归和白术提取的亲脂性提取物与β-环糊精重量比为1∶10的比例取亲脂性提取物和β-环糊精，在β-环糊精中加入重量比β-环糊精重量4倍量的水研磨均匀，制成β-环糊精水溶液；亲脂性提取物加入体积为亲脂性提取物30％的乙醇，制成亲脂性提取物醇溶液；采用研磨法进行包合，控制包合时间为50分钟，包合物经抽滤、洗涤，于40℃真空干燥，即得环糊精包合物，备用；将当归和白术的残渣与黄芪、党参、熟地黄加水煎煮2次，每次4小时，合并煎液，滤过，得到提取液；将提取液浓缩至其毫升数与全部生药的克数之比为10∶1，在调提取液pH为5.0后，搅拌下在物料温度为60℃下加入重量百分比浓度为1％的ZTC1+1-IIIA组份粘胶液，加入量为每100ml提取液加4ml，搅拌均匀后对物料第一次静置，静置2小时后，搅拌下在物料温度为60℃时加入重量百分比浓度为1％的ZTC1+1-IIIB组份粘胶液，加入量为每100ml提取液加8ml，搅拌均匀后对物料进行保温；保温25分钟后，继续搅拌使整个体系成为絮凝体系，静置8小时，采用台式离心机离心分离分离药液，所得药液浓缩至相对密度1.13-1.36；将阿胶粉碎成细粉，与淀粉适量混匀，加入上述浸膏与环糊精包合物，混匀，制粒、干燥、整粒和装入胶囊，即得本发明的补血中药胶囊。

实施例6

处方：与实施例1的处方相同。

制法：取当归和白术用CO₂超临界萃取装置萃取，萃取压力35Mpa，萃取温度37℃，解析压力5Mpa，解析温度45℃，时间5小时；当归和术提取的亲脂性提取物与β-环糊精重量比为1∶7的比例去亲脂性提取物和β-环糊精，在β-环糊精中加入重量比β-环糊精重量3倍量的水研磨均匀，制成β-环糊精水溶液；亲脂性提取物加入体积为亲脂性提取物45％的乙醇，制成亲脂性提取物醇溶液；采用研磨法进行包合，控制包合时间为40分钟，包合物经抽滤、洗涤，于40℃真空干燥，即得环糊精包合物，备用；将当归和白术的残渣与黄芪、党参、熟地黄加水煎煮2次，每次2小时，合并煎液，滤过，得到提取液；在采用ZTC1+1-III型天然澄清剂作为絮凝剂的情况下，将提取液浓缩至其毫升数与全部生药的克数之比为5∶1，在调提取液pH为7后，搅拌下在物料温度为40-60℃下加入重量百分比浓度为1％的ZTC1+1-IIIA组份粘胶液，加入量为每100ml提取液加2-6ml，搅拌均匀后对物料第一次静置，静置1-3小时后，搅拌下在物料温度为40℃时加入重量百分比浓度为1％的ZTC1+1-IIIB组份粘胶液，加入量为每100ml提取液加2-12ml，搅拌均匀后对物料进行保温；保温5-30分钟后，继续搅拌使整个体系成为絮凝体系，静置4-10小时。采用管式离心机离心分离分离药液，所得药液浓缩至相对密度1.20-1.32；将阿胶粉碎成细粉，与蔗糖粉适量混匀，加入上述浸膏与环糊精包合物，混匀，由制粒机将物料干燥成颗粒，干燥，过筛，即得本发明的补血中药颗粒。

实施例7

处方：与实施例1的处方相同。

制法：取当归和白术用CO₂超临界萃取装置萃取，萃取压力45Mpa，萃取温度45℃，解析压力7Mpa，解析温度55℃，时间3小时；当所得当归和白术亲脂性提取物与β-环糊精以重量比为1∶7的比例取料，在β-环糊精中加入3倍量β-环糊精重量的水研磨均匀，制成β-环糊精水溶液；亲脂性提取物中加入体积为亲脂性提取物30％的乙醇，制成亲脂性提取物醇溶液；采用研磨法进行包合，控制包合时间为40分钟，包合物经抽滤、洗涤，于40℃真空干燥，即得环糊精包合物，备用；将当归和白术的残渣与黄芪、党参、熟地黄加水煎煮2次，每次2小时，合并煎液，滤过，得到提取液；先将提取液滤过，滤液浓缩至其毫升数与全部生药的克数之比为2∶1；在调提取液pH为5.5后，搅拌下在物料温度为75℃下加入重量百分比浓度为5-10％的101果汁澄清剂，加入量为每100ml提取液加10ml，静置18小时，采用台式离心机离心分离药液，所得药液浓缩至相对密度1.28-1.30；将阿胶粉碎成细粉，与淀粉适量混匀，加入上述浸膏与环糊精包合物，混匀，压片、包薄膜衣，即得本发明的补血中药片。

实施例8

处方：与实施例1的处方相同。

制法：取当归和白术用CO₂超临界萃取装置萃取，萃取压力45Mpa，萃取温度45℃，解析压力7Mpa，解析温度55℃，时间3小时；所得当归和白术亲脂性提取物与β-环糊精以重量比为1∶7的比例取料，在β-环糊精中加入3倍量β-环糊精重量的水研磨均匀，制成β-环糊精水溶液；亲脂性提取物中加入体积为亲脂性提取物30％的乙醇，制成亲脂性提取物醇溶液；采用研磨法进行包合，控制包合时间为40分钟，包合物经抽滤、洗涤，于40℃真空干燥，即得环糊精包合物，备用；将当归和白术的残渣与黄芪、党参、熟地黄加水煎煮2次，每次2小时，合并煎液，滤过，得到提取液；提取液浓缩至生药量∶药液＝1∶7，在调提取液pH为5.5后，药液加热至50℃，加入重量百分比浓度为1％的ZTC1+1-IIA组份粘胶液的加入量为每100ml提取液为8ml，搅拌5min后对物料第一次静置，静置2小时后，搅拌下在物料温度为60℃时加入重量百分比浓度为1％ZTC1+1-IIB组份粘胶液，加入量为每100ml提取液为4ml，搅拌10分钟后；进行保温，保温20分钟；继续搅拌5分钟，然后对物料进行第二次静置，静置时间为6小时，采用管式离心机离心分离药液，所得药液浓缩至相对密度为1.28-1.30；将阿胶粉碎成细粉，与淀粉适量混匀，加入上述浸膏与环糊精包合物，混匀，搓丸，拉平，抛光，即得本发明的补血中药浓缩丸。

实施例9

处方：与实施例1的处方相同。

制法：取当归和白术用CO₂超临界萃取装置萃取，萃取压力45Mpa，萃取温度45℃，解析压力7Mpa，解析温度55℃，时间3小时；所得当归和白术亲脂性提取物与β-环糊精以重量比为1∶9的比例取料，在β-环糊精中加入3倍量β-环糊精重量的水研磨均匀，制成β-环糊精水溶液；亲脂性提取物中加入体积为亲脂性提取物30％的乙醇，制成亲脂性提取物醇溶液；采用研磨法进行包合，控制包合时间为40分钟，包合物经抽滤、洗涤，于40℃真空干燥，即得环糊精包合物，备用；将当归和白术的残渣与黄芪、党参、熟地黄加水煎煮2次，每次2小时，合并煎液，滤过，得到提取液；将提取液加热至70℃，减压蒸馏浓缩至其毫升数与全部生药的克数之比为4∶1；在调提取液pH为5.5后，趁热在70℃时，加入药液8％量的壳聚糖溶液(1％)，搅拌15分钟，保温1小时，取出，静置室温25小时，采用卧式自动离心机离心分离药液，所得药液浓缩至相对密度为1.28-1.30；将阿胶粉碎成细粉，与淀粉适量混匀，加入上述浸膏与环糊精包合物，混匀，加至已熔融的聚乙二醇6000中，搅匀，将药液滴入甲基硅油中，取出滴丸吸除冷凝液，干燥，即得本发明的补血中药滴丸。

实施例10

补血中药颗粒不同纯化工艺的比较：

实施例11新旧工艺的补血中药颗粒的抗血虚药理作用对比试验

该试验由湖南中医药大学第一附属医院进行。

1.1试验材料动物：Wistar大鼠，体质量200±20g，雌雄均可，均由上海普尔-必凯实验动物有限公司提供，许可证号：SCXK(沪)2003-2002，实验动物环境合格证号：SYXK(湘)2003-0001。药物与试剂：新工艺补血中药颗粒、传统工艺补血中药颗粒，均由九芝堂股份有限公司提供，批号分别为200807151、200807152。用时以蒸馏水配成所需浓度，供灌胃给药。空白组、模型组同时给同体积的蒸馏水10ml/kg。水合氯醛，由上海山浦化工有限公司提供，批号：20070914。仪器：雅培3700全自动无分类血细胞分析仪；AY120分析天平(日本岛津)；DT-1000A电子天平(常熟市意欧仪器仪表厂)。

1.2试验方法

1.2.1样品制备：

新工艺补血中药颗粒的制备：与具体实施列1的制备方法相同。

传统工艺补血中药颗粒的制备：取当归和白术进行蒸馏，收集挥发油备用；将当归和白术的残渣与黄芪、党参、熟地黄加水煎煮2次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.02-1.11(55-60℃)的清膏；冷却后，加乙醇使含醇量为55％，搅匀，静置，滤过，回收乙醇，浓缩，浓缩得浸膏(相对密度1.28-1.30)；将阿胶粉碎成细粉，与蔗糖粉适量混匀，加入上述浸膏与挥发油，混匀，由制粒机将物料干燥成颗粒，干燥，过筛，即得。

1.2.2动物试验：取雌雄Wistar大鼠80只，随机分为6组：空白组、血虚模型组、新工艺补血中药颗粒高、低剂量组(2.1g/kg、1.05g/kg)，传统工艺补血中药颗粒高、低剂量组(2.1g/kg、1.05g/kg)。尾部采血，检测RBC、Hb、WBC作为药前正常值。第一次放血后即按不同组别给药。每天给药一次，连续十天。除空白组外，其余各组尾部放血1.7ml/只，隔日同法放血一次，共五次，并于第三次放血(第五天)时检测RBC、Hb、WBC。末次给药后1小时称体重，于动物腹腔注射水合氯醛(300mg/kg)麻醉，颈总动脉采血，测RBC、Hb、WBC，并摘取肝、脾、子宫、卵巢，计算脏器指数。

1.3统计学分析数据以x±s表示，SPSS15.0统计学软件进行统计学处理。多组间比较采用ANOVA方差分析，组间比较采用独立样本t检验。以双侧P＜0.05判断为有统计学意义。

2结果

表1.试验前各组动物RBC、Hb、WBC值(x±s，n＝10)

注：与空白组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01；与模型组比较^▲P＜0.05，^▲▲P＜0.01；与新工艺补血中药颗粒低剂量组比较^★P＜0.05，^★★P＜0.01。

由表1可知，给药前组间比较差异无统计学意义(P＞0.05)；

表2.给药五天后新旧补血中药颗粒对失血性血虚大鼠的影响(x±s，n＝10)

注：与空白组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01；与模型组比较^▲P＜0.05，^▲▲P＜0.01；与新工艺补血中药颗粒低剂量组比较^★P＜0.05，^★★P＜0.01。

由表2可知，给药5天后，与空白组比较，各给药组血液指标差异无统计学意义(P＞0.05)；

表3.给药十天后新旧补血中药颗粒对失血性血虚大鼠的影响(x±s，n＝10)

注：与空白组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01；与模型组比较^▲P＜0.05，^▲▲P＜0.01；与新工艺补血中药颗粒低剂量组比较^★P＜0.05，^★★P＜0.01。

由表3可知，给药10天后，与空白组比较，各给药组血液指标差异具有统计学意义(P＜0.01)，结果表明造模成功。与模型组比较，新工艺补血中药颗粒组血红蛋白(Hb)、白细胞数(WBC)明显高于模型组，差异具有统计学意义(P＜0.05)。结果表明新工艺补血中药颗粒明显能够提高失血性血虚大鼠血红蛋白数和白细胞数。新工艺补血中药颗粒低剂量组比较，传统工艺补血中药颗粒组高、低剂量组血红蛋白数(Hb)明显偏低，差异具有统计学意义(P＜0.05-0.01)。

表4.新旧补血中药颗粒对血虚大鼠脏器指数的影响(x±s，n＝10)

注：与空白组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01；与模型组比较^▲P＜0.05，^▲▲P＜0.01；与新工艺补血中药颗粒低剂量组比较^★P＜0.05，^★★P＜0.01。

由表4可知，与空白组比较，模型组脏器指数差异具有统计学意义(P＜0.01)；与模型组比较，新旧工艺补血中药颗粒高剂量组脏器指数差异具有显著性差异(P＜0.01)，结果表明新工艺补血中药颗粒高剂量组与旧工艺补血中药颗粒高剂量组能够明显提高失血性血虚脏器指数；与新工艺补血中药颗粒低剂量组比较，传统工艺补血中药颗粒低剂量组肝脾指数明显偏低，差异具有统计学意义(P＜0.05-0.01)，提示新工艺补血中药颗粒能提高肝脾脏器指数的作用优于传统工艺补血中药颗粒。

3结论

失血性血虚大鼠模型试验结果表明，新工艺补血中药颗粒絮凝组抗血虚药理作用优于传统工艺补血中药颗粒。

虽然本发明已以较佳实施例披露如上，然其并非用以限定本发明，任何所属技术领域的技术人员，在不脱离本发明的精神和范围内，当可作些许的更动与改进，因此本发明的保护范围当以权利要求所界定者为准。

Claims (4)

1.一种补血中药制剂的制备方法，其特征在于：所述中药制剂由以下原料药制成：60g当归、90g白术、180g黄芪、180g党参、120g熟地黄、216g阿胶；所述方法包含步骤：

1)采用CO₂超临界萃取对当归和白术进行提取处理，得亲脂性提取物；所述CO₂超临界萃取的萃取压力为35-55Mpa，萃取温度为37-55℃，解析压力为5-15Mpa，解析温度为45-65℃，时间为2-5小时；

2)在β-环糊精中加入2-4倍量β-环糊精重量的水研磨均匀，制成β-环糊精水溶液；在步骤1)所述的亲脂性提取物中加入体积为所述提取物的15-45％的乙醇，制成亲脂性提取物醇溶液，然后采用研磨法进行包合，控制包合时间30-50分钟，制得包合物，所述包合物经抽滤、洗涤，于40℃真空干燥，即得环糊精包合物，其中的亲脂性提取物与环糊精的重量比为1∶6-10；

3)将步骤1)中进行提取处理后的当归和白术的残渣与黄芪、党参、熟地黄加水煎煮2-3次，每次1.5-4小时，合并煎液，得亲水性提取液；

4)步骤3)所述亲水性提取液滤过浓缩至其毫升数与全部原料药的克数之比为2-10∶1后，调所述提取液pH为3-7，加入絮凝澄清剂后静置6-48小时，加入时物料温度为40-80℃，静置后分离得药液；所述絮凝澄清剂为甲壳素、壳聚糖、ZTC1+1-II型天然澄清剂、ZTC1+1-III型天然澄清剂、101果汁澄清剂中的至少一种，所述分离采用过滤分离或离心分离中的至少一种，离心分离时采用的离心速度范围为1000rpm-50000rpm；

5)浓缩步骤4)所述药液，制得浸膏，所述浸膏的相对密度为1.13-1.36；

6)将阿胶粉碎成细粉，加入步骤2)所述环糊精包合物和步骤5)所述浸膏，制得所述补血中药制剂。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤6)中所述补血中药制剂为口服制剂。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述口服制剂为口服固体制剂。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述口服固体制剂为颗粒剂、片剂、胶囊剂、浓缩丸或滴丸。