CN101961454A - 复方龙血竭在制备治疗溃疡性结肠炎灌肠剂中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及医药技术领域，是龙血竭与白芨组成的复方灌肠制剂治疗溃疡性结肠炎的临床用途。本发明利用DNCB(二硝基氯苯)诱导的大鼠溃疡性结肠炎动物模型大鼠和病理学观察等试验，发现复方龙血竭灌肠液可以有效改善大鼠腹泻、便血、体重减轻、结肠组织形态学变化，能够调节炎性及抑炎性免疫因子，有利于炎症消除和组织修复；并采用该制剂对83例慢性非特异性溃疡性结肠炎(UC)患者进行治疗，发现复方龙血竭灌肠剂可以改善UC患者的血浆粘度、血细胞比容和纤维蛋白原等各项血液流变学指标。显示复方血竭灌肠对UC疗效满意、不含激素与磺胺类成分，无明显不良反应，值得临床推广应用。

Description

复方龙血竭在制备治疗溃疡性结肠炎灌肠剂中的应用

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种龙血竭和白芨组成复方用于制备治疗溃疡性结肠炎灌肠药物的新用途。

技术背景

溃疡性结肠炎是一种发生于结肠粘膜的慢性、炎症性及溃疡性疾病，最典型的特征是血性腹泻。溃疡性结肠炎的病因未明，有证据表明是由于遗传素质导致机体对环境，饮食或感染因子等产生不能调节的肠道免疫反应。然而，激发的抗原尚未被证实。目前国内外尚缺乏有效的根治手段，主要采用内科综合治疗，控制急性发作，减少复发，防止并发症。可选用柳氮磺胺吡啶(SASP)制剂，每日3～4g，分次口服；或用相当剂量的5-氨基水杨酸(5-ASA)制剂。病变分布于远段结肠者可酌用SASP栓剂0.5～1g，每日2次；氢化可的松琥珀酸钠盐灌肠液100～200mg，每晚1次保留灌肠。或用相当剂量的5-ASA制剂灌肠。SASP的维持治疗剂量一般为口服1～3g/d，亦可用相当剂量的新型5-ASA类药物。6-巯基嘌呤(6-MP)或硫唑嘌呤等用于上述药物不能维持或对类固醇激素依赖者。但所有此类治疗方法均无法根治且药物毒副作用较大，许多患者无法长期坚持治疗。但随着国人生活及饮食习惯的迅速西化，该病的发病率快速上升，而且重型、全结肠型所占的比例也有较大提高，加之发病年龄多在中青年，使相当多的患者丧失工作学习能力，对社会造成的疾病负担逐年增大。因此急需寻找切实有效的治疗途径改善疾病的疗效及预后，减轻疾病负担。近年来中医药治疗溃结报道较多，方法多样，疗效显著，无明显副作用，显示出中药治疗本病的优越性和广阔的前景。

龙血竭为百合科植物剑叶龙血树Dranaena cochinchinensis(Lour.)S.C.Chen的含脂木材经醇提取得到的提取物，在临床上其主要功能为活血散瘀，定痛止血，敛疮生肌。主要用于跌打损伤，淤血作痛，妇女气血凝滞，外伤出血，脓疮久不收口，现代临床还应用于治疗胃出血，缺血性心脏病，急性心肌梗死，子宫肌瘤，子宫出血，促进愈合。白芨为兰科白芨属植物Bletilla striata(Thunb.)Reichb.f.，以块茎入药。性微寒，味苦、甘，具化瘀止血、补肺生肌的功效，在中药里属止血类药。《本草纲目》指出：“白芨，敛气，渗痰，止血，此药质极粘腻，性极收涩，能封填破损，痈肿可消，溃败可托，死肌可去，脓血可洁，有托早生新之妙用也。现代药理研究表明，白芨含有白芨胶及葡配甘露聚糖，多种革兰氏阴性及阳性菌也有抑制作用。

本专利中采取了以血竭为主药配以白芨其它中药配制成新型复方灌肠制剂，配方新颖，制剂精炼，既有局部强大的收敛、止血、抗炎、去腐、促进粘膜修复作用，又有活血，促进结肠粘膜代谢，调节免疫的作用，针对溃结发病的多种可能病因有效的纠正了损伤因素与保护因素失衡的状态，达到了良好的治疗效果。

该制剂由我们自主研制，在国内外以往的研究中未见其他研究单位的相关报道，经我医院2003年4月～2007年4收治的慢性非特异性溃疡性结肠炎患者83例，疗效明显优于对照组。

发明内容

本发明公开了复方龙血竭治疗溃疡性结肠炎的组方及其制备方法。

它是由两味药按重量份的组成：龙血竭醇提物5-30g，白芨粉1-10g，纯水100ml。

我们应用中药龙血竭具有止血，祛腐，生肌，收敛，活血，化淤，消肿，止痛等功效。用血竭经局部用药保留灌肠，能较长时间控制病情。配方中加用白芨具有生肌、止血作用，并能增加灌肠液的的黏度和附着性，能增强龙血竭的作用。

上述所说的治疗溃疡性结肠炎的药物，制备成灌肠剂的方法如下：

1)称取白芨粉置研钵或胶体磨中，用少量乙醇润湿，加适量水研成胶体溶液；

2)取血竭粉粉碎成极细粉，加入1)制备的胶体溶液中，充分研匀后加纯化水至全量，即得。

附图说明

图1为正常对照组病理切片图(结肠粘膜正常，各层结构清晰×40倍)；

图2为模型对照组病理切片图(结肠粘膜广泛溃疡多侵及粘膜下，少数及肌层，大量炎细胞浸润×40倍)

图3为复方龙血竭组病理切片图(溃疡浅小，多只侵及黏膜下×40倍)

图4为柳氮磺胺吡啶组病理切片图(柳氮磺胺吡啶灌肠组溃疡较深较大，炎细胞浸润多×100倍)；

图5患者1结肠(乙状结肠)典型病变治疗前后结肠镜检查的对比

图6患者2结肠(乙状结肠)典型病变治疗前后结肠镜检查的对比

具体实施方式：

下面实验选取我院自制的复方龙血竭灌肠剂进一步描述本发明，但所述实验例仅用于说明本发明而不是限制本发明。

实验例1复方血竭灌肠液对溃疡性结肠炎的动物模型细胞因子的调节作用

1材料与方法

1.1实验动物选用雄性Wistar大鼠40只(体重100±10g)，由解放军总医院第二附属医院实验动物中心提供。

1.2主要试剂及仪器2，4-二硝基氯苯(DNCB)，北京生化试剂商店公司提供；丙酮：分析纯，北京化工厂产品；IL-1β，IL-4，IL-6，IL-10。R I A试剂盒：北京邦定泰克生物技术有限公司提供。国产FJ-630型自动r计数仪。

1.3实验分组及给药将40只大鼠随机分成4组，每组10只即正常对照组(正常大鼠以生理盐水1ml/kg灌肠)、模型对照组(溃结模型动物以生理盐水1ml/kg灌肠)、复方血竭灌肠组(本组为实验组溃结模型动物采用复方血竭灌肠液2.2g/kg灌肠)、柳氮磺吡啶灌肠组(溃结模型动物以柳氮磺吡啶灌肠液0.3g/kg灌肠)。

1.4造模方法将大鼠颈背部剃毛后，每日以2％DNCB丙酮液0.25ml(5滴)滴背，1次/天，连续7天致敏，其后每日向大鼠肛门内轻缓注入深度6cm处的结肠肠腔灌注0.45％DNCB乙醇0.25ml，连续5天，制作溃疡性结肠炎模型。

1.5实验方法：UC造模后第2天各组开始分别给予灌肠，每日1次，给药后第14天动物处死，剪取病变最明显处结肠组织，吸干血迹，称取15g，用生理盐水研磨成组织匀浆，经4℃3000r/min离心15分钟，取上清液-20℃保存，使用国产FJ-630型自动γ技术仪进行放射免疫检测结肠黏膜中IL-1β、IL-10、IL-6、IL-4的表达。

2实验结果

2.1一般情况模型组：UC造模开始的第2天出现稀便，随后相继出现粘液便、脓血便，治疗组：上述症状均有不同程度的改善，用药1周后大便开始好转，2周后脓血便减少。

2.2复方血竭灌肠组、柳氮磺吡啶灌肠组相比在病程缩短上无明显差异，但在结肠黏膜损伤恢复方面复方血竭灌肠组优于柳氮磺吡啶灌肠组，见附图1-4。

2.2对UC大鼠模型结肠组织IL-1β、IL-6水平的影响与模型组比较复方龙血竭组和柳氮磺吡啶的IL-1β、IL-6水平较明显降低(P＜0.01)；与空白组比较，两组对于IL-1β、IL-6水平的影响仍存在差异(P＜0.05，P＜0.01)，但从IL-1β数据看，复方血竭组优于柳氮磺吡啶组，结果见表1。

表1复方血竭对UC大鼠结肠组织IL-1β、IL-6水平的影响(X±SD)

注：^*表示与模型组比较P＜0.01；#，##表示与空白组比较P＜0.05，P＜0.01

2.3对UC大鼠模型结肠组织IL-4、IL-10水平的影响与模型组比较复方龙血竭组和柳氮磺吡啶的IL-4、IL-10水平较明显升高(P＜0.01)；与空白组比较，两组对于IL-1β、IL-6水平的影响仍存在差异(P＜0.01)，结果见表2。

表2复方血竭对UC大鼠结肠组织IL-4、IL-10水平的影响(X±SD)

注：^*表示与模型组比较P＜0.01；#表示与空白组比较P＜0.01

IL-1β、IL-6、IL-4、IL-10作为重要的炎性及抑炎性因子和免疫调节剂，在UC的发病中颇受重视。IL-1β、IL-6主要由活化的巨噬细胞、淋巴细胞分泌，具有多种生物学效应，能通过自分泌或旁分泌刺激其他细胞因子和炎症递质的产生，诱发抗原提呈细胞表面免疫分子的表达，为T淋巴细胞的活化提供第二信号，促进B细胞的增殖、分化，介导免疫球蛋白的分泌，由此激活补体、杀伤细胞及吞噬细胞的活性，增强细胞免疫和体液免疫介导组织损伤的过程。此外，IL-4、IL-10还能促进血管内皮、白细胞黏附分子的表达，趋化中性粒细胞等炎性细胞进入肠道病变部位，从而引起一系列肠道炎症反应和组织破坏。

二硝基氯苯DNCB为半抗原，与组织蛋白结合可激发T淋巴细胞依赖的细胞免疫反应。如多次接触，动物可对之产生过敏反应。该项动物实验结果证实复方血竭组与柳氮磺胺吡啶组的抗炎症及溃疡损伤修复作用十分明显，提示复方血竭灌肠有良好的抗UC炎症及溃疡形成作用。并表明该方治疗UC的的途径之一可能是抑制了U C上调的IL-1β、IL-6，并上调IL-4、IL-10等抑炎性因子，调整了炎性及抑炎性免疫因子的平衡失调，纠正了异常的免疫功能，从而有利于炎症的消除及组织的修复。

实验例2复方血竭灌肠液对慢性非特异性溃疡性结肠炎患者血液流变学的影响

2003年4月-2005年11月在我医院消化科采用复方血竭灌肠液保留灌肠治疗慢性非特异性溃疡性结肠炎(UC)，取得显著疗效。

1资料与方法

1.1一般资料83例UC患者均符合1999年全国慢性非感染性肠道疾病学术研讨会制定的诊断标准，将其随机分为治疗组(47例)和对照组(35例)。两组患者的年龄、性别、病程及病变范围间差别无显著性意义(P＞0.05)，见表3。

表3治疗组和对照组患者的一般情况

注：^*为x²值，余为t值

1.2治疗方法

1.2.1药品治疗组采用我院自制复方血竭灌肠液。

1.2.2临床用法治疗组患者取右侧卧位，暴露肛门，用14-16号导尿管涂少许液体石蜡后，插入肛内5-15cm，用100ml注射器吸取药液100ml(药液温度控制在35℃左右)，缓慢注入肠道内。20d为1个疗程，疗程间隔1周。治疗期间禁食刺激性食物及酒类，保持心情愉快、劳逸适度，慎用抗生素。

1.2.3对照组用锡类散1支(天津制药厂生产)、云南白药1/3支，加入200ml蒸馏水内搅匀，1次/d，100ml/次做保留灌肠。操作方法、疗程及治疗期注意事项同治疗组。

1.2.4血液流变学指标测定采用上海赛科希德SA6000血液流变学分析仪，分别检测两组患者治疗前、后的全血黏度、血浆黏度、血细胞比容和纤维蛋白原含量。

1.3疗效判定标准采用1993年全国慢性非感染性结肠炎肠道疾病学术研讨会制定的慢性溃疡性结肠炎疗效标准：治愈：临床症状消失，结肠镜检查黏膜正常；好转：临床症状明显好转，结肠镜检查黏膜轻度炎症反应；无效：经治疗后临床症状、内镜下表现及大便常规均无改善。患者用药前后结肠镜检查见附图5-6。

1.4统计学方法用SPSS10.0统计软件进行分析，计量资料采用秩和检验，计数资料采用t检验。

2结果

2.1两组患者疗效间差别有显著性意义(u＝2.01，P＜0.05，见表4)。

2.2两组患者血液流变学各指标治疗前、后的差值间差别均有显著性意义(P＜0.05，见表5)。

2.3副作用两组82例患者有6例(治疗组2例，对照组4例)出现轻微下腹部疼痛，继续灌肠未再出现持续腹痛。考虑为药物直接刺激溃疡面所致。未见其他不适。

表4两组患者血液流变学各指标治疗前、后的差值(X±SD)

注：^*为t′值

表5两组患者的疗效比较

本结果表明，复方龙血竭灌肠剂对UC患者的血浆黏度、血细胞比容和纤维蛋白原等各项血液流变学指标有明显改善作用。对照组使用锡类散、云南白药初步起到了止血、收敛的作用，但对于血液流变学指标的改善不很明显，这可能与两类药物的作用机制不同有关。本文结果初步显示复方血竭灌肠对U C疗效满意、不含激素与磺胺类成分，无明显不良反应，值得临床推广应用。

Claims (3)

1.治疗溃疡性结肠炎的复方龙血竭灌肠剂，其特征是它是由两味药按下列重量份制成：龙血竭醇提物5-30g，白芨粉1-10g，纯水100ml。

2.根据权利要求1所述的治疗溃疡性结肠炎的灌肠剂，制备方法包括下列步骤：

1)称取白芨粉置研钵或胶体磨中，用少量乙醇润湿，加适量水研成胶体溶液；

2)取血竭粉粉碎成极细粉，加入1)制备的胶体溶液中，充分研匀后加纯化水至全量，即得。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于添加适宜辅料：将最终制成可灌肠的其他液体制剂。

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