CN101954031B - 一种治疗血管性痴呆的药物及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗血管性痴呆的药物，由以下重量份的原料药制成：何首乌300～700份，益智100～500份，黄芪150～550份，天麻100～400份，丹参150～550份，水蛭10～380份，地龙100～400份，远志20～400份，银杏叶提取物1～100份，川芎100～500份。本发明的中药制剂，具有补肾填精、化瘀通窍等功效，主治血管性痴呆。

Description

一种治疗血管性痴呆的药物及制备方法

技术领域

本发明涉及一种治疗血管性痴呆的药物及其制备方法。

背景技术

血管性痴呆(VD)是因脑血管疾病所致的智能及认知功能障碍的临床综合征，是老年人多发病和疑难病。属于中医学的“痴呆”、“健忘”、“郁证”、“文痴”、“呆证”范畴；其临床表现除神经系统定位损害的症状和体征外，尚有系列异常的神经心理症状和精神行为，已成为继阿尔茨海默病(AD)后的第二大痴呆疾病。研究表明，西方国家VD发病率占所有痴呆的15-20％，根据我国痴呆流行病学统计资料，随着人口老龄化、饮食结构的改变，其发病率呈增加趋势。但是，VD是目前唯一可以防治的痴呆类，对血管性痴呆及时有效的治疗可以控制病情发展、改善患者的生存质量，减轻家庭和社会的负担。

目前，现有技术中虽有多种治疗血管性痴呆的治疗方式和药物，但大多存在治疗效果不理想、成本高、治疗方式复杂等缺陷。CN02114550.4公开了一种用于治疗血管性痴呆病的中成药，用以补肝肾、益心脾、行气血消痰浊、通脉健神益智，其特征在于它是由以下重量配比的原料加工制成的中药制剂：红参20～700个重量单位、鹿茸5～300个重量单位、人参(茎叶)皂甙粉5～200个重量单位、何首乌20～1000个重量单位、黄精40～80个重量单位、丹参50～900个重量单位、山楂30～700个重量单位、大黄(酒制)8～150个重量单位。200810134120.5公开了一种治疗血管性痴呆的中药组合物及其制备方法，中药组合物各种成分的重量份数比为：三七10～20份、天麻10～20份、葛根10～20份、肉苁蓉10～20份、丹参10～20份、丹皮10～20份、银杏叶10～20份、水蛭10～20份、蜈蚣10～20份、肉桂10～20份、川穹10～20份、五味子10～20份，以益气养血，滋阴补阳，配合熄风化痰，祛瘀通络。这些药物，由于采用了多种活血化瘀的药物，长期服用，容易损伤正气，影响脾胃，使得它们更加不能够增加活血化瘀药物的应用程度。

发明内容

针对上述现有技术，本发明的目的是提供一种治疗效果好、成本低的治疗血管性痴呆的药物，并提供了其制备方法，本发明的药物为纯中药制剂，具有补肾填精、化瘀通窍等功效。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种治疗血管性痴呆的药物，由以下重量份的原料药制成：何首乌300～700份，益智100～500份，黄芪150～550份，天麻100～400份，丹参150～550份，水蛭10～380份，地龙100～400份，远志20～400份，银杏叶提取物1～100份，川芎100～500份。

优选的，由以下重量份的原料药制成：何首乌400～600份，益智200～400份，黄芪250～450份，天麻150～350份，丹参250～450份，水蛭80～280份，地龙150～350份，远志100～300份，银杏叶提取物10～30份，川芎200～400份。

进一步优选的，由以下重量份的原料药制成：何首乌450～550份，益智250～350份，黄芪300～400份，天麻200～300份，丹参300～400份，水蛭130～230份，地龙200～300份，远志150～250份，银杏叶提取物15～25份，川芎250～350份。

再一步优选的，由以下重量份的原料药制成：何首乌480～520份，益智280～320份，黄芪320～380份，天麻230～270份，丹参320～380份，水蛭160～200份，地龙230～270份，远志170～220份，银杏叶提取物18～22份，川芎280～320份。

最优选的，由以下重量份的原料药制成：何首乌500份，益智300份，黄芪350份，天麻250份，丹参350份，水蛭180份，地龙250份，远志200份，银杏叶提取物20份，川芎300份。

所述何首乌优选制何首乌，采用中药技术领域中常规的何首乌炮制方法进行炮制即可得到。

所述的银杏叶提取物，是市售可得的银杏叶提取物，该银杏叶提取物为从银杏叶中提取的有效组分，棕黄色粉末，是《中国药典》2005年版(一部)收载的提取物，具有法定标准。

所述治疗血管性痴呆的药物，还包括药学上常用的辅料，例如淀粉。加入辅料后，可制成胶囊剂、片剂、口服液、丸剂、颗粒剂、滴丸剂、糖浆剂、合剂、注射剂或粉针剂等常规剂型。

所述的治疗血管性痴呆的药物的制备方法，步骤如下：

(1)将何首乌、丹参和水蛭混合，加乙醇回流提取，滤过，药渣再加同浓度的乙醇回流提取两次，滤过，合并三次醇提液，减压浓缩至稠膏，备用；

(2)将川芎、益智混合，加水，蒸馏提取挥发油，β-CD(β-环糊精)包结，干燥，粉碎，得β-CD包结物，备用；滤出水液，备用；

(3)将步骤(1)和步骤(2)的药渣，合并于黄芪、远志、地龙、天麻中，加水煎煮两次，合并两次水煎液及步骤(2)中提取挥发油后的水液，减压浓缩，加入乙醇，搅拌，置0～4℃静止24h，减压浓缩至稠膏；

(4)将步骤(3)所制得的稠膏和步骤(1)所制得的稠膏合并，加入适量淀粉，混匀，干燥，粉碎，过筛，递增法加入银杏叶提取物和步骤(2)所制得的β-CD包结物，混匀，装入胶囊或做成临床用其他剂型，分装，即得。

优选的，步骤如下：

(1)将制何首乌、丹参、水蛭混合，加2～10倍量(重量倍数，下同)85％乙醇(体积百分比，下同)回流提取1～4h，滤过，药渣再加3～9倍量同浓度的乙醇回流提取两次，每次1～3小时，滤过，合并三次醇提液，减压浓缩至稠膏，备用；

(2)将川芎、益智混合，加2～10倍量的水，蒸馏提取挥发油，β-CD包结，干燥，粉碎，得β-CD包结物，备用；滤出水液，备用；

(3)将步骤(1)和步骤(2)的药渣，合并于黄芪、远志、地龙、天麻中，加2～10倍量的水，煎煮两次，每次1～3小时，合并两次水煎液及步骤(2)中提取挥发油后的水液，减压浓缩至相对密度1.06～1.10(50℃测，下同)的药液，加入乙醇，使药液含醇量为40％-80％，搅拌，置0～4℃静止24h，减压浓缩至稠膏；

(4)将步骤(3)所制得的稠膏和步骤(1)所制得的稠膏合并，加入适量淀粉，混匀，干燥，粉碎，过筛；递增法加入银杏叶提取物和步骤(2)所制得的β-CD包结物，混匀，装入胶囊或做成临床用其他剂型，分装，即得。

进一步优选的，步骤如下：

(1)将制何首乌、丹参和水蛭混合，加8倍量85％乙醇回流提取3h，滤过，药渣再加6倍量同浓度的乙醇回流提取两次，每次2小时，滤过，合并三次醇提液，减压浓缩至密度为1.30～1.35的稠膏，备用；

(2)将川芎、益智混合，加8倍量的水，蒸馏提取挥发油，β-CD包结，干燥，粉碎，得β-CD包结物，备用；滤出水液，备用。

(3)将步骤(1)和步骤(2)的药渣，合并于黄芪、远志、地龙、天麻中，加8倍量的水，煎煮两次，每次2小时，合并两次水煎液及步骤(2)中提取挥发油后的水液，减压浓缩至相对密度1.06～110(50℃测)的药液，加入乙醇，使药液含醇量为65％，搅拌，置0～4℃静止24h，减压浓缩至密度为1.30～1.35℃(50℃测)的稠膏；

(4)将步骤(3)所制得的稠膏和步骤(1)所制得的稠膏合并，加入适量淀粉，混匀，干燥，粉碎，过筛；递增法加入银杏叶提取物和步骤(2)所制得的β-CD包结物，混匀，装入胶囊或做成临床用其他剂型，分装，即得。

上述步骤中，所述倍数均为重量倍数，所出现的浓度百分比均为体积百分比，所述稠膏的相对密度均为50℃下测的相对密度。

使用：以通过上述方法制得的胶囊剂型为例，每粒0.48g，服用时，口服，温开水冲服，一次四粒，一日三次，90天为一疗程。

本发明的中药制剂，具有补肾填精、化瘀通窍等功效，主治血管性痴呆。

方义分析：本发明方中，何首乌制用，味甘涩，性微温，得天地中和之气，阴不甚滞，阳不甚燥，补而不腻，为君药，专入肝、肾经，功专补益肝肾、益精生髓。《本草纲目》：“此物气温味苦涩，苦补肾，温补肝，涩能收敛精气所以能养血益肝、固精益肾、健筋骨、乌须发，为滋补良药。不寒不燥，功在地黄、天门冬诸药之上。”《开宝本草》言其：“久服长筋骨，益精髓，延年不老”。益智，为姜科植物益智的干燥成熟果实，异名为益智仁、益智子，味辛，性温，归肾、脾经，补肾阳，温肾经，收敛固精；醒脾益胃，使运化功能重建，血脉充，精髓化生有源。正如杨仁斋《直指方》“此为温煦以助阳和而斡旋大气，则能进食”。黄芪，味甘性微温，归脾肺经，功专补气升阳，为补脾益气之良药，对脾气虚弱，运化失健，气虚血亏，血行不畅等均为首选药。《本经逢源》言其“性虽温补，而能通调血脉、流行经络，可无碍于壅滞也。”天麻，味甘性平，入脾、肾、肝、胆经，体肥柔润，富含液质滋补之性，能养液开郁化痰。《本经》“......久服益气力、长阴、肥健、轻身、增年。”《日华子本草》“助阳气，补五劳七伤，通血脉开窍。”助君药补益肝肾，生精填髓。以上三药为臣药。益智，辛温助阳，黄芪补气升阳，天麻质润滋补，君臣配伍，脾肾同治，气血双补，鼓舞肾气以生精，助阳以化阴，取“阳生阴长”、“血得温则行”之意，使阴得阳升而泉源不竭，可使化源得滋，血得畅达，脑髓得充。丹参、水蛭、地龙、远志、银杏叶共为佐药。丹参，味苦，性微寒，活血祛瘀，养血安神。《滇南本草》“补心定志，安神宁心，治健忘怔忡，惊悸不寐”，助君药养血醒神。《本草正义》“丹参专入血分，其功在于活血行血。内之达脏腑而化瘀滞......外之利关节而通脉络”，与臣药益智、黄芪相配加强活血行气功能，正如《本草正义》指出：“详核古人主治，无一非宣通运行之效，而其所以能运行者，则必有温和之气，方能鼓荡之、振动之.......。水蛭，味咸苦，性平，入肝经，破血逐瘀通络。《本草汇言》“水蛭逐恶血、瘀血之药也”。《本草经百种录》“水蛭最善食人之血，而性又迟缓善入，迟缓则生血不伤，善入则坚积易破，借其力以攻积久之滞，自有利而无害也”。所以水蛭特点是专入血分而药力迟缓，善入血分则长于逐瘀，性迟缓而不伤正气。因此借其破瘀而不伤气血之功，剔除脑络瘀血，使瘀除络通，祛杂致纯，脑窍复开。地龙，味咸、性寒，入肝、脾、膀胱经，通利经络、祛瘀生新，与水蛭合用疏通血脉、驱逐脏腑经络之瘀血，推陈致新。远志，味辛、苦，性微温，善于宣泄通达，既能交通心肾，又可豁痰开窍，还能助心气，开心郁，故有宁心安神、益智、通心窍之功。本品益肾强智，故有远志之名。《本经》“主咳逆伤中，补不足，除邪气，利九窍，益智慧，耳目聪明，不忘，强志倍力。久服轻身不老”。《药性本草》“治心神健忘，安魂魄，令人不迷”。银杏叶提取物，为从银杏叶中提取的主要有效组分，具有银杏叶的性味归经和功能主治，味甘、苦、涩，性平，活血通络、益气敛肺。现代研究将其主治病症归结为：胸闷心痛、心悸怔仲、眩晕、中风、痴呆等。以上五味佐药与君臣药相合，共达益气活血、化瘀通络、推陈致新、填精生髓、开窍聪志之功。川芎为使药，味辛，性温，归肝、胆、心包经，辛则行，温则通，活血行气，通行血脉。金代张元素概括其功用特点“上行头目，下行血海”。《本草纲目.卷十四.川芎》称本品为“血中气药”。本品其气芳香走窜，能升能降，善于行散开郁，为血中之气药，可使血活气顺，助诸药发挥作用。

全方通补结合，补而不滞，诸药配合，滋补温养精血，益气通行血脉，祛瘀生新通络，共奏补肾填精，化瘀通窍之功能。正切中了血管性痴呆之肾精亏虚、瘀血阻络的病机。用于轻、中度血管性痴呆-肾精亏虚、瘀血阻络证，症见智力减退，神情呆滞，反应迟钝，善忘，头晕耳鸣，腰膝酸软，肢体麻木等。

与现有技术相比，本发明由于增加了黄芪、益智等药物，具有健脾和胃，固其根本的功效，并因此使得该药物中能进一步增加活血化瘀通络的效果，例如，本发明药物中增加的具有活血通络作用的水蛭、地龙，剔除脑络瘀血，使瘀除络通，祛杂致纯，脑窍复开。此外本发明中益智温补肾阳，阴得阳升而泉源不竭，且温能通气行血，振奋阳气，从而使气足血行水利。

现有技术中，专利CN1330363公开了一种治疗血管性痴呆的药物及其制备方法，由何首乌、益智仁、黄芪、天麻、丹参、水蛭、地龙、银杏叶总黄酮、石菖蒲、川芎组成，用以治疗肾精亏虚、瘀血阻络型血管性痴呆。与本发明作为接近，与本发明为同一申请人，与其相比，本发明用远志代替石菖蒲，且对用量进行了优选，改进了制备工艺，经过临床验证及动物试验，疗效显著提高，具体如下：

本发明的药物能更好地治疗血管性痴呆，较首乌益智灵组能明显改善临床疗效，改善证候积分及MMSE、HDS、ADL积分，且安全性好，对血象、肝功、肾功等无不良影响。

一、现有发明与本发明药物组成与用量说明：

现有发明组方：何首乌50、黄芪30、丹参24、川芎18、石菖蒲10、益智仁10、银杏叶总黄酮4、地龙6、水蛭3、天麻6。

本发明组方：制何首乌500份，益智300份，黄芪350份，天麻250份，丹参350份，水蛭180份，地龙250份，远志200份，银杏叶提取物20份，川芎300份。

注：本发明用远志代替石菖蒲，且各原料药用量比例不同。

二、现有发明与本发明制备方法的区别：

现有发明的制备方法：a.按比例经乙醇提取何首乌、黄芪、丹参、川芎；b.按比例煎煮石菖蒲、益智仁，过滤；c.将b步骤中的滤液与a步骤中的乙醇提取液合并，浓缩至稠膏，减压干燥，粉碎成浸膏粉；d.按比例将天麻、水蛭、地龙粉碎，将浸膏粉、天麻粉、水蛭粉、地龙粉与银杏叶提取物混合均匀，装入胶囊。

本发明的制备方法：a.按比例经乙醇提取何首乌、丹参、水蛭，过滤，浓缩至稠膏；b.按比例煎煮川芎、益智，提取挥发油，其水液另器收集；c.将a步骤与b步骤的药渣合并于黄芪、远志、地龙、天麻中水煎煮，然后过滤，提取挥发油后浓缩至稠膏；d.将a步骤与c步骤所得稠膏合并加入淀粉，干燥粉碎，加入银杏叶提取物混匀，装入胶囊。

说明：本发明在制备上与现有发明有质的改变。

三、本发明的优势：

(一)原料药和用量的改变：远志代替石菖蒲

远志，味辛、苦，性微温，善于宣泄通达，既能交通心肾，又可豁痰开窍，还能助心气，开心郁，故有宁心安神、益智、通心窍之功。本品益肾强智，故有远志之名。《本经》“主咳逆伤中，补不足，除邪气，利九窍，益智慧，耳目聪明，不忘，强志倍力。久服轻身不老”。《药性本草》“治心神健忘，安魂魄，令人不迷”。所以发明人用远志代替石菖蒲以增强补肾益智之功。

发明人对药物的剂量进行了优选，加重了补肾、活血、通络药物的比例，使本发明药物更能针对血管性痴呆肾精亏虚、瘀血阻络的病机，从而起到更好的治疗效果。

(二)本发明制备工艺的优选：

1.药物剂型的确定：鉴于本品为治疗血管性痴呆的药物，而血管性痴呆为慢性疾病，多数患者为中老年人，需较长时间甚至终身服药，且根据本处方药物经提取加工后适宜制成硬胶囊及在临床应用中原为硬胶囊的背景，故选用现代剂型中服用、携带、运输均十分方便的硬胶囊剂，作为本药物的剂型，并在处方和剂型确定的基础上，根据硬胶囊剂服用量及相关的技术要求，进行了制备工艺的总体设计和提取制备条件的优选，确定了本品的制备工艺及各工艺参数，通过样品的小试和三批中试样品制备及连续三批样品的工艺验证试验，表明采用本处方量及其生产工艺制成硬胶囊剂是适宜的，服用量为每次4粒，一日3次，每日服胶囊量为12粒，含胶囊内容物5.76g(0.48g/粒)，相当于生药量32.4g。

2.工艺设计的总体思路及依据：本硬胶囊剂制备工艺的确定是在查阅处方10味药物相关文献的基础上，根据处方各味中药最新研究成果和所含有效成分和主要成分的理化性质，参考相同药物在其它中成药制剂中的提取工艺及传统用药的习惯，将处方10味药物分为乙醇回流提取、提取挥发油和水煎煮醇沉淀及银杏叶提取物的直接加入四部分，并对各部分药物提取的最佳工艺条件进行了优选和三批样品制备的工艺验证试验，从而确定了科学合理的提取制备工艺。在确定工艺时，并尽量考虑到，既能充分提取和保留各药物的有效组分，保证产品质量，又能尽量简化工艺、缩短工时，降低成本，有利于工业化生产。在制备工艺确定的基础上，通过三批中试样品的制备和连续三批样品的工艺验证及对各批产品的质量检验，表明采用本工艺生产的中试及工艺验证样品与小试样品基本一致，均符合该制剂所附质量标准的技术要求，产品质量合格，制剂质量稳定，这表明本制备工艺是科学合理和成熟的。其本提取制备工艺确定的具体依据如下：

①制何首乌、丹参和水蛭3味药物乙醇提取确定的依据：现代药理研究表明，水蛭的水煎液、水煎醇沉液及醇提取液均具有明显的抗凝血作用，其中以醇提液抗凝血作用最强，醇提取液抗凝血作用强于虻虫、桃仁、红花等。根据制何首乌、丹参、水蛭中所含脂溶性有效成分和水溶性有效成分理化性质的特点，故采用对二类成分均具有良好溶解度的乙醇进行提取，药渣再合并于水煎醇沉药物中，共同水煎醇沉提取，以充分提取药物的各类有效成分。

②提取挥发油药物确定的依据：处方中的益智、川芎2味药物中均含有数量不同的挥发油，另外，这2味药物中尚有多种水溶性有效成分，故对二者先提取挥发油，药渣再合并于水煎醇沉药物中，进行水煎醇沉，以充分提取二味药物的各类有效成分。

③黄芪、远志、地龙、天麻4味水煎醇沉药物确定的依据：黄芪、远志、地龙、天麻4味药物均主要含有水醇皆溶有效成分。根据以上4味药物主要含水醇皆溶性有效成分的性质和传统水煎用药习惯及“混煎增溶”的原理，对以上4味药物与提取挥发油后的2味药渣和醇提取后的3味药渣，共同混合水煎，以充分提取各药物的有效成分，并采用醇沉法去除部分杂质，以达到减少服用量之目的。

④银杏叶提取物直接加入的依据：银杏叶提取物为从银杏叶中提取的有效组分，是《中国药典》2005年版(一部)收载的提取物，具有法定标准，本品为棕黄色粉末，为充分保留该提取物的有效成分，减少提取及制备中的损失，故将该提取物在装胶囊前直接加入各药物的提取干膏药粉中，混匀后，直接装入胶囊中。

(三)临床观察

2005年以来，发明人严格按照《药品临床试验管理规范(GCP)》，临床共观察符合轻中度血管性痴呆诊断标准的病人90例，采取分层随机、对照的原则，分为首乌益智灵组(即现有发明CN1330363组)、本发明药物组1、本发明药物组2三组，每组病例30例。三组病例在性别、年龄、病程、病情程度、以及其它临床特点经统计学分析，无显著性差异(P＞0.05)，具有可比性。研究结果显示：本发明药物临床总体疗效、中医证候积分、MMSE、HDS积分、WMS积分、日常生活能力量表积分，均明显优于现有发明(首乌益智灵)，有显著差异(P＜0.05，P＜0.01)。首乌益智灵组临床总有效率为73.3％，本发明药物组2为83.3％，本发明药物临床总疗效明显优于现有发明(首乌益智灵)(P＜0.01)。

具体实施方式

下面结合实施例和临床资料对本发明做进一步的说明。

实施例1制备一种治疗血管性痴呆的药物

配方为：何首乌500g，益智300g，黄芪350g，天麻250g，丹参350g，水蛭180g，地龙250g，远志200g，银杏叶提取物20g，川芎300g。

制备方法为：

(1)将制何首乌、丹参和水蛭混合，加8倍量85％乙醇回流提取3h，滤过，药渣再加6倍量同浓度的乙醇回流提取两次，每次2小时，滤过，合并三次醇提液，减压浓缩至密度为1.30～1.35的稠膏，备用；

(2)将川芎、益智混合，加8倍量的水，蒸馏提取挥发油，β-CD包结，干燥，粉碎，得β-CD包结物，备用；滤出水液，备用。

(3)将步骤(1)和步骤(2)的药渣，合并于黄芪、远志、地龙、天麻中，加8倍量的水，煎煮两次，每次2小时，合并两次水煎液及步骤(2)中提取挥发油后的水液，减压浓缩至相对密度1.06～1.10(50℃测)的药液，加入乙醇，使药液含醇量为65％，搅拌，置0～4℃静止24h，减压浓缩至密度为1.30～1.35℃(50℃测)的稠膏；

(4)将步骤(3)所制得的稠膏和步骤(1)所制得的稠膏合并，加入120g淀粉，混匀，干燥，粉碎，过筛；递增法加入银杏叶提取物和步骤(2)所制得的β-CD包结物，混匀，装入胶囊，分装，即得。

实施例2制备一种治疗血管性痴呆的药物

配方为：何首乌480g，益智320g，黄芪320g，天麻270g，丹参320g，水蛭200g，地龙230g，远志220g，银杏叶提取物18g，川芎320g。

制备方法为：

(1)将制何首乌、丹参和水蛭混合，加2倍量85％乙醇回流提取4h，滤过，药渣再加3倍量同浓度的乙醇回流提取两次，每次3小时，滤过，合并三次醇提液，减压浓缩至密度为1.30～1.35的稠膏，备用；

(2)将川芎、益智混合，加2倍量的水，蒸馏提取挥发油，β-CD包结，干燥，粉碎，得β-CD包结物，备用；滤出水液，备用。

(3)将步骤(1)和步骤(2)的药渣，合并于黄芪、远志、地龙、天麻中，加2倍量的水，煎煮两次，每次3小时，合并两次水煎液及步骤(2)中提取挥发油后的水液，减压浓缩至相对密度1.06～110(50℃测)的药液，加入乙醇，使药液含醇量为65％，搅拌，置0～4℃静止24h，减压浓缩至密度为1.30～1.35℃(50℃测)的稠膏；

(4)将步骤(3)所制得的稠膏和步骤(1)所制得的稠膏合并，加入80g淀粉，混匀，干燥，粉碎，过筛；递增法加入银杏叶提取物和步骤(2)所制得的β-CD包结物，混匀，装入胶囊或做成临床用其他剂型，分装，即得。

实施例3制备一种治疗血管性痴呆的药物

配方为：何首乌520g，益智280g，黄芪380g，天麻230g，丹参380g，水蛭160g，地龙270g，远志170g，银杏叶提取物22g，川芎280g。

制备方法为：

(1)将制何首乌、丹参和水蛭混合，加10倍量85％乙醇回流提取1h，滤过，药渣再加9倍量同浓度的乙醇回流提取两次，每次1小时，滤过，合并三次醇提液，减压浓缩至密度为1.30～1.35的稠膏，备用；

(2)将川芎、益智混合，加10倍量的水，蒸馏提取挥发油，β-CD包结，干燥，粉碎，得β-CD包结物，备用；滤出水液，备用。

(3)将步骤(1)和步骤(2)的药渣，合并于黄芪、远志、地龙、天麻中，加10倍量的水，煎煮两次，每次1小时，合并两次水煎液及步骤(2)中提取挥发油后的水液，减压浓缩至相对密度1.06～1.10(50℃测)的药液，加入乙醇，使药液含醇量为65％，搅拌，置0～4℃静止24h，减压浓缩至密度为1.30～1.35℃(50℃测)的稠膏；

(4)将步骤(3)所制得的稠膏和步骤(1)所制得的稠膏合并，加入150g淀粉，混匀，干燥，粉碎，过筛；递增法加入银杏叶提取物和步骤(2)所制得的β-CD包结物，混匀，装入胶囊或做成临床用其他剂型，分装，即得。

实施例4制备一种治疗血管性痴呆的药物

配方为：何首乌450g，益智250g，黄芪300g，天麻300g，丹参300g，水蛭230g，地龙200g，远志250g，银杏叶提取物15g，川芎350g。

制备方法为：

(1)将制何首乌、丹参和水蛭混合，加4倍量85％乙醇回流提取3h，滤过，药渣再加5倍量同浓度的乙醇回流提取两次，每次2小时，滤过，合并三次醇提液，减压浓缩至密度为1.30～1.35的稠膏，备用；

(2)将川芎、益智混合，加4倍量的水，蒸馏提取挥发油，β-CD包结，干燥，粉碎，得β-CD包结物，备用；滤出水液，备用。

(3)将步骤(1)和步骤(2)的药渣，合并于黄芪、远志、地龙、天麻中，加4倍量的水，煎煮两次，每次2小时，合并两次水煎液及步骤(2)中提取挥发油后的水液，减压浓缩至相对密度1.06～110(50℃测)的药液，加入乙醇，使药液含醇量为65％，搅拌，置0～4℃静止24h，减压浓缩至密度为1.30～1.35℃(50℃测)的稠膏；

(4)将步骤(3)所制得的稠膏和步骤(1)所制得的稠膏合并，加入50g淀粉，混匀，干燥，粉碎，过筛；递增法加入银杏叶提取物和步骤(2)所制得的β-CD包结物，混匀，装入胶囊，分装，即得。

实施例5制备一种治疗血管性痴呆的药物

配方为：何首乌550g，益智350g，黄芪400g，天麻200g，丹参400g，水蛭130g，地龙300g，远志150g，银杏叶提取物25g，川芎250g。

制备方法为：

(1)将制何首乌、丹参和水蛭混合，加6倍量85％乙醇回流提取2h，滤过，药渣再加7倍量同浓度的乙醇回流提取两次，每次1小时，滤过，合并三次醇提液，减压浓缩至密度为1.30～1.35的稠膏，备用；

(2)将川芎、益智混合，加6倍量的水，蒸馏提取挥发油，β-CD包结，干燥，粉碎，得β-CD包结物，备用；滤出水液，备用。

(3)将步骤(1)和步骤(2)的药渣，合并于黄芪、远志、地龙、天麻中，加6倍量的水，煎煮两次，每次2小时，合并两次水煎液及步骤(2)中提取挥发油后的水液，减压浓缩至相对密度1.06～110(50℃测)的药液，加入乙醇，使药液含醇量为65％，搅拌，置0～4℃静止24h，减压浓缩至密度为1.30～1.35℃(50℃测)的稠膏；

(4)将步骤(3)所制得的稠膏和步骤(1)所制得的稠膏合并，加入180g淀粉，混匀，干燥，粉碎，过筛；递增法加入银杏叶提取物和步骤(2)所制得的β-CD包结物，混匀，装入胶囊，分装，即得。

实施例6制备一种治疗血管性痴呆的药物

配方为：何首乌400g，益智400g，黄芪250g，天麻350g，丹参250g，水蛭280g，地龙150g，远志300g，银杏叶提取物10g，川芎400g。

制备方法为：

(1)将制何首乌、丹参和水蛭混合，加3倍量85％乙醇回流提取3h，滤过，药渣再加4倍量同浓度的乙醇回流提取两次，每次2小时，滤过，合并三次醇提液，减压浓缩至密度为1.30～1.35的稠膏，备用；

(2)将川芎、益智混合，加3倍量的水，蒸馏提取挥发油，β-CD包结，干燥，粉碎，得β-CD包结物，备用；滤出水液，备用。

(3)将步骤(1)和步骤(2)的药渣，合并于黄芪、远志、地龙、天麻中，加3倍量的水，煎煮两次，每次2小时，合并两次水煎液及步骤(2)中提取挥发油后的水液，减压浓缩至相对密度1.06～1.10(50℃测)的药液，加入乙醇，使药液含醇量为65％，搅拌，置0～4℃静止24h，减压浓缩至密度为1.30～1.35℃(50℃测)的稠膏；

(4)将步骤(3)所制得的稠膏和步骤(1)所制得的稠膏合并，加入20g淀粉，混匀，干燥，粉碎，过筛；递增法加入银杏叶提取物和步骤(2)所制得的β-CD包结物，混匀，装入胶囊或做成临床用其他剂型，分装，即得。

实施例7制备一种治疗血管性痴呆的药物

配方为：何首乌600g，益智200g，黄芪450g，天麻150g，丹参450g，水蛭80g，地龙350g，远志100g，银杏叶提取物30g，川芎200g。

制备方法为：

(1)将制何首乌、丹参和水蛭混合，加5倍量85％乙醇回流提取3h，滤过，药渣再加5倍量同浓度的乙醇回流提取两次，每次2小时，滤过，合并三次醇提液，减压浓缩至密度为1.30～1.35的稠膏，备用；

(2)将川芎、益智混合，加5倍量的水，蒸馏提取挥发油，β-CD包结，干燥，粉碎，得β-CD包结物，备用；滤出水液，备用。

(3)将步骤(1)和步骤(2)的药渣，合并于黄芪、远志、地龙、天麻中，加5倍量的水，煎煮两次，每次2小时，合并两次水煎液及步骤(2)中提取挥发油后的水液，减压浓缩至相对密度1.06～1.10(50℃测)的药液，加入乙醇，使药液含醇量为65％，搅拌，置0～4℃静止24h，减压浓缩至密度为1.30～1.35℃(50℃测)的稠膏；

(4)将步骤(3)所制得的稠膏和步骤(1)所制得的稠膏合并，加入220g淀粉，混匀，干燥，粉碎，过筛；递增法加入银杏叶提取物和步骤(2)所制得的β-CD包结物，混匀，装入胶囊或做成临床用其他剂型，分装，即得。

实施例8制备一种治疗血管性痴呆的药物

配方为：何首乌300g，益智500g，黄芪150g，天麻400g，丹参150g，水蛭380g，地龙100g，远志400g，银杏叶提取物5g，川芎500g。

制备方法为：

(1)将制何首乌、丹参和水蛭混合，加7倍量85％乙醇回流提取1h，滤过，药渣再加7倍量同浓度的乙醇回流提取两次，每次2小时，滤过，合并三次醇提液，减压浓缩至密度为1.30～1.35的稠膏，备用；

(2)将川芎、益智混合，加7倍量的水，蒸馏提取挥发油，β-CD包结，干燥，粉碎，得β-CD包结物，备用；滤出水液，备用。

(3)将步骤(1)和步骤(2)的药渣，合并于黄芪、远志、地龙、天麻中，加7倍量的水，煎煮两次，每次2小时，合并两次水煎液及步骤(2)中提取挥发油后的水液，减压浓缩至相对密度1.06～1.10(50℃测)的药液，加入乙醇，使药液含醇量为65％，搅拌，置0～4℃静止24h，减压浓缩至密度为1.30～1.35℃(50℃测)的稠膏；

(4)将步骤(3)所制得的稠膏和步骤(1)所制得的稠膏合并，加入10g淀粉，混匀，干燥，粉碎，过筛；递增法加入银杏叶提取物和步骤(2)所制得的β-CD包结物，混匀，装入胶囊或做成临床用其他剂型，分装，即得。

实施例9制备一种治疗血管性痴呆的药物

配方为：何首乌700g，益智100g，黄芪550g，天麻100g，丹参550g，水蛭10g，地龙400g，远志20g，银杏叶提取物100g，川芎100g。

制备方法为：

(1)将制何首乌、丹参和水蛭混合，加9倍量85％乙醇回流提取3h，滤过，药渣再加8倍量同浓度的乙醇回流提取两次，每次2小时，滤过，合并三次醇提液，减压浓缩至密度为1.30～1.35的稠膏，备用；

(2)将川芎、益智混合，加9倍量的水，蒸馏提取挥发油，β-CD包结，干燥，粉碎，得β-CD包结物，备用；滤出水液，备用。

(3)将步骤(1)和步骤(2)的药渣，合并于黄芪、远志、地龙、天麻中，加9倍量的水，煎煮两次，每次2小时，合并两次水煎液及步骤(2)中提取挥发油后的水液，减压浓缩至相对密度1.06～1.10(50℃测)的药液，加入乙醇，使药液含醇量为65％，搅拌，置0～4℃静止24h，减压浓缩至密度为1.30～1.35℃(50℃测)的稠膏；

(4)将步骤(3)所制得的稠膏和步骤(1)所制得的稠膏合并，加入320g淀粉，混匀，干燥，粉碎，过筛；递增法加入银杏叶提取物和步骤(2)所制得的β-CD包结物，混匀，装入胶囊或做成临床用其他剂型，分装，即得。

临床研究：

2005年来，共观察符合轻、中度血管性痴呆诊断标准的病人90例，均来自山东省千佛山医院中医科及神经内科门诊及住院病人，现将临床研究情况总结汇总如下：

研究设计采用分层随机对照，单盲，对照以年龄、性别、病情程度为分层因素，然后将入选的病人随机化分为A、B、C三组。其中，A组(首乌益智灵组，即现有发明CN1330363组)30例，男16例，女14例，平均年龄67.5±7.3，轻度痴呆15例，中度痴呆15例；B组(本发明药物组1)30例，男性17例，女性13例，平均年龄66.5±7.7，轻度痴呆14例，中度痴呆16例。C组(本发明药物组2)30例，男14例，女16例，平均年龄67.2±6.8，轻度痴呆13例，中度痴呆17例。三组病例在性别、年龄、病程、病情程度、以及其它临床特点经统计学分析，无显著性差异(P＞0.05)，具有可比性。

(一)诊断标准

1.西医诊断标准

1.1血管性痴呆的诊断：参照2002年中华医学会神经病学分会《血管性痴呆诊断标准草案》

1.2痴呆程度的确定：采用1993年Morris修订的临床痴呆分级表(CDR)中轻、中度标准。CDR＝1.0为轻度痴呆，CDR＝2.0为中度痴呆。

2.中医证候诊断标准

采用2000年中国中医药学会内科分会延缓衰老委员会制定的血管性痴呆中医辨证量表(SDSVD)和2002年中国医药科技出版社出版的《中药新药临床研究指导原则》中《中药新药治疗痴呆的临床研究指导原则》制定的标准，选择肾精亏虚，兼瘀血阻络证血管性痴呆为观察病例。

3.鉴别诊断

3.1血管性痴呆与阿尔茨海默病的鉴别：采用1975年Hachinski缺血量表，评分≥7分者为血管性痴呆，5，6分为混合性痴呆，≤4分为阿尔茨海默病。

3.2血管性痴呆与抑郁症的鉴别：采用田金洲引进的Alexopolous等制订的Cornell抑郁量表(CSDD)除外抑郁症，＞8分为抑郁症。

(二)病例入选标准

1.符合血管性痴呆中西医诊断标准；选择其中多发性梗死性痴呆类型。

2.符合临床痴呆分级表(CDR)中的轻度和中度标准。

3.符合血管性痴呆辨证量表(SDSVD)，辨证属肾精亏虚、瘀血阻络者，证候积分≥7分。

4.简易精神状态检查(MMSE)评分：19分(文盲组为17分)≤MMSE评分≤26分(文盲组24分)。

5.Hachinski缺血量表(HIS)评分≥7分。

6.体重在50～90kg之间。

7.年龄45～80岁，男女均可。

8.自愿者，并签订知情同意书。

9.对药物研究意义有正确认识，对研究人员的观察和评价有良好的依从性。

10.有一定文化程度，既往能阅读简单的报纸文章和写简单的小文章。

(三)治疗方法

3.1治疗前进行2周的清洗，停服所有益智药及扩血管药物。

3.2分组给药：

3.2.1A组(首乌益智灵组)：首乌益智灵胶囊

①组方及用量配比：何首乌500、黄芪300、丹参240、川芎180、石菖蒲100、益智仁100、银杏叶总黄酮40、地龙60、水蛭30、天麻60

②用药方法：口服，温开水送服，一次4粒，每粒0.48克，一日三次。

3.2.2B组(本发明药物组1)：首乌益智胶囊

①组方及用量配比：何首乌500、黄芪300、丹参240、川芎180、远志100、益智仁100、银杏叶总黄酮40、地龙60、水蛭30、天麻60

②用药方法：口服，温开水送服，一次4粒，每粒0.48克，一日三次。

3.2.3C组(本发明药物组2)：

①组方及用量配比：制何首乌500、益智300、黄芪350、天麻250、丹参350、水蛭180、地龙250、远志200、银杏叶提取物20、川芎300

②用药方法：口服，温开水送服，一次4粒，每粒0.48克，一日三次。

3.3观察疗程：各组均90天为一疗程。

3.4合并用药的规定：

3.4.1除规定用药外，试验观察期间不得使用下列药物：

①肾上腺皮质激素、中枢兴奋剂及各种影响记忆商的中、西医促认知药(如喜得镇、都可喜、脑复康、抗脑衰、阿尼西坦等)；

②胆碱脂酶抑制剂；

③N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)拮抗剂，如美金刚、金刚烷胺、氯胺酮和右美沙芬；

④抗精神病药；

⑤抗抑郁药；

3.4.2对其它合并疾病在不影响试验药物疗效判定的前提下，可以对症用药，对使用的试验药物以外的所有药物均必须记录在合并用药记录表中(包括药名、用量、使用次数和时间等)，以便总结时加以分析和报告。

3.4.3已达到稳定剂量至少一个月且在研究过程中可以维持不变的非选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRI)类抗抑郁药(仅限于西酞普兰、舍曲林、奎硫平)、非典型抗精神病药(仅限于利培酮、奎硫平、奥氮平)或镇静催眠药(仅限于甲基安定、舒乐安定、氯羟安定、左匹克隆)允许使用。

(四)疗效判定标准

参照国外的尼莫地平(nimodipine)疗效判定标准、和上海精神卫生研究所进行的安理申(donepezil)临床疗效判定标准及2002年中国医药科技出版社出版的《中药新药临床研究指导原则》疗效评定标准制订

(五)结果

5.1三组临床总体疗效比较：A组与B组比较有显著性差异(P＜0.05)，B组(本发明药物1组)较A组(首乌益智灵组)临床疗效显著提高，说明在其他药味及用量配比不变的情况下，用远志代替石菖蒲临床疗效显著提高；B组与C组比较有显著性差异(P＜0.05)，说明本发明药物优选的用量比例能显著提高临床疗效；A组与C组比较有显著性差异(P＜0.05)，说明本发明中的技术方案(原料药-远志代替石菖蒲和用量的选择)在整体上优于最接近的现有技术，能显著提高临床疗效。见表1：

表1三组临床总体疗效比较

注：经Ridit分析，三组总疗效比较有显著性差异，P＜0.05。

5.2三组证候积分比较：三组治疗后积分与治疗前相比均有显著性差异(P＜0.01)，说明三组药物均可改善证候积分；治疗后各组间比较，A组与B组比较有显著性差异(P＜0.05)，B组(本发明药物1组)较A组(首乌益智灵组)能明显改善证候积分，说明在其他药味及用量配比不变的情况下，用远志代替石菖蒲证候积分改善明显；B组与C组比较有显著性差异(P＜0.05)，说明本发明药物优选的用量比例能显著改善证候积分；A组与C组比较有显著性差异(P＜0.05)，说明本发明中的技术方案(原料药-远志代替石菖蒲和用量的优选)在整体上优于最接近的现有技术，能显著改善证候积分。见表2：

表2两组证候积分比较

注：经方差分析，三组治疗前积分比较无差异，P＞0.05。经配对t检验治疗后与治疗前比较，^**P＜0.01；经方差分析治疗后各组间两两比较P＜0.05。

5.3三组患者简易精神状态检查(MMSE)量表、长谷川痴呆量表(HDS)积分比较：三组治疗后MMSE、HDS积分与治疗前相比均有显著性差异(P＜0.01)，说明三组药物均可改善MMSE、HDS积分；治疗后各组间比较，A组与B组比较有显著性差异(P＜0.05)，B组(本发明药物1组)较A组(首乌益智灵组)能明显改善MMSE、HDS积分，说明在其他药味及用量配比不变的情况下，用远志代替石菖蒲MMSE、HDS积分改善明显；B组与C组比较有显著性差异(P＜0.05)，说明本发明药物优选的用量比例能显著改善MMSE、HDS积分；A组与C组比较有显著性差异(P＜0.05)，说明本发明中的技术方案(原料药-远志代替石菖蒲和用量的优选)在整体上优于最接近的现有技术，能显著改善MMSE、HDS积分。见表3：

表3三组患者治疗前后MMSE、HDS积分比较

注：经方差分析，三组治疗前积分比较无差异，P＞0.05。经配对t检验治疗后与治疗前比较，^**P＜0.01；经方差分析治疗后各组间两两比较P＜0.05。

5.4三组患者韦氏记忆量表(WMS)积分比较：三组治疗后WMS积分与治疗前相比均有显著性差异(P＜0.01)，说明三组药物均可改善WMS积分；治疗后各组间比较，A组与B组比较有显著性差异(P＜0.05)，B组(本发明药物1组)较A组(首乌益智灵组)能明显改善WMS积分，说明在其他药味及用量配比不变的情况下，用远志代替石菖蒲WMS积分改善明显；B组与C组比较有显著性差异(P＜0.05)，说明本发明药物优选的用量比例能显著改善WMS积分；A组与C组比较有显著性差异(P＜0.05)，说明本发明中的技术方案(原料药-远志代替石菖蒲和用量的优选)在整体上优于最接近的现有技术，能显著改善WMS积分。见表4：

表4三组患者治疗前后WMS积分比较

注：经方差分析，三组治疗前积分比较无差异，P＞0.05。经配对t检验治疗后与治疗前比较，^**P＜0.01；经方差分析治疗后各组间两两比较P＜0.05。

5.5三组患者日常生活能力量表积分比较：三组治疗后ADL积分与治疗前相比均有显著性差异(P＜0.01)，说明三组药物均可改善ADL积分；治疗后各组间比较，A组与B组比较有显著性差异(P＜0.05)，B组(本发明药物1组)较A组(首乌益智灵组)能明显改善ADL积分，说明在其他药味及用量配比不变的情况下，用远志代替石菖蒲ADL积分改善明显；B组与C组比较有显著性差异(P＜0.05)，说明本发明药物优选的用量比例能显著改善ADL积分；A组与C组比较有显著性差异(P＜0.05)，说明本发明中的技术方案(原料药-远志代替石菖蒲和用量的优选)在整体上优于最接近的现有技术，能显著改善ADL积分。见表5：

表5三组患者ADL积分比较

注：经方差分析，三组治疗前积分比较无差异，P＞0.05。经配对t检验治疗后与治疗前比较，^**P＜0.01；经方差分析治疗后各组间两两比较P＜0.05。

5.6安全性检测

三组治疗前后血常规、尿常规、大便常规、肝、肾功能等无显著差异(P＞0.05)。治疗组病人在服药期间未出现不良反应。提示首乌益智胶囊对血象、肝功、肾功等无不良影响。

(六)结论

总之，经过临床观察，B组(本发明药物组1--即在其他药及用量配比不变的情况下，用远志代替首乌益智灵中的石菖蒲)取得了很好的疗效，临床总有效率80％，优于A组；C组(本发明药物组2)临床总有效率83.3％，明显优于A组(首乌益智灵组)，其技术方案在整体上优于最接近的现有技术(首乌益智灵)，产生了意想不到的更好的疗效，其原料药(远志代替石菖蒲)和用量的选择都不是本领域技术人员的常规和一般性选择，而是有创造性的选择。临床效果显著，值得在临床推广使用。

药效学试验研究

(一)实验材料

1.试验药物：

首乌益智胶囊(即本发明药物，以下简称益智胶囊)：山东省中医研究院提供，批号：20070403。

口服，温开水送服，一次4粒，一日三次，一日共服12粒，含胶囊内容物5.76g(每粒0.48g)，相当于生药量32.4g。32.4g/60kg＝0.54g/kg。以下动物给药量均按生药量计算。小鼠用药低、中、高剂量用内容物配制，分别为生药量4.212g/kg、8.424g/kg、12.636g/kg；大鼠用药低、中、高剂量分别为生药量2.916g/kg、5.832g/kg、8.748g/kg。

脑复康片(吡拉西坦片)：天津金世制药有限公司，批号：20070530。

成人日服9片(0.2g/片)，即1.8g/d，1.8g/60kg＝0.03g/kg。小鼠用药0.702g/kg，大鼠用药0.486g/kg，人日用量的3倍动物等效量。

淀粉糊：0.095g/mL。小鼠用药剂量1.9g/kg，大鼠用药0.95g/kg，内容物含淀粉人日用量的动物等效量。

复方阿胶浆：山东东阿阿胶股份有限公司，批号：070469。

成人20mL/次，一日3次。小鼠用药23.4mL/kg，为人日用量的3倍小鼠等效量。

阿普唑仑片：0.4mg/片，成人0.8mg/d睡前服。批号：712040LB，生产日期：2007.12.22，有效期：2010.12.21。小鼠1次用量0.000lg/kg，为人日用量的小鼠等效量。

2.试剂：

氢溴酸东莨菪碱注射液：上海禾丰制药有限公司批号：0704013；无水乙醇：国营山东单县有机化工厂批号：931116；亚硝酸钠：济南市红旗第三化工厂批号：782081；戊巴比妥钠：北京化学试剂德国进分装批号：060222；盐酸肾上腺注射液天津金耀氨基酸有限公司批号：0610311；注射用环磷酰胺山西普德药业有限公司批号：20070803印度墨水上海长江日用粘合材料厂批号：881120；MDA试剂盒：批号：20071121；SOD试剂盒：批号：20071122；T-CHE测试盒：批号：20071120均由南京建成生物工程研究所生产

3.试验动物和饲料

3.1动物：昆明种小鼠，购于山东大学实验动物中心，SPF级动物，合格证号，SCXK(鲁)20030004号，编号：0004967。Wistar大鼠，购于山东大学实验动物中心，SPF级动物，合格证号，SCXK(鲁)20030004号，编号：0004968。

Wistar大鼠，购于山东中医药大学动物房，SPF级动物，合格证号，SCXK(鲁)20050015号，编号：0002341。

3.2饲料：实验动物标准饲料山东省实验动物中心康大公司生产许可证号：鲁饲准字364号。

4.仪器：

YLS-3T型跳台记录仪山东医学科学院设备供应维修站

B303基本型电子天平Mettler-Totado公司生产

YLS-1A多功能小鼠自主活动记录仪山东医学科学院设备供应维修站

UV-2100型紫外可见分光光度计上海合利仪器有限公司

FASCO-92型全自动血流变仪重庆大学维多生物工程所

(二)实验方法与结果

1.对小鼠学习记忆能力的影响：

1.1东莨菪碱致小鼠记忆获得障碍实验：

KM小鼠60只，按体重随机分为6组：正常组、模型组、脑复康组、首乌益智胶囊高、中、低剂量组，每组10只，雌雄各半。正常对照组、模型组灌胃淀粉糊，阳性药组灌胃脑复康，给药组灌胃不同浓度药物(首乌益智胶囊高生药12.636g/kg、中生药8.424g/kg、低生药4.212g/kg剂量)，0.2ml/10g体重。连续给药7天，于末次给药后20min，除正常对照组腹腔注射生理盐水外，其余各组分别腹腔注射氢溴酸东莨菪碱3mg/kg，注射后10min，进行学习训练。训练前，将小鼠置于跳台仪中，先适宜环境3min，轻放于平台上，当其跳下四肢接触铜栅时，即给予电刺激，小鼠受电击后的正常回避反应为跳回平台上，学习训练完后24h，进行正式跳台测试，记录小鼠第一次跳下受电击的时间(潜伏期)及其在10min内受电击的次数(错误次数)，以此作为记忆功能的评价指标[1]。结果见表6。

表6：首乌益智胶囊对东莨菪碱致小鼠记忆获得障碍模型的作用(n＝10，

)

与模型组比较：^*P＜0.05；^**P＜0.01；^***P＜0.001；与阳性药组比较△△P＜0.01

由表6看出，东莨菪碱造模后，模型组小鼠的跳台实验潜伏期明显短于正常组(P＜0.001)，10min触电次数明显多于正常组(P＜0.001)，说明记忆获得障碍模型造模成功。与模型组比较，脑复康组小鼠潜伏期明显延长(P＜0.05)，10min触电次数明显减少(P＜0.001)；首乌益智胶囊中、高剂量组潜伏期明显延长(P＜0.001，P＜0.001)；低、中、高剂量组10min触电次数明显减少(P＜0.05，P＜0.001，P＜0.001)；且与阳性药脑复康组比较，高剂量组小鼠的10min触电次数明显减少(P＜0.01)。表明首乌益智胶囊能抵制东莨菪碱造成的忆获得障碍，该作用优于脑复康。

1.2乙醇致小鼠记忆再现障碍实验：

KM小鼠60只，按体重随机分为6组：正常组、模型组、脑复康组、首乌益智胶囊高、中、低剂量组，每组10只，雌雄各半。正常对照组、模型组灌胃淀粉糊，阳性药组灌胃脑复康，给药组灌胃不同浓度药物(首乌益智胶囊高生药12.636g/kg、中生药8.424g/kg、低生药4.212g/kg剂量)，0.2ml/10g体重。连续给药7天，于末次给药后30min，进行学习训练。训练后24h，除正常对照组灌胃生理盐水外，其余各组分别灌胃30％乙醇10mL/kg。20min后，进行正式跳台测试，记录小鼠第一次跳下受电击的时间(潜伏期)及其在10min内受电击的次数(错误次数)，以此作为记忆功能的评价指标[2]。结果见表7。

表7：首乌益智胶囊对30％乙醇致小鼠记忆再现障碍模型的作用(n＝10，

)

与模型组比较：^*P＜0.05，^**P＜0.01，^***P＜0.001

由表7看出，30％乙醇造模后，模型组的小鼠跳台实验潜伏期明显短于正常组(P＜0.05)，10min触电次数明显多于正常组(P＜0.001)，小鼠记忆再现障碍模型复制成功。与模型组比较，脑复康组潜伏期明显延长(P＜0.05)，10min触电次数明显多于正常组(P＜0.001)；首乌益智胶囊低、中、高剂量组潜伏期明显延长(P＜0.05，P＜0.05，P＜0.05)，10min触电次数明显减少(P＜0.01，P＜0.01，P＜0.001)，表明首乌益智胶囊具有预防记忆再现障碍的作用。

1.3亚硝酸钠致小鼠记忆巩固障碍实验：

KM小鼠60只，按体重随机分为6组：正常组、模型组、脑复康组、首乌益智胶囊高、中、低剂量组，每组10只，雌雄各半。正常对照组、模型组灌胃淀粉糊，阳性药组灌胃脑复康，给药组灌胃不同浓度药物(首乌益智胶囊高生药12.636g/kg、中生药8.424g/kg、低生药4.212g/kg剂量)，0.2ml/10g体重。连续给药7天，于末次给药后30min，将小鼠尾部对着进入暗室的小口放入测定盒，接通电源，避暗学习训练5min。训练后，除正常对照组腹腔注射生理盐水外，其余各组分别注射亚硝酸钠120mg/kg，24h后，进行测试，记录每只小鼠进入暗室第一次受电击的时间(潜伏期)及其在5min内受电击的次数(错误次数)，以此作为记忆功能的评价指标[3]。结果见表8。

表8：首乌益智胶囊对亚硝酸钠致小鼠记忆巩固障碍模型的作用(n＝10，

)

与模型组比较：^*P＜0.05，^**P＜0.01，^***P＜0.001

由表8看出，亚硝酸钠造模后，模型组的小鼠避暗实验潜伏期明显短于正常组(P＜0.01)，5min触电次数(犯错误次数)明显多于正常组(P＜0.05)，造模成功。与模型组比较，脑复康组潜伏期明显延长(P＜0.05)，小鼠记忆巩固障碍模型复制成功。首乌益智胶囊高剂量组小鼠避暗潜伏期明显延长(P＜0.001)，5min触电次数明显减少(P＜0.01)。低、中剂量组避暗潜伏期有延长趋势，但未见显著性差异。与脑复康组比较，首乌益智胶囊高剂量组小鼠避暗潜伏期有延长趋势，犯错误次数有减少趋势。

2.对血管性痴呆大鼠模型的影响：

2.1分组：成年Wistar大鼠60只，体重250～300g，随机分为6组：正常组(假手术)、模型组、阳性药脑复康组、益智胶囊低、中、高剂量组，每组10只，雌雄各半。

2.2造模：用1％戊巴比妥钠按50mg/kg腹腔注射麻醉，背侧头顶切开，暴露两侧翼小孔，用直径0.5mm电烧针烧灼椎动脉，造成永久性关闭。24h后暴露双侧颈总动脉，可逆性关闭双侧颈总动脉3次，每次5min，中间间隔1h，阻断血管用无损伤血管夹，同时夹闭双侧颈总动脉。假手术组手术程序相同，但只暴露椎动脉不烧灼，颈总动脉只穿线不夹闭[4]。术后3天，刀口愈合，饮食正常后开始给药。

2.3方法：正常组、模型组灌胃淀粉糊1ml/100g，其余各组灌胃相应药物，连续灌胃16天，第15天将大鼠轻放于跳台箱内，使其适应3min，而后通电，大鼠受电击逐渐学会跳上平台回避。如此训练3min。第16天末次给药30min后，测试行为学改变，记录3min内各鼠第一次跳下平台的潜伏期及3min内各鼠跳下平台的错误次数，结果见表4。跳台实验结束后，断颈处死大鼠，取出脑组织，制成10％匀浆备用。测定MDA、SOD、TchE，按试剂盒说明书进行。结果见表9。

表9：首乌益智胶囊对血管性痴呆大鼠模型跳台实验的作用(n＝10，

)

与模型组比较：^**P＜0.01；与阳性药组比较△P＜0.05

从表9可以看出，造模后，模型组的大鼠跳台实验潜伏期明显短于正常组(P＜0.01)，3min内触电次数明显多于正常组(P＜0.01)，血管性痴呆大鼠模型复制成功。与模型组比较，脑复康组3min触电次数明显减少(P＜0.01)；首乌益智胶囊高剂量组潜伏期明显延长(P＜0.01)，中、高剂量3min触电次数明显减少(P＜0.01，P＜0.01)，且与阳性药组比较，高剂量组潜伏期明显延长(P＜0.05)；首乌益智胶囊低、中剂量组潜伏期有延长趋势，低剂量组3min触电次数有减少趋势，但未见显著性差异。

表10：首乌益智胶囊对血管性痴呆大鼠脑内物质的作用(n＝10，x±s)

与模型组比较：^*P＜0.05，^**P＜0.01，^***P＜0.001

从表10可以看出，造模后，模型组大鼠脑组织内SOD活力明显降低(P＜0.001)，MDA含量明显增加(P＜0.001)，乙酰胆碱酯酶TchE明显增加(P＜0.05)，血管性痴呆大鼠模型复制成功。与模型组比，首乌益智胶囊中、高剂量组均明显增强血管性痴呆大鼠脑内SOD活力(P＜0.01，P＜0.001)；首乌益智胶囊低、中、高剂量组均明显减少脑内MDA含量且有剂量趋势(P＜0.05，P＜0.001，P＜0.001)；首乌益智胶囊低、中、高剂量组对脑内TchE含量有降低的趋势。

3.对大鼠血流变的影响

取Wistar大鼠60只，雌雄各半，体重250g，大鼠随机分为6组：正常对照组、模型组、阳性药组、首乌益智胶囊高、中、低剂量组，给药各组按表中剂量灌胃给药，正常组及模型组灌胃等容量的淀粉糊，连续10天，于第9天，每只大鼠皮下注射0.1％的肾上腺素0.2ml，共注射2次，相隔4h，并在其间2h时进行1次冷刺激(对照组除外)，复制血瘀模型(5)，于第10天药后1小时乙醚麻醉，心脏取血，测定全血粘度和血小板聚集率，结果见表11。

表11：首乌益智胶囊对血瘀大鼠血粘度的影响(n＝10，

)

与模型组比较：^*P＜0.05，^**P＜0.01，^***P＜0.001

由表11看出，与正常对照组比，模型组大鼠的全血粘度高切(P＜0.01)、中切(P＜0.05)均明显增高，说明造模成功。与模型组比，首乌益智胶囊高剂量组能明显降低全血粘度高切(P＜0.01)、中切(P＜0.01)、低切(P＜0.05)。低、中剂量组有降低血瘀大鼠血粘度的趋势，但未见显著性差异。

4.对小鼠免疫功能的影响：

KM小鼠60只，按体重随机分为6组，每组10只，雌雄各半，除正常对照组外，其余各组小鼠腹腔注射环磷酰胺40mg/kg造模，每隔一天注射一次，共3次。正常对照组、模型组灌胃淀粉糊，阳性药组灌胃复方阿胶浆，给药组灌胃不同浓度药物(首乌益智胶囊高12.636g/kg、中8.424g/kg、低4.212g/kg剂量)。连续给药7天，于末次给药后30min，眼眶球后静脉丛取血计白细胞数。取血后，尾静脉注射20％印度墨水0.05ml/10g，注射后2min、20min用吸管(肝素湿润)分别从眼眶球后静脉丛取血20uL，溶于2mL0.1％Na2CO3溶液中，摇匀，置UV-2100型紫外分光光度计中，在波长600nm下比色，测定光密度(OD)。最后颈椎脱臼处死小鼠，分别称取肝、脾重量。计算廓清指数K和校正廓清指数α(6)。结果见表12。

表12：首乌益智胶囊对环磷酰胺小鼠免疫功能的影响(n＝10，

)

与模型组比较：^*P＜0.05，^**P＜0.01，^***P＜0.001

由表12看出，与正常对照组比，模型组大鼠的白细胞数(P＜0.001)、K值(P＜0.05)、α值(P＜0.01)均明显减小，说明免疫低下模型复制成功。与模型组比，首乌益智胶囊中剂量组能明显提高白细胞数、廓清指数K(P＜0.05，P＜0.05)；高剂量组能明显提高白细胞数、廓清指数K、校正廓清指数α(P＜0.05，P＜0.05，P＜0.05)，且提高廓清指数K、校正廓清指数α作用优于阳性药复方阿胶浆。

5.小鼠自主活动实验：

KM小鼠80只，按体重随机分为5组，每组16只，雌雄各半，正常对照组灌胃淀粉糊，阳性药组灌胃安定1mg/kg，给药组灌胃不同药物(首乌益智胶囊高12.636g/kg、中8.424g/kg、低4.212g/kg剂量)1次，于给药后30min，将小鼠放入自主活动记录仪内，前3min为适应期，后2min由仪器记录小鼠自主活动次数。结果见表13。

表13：首乌益智胶囊对小鼠自主活动的影响(n＝16，

)

与模型组比较：^*P＜0.05

由表13看出，与正常组比较，阳性药安定组的小鼠自主活动次数明显减少(P＜0.05)。首乌益智胶囊低、中、高剂量组小鼠2min自主活动次数未见明显改变。

小鼠急性毒性试验

根据国家食品药品监督管理局新药审评办法《有关中药部分的修订和补充规定》附件五“毒理研究的技术要求”，在一次给药无法测出LD50时，可作动物最大给药量测定。首乌益智胶囊对小鼠最大给药量测定结果为：灌服首乌益智胶囊溶液0.4ml/10g，一日2次，累计给药胶囊内容物量为30.4g/kg(相当生药量为171g/kg)，相当于临床成人拟用量的316.7倍，小鼠在该剂量下无明显异常，无一只死亡，表明本药物临床拟用剂量安全范围较大。

大鼠长期毒性试验

为临床用药的安全，利用大鼠对其长期毒性进行了试验。取健康Wistar大鼠160只，5-6周龄，体重75g左右，雌雄各半，实验前观察适应1周，随机分四组：空白对照组、首乌益智胶囊高、中、低剂量组。每组雌雄各20只，分笼饲养，每笼5只。首乌益智胶囊高、中、低剂量组分别按生药32.4g/kg、16.2g/kg、8.1g/kg剂量灌胃给药(相当于临床用量的60倍、30倍、15倍)，灌胃容量为1ml/100g体重，空白对照组给予等容量的水，各组连续灌胃给药6个月，每周称体重一次，根据体重及时调整给药量。并于试验第13周、26周、停药后8周末，每组随机分别取10只、20只、10只动物经心脏抽血检查血液常规、血液生化和凝血功能，并做组织学检查。实验结果表明：给大鼠32.4g/kg、16.2g/kg、8.1g/kg浓度的首乌益智胶囊，连续第13周、26周及停药8周，对大鼠一般状况、血常规主要指标、凝血功能均无明显影响。仅给药13周末的血生化指标TBIL、CK在高剂量组大鼠有明显增高，其它各项指标与空白对照组相似。解剖巨检：全部脏器均未见肉眼可见的病理变化；镜检：除个别大鼠的肾脏、肝脏、心肌有轻微炎症和变性，但与空白对照组大鼠病变程度相似外，对其他脏器均未见肉眼和镜下可见的病理变化。提示：本药长期应用未见明显毒副作用，临床应用其拟用量是安全的。

Claims (10)

1.一种治疗血管性痴呆的药物，其特征是，由以下重量份的原料药制成：何首乌300～700份，益智100～500份，黄芪150～550份，天麻100～400份，丹参150～550份，水蛭10～380份，地龙100～400份，远志20～400份，银杏叶提取物1～100份，川芎100～500份。

2.根据权利要求1所述的一种治疗血管性痴呆的药物，其特征是，由以下重量份的原料药制成：何首乌400～600份，益智200～400份，黄芪250～450份，天麻150～350份，丹参250～450份，水蛭80～280份，地龙150～350份，远志100～300份，银杏叶提取物10～30份，川芎200～400份。

3.根据权利要求1所述的一种治疗血管性痴呆的药物，其特征是，由以下重量份的原料药制成：何首乌450～550份，益智250～350份，黄芪300～400份，天麻200～300份，丹参300～400份，水蛭130～230份，地龙200～300份，远志150～250份，银杏叶提取物15～25份，川芎250～350份。

4.根据权利要求1所述的一种治疗血管性痴呆的药物，其特征是，由以下重量份的原料药制成：何首乌480～520份，益智280～320份，黄芪320～380份，天麻230～270份，丹参320～380份，水蛭160～200份，地龙230～270份，远志170～220份，银杏叶提取物18～22份，川芎280～320份。

5.根据权利要求1所述的一种治疗血管性痴呆的药物，其特征是，由以下重量份的原料药制成：何首乌500份，益智300份，黄芪350份，天麻250份，丹参350份，水蛭180份，地龙250份，远志200份，银杏叶提取物20份，川芎300份。

6.根据权利要求1～5之一所述的一种治疗血管性痴呆的药物，其特征是：所述何首乌为制何首乌。

7.根据权利要求1～5之一所述的一种治疗血管性痴呆的药物，其特征是：该药物制成胶囊剂、片剂、口服液、丸剂、颗粒剂、滴丸剂、糖浆剂、合剂、注射剂或粉针剂。

8.权利要求1～5之一所述的一种治疗血管性痴呆的药物的制备方法，其特征是，步骤如下：

(1)将何首乌、丹参和水蛭混合，加乙醇回流提取，滤过，药渣再加同浓度的乙醇回流提取两次，滤过，合并三次醇提液，减压浓缩至稠膏，备用；

(2)将川芎、益智混合，加水，蒸馏提取挥发油，β-CD包结，干燥，粉碎，得β-CD包结物，备用；滤出水液，备用；

(3)将步骤(1)和步骤(2)的药渣，合并于黄芪、远志、地龙、天麻中，加水煎煮两次，合并两次水煎液及步骤(2)中提取挥发油后的水液，减压浓缩，加入乙醇，搅拌，置0～4℃静止24h，减压浓缩至稠膏；

(4)将步骤(3)所制得的稠膏和步骤(1)所制得的稠膏合并，加入淀粉，混匀，干燥，粉碎，过筛，递增法加入银杏叶提取物和步骤(2)所制得的β-CD包结物，混匀，做成临床用制剂，即得。

9.权利要求8所述的治疗血管性痴呆的药物的制备方法，其特征是，步骤如下：

(1)将制何首乌、丹参和水蛭混合，加2～10倍量85％乙醇回流提取1～4h，滤过，药渣再加3～9倍量同浓度的乙醇回流提取两次，每次1～3小时，滤过，合并三次醇提液，减压浓缩至稠膏，备用；

(2)将川芎、益智混合，加2～10倍量的水，蒸馏提取挥发油，β-CD包结，干燥，粉碎，得β-CD包结物，备用；滤出水液，备用；

(3)将步骤(1)和步骤(2)的药渣，合并于黄芪、远志、地龙、天麻中，加2～10倍量的水，煎煮两次，每次1～3小时，合并两次水煎液及步骤(2)中提取挥发油后的水液，减压浓缩至相对密度为1.06～1.10的药液；然后加入乙醇，使药液含醇量为40％-80％，搅拌，置0～4℃静止24h，减压浓缩至稠膏；

(4)将步骤(3)所得到的稠膏和步骤(1)所得到的稠膏合并，加入淀粉，混匀，干燥，粉碎，过筛，递增法加入银杏叶提取物和步骤(2)所制得的β-CD包结物，混匀，装入胶囊或做成临床用其他剂型，分装，即得。

10.权利要求9所述的治疗血管性痴呆的药物的制备方法，其特征是，步骤如下：

(1)将制何首乌、丹参和水蛭混合，加8倍量85％乙醇回流提取3h，滤过，药渣再加6倍量同浓度的乙醇回流提取两次，每次2小时，滤过，合并三次醇提液，减压浓缩至密度为1.30～1.35的稠膏，备用；

(2)将川芎、益智混合，加8倍量的水，蒸馏提取挥发油，β-CD包结，干燥，粉碎，得β-CD包结物，备用；滤出水液，备用；

(3)将步骤(1)和步骤(2)的药渣，合并于黄芪、远志、地龙、天麻中，加8倍量的水，煎煮两次，每次2小时，合并两次水煎液及步骤(2)中提取挥发油后的水液，减压浓缩至相对密度1.06～1.10；然后加入乙醇，使药液含醇量为65％，搅拌，置0～4℃静止24h，减压浓缩至密度为1.30～1.35℃的稠膏；

(4)将步骤(3)所得到的稠膏和步骤(1)所得到的稠膏合并，加入淀粉，混匀，干燥，粉碎，过筛，递增法加入银杏叶提取物和步骤(2)所得到的β-CD包结物，混匀，装入胶囊或做成临床用其他剂型，分装，即得。