CN101940603B - 一种治疗癫痫病的药物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明“一种治疗癫痫病的药物”,属于中药制剂。为黑木耳菌丝母种的深层发酵产物,其特征在于:黑木耳菌丝母种深层发酵的培养基为石菖蒲的水提取物,所述石菖蒲的水提取物中石菖蒲原料药的质量比为10~20%,所述深层发酵指在常温环境中发酵72~96小时,接种量为:黑木耳菌丝母种液与水提取物质量比1∶10。该药物药味少属中药单方,而治疗效果好,并且副作用小,成本低。本发明还提供了本药物的制备工艺,降低了本药物的原料成本,且药效突出。治疗有效率达80%,治愈率为60%左右。
Description
技术领域
本发明涉及中药制剂领域,特别是涉及到一种治疗癫痫病的中药及其制备方法。
背景技术
癫痫系多种原因引起脑部神经元群阵发性异常放电所致的发作性运动、感觉、意识、精神、植物神经功能异常的一种疾病。西医根据癫痫病因不同分成特发性癫痫和继发性(症状性)癫痫两大类。前者指这类患者的脑病并无可以解释症状的结构变化或代谢异常,而与遗传因素有较密切的关系。症状性癫痫因于多种脑部病损和代谢障碍,如先天性疾病、产前期和围生期疾病、高热惊厥后遗、外伤、感染、中毒、颅内肿瘤、脑血管疾病、营养代谢性疾病等。癫痫的产生与神经元异常放电相关。人体休息时,一个大脑皮质锥体细胞的放电频率一般保持在1~10次/秒之间,而在癫痫病灶中,一组病态神经元的放电频率可高达每秒数百次。痫灶细胞群高频重复放电,使其轴突所直接联系的神经元产生较大的突触后电位,从而产生连续传播,直至抑制作用(包括痫性周围抑制性神经细胞的活动,胶质细胞对兴奋性物质的回收,以及病灶外抑制机构的参与)使发作终止。由于传播途径及范围不同而引起各种形式发作。痫性活动可能仅牵涉一个区域的大脑皮质而不再扩散,引起单纯部分性发作;兴奋在前中央回或后中央回通过放电后细胞外钾离子的增多而传导到邻近神经元,造成杰克逊(Jackson)癫痫;痫性活动常由大脑皮质通过下行投射纤维传播到丘脑和中脑网状结构,引起意识丧失,再由弥散性丘脑投射系统传布到整个大脑皮质,产生继发的全面性强直阵挛发作。
在癫痫发作的治疗中,抗癫痫药物有特殊重要的意义。抗癫痫药物可通过两种方式来消除或减轻癫痫发作,一是影响中枢神经元,以防止或减少他们的病理性过渡放电;其二是提高正常脑组织的兴奋阈,减弱病灶兴奋的扩散,防止癫痫复发。一般加巴喷丁、拉莫三嗪、卡马西平、丙戊酸钠等是目前广泛应用的一线抗癫痫药。但常用的西药治疗方法存在很多弊端和毒副作用,对人体各种脏器的影响很大。如常服西药已引起小脑综合症,行动异常嗜睡,影响工作和学习,精神呆滞,记忆力减退,或易怒、兴奋,活动过多,攻击行为,焦虑等精神异常。特别是西药对反藏有不同程度的损害,表现为恶心、呕吐、食欲下降、全身不适、无力、昏睡等。总之,西药治疗癫痫病毒副作用大,治标不治本,需终身服药。
发明内容
针对上述不足,本发明提供一种治疗癫痫病的中药制剂及其制备方法。该药物药味少属中药单方,而治疗效果好,并且副作用小,成本低。本发明还提供了本药物的制备工艺,降低了本药物的原料成本,且药效突出。
一种治疗癫痫病的药物,为黑木耳菌丝母种的深层发酵产物,其特征在于:黑木耳菌丝母种深层发酵的培养基为石菖蒲的水提取物,所述石菖蒲的水提取物中石菖蒲原料药的质量比为10~20%,所述深层发酵指在常温环境中发酵72~114小时,接种量为:黑木耳菌丝母种液与水提取物质量比以1∶10。
所述石菖蒲取根茎,即九节菖蒲。
步骤如下:
(1)预处理:取新鲜石菖蒲、捣碎并晒干;
(2)取预处理后石菖蒲,加饮用水煎煮提取两次,每次过滤取汁,后一次弃渣,合并两次所取的水提取物,所述水提取物中石菖蒲原料药的质量百分比为10~20%;
(3)将所述水提取物置于发酵罐中并灭活,待水提取物冷却至28~34℃时,向发酵罐中接种黑木耳菌丝母种液,深层发酵72~114小时,接种量为:黑木耳菌丝母种液与水提取物质量比以1∶10。
所述深层发酵72~114小时后,对发酵产物进行放罐、浓缩、焙干、过筛最后得粉状制品,炼蜜成丸。
所述灭活指常压下水蒸12小时。
所述黑木耳菌丝母种液为试管黑木耳菌丝母种在400ml液体培养基中发酵72~96小时得到的浑浊液;所述液体培养基以所述石菖蒲水提取物为溶剂,含有11~15%的辅助营养物质,所述辅助营养物质由下列重量份的组分组成:磷酸氢二钾5份、磷酸二氢钾5份、硫酸锌2份、天冬酸2份、甘露醇2份、白糖50份、酵母浸膏20份、营养琼脂培养基100份。
本发明选用药物石菖蒲,为石菖蒲Acorus tatarinowii Schott.的干燥根茎,含挥发油0.11%~0.42%,其中主要为β-细辛醚、α-细辛醚、石竹烯、α-葎草烯、石菖醚、细辛醚等,尚含有氨基酸、有机酸和糖类。石菖蒲水煎剂、挥发油、或细辛醚、β-细辛醚均有镇静作用和抗惊厥作用。石菖蒲味辛,微温。在《本草纲目》中记载:“开窍、豁痰、理气、活血、散风、去湿、治癫痫”;“治中恶卒死,客忏癫痫,下血崩中,安胎漏,痰阙昏迷,胸腹胀闷或疼痛”。
黑木耳,真菌类担子菌纲木耳科木耳属植物木耳Auricularia auricula(L.)Underw.,以子实体入药。夏秋采收,晒干。性味归经:甘,平。功能主治:补气血,润肺,止血。用于气虚血亏,四肢搐搦,肺虚咳嗽,咯血,吐血,衄血,崩漏,高血压病,便秘。含木耳多糖,包括L-岩藻糖,L-阿拉伯糖,D-木糖,D-甘露糖,D-葡萄糖,葡萄糖醛酸等组份。《神农本草经》载其有″益气不饥,轻身强志″之功,黑木耳又名桑耳,具有调气柔肝、养阴解毒之功,对于郁痫、食痫能柔肝和胃。对于癫痫一症,临床若见患者情绪抑郁,多有忧虑,表情淡漠,或呆滞,或胸脘痞满等症,乃为气郁之症象,并多为化风、化火、痰凝、瘀阻的病机之一,所以在痫病治疗上黑木耳的理气解郁对于防止气机逆乱,痰凝络阻等很有意义。本发明中所用的黑木耳菌丝母种,对菌种菌株没有特殊要求,市场上可买到的优质黑木耳菌丝母种即可。
本发明选用石菖蒲和黑木耳菌丝共同发酵,以石菖蒲的水提取物为黑木耳菌丝深层发酵唯一的营养物质,其中水提取物中的非药效成分如糖类可作为黑木耳菌丝的营养成分,同时起到了提取药用成分的作用,使药用成分更纯并溶于水中进入黑木耳菌丝内,成为细胞液的成分,既石菖蒲的药物有效成分转移到扩繁的黑木耳菌丝中,与黑木耳菌丝中的多糖物质协作,在治疗癫痫病患时,产生了协同作用。比现有报道中石菖蒲单方的治疗效果好(有效率和治愈率));现有技术中,未见单方黑木耳菌丝治疗癫痫的报道,也未见到黑木耳菌丝深层发酵液与石菖蒲互作治疗癫痫的报道,本发明与现有技术的区别之处在于,药味少,而药效显著,毒副作用小,即仅仅采用石菖蒲和黑木耳两味药,通过黑木耳菌丝深层发酵,将石菖蒲的药效成分转移到黑木耳菌丝细胞中与发酵产生的黑木耳多糖互作,并通过生物发酵过程降解石菖蒲对人体有毒的化学成分,本发明中的治疗实验例中,每一个药丸中的有效成分相当于25g石菖蒲原料药干品。据中国有毒植物图谱数据库收录记载,石菖蒲为有毒植物,有毒成分多样,有实验数据证明,其毒性为小鼠腹腔注射全草的氯仿提出物250-1000mg/kg,出现活动减少、肌张力增加、竖尾、眼睑下垂、呼吸深慢、流涎、共济失调、四肢外展、翻正反射消失、瘫痪死亡。换算成成年人体重的服用量,以平均60kg计,每次服用量不得超过15g鲜石菖蒲原料药,否则容易发生前述中毒现象加重患者症状,而本发明中,每颗药丸含26g干品石菖蒲原料药,在患者服用过程中,并未见到异常。
本发明中,石菖蒲原料药与其水提取物的质量百分比为10~20%,发酵时间优选为72小时至114小时。由于石菖蒲是唯一的营养成分,因此石菖蒲的原料药百分比与黑木耳菌丝的发酵时间共同决定了石菖蒲药用成分与黑木耳菌丝在多糖物质的比例,本发明采用上述比例,获得的发酵产物中两种原料药的协调作用最好,并能有效抵消石菖蒲对患者的副作用和毒性,有研究证明黑木耳菌丝深层发酵96小时左右,胞外多糖最高可达5.01g/L(肖彩霞等,2004年《黑木耳深层发酵工艺条件的研究》,生物技术)。
本发明中,优选使用九节菖蒲,本发明中的九节菖蒲指石菖蒲的根茎,在《名医别录》中记录,九节菖蒲在历代本草书籍中均指天南星科植物石菖蒲的根茎,所谓九节,系描述根茎之环节紧密。有别于阿尔泰银莲花的根茎(也叫九节菖蒲,为毛茛科植物阿尔泰银莲花的根茎)。
本发明还提供了上述药物的制备方法。
本发明中,用于接种到石菖蒲水提取溶液中的黑木耳菌丝母种液可以是通过常规方法制备的液体母种,本发明优选采用黑木耳菌丝母种液,菌龄在72~96个小时之间,这样保证进行深层发酵过程中能够维持较高的活力,另外该母种液所用的液体培养基的溶剂采用石菖蒲水提取液作为溶剂,加入11~15%的常规辅助营养成分,并对辅助营养成分的比例进行了优选,在制备得到的母种液中,这些辅助营养成分都转化到黑木耳菌丝中作为菌丝细胞构成物质。该母种液接种到石菖蒲水提取液中时,保证深层发酵产物的有效成分仅仅来源于黑木耳与石菖蒲两种成分。
具体实施方式
实施例1.治疗癫痫病药物的制备
步骤1.取新鲜九节菖蒲(石菖蒲的根茎),用药用铜刀刮去毛须、叶片,并在石臼中捣烂,晒干备用。
步骤2.制备石菖蒲水提取物。
取上述晒干石菖蒲25kg,置于130kg饮用水中,大火煮沸,并用小火再沸熬两小时,过滤取汁约得到65~80kg,留药渣,并再注入130kg饮用水,大火煮沸后小火再沸熬三小时,过滤取汁约得到65~80kg,弃渣,将两次药汁合并,总计重量约160kg,作为黑木耳菌丝母种发酵的中药底物溶液。
步骤3.制备黑木耳菌丝母种液
材料:
1.中药底物溶液;
2.营养琼脂培养基;(上海中药昆虫生物科技开发有限公司康乐培养基厂)
3.酵母浸膏;(北京双旋微生物培养基制品厂)
4.磷酸氢二钾;(广东汕头西陇化工厂)
5.硫酸锌(分析纯);(上海兴塔化工厂)
6.DL-天冬酸;(天津华北地区特种试剂开发中心)
7.甘露醇;(广州佳德化工有限公司)
8.磷酸二氢钾;(青岛市广汇化工厂)
9.白糖;(超市购买)
10.高锰酸钾;(天津恒兴化学制剂有限公司)
11.福尔马林;(山东济南试剂厂)
12.黑木耳菌丝母种试管;中国农业微生物菌种保藏管理中心(Agricultural Culture Collection ofChina英文缩写ACCC),保藏编号50057。
器具:
1.500ml玻璃瓶;
2.手提高压锅,电煤双用;(上海申仪三厂)
3.摇床:D4-900;(江苏太仑市实验设备厂)
4.超净工作台;
5.酒精灯;
6.勾、耙、针、刀;
7.火柴;
8.消毒棉花;
9.75%乙醇;10.橡皮筋。
方法:
1.取10kg步骤2得到的中药底物溶液内分别加入50g磷酸氢二钾、50g磷酸二氢钾、20g硫酸锌、20g天冬酸、20g甘露醇、500g白糖、200g酵母浸膏,搅拌并加温至100℃,放入1000g营养琼脂培养基,溶化后再注入石菖蒲水提取液制成15kg混浊液。
2.将混浊液注入500ml玻璃瓶内,每瓶400ml,一共得12瓶,置入手提高压锅内在0.012MP/cm2,30min,取出后冷却至28℃-34℃,放入超净工作台内。
3.工具和器具以及灭活后的培养基放入超净工作台内,用30g高锰酸钾置入盛有50%福尔马林30ml的器皿中,接种用的勾、耙、针、刀放入该器皿中灭菌30min。将试管内黑木耳菌丝母种,切成三份,每份接入400ml/瓶的混浊液内,静养120min~150min。
4.在摇床上振荡以20次/min,72~96小时即得到黑木耳菌丝母种菌丝液。
步骤4.深层发酵
将步骤2获得的水提取物置于题为《食用菌液体菌种培养罐的罐盖及培养罐》专利号为ZL03270560.3的发酵罐中作为发酵底物。并将发酵罐推入《饱和蒸气无压锅炉》专利号为ZL200320126611.8的的锅炉中常压水蒸汽灭活12小时。待罐内底物冷却至28~34℃时,用名称为“食用菌液体注射杆及包含该注射杆的注射器”专利号为ZL200320126960.X的接种注射器,将步骤3制备得到的黑木耳菌丝母种液注入到底物中;接种量:黑木耳菌丝母种液与底物液比例为1∶10,在26~28摄氏度室内温度下深层发酵72~144小时,放罐。
步骤3.制取药物:
放罐后得到的深层发酵产物,进行浓缩,焙干,过筛得粉状制品9.6kg,炼蜜为丸,每丸含10g粉状发酵产物,相当于每粒药丸中的石菖干原料药为26g。
使用方法:患者每日早晚各服一粒,小孩依体重递减至1/3或1/2,每疗程为60天,并定期做肾、肝功能检查。
实验例2临床统计
门诊接受癫痫患者共计10例。
使用方法:患者每日早晚各服一粒,小孩依体重递减至1/3或1/2,每疗程为60天,并定期做肾、肝功能检查。
通常总计服8疗程可愈(严重者服用12个疗程痊愈)。在服用本药品8个疗程之后痊愈率达到60%,有效率为80%,未见不适者。
其中的典型病例:
雷×霞:女,25岁,已婚,病史两年。家庭住址:湖北省黄冈市,黄州区望月堤,间断用药两年,已愈。
殷×:女,12岁,病史五年。家庭住址:江西省九江市原江西化工厂宿舍。九岁开始服药,连续两年半,已愈。
侯×:男,17岁,病史十六年半,中山市特殊学校学生。已服用两年,正在继续服用中,有效,未愈。
Claims (6)
1.一种治疗癫痫病的药物,为黑木耳菌丝母种的深层发酵产物,其特征在于:黑木耳菌丝母种深层发酵的培养基为石菖蒲的水提取物,所述石菖蒲的水提取物中石菖蒲原料药的质量比为10~20%,所述深层发酵指在常温环境中发酵72~114小时,接种量为:黑木耳菌丝母种液与水提取物质量比1∶10。
2.根据权利要求1所述的药物,所述石菖蒲取根茎,即九节菖蒲。
3.权利要求1或2所述药物的制备方法,步骤如下:
(1)预处理:取新鲜石菖蒲、捣碎并晒干;
(2)取预处理后石菖蒲,加饮用水煎煮提取两次,每次过滤取汁,后一次弃渣,合并两次所取的水提取物,所述水提取物中石菖蒲原料药的质量百分比为10~20%;
(3)将所述水提取物置于发酵罐中并灭活,待水提取物冷却至28~34℃时,向发酵罐中接种黑木耳菌丝母种液,深层发酵72~96小时,接种量为:黑木耳菌丝母种液与水提取物质量比1∶10。
4.根据权利要求3所述的制备方法,所述深层发酵72~96小时后,对发酵产物进行放罐、浓缩、焙干、过筛最后得粉状制品,炼蜜成丸。
5.根据权利要求3所述的制备方法,所述灭活指常压下水蒸12小时。
6.根据权利要求3所述的制备方法,所述黑木耳菌丝母种液为试管黑木耳菌丝母种在400ml液体培养基中发酵72~96小时得到的浑浊液,所述液体培养基以所述石菖蒲水提取物为溶剂,含有11~15%的辅助营养物质,所述辅助营养物质由下列重量份的组分组成:磷酸氢二钾5份、磷酸二氢钾5份、硫酸锌2份、天冬酸2份、甘露醇2份、白糖50份、酵母浸膏20份、营养琼脂培养基100份。
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