CN101936958B - 一种甲磺酸胺银杏内酯b的高效液相—蒸发光检测分析方法 - Google Patents
一种甲磺酸胺银杏内酯b的高效液相—蒸发光检测分析方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明是一种甲磺酸胺银杏内酯B的高效液相色谱-蒸发光分析检测方法分析方法，使用不同非极性的色谱柱，用一种或几种有机溶剂和1～100mmol/L缓冲盐溶液作为流动相，流动相流速为0.1-1.5ml/min，梯度洗脱，在蒸发光散射检测器检测(漂移管温度为30～45℃，载气压力为1.0～2.0bar)。对甲磺酸胺银杏内酯B原料药及其制剂进行鉴别、有关物质检查与含量测定，以控制其质量。
Description
技术领域
本发明涉及一种甲磺酸胺银杏内酯B的高效液相-蒸发光检测分析方法，对该药物的有关物质控制及药物质量标准的提高具有很好的作用，属于医药技术领域。
背景技术
银杏，降痰、清毒、杀虫之功能，可治疗“疮疥疽瘤、乳痈溃烂、牙齿虫龋、小儿腹泻、赤白带下、慢性淋浊、遗精遗尿等症”。入肺经、益脾气、定喘咳、缩小便。银杏是广泛应用于心血管等中药复方中，其有效成分为脂溶性的二萜化合物和水溶性的黄酮类化合物。
脂溶性银杏酮中主要有银杏黄酮、银杏内酯、白果内酯等成分。
甲磺酸胺银杏内酯B原料为银杏内酯水的衍生物，提高了银杏内酯水的水溶性，其拮抗血小板活化因子的作用提高10倍以上。高效液相-蒸发光检测分析法对甲磺酸胺银杏内酯B有关物质的控制也未见有任何报道。
蒸发光散射检测器(ELSD)的检测方法消除了常见于传统HPLC检测方法中的难点，它不同于紫外(UV)和荧光(FLD)检测器，ELSD的响应不依赖与样品的光学特性，任何挥发性低于流动相的样品均能被检测，不受其官能团的影响。ELSD的响应值与样品的质量成正比，因而能用于测定样品的纯度或者检测未知物。
蒸发光散射检测器是一种通用型的检测器，可检测挥发性低于流动相的任何样品，而不需要样品含有发色基团。蒸发光散射检测器灵敏度比示差折光检测器高，对温度变化不敏感，基线稳定，适合与梯度洗脱液相色谱联用。
高效液相梯度洗脱和ELSD的联用，可以检测出在紫外和荧光检测器中无法检测的杂质，反映甲磺酸胺银杏内酯B的真实杂质含量。梯度洗脱可以缩短试验周期，降低费用，节约能源，保护环境。
发明内容
本发明提供一种甲磺酸胺银杏内酯B的高效液相-蒸发光检测分析方法，该方法体现是用一种流动相梯度洗脱的高效液相条件能更有效、科学、便捷的控制甲磺酸胺银杏内酯水药物原料及制剂的有关物质，为本药物有关物质的质量标准的提高提供了一个有效的方法。
本发明的高效液相条件为：
分析柱：反相色谱柱，C18柱或C8柱。
流速：0.5ml/min-1.5ml/min
流动相：有机相为甲醇、乙腈或两者的混合溶液；水相为1～100mmol/L的甲酸、氨水、甲酸铵等中的一种或几种的水溶液，pH值为8.0～10.0。
梯度洗脱：在0分钟～40分钟内，有机相比例从20％变为80％。
检测器：ELSD
采用该液相色谱条件，能有效分析出甲磺酸胺银杏内酯B原料及制剂中的杂质，特别是用紫外或荧光检测器无法检测的杂质。
具体实施例
实施例1甲磺酸胺银杏内酯B的杂质检查高效液相-蒸发光检测分析与高效液相紫外(UV)分析比较。
1)取本品(090201批)适量，以流动相配成5mg/ml的溶液，分别以UV和ELSD检测器进行杂质检查。
分析柱：C18柱
流速：1.0ml/min
漂移管温度30℃，载气压力为1.0bar；
流动相条件：有机相是甲醇，水相是10mmol/L甲酸铵缓冲液(pH8.0)
梯度洗脱在0分钟～3分钟时，有机相比例为20％，在3至40分钟时，有机相比例为80％。
2)HPLC-UV等度检测条件如下：
取本品(090201批)适量，以流动相配成5mg/ml的溶液，分别以UV和ELSD检测器进行杂质检查。
分析柱：C18柱
流速：1.0ml/min
检测波长：210nm
流动相条件：甲醇∶10mmol/L甲酸铵溶液(pH8.0)＝40∶60
结果如下表，采用ELSD检测，能反映甲磺酸胺银杏内酯B中杂质的真实情况。
实施例2甲磺酸胺银杏内酯B原料杂质检查。
取甲磺酸胺银杏内酯B(090201批)、注射用甲磺酸胺银杏内酯B(090201批)适量，流动相配成5mg/ml的溶液，以ELSD检测器进行杂质检查。
分析柱：C18柱
流速：1.0ml/min
漂移管温度40℃，载气压力为1.5bar
流动相条件：有机相是甲醇，水相是10mmol/L甲酸溶液(以氨水调节pH值至9.0)；
梯度洗脱程序
实施例3甲磺酸胺银杏内酯B原料系统适用性试验。
取甲磺酸胺银杏内酯B(090201批)、注射用甲磺酸胺银杏内酯B(090201批)适量，加水配成5mg/ml的溶液，供测试。
分析柱：C8柱
流速：1.0ml/min
漂移管温度35℃，载气压力为1.8bar
高效液相流动相条件：有机相是乙腈；水相：取甲酸250μl，加水1000ml，氨水调pH至10.0。
梯度洗脱程序
甲磺酸胺银杏内酯B峰与相邻杂质峰分离良好，分离度均达到2.5以上。
实施例4甲磺酸胺银杏内酯B原料杂质检查。
取甲磺酸胺银杏内酯B(090201批)、注射用甲磺酸胺银杏内酯B(090201批)适量，流动相配成5mg/ml的溶液，以ELSD检测器进行杂质检查。
分析柱：C18柱
流速：1.5ml/min
漂移管温度40℃，载气压力为1.5bar
流动相条件：有机相是乙腈，水相是100mmol/L甲酸铵溶液(以氨水调节pH值至8.0)；
梯度洗脱程序
甲磺酸胺银杏内酯B峰与相邻杂质峰分离良好，分离度均达到3.0以上。
Claims (2)
1.一种甲磺酸氨银杏内酯B的高效液相-蒸发光分析检测方法，其特征是该方法采用蒸发光散射检测器，按反相色谱法进行梯度洗脱，采用反相色谱柱C18或者C8柱，HPLC具体设置如下：
(1)分析柱：C18柱；流速：1.0mL/min；流动相条件：有机相是甲醇，水相是10mmol/L的甲酸溶液，以氨水调节pH值至9.0；梯度洗脱顺序为：
或(2)分析柱：C8柱；流速：1.0mL/min；流动相条件：有机相是乙腈，水相：取甲酸250μl，加水1000ml，以氨水调节pH值至10.0；梯度洗脱顺序：
或(3)分析柱：C18柱；流速：1.5mL/min；流动相条件：有机相是乙腈，水相是100mmol/L的甲酸铵溶液，以氨水调节pH值至8.0；梯度洗脱顺序为：
2.根据权利要求1所述的高效液相分析方法，蒸发光散射检测器的漂移管温度为30-45℃，载气压力为1.0-2.0bar。
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| GR01 | Patent grant | ||
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