CN101912362B - 一种替尼泊苷静脉注射用脂肪乳预乳化浓缩液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于药物制剂领域，公开了一种替尼泊苷静脉注射用脂肪乳预乳化浓缩液及其制备方法，本发明的注射用脂肪乳预乳化浓缩液由替尼泊苷、油相、磷脂、注射用有机溶剂组成，各组分重量百分比如下：替尼泊苷0.01-10％，油相0％-20％，磷脂10-80％，注射用有机溶剂10-99％，制备方法为：将活性组分替尼泊苷先溶解在有机溶剂或油相或它们的混合液中，再加入处方中的其它组分，搅拌使混合均匀后即可形成透明澄清的预乳化浓缩液。

Description

一种替尼泊苷静脉注射用脂肪乳预乳化浓缩液及其制备方法

技术领域

本发明属于药物制剂领域，特别涉及一种替尼泊苷静脉注射用脂肪乳预乳化浓缩液的配方及其制备方法。

背景技术：

替尼泊苷(Teniposide，Vumon，VM-26)别名：威猛、维埃坶26、足叶毒硫花亚甲基葡萄糖苷、邦莱、鬼臼噻吩苷。是一种鬼臼毒素的半合成衍生物，属于植物来源的抗肿瘤药物。它是周期特异性细胞毒药物，抑制DNA拓扑异构酶Ⅱ，导致双链或单链破坏使细胞有丝分裂停止于S晚期或G₂前期，从而阻碍肿瘤细胞分裂，抑制肿瘤生长。替尼泊苷疗效显著，其生物活性是同类型药物依托泊苷的5～10倍，且临床资料表明替尼泊苷副作用少，毒性小，对肝、肾功能无明显影响。由于替尼泊苷具有较广谱的抗肿瘤活性，临床上通常与其它抗癌药物联合应用：主要用于恶性淋巴瘤、霍奇金氏病、急性淋巴细胞性白血病、胶质母细胞瘤、空管膜瘤、星形细胞瘤、膀胱癌、神经母细胞瘤和儿童的其它实体瘤。也用于治疗小细胞肺癌、卵巢癌、乳腺癌、多发性骨髓瘤、非小细胞肺癌等；更因其中性亲脂特性，能通过血脑屏障，目前已成为临床治疗脑瘤的首选化疗药物之一。

1992年替尼泊苷注射液被美国FDA正式批准用于小儿急性淋巴细胞白血病化疗，商品名为VUMON

我国在21世纪初仿制成功，其商品名为邦莱

。由于替尼泊苷本身几乎不溶于水，必须溶于有机溶媒溶解，而且要加入表面活性剂来增溶。市售制剂的处方组成为：每支安培(5ml)含替尼泊苷50mg，苯甲醇150mg，N，N-二甲基乙酰胺300mg，Cremophor EL2.5g，42.7％(v/v)的无水乙醇。临床单独使用时按体表面积50～00mg/m²给药，用5％的葡萄糖溶液或生理盐水稀释后静滴。因此，市售制剂在临床使用过程中存在的问题主要是处方中含有大量的聚氧乙烯蓖麻油(Cremophor EL)，使用后可引起体内组胺释放，而引起严重的过敏反应。为此，医生在医嘱前必须了解病人的过敏史，如是否对替尼泊苷或蓖麻油等过敏；在临床使用时，医务人员需密切观察病人的情况，必要时使用按组胺药物以减轻cremophor EL造成的严重过敏反应，从而导致临床上应用起来非常不方便，给病人带来很大的痛苦，顺应性差。

近年来，国内外药学工作者致力于研究减少或替代Cremophor EL使用的新型给药系统，以提高药物疗效，降低毒副作用。如用于全身给药的脂质体、环糊精包合物、磷脂复合物、含吐温的药物组合物、乳剂，供局部给药的微球制剂和凝胶制剂，供口服给药的微乳制剂等。但这些新的给药系统还是存在诸如表面活性剂Cremophor EL或吐温80的毒性、成本高、制备工艺复杂等问题。

我们曾申请过一项中国发明专利(200610167688.8)，同样是涉及供注射用的替尼泊苷微乳预浓缩液，处方中Cremophor EL用量大幅度下降，但仍含有一定量的表面活性剂类增溶剂Cremophor EL。中国发明专利(200710198956.7)涉及一种供注射用的替尼泊苷注射剂，处方中含有吐温80作为表面活性剂。吐温80是主要问题是引起溶血反应，所以一般仅有限地应用于注射剂中，显然，如果注射剂中不含吐温80将更有利于提高用药的顺应性。

目前国内外批准的可供注射用的表面活性剂有聚山梨酯(主要是聚山梨酯80，即Tween 80)、泊洛沙姆(主要是poloxamer 188)、聚氧乙烯蓖麻油类(主要是Cremophor EL)和磷脂。其中poloxamer 188和磷脂的乳化能力较强，而增溶能力较弱，主要用于注射用静脉脂肪乳中。Cremophor EL和Tween 80增溶和乳化能力都比较强，可将难溶药物增溶于非水介质中，临用时用注射用水等水性介质配制可形成水溶液或乳剂(当处方中有油时，如CN200710198956.7)。在这类即用型注射剂中，Cremophor EL或Tween 80的增溶能力和乳化能力都发挥了重要作用。但如前所述，Cremophor EL和Tween 80都有较强的副作用。

基于上述背景，我们进行了大量的试验研究，结果意外发现，在适当的条件下，不用表面活性剂Cremophor EL或吐温80，也可以制成供静脉注射的脂肪乳浓缩液新制剂，而且制备方法简单，组合物稳定，适合于工业化生产；处方中选用安全无毒的、静脉注射级的药用辅料磷脂、油相以及无水乙醇等制备成脂肪乳浓缩液，可消除Cremophor EL或吐温80引起的过敏反应或溶血作用等。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种不含有毒性表面活性剂的替尼泊苷静脉注射用脂肪乳预乳化浓缩液。与现有替尼泊苷注射剂相比，可降低溶血反应等副作用的发生，提高的患者的顺应性。

本发明的替尼泊苷静脉注射用脂肪乳预乳化浓缩液，该预乳化浓缩液含有替尼泊苷，注射用油，乳化剂，溶剂，各组分重量百分比如下：

替尼泊苷0.01-10％，

注射用油0％-20％，

磷脂10-80％，

溶剂10-99％，

优选的为：

替尼泊苷0.1-1.5％，

注射用油0.5％-10％，

磷脂20-50％，

溶剂40-80％。

特别优选的为：

替尼泊苷0.1-1.5％，

大豆油0.5％-10％，

卵磷脂20-50％，

含有N，N-二甲基乙酰胺的乙醇溶液40-80％。

本发明最优选的配方为本发明实施例中可行的配方。

本发明的替尼泊苷静脉注射用脂肪乳预乳化浓缩液中，所述的磷脂是天然磷脂、半合成磷脂、合成磷脂或它们的混合物。其中天然磷脂是蛋黄卵磷脂或大豆卵磷脂，或它们以任何比例组成的混合物；其中半合成和合成磷脂包括但不限于氢化豆磷脂(HSPC)、二油酰基卵磷脂(DOPC)、二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺(DMPE)、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺(DPPE)、二肉豆蔻酰磷脂酰丝氨酸(DMPS)、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE)二月桂酰卵磷脂(DLPC)、二肉豆蔻酰卵磷脂(DMPC)、二棕榈酰卵磷脂(DPPC)、二硬脂酰卵磷脂(DPPC)、二硬脂酰卵磷脂(DSPC)、1-肉豆蔻酰-2-棕榈酰卵磷脂(MPPC)、上述磷脂的聚乙二醇化衍生物(如聚乙二醇—二硬脂酰磷脂酰乙醇胺)或它们的混合物。

本发明的替尼泊苷静脉注射用脂肪乳预乳化浓缩液，其中所述油相包括长链中链脂肪酸，长链、中链脂肪酸甘油酯，长链脂肪醇及上述几种的混合物之中，包括它们的饱和、不饱和、直链、含支链形式。具体可选自大豆油、玉米油、蓖麻油、橄榄油、花生油、棉籽油、单硬脂酸甘油酯、单油酸甘油酯、芝麻油、红花油等中的一种或多种的混合物。优选的为大豆油。

本发明中所述注射用非水溶剂为N，N-二甲基乙酰胺和其它注射用有机溶剂的混合溶剂，其中N，N-二甲基乙酰胺占全部处方重量百分比为0.5％-10％；其它注射用有机溶剂可选用无水乙醇、苯甲醇，甘油、丙二醇、聚乙二醇中的一种或多种的组合，其中的聚乙二醇包括不同分子量的聚乙二醇或它们的混合物，分子量范围为200～2000。优选的为聚乙二醇200-400。

本发明提供的上述替尼泊苷静脉注射用脂肪乳预乳化浓缩液的制备方法是：先将替尼泊苷完全溶解在有机溶剂或油相或它们的混合液中，再加入处方中的其它组分，搅拌使混合均匀后即可形成透明澄清的预乳化浓缩液，过滤，灌装成一定规格的预乳化浓缩液。

本发明的替尼泊苷静脉注射用脂肪乳预乳化浓缩液，临床使用时，将其注入到5％的葡萄糖溶液或生理盐水中，适当振摇后，即可得到均一的脂肪乳剂，供静脉注射或静脉滴注方式给药。

本发明所述替尼泊苷静脉注射用脂肪乳预乳化浓缩液，水化后的脂肪乳剂的平均粒径大小在10-10000nm范围。

为考察本发明的替尼泊苷预乳化浓缩液的特质，进行了以下一些考察：

制剂含量测定：

采用高效液相色谱法考察了多组替尼泊苷预乳化浓缩液中替尼泊苷的含量，结果表明：预乳化浓缩液中的替尼泊苷的含量为标示量的95％-105％，表明本发明制剂的制备方法具有良好的同一性和工业实用性。

预乳化浓缩液乳化后稳定性考察：

预乳化浓缩液乳化后，进行了室温下8小时稳定性研究。采用高效液相色谱法测定了脂肪乳中替尼泊苷的含量；通过肉眼和显微镜观察药物析出情况；通过马尔文粒度仪测定了脂肪乳粒径的变化。结果表明：乳化后8小时，脂肪乳中无药物结晶析出，脂肪乳中的替尼泊苷的含量为标示量的95％-105％，表明本发明的预乳化浓缩液乳化后稳定性良好，适合临床使用。

本发明的预乳化浓缩液中，还可以根据需要在本处方中进一步加入其它医药学上可接受的辅料或对各组分的比例进行微小改变，如助乳化剂、抗氧剂、稳定剂、pH值调节剂等。但是，这些改进和变化对本领域技术人员是显而易见的，且与常规使用量基本上没有区别，因此，这些改进并没有脱离本发明的精神，也落在本发明的说明书和权利要求书的保护范围内。

如前所述的其它辅料中，稳定剂包括胆固醇、聚乙二醇类及其衍生物，甘油、木糖醇、山梨醇、甘露醇、丙二醇、丙三醇、尿素、水杨酸钠、磷脂酸、油酸、油酸钠、胆酸、胆酸钠、羟丙甲纤维素、羧甲基纤维素钠、淀粉及其衍生物、泊洛沙姆、明胶及其衍生物、海藻酸及其钠盐、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基-β-环糊精中的一种或几种的组合；pH调节剂是马来酸、盐酸、酒石酸、氢氧化钠、醋酸、醋酸盐、磷酸、磷酸盐、柠檬酸、柠檬酸盐、乙醇胺、三乙醇胺、二乙醇胺中的一种或几种，调节脂肪乳浓缩液的pH范围是4～8；助乳化剂包括各种小分子醇类及聚甘油的衍生物中的一种或它们的混合物；抗氧化剂为α-生育酚、α-生育酸琥珀酸酯、抗坏血酸棕榈酸酯、叔丁基对羟基茴香醚(BHA)、二丁基苯酚(BHT)或没食子酸丙酯中的一种或多种。

需要说明的是，替尼泊苷的溶解度非常低，一般情况下，不用Cremophor EL和Tween 80是很难制备其即用型注射剂的，因为如果表面活性剂的增溶能力不强，当用注射用水等水性介质配制时，替尼泊苷很容易折出结晶。本发明通过大量的研究发现，只有当替尼泊苷、油相、磷脂和注射用非水溶剂有一个非常适当的比例时，所制备的注射剂用水性介质配制时可在8小时内保持稳定，不出现药物结晶，符合临床用药的需要。出现这种结果的原因，可能是由于替尼泊苷在非水溶剂和油相中均有一定的溶解度，当比例适当时，溶解度可达最大，而磷脂有一定的粘度，还有过饱和的稳定作用，遇水乳化时可将药物保持在油相，以上综合原因使药物在短时间内不折出结晶。

本发明中各种组份的用量是非常重要的。本发明中所用到的各组份油相、注射用有机溶剂或磷脂类型发生改变时，其用量可能会发生一定的变化，但仍在本发明中的用量范围之内；但当各组份其用量超过本发明中的用量范围之外时，会出现诸如粘度太大或水化8小时内析出结晶等现象，不利于临床使用。只有在本发明的用量范围内，才可能制备成稳定性符合要求的替尼泊苷注射剂。处方用量的筛选结果见实施例。

同样，本发明中的各种组份的种类也是非常重要的。其中磷脂和非水溶剂的作用是必不可少的，其中非水溶剂需要同时用到N，N-二甲基乙酰胺和无水乙醇。相对而言，在体外稳定性方面，油相的作用要小一些，不用时也可制备成注射剂，也可以8小时内保持稳定。不加油相时遇水后可形成脂质体，而脂质体和乳剂的体内过程有所不同，各有特点，因此本发明将加油相与不加油相都考虑在保护的范围内。

本发明的替尼泊苷预乳化浓缩液具有以下优点：

1、与市售制剂相比较，以无毒副作用的磷脂、大豆油等代替了原有制剂中的聚氧乙烯蓖麻油(Cremophor EL)，大大改善了替尼泊苷现有制剂的严重过敏性的缺陷。

2、本发明中，替尼泊苷溶解在无水溶剂中，能防止替尼泊苷在水相介质中的氧化、水解等，增加了制剂储存稳定性，延长有效期。同时，小体积的浓缩液，便于运输和储存。

3、该预乳化浓缩液制备工艺简单，便于工业化生产。

具体实施方式

以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为本发明进行的任何限制。

实施例1、替尼泊苷注射剂的处方筛选

按上述方法配制溶液，8小时后观察结果。替尼泊苷的处方组成与筛选结果见表1。

表1.替尼泊苷的处方组成与筛选结果

实施例2

处方：

替尼泊苷             0.05g

卵磷脂               3.0g

大豆油               0.2g

N，N-二甲基乙酰胺    0.3g

无水乙醇             5g

制备方法：

将替尼泊苷0.05g加入到0.3g的N，N-二甲基乙酰胺中，待完全溶解后，再加入卵磷脂3g、大豆油0.2g和无水乙醇5g，搅拌使它们混合均匀后形成透明澄清的预乳化浓缩液。

实施例3、

处方：

替尼泊苷             0.05g

卵磷脂               3.0g

大豆油               0.2g

N，N-二甲基乙酰胺    0.3g

无水乙醇             5g

制备方法：

将替尼泊苷0.05g加入到0.3g的N，N-二甲基乙酰胺和0.2g的大豆油的混合溶液中，待完全溶解后，再加入卵磷脂3g和无水乙醇5g，搅拌使它们混合均匀后形成透明澄清的预乳化浓缩液。

实施例4、

处方：

替尼泊苷             0.05g

卵磷脂               3.0g

大豆油               0.2g

N，N-二甲基乙酰胺    0.3g

无水乙醇             5g

制备方法：

将替尼泊苷0.05g加入到0.3g的N，N-二甲基乙酰胺和2g的无水乙醇中，待完全溶解后，再加入卵磷脂3g、大豆油0.2g和无水乙醇3g，搅拌使它们混合均匀后形成透明澄清的预乳化浓缩液。

实施例5、

处方：

替尼泊苷             0.05g

卵磷脂               6.0g

大豆油               0.2g

N，N-二甲基乙酰胺    0.3g

无水乙醇             5g

制备方法：

将替尼泊苷0.05g加入到0.3g的N，N-二甲基乙酰胺中，待完全溶解后，再加入卵磷脂6g、大豆油0.2g和无水乙醇5g，搅拌使它们混合均匀后形成透明澄清的预乳化浓缩液。

实施例6、

处方：

替尼泊苷             0.05g

卵磷脂               3.0g

大豆油               1g

N，N-二甲基乙酰胺    0.3g

无水乙醇             5g

制备方法：

将替尼泊苷0.05g加入到0.3g的N，N-二甲基乙酰胺中，待完全溶解后，再加入卵磷脂3g、大豆油1g和无水乙醇5g，搅拌使它们混合均匀后形成透明澄清的预乳化浓缩液。

临床使用时，将上述浓缩液注入到500ml的5％的葡萄糖溶液中得到可供静脉注射用脂肪乳。

实施例7、

处方：

替尼泊苷             0.05g

卵磷脂               3.0g

大豆油               0.2g

N，N-二甲基乙酰胺    0.3g

无水乙醇             10g

制备方法：

将替尼泊苷0.05g加入到0.3g的N，N-二甲基乙酰胺中，待完全溶解后，再加入卵磷脂3g、大豆油0.2g和无水乙醇10g，搅拌使它们混合均匀后形成透明澄清的预乳化浓缩液。

实施例8、

处方：

替尼泊苷                          0.05g

卵磷脂                            3.0g

聚乙二醇—二硬脂酰磷脂酰乙醇胺    0.4g

大豆油                            0.2g

N，N-二甲基乙酰胺                 0.3g

无水乙醇                          5g

制备方法：

将替尼泊苷0.05g加入到0.3g的N，N-二甲基乙酰胺中，待完全溶解后，再加入卵磷脂3g、聚乙二醇—二硬脂酰磷脂酰乙醇胺0.4g、大豆油0.2g和无水乙醇5g，搅拌使它们混合均匀后形成透明澄清的预乳化浓缩液。

实施例9、

处方：

替尼泊苷             0.05g

卵磷脂               3.0g

玉米油               0.2g

N，N-二甲基乙酰胺    0.3g

无水乙醇             5g

制备方法：

将替尼泊苷0.05g加入到0.3g的N，N-二甲基乙酰胺中，待完全溶解后，再加入卵磷脂3g、玉米油0.2g和无水乙醇5g，搅拌使它们混合均匀后形成透明澄清的预乳化浓缩液。

实施例10、

处方：

替尼泊苷             0.05g

卵磷脂               3.0g

大豆油               0.2g

N，N-二甲基乙酰胺    0.3g

甘油                 5g

无水乙醇             2.5g

制备方法：

将替尼泊苷0.05g加入到0.3g的N，N-二甲基乙酰胺中，待完全溶解后，再加入卵磷脂3g、大豆油0.2g、无水乙醇2.5g和甘油5g，搅拌使它们混合均匀后形成透明澄清的预乳化浓缩液。

实施例11、

处方：

替尼泊苷             0.05g

卵磷脂               3.0g

大豆油               0.2g

N，N-二甲基乙酰胺    0.3g

聚乙二醇400          5g

无水乙醇             2.5g

制备方法：

将替尼泊苷0.05g加入到0.3g的N，N-二甲基乙酰胺中，待完全溶解后，再加入卵磷脂3g、大豆油0.2g、无水乙醇2.5g和聚乙二醇4005g，搅拌使它们混合均匀后形成透明澄清的预乳化浓缩液。

实施例12、

处方：

替尼泊苷             0.05g

氢化大豆卵磷脂       3.0g

大豆油               0.2g

N，N-二甲基乙酰胺    0.3g

无水乙醇             5g

马来酸               适量

制备方法：

将替尼泊苷0.05g加入到0.3g的N，N-二甲基乙酰胺中，待完全溶解后，再加入氢化大豆卵磷脂3g、大豆油0.2g和无水乙醇5g，搅拌使它们混合均匀后，用马来酸调pH值4～10，即得预乳化浓缩液。

本发明的预乳化浓缩液，临床使用时，将其注入到不同体积的5％的葡萄糖溶液或生理盐水中，适当振摇后，供静脉注射或静脉滴注方式给药。

实施例13、

处方：

替尼泊苷             0.05g

卵磷脂               3.0g

N，N-二甲基乙酰胺    0.3g

无水乙醇             5g

制备方法：将替尼泊苷0.05g加入到0.3g的N，N-二甲基乙酰胺中，待完全溶解后，再加入卵磷脂3g和无水乙醇5g，搅拌使它们混合均匀后形成透明澄清的预乳化浓缩液。

Claims (8)

1.一种替尼泊苷静脉注射用脂肪乳预乳化浓缩液，其特征在于，该预乳化浓缩液含有替尼泊苷，注射用油，磷脂，溶剂，各组分重量百分比如下：

替尼泊苷0.1-1.5％，

注射用油0.5％-10％，

磷脂10-50％，

溶剂40-80％，

其中磷脂选自：天然磷脂、半合成磷脂、合成磷脂或它们的混合物，其中注射用油选自：大豆油、玉米油、蓖麻油、橄榄油、花生油、棉籽油、芝麻油、红花油、单硬脂酸甘油酯或单油酸甘油酯中一种或多种的混合物，其中溶剂为N，N-二甲基乙酰胺和无水乙醇的混合溶剂，其中N，N-二甲基乙酰胺在混合溶剂中的重量百分比为0.5％-10％。

2.如权利要求1所述的替尼泊苷静脉注射用脂肪乳预乳化浓缩液，其特征是，其中所述的天然磷脂是蛋黄卵磷脂或大豆卵磷脂，或它们以任何比例组成的混合物。

3.如权利要求1所述的替尼泊苷静脉注射用脂肪乳预乳化浓缩液，其特征是，其中所述的半合成磷脂和合成磷脂选自：氢化豆磷脂(HSPC)、二油酰基卵磷脂(DOPC)、二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺(DMPE)、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺(DPPE)、二肉豆蔻酰磷脂酰丝氨酸(DMPS)、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE)、二月桂酰卵磷脂(DLPC)、二肉豆蔻酰卵磷脂(DMPC)、二棕榈酰卵磷脂(DPPC)、二硬脂酰卵磷脂(DPPC)、二硬脂酰卵磷脂(DSPC)、1-肉豆蔻酰-2-棕榈酰卵磷脂(MPPC)、上述磷脂的聚乙二醇化衍生物或它们的混合物。

4.如权利要求1所述的替尼泊苷静脉注射用脂肪乳预乳化浓缩液，其特征是，其中N，N-二甲基乙酰胺在混合溶剂中的重量百分比为1％-5％。

5.如权利要求1所述的替尼泊苷静脉注射用脂肪乳预乳化浓缩液，其特征是，根据需要进一步包括医药学上可接受的辅料：辅助乳化剂、稳定剂、pH值调节剂和抗氧剂。

6.如权利要求1所述的替尼泊苷静脉注射用脂肪乳预乳化浓缩液，其特征是使 用时可注入浓度为5％的葡萄糖溶液或生理盐水中，自动形成均一的脂肪乳剂。

7.如权利要求6所述的替尼泊苷静脉注射用脂肪乳预乳化浓缩液，其中脂肪乳剂的平均粒径大小在10-10000nm范围。

8.如权利要求1所述的注射用脂肪乳预乳化浓缩液的制备方法，其特征是，先将替尼泊苷完全溶解在N，N-二甲基乙酰胺或油相或它们的混合液中，再加入浓缩液中的其它组分，搅拌使混合均匀后即可形成透明澄清的预乳化浓缩液。