CN1698836A - 雪上一枝蒿总生物碱乳剂组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种含雪上一枝蒿总生物碱的稳定的水包油乳剂组合物，其包含：雪上一枝蒿总生物碱、油性载体、水和表面活性剂；其中雪上一枝蒿总生物碱是以有效剂量被均匀分散到所述的油性载体中，雪上一枝蒿总生物碱和油性载体在水中形成稳定的分散相；其中分散相的平均粒径≤500nm。

Description

雪上一枝蒿总生物碱乳剂组合物

技术领域

本发明涉及一种含雪上一枝蒿总生物碱的稳定的水包油乳剂组合物，其包含：雪上一枝蒿总生物碱、油性载体、水和表面活性剂；其中所述雪上一枝蒿总生物碱以有效剂量被分散到所述的油性载体中，雪上一枝蒿总生物碱和油性载体在水中形成稳定的分散相；其中分散相的平均粒径≤500nm。

背景技术

雪上一枝蒿为毛茛科乌头属植物短柄乌头的块根(Aconitum brachypodum Diels)。主产于云南省昆明市东川，生长于海拔2800米以上的高寒山区，早在明清年代民间就广泛用于治疗各种疾病，主用于跌打损伤、风湿疼痛。1971年经审定后，雪上一枝蒿收载入《中华人民共和国药典》(1977年版)，药效和临床研究证明本品能抑制炎症、降低毛细血管通透性、减少炎性渗出和水肿。对风湿痛、跌打损伤、各类关节炎、急慢性劳损等炎症肿痛有镇痛抗炎消肿等作用，对肝肾未见明显毒性。

目前市售的有雪上一枝蒿总生物碱水针剂，尚未见有关乳剂的报道。由于雪上一枝蒿总生物碱水针剂临床使用起来刺激性很大，是一种既不溶于油也不溶于水的物质，用普通的乳剂制备方法很难制成稳定的O/W体系。本发明中采用了一种特殊的方法，使雪上一枝蒿总生物碱逐步分散在油性载体中，再制成了稳定的水包油乳剂，加速稳定性实验表明，该制剂非常稳定。

由于乳剂为稳定的O/W体系，与皮肤细胞特有的亲和性，基本解决了雪上一枝蒿总生物碱药物的刺激性，基于该类制剂特有的靶向作用，有望在临床上得到很好的应用。

发明内容

本发明的雪上一枝蒿总生物碱乳剂，包含纳米微乳剂型和亚纳米乳剂型。本发明乳剂由药物雪上一枝蒿总生物碱、油性载体、水和表面活性剂组成，其中总生物碱以雪上一枝蒿甲素计，纯度大于70％；油性载体是指甘油三酯、脂肪酸甘油酯、脂肪酸/醇、脂肪酸乙酯、甾醇及其衍生物、聚氧乙烯脂肪酸酯中的一种或几种；表面活性剂是指磷脂、吐温、司盘、泊洛沙姆(poloxamer)、聚乙二醇及其衍生物中的一种或几种；其中甘油三酯，包含大豆油、茶油、玉米油、红花油、月见草油、橄榄油、C5-C14的甘油三酯中的一种或几种；磷脂，包含动物磷脂如蛋黄卵磷脂、植物磷脂比如大豆磷脂、合成磷脂如聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG2000-DSPE)以及改性磷脂如羟化磷脂中的一种或几种；脂肪酸/醇、脂肪酸甘油酯、脂肪酸乙酯，其中脂肪酸的碳链为C5-C24，比如油酸、亚油酸、硬脂酸单甘油酯、油酸乙酯、亚油酸乙酯中的一种或几种；聚乙二醇及其衍生物系列，如聚乙二醇200、400、600、1000、1500、2000、4000、6000、solutolHS15以及聚乙二醇琥珀酸酯中的一种或几种；甾醇及其衍生物，其中包含胆固醇、胆固醇油酸酯、胆固醇硬脂酸酯、胆固醇壬酸酯、胆固醇苯甲酸酯中的一种或几种。

本发明的雪上一枝蒿总生物碱是通过溶解在雪上一枝蒿总生物碱共溶剂中而被惨入油中的，雪上一枝蒿总生物碱和油性载体在水中形成稳定的分散相；其中分散相的平均粒径≤1um；在药剂学上称为钠米乳和亚钠米乳。其中共溶剂选自乙醇、甲醇、乙醇、甲醇、苯甲酸卞酯、苯甲酸甲酯、苯甲酸乙酯、二甲基亚砜(DMSO)、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺中的一种或几种。

本发明的雪上一枝蒿总生物碱亚纳米乳制剂，其制备方法如下：

a)将雪上一枝蒿总生物碱溶于乙醇、甲醇、苯甲酸卞酯、苯甲酸甲酯、苯甲酸乙酯、二甲基亚砜(DMSO)、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺中的一种或几种共溶剂中，加入油相载体，于50～90℃高速搅拌制成油相，除去挥发性溶剂，其余组分溶于适量水中，于50～90℃高速搅拌制成水相，油水两相混合于50～90℃高速搅拌制成初乳剂，调节PH值4.0～9.0。

b)取上述(a)中初乳剂，注射用水定容至处方量，转移至高压乳匀机中，反复乳化。至乳滴平均粒径≤1微米。

C)取上述(b)的乳剂过滤后，充氮气灌装，灭菌既得。

本发明的雪上一枝蒿总生物碱注射用纳米乳制剂，其制备方法如下：

a)将雪上一枝蒿总生物碱用适量乙醇溶解，加入适量吐温80、丙二醇、solutolHS15、聚氧乙烯蓖麻油、甘油三酯的一种或几种的组合物中，于20～60℃充分搅拌，再加入处方量的水，充分搅拌，调节PH值4.0～9.0。

b)取上述(a)的微乳制剂用活性炭处理除去热原，再除菌过滤后，充氮气灌装，灭菌既得。

口服或外用乳剂中还可以含芳香剂和防腐剂，其中芳香剂包括橘子香精、香蕉香精、草莓香精、奶油香精中的一种或几种，防腐剂包括尼泊金酯类、苯甲酸类中的一种或几种。

具体实施例

实施例一(亚纳米乳剂型)

组方1：雪上一枝蒿总生物碱0.005％～0.5％、甾醇及其衍生物0.01％～1.0％、生育酚0.01％～1.0％、磷脂1.0％～6.0％、2％-6％油酸乙酯、植物油5％～20％、甘油1.0％～6.0％、油酸1.0％～6.0％，注射用水添至100ml。

称取雪上一枝蒿总生物碱20-200mg溶于0-5ml苯甲酸卞酯和0-2ml乙醇中，加入生育酚0.1-1g、胆固醇油酸酯0.1-1.0g，充分搅拌，加入2-6g油酸乙酯、15g精制植物油或中链油或两者的混合物和0.1-3g油酸，于50℃～80℃高速搅拌使混合均匀，除去乙醇制成油相；称取蛋黄卵磷脂2.0g、甘油3g，加入处方量的水于50℃～80℃高速搅拌使充分分散，制成水相。油水两相混合，于50℃～80℃高速搅拌制成初乳剂。取初乳剂，注射用水定容至处方量，调节PH值为5.0～9.0，转移至高压乳匀机中，反复乳化至乳滴平均粒径≤1微米，除菌过滤，充氮气灌装，灭菌既得。

组方2：雪上一枝蒿总生物碱0.005％～0.5％、甾醇及其衍生物0.01％～1.0％、生育酚0.01％～1.0％、磷脂1.0％～6.0％、甘油三酯5％～20％、甘油1.0％～6.0％、油酸1.0％～6.0％，泊洛沙姆0.05％～1.0％、注射用水添至100ml。

称取雪上一枝蒿总生物碱20-200mg溶于0-5ml苯甲酸卞酯和0-2ml乙醇中，加入生育酚0.1-1g、胆固醇油酸酯0.1-1.0g，泊洛沙姆188 0.1-1.0g充分搅拌，加入20g中链甘油三酯和大豆油的混合物0.1-3g油酸，于50℃～90℃高速搅拌使混合均匀，除去乙醇制成油相；称取蛋黄卵磷脂2.2g、甘油3g，加入处方量的水于50℃～80℃高速搅拌使充分分散，制成水相。油水两相混合，于50℃～80℃高速搅拌制成初乳剂。取初乳剂，注射用水定容至处方量，调节PH值为5.0～9.0，转移至高压乳匀机中，反复乳化至乳滴平均粒径≤1微米，除菌过滤，充氮气灌装，灭菌既得。

组方3：雪上一枝蒿总生物碱0.005％～0.5％、磷脂0.5％～4.0％、胆固醇0.01％～1.0％、胆固醇油酸酯0.01％～1.0％、solutolHS15 0.5％～3.0％、甘油1.0％～6.0％、1-6g油酸乙酯、甘油三酯5％～20％、油酸1.0％～6.0％、生育酚0.01％～1.0％、注射用水添至100ml。

称取雪上一枝蒿总生物碱20-200mg溶于0-2ml乙醇、0-5ml苯甲酸卞酯和生育酚0.2-1g、胆固醇0.1-1.0g、胆固醇油酸酯0.1-1.0g中，充分搅拌，加入1-6g油酸乙酯、15-20g精制植物油或中链油或两者的混合物和油酸1.0g，于50℃～90℃高速搅拌使混合均匀制成油相；称取大豆磷脂1.0-1.5g、solutolHS15 1.0g、甘油3g，加入处方量的水于50℃～80℃高速搅拌使充分分散，制成水相。油水两相混合，于50℃～80℃高速搅拌制成初乳剂。取初乳剂，注射用水定容至处方量，调节PH值4.0～9.0，转移至高压乳匀机中，反复乳化至乳滴平均粒径≤1微米，除菌过滤充氮气灌装，灭菌既得。

组方4：雪上一枝蒿总生物碱0.005％～0.5％、奶油香精0.01％～1.0％、甾醇及其衍生物0.01％～1.0％、生育酚0.01％～1.0％、磷脂1.0％～6.0％、2％-6％油酸乙酯、植物油5％～20％、甘油1.0％～6.0％、油酸1.0％～6.0％，注射用水添至100ml。

称取雪上一枝蒿总生物碱20-200mg溶于0-5ml苯甲酸卞酯和0-2ml乙醇中，加入生育酚0.1-1.0g、胆固醇0.1-0.5g、奶油香精0.01-0.2g，充分溶解，加入2-6g油酸乙酯、15g精制大豆油或中链油或两者的混合物和0.1-3g油酸，于50℃～90℃高速搅拌使混合均匀，制成油相；称取蛋黄卵磷脂2.0g、甘油3g，加入处方量的水于50℃～80℃高速搅拌使充分分散，制成水相。油水两相混合，于50℃～80℃高速搅拌制成初乳剂。取初乳剂，注射用水定容至处方量，调节PH值4.0～9.0，转移至高压乳匀机中，反复乳化至乳滴平均粒径≤1微米，除菌过滤，充氮气灌装，灭菌既得。

实施例二(纳米微乳剂型)

组方1：雪上一枝蒿总生物碱0.005％～0.5％、甘油三酯0.01％～2.0％、solutolHS15 0.2％～5.0％、吐温80 0.01％～2.0％、DMSO 0.01％～8％、注射用水添至100ml。

称取雪上一枝蒿总生物碱20-200mg溶于0-2ml乙醇和0-5ml苯甲酸卞酯中，加入吐温80 0.1g、solutolHS15 0.5g充分溶解，加注射用水定容至100ml，于20℃-80℃搅拌制成微乳。调节PH值4.0～9.0，除菌过滤充氮气灌装，灭菌既得。

组方2：雪上一枝蒿总生物碱0.005％～0.5％、磷脂0.2％～5.0％、丙二醇0.01％～2％、油酸乙酯0.01％～8％、注射用水添至100ml。

称取雪上一枝蒿总生物碱20-200mg溶于0-2ml乙醇和0-5ml苯甲酸卞酯中，加入油酸乙酯0.5g、丙二醇0.1g、蛋黄磷脂0.2g-1.0g及适量水中，于20℃-80℃搅拌使混合均匀，加入适量注射用水容至100ml，调节PH值4.0～9.0，于20℃-80℃搅拌制成微乳。转移至高压乳匀机中，反复乳化至乳滴平均粒径≤0.5微米，除菌过滤充氮气灌装，灭菌既得。

组方3：雪上一枝蒿总生物碱0.005％～0.5％、泊洛沙姆188 0.2％～2.0％、聚氧乙烯蓖麻油0.01％～5％、聚乙二醇400/600 0.1％～5.0％、注射用水添至100ml。

称取雪上一枝蒿总生物碱20-200mg溶于0-2ml乙醇和0-5ml苯甲酸卞酯中，加入泊洛沙姆188 1.0g、聚氧乙烯蓖麻油0.5g及适量水中，于20℃-80℃搅拌使混合均匀；聚乙二醇400/600 1g溶于适量水中，两者混合定容至100ml，调节PH值4.0～9.0，于20℃-80℃搅拌制成微乳。转移至高压乳匀机中，反复乳化至乳滴平均粒径≤0.5微米。除菌过滤充氮气灌装，灭菌既得。

组方4：雪上一枝蒿总生物碱0.005％～0.5％、泊洛沙姆188 0.2％～2.0％、吐温80 0.01％～2.0％、中链甘油三酯0.01％～5％、羟丙基β～环糊精0.1％～5.0％、注射用水添至100ml

称取雪上一枝蒿总生物碱20-200mg溶于0-2ml乙醇和0-5ml苯甲酸卞酯，加入吐温800.2g、泊洛沙姆188 1.2g及适量水中，于20℃-80℃搅拌使混合均匀；羟丙基β～环糊精2g溶于适量水中，两者混合定容至100ml，调节PH值4.0～9.0，于20℃-80℃高速搅拌制成微乳。除菌过滤充氮气灌装，灭菌既得。

实施例三(血管刺激性试验)

试验药物：雪上一枝蒿总生物碱亚钠米乳剂，北京金方华医药科技有限公司提供。雪上一枝蒿总生物碱水针，从市场购得，试验时用0.9％氯化钠注射液配制成5％溶液。

试验动物：健康家兔，体重2.3～2.5kg。

试验方法：取健康家兔6只，雌雄各半。按体重及性别分为0.9％氯化钠注射液对照组和雪上一枝蒿总生物碱乳剂组以及雪上一枝蒿总生物碱水针对照药组，每组2只。雪上一枝蒿总生物碱乳剂组和雪上一枝蒿总生物碱水针组于家兔左耳耳缘按临床给药浓度静脉滴注10ml/kg，滴注速度1ml/分，每日1次，连续7日。对照组同法静脉滴注0.9％氯化钠注射液。除每次给药时及给药后观察给药局部表现外，于末次静脉滴注后剪下药侧耳廓，常规固定后，在距静脉滴注入针近心端1cm处，每隔1cm切取0.5cm宽标本，共取3块标本。切片染色，进行镜下病理观察，结果见下表：

                                血管刺激性试验

项目	兔耳廓血管扩张	红肿	有无炎细胞浸润
				0.9％氯化钠注射液对照组	-	-	-
雪上一枝蒿总生物碱水针	+	++	+
				雪上一枝蒿总生物碱亚钠米乳剂(组方1)	-	-	-
雪上一枝蒿总生物碱亚钠米乳剂(组方2)	-	-	-
				雪上一枝蒿总生物碱亚钠米乳剂(组方3)	-	-	-

备注：“++”严重、“+”少许、“-”无

Claims (9)

1、一种含雪上一枝蒿总生物碱的稳定的水包油乳剂组合物，其包含：雪上一枝蒿总生物碱、油性载体、水和表面活性剂；其中所述雪上一枝蒿总生物碱以有效剂量被分散到所述的油性载体中，雪上一枝蒿总生物碱和油性载体在水中形成稳定的分散相；其中分散相的平均粒径≤500nm。

2、根据权利要求1中的雪上一枝蒿总生物碱，其中总生物碱以雪上一枝蒿甲素计，纯度大于70％。

3、根据权利要求1中的组合物，其中油性载体是指甘油三酯、脂肪酸甘油酯、脂肪酸/醇、脂肪酸乙酯、甾醇及其衍生物、聚氧乙烯脂肪酸酯中的一种或几种；所述油性载体的用量以重量计为0.1％-30％。

4、根据权利要求1中的组合物，其中表面活性剂是指磷脂、吐温、司盘、泊洛沙姆(poloxamer)、聚乙二醇及其衍生物中的一种或几种；所述表面活性剂的用量以重量计为0.1％-10％。

5、根据权利要求1中的组合物，所述雪上一枝蒿总生物碱的用量以重量计为0.005％-0.5％。

6、根据权利要求1中的表面活性剂，其特征在于进一步包含抗氧化剂α-生育酚、抗坏血酸棕榈酸酯、丁基羟基茴香醚(BHA)、二丁基羟基甲苯(BHT)中的一种。

7、根据权利要求1中的表面活性剂，其特征在于进一步包含甘油、丙二醇、乙醇、羟丙基β～环糊精中的一种或几种。

8、根据权利要求1中的水包油乳剂组合物，是指钠米乳和亚钠米乳剂，其中雪上一枝蒿总生物碱是通过分散在雪上一枝蒿总生物碱共溶剂中而被惨入油中的，雪上一枝蒿总生物碱和油性载体在水中形成稳定的分散相；其中分散相的平均粒径≤1um。

9、根据权利要求1中的水包油乳剂组合物，其口服或外用乳剂中进一步含芳香剂和防腐剂，其中芳香剂包括橘子香精、香蕉香精、草莓香精、奶油香精中的一种或几种，防腐剂包括尼泊金酯类、苯甲酸类中的一种或几种。