CN101797019A - 猪用湿基态发酵蛋白质饲料及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种猪用湿基态发酵蛋白质饲料及其应用，它采用以乳酸菌为主的发酵技术，以棉粕等非常规蛋白质饲料为主要底物，进行袋装发酵，生产出高活性湿基态蛋白质饲料活性乳酸菌的含量不低于1×107cfu/g。这种饲料与预混料搭配应用，在预混料的推荐配比中，等量替代2-5％豆粕。在猪通用浓缩料中，等量替代5-10％重量的豆粕，并减少浓缩料中饲用抗生素的1/3。本发明产品质量稳定、应用效果明显，对降低猪饲料成本、节约昂贵的豆粕蛋白质资源、提高养猪业经济效益和实现绿色环保养殖具有重要作用。
Description
技术领域
本发明涉及一种猪饲料，尤其是湿基态发酵蛋白质饲料。
技术背景
微生物发酵饲料是一种优质的生物饲料，能改善动物的消化和健康水平。微生物发酵蛋白质饲料能够替代部分优质蛋白质原料，提供活菌及菌体活性代谢产物，增加适口性，增强机体免疫能力，具有广阔的应用前景。但是目前微生物发酵蛋白质饲料因发酵菌种的特异性不强、采用烘干技术使微生物活性破坏、饲喂形式不合理、应用效果不稳定等，实际推广应用还较少，活菌数量不足、湿基态形式不易保存、容易发霉变质是目前实际生产中面临的三大主要困难。
发明内容
本发明的目的是提供一种活菌数量多、活性高的猪用湿基态发酵蛋白质饲料以及应用技术。
为达到上述目的，本发明是由以下重量比例的原料混合发酵而成的：
具体如下表：
本发明添加剂各原料最佳配比见下表：
上述菌种应保证混合发酵后形成的饲料活性乳酸菌的含量不低于1×107cfu/g。
本发明饲料制作时，将菌种以1∶10的比例(重量比)先与红糖混合，混合后在10-20倍重量的温水(30℃)中保持20-60分钟，然后再与剩余红糖和其它原料混合。混合选择人工方式或连续化生产。使用成套不锈钢混合机组时，混合机转轴要加粗，将菌粉溶于水后的菌液盛于塑料容器中，用抽吸泵将菌液自动泵出至混合机内，实现自动化、批量生产。接种后的物料分装在20-25kg容量的铝箔袋中，或者是致密度较高的双层塑料袋(透气率不超过25.0cm3/m2.bar.d)中，物料要压实，封口用绳扎紧。堆放在库房中，在20℃以上的环境中发酵7天即可使用。成熟的发酵植物蛋白质饲料中，水分含量35％，pH值4.0-4.4，活性乳酸菌的含量不低于1×107cfu/g。铝箔袋中发酵7天后的物料即发酵成品，呈湿基态，无需再包装。
本发明菌种可以是混合菌种，由发酵乳杆菌、粪肠球菌、酿酒酵母菌和枯草芽孢杆菌四种菌株分别经扩大培养后混合而成的，最佳混合比例为等量混合，即：发酵乳杆菌∶粪肠球菌∶酿洒酵母菌∶枯草芽孢杆菌＝1∶1∶1∶1。
上述四种菌种均为已有产品，其中发酵乳杆菌和粪肠球菌为乳酸菌。
所述的发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentium)，菌株ATCC14931，细菌类，从中国科学院微生物研究所菌种保藏中心购买，其保藏登记号为CGMCC1.1880。
所述的粪肠球菌(Enterococcus faecalis)，菌株ATCC19433，细菌类，购自中国科学院微生物研究所菌种保藏中心，其保藏登记号为CGMCC1.2135。
所述酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)，菌株ATCC18824，真菌类，购自中国科学院微生物研究所菌种保藏中心，其保藏登记号为CGMCC2.1882，糖酵解能力很强，能耐受较低的pH环境，在pH值为4.5的情况下还能进行糖代谢。
所述芽孢杆菌是枯草芽孢杆菌枯草亚种(Bacillus subtilis subsp.Subtilis)，细菌类，购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏登记号为CGMCC No.1946，在有氧条件下繁殖扩增，在无氧和营养缺乏的条件下形成芽孢。能分泌杀灭大肠杆菌和沙门氏菌等有害微生物的细菌素，但是这类细菌素对酵母菌和乳酸菌的生长代谢没有影响，在偏酸性环境中对大肠杆菌和沙门氏菌的杀伤力更强。
本发明发酵菌种的扩大培养方法如下：
1、乳酸菌扩大培养方法
(1)制备乳酸菌保存用固态培养基
将上述成分充分融化后形成培养液，把琼脂融化在培养液中成为培养基，把培养基分装在10ml厌氧管中，在121℃高温消毒30分钟，冷却至室温后备用。挑选合适的乳酸菌单菌落，采用穿刺法接种在厌氧管中，在34-36℃温度范围内培养4-6天。然后继续扩大培养。
(2)制备工业生产用液体培养基：(计算基准为1吨)
取下述原料进一步扩大培养
一级和二级种子培养基的营养物质组成和比例与工业生产用液体培养基相同，但是浓度需要降低50％。接种扩大比例为2.0-5.0％，最初从试管或者三角瓶液体菌种开始，逐渐扩大。培养温度为34-36℃。一级种子的培养时间18小时，二级种子培养时间为12小时。最终大罐的培养时间为22小时。培养过程不要通气，厌氧静息培养。培养结束后，用10-20倍重量的干燥麦粉(过40目筛)与乳酸菌培养液均匀混合。麦粉的含水量在8.0％以下，混合菌粉的含水量不超过15％，真空包装。
2、酵母菌扩大培养
(1)制备酵母菌保存用固态培养基(以一升为计算基准)
取以下成分融化形成营养液，按常规方法进行扩大培养
(2)工业生产用液体培养基：(以一升为计算基准)
取下述原料继续进行扩大培养
一级种子用三角瓶摇瓶培养，接种比为1.0-2.0％，500ml三角瓶装液量不超过150ml，转速在200-250rpm之间。在30℃恒温培养10小时，接入二级种子罐。二级种子用80-100升小罐，接种比为2.0-3.0％，采用鼓泡式通气就可以了，通风比为1.0-1.2vvm。在30℃通风培养8小时，接入生产用大罐。大罐的接种比为2.0-5.0％，如果采用鼓泡式通气，通风量控制在0.6-0.9vvm之间。在前4小时低一些，后面的时间通风比高一些。如果有搅拌电机，功率可以设置在1.0kw/m3(培养液)，通风量可以减少50％。整个培养时间为10小时左右。其主要指标是溶液中的残糖浓度。如果糖浓度低于1.0％，就可以结束了。
斜面培养基、一级种子培养基和二级种子培养基需要严格消毒，121℃维持20分钟。但是大罐培养基的消毒可以适当简化，在100℃维持30分钟就可以了，培养酵母的大罐可以是常压容器。
培养结束后的酵母液用离心机离心浓缩，分离出浓浆酵母，然后在60-80℃进行喷雾干燥。获得的干燥物即为酵母菌粉。
3、芽孢杆菌扩大培养
(1)制备芽孢杆菌保存用固态培养基：(琼脂含量15g，计算基准为1升)
取上述成分融化成营养液，把琼脂融化在培养液中，把培养基分装在斜面试管中。121℃高温灭菌30分钟，摆成斜面，冷却后待用。挑选合适的单菌落，接种在斜面培养基上，36-37℃培养20小时，然后在冰箱4℃保藏。
(2)制备工业生产用液体培养基：(计算基准为1吨)
取下述成分按常规方法进行扩大培养
一级和二级液体种子的培养液营养组成与工业生产用液体培养基一致，但是浓度降低50％，培养过程需要通无菌空气。一级摇瓶培养，二级采用100升小罐培养。500ml三角瓶装液量为100-120ml，转速为200rpm。37℃摇瓶培养16小时后接种在二级小罐中通风培养16小时。培养温度在35-37℃。随着时间的延续，通风量也要逐步加大，供氧量与菌体的数量成正比。在前10小时，通风量控制在0.2-0.5vvm，在后6小时，通风量逐步加大到0.5-0.7vvm。二级种子罐的搅拌电机功率不能小于2.0kw/m3培养液。
二级种子培养结束后接入到最终生产用大罐中，大罐电机的搅拌功率不低于1.5(kw/m3培养液)在37℃通风培养。培养时间与通风量的关系如下：(培养液的体积在2-5m3之间)
培养结束后，在3000×g以上离心，除去多余的水分，获得浓缩液，然后在60-80℃条件下喷雾干燥。成品在真空袋中包装。
本发明饲料活性乳酸菌的含量不低于1×107cfu/g，水分含量35％，pH值4.0-4.4，营养指标经过检测如下：
本发明湿基态发酵蛋白质饲料在猪日粮中的应用包括以下两方面：
第一方面：在猪预混料中的应用
湿基态发酵蛋白质饲料单独包装，作为猪4％或5％预混料的伴侣蛋白质饲料，与预混料搭配应用，在预混料的推荐配比中，等量替代2-5％豆粕。
在15-30kg体重仔猪预混料配制的配合日粮中，湿基态发酵蛋白质饲料等量替代推荐配比中的4-5％豆粕，仔猪采食量增加，生长性能提高，免疫力增强，腹泻率下降。在30-60kg体重生长猪预混料配制的配合日粮中，湿基态发酵蛋白质饲料等量替代推荐配比中的3-5％豆粕，生长猪采食量增加，生长性能明显改善，免疫力增强，在良好的饲养管理环境下不需使用饲用抗生素。在60kg体重-出栏肥育猪预混料配制的配合日粮中，湿基态发酵蛋白质饲料等量替代推荐配比中的2-5％豆粕，肥育猪消化机能改善，生长性能提高，免疫力增强。
第二方面：在猪浓缩料中的应用
在猪通用浓缩料中，湿基态发酵蛋白质饲料等量替代5-10％的豆粕，并可减少浓缩料中饲用抗生素的1/3，只要配制后的浓缩料水分含量夏天不超过13.0％、冬天不超过13.5％即可。要求湿基态发酵蛋白质饲料与浓缩料混合要充分，不得有块状物出现。
本发明猪高活性湿基态发酵蛋白质饲料饲喂仔猪的效果如下：
(1)试验设计与试验日粮
试验选择体重约15kg仔猪72头，分3个处理A、B、C，每处理3个重复，每重复8头，以每栏作为一个重复，饲养至体重约30kg。试验日粮为4％仔猪预混料与推荐的玉米、豆粕和麸皮三种大原料混合而成，其中A、B、C三个处理的4％仔猪预混料相同，推荐大原料配比不同，A组蛋白质原料为豆粕，B、C组分别用2％、5％湿基态发酵蛋白质饲料等量替代推荐配比中的豆粕。4％(指预混料占全价配合料的4％)仔猪预混料组成(重量份)如下：
其中：
仔猪微量元素包括(重量份)：
仔猪复合维生素包括(重量份)：
由4％仔猪预混料与玉米、豆粕、麸皮三种大原料以及湿基态发酵蛋白质饲料配制成的三个处理组的仔猪配合日粮配比如下：
A、B、C三个处理组在仔猪阶段饲喂的由4％预混料与大料及湿基态发酵蛋白质饲料配制成的上述配合日粮主要营养水平如下：
(2)饲养管理
试验仔猪饲养于半密闭式猪舍，饲养至体重约30kg。配合日粮以粉料形式饲喂，仔猪自由采食和饮水，每天清理消毒舍内卫生，冲洗饮水器。按正常免疫程序免疫。每天由专人观察记录试验仔猪生长、腹泻及日常行为等情况。
(3)指标检测
日增重、采食量和料肉比：在试验开始和试验结束时分别于早晨8:00空腹称重；称重的同时进行结料，统计采食量；计算试验期仔猪的平均日增重和料肉比。
腹泻指数的确定：在仔猪饲养阶段每天观察腹泻情况，根据粪便的情况给予不同分数，统计腹泻指数，具体评分方法如下。
腹泻指数的评分标准
(4)数据处理
试验数据采用SPSS 10.0统计软件进行统计，进行方差分析和Duncan’s多重比较。差异显著水平设定：P＜0.05为差异显著，P＜0.01为差异极显著。
(5)生产性能指标及粪便结果
A、B、C三个处理组在仔猪阶段饲喂的由4％仔猪预混料与大原料及湿基态发酵蛋白质饲料配制成的上述配合日粮对仔猪生产性能影响如下：
注：*表示同行数据比较，差异显著(P＜0.05)。
不同处理的日增重、采食量、料肉比及腹泻指数显示：与处理A组相比，以2％比例的湿基态发酵蛋白质饲料等量替代豆粕的处理B组平均采食量显著提高(P＜0.05)，以4％比例的湿基态发酵蛋白质饲料等量替代豆粕的处理C组平均日增重、平均采食量分别提高5.7％、4.0％，差异显著(P＜0.05)；处理B、C两组的料肉比和腹泻指数较处理A组有改善的趋势。三个试验组中，湿基态发酵蛋白质饲料替代豆粕的比例以4％最佳。
具体实施方式
下面以三个实施例具体说明本发明饲料的各原料配比。
实施例一：
实施例二
实施例三
Claims (6)
1.一种猪用湿基态发酵蛋白质饲料，其特征在于，它是由以下重量比例的原料混合发酵而成的：
CP40％棉籽粕42％-48％、CP43％豆粕2.0％-8.0％、CP39％菜籽粕12.0％-18.0％、红糖1.0％-3.0％、CP15麸皮1.0％-5.0％、果渣1.0％-5.0％、菌种0.1％和水25.0％-28.0％；
上述菌种应保证发酵后形成的添加剂中活性乳酸菌的含量不低于1×107cfu/g。
2.如权利要求1所述的猪用湿基态发酵蛋白质饲料，其特征在于，它是由以下重量比例的原料混合发酵而成的：CP40％棉籽粕45.0％、CP43％豆粕5.0％、CP39％菜籽粕15.0％、红糖2.0％、CP15麸皮3.0％、果渣3.0％、菌种0.1％和水26.9％。
3.如权利要求1或2所述的猪用湿基态发酵蛋白质饲料，其特征在于，所述的菌种是混合菌种，由发酵乳杆菌、粪肠球菌、酿酒酵母菌和枯草芽孢杆菌四种菌株分别经扩大培养后混合而成的。
4.如权利要求3所述的猪用湿基态发酵蛋白质饲料，其特征在于，所述的发酵乳杆菌、粪肠球菌、酿酒酵母菌和枯草芽孢杆菌四种菌株按1；1；1；1混合。
5.如独权1所述的猪用湿基态发酵蛋白质饲料在猪预混料中的应用，作为猪4％或5％重量预混料的伴侣蛋白质饲料，与预混料搭配应用，在预混料的推荐配比中，等量替代2-5％豆粕。
6.如独权1所述的猪用湿基态发酵蛋白质饲料在猪浓缩料中的应用，在猪通用浓缩料中，等量替代5-10％重量的豆粕，并减少浓缩料中饲用抗生素的1/3。
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