CN101760488A

CN101760488A - 一种从槐角中制备染料木素的方法

Info

Publication number: CN101760488A
Application number: CN200910234070A
Authority: CN
Inventors: 刘东锋; 张翼; 杨成东
Original assignee: Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Current assignee: Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Priority date: 2009-11-20
Filing date: 2009-11-20
Publication date: 2010-06-30

Abstract

一种制备染料木素的方法，以槐角为原料，加入原料量的1-2％的生物酶，45-55℃保温酶解10-15小时，乙醇回流提取2-3次，减压浓缩放置结晶，热水洗涤结晶，再回流溶解，调节pH至4-5放置结晶。采用该方法生产的产品含量高、收率高、成本低。该工艺易放大和产业化。

Description

一种从槐角中制备染料木素的方法

技术领域：

本发明涉及一种从新鲜槐角制备染料木素方法，尤其是一种采用生物酶解制备染料木素的方法。

背景技术：

染料木素

别名：染料木黄酮，金雀异黄酮

化学名：5，7-二羟基-3-(4-羟苯基)-4H-1-苯并吡喃-4-酮；4′，5，7-三羟基异黄酮

分子式：C₁₅H₁₀O₅

分子量：270.24

分子结构：

染料木素属于黄酮类物质，具有雌性激素及抗雌激素性质，具有抗氧化作用，可以抑制酪氨酸蛋白激酶(PTK)的活性，可以抑制拓扑异购酶II的活性，具有诱发细胞程序性死亡、提高抗癌药效、抑制血管生成等作用。是一种很有潜力的癌症化学预防剂，其抗癌作用及机制具有广泛的应用前景。

染料木素广泛存在于植物的叶子和种子，但是含量都十分低，远不能市场满足需求。现在市场上的染料木素多是槐角水解的得到产物。

槐角资源丰富，遍及全国各地。槐角含有大量的槐角苷，含量高达9％。《中药材》(第1期-2007)房敏峰、曲欢欢等人发表的“槐角不同炮制品中槐角苷的含量测定”文献中报道河南产地的生槐角中槐角苷含量达9.14％。

槐角苷又叫染料木苷，分子式及分子量：C₂₁H₂₀O₁₀；432.37。

现有工艺多是乙醇提取，酸水解，氯仿丙酮乙酸乙酯萃取生产染料木素。酸水解对设备腐蚀严重，多种有机试剂的应用给回收试剂和产品溶剂残留控制造成困难，产品成本高。如中国专利CN1269810C(授权号)“染料木素的提取方法”中公开的方法中就是采用了酸水解、氯仿萃取等工序，再如中国专利CN1216878C“染料木素的制备工艺及药物组合应用”公开的方法中也采用了酸水解，有机试剂萃取等工序。现有生产染料木素的工艺，操作难度大，设备要求程度高，产业化程度不高。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是提供一种从槐角制备染料木素的方法。该方法能够降低生产成本，提高产品收率，便于工业化操作。

为了解决上述技术问题，本发明提取技术方案如下：

1)酶解：将槐角粉碎30-60目，加入水调节pH，再加生物酶，保温酶解；

2)提取：酶解的槐角加入6-8倍乙醇提取，得提取液；

3)结晶：提取液减压浓缩，放置结晶，热水洗涤结晶物，得染料木素粗品；

4)重结晶：染料木素粗品用乙醇回流溶解，调节pH放置结晶，收集结晶物洗涤干燥即得产品。

所述生物酶可选淀粉酶、纤维素酶、β-葡聚糖苷酶中的一种或几种。

所述调节pH的酸可选盐酸、硫酸、磷酸的一种，优选盐酸。

所述酶解条件为：加水量是原料重量的1-2倍，pH调节为4.5-5.5，保温温度45-55℃，加酶量为原料重量的1-2％，酶解时间10-15小时。

所述提取条件为：乙醇浓度为90-95％，回流提取2-3次，每次1-2小时。

所述结晶条件为：染料木素提取液浓缩至乙醇浓度为60-70％，放置8-12小时，洗涤热水用量为结晶物量的5-6倍，热水温度70-80℃。

所述重结晶条件为：乙醇浓度90-95％，PH调节4-5，结晶时间12-14小时，洗涤试剂为50-70％乙醇，用量为结晶物的1-2倍

综上所述，本发明存在以下优点：

1)以槐角为原料，槐角中槐角苷含量高，更易提高产品收率和含量。

2)生物酶解工序，易操作，设备要求程度低。

3)乙醇结晶，试剂容易回收，产品易控制试剂残留。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

槐角粉碎到30目，取10kg(槐角苷苷含量9.5％)，加入20L水，调节PH至5，加入200克纤维素酶，加热至50℃，保温10小时。加入60L90％乙醇，回流提取2小时，提取两次，合并提取液减压浓缩至醇浓度70％，放置结晶8小时，过滤结晶体加入其重量的5倍80℃热水搅拌洗涤，滤过得染料木素粗品。染料木素粗品用95％乙醇回流饱和溶解，调pH至4，放置结晶12小时，过滤，得结晶体，加入结晶体重量2倍的50％的乙醇搅拌洗涤，滤过，干燥得成品360克含量99％。

实施例2：

槐角粉碎到60目，取10kg(槐角苷苷含量9％)，加入10L水，调节PH至5.5，加入100克β-葡聚糖苷酶，加热至45℃，保温12小时。加入80L90％乙醇，回流提取1小时，提取两次，合并提取液减压浓缩至醇浓度65％，放置结晶12小时，过滤结晶体加入其重量的6倍70℃热水搅拌洗涤，滤过得染料木素粗品。染料木素粗品用93％乙醇回流饱和溶解，调pH至4.5，放置结晶14小时，过滤，得结晶体，加入结晶体重量2倍的70％的乙醇搅拌洗涤，滤过，干燥得成品330克含量98％。

实施例3：

槐角粉碎到40目，取10kg(槐角苷苷含量9％)，加入10L水，调节PH至4.5，加入200克淀粉酶，加热至55℃，保温15小时。加入60L95％乙醇，回流提取1小时，提取三次，合并提取液减压浓缩至醇浓度60％，放置结晶10小时，过滤结晶体加入其重量的6倍80℃热水搅拌洗涤，滤过得染料木素粗品。染料木素粗品用90％乙醇回流饱和溶解，调pH至5，放置结晶14小时，过滤，得结晶体，加入结晶体重量2倍的70％的乙醇搅拌洗涤，滤过，干燥得成品340克含量98％。

实施例4：

槐角粉碎到40目，取10kg(槐角苷苷含量8.5％)，加入10L水，调节PH至5.5，加入100克纤维素酶和50克β-葡聚糖苷酶，加热至50℃，保温12小时。加入70L90％乙醇，回流提取2小时，提取三次，合并提取液减压浓缩至醇浓度60％，放置结晶12小时，过滤结晶体加入其重量的5倍70℃热水搅拌洗涤，滤过得染料木素粗品。染料木素粗品用95％乙醇回流饱和溶解，调pH至5放置结晶14小时，过滤，得结晶体，加入结晶体重量1倍的70％的乙醇搅拌洗涤，滤过，干燥得成品320克含量99％。

Claims

1.一种从槐角中制备染料木素的方法，其特征在于包含以下步骤：

2)提取：酶解的槐角加入6-8倍乙醇提取，得提取液；

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述生物酶可选淀粉酶、纤维素酶、β-葡聚糖苷酶中的一种或几种。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述调节pH的酸可选盐酸、硫酸、磷酸的一种，优选盐酸。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述酶解条件为：加水量是原料重量的1-2倍，pH调节为4.5-5.5，保温温度45-55℃，加酶量为原料重量的1-2％，酶解时间10-15小时。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的提取条件为：乙醇浓度为90-95％，回流提取2-3次，每次1-2小时。

6.如权利要求所述的制备方法，其特征在于所述结晶条件为：染料木素提取液浓缩至乙醇浓度为60-70％，放置8-12小时，洗涤热水用量为结晶物量的5-6倍，热水温度70-80℃。

7.如权利要求所述的制备方法，其特征在于所述重结晶条件为：乙醇浓度90-95％，PH调节4-5，结晶时间12-14小时洗涤试剂为50-70％乙醇，用量为结晶物的1-2倍。