CN101744978A - 预防和治疗糖尿病的药物组合物 - Google Patents
预防和治疗糖尿病的药物组合物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101744978A CN101744978A CN201010022822A CN201010022822A CN101744978A CN 101744978 A CN101744978 A CN 101744978A CN 201010022822 A CN201010022822 A CN 201010022822A CN 201010022822 A CN201010022822 A CN 201010022822A CN 101744978 A CN101744978 A CN 101744978A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- timosaponin
- extract
- berberine
- compositions
- weight
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
一种预防和治疗糖尿病的药物组合物,至少含有知母皂苷B-II和小檗碱两种组分。在组合物中增加芒果苷,知母皂苷A-III和知母皂苷B-III中一种或几种组分,可以提高预防和治疗效果。本发明组合物还可以由知母提取物和黄柏提取物组合而成,或从知母和黄柏中直接提取而获得。本发明组合物具有显著的降低血糖作用,有效成分含量高,质量容易控制,制备工艺易于产业化,可应用于预防和治疗糖尿病药物。
Description
技术领域
本发明涉及一种提取自天然植物的组合物,尤其涉及一种提取自知母和黄柏的组合物,用于糖尿病的预防和治疗。
背景技术
糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)是一种因体内胰岛素绝对或者相对不足所导致的一系列临床综合症。该病在发展进程中还会引起一些并发症,如:低血糖症(Hypoglycemia)、酮症酸中毒(Ketoacidosis)、非酮高渗性昏迷(Nonketotic Hyperosmolar Coma)、心血管疾病、慢性肾衰竭、视网膜病变、神经病变及微血管病变等。糖尿病治疗常用的药物主要有三大类:生物药类,如:胰岛素(Insulin);化学药,如:磺酰脲类(Sulfonylurea)、双胍类(Biguanide)、格列酮类(Glitazone)和中成药类。限于目前尚没有较为成熟的胰岛素非注射给药技术,其使用仍以注射为主,且注射过程也存在安全性风险。化学类药物虽具有较强的降血糖作用,但对肝、肾等毒副作用大,还容易导致心血管并发症加重。此外,还有一些药物,如:胰高血糖素类多肽(Glucagon-like peptide 1,GL1)、脂酰基化胰高血 糖素类多肽(NN2211,Novo Nordisk)、Exendin-4(Byetta,Amylin)和聚乙二醇修饰的Exendin-4(中国发明专利申请00809516.7)等,长期给药后虽能有效控制血糖、降低糖化血红蛋白HbA1c数值和改善β胰岛细胞功能,但由于这些分子还同样作用于中枢神经受体,所以给药后呕吐和眩晕的症状较难避免,且给药方式仍以注射为主。另一类DPPIV酶抑制剂,虽能口服,但其将对生物体内的一大类酶均产生抑制作用,从而会使体内脂肪分布发生变化,且给药的实际效果也相对较差。
知母为百合科(Liliaceae)植物知母(Anemarrhena asphodeloides Bunge)的根茎,具有滋阴降火、润燥滑肠的功效,中医临床多用于消渴证。知母药用以单位知母饮片或与其它中药配伍后煎煮或熬煮为主。中药材知母中含知母皂甙(苷)(timosaponin)A-I、A-II、A-III、A-IV、B-I、B-II和B-III,其中,知母皂甙A-II、A-IV结构尚不明。以及知母皂甙(amemarsaponin)A2,即马尔考皂甙元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃半乳糖甙B(marlogenin-3-O-β-D-glucopyranosy(1→2)-β-D-galactopyranosideB)、去半乳糖替告皂甙(desgalactotigonin)、F-芰脱皂甙(F-gitonin)和异菝葜皂甙(smilageninoside)等。此外,还含有知母多糖(anemaran)A/B/C/D、顺-扁柏树脂酚(cis-hinokiresinol)、单甲基-顺-扁柏树脂酚(monomethyl-cis-hinokiresinol)、氧化-顺-扁柏树脂酚(oxy-cis-himokiresinol)、2,6,4′-三羟基-4-甲氧基二苯甲酮(2,6,4′-trihydroxy-4-methoxy benzophenone)、对-羟苯基巴豆油酸(p-hydroxyphenyl crotonic acid)、二十五烷酸乙烯脂(pentacosyl vinyl ester)、β-谷甾醇(β-sitosterol)、芒果甙(mangiferin)、烟酸(nicotinic acid)、烟酰胺(nicotinamide)及泛酸(pantothenic acid)等。
黄柏来源于芸香科(Rutaceae)植物黄皮树(Phellodendron chinense Schneid.)或黄檗(Phellodendronamurense Rupr.)的干燥树皮,前者习称“川黄柏”,后者习称“关黄柏”。黄柏始载于《神农本草经》,原名“檗术”,列上品。为清热燥湿、泻火解毒、退虚热的常用中药材,化学成分主要为小檗碱生物碱。小檗碱对溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌、淋球菌和弗氏、志贺氏痢疾杆菌均有抗菌作用,并有增强白血球吞噬作用。小檗碱的盐酸盐(俗称盐酸黄连素)已广泛用于治疗胃肠炎、细菌性痢疾等,对肺结核、猩红热、急性扁桃腺炎和呼吸道感染也有一定疗效。
关黄柏为黄檗树(Phyllodendron amurense Rupr.)的树皮,黄檗树皮含小檗碱(berberine)约1.6%,并含少量黄柏碱(phellodendrine)、木兰碱(magnoflorine)、药根碱(jatrorrhizine)、掌叶防己碱(palmatine)和白栝楼碱(candicine)等,其根皮可分离出的小檗碱约9%,尚有药根碱、黄柏碱和白栝楼碱等。川黄柏为黄皮树(Phyllodendron Chinense Schneid)和秃叶黄皮树(P.Chinense Schneid.var.Glabriusculum Schneid)的树皮,含小檗碱3-8%是提取小檗碱的重要来源之一。黄皮树树皮含小檗碱达3%。秃叶黄皮树树皮含小檗碱达6.5%,并含少量掌叶防己碱、药根碱、黄柏碱和木兰碱。
近年来,有关黄柏和知母单味药材及其有效成分治疗糖尿病的研究较多。已经有研究表明知母黄酮类成分具有防治糖尿病的作用(国外医学中医中药分册,2002,24,353;中国发明专利ZL03115509.X)。现代研究发现,知母总皂苷(中药药理与临床,2005,21,22-23)、知母皂苷A-III、B-II、B-III和芒果苷等(Wakan Iyakugakn Zasshi,1995,5,404-405;中国生化药物杂志,2005,26,332)具有降低血糖的功效。据报道,知母醇提物可刺激糖尿病大鼠分泌胰岛素而起到降血糖作用(Exp.Clin.Endocrinol.Diabetes,2004,112,520-525);知母中的多糖类成分可显著降低四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠血糖及肝糖元(中草药,1996,17,605-606)。研究表明,黄柏中的主要成分小檗碱具有能促进胰岛素分泌,调节脂质代谢和抗糖尿病的功效(Acta Pharmacologica Sinica,2004,25,496-502;中国发明专利ZL01118320.9)。进一步临床研究证实,黄连素,即小檗碱,对II型糖尿病(Non-Insulin-Dependent Diabetes Mellitus,NIDDM)患者的临床有效率为63.3%,且不良反应小(新中医,1997,29,33-34)。
中国发明专利申请93100485.3公开了一种荞麦保健食品,以苦荞麦粉为基料,辅以大豆蛋白粉,再添加枸杞、人参、知母、活性钙等中草药天然成分,其配方重量百分组成为:苦荞麦面粉60-80%、大豆蛋白粉15-30%、枸杞多糖0.5-2.5%、知母皂甙0.2-0.5%、人参多糖0.5-1.5%、活性钙1.2-4.3%。组成的食品对糖尿病具有治疗作用。该保健食品以荞麦为主,能对糖尿病患者的饮食起到一定作用,但在治疗方面的效果有待进一步的实验证实。
中国发明专利ZL95116521.6公开了一种双补降糖胶囊及其制作方法,使用熟地、黄芪、枸杞子、丹参、黄柏、知母和肉桂等20味原料药,经特殊炮制和加工而成。该降糖胶囊由中药材粉碎后制成,由于含有的纤维素含量多,而能减缓糖的吸收,加入附子和肉桂二药材后使得药物降糖效果更为显著,是该发明的重点所在。
中国发明专利申请99126988.8公开了一种专冶糖尿病降糖胶囊,以生地、天花粉、玄参、知母、黄柏、黄连、鹿茸、边桂、山药、石膏和干藕粉等药材为主要组分,治疗由糖尿病引起的上消、中消、下消和多食多尿等病症。
中国发明专利申请02107203.5公开了一种治疗2型糖尿病的复方中药制剂,以葛根、天花粉、苍术、玄参、生黄芪、山药、生石膏、肉桂、熟附片、鬼箭羽、地鳖虫、桑寄生、蚕茧、炮山甲、水蛭、血竭、菝葜、知母、绞股蓝、生地、麦冬、赤芍、地骨皮、制大黄等天然中药材为原料,通过粉碎、煎煮、烘干、灭菌等工序制成,用于II型糖尿病及其并发症的治疗。
中国发明专利申请200310110332.7公开了一种治疗糖尿病的药物参芪山药膏及其制备方法,由“君”药:山药和人参;“臣”药:海龙、海马、阿魏、乳香、没药、红花、肉桂、珍珠、人工麝香、天花粉、黄柏、黄芪、芒果叶和番石榴叶;以及“使”药:冰片等药材共同配伍而成。将山药、人参、天花粉、黄柏、黄芪、芒果叶和番石榴叶等药材的碎段混匀,浸泡于麻油中,三天后经加热,过滤,在滤油中加入红丹,再搅匀,收膏;将药膏加入冷水中,不断搅拌,挤压换水;取药膏用文火熔化,加入珍珠层粉、冰片粉、人工麝香、海龙、海马、阿魏、乳香、没药、红花和肉桂等药材的细粉,搅匀,分摊在无纺布上制成膏药。所制得的药膏益气养阴、生津止渴,具有治疗II型糖尿病的功效。
现有的各种中成药对糖尿病虽有一定的治疗作用,但目前临床使用的单一组分制剂或医生自拟的处方汤药,缺乏药效显著、有效成分和作用机理明确,且质量可控和剂型方便的现代中药。中国发明专利ZL200510110763.2公开了一种治疗糖尿病的组合物,由知母、黄柏和肉桂提取物组成,虽然克服了现有技术的诸多缺陷,但是需要用三种药材,生产成本较高,工艺路线较复杂。
发明内容
本发明的一个目的在于提供一种预防和治疗糖尿病的药物组合物,包括知母皂苷B-II、芒果苷和小檗碱,还包括知母皂苷A-III或/和B-III,能有效治疗糖尿病,对糖尿病的发生和发展也有预防作用。
本发明的另一个目的在于提供一种预防和治疗糖尿病的药物组合物,包括知母皂苷B-II提取物、芒果苷提取物和小檗碱提取物,还包括知母皂苷A-III提取物或/和B-III提取物,能有效治疗糖尿病,对糖尿病的发生和发展也有预防作用。
本发明的又一个目的在于提供一种预防和治疗糖尿病的药物组合物,由知母提取物和黄柏提取物组成,能有效治疗糖尿病,还对糖尿病的发生和发展有预防作用。
本发明的再一个目的在于提供一种预防和治疗糖尿病的药物组合物的制剂,在知母提取物、黄柏提取物及其药学上可接受的盐或其混合物中加入各种药物辅料制成的制剂。
知母皂苷A-III,化学名称萨尔萨皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃半乳糖苷,是一种甾体皂苷,其结构式如式I所示。
知母皂苷A-III可以通过化学合成制得,从植物或中药材中提取是最主要的方式。将知母置于索氏提取器中,加入乙醇,并回流浓缩,然后浓缩液萃取3次并脱脂,再经萃取得到知母总皂苷,其中就含有知母皂苷A-III(郑州大学学报,2008,43,167-168)。知母药材经乙醇回流、减压回收、溶解再萃取和分离等步骤就能得到知母皂苷A-III纯化合物(中国发明专利ZL02160151.8)。
知母皂苷B-II,化学名称25(S)-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-5β-呋甾-22-羟基-3β,26-二醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃半乳糖苷,是一种甾体皂苷,其结构式如式II所示。
知母皂苷B-II可以通过化学合成制得,从植物或中药材中提取是最主要的方式。根据中国发明专利申请200810032324.8公开的各种提取方法,得到的提取物中的知母皂苷B-II含量30%-70%,也可以得到纯度高于90%的知母皂苷B-II。知母药材采用溶剂提取法、树脂吸附法、聚酰胺层析法、反相层析法、Sephadex LH-20层析法等分离方法,结合减压干燥、冷冻干燥、喷雾干燥等方法制得的知母皂苷B-II纯度高于90%(中国发明专利申请200510059467.4)。
知母皂苷B-III,化学名称为25(S)-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-5β-呋甾-20(22)-烯-3β,26-二醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃半乳糖苷,是一种甾体皂苷,其结构式如式III所示。
知母皂苷B-III可以通过化学合成制得,从植物或中药材中提取是最主要的方式。根据中国发明专利申请200810032324.8公开的各种提取方法,得到含有知母皂苷B-III的提取物。知母药材先经C6-C30的脂肪烃渗漉,再使用低级醇回流并萃取后,经层析分离和重结晶后制得纯度大于90%的知母皂苷B-III(中国发明专利申请200710040730.4)。
芒果苷略溶于甲醇、乙醇、水、可溶于热稀甲醇、热稀乙醇,不溶于非极性溶剂。可以通过化学方法直接合成制得,一般从含有芒果苷的植物或中药材(如:知母)中提取。这类药材经溶媒,如:水、乙醇、甲醇、丙醇、丁醇或纯的水溶液,高温提取、浓缩后在分离等步骤得到纯度大于60%的芒果苷(中国发明专利申请200710066354.6)。这类药材依次经醇提、脱色、去溶剂、稀醇溶解和去溶剂等步骤得到的提取物中芒果苷纯度大于90%(中国发明专利申请200610079234.5)。这些含有芒果苷的药材如:但不仅限于,芒果叶、扁桃叶、知母和石韦等。
小檗碱,化学名称为5,6-二氢-9,10-二甲氧基苯并-1,3-二苯并间二氧杂环戊烯-5,6α-喹嗪,是一种异喹啉生物碱,也是一种季铵生物碱,存在于小檗科(Berberidaceae)等4科10属的植物中,其结构式如式V所示。
小檗碱的熔点145℃,能溶于水和乙醇,在冷乙醇中的溶解度为1∶100,易溶于热水或热乙醇;难溶于苯、乙醚和氯仿。其从乙醚中可析出黄色针状晶体;从水或稀乙醇中析出的晶体带有5.5分子结晶水;若从氯仿、丙酮或苯中结晶,也带有相应的结晶溶剂分子。小檗碱主要以氢氧化季铵的形式存在,在季铵式小檗碱的水溶液中加入过量的碱则生成醇式(叔胺)和醛式(仲胺)小檗碱的沉淀,由此可得到季铵式、醛式和醇式等三种不同形式的小檗碱,其中以季铵式最稳定。小檗碱的盐类在水中的溶解度都比较小,如:其盐酸盐溶解度为1∶500,其硫酸盐溶解度为1∶30。
小檗碱及其盐可以通过化学合成的方式获得。如:以胡椒乙胺和3,4-二甲氧基苯乙酸为起始原料,通过缩合、还原和氧化等多个步骤得到小檗碱(Ber.,1912,44,2980-2985)。又如:以儿茶酚为起始原料,经成环反应得胡椒环,经氯氰化反应得胡椒乙腈,再经缩合、催化和氢化步骤得缩合物盐酸盐,又经环合反应得小檗碱粗品,经碱化和成盐可制得小檗碱盐酸盐、小檗碱硫酸盐或小檗碱鞣酸盐(中国发明专利ZL01106089.1)。还有如:以2,3-二甲氧基苯甲醇和胡椒乙胺为原料,经过烷基化、氯甲基化、氰化、醇解、缩合和环合六步制得盐酸小檗碱(中国发明专利申请200710020332.6)。
本领域技术人员根据现有技术能够从含有小檗碱的的天然植物或药材中提取得到纯度大于90%的小檗碱,经过条件的优化能进一步得到纯度大于95%的小檗碱。
小檗碱及其盐还可以从天然植物/中药材(如:三颗针、黄连和黄柏)提取的提取物中获得。酸水法是目前提取小檗碱常用的方法,从三颗针中提取小檗碱,常用多倍量的0.3%硫酸水溶液浸泡24h,过滤后滤液用石灰乳调pH值至12,经过滤的滤液用盐酸调pH值到2-3,再加入6%左右的精制食盐,使食盐完全溶解,放置过夜,抽滤得盐酸小檗碱(中药化学,山东科学技术出版社,1997)。或用0.5%的硫酸水溶液冷浸提取,提取液pH值调至7,滤液浓缩后pH值再调至2-3,再加入6%左右的食盐并过滤,将沉淀溶于热水,将pH调至8.5-9后过滤,滤液再调pH值到2-3,放冷过滤得盐酸小檗碱(天然药物化学,人民卫生出版社,2003)。在小檗碱提取过程中,提取工艺的条件,如:pH值、酸用量、水用量和温度等,对提高产物的提取率有一定影响(天然产物研究与开发,1998,10,62;广东药学院学报,1996,12,261;怀化医专学报,2004,3,26;海峡药学,1999,11,100;时珍国医国药,2001,12,982)。廖自基等人采用硫酸液浸泡,加入氯化钠、氯化锌沉降浓集后,再用石灰、强碱除去碱性杂质,用硫化铵除锌及胶体杂质的方法从“十大功劳”中提取黄连素,制得的成品小檗碱含量98.1%,提取率65-69%(中国发明专利申请91105606.8)。乙醇法是另一种小檗碱常用的提取方法,一般包括:投料→提取→蒸发→溶解→洗涤→精制→成品等多个步骤。将中药材(如:黄连或黄柏)用热乙醇浸泡后,将乙醇浓缩液经过滤、加酸、沉淀、放置和过滤等步骤制得盐酸小檗碱。或于乙醇中回流30min后静置,反复多次后合并滤液,减压除去乙醇,加酸液后过滤冷却制得盐酸小檗碱。黄连用9倍体积50%乙醇,60℃提取两次,能使小檗碱提取率为91%以上,平均回收率为97.38%(山东农业生物学报,2004,6,502-505)。当提取工艺采用:6倍量80%乙醇,乙醇中硫酸加入量为0.25%,提取时间为1.5h/次,提取次数为3次时,制备所得盐酸小檗碱精制品含量在90%以上(中国药房,2004,15,18)。
小檗碱的碱提取法中,最常用的是石灰乳法,如:黄柏粗粉中加入石灰乳搅拌均匀,常法装渗漉桶,加入饱和石灰水浸泡6h后渗漉(pH值在10以上),收集渗漉液,加入渗漉体积7%(质量浓度)的固体食盐,搅拌后放置过夜,过滤,沉淀,用热水溶解再过滤。滤液加酸调pH值至2,放置过夜,过滤,沉淀用蒸馏水洗至中性,抽干后于80℃下干燥,即得盐酸小檗碱。在比较几种提取方法如:酸水法、石灰乳法和乙醇提取法等,并加以改进后,证明石灰乳法提取效率优于其他方法(基层中药杂志,2000,14,27-29)。
当单独使用超声波(海峡药学,1999,11,100-101;中医药学报,2004,32,29-30;中成药,2004,26,186-189;时珍国医国药,2005,16,374-375)、微波(数理医药学杂志,2002,15,88-89;化工进展,2003,22,1338-1341;光谱实验室,2006,23,526-529)和酶法(中草药,1994,25,123;应用化工,2006,35,373-374)等方法提取小檗碱,或与酸水法、碱提法和醇提法等方法相结合提取小檗碱时,能大大缩短提取的时间并显著提高小檗碱的提取率。
本发明所述的预防和治疗糖尿病的药物组合物,至少含有知母皂苷B-II和小檗碱两种组分,两种组分总量占组合物的重量百分比为5%-95%。在组合物中增加芒果苷,知母皂苷A-III和知母皂苷B-III中一种或几种组分,可以提高预防和治疗效果。必要的,本发明组合物中还包括各种与所含化合物相适应的药物辅料,以制成制剂,如:但不仅限于,水溶液注射剂、粉针剂、丸剂、散剂、片剂、贴剂、栓剂、乳剂、霜剂、凝胶剂、颗粒剂、胶囊剂、气雾剂、喷雾剂、粉雾剂、缓释剂和控释剂等。这些药用辅料既可以是各种制剂中常规使用的,如:但不仅限于,等渗剂、缓冲液、矫味剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、崩解剂和润滑剂等;也可以是为了与所述物质相适应而选择使用的,如:乳化剂、增溶剂、抑菌剂、止痛剂和抗氧剂等,这类辅料能有效提高组合物所含化合物的稳定性和溶解性或改变化合物的释放速率和吸收速率等,如:使用环糊精增加芒果苷的溶解性(中国发明专利申请200710088853.5),从而改善各种化合物在生物体内的代谢,进而增强组合物的给药效果。此外,还可以为实现特定的给药目的或方式,如:缓释给药、控释给药和脉冲给药等,而使用的辅料,如:但不仅限于,明胶、白蛋白、壳聚糖、聚醚和聚酯类高分子材料,如:但不仅限于,聚乙二醇、聚氨酯、聚碳酸酯及其共聚物等。
在水溶液注射剂中,除知母皂苷A-III、B-II、B-III、芒果苷和小檗碱五种组分外,辅料一般包括等渗剂和缓冲液,以及必要的乳化剂(如:Tweeen-80、Pluronic和Poloxamer等)、增溶剂和抑菌剂等。此外,还包括含有药学上可接受的其它药用辅料,如:抗氧剂、pH调节剂和止痛剂等。
口服液体制剂,除五种组分外,辅料一般包括溶剂,以及必要的矫味剂、抑菌剂、乳化剂和着色剂等。一种本发明所述预防和治疗糖尿病的药物组合物,含有知母皂苷A-III、B-II、B-III、芒果苷和小檗碱,还包括矫味剂(如:蔗糖)和香精,以及必要的抑菌剂、乳化剂、着色剂和防腐剂等制成口服液。
片剂,除五种组分外,辅料一般包括填充剂(如:淀粉、糖粉、糊精、乳糖、可压性淀粉、微晶纤维素、硫酸钙、磷酸氢钙和甘露醇等)、粘合剂(如:乙醇、淀粉浆、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、明胶溶液、蔗糖溶液和聚乙烯吡咯烷酮的水溶液或醇溶液等)、崩解剂(如:干淀粉、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮和交联羧甲基纤维素钠)和润滑剂(如:硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉、氢化植物油、聚乙二醇4,000、聚乙二醇6,000和月桂醇硫酸镁等)等。一种本发明所述预防和治疗糖尿病的药物组合物,含有知母皂苷A-III、B-II、B-III、芒果苷和小檗碱,还包括填充剂(如:微晶纤维素、乳糖)和润滑剂(如:硬脂酸镁)。所得的片剂硬度好、崩解快、药物溶出快、在水中的溶解度大和生物利用度高。
乳剂,除五种组分外,辅料一般为水、油(如:脂肪酸)、乳化剂,以及必要的防腐剂和矫味剂等。
颗粒剂,除五种组分外,其它辅料与片剂类似,但造粒过程不同。根据需要,将制得的颗粒剂与助流剂混合后装入胶囊即得胶囊剂。
一种本发明所述的预防和治疗糖尿病的药物组合物,主要包含知母皂苷B-II和小檗碱两种组分,两种组分总量占组合物的重量百分比为5%-95%。根据需要可以增加两种组分总量在组合物中的比例,如:为了实现在预防和治疗糖尿病方面更好的效果,所述组合物中,小檗碱占组合物的重量百分比为2%-60%;知母皂苷B-II占组合物的重量百分比为5%-80%。
另一种本发明所述的预防和治疗糖尿病的药物组合物,主要包含知母皂苷B-II、芒果苷和小檗碱三种组分,三种组分总量占组合物的重量百分比为5%-95%。根据需要可以增加三种组分总量在组合物中的比例,如:为了实现在预防和治疗糖尿病方面更好的效果,三种组分总量占组合物的重量百分比通常选择20%-95%,优先选择50-95%。优选的,所述组合物中,小檗碱占组合物的重量百分比为2%-60%;知母皂苷B-II占组合物的重量百分比为5%-80%;芒果苷占组合物的重量百分比为1%-30%。
在预防和治疗糖尿病方面,还可以在组合中同时或单独添加重量百分比为小于10%的知母皂苷A-III和重量百分比小于10%的知母皂苷B-III两种组分。所得的本发明组合物能使生物体糖代谢能力得以更显著的改善,血糖水平为更为稳定。另一种本发明所述的预防和治疗糖尿病的药物组合物,含有知母皂苷A-III、B-II、B-III、芒果苷和小檗碱五种组分,五种组分占组合物的重量百分比为5%-95%。根据需要可以增加五种组分在组合物中的比例,如:为了实现在预防和治疗糖尿病方面更好的效果,五种组分总量占组合物的重量百分比通常选择20%-95%,优先选择50-95%。
本发明组合物还可以使用含有上述五种组分的提取物,根据各个组分的重量百分比含量进行配伍后获得。
知母皂苷A-III提取物从植物或中药材的总知母皂苷中提取获得,提取物中知母皂苷A-III含量大于30%(w/w)。根据需要可以增加知母皂苷A-III的含量,如:增强预防和治疗糖尿病的效果,减少给药剂量和减少给药次数等,知母皂苷A-III提取物中知母皂苷A-III含量一般大于50%(w/w),优先选择大于90%(w/w)。
知母皂苷B-II提取物从植物或中药材的总知母皂苷中提取获得,提取物中知母皂苷B-II含量大于30%(w/w)。根据需要可以增加知母皂苷B-II的含量,如:增强预防和治疗糖尿病的效果,减少给药剂量和减少给药次数等,知母皂苷B-II提取物中知母皂苷B-II含量一般大于50%(w/w),优先选择大于90%(w/w)。
知母皂苷B-III提取物从植物或中药材的总知母皂苷中提取获得,提取物中知母皂苷B-III含量大于30%(w/w)。根据需要可以增加知母皂苷B-III的含量,如:增强预防和治疗糖尿病的效果,减少给药剂量和减少给药次数等,知母皂苷B-III提取物中知母皂苷B-III含量一般大于50%(w/w),优先选择大于90%(w/w)。
知母皂苷A-III、B-II和B-III既可以从植物或中药材的总知母皂苷中分别提取,也可以从植物或中药材的总知母皂苷中共同提取,还可以植物或中药材的总知母皂苷中提取知母皂苷A-III、B-II和B-III之一种或两种,再与其它相应组分的提取物混合而成。本领域技术人员单独或联合使用现有的各种提取技术就能从含有知母皂苷的植物或中药材的总皂苷部位中提取得到能实现预防和治疗糖尿病的效果所需的各种知母皂苷含量的知母皂苷A-III提取物、知母皂苷B-II提取物、知母皂苷B-III提取物以及知母总皂苷提取物。
知母皂苷A-III、B-II和B-III是从植物或中药材的总知母皂苷中共同提取的,知母提取物中知母皂苷A-III、B-II和B-III三个组分的总含量大于50%(w/w),三个组分的总含量优先选择大于90%(w/w)以增强预防和治疗糖尿病的效果,减少给药剂量和减少给药次数等。
芒果苷存在于漆树科植物芒果(Mangifera indica L.)的果实、叶和树皮,以及知母的根茎、地上部分,鸢尾科植物射干(Belamcanda chinensis(L.)DC.)的花和叶等植物中。芒果苷提取物从植物或中药材的总黄酮中提取获得,提取物中芒果苷含量大于60%(w/w),优选大于90%(w/w)。本领域技术人员单独或联合使用现有的各种提取技术就能从含有芒果苷的植物或中药材的总黄酮部位中提取得到能实现预防和治疗糖尿病的效果所需的各种芒果苷含量的芒果苷提取物。
小檗碱提取物从植物或中药材的总生物碱中提取获得,提取物中小檗碱含量大于5%(w/w)。根据需要可以增加小檗碱的含量,如:增强预防和治疗糖尿病的效果,减少给药剂量和减少给药次数等,小檗碱提取物中小檗碱含量一般大于50%(w/w),优先选择大于90%(w/w)。
可用于提取小檗碱的中药材可以为黄柏及其相应植物的部位。此外,还可以选择黄连和三颗针。黄连为毛茛科植物黄连(Coptis chinensis Franch.)、三角叶黄连(Coptisdeltoidea C.Y.Chenget Hsiao)或云连(Coptis teeta Wall.)的根茎。根茎中小檗碱含量5-8%,并含少量的黄连碱、甲基黄连碱、巴马亭、药根碱和木兰花碱等;须根含小檗碱可达5%;黄连叶含小檗碱1.4%-2.9%。因此,黄连是另一种提取小檗碱的重要来源。本领域技术人员单独或联合使用现有的各种提取技术就能从含有小檗碱的植物或中药材的总生物碱部位中提取得到能实现预防和治疗糖尿病的效果所需的各种小檗碱含量的小檗碱提取物。
另一种本发明所述的预防和治疗糖尿病的药物组合物,主要包括小檗碱提取物和知母皂苷B-II提取物。两种提取物中,小檗碱和知母皂苷B-II的总量占组合物的重量百分比为5%-95%。优选的,小檗碱占组合物的重量百分比为2%-60%;知母皂苷B-II占组合物的重量百分比为5%-80%。必要的,组合物中还包括各种药用辅料。为了实现在预防和治疗糖尿病更好的效果、减少给药剂量和减少给药次数等目的,小檗碱和知母皂苷B-II两种组分总量占组合物的重量百分比进一步选择20%-95%,优先选择50-95%。
另一种本发明所述的预防和治疗糖尿病的药物组合物,主要包括小檗碱提取物、知母皂苷B-II提取物和芒果苷提取物组成,三种提取物中,小檗碱、知母皂苷B-II和芒果苷总量占组合物的重量百分比为5%-95%。优选的,小檗碱占组合物的重量百分比为2%-60%;知母皂苷B-II占组合物的重量百分比为5%-80%;芒果苷占组合物的重量百分比为1%-30%。必要的,组合物中还包括各种药用辅料。为了实现在预防和治疗糖尿病更好的效果、减少给药剂量和减少给药次数等目的,小檗碱、知母皂苷B-II和芒果苷三种组分总量占组合物的重量百分比进一步选择20%-95%,优先选择50-95%。
在预防和治疗糖尿病方面,还可以在组合中同时或单独添加知母皂苷A-III提取物和知母皂苷B-III提取物,提取物中所含的知母皂苷A-III占组合物的重量百分比小于10%,所含的知母皂苷B-III占组合物的重量百分比小于10%。所得的本发明组合物能使生物体糖代谢能力得以更显著的改善,血糖水平为更为稳定。另一种本发明所述的预防和治疗糖尿病的药物组合物,主要包括知母皂苷A-III提取物、B-II提取物、B-III提取物、芒果苷提取物和小檗碱提取物组成,五种提取物中,知母皂苷A-III、B-II、B-III、芒果苷和小檗碱占组合物的重量百分比为5%-95%。优选的,知母皂苷A-III、B-II和B-III总量占组合物的重量百分比为5%-80%;芒果苷占组合物的重量百分比为1%-30%;小檗碱占组合物的重量百分比为2%-60%。必要的,组合物中还包括各种药用辅料。为了实现在预防和治疗糖尿病更好的效果、减少给药剂量和减少给药次数等目的,知母皂苷A-III、B-II、B-III、芒果苷和小檗碱五种组分占组合物的重量百分比进一步选择20%-95%,优先选择50-95%。
另一种本发明所述的预防和治疗糖尿病的药物组合物,由知母提取物和黄柏提取物组成,知母提取物占组合物的重量百分比为1%-90%,黄柏提取物占组合物的重量百分比为1%-90%;组合物中含有知母皂苷B-II和小檗碱两种组分,还可以添加知母皂苷A-III、B-III和芒果苷之一种或几种组分,所述各种组分总量占组合物的重量百分比为5%-95%。优选的,本发明组合物,知母皂苷A-III、B-II和B-III总量占组合物的重量百分比为5%-80%,知母皂苷A-III和B-III含量可为零;芒果苷占组合物的重量百分比为1%-30%;小檗碱占组合物的重量百分比为2%-60%。
本领域技术人员可以预见,将含有各种纯度的知母皂苷A-III、B-II和B-III的总皂苷提取物、含有各种纯度芒果苷的总黄酮提取物和含有各种纯度小檗碱的总生物碱提取物互相混合可以得到各种比例关系的组分相组合以实现预防和治疗糖尿病的目的。
本发明所述的预防和治疗糖尿病的药物组合物还可以是从一定重量份的相应植物/中药材中直接提取后制得。
另一种本发明预防和治疗糖尿病的药物组合物,由知母提取物和黄柏提取物组成。其中,知母提取物占组合物的重量百分比为1%-90%,黄柏提取物占组合物的重量百分比为1%-90%。组合物中,含有的知母皂苷B-II和小檗碱三种组分总量为5%-90%。优选的,本发明组合物,知母皂苷B-II占组合物的重量百分比为5%-80%;小檗碱占组合物的重量百分比为2%-60%。
另一种本发明预防和治疗糖尿病的药物组合物,由知母提取物和黄柏提取物组成。其中,知母提取物占组合物的重量百分比为1%-90%,黄柏提取物占组合物的重量百分比为1%-90%。组合物中,含有的知母皂苷B-II、芒果苷和小檗碱三种组分总量为5%-90%。优选的,本发明组合物,知母皂苷B-II占组合物的重量百分比为5%-80%;芒果苷占组合物的重量百分比为1%-30%;小檗碱占组合物的重量百分比为2%-60%。
在预防和治疗糖尿病方面,在增加知母皂苷A-III和B-III两种组分后,所得的本发明组合物能使生物体糖代谢能力得以更显著的改善,血糖水平为更为稳定。另一种本发明预防和治疗糖尿病的药物组合物,由知母提取物和黄柏提取物组成。其中,知母提取物占组合物的重量百分比为1%-90%,黄柏提取物占组合物的重量百分比为1%-90%。组合物中,含有的知母皂苷A-III、B-II、B-III、芒果苷和小檗碱五种组分总量为5%-90%。优选的,本发明组合物,知母皂苷A-III、B-II和B-III总量占组合物的重量百分比为5%-80%,知母皂苷A-III和B-III含量可为零;芒果苷占组合物的重量百分比为1%-30%;小檗碱占组合物的重量百分比为2%-60%。
知母提取物由0.5-9重量份的知母先用10%-95%(v/v)的乙醇提取后,将提取液去乙醇,于大孔树脂上样,用20%-95%(v/v)乙醇洗脱并收集,浓缩洗脱液并去乙醇,调节pH至4-10,以水饱和正丁醇反复萃取后得知母总皂苷提取物,再将萃取后水溶液(母液)的pH值调至中性,再以水饱和正丁醇反复萃取后得知母总黄酮提取物。
优先选择pH9-10以提取知母总皂苷,所得知母总皂苷提取物中,知母皂苷B-II的含量为10%-90%(w/w),通常含有20%-50%(w/w),通过后续分离可以大于90%(w/w)。
知母总黄酮提取物中,芒果苷的含量为5%-90%(w/w),通常含有5%-30%(w/w),通过后续分离可以大于90%(w/w)。
黄柏提取物由1重量份的黄柏先用30%-90%(v/v)的乙醇提取后,将提取液浓缩并去乙醇,于大孔树脂上样,再用65%-95%(v/v)的乙醇洗脱并收集,浓缩后即得总生物碱提取物,其中所含小檗碱≥5%(w/w)。经离子交换、硅胶、Sephadex LH-20和ODS反相色谱之一或几种方法能得到小檗碱含量≥50%(w/w)的总生物碱提取物。纯化所用的大孔树脂,优先选择离子交换与吸附树脂为填料,用含有H+、Na+、K+和Ca+离子的C1-C5醇(如:乙醇)及其溶液洗脱,洗脱液除醇浓缩后即得。
将知母和黄柏混合后共同提取得到本发明组合物,将1重量份的黄柏和0.5-9重量份的知母混合,用50%-95%(v/v)乙醇提取,提取液除醇后于大孔树脂上样,再用65%-80%(v/v)乙醇洗脱,所得洗脱液经除醇、浓缩和干燥后即为本发明组合物,含有的知母皂苷A-III、B-II、B-III、芒果苷和小檗碱五种组分的总量为5%-90%(w/w)。经离子交换树脂、硅胶、Sephadex LH-20和ODS反相色谱之一或几种方法可以将知母皂苷A-III和B-III除去。
必要时,本发明各个组合物中还包括将所述组合物制成各种制剂所需的药用辅料。根据制成各种制剂的实际需要,如:各种组分与辅料的配伍关系、组分之间的配伍关系,以及改善药代动力学和药效学等,对组合物中各个组分的配伍关系进行个例适当调整。
本发明技术方案实现的有益效果:
本发明提供的预防和治疗糖尿病的药物组合物,可显著改善机体的葡萄糖耐受水平,提高机体对葡萄糖的处置能力,抑制α-葡萄糖苷酶,降低随机血糖和空腹血糖。不同的组分组合都有明显的降糖效果,可以适应不同的需要。如组分少的组合可直接由单体成分组合,这时每种组分(成分)含量相对较高;组分多的组合既可由单体成分组合,也可由相应的药材提取物组合,用药材提取物组合时,各组分(成分)含量相对较低,但药材综合利用度高。此外,在小檗碱和知母皂苷B-II两种组分的基础上,增加芒果苷、知母皂苷A-III和知母皂苷B-III之一种或几种组分后,所得组合物的各个单体之间互相协同,从而在预防和治疗糖尿病方面取得更好的综合效果,如:除降低血糖外,还可改善患者的综合机能等。本发明不同的组分组合,可根据预防或治疗的不同阶段和不同目的需要,综合考虑预防和治疗效果、性价比、成本和药材利用等因素取舍。
与发明专利ZL200510110763.2的药物组合物相比,本发明所述预防和治疗糖尿病药物组合物,药味数虽少但药效显著,有效成分明确且含量高,质量容易控制,制备工艺易于产业化,如:制成药物制剂,成本更低,可减轻病人经济负担。
本发明所涉及的术语与其一般概念相同。
所述的“预防”是指在未被临床标准认定的疾病前,各种用于防止疾病发生或发展的手段或措施,包括医学、物理或化学的方法,以阻止和降低疾病各种症状的发生或发展。
所述的“预防糖尿病”是指将本发明组合物用于还未符合“糖尿病”临床指标的,随着时间的延续将慢慢发展成为临床上定义为“糖尿病”的潜在患者,从而改善这些患者对葡萄糖的耐受,促进肌体对糖代谢的能力,增加肌体对胰岛素的敏感性。这类潜在的患者通常患有“代谢综合症(Metabolic Syndrome)”(Annnu.Rev.Nutri.,2005,25,391-406;Annnu.Rev.Med.,2005,56,45-62;Nat.Rev.Drug.Disc.,2006,5,295-309;Nat.Rev.Endocri.,2006,2,335-348),如:肥胖、胰岛素抵制、葡萄糖不耐受、高血压、动脉硬化证(antherosclerosis)、血脂异常症(dyslipidemia)(即血液中的甘油三酯水平偏高,高密度脂蛋白同时偏低)等。
所述“治疗”是指为了阻止和降低疾病的发生或发展,使疾病病程的发展或加重得以抑制、遏制、减轻、改善、减缓、停止、延迟或反转,所描述的保持和/或用药时的疾病的、紊乱的或病理学状态的各种指标包括减轻或减少症状或并发症,或治愈或消除疾病、紊乱或状况。
所述的“治疗糖尿病”是指将本发明组合物用于临床诊断为“糖尿病”的患者,改善这些患者对葡萄糖的耐受,促进肌体对糖代谢的能力,增加肌体对胰岛素的敏感性。进而使得患者的餐后和空腹血糖得以控制在正常的水平。由于对葡萄糖代谢的能力得以提高,从而减缓了因长期高血糖而产生的各种心血管疾病、慢性肾衰竭、视网膜病变、神经病变及微血管病变的发生和发展。
所述的“预防和治疗糖尿病更好的效果、减少给药剂量和减少给药次数,知母皂苷A-III、B-II、B-III、芒果苷和小檗碱五种组分占组合物的重量百分比进一步选择20%-95%,优先选择50-95%”是指在有效治疗剂量的前提下,将本发明组合物基于不同的患者的需要而使用不同的用药量,如:本领域技术人员所熟知的实验用小鼠、实验用大鼠和人之间的给药倍数关系;实验用兔和人之间的给药倍数关系;以及实验用狗和人之间的给药倍数关系等。本发明组合物在五种组分含量较低的情况下,如:5%-15%(w/w),一天多次(3次以上)或长期给药后,患者仍能表现出对随机血糖和空腹血糖显著下降,机体对葡萄糖的代谢能力显著提高。根据患者重量换算关系而确定给药量,当给药对象从实验动物转换到人时,本组合物的实际用量将显著增加,因此需要将组合物中的五种组分含量略微增加减少服药的数量,如:20-50%(w/w)亦或更高。或因为缓释、控释或脉冲给药的需要,单剂量药物组合物中,需要将本发明所含有的五种组合物含量提高,如:20-50%(w/w)亦或更高。
所述的“有效治疗剂量”指能减缓各种病理学意义上的症状而使用本发明组合物的量。本发明组合物的特定剂量需要根据具体的情况加以确定,如:给药的方式、给药途径、给药时患者的状态以及在治疗时的病理学状况等。
所述的“患者”指人、野生动物和家畜(Livestock)。野生动物为自然状态下未经人工驯化的动物。家畜是为了提供食物来源而人工饲养的动物,如:狗、鼠、仓鼠、猪、兔、奶牛、水牛、公牛、绵羊、山羊、鹅和鸡等。给予治疗的“患者”优先选择哺乳动物,尤其是人。
所述的“C1-C5醇”指直连或支链的饱和一元醇,如:甲醇、、乙醇、正丙醇、异丙醇或正丁醇等;或直连或支链的不饱和一元醇,如:丙烯醇;或直连或支链的饱和多元醇,如:乙二醇、1,3-丙二醇或丙三醇等。其中,字母C表示碳原子,其后数字为正整数,如:1、2、3、4或5等,表示基团所含的碳原子个数。
附图说明
图1表示知母黄柏不同组分组合物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性。
图2表示知母黄柏对GK糖尿病大鼠随机血糖的影响,图中,与正常组比:##P<0.01;与模型组比:*P<0.05,**P<0.01;
图3表示知母黄柏对GK糖尿病大鼠空腹血糖的影响,图中,与正常组比:##P<0.01;与模型组比:*P<0.05,**P<0.01;
图4表示知母黄柏对GK糖尿病大鼠葡萄糖耐量的影响,图中,与正常组比:##P<0.01;与模型组比:*P<0.05,**P<0.01。
具体实施方式
以下结合附图详细描述本发明的技术方案。本发明实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制,尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的精神和范围,其均应涵盖在本发明的权利要求范围中。
本发明所用的试剂若未明确指明,则均购自于西格玛-奥德里奇(Sigma-Aldrich)。
实施例1 知母皂苷A-III、B-II和B-III含量测定
色谱柱:DiamonsilTM C18(200mm×4.6mm,5μm)。柱温:25℃,流速1.0ml/min。ELSD检测器,漂移管温度110℃,雾化气体流速2.6SPLM。进样量20μl。
流动相A:乙腈;流动相B:0.5%甲酸水溶液;以30%流动相B平衡,30分钟线性梯度洗脱,90%流动相B终止。
分别精密称取知母皂苷A-III、B-II和B-III标准品各25.0mg置10ml量瓶中,加甲醇适量,超声处理使溶解,放冷,加甲醇稀释至刻度,摇匀,再配置成1.0mg/ml知母皂苷B-II、B-III对照品溶液和1.0mg/ml知母皂苷A-III对照品溶液,备用。
精密称取知母总皂苷提取物25mg,置25ml容量瓶中,加甲醇适量,超声处理使溶解,放冷,加甲醇稀释至刻度,摇匀,再稀释至适当浓度,则为知母总皂苷样品溶液,备用。
精密称取知母、黄柏提取物组合物50mg,置25ml容量瓶中,加甲醇适量,超声处理使溶解,放冷,加甲醇稀释至刻度,再稀释至适当浓度,摇匀,则为样品溶液,备用。
分别取样品和对照品溶液20ml。注入高效液相色谱仪,根据各个物质的标准曲线,按相应的计算方法计算样品中三个皂苷的含量。
为了确定知母总皂苷提取物的结构,可以收集相应洗脱液后通过质谱确定,或直接通过液质连用确定分子量,配合核磁检测具体化合物结构。
实施例2 芒果苷含量测定
色谱柱:迪马公司DiamonsilRC18柱(250mm×4.6mm,5μm);柱温为20℃。
流动相:乙腈-水(15∶85,v/v),(磷酸调pH=3.0);流速:1ml/min;进样量20μL。
检测波长:254nm。
精密称取芒果苷对照品6.3mg,置25ml量瓶中,加甲醇适量,超声处理使溶解,放冷,加甲醇稀释至刻度,摇匀,配置成0.252mg/ml芒果苷对照品溶液,备用。
精密称取知母总黄酮提取物10mg,置25ml容量瓶中,加甲醇适量,超声处理使溶解,放冷,加甲醇稀释至刻度,摇匀,再稀释至适当浓度,则为知母总黄酮样品溶液,备用。
精密称取知母、黄柏提取物组合物10mg,置25ml容量瓶中,加甲醇适量,超声处理使溶解,放冷,加甲醇稀释至刻度,摇匀,再稀释至适当浓度,则为组合物样品溶液,备用。
分别取样品和对照品溶液20ml。注入高效液相色谱仪,根据各个物质的标准曲线,按相应的计算方法计算样品中芒果苷的含量。
为了确定芒果苷提取物的结构,可以收集相应洗脱液后通过质谱确定,或直接通过液质连用确定分子量,配合核磁检测具体化合物结构。
实施例3 小檗碱含量测定
高效液相色谱仪:Agilent 1100系统;杭州英谱色谱工作站。
色谱柱:DiamonsilTMC18(250mm×4.6mm,5μm);柱温为20℃;进样量20μl。
流动相:水-乙腈-冰醋酸-三乙胺(67∶33∶0.3∶0.8,v/v),检测波长:345nm;流速:1ml/min。
精密称取盐酸小檗碱10.0mg置25ml量瓶中,加甲醇溶解定容至刻度,配置成400μg/ml储备液,精密吸取小檗碱储备液0.5ml,加甲醇溶解并定容至10ml,制成1ml含小檗碱20μg的对照品溶液。
精密称取黄柏提取物10mg,置25ml容量瓶中,加甲醇适量,超声处理使溶解,放冷,加甲醇稀释至刻度,摇匀,再稀释至适当浓度,则为黄柏提取物样品溶液,备用。
精密称取知母、黄柏提取物组合物20mg,置25ml容量瓶中,加甲醇适量,超声处理使溶解,放冷,加甲醇稀释至刻度,再稀释至适当浓度,摇匀,则为组合物样品溶液,备用。
分别取样品和对照品溶液20ml。注入高效液相色谱仪,根据各个物质的标准曲线,按相应的计算方法计算样品中小檗碱的含量。
为了确定小檗碱提取物的结构,可以收集相应洗脱液后通过质谱确定,或直接通过液质连用确定分子量,配合核磁检测具体化合物结构。
实施例4 知母提取物的制备
100公斤知母药材,经粉碎后,投入提取罐中,在80-90℃条件下依次用70%(v/v)乙醇800升加热提取3次,每次提取时间为90分钟,合并三次提取液,浓缩至80升,过滤。将所得滤液用蒸馏水调节至160升,缓缓通过有150升D101型大孔树脂的吸附柱,然后用200升蒸馏水淋洗除去杂质,再用400升30%(v/v)乙醇洗脱,收集洗脱液,浓缩除醇后再浓缩至50升,以NaOH调节pH至5,以水饱和的正丁醇35升萃取3次,合并萃取液,浓缩至干。将浓缩所得固体粉碎后得浅黄色粉末,作为提取物1;再用400升90%(v/v)乙醇洗脱大孔树脂,收集洗脱液,浓缩除醇,加水至50升,以水饱和正丁醇35升萃取3次,合并萃取液,浓缩至干。将浓缩所得固体粉碎后得浅黄色粉末,作为提取物2。
合并提取物1与提取物2混合均匀,即为知母提取物。采用正、反相硅胶、Sephadex等手段分离并经核磁鉴定为知母皂苷A-III、B-II和B-III,具体数据如下:
13C-NMR数据(100MHz,in C5D5N,ppm)
编号 | 知母皂苷A-III | 知母皂苷B-II | 知母皂苷B-III |
C-1 | 30.9 | 30.8 | 30.9 |
2 | 26.8 | 27.0 | 26.9 |
3 | 75.2 | 75.2 | 75.1 |
4 | 30.9 | 30.9 | 30.9 |
5 | 36.9 | 36.9 | 36.9 |
6 | 26.4 | 27.0 | 26.8 |
7 | 26.4 | 26.8 | 26.8 |
8 | 35.3 | 35.5 | 35.1 |
9 | 40.3 | 40.3 | 40.1 |
10 | 35.3 | 35.3 | 35.2 |
11 | 21.2 | 21.2 | 21.2 |
12 | 40.3 | 40.5 | 40.0 |
13 | 40.9 | 41.3 | 43.8 |
14 | 56.5 | 56.5 | 54.7 |
15 | 32.2 | 32.4 | 31.3 |
编号 | 知母皂苷A-III | 知母皂苷B-II | 知母皂苷B-III |
16 | 81.4 | 81.2 | 84.5 |
17 | 63.0 | 64.0 | 64.6 |
18 | 16.6 | 16.7 | 14.6 |
19 | 24.0 | 24.0 | 24.0 |
20 | 42.5 | 40.7 | 103.5 |
21 | 14.9 | 16.5 | 11.8 |
采用正、反相硅胶、Sephadex等手段分离并经核磁鉴定为芒果苷,具体数据如下:
13C-NMR{(CD3)SO,100MHz,ppm}:甙元:179.2(羰基),161.8(C-1),107.9(C-2),163.9(C-3),93.4(C-4),156.3(C-4a),150.8(C-4b),102.7(C-5),154.1(C-6),143.8(C-7),108.2(C-8),111.6(C-8a),101.4(C-8b);Glu:81.5(C-1),73.2(C-2),70.7(C-3),70.4(C-4),79.1(C-5),61.6(C-6)。
经HPLC检测,知母提取物中知母皂苷A-III含量为4%(w/w),B-II含量为40%(w/w),知母皂苷B-III含量为8%(w/w),芒果苷含量为18%(w/w)。
实施例5 知母提取物的制备
100公斤知母药材,粉碎,投入提取罐中,在80-90℃条件下依次用40%(v/v)乙醇1000升加热提取2次,每次提取时间为120分钟,合并两次提取液,浓缩至120升,过滤。将所得滤液用蒸馏水调节至200升,缓缓通过有200升ZTC-1型大孔树脂(天津正天成澄清技术有限公司生产)的吸附柱,用400升蒸馏水淋洗除去杂质;再用600升70%(v/v)乙醇洗脱,收集洗脱液,浓缩除醇后再浓缩至50升,以NaOH调节pH至9-10,以水饱和正丁醇50升萃取2次,合并萃取液,浓缩至干。将浓缩所得固体粉碎后得浅黄色粉末,作为提取物1。母液用HCl调pH值至中性,以水饱和正丁醇50升萃取3次,合并萃取液,浓缩至干。将浓缩所得固体粉碎后得浅黄色粉末,为提取物2。
合并提取物1与提取物2混合均匀,即为知母提取物。经HPLC检测,知母提取物中知母皂苷A-III含量为5%(w/w),知母皂苷B-II含量为45%(w/w),知母皂苷B-III含量为10%(w/w),芒果苷含量为15%。
实施例6 黄柏提取物制备
100公斤粉碎后的黄柏药材,以80%(v/v)乙醇600升在80-90℃下提取1.5小时,提取3次,合并提取液,离心,上清液即为上柱样品液。将样品液通入装有50Kg 732*型强酸型离子树脂(上海国药集团生产)的色谱柱中,依次用蒸馏水和500升含0.2M NaOH的60%乙醇洗脱,收集60%乙醇洗脱液,用HCl调节pH值至3,减压浓缩去乙醇,加水定容至200升,加入内装已处理的AB-8大孔吸附树脂100升的吸附柱上,水洗除杂,400升70%(v/v)乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩至干。将所得固体粉碎得黄色粉末,即为本发明的黄柏提取物。采用正、反相硅胶、Sephadex等手段分离并经核磁鉴定为盐酸小檗碱,具体数据如下:
13C-NMR{DMSO-d6,100MHz,ppm}:150,5,149.9,147.8,145.6,143.8,137.6,133.2,130.8,126.9,123.7,121.5,120.6,120.4,108.6,105.6,102.2,62.1,57.2,55.3,26.5。
经HPLC检测,黄柏提取物中小檗碱含量为60%(w/w)。
实施例7 黄柏提取物制备
100公斤粉碎后的黄柏药材,以用量5∶1(溶剂体积∶药材重量)60%(v/v)的乙醇浸润24小时后渗滤提取,收集20倍量渗滤液,即为提取液。提取液减压浓缩并去乙醇,浓缩液离心,用离心所得的上清液上柱。将样品液通入装有D152树脂(西安电力树脂厂生产)的色谱柱中,依次用蒸馏水、15倍量柱体积的50%(v/v)酸性乙醇洗脱,洗脱液低温减压浓缩至干燥,粉碎得黄色粉末,即为本发明的黄柏提取物。经HPLC检测,黄柏提取物中盐酸小檗碱含量为45%(w/w)。
实施例8 知母、黄柏提取物组合物制备
取100Kg知母按实施例4所得的知母总皂苷和知母总黄酮,两者混合,再加入100Kg黄柏药材按实施例6所得的黄柏总生物碱,合并后的粉末打粉,过筛,即得知母、黄柏提取物组合物。经HPLC检测,其中知母皂苷A-III含量为2%(w/w),知母皂苷B-II含量为30%(w/w),知母皂苷B-III含量为7%(w/w),芒果苷含量为10%(w/w),小檗碱含量为20%(w/w)。
实施例9 知母、黄柏提取物组合物制备
50公斤知母、50公斤黄柏药材,粉碎,投入提取罐中,在80-90℃条件下用50%(v/v)乙醇1000升加热提取3次,每次提取时间为120分钟,合并三次提取液,浓缩至100升,过滤,将滤液用蒸馏水调节至150升。再缓缓通过装有150升AB-8型大孔树脂的吸附柱,用300升蒸馏水淋洗除去杂质;再用300升90%(v/v)乙醇洗脱,收集洗脱液,浓缩除醇后再浓缩至50升,以水饱和正丁醇50升萃取3次,合并正丁醇萃取液,浓缩至干,粉碎后得浅黄色粉末9公斤,为知母黄柏提取物。经HPLC检测,提取物中知母皂苷A-III含量为4%(w/w),知母皂苷B-II含量为30%(w/w),知母皂苷B-III含量为8%(w/w),芒果苷含量为10%(w/w),小檗碱含量为15%(w/w)。
实施例10 知母、黄柏提取物组合物制备
60公斤粉碎后的知母、40公斤粉碎后的黄柏药材,混合,以60%(v/v)乙醇500升浸润24小时后渗滤提取,收集2000升渗滤液,即为提取液。提取液减压浓缩到无醇味,加水定容至500升,过滤,滤液即为上柱样品液。将样品液通入装有200升D152树脂的色谱柱中,用200升蒸馏水洗涤树脂,同前面的吸附后残液合并,缓缓通过100升AB-8型大孔树脂吸附。D152树脂以50%的酸性乙醇洗脱,浓缩干燥,得提取物1.AB-8型大孔树脂柱,水洗除杂,70%(v/v)乙醇洗脱,洗脱液减压浓缩,干燥粉碎得淡黄色粉末,得提取物2。合并提取物1、2,即得知母黄柏提取物。经HPLC检测,提取物中知母皂苷A-III含量为3%(w/w),知母皂苷B-II含量为32%(w/w),知母皂苷B-III含量为6%(w/w),芒果苷含量为8%(w/w),小檗碱含量为18%(w/w)。
实施例11:知母黄柏不同组分组合对ICR小鼠糖耐量的影响
知母黄柏不同组分组合分别为:
两种组分:知母皂苷B-II(45%,w/w)+盐酸小檗碱(40%,w/w);
三种组分:知母皂苷B-II(40%,w/w)+芒果苷(15%,w/w)+盐酸小檗碱(30%,w/w);
四种组分:知母皂苷A-III(5%,w/w)+知母皂苷B-II(30%,w/w)+芒果苷(15%,w/w)+盐酸小檗碱(20%,w/w);
五种组分:知母皂苷A-III(4%,w/w)+知母皂苷B-II(30%,w/w)+知母皂苷B-III(8%,w/w)+芒果苷(10%,w/w)+盐酸小檗碱(15%,w/w)。
试验中,ICR小鼠随机分为空白对照组、两种组分组、三种组分组、四种组分组、五种组分组和阳性药物拜唐苹组。ICR小鼠禁食不禁水12小时后,分别灌胃给予上述样品及蔗糖(2.5g/kg),并测定给糖后0、30、60、120min的血糖值,同时计算给糖后各时间点血糖曲线下面积,试验结果见表1。
表1 知母黄柏不同组分对对ICR小鼠糖耐量的影响
与空白对照组比:*p<0.05。
试验表明:知母黄柏不同组分组合均能有效降低ICR小鼠给糖后的血糖,各组分组合的血糖曲线下面积与空白对照组相比有显著性差异。
实施例12:知母黄柏不同组分组合对α-葡萄糖苷酶的抑制活性
知母黄柏不同组分组合分别为:
两种组分:知母皂苷BII+盐酸小檗碱;
三种组分:知母皂苷BII+芒果苷+盐酸小檗碱;
四种组分:知母皂苷AIII+知母皂苷BII+芒果苷+盐酸小檗碱;
五种组分:知母皂苷AIII+知母皂苷BII+知母皂苷BIII+芒果苷+盐酸小檗碱,以上各种组合物中的各组分含量同实施例11。
体外测定知母黄柏不同组分组合对α-葡萄糖苷酶的抑制活性。以拜唐苹为阳性对照药物。实验反应体系为67mM磷酸盐缓冲液(pH=6.8)145μl,0.5mg/mlα-葡萄糖苷酶5μl,不同浓度的样品溶液20μl,0.029M 4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷10μl。37℃孵育10min,加入100μl 1MNa2CO3终止反应,405nm检测在酶的作用下释放出对硝基苯酚量,计算不同样品的IC50值,试验结果见表2和图1。
试验表明:知母黄柏不同组分组合对α-葡萄糖苷酶均具有显著抑制活性。
表2 知母黄柏不同组分组合对α-葡萄糖苷酶的抑制活性
实施例13 知母黄柏提取物对GK糖尿病大鼠随机血糖的影响
GK糖尿病大鼠随机分为模型组、罗格列酮组、知母黄柏组(其中知母皂苷A-III含量为4%,知母皂苷B-II含量为30%(w/w),知母皂苷B-III含量为8%(w/w),芒果苷含量为10%(w/w),小檗碱含量为15%(w/w))以及知母黄柏肉桂组(根据中国发明专利ZL200510110763.2公开的方法制备)。正常组为Wistar大鼠。试验期间,知母黄柏组,知母黄柏肉桂组分别给予知母黄柏、知母黄柏肉桂提取物,每日一次,剂量为200mg/kg。每周测定随机血糖,试验结果见表3和图2。
表3 知母黄柏对GK糖尿病大鼠随机血糖的影响
与正常组比:##P<0.01;与模型组比:*P<0.05,**P<0.01。
试验表明:知母黄柏能有效地降低GK大鼠的随机血糖。连续给予2周后,知母黄柏和知母黄柏肉桂组GK大鼠的随机血糖明显下降,与模型组相比呈显著性差异。知母黄柏组与知母黄柏肉桂组降血糖效果无显著性差异。
实施例14 知母黄柏对GK糖尿病大鼠空腹血糖的影响
GK糖尿病大鼠随机分为模型组、罗格列酮组、知母黄柏组(其中知母皂苷A-III含量为4%(w/w),知母皂苷B-II含量为30%(w/w),知母皂苷B-III含量为8%(w/w),芒果苷含量为10%(w/w),小檗碱含量为15%(w/w)),以及知母黄柏肉桂组(根据中国发明专利ZL200510110763.2公开的方法制备),正常组为Wistar大鼠。试验期间,知母黄柏组,知母黄柏肉桂组分别给予知母黄柏、知母黄柏肉桂提取物,每日一次,剂量为200mg/kg。每周测定空腹血糖,试验结果见表4和图3。
表4 知母黄柏对GK糖尿病大鼠空腹血糖的影响
与正常组比:##P<0.01;与模型组比:*P<0.05,**P<0.01
试验表明:知母黄柏能有效地降低GK大鼠的空腹血糖,知母黄柏和知母黄柏肉桂组给药第3、4周血糖明显降低,与模型组相比有显著差异(P<0.01)。知母黄柏组与知母黄柏肉桂组降血糖效果无显著性差异。
实施例15知母黄柏提取物对GK糖尿病大鼠葡萄糖耐量的影响
GK糖尿病大鼠随机分为模型组、罗格列酮组、知母黄柏组(其中知母皂苷A-III含量为4%,知母皂苷B-II含量为30%(w/w),知母皂苷B-III含量为8%(w/w),芒果苷含量为10%(w/w),小檗碱含量为15%(w/w))、知母黄柏肉桂组(根据中国发明专利ZL200510110763.2公开的方法制备),正常组为Wistar大鼠。试验期间,知母黄柏组、知母黄柏肉桂组分别给予知母黄柏、知母黄柏肉桂提取物,每日一次,剂量为200mg/kg。给药四周后进行口服葡萄糖耐量试验,结果见图4。
试验表明:知母黄柏能有效改善GK糖尿病大鼠的葡萄糖不耐受,提高机体对葡萄糖的处置能力,知母黄柏和知母黄柏肉桂组在糖负荷60、90和120min后,显著降低GK糖尿病大鼠血糖,与模型组相比,具有显著性差异(P<0.05)。知母黄柏组与知母黄柏肉桂组对GK糖尿病大鼠的口服葡萄糖耐量无显著性差异。
Claims (17)
1.一种预防和治疗糖尿病的药物组合物,其特征在于包括知母皂苷B-II和小檗碱两种组分,所述两种组分总量占组合物的重量百分比为5%-95%。
2.根据权利要求1所述的预防和治疗糖尿病的药物组合物,其特征在于所述组合物还包括芒果苷、知母皂苷A-III和知母皂苷B-III之一种或几种组分。
3.一种预防和治疗糖尿病的药物组合物,其特征在于主要包括知母皂苷B-II提取物和小檗碱提取物;所述两种提取物中,知母皂苷B-II和小檗碱总量占组合物的重量百分比为5%-95%。
4.根据权利要求3所述的预防和治疗糖尿病的药物组合物,其特征在于所述组合物还包括芒果苷提取物、知母皂苷A-III提取物和知母皂苷B-III提取物之一种或几种组分。
5.一种预防和治疗糖尿病的药物组合物,其特征在于由知母提取物和黄柏提取物组成,组合物中含有的知母皂苷B-II和小檗碱两种组分总量占组合物的重量百分比为5%-95%;其中,
所述知母提取物由0.5-9重量份的知母先用10%-95%,v/v的乙醇提取后,将提取液去乙醇,于大孔树脂上样,用20%-95%,v/v乙醇洗脱并收集,浓缩洗脱液并去乙醇,调节pH至4-10,以水饱和正丁醇反复萃取后得知母皂苷B-II重量百分比为10%-90%知母总皂苷提取物;
所述黄柏提取物由1重量份的黄柏先用10%-90%,v/v的乙醇提取后,将提取液浓缩并去乙醇,于大孔树脂上样,再用20%-95%,v/v的乙醇洗脱并收集,浓缩后制得,其中所含小檗碱的重量百分比为5%-90%。
6.根据权利要求5所述的预防和治疗糖尿病的药物组合物,其特征在于所述组合物还包括芒果苷提取物;其中,
所述知母提取物由0.5-9重量份的知母先用10%-95%,v/v的乙醇提取后,将提取液去乙醇,于大孔树脂上样,用20%-95%,v/v乙醇洗脱并收集,浓缩洗脱液并去乙醇,调节pH至4-10,以水饱和正丁醇反复萃取后得知母皂苷B-II重量百分比为10%-90%知母总皂苷提取物,再将萃取后水溶液的pH值调至中性,再以水饱和正丁醇反复萃取后得芒果苷重量百分比为5%-90%知母总黄酮提取物。
7.根据权利要求6所述的预防和治疗糖尿病的药物组合物,其特征在于所述组合物含有的芒果苷占组合物的重量百分比为1%-30%。
8.根据权利要求5或6所述的预防和治疗糖尿病的药物组合物,其特征在于所述黄柏提取物中使用的大孔树脂为离子交换与吸附树脂。
9.一种预防和治疗糖尿病的药物组合物,其特征在于由知母提取物和黄柏提取物组成,将1重量份的黄柏和0.5-9重量份的知母混合,用10%-95%,v/v乙醇提取,提取液除醇后于大孔树脂上样,再用20%-95%,v/v乙醇洗脱,所得洗脱液经除醇、浓缩和干燥后的产物含有的知母皂苷B-II和小檗碱两种组分的总量为5%-95%。
10.根据权利要求9所述的预防和治疗糖尿病的药物组合物,其特征在于所述组合物中还包括芒果苷。
11.根据权利要求5、6、7、9或10所述的预防和治疗糖尿病的药物组合物,其特征在于所述的知母提取物占组合物的重量百分比为1%-90%。
12.根据权利要求5、6、7、9或10所述的预防和治疗糖尿病的药物组合物,其特征在于所述的黄柏提取物占组合物的重量百分比为1%-90%。
13.根据权利要求1-7和9-10之一所述的预防和治疗糖尿病的药物组合物,其特征在于所述组合物含有的知母皂苷B-II占组合物的重量百分比为5%-80%。
14.根据权利要求1-7和9-10之一所述的预防和治疗糖尿病的药物组合物,其特征在于所述组合物含有的小檗碱占组合物的重量百分比为2%-60%。
15.根据权利要求1-7和9-10之一所述的预防和治疗糖尿病的药物组合物,其特征在于所述小檗碱还包含小檗碱药学上可接受的盐。
16.根据权利要求15所述的预防和治疗糖尿病的药物组合物,其特征在于所述的盐为盐酸盐或硫酸盐。
17.一种预防和治疗糖尿病的制剂,包含权利要求1-16之一所述的预防和治疗糖尿病的药物组合物。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 201010022822 CN101744978B (zh) | 2010-01-14 | 2010-01-14 | 预防和治疗糖尿病的药物组合物 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 201010022822 CN101744978B (zh) | 2010-01-14 | 2010-01-14 | 预防和治疗糖尿病的药物组合物 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101744978A true CN101744978A (zh) | 2010-06-23 |
CN101744978B CN101744978B (zh) | 2013-07-17 |
Family
ID=42472993
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN 201010022822 Active CN101744978B (zh) | 2010-01-14 | 2010-01-14 | 预防和治疗糖尿病的药物组合物 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN101744978B (zh) |
Cited By (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103191289A (zh) * | 2013-04-08 | 2013-07-10 | 广州中医药大学 | 知母黄柏药对中四种有效部位的同步制备方法及其应用 |
CN105338993A (zh) * | 2013-04-23 | 2016-02-17 | 庆熙大学校产学协力团 | 含复合提取物的用于预防、改善或治疗大肠炎的组合物 |
CN105663626A (zh) * | 2016-03-04 | 2016-06-15 | 广东药学院 | 一种知母有效部位及其制备方法和应用 |
CN106551943A (zh) * | 2015-09-30 | 2017-04-05 | 中国科学院上海药物研究所 | 含有螺甾烷化合物的组合物及其用途 |
CN107184590A (zh) * | 2016-03-14 | 2017-09-22 | 中国科学院上海药物研究所 | 含小檗碱和知母皂苷的组合物及其应用 |
CN107991416A (zh) * | 2018-01-26 | 2018-05-04 | 江苏省中医院 | 具有治疗急慢性肾盂肾炎和前列腺增生功效的中药复方的质量检测方法 |
CN108378987A (zh) * | 2018-03-22 | 2018-08-10 | 曹洪乾 | 消渴膏 |
CN110025717A (zh) * | 2019-05-20 | 2019-07-19 | 上海中医药大学 | 知母皂苷酶解转化物在制备抑制皮肤浅表真菌药物中的应用 |
CN114288296A (zh) * | 2022-01-27 | 2022-04-08 | 浙江省中医药研究院 | 药物组合物及其在制备抗骨质疏松药物中的应用 |
CN114306498A (zh) * | 2022-01-19 | 2022-04-12 | 宝莱福健康科技研究(中山)有限公司 | 一种防治糖尿病的组合物制备方法及其应用 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN100427500C (zh) * | 2004-04-29 | 2008-10-22 | 中国人民解放军军事医学科学院放射医学研究所 | 知母皂苷bⅱ的制备方法 |
CN101229181A (zh) * | 2006-09-12 | 2008-07-30 | 徐广爱 | 具有糖尿病及其并发症治疗作用的药物组合物 |
CN101307090B (zh) * | 2007-05-16 | 2011-04-13 | 中国科学院上海药物研究所 | 知母皂苷bⅲ的制备方法及其用途 |
CN101062249B (zh) * | 2007-05-22 | 2010-05-19 | 中国人民解放军第二军医大学 | 知母提取物与黄柏提取物的组合物及其用途 |
-
2010
- 2010-01-14 CN CN 201010022822 patent/CN101744978B/zh active Active
Cited By (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103191289A (zh) * | 2013-04-08 | 2013-07-10 | 广州中医药大学 | 知母黄柏药对中四种有效部位的同步制备方法及其应用 |
CN105338993A (zh) * | 2013-04-23 | 2016-02-17 | 庆熙大学校产学协力团 | 含复合提取物的用于预防、改善或治疗大肠炎的组合物 |
CN106551943B (zh) * | 2015-09-30 | 2021-09-10 | 中国科学院上海药物研究所 | 含有螺甾烷化合物的组合物及其用途 |
CN106551943A (zh) * | 2015-09-30 | 2017-04-05 | 中国科学院上海药物研究所 | 含有螺甾烷化合物的组合物及其用途 |
CN105663626A (zh) * | 2016-03-04 | 2016-06-15 | 广东药学院 | 一种知母有效部位及其制备方法和应用 |
CN107184590A (zh) * | 2016-03-14 | 2017-09-22 | 中国科学院上海药物研究所 | 含小檗碱和知母皂苷的组合物及其应用 |
CN107991416A (zh) * | 2018-01-26 | 2018-05-04 | 江苏省中医院 | 具有治疗急慢性肾盂肾炎和前列腺增生功效的中药复方的质量检测方法 |
CN107991416B (zh) * | 2018-01-26 | 2020-10-09 | 江苏省中医院 | 具有治疗急慢性肾盂肾炎和前列腺增生功效的中药复方的质量检测方法 |
CN108378987A (zh) * | 2018-03-22 | 2018-08-10 | 曹洪乾 | 消渴膏 |
CN110025717A (zh) * | 2019-05-20 | 2019-07-19 | 上海中医药大学 | 知母皂苷酶解转化物在制备抑制皮肤浅表真菌药物中的应用 |
CN110025717B (zh) * | 2019-05-20 | 2022-02-08 | 上海中医药大学 | 知母皂苷酶解转化物在制备抑制皮肤浅表真菌药物中的应用 |
CN114306498A (zh) * | 2022-01-19 | 2022-04-12 | 宝莱福健康科技研究(中山)有限公司 | 一种防治糖尿病的组合物制备方法及其应用 |
CN114288296A (zh) * | 2022-01-27 | 2022-04-08 | 浙江省中医药研究院 | 药物组合物及其在制备抗骨质疏松药物中的应用 |
CN114288296B (zh) * | 2022-01-27 | 2022-11-29 | 浙江省中医药研究院 | 药物组合物及其在制备抗骨质疏松药物中的应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN101744978B (zh) | 2013-07-17 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101744978B (zh) | 预防和治疗糖尿病的药物组合物 | |
CN102138966A (zh) | 藏茵陈提取物及其制备方法、药物组合物和用途 | |
CN102397372A (zh) | 一种药物组合物及制剂和其在治疗肠易激综合征中的应用 | |
CN101757073A (zh) | 含有苍术提取物的药物组合物 | |
CN101953866A (zh) | 一种白背三七总黄酮的制备方法及应用 | |
CN101057890B (zh) | 一种治疗冠心病的中药组合物及其制备方法、制剂和其应用 | |
CN101156915B (zh) | 预防及治疗糖尿病的中药有效部位组合物及其制备和应用 | |
CN1977889A (zh) | 一种由黄芪、丹参和苦参素制成的药物组合物及其制备方法 | |
CN101474275B (zh) | “痛泻要方”中药提取物的制备方法和用途 | |
CN101890063B (zh) | 一种中药降血糖药及其制备方法 | |
CN101549010B (zh) | 一种补骨脂总苷提取物的制备方法及应用 | |
CN101199735A (zh) | 一种治疗儿童多动综合征的药物组合物及其制备方法 | |
CN101411779B (zh) | 一种治疗肝癌的中药有效部位组合物及其制备方法 | |
CN103432420B (zh) | 一种治疗糖尿病的中药组合物及其制备方法和检测方法 | |
CN1903236A (zh) | 具有抗糖尿病活性的药物组合物 | |
CN101249129B (zh) | 一种治疗糖尿病的中药提取物组合物及其医药用途 | |
CN101757091B (zh) | 治疗口腔溃疡的提取物组合制剂及其制备方法 | |
CN100998784B (zh) | 一种治疗胃肠疾病中药组合物的制备方法 | |
CN101234103B (zh) | 一种白芷总香豆素组合物 | |
CN1970001B (zh) | 一种苦参素、五味子和人参配伍的治疗肝炎的药物组合物 | |
CN100355440C (zh) | 治疗ⅱ型糖尿病、降低血糖的中药复方制剂及其制备方法 | |
CN114366771B (zh) | 一种防治高尿酸血症的中药组合物、制剂、方法及应用 | |
CN115105480B (zh) | 一种藿香正气片及其制备方法 | |
CN115429790B (zh) | 异黄酮类化合物在制备预防或治疗酒精性肝损伤或解酒保肝的药物中的用途 | |
CN114796417B (zh) | 一种降血糖中药组方及其制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant |