CN101703567A - 提高畜禽免疫力的中药组合物的制备方法及其应用 - Google Patents

Abstract

一种提高畜禽免疫力的中药组合物的制备方法，涉及一种中药组合物；所述制备方法包含如下步骤：取刺五加经过粉碎过目，加乙醇动态浸渍，回流提取，上清液减压回收乙醇至无醇味，加低浓度乙醇制成生药，离心，上清液加于大孔吸附树脂柱上，用水洗脱反应阴性，依次乙醇乙醇洗脱，收集乙醇、乙醇洗脱部位，合并得刺五加总苷；取黄芪，连同乙醇提取后刺五加药渣混合，滤过，滤液回收乙醇得总多糖；将刺五加总苷与总多糖合并，灌装，灭菌制成注射液；本发明采用醇提法和水提法相结合的技术方案提取刺五加总苷、刺五加多糖和黄芪多糖；将刺五加总苷、刺五加及黄芪总多糖加入赋形剂，经过常规工序或加入药物可接受的赋形剂制成临床可接受的剂型。

Description

提高畜禽免疫力的中药组合物的制备方法及其应用

【技术领域】

本发明涉及一种中药组合物，尤其是涉及一种可有效提高畜禽免疫力的中药组合物的制备方法及其应用。

【背景技术】

目前，随着畜禽生产规模化和产业化，养殖集约化程度越来越高，应激综合症发生率不断上升。在畜禽生产过程中，转群、运输、捕捉、接种免疫等工作中都难免会出现应激反应、免疫力下降。

如蛋鸡在夏季高温季节是养鸡生产最困难的时期，气温高于33℃时，蛋鸡的正常生产受到严重影响，产蛋率下降，死亡率和鸡蛋破损率上升。

再如仔猪断奶是一个复合应激过程，包括仔猪与母猪隔离、新群体的形成、从吃母乳转为饲料、环境小气候改变等因素。断奶引起的应激较强，常常伴有消化系统紊乱、免疫功能下降、严重腹泻、生长停滞、甚至死亡，给生产上造成巨大经济损失。所以研究克服上述问题成为制药行业和饲养户的专注方向之一。

中草药刺五加为五加科植物，刺五加的干燥根、根茎或茎，具有益气健脾，补肾安神的功能。现代药理表明刺五加总苷具类似人参皂苷的生物活性，可改善实验动物的疲劳状态，调节机体应激反应水平；刺五加多糖能增强小鼠对SRBC(羊红细胞)的特异性体液免疫的反应性，表现为脾抗体分泌细胞明显增加；能特异地增强小鼠的细胞免疫功能，表现为迟发型超敏反应性增强，药物对自溶空斑实验(PFC)的免疫增强作用，在12.5～100mg/kg剂量范围内，随剂量增加而增强能增强小鼠体液免疫及细胞免疫的功能。

中草药黄芪，豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，具有补气固表，托毒排脓，敛疮生肌，利尿的功能。现代药理表明黄芪多糖具有增强机体免疫功能、抗病毒的作用。黄芪多糖可用作鸡疫苗的免疫佐剂提高鸡的免疫力，黄芪多糖对鸡传染性喉气管炎具有明显的预防和治疗效果。

目前含有刺五加、黄芪组方主要是针对其中的多糖类成分，多采用水煮醇沉的方法获取其中的多糖类成分，应用于免疫增强、抗病毒、抗肿瘤等方面；而其中的刺五加总苷在提取的过程中由于工艺的原因会损失大部分，甚至会出现一点也未提取出来的现象；所以未能充分利用其中的药效成分，造成了资源的浪费。中国专利CN1424057A公开了刺五加和黄芪两者药材的组合经过水提醇沉，仅获取了刺五加和黄芪粗多糖，而具有抗应激作用的刺五加总苷未得到利用。中国专利CN1285344C公开了刺五加药材利用醇水双提法分别提取刺五加的总苷成分和多糖成分，对总苷类成分采用大孔吸附树脂柱纯化精制，提取物采用水溶解、离心后的上清液经过大孔树脂柱纯化，虽然解决了上提取液中的微粒污染和堵塞大孔树脂柱的问题，但是容易导致部分溶水性较小的苷类成分的损失。

【发明内容】

为了克服背景技术中的不足，本发明提出一种提高畜禽免疫力的中药组合物的制备方法及其应用，本发明所述方法采用醇提法和水提法相结合的技术方案提取刺五加总苷、刺五加多糖和黄芪多糖，醇提物利用大孔吸附树脂纯化得刺五加总苷类成分；水提醇沉法获取刺五加及黄芪总多糖类成分；将刺五加总苷、刺五加及黄芪总多糖加入赋形剂，经过常规工序或加入药物可接受的赋形剂制成临床可接受的剂型.

为了实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案：

一种提高畜禽免疫力的中药组合物的制备方法，包含如下步骤：

①取刺五加，粉碎过10-20目，加8～12倍量60-80％乙醇动态浸渍1小时，回流提取3小时，提取液放置过夜，上清液减压回收乙醇至无醇味，加低浓度乙醇制成1g生药/ml，离心，上清液加于大孔吸附树脂柱上，先用水洗脱至Molisch反应阴性，依次用2～4倍量柱体积的20％-40％乙醇、用4～8倍量柱体积的70％-80％乙醇洗脱，收集20％-40％乙醇、70％-80％乙醇洗脱部位，合并得刺五加总苷；

②取黄芪，切片，连同乙醇提取后刺五加药渣混合，加8～12倍量水动态浸渍2小时，60～80℃真空动态提取4小时，收集提取液，将提取液与步骤①水洗脱液合并浓缩至相对密度1.05-1.1(70℃)，在搅拌下加乙醇，使含醇量达85％，搅拌均匀后于4℃冷藏12至24小时，滤过，沉淀加2-3倍量水溶解，滤过，滤液在搅拌下加乙醇使含醇量达50％，搅拌均匀后于4℃冷藏12至24小时，滤过，滤液回收乙醇得总多糖；

③将步骤①刺五加总苷与步骤②总多糖合并，加入0.01～3％防腐剂，加纯化水至全量10kg，混匀，4℃冷藏12-24小时，滤过，灌装，灭菌制成口服液；或将步骤①、②合并，加入蔗糖、糊精，搅拌均匀，用沸腾干燥制粒机制成10kg颗粒；或将将步骤①刺五加总苷与步骤②总多糖合并，加入蔗糖、糊精，搅拌均匀，制粒，加入0.5～5％硬脂酸镁，压片；或将步骤②得到的总多糖加3～10倍量注射用水沉淀，滤过，滤液与步骤①刺五加总苷合并，加注射用水至约全量，加注射用水至全量10kg，加活性炭0.2％煮沸20min，滤过，灌装，灭菌制成注射液。

本发明提高畜禽免疫力的中药组合物的制备方法，其所述的刺五加总苷的制备采用醇提后，利用大孔吸附树脂分离，所采用的大孔树脂为AB-8、HPD-100、HPD-300、D101等非极性或弱极性大孔吸附树脂。

本发明提高畜禽免疫力的中药组合物的制备方法，其所述的总多糖的制备采用水提法，提取液与刺五加提取物过大孔树脂柱水洗脱液合并后醇沉，收集沉淀得总多糖。

本发明提高畜禽免疫力的中药组合物的制备方法，在制备刺五加总苷时，上大孔树脂柱是样品用低浓度乙醇溶解，离心后再上样，所述的低浓度乙醇为浓度小于10％。

本发明提高畜禽免疫力的中药组合物的制备方法，所述制备组合物颗粒、片剂时，蔗糖与糊精的用量比为2～1∶1。

本发明所述具有免疫增强功能的中药组合物的应用。

本发明所述具有免疫增强功能的中药组合物的应用为注射液。

本发明所述具有免疫增强功能的中药组合物的应用适用于肉蛋鸡、仔猪、鸭及畜禽类。

本发明所述具有免疫增强功能的中药组合物的应用为口服液用量为1～2g兑1kg水、颗粒用量为为1～2g兑1kg水、片剂用量为1片/羽，注射液猪用量为0.1ml/kg、鸭0.1～0.2ml/kg。

由于采用了上述技术方案，本发明具有如下有益效果：

1.醇提法和水提法相结合的技术方案，将刺五加中增强免疫作用的成分刺五加总苷、刺五加多糖同时提取出来。

2.本发明纯化刺五加总苷时提取物用低浓度乙醇溶解，解决了上提取液中的微粒污染和堵塞大孔树脂柱的问题，减少溶水性较小的苷类成分的损失。

【具体实施方式】

实施例1

①取刺五加5kg，粉碎过10目，加10倍量60％乙醇动态浸渍1小时，回流提取3小时，提取液放置过夜，上清液减压回收乙醇至无醇味，加10％乙醇制成1g生药/ml，离心，上清液加于大孔吸附树脂柱上，先用水洗脱至Molisch反应阴性，依次用2倍量柱体积的20％乙醇、4倍量柱体积的80％乙醇洗脱，收集20、80％乙醇洗脱部位，合并得刺五加总苷；

②取黄芪3kg，切片，连同乙醇提取后刺五加药渣混合，加10倍量水动态浸渍2小时，70℃真空动态提取4小时，收集提取液，将提取液与刺五加过大孔树脂柱水洗脱液合并后浓缩至相对密度1.05(70℃)，在搅拌下加乙醇，使含醇量达85％，搅拌均匀后于4℃冷藏12至24小时，滤过，沉淀加2-3倍量水溶解，滤过，滤液在搅拌下加乙醇使含醇量达50％，搅拌均匀后于4℃冷藏12小时，滤过，滤液回收乙醇得总多糖；

③合并刺五加总苷及总多糖，加入山梨酸钾15g，加纯化水至全量10kg，混匀，4℃冷藏12小时，滤过，灌装，灭菌制成口服液。

实施例2

①取刺五加7kg，粉碎过20目，加10倍量70％乙醇动态浸渍1小时，回流提取3小时，提取液放置过夜，上清液减压回收乙醇至无醇味，加5％乙醇制成1g生药/ml，离心，上清液加于大孔吸附树脂柱上，先用水洗脱至Molisch反应阴性，依次用4倍量柱体积的30％乙醇、8倍量柱体积的80％乙醇洗脱，收集30、80％乙醇洗脱部位，合并得刺五加总苷；

②取黄芪4kg，切片，连同乙醇提取后刺五加药渣混合，加10倍量水动态浸渍2小时，≤70℃真空动态提取4小时，收集提取液，将提取液与刺五加过大孔树脂柱水洗脱液合并后浓缩至相对密度1.10(70℃)，在搅拌下加乙醇，使含醇量达85％，搅拌均匀后于4℃冷藏12至24小时，滤过，沉淀加2-3倍量水溶解，滤过，滤液在搅拌下加乙醇使含醇量达50％，搅拌均匀后于4℃冷藏24小时，滤过，滤液回收乙醇得总多糖；

③合并刺五加总苷及总多糖，加入蔗糖-糊精(1∶1)，搅拌均匀，制成10kg颗粒。

实施例3

①取刺五加6kg，粉碎过20目，加12倍量80％乙醇动态浸渍1小时，回流提取3小时，提取液放置过夜，上清液减压回收乙醇至无醇味，加10％乙醇制成1g生药/ml，离心，上清液加于大孔吸附树脂柱上，先用水洗脱至Molisch反应阴性，依次用2倍量柱体积的30％乙醇、6倍量柱体积的70％乙醇洗脱，收集30、70％乙醇洗脱部位，合并得刺五加总苷；

②取黄芪2kg，切片，连同乙醇提取后刺五加药渣混合，加12倍量水动态浸渍2小时，≤70℃真空动态提取4小时，收集提取液，将提取液与刺五加过大孔树脂柱水洗脱液合并后浓缩至相对密度1.08(70℃)，在搅拌下加乙醇，使含醇量达85％，搅拌均匀后于4℃冷藏12至24小时，滤过，沉淀加2-3倍量水溶解，滤过，滤液在搅拌下加乙醇使含醇量达50％，搅拌均匀后于4℃冷藏12小时，滤过，滤液回收乙醇得总多糖；

③合并刺五加总苷及总多糖，加入蔗糖-糊精(2∶1)，搅拌均匀，制粒，加入2％硬脂酸镁，压片，1g/片，制成10kg。

实施例4

①取刺五加7kg，粉碎过10目，加8倍量80％乙醇动态浸渍1小时，回流提取3小时，提取液放置过夜，上清液减压回收乙醇至无醇味，加5％乙醇制成1g生药/ml，离心，上清液加于大孔吸附树脂柱上，先用水洗脱至Molisch反应阴性，依次用2倍量柱体积的40％乙醇、4倍量柱体积的80％乙醇洗脱，收集40、80％乙醇洗脱部位，合并得刺五加总苷；

②取黄芪3kg，切片，连同乙醇提取后刺五加药渣混合，加8倍量水动态浸渍2小时，≤70℃真空动态提取4小时，收集提取液，将提取液与刺五加过大孔树脂柱水洗脱液合并后浓缩至相对密度1.05(70℃)，在搅拌下加乙醇，使含醇量达85％，搅拌均匀后于4℃冷藏12至24小时，滤过，沉淀加2-3倍量水溶解，滤过，滤液在搅拌下加乙醇使含醇量达50％，搅拌均匀后于4℃冷藏12小时，滤过，滤液回收乙醇得总多糖；

③合并刺五加总苷及总多糖，加注射用水至约全量，加注射用水至全量10kg，加活性炭0.2％煮沸20min，滤过，灌装，灭菌制成注射液。

Claims (9)

1.一种提高畜禽免疫力的中药组合物的制备方法，其特征在于；所述制备方法包含如下步骤：

①、取刺五加，粉碎过10-20目，加8～12倍量60-80％乙醇动态浸渍1小时，回流提取3小时，提取液放置过夜，上清液减压回收乙醇至无醇味，加低浓度乙醇制成1g生药/ml，离心，上清液加于大孔吸附树脂柱上，先用水洗脱至Molisch反应阴性，依次用2～4倍量柱体积的20％-40％乙醇、用4～8倍量柱体积的70％-80％乙醇洗脱，收集20％-40％乙醇、70％-80％乙醇洗脱部位，合并得刺五加总苷；

②、取黄芪，切片，连同乙醇提取后刺五加药渣混合，加8～12倍量水动态浸渍2小时，60～80℃真空动态提取4小时，收集提取液，将提取液与步骤①水洗脱液合并浓缩至相对密度1.05-1.1(70℃)，在搅拌下加乙醇，使含醇量达85％，搅拌均匀后于4℃冷藏12至24小时，滤过，沉淀加2-3倍量水溶解，滤过，滤液在搅拌下加乙醇使含醇量达50％，搅拌均匀后于4℃冷藏12至24小时，滤过，滤液回收乙醇得总多糖；

③、将步骤①刺五加总苷与步骤②总多糖合并，加入0.01～3％防腐剂，加纯化水至全量10kg，混匀，4℃冷藏12-24小时，滤过，灌装，灭菌制成口服液；或将步骤①、②合并，加入蔗糖、糊精，搅拌均匀，用沸腾干燥制粒机制成10kg颗粒；或将将步骤①刺五加总苷与步骤②总多糖合并，加入蔗糖、糊精，搅拌均匀，制粒，加入0.5～5％硬脂酸镁，压片；或将步骤②得到的总多糖加3～10倍量注射用水沉淀，滤过，滤液与步骤①刺五加总苷合并，加注射用水至约全量，加注射用水至全量10kg，加活性炭0.2％煮沸20min，滤过，灌装，灭菌制成注射液。

2.根据权利要求1所述的提高畜禽免疫力的中药组合物的制备方法，其特征在于；所述的刺五加总苷的制备采用醇提后，利用大孔吸附树脂分离，所采用的大孔树脂为AB-8、HPD-100、HPD-300、D101等非极性或弱极性大孔吸附树脂。

3.根据权利要求1所述的提高畜禽免疫力的中药组合物的制备方法，其特征在于；其所述的总多糖的制备采用水提法，提取液与刺五加提取物过大孔树脂柱水洗脱液合并后醇沉，收集沉淀得总多糖。

4.根据权利要求1所述的提高畜禽免疫力的中药组合物的制备方法，其特征在于；在制备刺五加总苷时，上大孔树脂柱是样品用低浓度乙醇溶解，离心后再上样，所述的低浓度乙醇为浓度小于10％。

5.根据权利要求1所述的提高畜禽免疫力的中药组合物的制备方法，其特征在于；所述制备组合物颗粒、片剂的蔗糖与糊精的用量比为2～1∶1。

6.根据权利要求1所述的提高畜禽免疫力的中药组合物的应用。

7.根据权利要求6所述的提高畜禽免疫力的中药组合物的应用，其特征在于；所述中药组合物为注射液。

8.根据权利要求6所述的提高畜禽免疫力的中药组合物的应用，其特征在于；所述中药组合物适用于肉蛋鸡、仔猪、鸭及畜禽类。

9.根据权利要求6所述的提高畜禽免疫力的中药组合物的应用，其特征在于；口服液用量为1～2g兑1kg水、颗粒用量为为1～2g兑1kg水、片剂用量为1片/羽，注射液猪用量为0.1ml/kg、鸭0.1～0.2ml/kg。