CN101683321B - 一种奈拉滨注射液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种奈拉滨注射液及其制备方法，其特征在于注射液制备过程中保持温度50℃-90℃。在此温度下，制备的奈拉滨注射液的成品合格率大大提高，充分说明奈拉滨注射液制备过程中温度对主药和药用辅料溶液稳定性的影响，在保持此温度下制备奈拉滨注射液具有很好的科学意义。

Description

一种奈拉滨注射液及其制备方法

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种奈拉滨注射液及其制备方法。

背景技术

T-ALL和T-LBL是两种恶化速度非常快的疾病，它们严重影响着机体的造血功能。T-ALL在我国急性淋巴细胞白血病(急淋)的发病率仅次于普通型急淋(C-ALL)，占急淋发病的第二位。T细胞急性淋巴细胞性白血病通常发病于较大的儿童、青少年和青年，较B细胞急性淋巴细胞性白血病不太常见。美国每年大约有1600名成人和儿童被诊断患有T-ALL或T-LBL。随着环磷酰胺、阿糖胞苷和左旋门冬酰胺酶的应用，T-细胞淋巴细胞白血病和T-细胞淋巴母细胞瘤的反应率和生存率有了很大的改观。但对于复发病人的补救化疗方案的效果有限，反应率低，许多病人必须进行骨髓抑制，而缓解的病人进行骨髓移植更有效。开发特异性地针对恶性T-细胞的化合物是关键。核苷类似物被证明是治疗血液系统肿瘤的相当成功的细胞毒药物。脱氧鸟苷酸类似物9-β-D-arabinofuranosylguanine(ara-G)发现于20世纪60年代，但由于溶解性差而未能用于临床。但开始于70年代的对嘌呤核苷磷酸酶(PNP)缺陷症的研究则为开发脱氧鸟苷类似物提供了有益的思路。PNP催化脱氧鸟苷酸，缺乏PNP的病人出现了dGTP-介导的T-细胞淋巴细胞减少症，而B细胞的数量却没有降低。这表明脱氧鸟苷酸类似物可以用来治疗T-细胞恶性肿瘤，如T-ALL。实际上ara-G就选择性地对T细胞有细胞毒作用。之后开发了ara-G的水溶性前药奈拉滨。临床和药物代谢研究发现奈拉滨是一种在血浆中可产生ara-G，在白血病细胞中可产生ara-GTP的前药。奈拉滨被腺苷脱氨酶去甲基形成ara-G，在细胞内被进一步转化为活性形式ara-GTP，ara-GTP掺入到DNA可导致DNA合成的终止和细胞死亡。奈拉滨为罹患这两种罕见但致命疾病的患者带来了希望。

药物在制备注射液时，要检查澄明度，这是注射剂成为合格品的基本标准之一，因此，在制剂制备的过程中要充分考虑主药和药用辅料性质，同时还要考虑药用辅料对主药的影响等等因素，经过严格的、科学的实验才能制备出合格的注射制剂。

发明内容

基于上述原因，我们通过科学的实验发现，在奈拉滨在一定温度的注射用水中具有很好的溶解性，而药用辅料氯化钠对奈拉滨具有促析出的作用，这就导致产品的澄明度不合格，而我们在科学的实验基础上，将溶液保持在一定温度下，将主药和药用辅料同时加入，并且在所有制剂制备过程中，保持这个温度，使奈拉滨和氯化钠形成稳定的溶液体系，制剂制备后，澄明度的合格率大大提高。

本申请通过以下技术方案实现的。

一种奈拉滨注射液的制备方法，其特征在于原料药奈拉滨和药用辅料氯化钠在制备制剂中保持溶液温度50℃—90℃。

其制备方法为：

将奈拉滨、氯化钠加入至50℃—90℃注射用水中，搅拌，使完全溶解，加入盐酸调节pH值至5.0～7.0，加入50℃—90℃注射用水，搅拌均匀，加入活性炭，搅拌均匀，50℃—90℃静置，粗滤脱去活性炭，药液保持50℃—90℃，用0.22μm滤膜将药液趁热过滤，将药液灌注于输液瓶中，使用处理过的胶塞压塞，温度保持在50℃—90℃，并轧上铝盖，将样品放入灭菌锅中，热压蒸汽灭菌，既得。

其中制剂制备中溶液温度为60℃—90℃。

其中制剂制备中溶液温度为60℃—80℃。

一、检测方法

照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录VD)测定。

色谱条件与系统适用性试验    采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.02mol/L磷酸二氢钠溶液-甲醇(70：30)为流动相，流速0.75ml/min，检测波长247nm。理论板数按奈拉滨计不低于2000；奈拉滨峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。

对照品溶液的制备取奈拉滨对照品约10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加流动相超声使溶解，并用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml至10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得。

供试品溶液的制备取本品，精密量取5ml置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，再精密量取5ml至50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

测定法精密量取对照品溶液和供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，测定结果见表1。

表1奈拉滨注射液三批样品含量检测结果(HPLC法)

结论：奈拉滨注射液样品含量均在标示量的90.0％～110.0％。

二、制剂制备方法研究

1、主药的性质：本品为白色或类白色粉末。本品在水和乙醇中不溶。

2、奈拉滨水溶解性研究：取奈拉滨约0.1g，置于1000ml量瓶中，加水约至刻度，每隔5分钟振摇一次，观察30分钟溶解情况。该样品不溶于水。

取奈拉滨约0.25g，置于50ml量瓶中，加水约至刻度，加热至50—90℃，观察溶解情况。该样品完全溶解，浓度为5mg/ml，可以满足本制剂的需要。

3、奈拉滨水溶液物理稳定性研究：制备奈拉滨水溶液，浓度为5mg/ml，取2ml灌封于2ml白色曲颈易折安瓿中，制得样品。样品依下列条件放置，测定样品溶液可见异物的变化情况，考察奈拉滨水溶液的物理稳定性，结果见表-2。

表-2奈拉滨水溶液物理稳定性结果

结论：样品溶液在放置过程中，物理稳定性良好。

4、奈拉滨水溶液的化学稳定性研究

制备奈拉滨水溶液，浓度为5mg/ml，取2ml灌封于2ml白色曲颈易折安瓿中，制得样品。样品依下列条件放置，测定样品溶液有关物质的变化情况，考察奈拉滨水溶液的化学稳定性，结果见表-3。

表-3奈拉滨水溶液化学稳定性结果

结论：样品溶液在放置过程中，化学稳定性良好。

5、工艺筛选研究

在处方前研究的基础上，依序筛选渗透压调节剂的用量、pH值范围，初步确定处方；依序筛选炭脱工艺、灭菌工艺，初步确定制备工艺。

渗透压调节剂筛选

测定奈拉滨水溶液的渗透压

制备奈拉滨水溶液，浓度为5mg/ml，测定渗透压，结果见表-4。

表-4奈拉滨水溶液渗透压测定结果

结果：奈拉滨水溶液的渗透压较低，为8mOsm。

结论：上述试验结果表明，奈拉滨水溶液的渗透压较低，因此需要对其渗透压进行调节，参考国外制剂处方，渗透压调节剂选用氯化钠，其用量为4.5mg/ml，考虑到当氯化钠溶液的浓度为0.9％时为等渗溶液，故我们选择4.5mg/ml和9.0mg/ml两个处方，配制样品溶液并测定其渗透压。

渗透压调节剂用量的筛选

依处方1和处方2，制备奈拉滨样品溶液，取2ml灌封于2ml白色曲颈易折安瓿中，制得样品。取样品，测定渗透压，结果见表-5。

表-6不同处方制备的样品溶液渗透压测定结果

结果：处方1的渗透压为155mOsm，本品为不等渗溶液；处方2的渗透压为295mOsm，本品为等渗溶液。

结论：根据以上试验结果，可以分析出国外上市的奈拉滨注射液为低渗溶液。因此，我们考虑，是否氯化钠的加入量不同，会对奈拉滨注射液的稳定性产生影响，故选择处方1和处方2处方分别制备的样品进行稳定性考察，以考察处方中氯化钠的用量。

样品溶液稳定性考察

取上述样品，依下列条件放置。测定样品的外观、可见异物、渗透压，有关物质等指标的变化情况，考察不同处方所制备的样品稳定性，结果见表-6。

表-6不同处方制备的样品溶液稳定性考察结果

结果：根据以上考察结果可知，奈拉滨注射液中氯化钠的加入量对其稳定性有影响，即氯化钠能促进奈拉滨的析出，故决定采用氯化钠的用量为4.5mg/ml。初步选择处方1为本制剂处方。另外，参考有关文献，大容量注射剂静脉滴注时，如果其为低渗溶液，可能会产生溶血现象，考虑到本产品的临床用药安全性，故取处方1的样品进行溶血试验，该样品未发生溶血现象，因此，可以证明依处方1所制备的样品，临床应用时不会产生溶血现象。

结论：根据以上试验结果及参考国外制剂处方，初步选择渗透压调节剂为氯化钠，用量为4.5mg/ml。

pH值范围筛选

依处方，制备奈拉滨样品溶液，分为7份，用1mol/L盐酸或1mol/L氢氧化钠分别调节样品溶液的pH值为4.0、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、8.0，取2ml灌封于2ml白色曲颈易折安瓿中，制得样品。取样品，60℃放置4小时，测定样品的外观、可见异物及有关物质变化情况，考察pH值的影响结果见表-6。

表-7不同pH值的样品溶液稳定性考察结果

结果：由上述试验结果可知，样品溶液在各pH值条件下，在放置过程中，样品外观性状及可见异物测定结果均良好。样品溶液在放置过程中，pH值为4.0或8.0时，有关物质有明显增加(大于1.0％)；pH值为5.0时，有关物质有一定增加，但依然在规定范围之内(小于1.0％)；pH值为5.5～7.0时，有关物质随着pH值的增加而加大，但依然在规定范围之内(小于1.0％)；而当pH值为5.5时，有关物质测定结果良好。

结论：由此可以确定奈拉滨注射液的pH值范围为5.0～7.0，最佳pH值为5.5。

整理初步确定的处方及工艺

工艺：将处方量的奈拉滨、氯化钠加入至总量80％的50—90℃注射用水中，搅拌，使完全溶解。加入适量的1mol/L盐酸调节pH值至5.0～7.0(最佳pH值为5.5)。加入50—90℃注射用水至处方量，搅拌均匀。加入活性炭，搅拌均匀，50—90℃下静置，粗滤脱去活性炭。药液保持50—90℃，用0.22μm滤膜将药液趁热过滤至可见异物合格。将药液灌注于输液瓶中，使用处理过的胶塞压塞，(温度保持在50—90)并轧上铝盖。将样品放入灭菌锅中，于116℃热压蒸汽灭菌40分钟。

影响因素试验

根据初步确定的处方工艺制备样品，分别设定考察条件为高温60℃、低温4℃、4500Lx光照进行影响因素试验，分别于5、10天对外观性状、可见异物检查、含量、pH值、澄清度及有关物质进行考察，考察处方在以上条件下的稳定性。

高温试验60℃

取样品置于60℃的恒温箱中放置10天，在考察的第0、5、10天，分别取样品进行检查。

低温试验4℃

取样品置于4℃的冰箱中放置10天，在考察的第0、5、10天，分别取样品进行检查。

强光照射试验

取样品置于YB-2可见异物检测仪在4500Lx光强度下光照10天，在考察的第0、5、10天，分别取样品进行检查。

表-8高温试验结果(温度60℃)

表-9低温试验结果(温度4℃)

表-10强光试验结果(4500Lx)

结果：本品经影响因素高温60℃、低温4℃、4500Lx光照分别考察5、10天，样品的外观性状、可见异物检查、pH值、含量、有关物质基本无变化，产品性质较为稳定。

结论：影响因素结果表明，样品在高温、低温及强光条件下均稳定，样品可以以常温密闭条件贮存；同时也证明处方样品能够符合奈拉滨注射液初步稳定性考察的要求，处方工艺适用。所以初步确定该处方及工艺为奈拉滨注射液的最终处方及工艺。

热循环低温试验

取奈拉滨注射液，进行三次循环试验，每次循环在2～8℃条件放置2天，然后在40℃条件下放置2天，取样检测，测定每次循环后样品的外观、可见异物、pH值、含量及有关物质的变化。见表-11。

表-11热循环低温试验测定结果

热循环冻融试验

取奈拉滨注射液，进行三次循环试验，每次循环在-10～-20℃条件放置2天，然后在40℃条件下放置2天，取样检测，测定每次循环后样品的外观、可见异物、pH值、含量及有关物质的变化。见表-12。

表-12热循环冻融试验测定结果

结果：奈拉滨注射液样品经三次热循环冻融试验，样品的外观、可见异物、pH值、含量与循环前样品比较均无明显变化。

结果：奈拉滨注射液样品经三次热循环低温试验，样品的外观、可见异物、pH值、含量与循环前样品比较均无明显变化。

注：将奈拉滨和氯化钠按照常温的温度下，其它工艺与上述实验相同，得到的奈拉滨注射液不合格。

实验结论：通过上述实验表明，在制备奈拉滨注射液的过程中，要严格控制制备过程中溶液的温度，在低于本发明温度下，成品的合格率大大受到影响，充分说明本发明工艺方法具有科学意义。

三、制备实施例

实施例1

将重量比为10：9的奈拉滨和氯化钠加入至50℃注射用水中，搅拌，使完全溶解，加入盐酸调节pH值至5.0，加入50℃注射用水，搅拌均匀，加入活性炭，搅拌均匀，50℃静置，粗滤脱去活性炭，药液保持50℃，用0.22μm滤膜将药液趁热过滤，将药液灌注于输液瓶中，使用处理过的胶塞压塞，温度保持在50℃，并轧上铝盖，将样品放入灭菌锅中，热压蒸汽灭菌，既得。

实施例2

将重量比为10：9的奈拉滨和氯化钠加入至90℃注射用水中，搅拌，使完全溶解，加入盐酸调节pH值至5.0～7.0，加入90℃注射用水，搅拌均匀，加入活性炭，搅拌均匀，90℃静置，粗滤脱去活性炭，药液保持90℃，用0.22μm滤膜将药液趁热过滤，将药液灌注于输液瓶中，使用处理过的胶塞压塞，温度保持在90℃，并轧上铝盖，将样品放入灭菌锅中，热压蒸汽灭菌，既得。

实施例3

将重量比为10：9的奈拉滨和氯化钠加入至60℃注射用水中，搅拌，使完全溶解，加入盐酸调节pH值至5.0～7.0，加入60℃注射用水，搅拌均匀，加入活性炭，搅拌均匀，60℃静置，粗滤脱去活性炭，药液保持60℃，用0.22μm滤膜将药液趁热过滤，将药液灌注于输液瓶中，使用处理过的胶塞压塞，温度保持在60℃，并轧上铝盖，将样品放入灭菌锅中，热压蒸汽灭菌，既得。

实施例4

将重量比为10：9的奈拉滨和氯化钠加入至80℃注射用水中，搅拌，使完全溶解，加入盐酸调节pH值至5.0～7.0，加入80℃注射用水，搅拌均匀，加入活性炭，搅拌均匀，80℃静置，粗滤脱去活性炭，药液保持80℃，用0.22μm滤膜将药液趁热过滤，将药液灌注于输液瓶中，使用处理过的胶塞压塞，温度保持在80℃，并轧上铝盖，将样品放入灭菌锅中，热压蒸汽灭菌，既得。

实施例5

将重量比为10：9的奈拉滨和氯化钠加入至80℃注射用水中，搅拌，使完全溶解，加入盐酸调节pH值至5.0～7.0，加入80℃注射用水，搅拌均匀，加入活性炭，搅拌均匀，60℃静置，粗滤脱去活性炭，药液保持70℃，用0.22μm滤膜将药液趁热过滤，将药液灌注于输液瓶中，使用处理过的胶塞压塞，温度保持在60℃，并轧上铝盖，将样品放入灭菌锅中，热压蒸汽灭菌，既得。

实施例6

将重量比为10：9的奈拉滨和氯化钠加入至80℃注射用水中，搅拌，使完全溶解，加入盐酸调节pH值至5.0～7.0，加入80℃注射用水，搅拌均匀，加入活性炭，搅拌均匀，60℃静置，粗滤脱去活性炭，药液保持60℃，用0.22μm滤膜将药液趁热过滤，将药液灌注于输液瓶中，使用处理过的胶塞压塞，温度保持在60℃，并轧上铝盖，将样品放入灭菌锅中，热压蒸汽灭菌，既得。

注：本发明所要求保护的具体技术方案，不限于上述实施例所表达的技术方案的具体组合。

Claims (4)

1.一种奈拉滨注射液的制备方法，其特征在于原料药奈拉滨和药用辅料氯化钠在制备制剂中保持溶液温度50℃—90℃。

2.根据权利要求1所述的一种奈拉滨注射液的制备方法，其制备方法为：

将重量比为10：9的奈拉滨和氯化钠加入至50℃—90℃注射用水中，搅拌，使完全溶解，加入盐酸调节pH值至5.0～7.0，加入50℃—90℃注射用水，搅拌均匀，加入活性炭，搅拌均匀，50℃—90℃静置，粗滤脱去活性炭，药液保持50℃—90℃，用0.22μm滤膜将药液趁热过滤，将药液灌注于输液瓶中，使用处理过的胶塞压塞，温度保持在50℃—90℃，并轧上铝盖，将样品放入灭菌锅中，热压蒸汽灭菌，既得。

3.根据权利要求1所述的一种奈拉滨注射液的制备方法，其中制剂制备中溶液温度为60℃—90℃。

4.根据权利要求1所述的一种奈拉滨注射液的制备方法，其中制剂制备中溶液温度为60℃—80℃。